"Ao de la Promocin de la Industria Responsable y del compromiso Climtico"

UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS

FACULTAD DE QUIMICA E INGENIERIA QUIMICA
ESCUELA ACADEMICO PROFESIONAL DE QUIMICA
DEPARTAMENTO DE QUMICA ANALTICA
LABORATORIO DE ANALISIS POR INSTRUMENTACIN II









Trabajo : Espectrofotometra Ultravioleta (UV)
Apellidos y nombres : Coasaca Camacho, Mara Ftima
Cdigo : 08070136
Profesora : Dra Gloria Cosco Salguero
Horario : Sbado de 8 am 2 pm
Semestre : 2014-I


Ciudad Universitaria - 2014

RESUMEN

En este presente informe se utiliza un espectrofotmetro UV/visible para determinar la
variacin de la longitud de onda mxima del espectro modificando su pH, obtenindose para
el fenol-HCl una longitud de onda de 265.0nm y para el fenol-OH una longitud de onda de
279m. Tambin se observ la modificacin de espectro en funcin del solvente obtenindose
para la acetona-agua una longitud de onda de 265nm, para la acetona-hexano una longitud de
onda de 279nm y para la acetona-etanol una longitud de onda de 271nm.
En la presente practica tambin se demostr que la espectrometra tambin es una buena
herramienta para procesos cualitativos y cuantitativos, determinndose el porcentaje de
cafena en el t el cual fue 83.23% en promedio.


















INTRODUCCIN

Desde hace muchos aos se ha usado el color como ayuda para reconocer las
sustancias qumicas; al reemplazar el ojo humano por otros detectores de radiacin
se puede estudiar la absorcin de sustancias, no solamente en la zona del espectro
visible, sino tambin en ultravioleta e infrarrojo. Se denomina espectrofotometra a la
medicin de la cantidad de energa radiante que absorbe un sistema qumico en
funcin de la longitud de onda de la radiacin, y a las mediciones a una determinada
longitud de onda. La teora ondulatoria de la luz propone la idea de que un haz de luz
es un flujo de cuantos de energa llamados fotones; la luz de una cierta longitud de
onda est asociada con los fotones, cada uno de los cuales posee una cantidad definida
de energa.

















FUNDAMENTOS TEORICOS

La Espectrofotometra es una de las tcnicas experimentales ms utilizadas para la
deteccin especfica de molculas. Se caracteriza por su precisin, sensibilidad y su
aplicabilidad a molculas de distinta naturaleza (contaminantes, biomolculas, etc) y
estado de agregacin (slido, lquido, gas). Los fundamentos fsico-qumicos de la
espectrofotometra son relativamente sencillos.
Las molculas pueden absorber energa luminosa y almacenarla en forma de energa
interna. Esto permite que se inicien ciclos vitales de muchos organismos, entre ellos el
de la fotosntesis en plantas y bacterias. La Mecnica Cuntica nos dice que la luz est
compuesta de fotones cada uno de los cules tiene una energa:

Efotn = hn = hc/l

Dnde: c es la velocidad de la luz
n es su frecuencia
l su longitud de onda
h= 6.6 10-34 Js, es la constante de Planck.

Cuando decimos que una sustancia qumica absorbe luz de longitud de onda l, esto
significa que las molculas de esa sustancia absorben fotones de esa longitud de onda.
Cuando una molcula absorbe un fotn en el intervalo espectral ultravioleta, se excita
pasando un electrn de un orbital del estado fundamental aun orbital excitado de
energa superior. De esta manera la molcula almacena la energa del fotn:

A + h A*
E(A*) = E(A) + Efotn

Como la energa se conserva, la diferencia de energa entre el estado fundamental de
la molcula (A) y su estado excitado (A*) debe ser exactamente igual a la energa del
fotn. Es decir, una molcula slo puede absorber fotones cuya energa hn sea igual a
la energa de un estado molecular excitado. Cada molcula tiene una serie de estados
excitados discretos (o bandas) que dependen de su estructura electrnica y que la
distinguen del resto de molculas. Como consecuencia, el espectro de absorcin, es
decir, la luz absorbida en funcin de la longitud de onda, constituye una verdadera
sea de identidad de cada sustancia o molcula.


TIPOS DE ESPECTROFOMETRA
ESPECTROMETRA DE ABSORCIN

La espectrometra de absorcin es una tcnica en la cual la energa de un haz
de luz se mide antes y despus de la interaccin con una muestra. Cuando se
realiza con lser de diodo ajustable, se la conoce como espectroscopia de
absorcin con lser de diodo ajustable. Tambin se combina a menudo con una
tcnica de modulacin, como la espectrometra de modulacin de longitud de
onda, y de vez en cuando con la espectrometra de modulacin de frecuencia a
fin de reducir el ruido en el sistema.

ESPECTROMETRA DE FLUORESCENCIA

La espectrometra de fluorescencia usa fotones de energa ms elevada para
excitar una muestra, que emitir entonces fotones de inferior energa. Esta
tcnica se ha hecho popular en aplicaciones bioqumicas y mdicas, y puede ser
usada con microscopa confocal, transferencia de energa entre partculas
fluorescentes, y visualizacin de la vida media de fluorescencia.

ESPECTROMETRA DE RAYOS X

Cuando los rayos X con suficiente frecuencia (energa) interaccionan con una
sustancia, los electrones de las capas interiores del tomo se excitan a orbitales
vacos externos, o bien son eliminados completamente, ionizndose el tomo.
El "agujero" de la capa interior se llena entonces con electrones de los orbitales
externos. La energa disponible en este proceso de excitacin se emite como
radiacin (fluorescencia) o quitar otros electrones menos enlazados del
tomo (efecto Auger). La absorcin o frecuencias de emisin (energas) son
caractersticas de cada tomo especfico. Adems, para un tomo especfico se
producen pequeas variaciones de frecuencia (energa) que son caractersticas
del enlace qumico. Con un aparato apropiado pueden medirse estas
frecuencias de rayos X caractersticas o energas de electrones Auger. La
absorcin de rayos X y la espectroscopia de emisin se usan en qumica y
ciencias de los materiales para determinar la composicin elemental y el enlace
qumico.

La cristalografa de rayos X es un proceso de dispersin. Los materiales
cristalinos dispersan rayos X en ngulos bien definidos. Si la longitud de onda
de los rayos X incidentes es conocida, se pueden calcular las distancias entre
planos de tomos dentro del cristal. Las intensidades de los rayos X
dispersados dan informacin sobre las posiciones atmicas y permiten calcular
la organizacin de los tomos dentro de la estructura cristalina.

ESPECTROMETRA DE LLAMA

Las muestras de solucin lquidas son aspiradas en un quemador o una
combinacin de nebulizador/quemador, desolvatadas, atomizadas, y a veces
excitadas a un estado electrnico de energa ms alta. El uso de una llama
durante el anlisis requiere combustible y oxidante, tpicamente en forma de
gases. Los gases combustibles comunes que se usan son el acetileno (etino) o el
hidrgeno. Los gases de oxidante suelen ser el oxgeno, el aire, o el xido
nitroso. Estos mtodos son a menudo capaces de analizar elementos metlicos
en partes por milln, billones, o posiblemente rangos ms bajos de
concentracin. Son necesarios detectores de luz para detectar la luz con
informacin que viene de la llama.

- Espectrometra de emisin atmica. Este mtodo usa la excitacin de la
llama; los tomos son excitados por el calor de la llama para emitir luz. Este
mtodo suele usar un quemador de consumo total con una salida de
incineracin redonda. Se utiliza una llama de temperatura ms alta que la
usada en la espectrometra de absorcin atmica para producir la excitacin de
tomos de analito. Ya que los tomos de analito estn excitados por el calor de
la llama, no es necesaria ninguna lmpara elemental especial. Puede usarse un
policromador de alta resolucin para producir una intensidad de emisin
contra el espectro de longitud de onda por encima de un rango de longitudes
de onda que muestran lneas de excitacin de elementos mltiples. O bien
puede usarse un monocromador en una longitud de onda determinada para
concentrarse en el anlisis de un solo elemento en una cierta lnea de emisin.
La espectrometra de emisin de plasma es una versin ms moderna de este
mtodo.

- Espectrometra de absorcin atmica (a menudo llamada AA). Este mtodo
usa un nebulizador pre-quemador (o cmara de nebulizacin) para crear una
niebla de la muestra, y un quemador en forma de ranura que da una llama de
longitud de ruta ms larga. La temperatura de la llama es lo bastante baja como
para no excitar los tomos de la muestra de su estado basal. El nebulizador y la
llama se usan para desolvatar y atomizar la muestra, pero la excitacin de los
tomos de analito se realiza mediante lmparas que brillan a travs de la llama
en varias longitudes de onda para cada tipo de analito. En la absorcin atmica,
la cantidad de luz absorbida despus de pasar por la llama determina la
cantidad de analito en la muestra. Suele usarse un horno de grafito para
calentar, desolvatar y atomizar la muestra con el fin de obtener una mayor
sensibilidad. El mtodo del horno de grafito tambin puede analizar algn
slido o muestras mezcladas. A causa de su buena sensibilidad y selectividad,
es un mtodo que todava se usa para el anlisis de ciertos microelementos en
muestras acuosas (y otros lquidos).

- Espectrometra de fluorescencia atmica. Este mtodo usa un quemador con
una salida de incineracin redonda. La llama se usa para solvatar y atomizar la
muestra, y una lmpara emite luz a una longitud de onda especfica en la llama
para excitar los tomos de analito. Los tomos de ciertos elementos pueden
entonces fluorescer, emitiendo luz en diferentes direcciones. La intensidad de
esta luz fluorescente sirve para cuantificar la cantidad del elemento analizado
en la muestra. Tambin puede usarse un horno de grafito para la
espectrometra de fluorescencia atmica. Este mtodo no es tan comn como el
de absorcin atmica o el de emisin de plasma.

ESPECTROMETRA DE EMISIN DE PLASMA
Es similar a la emisin atmica por llama, y la ha sustituido en gran parte.

- Espectrometra de plasma de corriente contnua (DCP). Un plasma de
corriente contnua se crea por una descarga elctrica entre dos electrodos. Es
necesario un gas de apoyo al plasma, y el ms comn es el argn. Las muestras
pueden ser depositadas en uno de los electrodos.

- Espectrometra de emisin ptica por descarga luminiscente (GD-OES)

- Espectrometra de emisin plasma-atmica acoplada inductivamente (ICP-
AES)

- Espectrometra de ruptura inducida por lser (LIBS), tambin llamada
espectrometra de plasma inducida por lser (LABIOS)

- Espectrometra de plasma inducida por microondas(MIP)




ESPECTROMETRA VISIBLE

Muchos tomos emiten o absorben la luz visible. A fin de obtener un espectro
lineal fino, los tomos deben estar en fase gaseosa. Esto significa que la
sustancia tiene que ser vaporizada. El espectro se estudia en absorcin o
emisin. La espectroscopia de absorcin visible a menudo se combina con la de
absorcin ultravioleta (espectroscopia UV/Vis). Aunque esta forma pueda ser
poco comn al ser el ojo humano un indicador similar, todava se muestra til
para distinguir colores.

ESPECTROMETRA ULTRAVIOLETA

Todos los tomos absorben en la regin ultravioleta (UV) ya que estos fotones
son bastante energticos para excitar a los electrones externos. Si la frecuencia
es lo bastante alta, se produce la fotoionizacin. La espectrometra UV tambin
se usa para la cuantificacin de protenas y concentracin de ADN, as como
para la proporcin de protenas y ADN en una solucin. En las protenas se
encuentran generalmente varios aminocidos, como el triptfano, que
absorben la luz en el rango de 280nm. El ADN absorbe la luz en el rango de
260nm. Por esta razn, la proporcin de absorbancia 260/280nm es un buen
indicador general de la pureza relativa de una solucin en trminos de estas
dos macromolculas. Tambin pueden hacerse estimaciones razonables de la
concentracin de ADN o protenas aplicando la ley de Beer.

ESPECTROMETRA INFRARROJA

La espectrometra infrarroja ofrece la posibilidad de medir tipos diferentes de
vibraciones en los enlaces atmicos a frecuencias diferentes. En qumica
orgnica, el anlisis de los espectros de absorcin infrarroja indica qu tipo de
enlaces estn presentes en la muestra.

ESPECTROMETRA RAMAN

La espectrometra Raman usa la dispersin inelstica de la luz para analizar
modos vibracionales y rotatorios de las molculas. Las "huellas digitales" que
resultan son una ayuda para el anlisis.




ESPECTROMETRA DE RESONANCIA MAGNTICA NUCLEAR (RMN)

La espectrometra de resonancia magntica nuclear analiza las propiedades
magnticas de ciertos ncleos atmicos para determinar diferentes ambientes
locales electrnicos del hidrgeno, carbono, u otros tomos en un compuesto
orgnico u otro compuesto. Se usa para determinar la estructura del
compuesto.

ESPECTROFOMETRO
Un espectrofotmetro es un instrumento que tiene la capacidad de manejar un haz de
Radiacin Electromagntica (REM), comnmente denominado Luz, separndolo en
facilitar la identificacin, calificacin y cuantificacin de su energa. Su eficiencia,
resolucin, sensibilidad y rango espectral, dependern de las variables de diseo y de
la seleccin de los componentes pticos que lo conforman.
Cuando la luz atraviesa una sustancia, parte de la energa es absorbida. El color de las
sustancias se debe a que estas absorben ciertas longitudes de onda de la luz blanca
que incide sobre ellas, y slo vemos aquellas longitudes de onda que no fueron
absorbidas.
El espectrofotmetro mide la absorbancia de una muestra en los espectros de luz
ultravioleta y visible (200 a 850 nm). El largo de onda es determinado por un prisma
que descompone el rayo de luz de acuerdo al largo de onda escogido. Luego la luz pasa
por una hendidura que determina la intensidad del haz. Este haz atraviesa la muestra
y llega a un tubo fotogrfico, donde es medido. La cantidad de luz que atraviesa la
muestra es el porcentaje (%) de transmitancia. Podemos usar esta unidad o cambiarla
a absorbancia usando la siguiente ecuacin.
%T = - Log Abs.
El espectrofotmetro nos puede dar ambos valores a la misma vez, ahorrando la
necesidad de hacer los clculos. (Transmitancia= cantidad de luz que atraviesa la
mezcla).
Una caracterstica del instrumento es la necesidad de blanquear el aparato antes de
cada lectura. Esto se hace colocando una cubeta con una solucin control que tenga
todos los componentes de la reaccin menos la sustancia que va a ser medida en el
instrumento y ajustando la lectura a cero absorbancia.
El propsito de esto es eliminar el registro de absorbancia (background) que puedan
presentar los dems componentes de la reaccin a ese largo de onda particular. Todas
las molculas presentan absorbancia porque todas interfieren con el paso de la luz.
Slo que la absorbancia ser ptima a un largo de onda de luz especfico para cada
tipo de sustancia.
Componentes de un espectrofotmetro
La medicin de absorbancia de la luz por las molculas se realiza en unos aparatos
llamados espectrofotmetros. Aunque pueden variar en diseo, en especial con la
incorporacin de ordenadores para el anlisis de datos, todos los espectrofotmetros
constan, segn se indica en la figura, de:
1. Una fuente de energa radiante: lmpara de deuterio y tungsteno.
2. Un monocromador para la seleccin de radiaciones de una determinada
longitud de onda: filtros, prismas, redes de difraccin.
3. Un compartimento donde se aloja un recipiente transparente (cubetas o
tubos) que contenga la muestra Pueden ser de vidrio, cuarzo o plstico
transparente. Para medir en UV se deben usar las de cuarzo o slice fundido,
porque el vidrio no transmite la radiacin UV.
4. Un detector de luz y un amplificador convertidor de las seales luminosas
en seales elctricas.
5. Un registrador o sistema de lectura de datos.









Utilidad.
Los espectrofotmetros son tiles debido a la relacin de la intensidad del color en
una muestra y su relacin a la cantidad de solute dentro de la muestra. Por ejemplo, si
usted utiliza una solucin del colorante rojo del alimento en agua, y mida la cantidad
de luz azul absorbida cuando pasa a travs de la solucin, una fluctuacin mensurable
del voltaje puede ser inducido en una fotoclula en el lado opuesto.
Si ahora la solucin del tinte rojo es diluida por la adicin del agua el color ser menos
intenso. As, hay una relacin entre el voltaje y la cantidad de tinte en la muestra.
El espectrofotmetro tiene la capacidad de proyectar un haz de luz monocromtica
(de una longitud de onda particular) a travs de una muestra y medir la cantidad de
luz que es absorbida por dicha muestra. Esto le permite al experimentador realizar
dos funciones:
Nos da informacin sobre la naturaleza de la sustancia en la muestra. Esto podemos
lograrlo midiendo la absorbancia (Abs) a distintos largos de onda (l) y graficar estos
valores en funcin del largo de onda, formando un espectrograma. Como cada
sustancia tiene unas propiedades espectrales nicas, distintas sustancias producen
distintos espectrogramas. Esto se debe a que cada sustancia tiene un arreglo de
tomos tridimensional particular que hace que cada sustancia tenga caractersticas
nicas.

Principio fsico
El principio de la espectroscopia ultravioleta-visible involucra la absorcin de
radiacin ultravioleta visible por una molcula, causando la promocin de un
electrn de un estado basal a un estado excitado, liberndose el exceso de energa en
forma de calor. La longitud de onda () comprende entre 190 y 800 nm.
La luz visible o UV es absorbida por los electrones de valencia, stos son promovidos a
estados excitados (de energa mayor). Al absorber radiacin electromagntica de una
frecuencia correcta, ocurre una transicin desde uno de estos orbitales a un orbital
vaco. Las diferencias entre energas varan entre los diversos orbitales. Algunos
enlaces, como los dobles, provocan coloracin en las molculas ya que absorben
energa en el visible as como en el UV, como es el caso del -caroteno.
Cuando un haz de radiacin UV-Vis atraviesa una disolucin conteniendo un analito
absorbente, la intensidad incidente del haz (Io) es atenuada hasta I. Esta fraccin de
radiacin que no ha logrado traspasar la muestra es denominada transmitancia (T) (T
= I/Io). Por aspectos prcticos, se utizar la absorbancia (A) en lugar de la
transmitancia (A = -logT), por estar relacionada linealmente con la concentracin de la
especie absorbente segn la Ley de Beer-Lambert: A = lc (: coeficiente de
absortividad molar, l: camino ptico, c: concentracin de la especie absorbente).
Modos de excitacin electrnica
Cuando un fotn UV-Visible de energa adecuada incide en una especie absorbente, un
electrn es promovido desde su estado fundamental a un estado electrnico excitado.
En absorcin UV-Visible, pueden observarse las distintas transiciones electrnicas:
Transiciones *
<150 nm . Este tipo de transiciones se dan sobre todo en hidrocarburos que
nicamente poseen enlaces C-H o C-C. La energa requerida para que tenga lugar
esta transicin es relativamente grande, perteneciente a la regin espectral
denominada ultravioleta de vaco.
Transiciones n *
entre 150-200 nm . Correspondientes a hidrocarburos que poseen tomos con pares
de electrones no compartidos (electrones de no enlace). La energa necesaria para que
se produzca esta transicin sigue siendo alta (aunque menor que en las * )
perteneciendo stas a la regin espectral UV Lejano.
Transiciones n * y *
entre 200-700 nm. La mayora de las aplicaciones de espectroscopia UV-Visible
estn basadas en transiciones que ocurren en esta zona. Se requiere que las especies
participantes aporten un sistema de electrones (grupos cromforos: compuestos
con insaturaciones, sistemas aromticos multicclicos, etc.). Las energas de excitacin
en las transiciones * son medianamente altas, correspondiendo a la regin UV
Lejano y Prximo, mientras que las n * son considerablemente menores,
correspondiendo a la regin visible del espectro.
En espectroscopia UV-Vis se irradia con luz de energa conocida suficiente como para
provocar transiciones electrnicas, es decir promover un electrn desde un orbital de
baja energa a uno vacante de alta energa.



Transiciones electrnicas posibles entre orbitales n: orbital que contiene par de
electrones no compartidos (ejemplo en : O, N, Cl)
Las transiciones ms favorecidas son entre el orbital ocupado de energia ms alta
(HOMO) y el orbital desocupado de energia ms baja (LUMO)
el espectrometro UV-Vis registra las longitudes de onda donde se registra absorcin y
cuantifica la absorcin.
El espectro se registra como absorbancia (A) Vs. longitud de onda (), las bandas del
espectro UV son anchas por que incluyen la estructura fina de transiciones
vibracionales y rotacionales de menor energa.


















PARTE EXPERIMENTAL

Para la presente practica de utiliz el espectrofotmetro UV-VIS 1700 marca
Shimadzu

EXPERIENCIA A: INFLUENCIA DEL MEDIO EN EL ESPECTRO UV DE LA MOLECULA
DE FENOL EN HCl 2.0M y NaOH 2.0M
Reactivos:
- Fenol
- Solucin de cido clorhdrico 2.0M
- Solucin de hidrxido de sodio 2.0M
Se pes 5mg de fenol y se disolvi en agua destilada, se llev a una fiola de 50mL y se
enraz, esta solucin es de 100 ug/mL. De esta solucin de repar 2 soluciones de 10
ug/mL en fiolas de 50mL, una de ellas enrazando con HCl y la otra con NaOH. Ambas
soluciones se llevaron al instrumento, se realiz un scaning entre 200nm y 340nm, se
registraron los espectros y mximos de absorbancia.


EXPERIENCIA B: INFLUENCIA DEL EFECTO DEL SOLVENTE UV DE LA ACETONA
Reactivos:
- Acetona
- Hexano
- Etanol
- Agua
Se prepar 3 sustancias en fiolas de 10mL, a la primera fiola se agreg una gota de
acetona, se disolvi en solvente agua y se enraz. A la segunda fiola de agreg una gota
de acetona, se diluy en solvente hexano y se enraz. Ala tercera fiola se agreg una
gota de acetona, se diluy en solvente acetona y se enraz. Todas las soluciones se
llevaron al instrumento y se realiz un scaning entre 200nm y 380nm, se registraron
los espectros y mximos de absorbancias.


EXPERIENCIA C: ANALISIS CUANTITATIVO, CUANTIFICACIN DE CAFEINA
EXTRAIDA DEL T USANDO CURVA DE CALBRACIN EXTERNA
Reactivos y Materiales:
- Solucin de Acetato de plomo al 10%
- Cloroformo
- Papel de Filtro
- Pera de separacin
- Equipo para destilacin del cloroformo
- Embudo
Se pes 5.0027g de t y se le adicion 100mL de agua destilada y se dej hervir por 10
min aprx, se filtr y se le agreg 20mL de la solucin de Acetato de plomo al 10% y se
dej hervir por 5 min aprx. Luego se volvi a filtrar y se lav con agua destilada y se
dej concentrar el lquido hasta un volumen pequeo. Se extrajo 3 vece con 5mL de
cloroformo, recibiendo en un tubo que pesa 29.8031g, Luego se llev a destilacin y el
tubo con as muestra se volvi a pesar, el peso fue de 29.8691, por diferencia se obtuvo
un peso de muestra de 0.0660g.
Preparacin de patrones
Se pes 5mg de patrn cafena, se disolvi con agua destilada y se enraz en fiola de
50mL, esta solucin fue de 100ug/mL, la cual se diluy a 50ug/mL y se le realiz un
scaning entre 200nm y 380nm, para hallar la longitud de onda mxima. Una vez que
se obtuvo esta longitud de onda mxima se prepar soluciones de 0.5ug/mL,
1.0ug/mL, 2.0ug/mL, 4ug/mL y 6 ug/mL respectivamente en fiolas de 50mL.
Preparacin de la muestra problema
Del residuo seco extrado del t, se pes 5mg y se disolvi con agua destilada en una
fiola de 50mL, esta solucin fue de 100ug/mL, de esta solucin se prepar una
solucin de 10ug/mL en una fiola de 50mL. De esta ltima solucin de tomaron 2
alcuotas de 15mL cada una y se enraz a 50mL con agua destilada.
Los patrones y las muestras preparadas se leyeron en el espectrofotmetro, y se
cuantific la concentracin de la cafena extrada del t.




CLCULOS Y RESULTADOS

EXPERIENCIA A: INFLUENCIA DEL MEDIO EN EL ESPECTRO UV DE LA MOLECULA
DE FENOL EN HCl 2.0M y NaOH 2.0M
mx = 211.0 nm Amx = 0.789










mx = 235.0 nm Amx = 1.500







EXPERIENCIA B: INFLUENCIA DEL EFECTO DEL SOLVENTE UV DE LA ACETONA

mx =265.0 nm Amx = 1.240











mx = 279.0 nm Amx = 0.352









mx = 271.0 nm Amx = 0.461










EXPERIENCIA C: ANALISIS CUANTITATIVO, CUANTIFICACIN DE CAFEINA
EXTRAIDA DEL T USANDO CURVA DE CALBRACIN EXTERNA

mx = 271.0 nm Amx = 0.461









- Para los estndares















- Para las muestras








- Curva Patrn

















Se analizaron dos muestras:

Concentracin Absorbancias
M1 2.717 0.122
M2
2.823 0.127

cc A
0,5 0,018
1 0,039
2 0,089
4 0,182
6 0,281
Para conocer la concentracin: Se utiliza la ecuacin de a Recta de Curva de Patrones.
Reemplazando y = A . En cda caso
- CC1 = 2.7015 ug/mL
- CC2 = 2.4969 ug/mL

Muestra 1:
2.5470ppm

= 90.05ppm
90.05ppm0.05L = 4.5025mg
% cafena en M1:

*100% = 90.05%

Muestra 2:
2.4969ppm

= 83.23ppm
83.23ppm0.05L = 4.1615mg
% cafena en M2:

*100% = 83.23%

Luego el promedio es:

= 86.66 %






DISCUSIN DE RESULTADOS

EXPERIENCIA A: INFLUENCIA DEL MEDIO EN EL ESPECTRO UV DE LA MOLECULA
DE FENOL EN HCl 2.0M y NaOH 2.0M
La polaridad y el pH del disolvente pueden afectar la absorcin del espectro de un
compuesto orgnico. Es por eso que el Fenol aumenta su Absorcin a medida que pasa
de una solucin acida a una bsica. Producindose un efecto Batocrmico

EXPERIENCIA B: INFLUENCIA DEL EFECTO DEL SOLVENTE UV DE LA ACETONA
Aqu se observa el efecto batacrmico que ejercen el agua, hexano y el etano sobre la
acetona. La energa requerida para realizar las transiciones de onda es inversamente
proporcional a la longitud de onda. Por eso para que el enlace sea estable de la
acetona-agua se requiere una energa considerablemente grande y por ende su
longitud de onda es pequea, de esta manera para la acetona-hexano se requiere de
menos energa por eso su longitud de onda es mayor.

EXPERIENCIA C: ANALISIS CUANTITATIVO, CUANTIFICACIN DE CAFEINA
EXTRAIDA DEL T USANDO CURVA DE CALBRACIN EXTERNA

Se obtuvo la longitud de onda mxima de la cafena y esta fue de 271.0 nm y fue en
esta donde se realizaron las medidas respectivas para trazar la curva patrn y as se
pudo leer las muestras.






CONCLUSIONES

Existe un cambio en el espectro del fenol cuando se le varia el pH, estos nos
indica que se deben encontrar las mejores condiciones de trabajo para poder
obtener mejores resultados.

Una molcula puede sufrir un efecto batocrmico si es que se le modifica el
medio en el que se encuentra. Todo depende de la energa requeria para tener
un enlace estable.


El anlisis por espectrometra puede ser bien utilizado para determinaciones
cuantitativas, evitndonos operaciones engorrosas y disminuyendo el tiempo
de anlisis.














BIBLIOGRAFIA

http://www.uhv.es/sites/pecas/doc/poster_ultravioleta.pdf

http://karin.fq.uh.cu/~cnv1/qf/docencia/pregrado/estruc_2/curso_08_09/2_
UV.pdf

http://www.upo.es/depa/webdex/quimfis/docencia/quimbiotec/FQpractica4
.pdf

http://www.ugr.es/~quiored/espec/uv.htm

http://www.espectrometria.com/tipos_de_espectrometra

http://www.metrologiaindust.com.ar/Servicios/Capacitacion/Curso2/Materia
l/Diapositivas/5-Espectrofotometria.pdf