EVALUACION DE LA HEMOSTASIA Y LA COAGULACION

DE LA SANGRE

TIEMPO DE COAGULACIN


METODO DE LEE WHITE

Reactivos y Aparatos:

Tubos de prueba de 8 mm dimetro, limpios y secos















Agujas y jeringas para uso endovenosos descartables, estriles.











Bao mara 37 C









Reloj cronmetro















Procedimiento:


Obtenemos 3 ml de sangre venosa y anotamos la hora exacta (Para
controlar el tiempo de inicio)

Inmediatamente transferimos 1.5 ml de sangre a cada uno de dos tubos
y los colocamos en Bao Mara a 37C. Luego de tres min. de reposo ir
sacando cada uno de los tubos e ir inclinndolos suavemente en 90
cada minuto, hasta que no se observe desplazamiento de sangre y
pueda ser completamente invertido el tubo sin caerse la sangre.









Anotar el tiempo.


Resultado:


Inicio para el tiempo de coagulacin en el tubo de prueba:



Tiempo de coagulacin en tubo de prueba:



Tiempo de coagulacin en la Jeringa:



Tiempo de coagulacin en lmina porta objetos:



Valores referenciales:

Con este mtodo de Lee White los valores normales para hombres y mujeres
vara entre: 5 a 8 min.

Los valores referenciales dependen del dimetro del tubo empleado:

Usando tubos de dimetro interno de 11 mm: 9 a 15 min.
Usando tubos de dimetro interno de 8 mm: 6 a 10 min.

Existen otros mtodos para determinar el tiempo de Coagulacin por ejemplo
el mtodo del portaobjetos: Valor normal de 2 a 8 minutos.
Mtodo del Tubo Capilar: Valor referencial de 3 a 7 min.



Anlisis:

El tiempo que tarda este proceso est en relacin con el sistema de
procoagulantes e inhibidores fisiolgicos o adquiridos, que influyen en la
formacin de dicho cogulo.
Este tiempo de coagulacin in vitro reflejar mejor la eficacia del sistema in
vivo, cuanto menos se modifique o manipule esta sangre (contacto con el
vidrio, burbujas de aire, detergentes, etc.).
El tiempo de coagulacin ha sido un mtodo til en el control de la terapia
anticoagulante con heparina, reemplazado actualmente por otras pruebas de
mayor sensibilidad y reproducibilidad.
Un tiempo de coagulacin normal no descarta la existencia de un trastorno de
la coagulacin, pero un tiempo prolongado es siempre ndice de un defecto
severo de la misma, que puede deberse a una deficiencia de cualquiera de los
factores que intervienen en la formacin del cogulo de fibrina, con excepcin
de una deficiencia pura de los factores VII y XIII.
Sin embargo, el mtodo es mucho ms sensible a los defectos de los factores
que intervienen en la activacin por contacto y en la formacin del activador
intrnseco de la protrombina.


Tiempo de Sangra

METODO DE DUKE

Reactivos y Aparatos:

Cronmetro















lancetas descartables














desinfectante de piel

















papel de filtro.






























Procedimiento:

Desinfectar el lbulo de una oreja y punzar con la lanceta descartable standard
de manera que la sangre fluya libremente, gota a gota, sin necesidad de
exprimir la piel.

Anotar el tiempo de aparicin de la primera gota y, luego con el papel de filtro
ir secando cada gota, cada 30 segundos sin tocar la piel, hasta que deje de
sangrar.
Anotar el tiempo transcurrido.


















Resultado:



Valores Referenciales:

1 a 3 MIN

Anlisis:

En este examen de sangre se analiza qu tan rpido se cierran los vasos
sanguneos pequeos en la piel para detener el sangrado. El tiempo de
sangrado constituye la mejor prueba para detectar alteraciones de la funcin
plaquetaria y es uno de los principales estudios en los trastornos de la
coagulacin. La duracin del sangrado de un capilar depende de la calidad y
cantidad de plaquetas y de la vasoconstriccin.


TIEMPO DE PROTROMBINA Y TIEMPO DE TROMBOPLASTINA PARCIAL

Materiales:

Soluplastin (Tromboplastina clcica) Casa Wiener Lab. (Rosario.
Argentina)














Tubos de ensayo de vidrio de 12 x 75 mm.














Cronmetro












Bao Mara 37C
















Asa de alambre Nquel Cromo Nuevas (Bacteriolgicas)

Micropipetas 100 y 200 lambdas.



















Tiempo de Protrombina
Pre incubar el plasma: en un tubo de ensayo,marcado (Px) colocar 1 ml del
plasma en BM 37 C, por 3 min. (El saldo del plasma refrigerarlo).(No pre
incubar ms de 10 min.)

Pre incubar el Soluplastin: en otros dos tubos de ensayo colocar 0.2 ml de
Soluplastin en cada uno y colocar en BM a 37C por 3 min. (No pre incubar
ms de 10 min.).

Pipetear 100 lambdas del plasma Pre incubado y aadir rpidamente al tubo
conteniendo los 0.2 ml de Soluplastin, disparando simultneamente el
cronmetro.
Previo al tiempo estimado de coagulacin sacar el tubo del bao e inclinar
suavemente por una o dos veces por segundo y detener el cronmetro en el
momento exacto de la aparicin del cogulo, que se manifestara por la
aparicin de muy discretos hilos de fibrina, en ese instante precisamente para
el cronmetro.

Repetir por triplicado esta prueba. Calcular el valor promedio en segundos.

Valores Referenciales:


11- 12 sgs. + - 2 segs del control Normal
El control Normal estar entre 10 a 13 segundos +- 0.5 2DS.
Con estos valores en segundos a travs de una curva de calibracin podemos
expresarlos en porcentaje de actividad protrombinica en relacin a los valores
normales: examinemos el siguiente cuadro que muestra los valores
porcentuales:



Resultado:
Tiempo promedio: 14 segundos = 55%

Anlisis:
El anlisis de TP se puede utilizar para evaluar la actividad de cinco factores de
coagulacin diferentes (I, II, V, VII y X). El tiempo de coagulacin se alarga si
alguno de estos factores no se encuentra, es deficiente o defectuoso. Si el
proceso de coagulacin de la sangre lleva mucho tiempo durante un anlisis de
TP, puede ser una seal de lo siguiente:

a) una deficiencia hereditaria de los factores de coagulacin (tales como
trastornos hemorrgicos, hemofilia y la enfermedad de von Willebrand)
b) una enfermedad heptica (ya que la mayora de los factores de
coagulacin se generan en el hgado)
c) una deficiencia de vitamina K (ya que la vitamina K es un componente
necesario de varios factores de coagulacin)
d) una terapia con warfarina, un medicamento anticoagulante
e) ciertas afecciones mdicas en las cuales el cuerpo utiliza o destruye los
factores de coagulacin demasiado rpido
f) El tiempo de protrombina sirve para analizar la va extrnseca.

DETERMINACIN DEL TIEMPO DE TROMBOPLASTINA PARCIAL
ACTIVADO.
Se procede extraer 4,5 cc de y se le aade 0,5 cc de anticoagulante ,
luego lo llevamos a centrifugar.












Observacin:









Anlisis:
Los valores por debajo de 20 segundos o por encima de 40 s (dependiendo de
los rangos locales de referencia) generalmente se consideran anormales. Un
tiempo de aPTT corto tiene poca relevancia clnica. Un tiempo prolongado de
aPTT puede indicar:

a) Uso de heparina (o contaminacin de la muestra)
b) Presencia de un anticuerpo antifosfolpidos (sobre todo en el lupus
anticoagulante, una afeccin que paradjicamente aumenta la
propensin a la trombosis)
c) Una deficiencia en un factor de coagulacin, especfica (por ejemplo, el
factor VIII en la hemofilia de tipo A) o general (por ejemplo, debido a la
carencia de vitamina K).
d) El tiempo de tromboplastina sirve para analizar la va intrnseca.

Grupos Sanguneos y Factor RH

Materiales
Materiales y Reactivos
Suero monoclonal Anti A








Suero monoclonal Anti B












Suero monoclonal Anti AB
Lmina excavada o lmina portaobjetos











Lancetas descartables














Muestra de sangre
Algodn y desinfectante








Se extrae sangre del alumno y se coloca una gota de sangre en la Lmina
excavada o lmina portaobjetos, luego vemos la reaccin a los sueros que le
aadimos












Resultado:
Grupo Sanguneo A, factor RH positivo.
Anlisis:
La aglutinacin se produce por la actuacin de los anticuerpos (Acs) del suero
o aglutininas sobre los antgenos (Ags) de los glbulos rojos o aglutingenos.
De acuerdo a la existencia de los diversos aglutingenos y aglutininas los
individuos pueden clasificarse dentro de 4 grupos sanguneos bsicos.
En el caso del grupo Sanguneo A, posee Aglutingeno A y aglutinina beta. Que
al entrar en contacto con el suero monoclonal A (suero anti A) produce la
aglutinacin.
Rh Positivo, lo que significa la presencia del Aglutingeno D en sus eritrocitos.