Y COMPLEMENTARIA FITOTERAPIA CLASE 16 IN!ESTI"ACION EN PLANTAS MEDICINALES O#$etiv%s 1. Incentivar en los participantes la investigacin cientfica de plantas cuya accin medicinal es reconocida por la Medicina Tradicional. 2. Dar las pautas a seguir para desarrollar un Proyecto de Investigacin, relacionado a la bs!ueda de "rupos #umicos $%lavonoides, &lcaloides, 'es!uiterpenlactonas, etc( en especies conocidas por sus propiedades curativas o en otras especies del mismo g)nero ta*onmico . C%ntenid% de& Te'a +as plantas medicinales poseen componentes !umicos con propiedades terap)uticas, las cuales ,an sido usadas en la medicina tradicional. Para la e!uiparacin y uso oficial de las plantas medicinales, es necesario recabar el conocimiento y pr-cticas populares en forma precisa a trav)s de una metodologa !ue ,aga posible la recuperacin de pr-cticas de curacin y de los recursos terap)uticos empleados, !ue permitan orientar la validacin cientfica !ue condu.ca a su utili.acin como nuevas drogas o f-rmacos cuya inocuidad ,a sido demostrada. +a Investigacin de plantas medicinales ,a sido para el ,ombre una in!uietud desde tiempos inmemoriales. +os primeros datos sobre las propiedades medicinales de plantas se obtuvieron a trav)s de los curanderos sacerdotes y ,ec,iceros !uienes ,an trasmitido sus conocimientos de generacin en generacin a determinados aprendices y a sus descendientes. METODOLO"(A +as plantas medicinales deben su efecto terap)utico al contenido de metabolitos primarios $a.cares y amino-cidos( y/o secundarios $alcaloides, flavonoides, terpenoides, esteroides, !uinonas, etc.(, !ue se generan por rutas biog)nicas determinadas. & estas sustancias se les denomina )rinci)i%s activ%s. Para estudiarlas cientficamente necesitamos la contribucin multidisciplinaria de agrnomos, !umicos, farmaclogos, to*iclogos, microbiollogos, antroplogos, m)dicos y socilogos entre otros profesionales.
0lase 12 13 %itoterapia Dr. &ngel 4argas Mos!ueira 1 +a metodologa cientfica a seguir cuando se estudia una planta con propiedades medicinales, comprende las siguientes etapas5 6studio 6tnobot-nico 6studio 6tnofarmacolgico 6studio de &ctividad 7iolgica 6studio %ito!umico Desarrollo de un producto fitoterap)utico Est*di% Etn%#%t+nic%.8 7asado en la medicina tradicional ancestral de la planta a investigar. Est*di% Etn%,ar'ac%&-ic%.8 7asado en las formas de utili.acin para determinadas dolencias. Est*di% de Actividad .i%&-ica.8 0onsiste en la comprobacin del uso terap)utico por ensayos biolgicos, !ue involucran evaluacin de la actividad antiinflamatoria, analg)sica, cicatri.ante, antibitica, ,ipoglicemiante, entre otras9 a partir de e*tractos de ,o:as, flores, tallos, races, etc. Est*di% Fit%/*0'ic% 1'creening fito!umico( +lamado tambi)n marc,a fito!umica. Permite determinar cualitativamente los principales grupos de constituyentes !umicos de la planta a partir del cual puede orientarse el fraccionamiento de los e*tractos eligiendo los grupos de mayor inter)s para el investigador. Desarr%&&% de *n )r%d*ct% ,it%tera)2*tic%.8 0onsiste en el desarrollo y formulacin de un fitof-rmaco para su evaluacin Pre clnica y clnica. PROCEDIMIENTO +os procedimientos !ue conllevan a la investigacin de la actividad biolgica de una planta medicinal as denominada por los estudios etnobot-nicos y etnofarmacolgicos con la finalidad de comprobar su accin terap)utica comprende las siguientes etapas5 ; <bicacin geogr-fica de la muestra vegetal recolectada ; 0lasificacin ta*onmica ; 6stabili.acin y estandari.acin de la muestra vegetal ; Molienda y almacenamiento ; =btencin de e*tractos conteniendo las sustancias activas de las ,o:as, flores, tallos, etc. ; 6valuacin de la actividad biolgica de los e*tractos ; 6valuacin to*icolgica de los e*tractos +a metodologa a seguir en cada una de las etapas, debe garanti.ar resultados ptimos !ue permitan dar valor cientfico al uso terap)utico tradicional y de este modo dar un valor agregado a la planta investigada a fin de poder ser utili.ada para el desarrollo de un fitof-rmaco. PASOS RECOMENDADOS PARA UNA IN!ESTI"ACI3N FITO4U(MICA 156 Identi,icacin de &as )&anta 6l reconocimiento e identificacin de la planta seleccionada re!uiere del concurso de un profesional especialista en Ta*onoma vegetal. 6sto evitara traba:ar con plantas morfolgicamente parecidas pero ta*onmicamente diferentes. 'e debe tener en cuenta la 0lase 12 13 %itoterapia Dr. &ngel 4argas Mos!ueira 2 sinonimia popular, pues una sola especie bot-nica puede ser conocida por diferentes nombres populares, segn la regin de nuestro Pas. 0omo e:emplos de este proceso de identificacin podemos citar las siguientes plantas5 0<TI 0<TI , Notholaena nivea $ cuti cuti ,embra(5 6s una planta Pteridop,yta $ se propaga por medio de esporas ,aploides(. 6l nombre popular de >cuti cuti ,embra?, se debe !ue los pa!uetes de esporangios !ue contienen a las espora, aparecen como diminutas rosetas blan!uecinas en los e*tremos de las ramas y la gente !ue comerciali.a esta planta, lo confunde con >flores?. +a planta es usada para el control de la diabetes. @<TI @<TI $ra!ui ra!ui ( Cheilanthes pruinata 5 & esta especie, la gente !ue se dedica al comercio de ,ierbas medicinales , lo llama >cuti cuti mac,o? pues no se aprecia sus esporas. 'e usa tambi)n para el control de la diabetes 6l M&'T<6AB=, Tropaeolum majus9. 6sta planta es tambi)n conocida con los nombres populares de, >¶cay? $norte del pas( >Tic sau? $sur del pas(, tambi)n como >capuc,ina?. 756 Tener *n re-istr% c%n &%s dat%s ec%&-ic%s de &a )&anta en est*di% 8 lugar de origen $localidad( 8 <ura a la !ue crece 8 0aracterstica b-sica de la planta $arbusto, ,ierba, etc( 8 4egetacin natural circundante $del lugar donde crece( FIC8A PARA IN!ESTI"ACI3N Y9O 8ER.ARIO 1. popular5 CCCCCCCCCCCCCCCCCCCCC 1. cientfico5 CCCCCCCCCCCCCCCCCCCC. Tipo de planta5 -rbol $ (, &rbusto $ (, Dierba $ ( Muestra5 Aa. $ (, Tallo $ (, Do:a $ (, flores $ ( planta entera $ ( +ugar de coleccin5 CCCCCCCCCCCCCCCCCC <itud5 CCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCC %lora acompaEante5 CCCCCCCCCCCCCCCCCC 0iudad5 CCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCC %ec,a5 CCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCC. 0olector5 CCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCC. Puede agregar el nombre del colector y una fotografa de la planta :56 Pr*e#as /*0'icas )re&i'inares5 6n los estudios preliminares se pueden utili.ar muestras de 1 a 1FFF !ue gr y orientarse a locali.ar cualitativa o cuantitativamente uno o varios principios activos $ %lavonoides, 'apogeninas,( +os m)todos pueden ser5 a( 8ist%&-ic%s56 =bservacin del comportamiento de cortes de te:idos frente a ciertos reactivos !ue formen colores, den precipitados, etc. b( 4*0'ic%s.8 Tratamiento de e*tractos con agentes cromgenos, sustancias !ue forman precipitados, etc. c( Fisic%/*0'ic%s.8 <so de cromatografa, locali.acin de ciertas bandas de absorcin en el infrarro:o9 por e:emplo la de 1G3H cm 81 caracterstica de las ses!uiterpenlactonas. 0lase 12 13 %itoterapia Dr. &ngel 4argas Mos!ueira 3 d( .i%&-ic%.8 Permite ver el efecto de e*tractos de un a determinada planta, sobre cultivos de microorganismos internacionalmente tipificados $cepas &T00(, o sobre ratones $bioto*icidad(, embriones, rganos aislados, te:idos, etc. 6n la pr-ctica es venta:oso utili.ar varios de estos m)todos, procurando !ue no falte el biolgico. Day numerosas investigaciones sobre las condiciones ptimas para estudios preliminares. %arnsIort, $P,arm. 'ci( ,a presentado un cuidadoso compendio de ellas. 6n todos los casos se recomienda verificar el comportamiento de los reactivos y la reproductividad y limitaciones de las t)cnicas mediante el empleo de sustancias y e*tractos testigos. PRUE.AS PRELIMINARES EN EL LA.ORATORIO Investi-acin de a&ca&%ides 6l m)todo r-pido de Jebb es aplicable desde F.1 a F.H gr, en el campo o en el laboratorio con H gr. de material seco pulveri.ado $ o su e!uivalente en planta fresca triturada(, se me.cla con suficiente D0l al 1K para formar una suspensin y obtener despu)s 2 ml de filtrado. +a suspensin se vierte en <n matra. 6rlenmeyer y se coloca en baEo Mara a LFM0. +a me.cla se calienta N ,oras y se sacude peridicamente. Despu)s se retira la suspensin, se de:a enfriar y se filtra. 'i el filtrado es menor de 2 ml, aEadir al residuo suficiente D0l al 1K para a:ustar el filtrado a 2 ml. Por separado se ensayan alcuotas de F.2 ml. del filtrado con volmenes de F.1ml de reactivos de Mayer, Jagner, Dragendorff, 'onnensc,ein y -cido slico8tngstico. +os m)todos para la bs!ueda de "licsidos cardiotnicos, "licsidos cianogen)ticos, 6steroides, antra!uinonas, terpenos, saponinas y oros grupos est-n descritos en los te*tos especiali.ados de fito!umica. .;s/*eda de Sa)%ninas Para la bs!ueda de saponinas, "riffing y colaboradores ,an descrito algunas pruebas ,istolgicas, una de ellas es la prueba de ,emlisis. Para esta prueba, colocaron un tro.o fresco de material sobre una placa de agar sangre $HK de sangre entera de e!uino en agar(. 6n caso positivo a las 3812 ,oras se observ una .ona clara como resultado de la ,emlisis. .;s/*eda de Antra/*in%nas +as antra!uinonas se pueden locali.ar usando la reaccin de 7orntrager. 6n esta reaccin, se ,ierven unos H minutos F.O gr. de planta pulveri.ada con 1F ml de @=D $ ,idr*ido de sodio( F.H 1 y 1 ml de per*ido de ,idrgeno $agua o*igenada( al 3K. Despu)s se enfra la suspensin, se filtra o centrifuga. &l filtrado se le acidula con -cido ac)tico $unas 1F gotas( y despu)s se le e*trae con 1F ml de benceno. +a capa benc)nica se pone amarilla, se separa, y unos H ml de solucin benc)nica se agitan con 2.H ml de 1D N =D . +as antra!uinonas colorean de ro:o la capa alcalina. 6s posible !ue no den la prueba los 08 glicsidos antra!uinnicos. De la solucin benc)nica se puede tomar una alcuota para cdd sobre gel de slice ". Disolventes5 &( benceno8metanol $P51(9 7( cloruro de metileno8 metanol. $LO5H513.H( .i#&i%-ra,0a c%ns*&tada. 8 Qorge &. domngue.5 >M)todos de Investigacin. %IT=#<RMI0&? 6ditorial +IM<'&. M)*ico. 1PLO 0lase 12 13 %itoterapia Dr. &ngel 4argas Mos!ueira 4