UNIVERSIDADE FEDERAL DE CAMPINA GRANDE

CENTRO DE SADE E TECNOLOGIA RURAL

CAMPUS DE PATOS PB
CURSO DE MEDICINA VETERINRIA










MONOGRAFIA








Estudo comparativo da microbiota vaginal e uterina de cadelas e gatas
submetidas a OSH no HV/CSTR-UFCG







Rossandra dos Santos Lucena









2014




UNIVERSIDADE FEDERAL DE CAMPINA GRANDE
CENTRO DE SADE E TECNOLOGIA RURAL
CAMPUS UNIVERSITRIO DE PATOS PB
CURSO DE MEDICINA VETERINRIA









MONOGRAFIA




Estudo comparativo da microbiota vaginal e uterina de cadelas e gatas
submetidas a OSH no HV/CSTR-UFCG



Rossandra dos Santos Lucena
Graduanda



Profa. Dra. Norma Lcia de Souza Arajo
Orientadora






Patos -PB
Junho de 2014
UNIVERSIDADE FEDERAL DE CAMPINA GRANDE
CENTRO DE SAUDE E TECNOLOGIA RURAL
CAMPUS DE PATOS-PB
CURSO DE MEDICINA VETERINRIA







ROSSANDRA DOS SANTOS LUCENA
Graduanda





Monografia submetida ao Curso de Medicina Veterinria como requisito parcial para
obteno do grau de Medico Veterinrio.





ENTREGUE EM ....../....../........ MDIA:________




BANCA EXAMINADORA



______________________________________ _________
Profa. Dra. Norma Lcia de Souza Arajo Nota
Orientadora

______________________________________ _________
Prof. Dr. Carlos Enrique Pea Alfaro Nota
Examinador I

_______________________________________ _________
M.V. Msc. Layze Cilmara Alves da Silva Nota
Examinador II




































A Deus, que sempre me acompanhou nessa
jornada e que me guiou pelos caminhos
certos.
Aos meus pais Raimundo e Maria do Carmo,
pela fora, ajuda, amor, confiana e oraes
para que este sonho se realizasse.
Ao meu esposo Josinaldo, que esteve sempre
ao meu lado em todos os momentos, pelo
amor e confiana, pela f que tudo vai dar
certo.
Dedico
AGRADECIMENTOS


A Deus, por todas as benes que derramou sobre mim e meus familiares, me
transformando num ser de bondade e f, tambm pela fora que me acompanhou no
decorrer dessa jornada.
Aos meus pais Maria do Carmo e Raimundo, aos quais devo-lhes tudo, pois foram
essenciais no desenvolver dessa formao, pelo amor, oraes, ajuda financeira, por
sempre acreditarem no meu potencial e por juntos realizarmos um sonho em comum.
Ao meu esposo Josinaldo, pelo amor, dedicao, companheirismo, conselhos,
amizade, por dividir comigo essa misso e essa conquista, pela pacincia comigo e com os
meus animais, por estar sempre presente e por transformar a minha vida mais colorida.
Aos meus irmos, Roberta, Luiz e Leandro, pela cumplicidade e companheirismo,
pelos momentos de conversas, e por me atualizarem sobre os acontecimentos do Brasil e
do mundo.
Aos amigos e colegas, Ramon e Ediane por estarem sempre comigo, me ajudando
quando tive dificuldades, explicando quando tive dvidas, tambm, pelos momentos de
descontrao, pelas risadas, pelas brigas, pela amizade e companheirismo e por todos os
momentos que convivemos nesses 5 anos.
Daniele Aluska, por ter me ajudado na parte das anlises microbiolgicas, pelos
conselhos sobre a monografia e por ser to boa sempre comigo, estando sempre disposta a
me ajudar.
Profa. Dra. Norma Lcia de Souza Arajo, minha orientadora, pela pacincia,
motivao e confiana no meu trabalho, por me entender e me tratar to bem.
Ao Prof. Dr. Pedro Izidro, Renato, Davyd, Roberta, Fernanda, Lilian, Sstenes, por
me ajudarem a concretizar uma parte do meu estudo.
Ao Prof. Dr. Otavio Brilhante por ceder um dos microscpios do laboratrio para
que pudesse fazer a leitura das lminas.
Aos funcionrios da instituio que estiveram sempre dispostos a ajudar Alielson,
Fabiano, Adriano, Seu Cuit, Finha, Neide, Dona Rilva, Dona Socorro, Verinha, Erotides e
Dona Solange.
Dona Lena e Seu Francisco, Dguia, Nathalia e Dona Zenilda pela convivncia.
A todos os meus professores, pelos ensinamentos.
turma 2009.2 que ser lembrada por mim pelo resto dos meus dias.
Aos amigos do Centro Mdico Dr. Leonardo Torres: Dr. Leonardo, Dra. Alinne
Dantas, Dra Kamila e Dra Janaina, pelos ensinamentos, pelas demonstraes e por me
aceitarem to bem, Maria, Din, Luclia, Jonathan, Neto, pelas brincadeiras, risadas,
descontrao e pelo carinho.
minha sogra, cunhados e amigos, por ajudarem quando tive dificuldades.
Aos meus filhotes de quatro patas, pela inocncia, carinho, por terem me
transformado na pessoa que sou hoje.
Aos animais, seres que desde sempre respeitei, amei, cuidei e que a cada dia me
apaixono mais e mais, aos que fizeram parte desta trajetria e que, com o silncio, me
mostraram o caminho at aqui, me ajudando na realizao desse sonho. Muitas vezes com
um olhar desconfiado, um pedido de carinho ou ajuda. Muitas vezes fui incapaz de ajudar
perante as dificuldades, mas aqueles que consegui ajudar fizeram a diferena na minha
vida.
Ao REUNI pelo auxlio financeiro e por possibilitar uma vida melhor.
Aos que contriburam direta ou indiretamente para a concluso deste trabalho.

A todos, muito obrigada!

































"No semblante de um animal que no fala, h
todo um discurso que somente um esprito
sbio pode realmente entender."
(Mahatma Gandhi)
SUMRIO

Pg.
1 INTRODUO.......................................................................................................... 12
2 REVISO DE LITERATURA.................................................................................. 13
2.1 O ciclo estral nas cadelas e gatas.............................................................................. 13
2.1.1 Fases do ciclo estral na cadela e na gata................................................................ 14
2.1.1.1 Proestro................................................................................................................ 14
2.1.1.2 Estro..................................................................................................................... 15
2.1.1.3 Interestro.............................................................................................................. 16
2.1.1.4 Diestro................................................................................................................. 16
2.1.1.5 Anestro................................................................................................................ 16
2.2 Citologia Vaginal....................................................................................................... 17
2.2.1 Tcnicas de colheita............................................................................................... 19
2.2.2 Determinao da fase do ciclo estral em cadelas e gatas utilizando citologia
vaginal.............................................................................................................................

20
2.3 Mecanismos de defesa uterina em cadelas e gatas.................................................... 21
2.3.1 Mecanismo celular.................................................................................................. 21
2.3.2 Mecanismo humoral............................................................................................... 22
2.3.3 Mecanismo fisco.................................................................................................... 23
2.4 Microrganismos colonizadores do trato reprodutivo................................................. 23
2.4.1 Escherichia coli...................................................................................................... 23
2.4.2 Streptococcus spp................................................................................................... 24
2.4.3 Staphylococcus spp................................................................................................. 25
2.4.4 Klebsiella spp......................................................................................................... 26
3 MATERIAL E MTODOS....................................................................................... 27
3.1 Local do experimento................................................................................................ 27
3.2 Animais...................................................................................................................... 27
3.3 Citologia vaginal....................................................................................................... 27
3.4 Microbiologia vaginal............................................................................................... 27
3.5 Realizao da ovariosalpingohisterectomia.............................................................. 28
3.6 Microbiologia uterina................................................................................................ 30
3.7 Anlises microbiolgicas........................................................................................... 30
4 RESULTADOS E DISCUSSO............................................................................... 31
5 CONCLUSES........................................................................................................... 36
6 REFERENCIAS......................................................................................................... 37




LISTA DE FIGURAS



Pg.
Figura 1 Influncia dos hormnios nas diferentes fases do ciclo estral............... 15
Figura 2 Clula parabasal..................................................................................... 18
Figura 3 Clula intermediria............................................................................... 18
Figura 4 Clula superficiais: A - Clulas superficiais com ncleo. B Clulas
superficiais sem ncleo ou queratinizadas............................................

19
Figura 5 Mecanismo de migrao dos neutrfilos at agente invasor e
fagocitose...............................................................................................

22
Figura 6 Escherichia coli..................................................................................... 24
Figura 7 Streptococus spp.................................................................................... 25
Figura 8 Staphylococcus spp................................................................................ 26
Figura 9 Klebsiella Pneumoniae.......................................................................... 26
Figura 10 Tcnica cirrgica utilizada no experimento......................................... 39
Figura 11 Fases do ciclo estral em cadelas e gatas submetidas OSH no
HV/CSTR-UFCG................................................................................

31
Figura 12 Microbiologias vaginais de cadelas e gatas submetidas OSH no
HV/CSTR-UFCG................................................................................

32
Figura 13 Relao dos microrganismos isolados das amostras vaginais em
gatas com as fases do ciclo estral........................................................

34
Figura 14 Relao dos microrganismos isolados das amostras vaginais em
cadelas com as fases do ciclo estral....................................................

35
RESUMO


LUCENA, R. S. Estudo comparativo da microbiota vaginal e uterina de cadelas e
gatas submetidas OSH no HV/CSTR-UFCG. [Comparative study of microbiota
vaginal and uterine of bitches and cats undergoing ovariohysterectomy in HV / CSTR-
UFCG]. 2014. 40f. Monografia (Medicina Veterinria) - Unidade Acadmica de Medicina
Veterinria, Universidade Federal de Campina Grande.

Diversas enfermidades acometem os animais domsticos, sendo as doenas reprodutivas de
grande importncia, podendo levar a complicaes sistmicas ocasionando a morte de
fmeas. A piometra um distrbio decorrente da colonizao do tero por microrganismos
patognicos, os quais, na maioria das vezes fazem parte da microbiota residente da vagina
da fmea que, por ocasio de vrios fatores podem multiplicar-se e gerar a enfermidade.
Objetivou-se com este estudo comparar a microbiota colonizadora do trato reprodutivo de
cadelas com o de gatas saudveis, atravs do isolamento e identificao dos
microrganismos e relacionar a sua presena com as fases do ciclo estral determinando em
qual dessas ocorre maior ndice de colonizao. Para tanto, foram utilizados 32 animais
saudveis, sendo 16 da espcie felina e 16 da espcie canina, em diferentes fases do ciclo
estral, submetidos a ovariossalpingohisterectomia (OSH) eletiva no Hospital Veterinrio
do Centro de Sade e Tecnologia Rural da Universidade Federal de Campina Grande
(HV/CSTR-UFCG), na cidade de Patos, Paraba. Foram coletadas de cada animal,
amostras biolgicas para citologia vaginal, microbiologia vaginal e uterina. Que resultaram
em colonizao de 10 amostras da vagina cranial de cadelas e 16 amostras de vagina
cranial de gatas e uma amostra de cornos uterinos direito e esquerdo de cadela. Os
microrganismos isolados em cadelas foram Streptococcus spp., Staphylococcus spp.,
Escherichia Coli e Klebisiella spp., enquanto que os microrganismos isolados em gatas
foram a Escherichia Coli e Klebisiella spp. A fase de maior ndice de colonizao foi o
anestro tanto em cadelas como em gatas.

Palavras chaves: Defesa uterina. Reproduo. Piometra.

ABSTRACT


LUCENA, R. S. Comparative study of the microbiota of the vagina and uterus of
female bitches and cats at different stages of the estrous cycle.[Estudo comparativo da
microbiota vaginal e uterina de cadelas e gatas submetidas OSH no HV/CSTR-UFCG].
2014. 40f. Monografia (Medicina Veterinria) - Unidade Acadmica de Medicina
Veterinria, Universidade Federal de Campina Grande.

Various diseases affecting domestic animals and reproductive diseases are of great
importance and may lead to systemic complications leading to death of females. The
Pyometra is a disease that occurs when the uterus is colonized by pathogenic
microorganisms,that most part are of the resident microbiota of the female's vagina, in
occasions several of factors can multiply and generate the disease. The objective of this
study was to compare the colonization of the reproductive tract microbiota of healthy dogs
and cats through the isolation and identification of microorganisms and relate their
presence with the phases of the estrous cycle by determining at what stage of the estrous
cycle higher rate of colonization occurs. 32 animals were used, 16 of the feline specie and
16 of the canine specie, healthy, at different stages of the estrous cycle, submitted
ovariohysterectomy (OSH) elective at the Veterinary Hospital of the Federal University of
Campina Grande (HV / CSTR-UFCG) in city of Patos, Paraba. Were collected from each
animal, biological samples for cytology, microbiology vaginal and uterine. The
colonization obtained in 10 samples from the cranial vagina bitches and 16 samples of
cranial vagina and a sample of right and left uterine horns of a bitch. The microorganisms
isolated were Streptococcus spp., Staphylococcus spp., Escherichia coli and Klebisiella
spp., in bitches. While the microorganisms isolated in cats were Escherichia coli and
Klebisiella spp. The highest stage of colonization was anoestrus in bitches as in cats.

Keyswords: Uterine Defense. Reproduction. Pyometra.






1 INTRODUO

A populao de animais de estimao cresce proporcionalmente ao nmero de
pessoas e a cada dia ganha mais espao dentro das casas, onde desenvolvem um papel
social importante. Sendo considerados membros da famlia, os animais de estimao
encontram-se diretamente ligados a evoluo do consumo de produtos e servios estticos
voltados para este novo tipo de consumidor.
Os cuidados com a sade desses animais de estimao tambm movimentam um
mercado importante, dada a preocupao dos proprietrios pela proximidade do co ou
gato com os membros da famlia e o risco de contato com enfermidades.
O diagnstico de enfermidades do sistema genital assume um papel importante na
criao dos animais de estimao, uma vez que as enfermidades podem comprometer a
capacidade reprodutiva dos animais, podendo ainda ser fatais em cadelas e gatas.
Caractersticas peculiares do ciclo estral tornam as fmeas suscetveis a distrbios como a
piometra, que pode levar a morte ou a esterilidade.
A piometra ocorre quando h colonizao do tero por microrganismos
patgenos, estes, na maioria das vezes fazem parte da microbiota residente na vagina da
fmea, que por ocasies de vrios fatores, podem multiplicar-se e gerar a enfermidade.
necessrio um conhecimento aprofundado dos microrganismos potencialmente
patognicos que esto presentes na flora do trato genital das fmeas e sua associao ao
ciclo estral onde se possa observar qual fase h maior ndice de contaminao, pois, atravs
desse entendimento pode-se determinar a etiologia de distrbios que acometem o sistema
reprodutivo de cadelas e gatas e assim obter maior eficcia no tratamento institudo ao
animal acometido.
Com base nesses aspectos, o objetivo deste estudo foi comparar a microbiota
colonizadora do trato reprodutivo de cadelas com o de gatas saudveis, identificar os
microrganismos presentes e relacionar com as fases do ciclo estral, determinando em que
fase do ciclo estral ocorre maior ndice de colonizao.

13

2 REVISO DE LITERATURA

2.1 O ciclo estral nas cadelas e gatas

O fenmeno rtmico observado em todos os mamferos que envolvem perodos
regulares, mas limitados, de receptividade sexual (estro) que ocorrem em intervalos
caractersticos para cada espcie denominado de ciclo estral. Um intervalo de ciclo
definido como o tempo do incio de um perodo de receptividade sexual at o ciclo
seguinte (REECE, 2008).
O ciclo estral classicamente dividido em estgios que representam eventos
comportamentais ou gonadais, em que so observados quatro perodos definidos como:
Proestro, perodo do desenvolvimento do folculo; Estro, perodo de receptividade sexual;
Diestro, perodo da fase madura do corpo lteo (GRECO; STABENFELD, 2008); Anestro,
perodo caracterizado pela queda da progesterona srica e inatividade sexual da fmea
(ETTINGER, 1992).
O mecanismo fisiolgico que determina o primeiro ciclo estral inicia-se no
hipotlamo, quando h um aumento na sntese e liberao do hormnio liberador de
gonadotrofina (GnRH) que estimula a secreo das gonadotrofinas: o hormnio
folculoestimulate (FSH) e o hormnio luteinizante (LH) pela adenohipfise. As
gonadotrofinas influenciam a funo ovariana na intensificao do desenvolvimento
folicular ovariano, a ovulao e a funo do corpo lteo (CL). O ovrio secreta estrognio,
progesterona e inibina em resposta ao estmulo das gonadotrofinas. O LH e o FSH agem
tanto em conjunto quanto separadamente, so necessrios para o crescimento adicional dos
folculos que participam do estgio pr-ovulatrio e para a secreo mxima de estradiol.
O FSH necessrio para o desenvolvimento folicular no perodo inicial e estimula o
crescimento folicular ovariano enquanto que o LH importante para a maturao final do
folculo, ovulao e manuteno do corpo lteo e consequentemente a secreo de
progesterona (REECE, 2006).
As cadelas so consideradas monostricas, pois apresentam apenas um ciclo estral
seguido por um longo perodo de anestro (HOSPOOLS, 2007), representando cerca de um
ou dois ciclos por ano (NELSON; COUTO, 2010), porm no so raros trs cios, embora,
mesmo nesse caso, na maior parte do ano ela se encontre em anestro.
14

As gatas so consideradas polistricas estacionais, sua ciclicidade controlada pelo
fotoperodo que deve ser de aproximadamente 12 a 14 horas de luz com intensidade de 50
Lux (NELSON; COUTO, 2010). Essa espcie possui ovulao desencadeada pelo
acasalamento, na qual, durante o coito haver a estimulao da hipfise para produo de
maior quantidade de FSH e LH que resultar em ovulao imediata, enquanto na espcie
canina a ovulao ocorre independente de acasalamento (GRTLER et al., 1987). O
primeiro cio ocorre na idade de aproximadamente seis a nove meses nas cadelas e entre
seis a doze meses nas gatas (DYCE; SACK; WENSING, 1997).

2.1.1 Fases do ciclo estral na cadela e na gata

O ciclo estral pode ser dividido em quatro ou cinco fases: o proestro, estro,
interestro (em gatas), diestro e anestro, onde so observadas modificaes orgnicas
especficas e com diferentes perodos de durao (FELDMAN, 2004; GRUNERT;
BIRGEL; VALE, 2005).

2.1.1.1 Proestro

identificado pelo edemaciamento vulvar e pelo sangramento vaginal. No h
receptividade sexual apesar da fmea se encontrar sexualmente atraente (HOSPOOLS,
2007). Tem durao mdia de 9 dias, variando de 3 a 17 dias em cadelas, j em gatas pode
ser curto ao ponto de no ser identificado, contudo tipicamente dura de 1 a 2 dias
(NELSON; COUTO, 2010). Em algumas gatas difcil distinguir o proestro do estro, pois
esses animais expressam comportamento de estro e aceitam o acasalamento sem este
perodo de transio preliminar (FELDMAN, 2004).
O aumento na concentrao de FSH considerado fundamental para iniciar a fase
do proestro e o desenvolvimento dos folculos ovarianos que apresentam um dimetro de
1,5 a 5mm em cadelas, esses folculos iro produzir estradiol, que o responsvel pelo
edema da vulva, pela cornificao da vagina e pelo sangramento vaginal, observado como
uma secreo vulvar serossanguinolenta. A concentrao srica de estradiol se eleva
gradualmente durante o incio do proestro, aumenta de forma abrupta momentos antes do
pico pr-ovulatrio de LH (Figura 1) e em seguida atinge rapidamente nveis basais
(NELSON; COUTO, 2010).
15



2.1.1.2 Estro

O estro inicia-se com receptividade monta e termina com a recusa ao
acasalamento. Sua durao em cadelas de 9 dias em mdia, com variao de 3 a 21 dias,
em gatas tem durao de 3 a 16 dias com mdia de 7 dias (ETTINGER, 1992). Ocorre a
aceitao do macho pela cadela que se torna menos agressiva com postura imvel e patas
firmemente plantadas no cho, sua cauda deslocada lateralmente, permitindo a
intromisso do pnis. As gatas apresentam comportamento caracterizado por vocalizaes,
rolamento pelo cho, lordose, tremores no corpo ou cauda e sustentao da cauda para um
dos lados, aceitando a cobertura (NELSON; COUTO, 2010).
Nas cadelas os folculos pr-ovulatrios continuam a se desenvolver e aumentar de
tamanho. O aumento na concentrao de estradiol durante o proestro, via feedback positivo
no hipotlamo, inicia o pico de LH que, por sua vez, determina a ovulao, formao do
corpo lteo e secreo de progesterona pelo ovrio. A ovulao ocorre na maioria das
cadelas em intervalo de 48 horas aps o pico de LH (variao de 0 a 96 horas). Em gatas o
processo de ovulao decorrente de um reflexo neuroendcrino, iniciado por meio da
estimulao mecnica dos receptores sensoriais localizados na vagina e crvix. O estmulo
Figura 1 Influncia dos hormnios nas diferentes fases do ciclo estral.
Fonte: Nelson; Couto, (2010).
16

induz a liberao do pico de LH pela hipfise, ocorrendo ovulao 48 horas depois
(NELSON; COUTO, 2010).

2.1.1.3 Interestro

Ocorre em gatas que no ovularam devido ausncia de cpula ou a estimulao de
hormnio insuficiente. Se manifesta entre um estro no ovulatrio e um novo estro
subsequente, a fmea no exibe sinais fsicos ou comportamentais de atividade sexual,
podendo durar em mdia 7 dias (FELDMAN, 2004).

2.1.1.4 Diestro

O diestro marcado pelo fim do estro, tem durao de 2 a 3 meses, perodo em que
as fmeas se tornam calmas, a atrao pelos machos decresce e no so mais receptivas
(FELDMAN, 2004). Essa fase est sob influncia da progesterona, pois os corpos lteos
dos ovrios secretam o hormnio tanto em animais prenhes, quanto no prenhes. A
progesterona srica durante esse perodo varia de 2 at mais de 40 ng/mL. Quando h
declnio na progesterona para menos de 2 ng/mL se torna um indicativo do fim do diestro,
que ocorre na ocasio do parto (ETTINGER, 1992).
Quando o diestro ocorre seguido de gestao, a fase ter durao de 62 a 71 dias,
quando h ovulao seguida da ausncia de gestao, o diestro ir se apresentar como
pseudogestao fisiolgica, durando de 25 a 45 dias (FELDMAN, 2004).

2.1.1.5 Anestro

No anestro a fmea se encontra sexualmente sem atividade e inicia-se quando a
progesterona srica cai para menos de 2 ng/mL, terminando no incio dos sinais do
proestro. A durao do anestro em cadelas varivel, em mdia de 4,5 meses, enquanto
que em gatas em torno de 3 meses (ETTINGER, 1992).
Como no h comportamentos especficos associados fase de anestro, essa fase do
ciclo tem sido erroneamente descrita como perodo de quiescncia reprodutiva quando se
compara com parmetros de cadelas pr-pberes. Porm, o eixo hipofisrio-ovariano e o
tero esto ativos durante a fase, a secreo pulstil dos hormnios LH e FSH continuam.
17

O endomtrio descama-se e o tamanho e atividade das glndulas endometriais e as
espessuras do miomtrio e do endomtrio diminuem. A regresso endometrial continua por
cerca de 120 dias aps um ciclo em que no houve gestao e por 150 dias aps ciclo onde
houve uma gestao (NELSON; COUTO, 2010).

2.2 Citologia vaginal

O exame das clulas epiteliais da vagina de cadelas e gatas denominado citologia
vaginal, uma tcnica bastante usada na Medicina Veterinria e de grande importncia
como auxlio no diagnstico de doenas uterinas e vaginais, assim como na avaliao do
estgio do ciclo estral (BANKS, 1991).
A citologia vaginal um dos meios empregados para a determinao do incio e
durao do perodo frtil de cadelas e gatas que consiste na esfoliao do epitlio da
mucosa vaginal, esfregao por aposio em lmina e interpretao (ALVES; MATEUS;
COSTA, 2002).
A mucosa vaginal formada por vrias camadas celulares, que diferem quanto a
sua morfologia. Essas camadas variam em espessuras ao longo do ciclo estral, durante a
gestao, anestro e lactao de acordo com estmulo hormonal ao qual so submetidos
(RAPOSO et al., 2000).
Quatro tipos de achados podem estar presentes na citologia vaginal como: clulas
do epitlio vaginal, leuccitos, hemcias e bactrias. As clulas de maior importncia para
avaliar as diferentes fases do ciclo estral em cadelas e gatas so as clulas epiteliais, pois o
epitlio vaginal sofre constantemente modificaes por influencia hormonal (BANKS,
1991).
Schutter (1967, apud Porto et al., 2007) em estudo da arquitetura celular em
cadelas, classificou as clulas do epitlio vaginal em: basais, parabasais, intermedirias,
superficiais com ncleo e superficiais sem ncleo.
As clulas basais possuem ncleo arredondado e quantidade escassa de citoplasma
basoflico, esto localizadas ao longo da membrana basal e, por esse motivo, so raramente
observadas na citologia (RASKIN; MEYER, 2003).
As clulas parabasais apresentam alta proporo ncleo:citoplasma, possuem
citoplasma basoflico, ncleos arredondados de tamanho e forma uniformes (Figura 2). So
as menores clulas epiteliais observadas no exame citolgico de rotina das amostras da
18

vagina. As clulas que contm vacolos citoplasmticos so denominadas clulas
espumosas, porm, o significado dos vacolos desconhecido (OLSON, 1984 apud
RASKIN; MEYER, 2003).




As clulas intermedirias possuem proporo ncleo:citoplasma baixa, com
abundante quantidade de citoplasma azul a azul-esverdeado (Figura 3), os bordos
citoplasmticos so arredondados a irregulares e dobrados (BAKER; LUMSDEN, 1999
apud RASKIN; MEYER, 2003 ). Variam em tamanho podendo ser classificadas em clulas
intermedirias pequenas e grandes (MUSOLINO; GHIRELLI; MORENO, 2000).



Figura 2 Clula parabasal.
Fonte: Musolino; Ghirelli; Moreno (2000).
Figura 3 Clula intermediaria
Fonte: Musolino; Ghirelli; Moreno (2000).

19

As clulas superficiais com ncleo (Figura 4-A) possuem quantidade abundante de
citoplasma azul-claro a azul esverdeado, ncleo picntico e bordos celulares angulares ou
dobrados. Quando as clulas superficiais envelhecem se degeneram e so denominadas
clulas superficiais sem ncleo (queratinizadas) e estas se caracterizam por serem grandes
e irregulares (Figura 4-B) representando o fim do processo que se inicia com as clulas
basais. So tambm chamadas de clulas queratinizadas ou cornificadas (MUSOLINO;
GHIRELLI; MORENO, 2000).





2.2.1 Tcnicas de colheita

Para obteno de clulas vaginais para exame citolgico utiliza-se, segundo Raskin
e Meyer (2003), um swab de algodo umedecido com soluo salina ou uma escova
ginecolgica direcionada craniodorsalmente na regio caudal da vagina. Deve-se evitar o
vestbulo e a fossa do clitris, visto que as clulas superficiais queratinizadas presentes
neste local podem influenciar a interpretao citolgica. Cranialmente ao orifcio da uretra
obtm-se as clulas da vagina tocando-se suavemente no revestimento epitelial.
Outro mtodo alternativo de colheita foi descrito Olson (1984 apud RASKIN;
MEYER, 2003) consiste na utilizao de uma pequena pipeta de vidro com bulbo contendo
soluo salina estril, introduzida na poro caudal da vagina, obtendo-se as clulas
mediante repetidas infuses e aspiraes da soluo.
Figura 4 Clulas superficiais: A- clulas superficiais com ncleo. B- clulas superficiais
sem ncleo ou queratinizadas
Fonte: Musolino; Ghirelli; Moreno (2000).

B A
20

2.2.2 Determinao da fase do ciclo estral em cadelas e gatas utilizando citologia
vaginal

O estrgeno exerce grande influncia no epitlio vaginal, estimulando a
proliferao do epitlio que passa de uma espessura de poucas camadas celulares no
anestro para uma espessura de 20 a 30 (at 100-150) camadas de clulas no fim do pr-
estro (ALVES; MATEUS; COSTA, 2002).
No incio do proestro, h predominncia de clulas parabasais e intermedirias no
cornificadas em mais de 80% (NELSON; COUTO, 2010). So comumente encontrados
poucos neutrfilos e bactrias podem ser visualizadas em pequenas ou grandes
quantidades. O fundo do esfregao aparentemente sujo devido presena de secrees
cervicais e vaginais que se coram facilmente (MUSOLINO; GHIRELLI; MORENO,
2000). Com a progresso do proestro, a populao de clulas esfoliadas sofre uma
maturao gradual desaparecendo as clulas parabasais e intermedirias, enquanto o
numero de clulas superficiais aumenta (NELSON; COUTO, 2010). Dessa forma, a
variao na percentagem de clulas superficiais ao longo de esfregaos vaginais seriados
pode ser usada no monitoramento da evoluo do ciclo reprodutivo. Em termos
citolgicos, considera-se que a cadela ou gata est em cio (estro) quando o esfregao
celular apresenta um ndice de clulas superficiais superior a 80 % (ALVES; MATEUS;
COSTA, 2002).
A presena ou ausncia de ncleo picntico dentro de clulas superficiais no tem
relao com alteraes de concentraes plasmticas de hormnios, ou com a presena de
folculos ou corpo lteo dentro do ovrio (MUSOLINO; GHIRELLI; MORENO, 2000).
No diestro h um predomnio de clulas intermedirias e, conforme progride a fase,
pode-se observar maior nmero de clulas parabasais. No anestro, por no possuir tanta
influncia hormonal, h poucas camadas de clulas. As clulas que se observam so as
basais, porm, tambm h parabasais e intermedirias em pouca quantidade (SERVICIO,
2011).
No anestro podem estar presentes neutrfilos, enquanto os glbulos vermelhos
esto normalmente ausentes. Bactrias podem ou no estar presentes e, quando presentes,
geralmente representam a microflora normal (MUSOLINO; GHIRELLI; MORENO,
2000).

21

2.3 Mecanismo de defesa uterina em cadelas e gatas

Os mamferos possuem diversos mecanismos de defesa, cuja finalidade controlar
as infeces causadas por microrganismos patognicos. Esses mecanismos podem ser
classificados em: inespecficos ou imunidade natural, quando no h o contato do
hospedeiro com o microrganismo patognico e o especfico ou imunidade adquirida, que
dependente do contato com o patgeno e do reconhecimento do antgeno. Tanto os
mecanismos de defesa especficos como os inespecficos so especializados para oferecer
proteo ao nvel das mucosas, pois, na grande maioria das vezes, as infeces bacterianas
tm incio ou se limitam s mucosas, constituindo assim a imunidade local (PEREIRA,
1991).
Para alguns microrganismos a primeira etapa na infeco sua aderncia s clulas
epiteliais superficiais. Quando microrganismos penetram na mucosa, eles tendem a ser
capturados por fagcitos e transportados pelos canais linfticos regionais at os linfonodos.
Estes atuam como barreiras a uma disseminao adicional e conseguem remover um
grande nmero de bactrias. A maioria das mucosas do organismo apresenta uma flora
microbiana normal constante, que por si s se ope ao estabelecimento de microrganismos
patognicos e tem funes fisiolgicas importantes (JAWETZ; MELNICK; ADELBERG,
1984).

2.3.1 Mecanismo celular

Os principais representantes do mecanismo de defesa celular uterina so os
neutrfilos que esto presentes nos processos inflamatrios agudos, constituindo a primeira
linha de defesa do organismo. Essas clulas so as primeiras a chegar ao local de infeco
e sua migrao direcionada pela quimiotaxia, e sua locomoo orientada atravs de um
gradiente qumico (Figura 5). Os neutrfilos atuam no local, englobando os agentes
invasores pelo processo de fagocitose, decompem o antgeno atravs da liberao dos
grnulos presentes no citoplasma (TIZARD, 2002).
22



Macrfagos tambm so importantes representantes da defesa celular, diferenciam-
se dos moncitos que circulam pelo sangue perifrico como clulas imaturas,
desenvolvem-se e atingem os tecidos, onde se diferenciam em macrfagos, com alto
potencial fagoctico (CASSADO, 2011).

2.3.2 Mecanismo humoral

O mecanismo humoral da resposta imune contribui na defesa uterina atravs das
imunoglobulinas (Ig). A permeabilidade do endotlio da circulao local est alterada no
incio do processo inflamatrio, permitindo assim a sada de fluidos do sistema vascular
para os tecidos e cavidades. O fluido uterino composto basicamente de imunoglobulinas,
protenas plasmticas e clulas inflamatrias (GALINDO et al., 2003).
A ligao das imunoglobulinas com microorganismos da superfcie epitelial uterina
e o sistema complemento aumenta a eficincia do processo de fagocitose, pois facilita a
aderncia das membranas dos organismos contaminantes aos fagcitos (CASTANHEIRA,
2002).
Figura 5 Mecanismo de migrao dos
neutrfilos at agente invasor e
fagocitose.
Fonte: wikipedia.org
23

2.3.3 Mecanismo fsico

A remoo do fluido uterino tem papel importante no mecanismo fsico de defesa
uterina. As contraes uterinas aps a expulso do feto favorecem a eliminao do
contedo restante, reduzindo assim a proliferao de microrganismos inespecficos
(OLIVEIRA FILHO, 1996) e alm, a adequada dilatao cervical associada s contraes
miometriais e uma eficiente drenagem linftica so requisitos para a manuteno de um
tero saudvel (CASTANHEIRA, 2002).

2.4 Microrganismos colonizadores do trato reprodutivo

O trato genital feminino possui uma microbiota residente das regies externas ao
stio cervical. O tero desprovido de microrganismos graas crvix que se mostra
como uma barreira muito eficiente aliada a outros mecanismos de defesa. A higidez do
tero fica comprometida quando as bactrias oriundas do trato geniturinrio ascendem via
crvix, situao que surge quando se acha reunido certo nmero de fatores como o
relaxamento cervical no estro. No diestro o ambiente uterino encontra-se mais susceptvel
a possveis contaminaes assim, as bactrias que colonizam o tero encontram-se num
meio receptivo e apropriado sua adeso e multiplicao, desenvolvendo-se uma infeco
(VINES, 2011).

2.4.1 Escherichia coli

A Escherichia coli facultativamente anaerbia, gram-negativa, em forma de
bastonete, no formadora de esporo, medindo de 1,0 -1,5 m de largura e 2,06,0 m de
comprimento (Figura 6) (GOMES, 2014).
24



Nos animais a E.coli tem sido relacionada a uma grande variedade de
manifestaes clnicas, incluindo diarreia, endometrite, cistite, aborto, septicemia, entre
outras (RADOSTITS et al., 2000).
Na piometra, a E.coli a principal bactria associada a enfermidade, sendo isolada
em 59% a 96% dos casos (FRANSSON, 2003).
Em poucas horas ou em poucos dias aps o nascimento h a colonizao do trato
gastrintestinal pela E. coli, isso ocorre porque o microrganismo ingerido junto com o
alimento, gua ou obtido diretamente de outros indivduos. A E. coli adere-se superfcie
mucosa do intestino grosso e, uma vez estabelecida, pode persistir por meses ou anos.
Linhagens residentes mudam aps um longo perodo de tempo, especialmente aps
infeces entricas ou terapia com antimicrobianos que alteram a flora normal (GOMES,
2014).

2.4.2 Streptococcus spp.

Os estreptococos so microrganismos esfricos, dispostos geralmente em cadeias,
gram-positivos, suas dimenses variam entre 0,2 a 1,2 m, imveis, amplamente
distribudos na natureza, mas so sensveis ao aquecimento por 30 minutos a 60C (Figura
7) (JAWETZ; MELNICK; ADELBERG, 1982).
Figura 6 Escherichia coli Fonte:
Mdsaude.com

25

A maior parte dos estreptococos so anaerbicos facultativos, produtores de
substncias extracelulares e enzimas, possuem capacidade de lisar hemcias em diversos
graus e isso constitui um importante critrio para sua classificao (JAWETZ; MELNICK;
ADELBERG, 1982). So encontrados nas mucosas da boca, trato respiratrio,
gastrointestinal, genitourinrio e pele (QUINN et al., 2005).
Podem causar diversas enfermidades dentre elas: infeces do trato respiratrio
superior, septicmicas neonatais, infeces piognicas, infeces do trato genitourinrio e
mastite bovina (HIRSCH; ZEE, 2003).

2.4.3 Staphylococcus spp.

O nome do gnero deriva da palavra grega staphyl que significa cacho de uvas
(Figura 8), pois podem estar arranjados de tal modo que lembra a fruta. Os estafilococos
so organismos esfricos, com 0,5 -1,5 m de dimetro, gram-positivos, imveis, no
formadores de esporos e aerbios ou anaerbios facultativos (QUINN et al., 2005).
Alguns estafilococos patognicos provocam supurao, formao de abscessos,
uma variedade de infeces piognicas e at septicemia fatal, alm de infeco do trato
urinrio. Podem produzir doenas tanto por sua capacidade de multiplicao e
disseminao ampla nos tecidos, como por produo de muitas substncias extracelulares
(JAWETZ; MELNICK; ADELBERG, 1982).



Figura 7 Streptococcus spp. Fontes: Bioweb.uwlax.edu
26



2.4.4 Klebsiella pneumoniae

A Klebsiella pneumoniae o membro mais comumente isolado do gnero. So
bactrias gram-negativas, encapsulada, imveis e pertencentem famlia
Enterobacteriaceae (Figura 9). Isolada normalmente da flora intestinal de humanos e
animais (JAWETZ; MELNICK; ADELBERG, 1982; KRIEG, 1984).


Figura 8 Staphylococcus spp.
Fontes: Extension.org
Figura 9 Klebsiella Pneumoniae.
Fontes: klebsiella-pneumoniae.org
27

um agente oportunista de importantes infeces, sendo encontrada em
enfermidades como a piometra. Em estudos observa-se que as cepas da K. pneumoniae
vem demonstrando resistncia mltipla a antimicrobianos (KRIEG, 1984).
28

3 MATERIAL E MTODOS

3.1 Local do experimento

O experimento foi realizado no Setor de Cirurgia de Pequenos Animais e
Laboratrio de Microbiologia do Hospital Veterinrio da Universidade Federal de
Campina Grande, Centro de Sade e Tecnologia Rural no Campus de Patos-PB.

3.2 Animais

Foram utilizadas 32 fmeas em idade frtil, sadias clinicamente, sendo 16 da
espcie canina e 16 da espcie felina, sem padro racial defenido, em diferentes fases do
ciclo estral.

3.3 Citologia vaginal

Para citologia vaginal, um swab foi inserido na comissura dorsal da vulva sendo
direcionado crniodorsalmente e friccionado levemente na mucosa vaginal. Em seguida,
foi realizado um imprint das clulas em uma lmina histolgica por meio de rolamento
do swab sobre a mesma. A lmina foi posteriormente corada pelo mtodo do pantico
rpido, sendo em seguida identificada.
A anlise foi feita em microscpio ptico, em objetivas de 10x e 40x, onde se
analisou o tipo celular predominante compatvel com as diferentes fases do ciclo estral nas
cadelas e gatas.

3.4 Microbiologia vaginal

O contedo biolgico vaginal foi coletado com um swab estril, inserido na vagina
do animal e levemente friccionado contra a parede. Em seguida, embebido em meio Stuart
que foi mantido resfriado em isopor contendo gelo, sendo ento encaminhado ao
Laboratrio de Microbiologia do Hospital Veterinrio da Universidade Federal de
Campina Grande.

29

3.5 Realizao da ovariossalpingohisterectomia (OSH)

O protocolo anestsico realizado nas cadelas submetidas OSH constituiu-se em
medicao pr-anestsica (MPA) com acepromazina na dose de 1mg/kg e diazepam na
dose de 0,2mg/kg pela via intramuscular, que provocou sedao e proporcionou a
tricotomia da rea desde a cartilagem xifide at o pbis, como tambm a tricotomia da
regio lombossacro para epidural. Na anestesia local epidural utilizou-se lidocana na dose
de 0,25mL/kg e para a anestesia geral, propofol na dose de 5mg/kg pela via endovenosa. A
manuteno anestsica foi realizada com isofluorano em circuito fechado.
Em gatas o protocolo anestsico utilizado na MPA compreendeu a administrao de
atropina na dose de 0,044mg/kg pela via subcutnea, 15 minutos antes da induo
anestsica. Para induo e manuteno anestsica utilizaram xilazina na dose 1mg/kg
associada na mesma seringa com cetamina na dose 15mg/kg, ambas por via intramuscular.
Foi realizada a tricotomia da rea ventral desde a cartilagem xifide at o pbis e regio
lombossacral para epidural. Para anestesia local epidural utilizou-se lidocana na dose de
0,22mL/kg.
Os animais foram posicionados em decbito dorsal, seguindo-se com a antissepsia
da rea tricotomizada com clorexidine 2%, e colocao do campo cirrgico. Realizou-se
uma inciso pr retro umbilical nas cadelas, pois os ovrios nessa espcie so mais difceis
de exteriorizar do que o corpo uterino, enquanto que nas gatas a inciso realizada foi a
retro-umbilical, em seguida, divulsionou-se o tecido subcutneo, identificando-se a linha
alba, onde fez-se uma inciso para promover o acesso cavidade. O corno uterino direito
foi localizado com o dedo indicador e, logo em seguida, o ovrio direito. Duas pinas
hemostticas foram aplicadas atravs de um orifcio no ligamento largo do tero,
envolvendo artria, veia e ligamento suspensor do ovrio (Figura 10A), foi realizada a
ligadura abaixo das duas pinas hemostticas e seco acima das duas pinas (Figura 10B).
O mesmo procedimento se deu no corno uterino esquerdo. A crvix foi pinada com trs
pinas hemostticas, onde se fez a ligadura posterior a ltima pina, seccionando-se entre a
primeira e segunda pina (Figura 10C). Procedeu-se a cauterizao do coto cervical com
tintura de iodo a 2% e a ocluso com sutura contnua transfixante invertida (Figura 10D).
Foi feita em seguida a sntese da parede abdominal com fio nylon e em logo aps a
dermorrafia com sutura simples separado.

30










A B
C
D
Figura 10 Tcnica cirrgica utilizada no experimento A-Pinas hemostticas aplicadas envolvendo artria,
veia e ligamento suspensor do ovrio; B- ligadura abaixo das hemostticas e seco do corno
ovariano. C- pinamento da cervix com pinas hemostticas e ligadura ao final da ultima pina,
com a seco entre a primeira e segunda pina. D- sutura contnua transfixante invertida do coto da
crvix.
Fonte: Ovario hist.
31

3.6 Microbiologia uterina

A amostra do contedo uterino foi coletada aps a realizao da OSH, onde fez-se
um corte longitudinal no corno uterino direito e com o auxlio de um swab estril coletou-
se material biolgico da parede do endomtrio. Em seguida, o swab com a amostra foi
colocado em um tubo de ensaio contendo meio Stuart e posteriormente identificado com
nome do animal e corno uterino respectivo, o mesmo procedimento foi realizado com
corno do uterino esquerdo. Todo o procedimento acima descrito ocorreu em ambiente
cirrgico e, portanto, estril.

3.7 Anlise microbiolgica

Os materiais biolgicos coletados foram acondicionados em isopor contendo gelo e
encaminhados para o Laboratrio de Microbiologia do Hospital Veterinrio da
Universidade Federal de Campina Grande, onde foram semeados por tcnica de inoculao
em placas de Petri por esgotamento, para obteno de colnias isoladas, com meios de
cultivo em gar sangue e gar MacConkey e meio de enriquecimento BHI (Brain Heart
Infusion), incubados em estufa a 37C durante 24-48 horas. Passado o perodo de
incubao, observou-se ento, a presena de crescimento bacteriano. Das colnias que
cresceram nas placas, foram confeccionadas lminas histolgicas e coradas com a
colorao de Gram, sendo posteriormente visualizadas em microscpio ptico com
objetiva de 100X em leo de imerso.


32

4 RESULTADOS E DISCUSSO

Os resultados das anlises da citologia vaginal das cadelas e gatas obtidos neste
estudo esto representados na figura 11.




Observou-se que o anestro foi a fase de maior incidncia nas duas espcies
estudadas, totalizando 25 animais (78,14 %), o que justifica por o anestro ser a fase do
ciclo reprodutivo com maior durao. O proestro apresentou-se em cinco animais
(15,62%), em duas gatas e trs cadelas. O estro e diestro foram as fases de menor
incidncia. O estro apresentou-se em apenas uma gata (3,12%) no sendo identificado em
nenhuma das cadelas, o inverso aconteceu com a fase do diestro observado em apenas uma
cadela (3,12%) no sendo identificada em nenhuma das gatas.
Os resultados obtidos nas anlises microbiolgicas vaginais das cadelas e gatas
esto representadas na figura 12. Dos 32 animais utilizados no estudo, apenas seis
(18,75%) apresentaram ausncia de microrganismos no trato reprodutivo. O restante dos
animais apresentou-se positivo em pelo menos uma das regies do trato reprodutivo. A
Figura 11 Fases do ciclo estral em cadelas e gatas submetidas a OSH no
HV/CSTR-UFCG.
0
2
4
6
8
10
12
14
Proestro Estro Diestro Anestro
N

m
e
r
o
s

d
e

a
n
i
m
a
i
s

Fases do ciclo estral
Cadela
Gata
33

vagina cranial encontrou-se colonizada em 10 amostras de cadelas (31,25%) e 16 amostras
de gatas (50%).


As cadelas apresentaram maior variedade de espcies de microrganismos nas
culturas vaginais quando comparadas as da gata. Das 16 amostras vagnais de cadelas, no
houve crescimento microbiano em seis (37,5%) e as 10 restantes.isolou-se: Streptococcus
spp. (12,5%), Staphylococcus spp .(6,25%), Escherichia Coli (25%), Klebisiella
spp.(12,5%). Em apenas uma amostra houve crescimento de Streptococcus spp. juntamente
com Staphylococcus spp.(6,25%). As amostras vaginais de gatas por sua vez, apresentaram
crescimento de Escherichia coli em14 amostras (87,5%) e em duas amostras (12,5%)
houve crescimento de Escherichia coli juntamente com Klebsiella spp.
A presena de Staphylococcus spp., Streptococcus spp. e Escherichia coli em
cadelas como demonstrado neste estudo, mostra que esses agentes podem estar presentes
na vagina e consequentemente ascender ao tero de cadelas sadias, causando danos ao
aparelho reprodutor da fmea ( ETTINGER, 1992).
Os achados do estudo de Carneiro; Toniollo e Schocken-Iturrino (2005) mostraram
que os microrganismos encontrados em amostras vaginais de cadelas sadias foram:
Staphylococcus spp., Escherichia coli e o Streptococcus spp., o que se assemelha quanto
aos microrganismos isolados neste trabalho.
0
2
4
6
8
10
12
14
16
Cadela
Gata
Figura 12 Microbiologias vaginais de cadelas e gatas submetidas OSH no HV/CSTR-UFCG.
34

Santos (2006) estudou a avaliao da microbiota vaginal de cadelas usando como
diagnstico o isolamento microbiolgico e a colpocitologia, em 40 cadelas hgidas, os
resultados obtidos do isolamento bacteriano foram diferentes deste estudo quanto aos
microrganismos encontrados, visto que Santos (2006) obteve maior incidncia de
Micrococcus spp.
Avila et al. (2008) obtiveram grande diversidade de microrganismos isolados no
canal vaginal. Utilizaram 70 cadelas sem alteraes clnicas perceptveis no sistema
genital. Dentre as espcies isoladas obteve-se Staphylococcus epidermidis (14,2%),
Pseudomonas aeruginosa (11,5%), Proteus mirabilis (11,5%), Staphylococcus aureus
(8,6%), Escherichia coli (8,6%), Proteus vulgaris (8,6%), Streptococcus spp. (5,7%),
Klebsiella sp. (2,8%), Shiguella sp. (2,8%), Citrobacter sp. (2,8%).
J os resultados obtidos das amostras vaginais de gatas so distintos dos
encontrados por Clemetson e Ward (1990), que utilizaram em seu trabalho 53 gatas
saudveis e obtiveram o isolamento das seguintes bactrias: Staphylococcus spp. em
56,0%, Streptococcus canis em 52,0% e Escherichia coli em 44,0% das amostras vaginais.
Em outro estudo desenvolvido por Schocken-Iturrino et al. (1992) utilizaram 80
amostras vaginais de gatas adultas no castradas conseguiram 223 isolamentos, dentre as
espcies bacterianas isoladas, duas se destacaram como mais frequentes: a Escherichia coli
isolada 67 vezes (83,75%) e Streptococcus spp. isolados 40 vezes (50%), o que se
assemelha ao resultado deste experimento quanto a incidncia da Escherichia coli que foi o
microrganismo de maior predominncia no isolamento vaginal de gatas estando presente
nas 16 gatas e em duas encontrava-se atuando juntamente com Klebsiella spp.
Os resultados microbiolgicos uterinos das 16 gatas deste estudo, indicaram que
tanto os cornos uterinos direito quanto os cornos uterinos esquerdo no desenvolveram
crescimento nos meios de cultura utilizados, semelhante ao estudo de Holst et al. (2003)
que caracterizaram a populao de bactrias do trato genital de gatas adultas, utilizando 66
fmeas submetidas a OSH, no obtendo crescimento de nenhum microrganismo nas
amostras uterinas submetidas a cultura microbiolgica.
Na anlise microbiolgica uterina de cadelas deste estudo, observou-se crescimento
em ambos os cornos uterinos em um nico animal (6,25%) com Staphylococcus spp. Nesse
mesmo animal houve o crescimento de Streptococcus spp. na amostra vaginal, o que
sugere que, neste caso, a contaminao no foi ascendente. O restante das cadelas (93,25)
no apresentaram crescimento microbiolgico uterino, esse resultado difere do estudo de
35

Watts; Wright e Whithear (1996) que concluiu com seu estudo que o tero de fmeas
hgidas tem uma microflora durante o proestro e estro semelhante microflora da vagina e
da crvix.
Por sua vez, Carneiro; Toniollo e Schocken-Iturrino (2005) conseguiram isolar no
tero de 21 cadelas sadias Staphylococcus (42,85%), Escherichia coli (23,80%),
Streptococcus (23,80%), Lactobacillus (19,04%), Streptococcus lacticus (14,28%),
Bacillus (9,52%), Sarcina (9,52%), Proteus (4,76%), leveduras (4,76%), Corynebacterium
(4,76%), diferentemente dos resultados obtidos nesse estudo.
A fase do ciclo estral das gatas com maior ndice de contaminao foi o anestro,
estando presente em 13 animais (81,25%), onde houve a colonizao de Escherichia coli e
Klebisiella spp. (Figura 13).




Relacionando o ndice de contaminao do trato genital de cadelas com a fase do
ciclo estral (Figura 14), observa-se que todas as fases exceto o estro que no foi observado
nas cadelas avaliadas, obtiveram colonizao vaginal, a fase de maior ndice de
contaminao foi o anestro, estando presente em 12 animais. Semelhante aos resultados
obtidos por Stein et al. (2009) que fizeram uma avaliao da microbiota vaginal de cadelas
e relacionando-a com o ciclo estral, onde 11 fmeas apresentaram maior ndice de
Figura 13 Relao das fases do ciclo estral em gatas com microrganismos
isolados das amostras vaginais.
0
2
4
6
8
10
12
14
Proestro Estro Diestro Anestro
Escherichia coli
Klebsiella spp
36

contaminao na fase de anestro (73,4%) sendo o microrganismo de maior incidncia foi o
Streptococcus spp.








0
1
2
3
4
5
6
Proestro Estro Diestro Anestro
Streptococcus spp.
Staphylococcus spp
Escherichia Coli
Klebisiella spp
Sem crescimento
Figura 14 Relao das fases do ciclo estral em cadelas com microrganismos
isolados amostras vaginais.
37

5 CONCLUSO

Com base nos dados obtidos e segundo as condies deste experimento conclui-se
que:
Houve colonizao em 10 amostras da vagina cranial de cadelas e 16 amostras da
vagina cranial de gatas e uma amostra de cornos uterinos direito e esquerdo de
cadela.
Os microrganismos isolados em cadelas foram Streptococcus spp., Staphylococcus
spp., Escherichia Coli e Klebisiella spp., diferentemente dos microrganismos
isolados em gatas que foram a Escherichia Coli e Klebisiella spp.
A fase de maior ndice de colonizao foi o anestro tanto em cadelas como em
gatas.

necessrio um estudo mais aprofundado no sentido de associar os resultados
forma de manejo e histrico reprodutivo, o que no foi possvel realizar no presente estudo,
uma vez que a maioria dos animais que participaram do experimento eram errantes, muitas
vezes sem proprietrio, impedindo uma avaliao mais apurada das condies de manejo e
histrico reprodutivo.

38

REFERNCIAS


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