Los hidrocarburos aromticos son compuestos frecuentemente utilizados como disolventes de
aceites, grasas, caucho, resinas, etc., en las industrias de fabricacin de pinturas y barnices, tintas, colas, adhesivos, as como, materia prima de sntesis orgnica e industrias de carburantes. Por esta razn, resulta de inters disponer de un mtodo ensayado y validado para la determinacin de vapores de hidrocarburos aromticos en aire, con el fin de poder evaluar la exposicin laboral a este tipo de compuestos. El presente estudio se realiz en una muestra de orina que fue facilitada por la ctedra de Toxicologa y Qumica Legal, para determinar la concentracin de fenoles libres y de fenoles totales y as comprobar si la muestra corresponde a una persona que ha sido expuesta a solventes voltiles como el benceno, el cual como lo demuestran los estudios cientficos recientes, es una sustancia txica para la salud humana. La inhalacin involuntaria de solventes voltiles en forma crnica e manifiesta de diferentes formas en el ser humano, pudiendo observarse alteracin a nivel psico motriz o bien algn dao de un rgano y repercusin a las personas expuestas a este tipo de solventes. El anlisis se realiz en el Laboratorio de Toxicologa de la Facultad de Farmacia y Bioqumica de la UNMSM. La cuantificacin de fenoles totales y libres en la orina se realiz por el mtodo de Marenzi y Banfi. Finalmente una vez obtenido los resultados se procede a comparar con los valores normales o el rango permitido de fenoles en orina.
Marco terico 1. Benceno: Es un hidrocarburo lquido de olor agradable que se emplea como disolvente de grasas, pinturas, etc. Su frmula molecular es C 6 H 6 , formando un anillo aromtico, su punto de fusin es de 5,5 0 C y su punto de ebullicin es de 80 0 C, es un qumico naturalmente encontrado en el petrleo crudo a los niveles a 4g/L. Conocido tambin como benzol, se evapora al aire rpidamente y es slo ligeramente soluble en agua. El benceno es sumamente inflamable. La mayora de la gente puede empezar a detectar el olor del benceno en el aire cuando est en concentraciones de 1.5 a 4.7 partes de benceno por milln de partes de aire (ppm) y en el agua cuando la concentracin es de 2 ppm. La mayora de la gente empieza a detectar el sabor del benceno cuando est en concentraciones entre 0.5 y 4.5 ppm en el agua. Una parte por milln equivale aproximadamente a una gota en 40 galones. El benceno se encuentra en el aire, el agua y el suelo. El benceno proviene tanto de fuentes industriales como naturales.
A. Usos: Debido a su extenso uso, el benceno es una de las 20 sustancias qumicas ms producidas en los Estados Unidos en trminos de volumen. Varias industrias usan benceno para fabricar otros productos qumicos, como por ejemplo el estireno (en Styrofoam y otros plsticos), cumeno (en varias resinas) y ciclohexano (en niln y fibras sintticas). El benceno tambin se usa en la manufactura de ciertos tipos de caucho, lubricantes, tinturas, detergentes, medicamentos y plaguicidas. Es buen disolvente de lacas, barnices, ceras, resinas, plsticos, hules y aceites. Por ltimo, tambin es utilizado como aditivo de la gasolina. Sin embargo, debido a su gran toxicidad, en la actualidad, solo se utiliza cuando no existe un sustituto adecuado. El tolueno es uno de los disolventes que pueden utilizarse como alternativa.
B. Fuentes: Las fuentes naturales de benceno, entre las que se incluyen los gases emitidos por volcanes y los incendios forestales, tambin contribuyen a la presencia de benceno en el medio ambiente. El benceno tambin se encuentra en el petrleo y la gasolina y en el humo de cigarrillos.
C. Propiedades Qumicas: Productos de descomposicin: monxido y dixido de carbono. Es inflamable y reacciona violentamente con agentes oxidantes como perclorato de plata, perxidos de sodio y potasio, xgeno lquido, cloro, trixido de cromo, cido crmico, cido ntrico, cido permangnico, ozono, perxido de nitrilo; cloruro de aluminio en presencia de perclorato de fluor y con productos halogenados como trifluoruro y pentafluoruro de bromo, pentafluoruro y heptafluoruro de yodo y con hexafluoruro de uranio.
2. Exposicin al benceno y sus riesgos en la salud Como puede observarse en los valores dados en Niveles de toxicidad, este producto es considerado altamente peligroso (especialmente ver el valor dado en Alemania). El benceno tiene efectos txicos sobre la sangre principalmente. Un contacto constante con este producto produce sangrado nasal y de las mucosas desarrollndose, adems, manchas prpuras. Si las condiciones lo propician los daos progresan y pueden generar leucemia. Estos efectos pueden aparecer meses o aos despus de la exposicin. Se elimina del cuerpo, en parte, sin cambio a travs de la respiracin y la orina. Otra parte, es oxidada a epxido de benceno y despus a fenoles y difenoles, los cuales son excretados en la orina. Es precisamente a travs de la deteccin de fenoles en la orina, como puede detectarse el nivel de exposicin al benceno. Algunos productos como fenacetina, cafena, sacarina y otros analgsicos suaves, tambin generan fenoles. Aunque no se sabe con certeza la manera en que actua el benceno en la generacin de los problemas sanguneos, ya mencionados, se cree que son alguno o algunos de los metabolitos que se genera dentro del organismo son los responsables. En base a esto, se ha propuesto que el benceno se convierte en fenol e hidroquinona en el hgado, esta ltima se acumula en la mdula sea y se convierte en benzoquinona (mediante la mieloperoxidasa), la cual reacciona con macromolculas provocando desordenes celulares.
Parte experimental 1. Objetivo: Determinar fenoles (totales, libres y conjugados) en la orina mediante el mtodo operatorio de Marenzi y Banfi. 2. Reactivos, materiales y equipos: A. Reactivos: HCL concentrado. NaOH 0,1N. P-nitroanilina diazotada. Goma arbiga 1%. Acetato de sodio 50%. Carbonato de sodio 20%. Agua destilada. B. Materiales: Tubos de ensayo de 20mL Gradilla para tubos. Pipeta graduada de 1, 5 y 10mL Probeta graduada de 50 y 100mL Pisetas. Fiola de 10mL. C. Equipos: Espectrofotmetro UV. Bao maria. 3. Mtodo de Banfi y Marenzi: A. Fundamento: Los fenoles presentes en la orina se determinan cuantificando el complejo rojo naranja, formado por la reaccin de la p-nitroanilina diazotada con los fenoles en medio alcalino (Na 2 CO 3 ), que puede ser ledo por el espectrofotmetro a 525nm. B. Tcnica operatoria: Diluir 1 ml de orina hasta 100 ml con agua. Se toma 20 ml de esta orina diluida y se coloca en un matraz erlenmeyer, se aade 1 g de permutita por cada 10 ml se tapa y se agita suavemente durante 10 min. Se decanta Tomar 1 ml de orina diluida en un tubo de ensayo para determinar fenoles libre y otros 1 ml en otro tubo de ensayo para fenoles totoles. Para determinar fenoles totales incorporar 0.4 ml de acido clorhdrico concentrado. Llevar a bao maria hirviente por 5 minutos, enfriar y neutralizar con 0.6 ml de hidrxido de sodio al 40 %. Completar el volumen con 1 ml de agua destilada. A ambos tubos agregar 1 ml de solucin de goma arbiga al 1% seguida de 1 ml de solucin de acetato de sodio al 50% y 1 ml de p-nitroanilina diazotada recientemente preparada y mantenida en bao de hielo. Agitar y dejar en reposo durante 1 minuto. Agregar 2 ml de solucin de carbonato de sodio al 20 %, agitar y dejar en reposo por 20 min. Determinar la absorbancia a 525 nm en el espectrofotmetro. C. Resultados: Tubo N1: Fenoles libres. Absorbancia: 0.17 Tubo N2: fenoles totales. Absorbancia: 0.963
Bibliografa Eusebio D., Rodrguez Y. Determinacin de fenoles y cido hiprico en orina como indicadores de exposicin al Benceno y tolueno en trabajadores de confeccin y reparacin de calzados del Mercado Virrey Amat del distrito del Rmac. Tesis pregrado. Lima, 2007. GeoSalud. El Benceno y su impacto en la Salud Pblica. ATSDR: Agency for Toxic Substances & Disease Registry. [Actualizacin, Enero 2009]. Georgia, EEUU [Revisado el 27 de Abril del 2014]. Disponible en: http://geosalud.com/Ambiente/benceno.htm INSHT. Benceno. Fichas Internacionales de Seguridad Qumica. INSHT: IPCS. [Actualizacin, Mayo del 2003]. Madrid, Espaa [Revisado el 27 de abril de 2014]. Disponible en: http://www.insht.es/InshtWeb/Contenidos/Documentacion/FichasTecnicas/FISQ/Fich eros/0a100/nspn0015.pdf