REPBLICA BOLIVARIANA DE VENEZUELA

UNIVERSIDAD DEL ZULIA

ESCUELA DE BIOANLISIS
ASIGNATURA BACTERIOLOGA GENERAL
CONTROL DE CALIDAD EN EL LABORATORIO
DE BACTERIOLOGA
Lcda. Sonia C. Romero A., MSc
CONTROL DE CALIDAD EN EL
LABORATORIO DE BACTERIOLOGA
Control de Calidad
Definicin
Son un conjunto de elementos fundamentales para un
laboratorio que ayudan a crear confiabilidad en las pruebas
realizadas garantizando, la reproducibilidad de los resultados;
en general, provee un entorno de excelencia en todos los
aspectos del trabajo.
Objetivo
Garantizar que el producto final de la jornada de trabajo
tenga un grado de seguridad aceptable, de conformidad con
las normas establecidas.
CONTROL DE CALIDAD EN EL
LABORATORIO DE BACTERIOLOGA
GENERALIDADES
Se debe realizar sobre todas las etapas del proceso: Recoleccin de la
muestra, procesamiento y reporte.
Cubre todo lo relativo a la preparacin de los medios de cultivo,
reactivos, instrumentos y el personal.
Un programa de control de calidad debe incluir:
Un Manual de Procedimiento
Validacin de las Metodologas y Equipos utilizados
Ciclos de Educacin Continua y Evaluacin del Personal
Elementos de Seguridad
Supervisin de los Reportes Obtenidos
Controles Externos
CONTROL DE CALIDAD EN EL
LABORATORIO DE BACTERIOLOGA
Criterios para la Recoleccin, Transporte y Recepcin
de las Muestras Clnicas
1.- La muestra debe ser representativa.
2.- Es importante evitar la contaminacin durante la toma de
la muestra.
3.- Seleccionar la tcnica y los instrumentos apropiados para
la obtencin la muestra.
4.- Tomar un volumen apropiado de muestra.
5.- Obtener las muestras preferentemente antes de comenzar
la antibioticoterapia o bien antes de introducir cualquier
modificacin al tratamiento
CONTROL DE CALIDAD EN EL
LABORATORIO DE BACTERIOLOGA
Criterios para la Recoleccin, Transporte y Recepcin
(cont. . .)
6.- Emplear envase adecuado para su transporte.
7.- Luego de tomada la muestra, la misma debe ser
trasladada lo ms rpido al laboratorio.
8.- Las muestras deben ser identificadas con una etiqueta
adherida al envase, y los datos anotados deben coincidir
exactamente con los de la solicitud de examen (Nombre del
Paciente , Nmero de Identificacin Personal, Procedencia,
Tipo de Muestra, Fecha de Recoleccin).
CONTROL DE CALIDAD EN EL
LABORATORIO DE BACTERIOLOGA
Solicitudes para exmenes de
muestras.
Recipientes para recoleccin y
transporte de muestras
CONTROL DE CALIDAD EN EL
LABORATORIO DE BACTERIOLOGA
Criterios de Rechazo de Muestras Clnicas
1.- Muestras no rotuladas o sin identificar
2.- Envase inapropiado o medio de transporte inadecuado
3.- Demora prolongada en enviar la muestra al laboratorio
4.- No indicar tipo de muestra o procedencia
5.- No indicar tipo de examen en la orden
6.- Muestra derramada o rotura del envase
7.- Volumen inadecuado
8.- Orina colectada de la bolsa del catter
CONTROL DE CALIDAD EN EL
LABORATORIO DE BACTERIOLOGA
PRUEBAS DE CONTROL DE CALIDAD DE LOS MEDIOS
CULTIVOS
Prueba de Esterilidad
Todo medio de cultivo despus de preparado debe ser estril, de all
que se realice esta prueba para verificar la esterilidad del medio.
Procedimiento:
Tomar una muestra del lote del medio realizado de un 1-5% y
colocarlo en la estufa a una temperatura de 35
0
C durante 24-48 h.
Interpretacin:
Positiva: sin crecimiento
Negativa: con crecimiento
CONTROL DE CALIDAD EN EL
LABORATORIO DE BACTERIOLOGA
PRUEBAS DE CONTROL DE CALIDAD DE LOS MEDIOS
CULTIVOS
Prueba de Desarrollo
Determinar la capacidad del medio de cultivo de respaldar el
crecimiento de m.o. de importancia clnica, an cuando estn en baja
concentracin en la muestra.
Procedimiento:
1.- Prepara una suspensin bacteriana con una turbidez
semejante a la del estndar 0,5 de Mac Farland.
2.-Posteriormente realizar una dilucin 1/100.
Interpretacin:
Positiva: con crecimiento
Negativa: sin crecimiento
CONTROL DE CALIDAD EN EL
LABORATORIO DE BACTERIOLOGA
PRUEBAS DE CONTROL DE CALIDAD DE LOS
MEDIOS CULTIVOS
Prueba de Inhibicin
Demostrar el efecto inhibidor del medio de cultivo, se efecta
realizando un inculo fuerte del m.o. no deseado. Solo se aplica
principalmente a los MEDIOS SELECTIVOS, pero tambin a los
medios de enriquecimiento.
Procedimiento:
1.- Prepara una suspensin bacteriana con una turbidez
semejante a la del estndar 0,5 de Mac Farland.
2.- Posteriormente realizar una dilucin 1/10.
Interpretacin:
Positiva: sin crecimiento
Negativa: con crecimiento
CONTROL DE CALIDAD EN EL
LABORATORIO DE BACTERIOLOGA
PRUEBAS DE CONTROL DE CALIDAD DE LOS MEDIOS
CULTIVOS
Prueba de Respuesta Bioqumica
Verificar una reaccin qumica especfica, la cual va a depender del
medio a preparar Ej. fermentacin de CHO, decarboxilacin de AA.
Procedimiento:
.- Inocular directamente el microorganismo en el medio,
empleando cultivos puros de cepas con reacciones bioqumicas
conocidas.
Interpretacin:
Positiva: se producen la reaccin esperada
Negativa: no se producen la reaccin esperada
CONTROL DE CALIDAD EN EL
LABORATORIO DE BACTERIOLOGA
PRUEBAS DE CONTROL DE CALIDAD DE LOS MEDIOS CULTIVOS
Medio
Pruebas
Esterilidad Desarrollo Inhibicin Respuesta
bioqumica
Basal
X X
Selectivo
X X
a
X
Diferencial
X X
Enriquecido
X X
De
Enriquecimiento
X X X
Indicador
X X
Transporte
X X
a
Algunos medios selectivos esta prueba lleva implcita una respuesta
bioqumica
CONTROL DE CALIDAD EN EL
LABORATORIO DE BACTERIOLOGA
Criterios de Calidad de los Medios de Cultivo ya preparados
1.- Fisura de la placa
2.- Agrietamiento de la superficie del medio de cultivo
3.- Variaciones en el Volumen del Medio
4.- Hemlisis
5.- Cristales en el medio
6.- Presencia de burbujas
7.- Presencia de cogulos
8.- Cambio del color normal
9.- Contaminacin
CONTROL DE CALIDAD EN EL
LABORATORIO DE
BACTERIOLOGA
Control de Calidad en las Coloraciones
Los Colorantes
a.- Debe realizarse primero con cada lote nuevo preparado,
luego basta con un control semanal.
b.- En el caso de la tincin de Gram, es recomendable tener
especial cuidado con la mezcla de alcohol acetona.
c.- Se debe realizar un extendido con cepas frescas, y esta
dependen de la coloracin a realizar.
CONTROL DE CALIDAD EN EL
LABORATORIO DE BACTERIOLOGA
Control de Calidad en las Coloraciones
Causas de Error Durante la Coloracin
1.- El cristal violeta est precipitado, se debe filtrar el colorante
2.- Las lminas porta objeto no estn limpias ni desgrasadas
3.- Sobrecalentamiento del extendido
4.- Lavado fuerte de la lmina durante la coloracin
5.- Algunos colorantes como la safranina y la fucsina pueden
contaminarse
CONTROL DE CALIDAD EN EL
LABORATORIO DE
BACTERIOLOGA
Control de Calidad de Reactivos y Antisueros
Consideraciones Generales
a.- Correr controles diarios con las bacterias tipos.
b.- Seguir estrictamente las indicaciones.
c.- Los reactivos comerciales deben ser probados
inmediatamente cuando se abre un nuevo lote o vial.
d.- Llevar un registro de su funcionamiento.
e.- Conservar los reactivos en refrigeracin, no en congelacin.
f.- No reutilizar las tarjetas desechables de los equipos.
g.- No utilizar reactivos despus de la fecha de expiracin.
h.- Despus de sacar de la nevera los reactivos, esperar que
tomen la temperatura ambiente.
CONTROL DE CALIDAD EN EL
LABORATORIO DE BACTERIOLOGA
Control de Calidad de la Prueba de Sensibilidad a los
Antibiticos
a.- Control de Calidad al Medio de Cultivo.
1.- Utilizar agar Mueller-Hinton
2.- Calidad del agua, debe ser libre de iones metlicos
3.- Aproximadamente utilizar 25 ml. del medio para placas de
100x15 mm, ya que mayor volumen provoca disminucin en el tamao del
halo.
4.- Colocar las placas con en el medio en la incubadora para
secarles el agua de condensacin, antes de utilizarlos
5.- Seguir las normas generales para almacenamiento de los
medios de cultivos.
CONTROL DE CALIDAD EN EL
LABORATORIO DE BACTERIOLOGA
Control de Calidad de la Prueba de Sensibilidad a los
Antibiticos
b.- Control de Calidad de los Discos de Sensibilidad.
1.- Los discos deben ser almacenados a una temperatura
entre -20 y 8
0
C.
2.- Antes de usarlos esperar que alcancen la temperatura
ambiente.
3.- Emplear los viales con fecha de caducidad mas reciente.
4.- No colocar mas de 5 discos sobre las placas de 100 mm
.
CONTROL DE CALIDAD EN EL
LABORATORIO DE BACTERIOLOGA
Control de Calidad de la Prueba de Sensibilidad a los
Antibiticos
b.- Control de Calidad de los Discos de Sensibilidad.
5.- Los discos de antibiticos bactericidas (Pg, Cf, Va, Aminogluc) no
colocarse cerca a los antibiticos bacteriostticos ( C, Te, Su), para
evitar antagonismo.
6.- Colocar las placas en la incubadora dentro de los primeros 15 min.,
despus de su aplicacin.
7.- Verificar el estado de los discos, utilizando Cepas ATCC ( American
Type Culture Collectio) Staphylococcus aureus 25923 y 29213; Escherichia coli
25922 y 35218; Pseudomonas aeruginosa 27853; Streptococcus
pneumoniae49619; Enterococcus faecalis ATCC 29212; Haemophilus
influenzae 49247 y 49766; Neisseria gonorrhoeae 49226
.
CONTROL DE CALIDAD EN EL
LABORATORIO DE BACTERIOLOGA
Control de Calidad de Equipos
a.- Todos los instrumentos deben estar amparados por
un programa de control de calidad y mantenimiento.
b.- Aplicar un programa de mantenimiento preventivo,
para asegurar la exactitud y longevidad del equipo.
c.- Revisin peridica del equipo, para minimizar el
deterioro del mismo.
d.- Realizar un listado de los equipos donde se refleje:
nombre, marca, modelo, serial, fecha, nmero de inventario
de la institucin.
Tipo de Aparato Requisito Frecuencia sugerida
Incubadoras,
refrigeradores,
congeladores y estufas
Limpiar las superficies
internas y desinfectar
si es necesario
Semestralmente
Baos mara
Vaciar, limpiar, desinfectar
y rellenar
Cada mes o cada 6 meses
si se utiliza un biocida
Centrfugas Limpiar y desinfectar Trimestralmente
Autoclaves
Verificar visualmente la
junta, limpiar/drenar la
cmara
Mensualmente
Cabinas de seguridad y de
flujo laminar
Revisin/cambio de filtros Anualmente
CONTROL DE CALIDAD EN EL
LABORATORIO DE BACTERIOLOGA
Tipo de Aparato Requisito Frecuencia sugerida
Microscopios Limpieza de objetivos Anualmente
pH metros a) Limpiar electrodos
b) Revisar/rellenar
electrolito
a) Con cada uso
b) Cuando sea necesario
Balanzas/Diluidores
gravimtricos
a) Limpiar
b) Revisar
a) Con cada uso
b) Anualmente
Destilador Limpiar y desincrustar Segn sea necesario
Jarra de anaerobiosis Limpiar/desinfectar Despus de cada uso
CONTROL DE CALIDAD EN EL
LABORATORIO DE BACTERIOLOGA
Muchas Gracias