CITOLOGIA

GINECOLOGICA
Lic. TM Soledad Rivera L.
Miembro I A C
HISTORIA
1600, invencin del microscopio por Hans y Zacharias
Janssen en Michelsburg, permiti observaciones 60 veces
en relacin al tamao original.
1678, Anthony Van Leeuwenhoek, en Delft, logr identificar
espermatozoides, aumento 275
1838, botnico Schleiden, hace descubrimiento de la clula
en las plantas
1838 Alfred Danne en Paris descubri Trichomonas
1845 Alfred Danne hizo publicaciones sobre examenes
microscpicos de lquidos corporales (calostro)
HISTORIA
1847 Pouchet, realiz estudios citolgicos del ciclo menstrual
1847 Carl Bruch public un atlas de citologa de los tumores.
1855 Rudolf Wirchow en Berln public un libro de Patologa
celular
1860 Lionel Beale en Londres, Atlas de Citologa del esputo
Despus de estos trabajo en Europa y EE UU, salen
publicaciones sobre citologa de orina, lquidos corporales,
rbol bronquial, tracto gastrointestinal.
La citologa ginecolgica en sentido estricto comienza en
1943 con George Papanicolaou.
HISTORIA
George Papanicolaou. Naci en 1833, Kymi, en la isla de
Eurea
1904, termin estudios de medicina en Atenas
En Munich, Doctor en Filosofa
En 1913, decidi emigrar a los EE UU donde residi varios
aos
Fu profesor de anatoma clnica en Cornell, New York
Se ocup de estudiar el comportamiento del ciclo del epitelio
vaginal, primero en animales (cobayos) mas tarde en seres
humanos
Al estudiar extendidos citolgicos procedentes de clnicas
vecinas, descubri clulas tumorales.
HISTORIA
Para reconocer ms exactamente estas clulas y poder
descubrirlo, Papanicolaou desarroll la fijacin alcohlica
y la tcnica de tincin
En 1928, public : Nuevo Diagnstico de Cncer
En este mismo ao el antomo patolgo Ruman Babes,
public : Diagnstico del Cncer de cuello uterino por frotis,
con diferente tcnica de preparacin y tincin
Ambas publicaciones pasaron casi inadvertidas
En 1943 Papanicolaou junto con eI gineclogo Traut, public
su monografa : Diagnstico del Cncer Uterino mediante el
frotis vaginal. Obtuvo el reconocimiento internacional.
HISTORIA
Aos siguientes gracias a la iniciativa de numerosos
cientficos el nuevo mtodo se extendi
1961 Papanicolaou, director de un instituto nuevo en Miami.
Florida
1962, muere a la edad de 79 aos, de un ataque cardaco
Aos siguientes se aceptan estas tcnicas en EEUU, luego
en otros paises
Existen sociedades cientficas en todos los paises, siendo la
Academia Internacional de Citologa su organizacin central.
Mtodos de obtencin, preparacin y
coloracin de muestras ginecolgicas.
TOMA DE MUESTRA
Recomendaciones Previas.
No manipulaciones intravaginales
(duchas vaginales)
No medicamentos vaginales o locales
Evitar toma de muestra durante la menstruacin
Evitar tener relaciones sexuales (24 a 48 hrs antes)
No utilizar soluciones en el momento de toma de
muestra, como cido actico
Mtodos de obtencin, preparacin y
coloracin de muestras ginecolgicas.
Obtencin de muestra : Condiciones.
Colocar en mesa de exploracin ginecolgica
Colocar espculo
No utilizar lubricantes
No utilizar desinfectantes
Puede usarse suero fisiolgico
Utilizar guantes de jebe para cada paciente
Utilizar el hocico de tenca
Mtodos de obtencin, preparacin y
coloracin de muestras ginecolgicas.
Obtencin de muestra : Condiciones.
d) Toma debe efectuarse despus del examen
ginecolgico
Colposcopa simple
Toma de frotis
Colposcopa tras aplicacin de cido actico y lugol
Exploracin ginecolgica bimanual
d) Tacto rectal
Mtodos de obtencin, preparacin y
coloracin de muestras ginecolgicas.
Obtencin de muestra : Condiciones.
Obtencin del frotis con :
Torunda
Esptula de madera simple o cortada en forma
cncava
Esptula de aire
Citocepillos
Crvix brush
Cervix - Brush
Es una escobilla cervical
Permite obtener un frotis limpio y
uniforme
Recoge en un solo movimiento, todas las
clulas necesarias
DISEO
Compuesto de polietileno, mide 20 cmts.
El cepillo consta de 57 cerdas de plstico
semi-redondas de distinta longitud
Las del centro (mas largas) - zona
endocervical
Las externas (mas cortas) - superficie
ectocervical y zona de transformacin
APLICACION
Introducir la cerdas del cepillo en el canal endocervical
Presionar suavemente la escobilla, haciendo girar 5 veces
en la direccin de las agujas del reloj
El material celular que adherido a los lados de las cerdas
Realizar el extendido en una lmina porta-objeto y fijar
Introducir el cervix-brush en el vial para la citologa de base
lquida
Mtodos de obtencin, preparacin y
coloracin de muestras ginecolgicas.
Obtencin de muestra : Condiciones.
Mtodos de toma de muestra :
toma vaginal : tercio superior de pared lateral de
vagina (estudio hormonal)
Toma de crvix : Ectocrvix y endocervix
Toma endometrial :
Debe ser simple y rpida
No anestesia
Por aspiracin (cnulas o aspirados)
Lavado endometrio por presin
Mtodos de fijacin de la muestra
1.- Recomendaciones :
No utilizar preparaciones desecadas al aire
Fijar inmediatamente obtenida la muestra, aun
cuando est hmeda
Tiempo mnimo : 10 a 30
Tiempo mximo : 8 - 10 dias
Mtodos de fijacin de la muestra
2.- Fijadores empleados .
A. Fijadores Lquidos:
Licor de Hoffman en partes iguales de alcohol
96 y eter sulfrico
Ventaja: excelente fijacin
Desventajas : rpida evaporacin y muy
inflamable
Alcohol de 96
Mtodos de fijacin de la muestra
2.- Fijadores empleados
B. Fijadores de Revestimiento:
1. Polietilenglicoles - solucin acuosa o alcoholtica
Ventajas: protegen al material celular con
fina capa - no voltiles
Desventajas : debe ser disuelta
completamente
no disuelta evita buena coloracin
se recomienda usa agua destilada y alcohol
B. Fijadores de Revestimiento:
2. Lacas spray: Polietilenglicol - Alcohol etlico o isoproplico
Ventajas: son excelentes fijadores
Protegen el material celular con una fina capa
(distancia 30 cm)
no son voltiles
no inflamables a temperatura normal
el frotis est seco a los 10
Desventajas : debe se completamente disuelta la
solucin antes de iniciar la tincin (mala coloracin)
Marcas : mercofix, spraycyte, profix.
Mtodos de Coloracin
Tincin de Papanicolaou
Hematoxilina Esosina
PAS - Alcian Blue
Fluorescena
Inmunocitoqumica
PCR, otros
Mtodo de Papanicolaou
Ventaja.
Se obtiene un aspecto muy ntido y fino de
la estructura nuclear.
Gran transparencia del citoplasma
coloreado. Las clulas son perfectamente
reconocibles aunque se encuentren
superpuestas
El citoplasma toma la coloracin de
diferentes tonalidades, hace una gran
diferenciacin de las clulas maduras e
inmaduras.
Mtodo de Papanicolaou
Fundamento.
Es una coloracin policromtica por la
mezcla de colorantes catinicos, aninicos
y anfoteros.
Hidratacin.
Como los extendidos han sido fijados con
alcohol, se requiere una serie descendente
de concentracin de alcohol (hidratacin),
para posibilitar la tincin con hematoxilina
en solucin acuosa que tiene principalmente
la heterocromatna del ncleo celular.
Mtodo de Papanicolaou
Decoloracin.
Se produce con el bao de cido
clorhdrico para eliminar el exceso de
coloracin del citoplasma.
Mtodo de Papanicolaou
Deshidratacin.
Se realiza mediante una serie ascendente
de concentracin de alcoholes que nos
permite seguir trabajando con colorantes
citoplasmticos
Orange G da una coloracin eosinfila, y el
E 36 una coloracin basfila. Luego sigue
otra deshidratacin de alcohol 96
Alcoholes absoluto y al final un aclaramiento
con baos de xilol.
Montaje de la Preparacin
Laminillas de 22 x 40
Blsamo de Canad
Merkoglas (resina sinttica)
Tellan
Histologa y Citologa
del Tracto Femenino
Vulva
Vagina
Utero
Trompas de Falopio
Ovarios
Utero
Organo muscular hueco, situado en el
centro de la cavidad plvica, entre vejiga
por debajo y el colon sigmoide por detrs
Forma de pera
El tero est compuesto :
Crvix o cuello uterino
Cuerpo uterino
Crvix.
Comprende aproximadamente el tercio
inferior del tero y presenta una
estructura tubular. Tiene dos porciones:
Exocrvix o Ectocrvix
Endocrvix
Cuerpo Uterino.
Se encuentra la cavidad endometrial, que
tiene forma cnica y est en
comunicacin con las dos trompas de
Falopio
Epitelio plano estratificado no queratinizado
Est constiudo por 3 estratos
A) Estrato basal : Clulas basales
B) Estrato Espinoso : Clulas parabasales
Clulas intermedias pequeas
C) Estrato superficial : Clulas intermedias grandes
Clulas superficiales.
Su grosor depende de las influencias hormonales
Epitelio maduro ; 5 a 50 capas de clulas
Epitelio atrfico ; 5 a 10 capas de clulas
Histologia Del Ectocervix o Exocervix
Proteccin mecnica contra agresiones debido a
su estratificacin y disposicin horizontal de las
clulas superficiales
Proteccin biolgica de depuracin frente a las
infecciones. Se debe a la produccin de
glucgeno de la capa intermedia, que por accin
de los bacilos de Doderlein, transforman el
glucgeno en cido lctico, dando un pH cido a
la secrecin crvico vaginal.
Funcin epitelio plano
Se distinguen 4 tipos de
clulas :
Basales
Parabasales
Intermedias
Superficiales
Citologa del Exocrvix o Ectocrvix
Ubicacin : Estrato basal
Tamao : 12 a 20 micras
Forma : Redonda
Ncleo : Redondo, central, 8 a 10 micras,
cromatina finamente granular
Citoplasma : Cianfilo o basfilo denso
Predominan :Atrofias intensas, normalmente no
se observan en los frotis
Clulas Basales
Ubicacin : Estrato espinoso profundo
Tamao : 20 a 40 micras
Forma : Redonda u oval
Ncleo : Redondo u oval, central, 9 a 10 micras,
cromatina es finamente reticular,
ocasionalmente presenta nucleolo
Citoplasma : Cianfilo o basfilo, denso pero algo
ms claro que en las clulas basales,
pero ms intenso que en las clulas
intermedias, no contiene glucgeno
Variedad : Clulas post parto
Predominan: atrofia senil, infancia, puerperio
Clulas Parabasales
Ubicacin : Estrato espinoso profundo
Tamao : 25 a 40 micras
Forma : Redonda u oval
Ncleo : Posicin variable, redondo u oval,
7 9 micras, cromatina reticulada
finamente distribuida
Citoplasma : Cianfilo o transparente, ligeramente
plegado, contiene glucgeno.
Variedad : Naviculares
Predominan: Gestacin, insuficiencia hormonal
folicular
Clulas Intermedias pequeas
Ubicacin : Estrato espinoso superficial
Tamao : 40 a 60 micras
Forma : Poligonal
Ncleo : Redondo vesicular, cromatina
finamente granular, 6 a 7 micras
Citoplasma : Cianfilo muy transparente, plegado
o extendido, dependiente de influencia
hormonal
Predominan: En mujer sexualmente activa
Clulas Intermedias grandes
Ubicacin : Estrato superficial
Tamao : 50 a 60 micras
Forma : Poligonal
Ncleo : Central, 6 micras,(picntico)
Citoplasma : Eosinfilo o basfilo, amplio,
transparente y resistente
Predominan: En la ovulacin o en tumores quwe
producen estrgeno
Clulas Superficiales
Epitelio monoestratificado, cilndrico ciliado y
no ciliado que reviste la superficie del conducto
endocervical y sus formaciones glandulares. Se
extiende desde la posicin interna ms
profunda del endocrvix hasta el orificio externo
del cuello uterino.
Histologa del Endocrvix.
Clulas endocervicales producen mucina, ms
agua dando lugar al moco
El moco proporciona protecin a la cavidad
endouterina y acta como veradadero tapn
En la fase ovulatoria pierde este espesamiento
y permite el paso del espermatozoide
Se produce de forma armoniosa los fenmenos
de diferenciacin y maduracin cumpliendo su
funcin designada.
Funcin Epitelio Cilndrico.
Forma : Variable, alargadas o aspecto de luz de linterna
Tamao : 16 micras
Citoplasma :Basfilo, son muy sensibles a la influencia del
medio circulante, con frecuencia se presentan en estado
de degeneracin, el citoplasma presenta numerosas
vacuolas que a veces desplazan al ncleo hacia la base
celular.
Ncleo : Redondo u oval, a veces en forma de clava, su
posicin depende de la fase de ciclo, basal o central.
Estructura finamente granular de la cromatina, suele
mostrar cromocentros o micronucleolos.
Disposicin :Panal de abejas, hileras o sueltas
Clulas secretoras
Citologa del Endocrvix
Clulas Cilndricas Ciliadas
Forma : Alargadas, bordes libres ms anchos
provistos de cilios
Citoplasma : Cianfilo de forma columnar, con
colas delgadas
Ncleo : Redondo o alargado, suele ser
central, cromatina se dispone en grnulos o
grumos, poseen nucleolos
Disposicin : En empalizada o panal de abejas,
hileras; sueltas.
Histologa del Endometrio
Epitelio cilndrico simple, que reviste tanto
la superficie de la cavidad uterina (epitelio
superficial), como los tubos glandulares
situados en el estroma (epitelio glandular)
Citologa del Endometrio
En condiciones fisiolgicas normales es
raro encontrar clulas endometriales en
los frotis cervicales
Se pueden encontrar en hemorragias
uterinas, en la fase menstrual.
Clulas endometriales secretoras
Estn presentes en la segunda fase del
ciclo menstrual
Citoplasma es basfilo de tincin dbil y
escaso
Ncleos son redondos u ovales con bordes
nucleares delicados y cromatina granular
fina
Se exfolian en grupos y tienden a
superponerse.
Clulas endometriales ciliadas
Son pequeas y poligonales, se presentan
agrupadas en forma de panal, en la fase
proliferativa aparecen con escaso
citoplasma basfilo, en la fase secretora los
ncleos estn separados y el citoplasma es
de mayor volumen.
Los ncleos son redondos u ovales, con
estructura cromatnica finamente granular.