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Facultad de ingeniera qumica

PRACTICA N
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COLIFORMES,ECHERICHIA COLI Y SALMONELLA
I. OBJETIVOS
- Establecer la importancia que tiene la presencia de microorganismos
del gnero Salmonella, Eschericha coli y Coliformes en los alimentos.
- Manear la metodologa necesaria para su detecci!n e identi"caci!n
en alimentos.
II. FUNDAMENTO TEORICO
#a preparaci!n adecuada de un medio de culti$o nos permite disponer de
los nutrientes y condiciones necesarias para fa$orecer el crecimiento de los
microorganismos en el laboratorio.
Salmonella
Son bacilos gran negati$os,areo %anaerobios facultati$os pertenecientes a
la familia Enterabacteraceae, su tama&o oscila de a,'-( )m, normalmente
son m!$iles aun que e*isten alguinas e*cepciones. #as salmonellas se
multiplican bien en medios ordinarios.
#as colonias son al cabo de (+-,- horas de , a ' mm de di.metro, la
temperatura optima de crecimiento se encuentra entre '/-'01C2 presentan
una cierta sensibilidad al calor.
Salmonella es un gnero de bacterias que pertenece a la familia
Enterobacteriaceae, formado por bacilos gramnegati$os, anaerobios
facultati$os, con 3agelos pertricos y que no desarrollan c.psula ,ni esporas.
Son bacterias m!$iles que producen .cido sulfhdrico 45
,
S6. Emplean
glucosa por poseer una en7ima especiali7ada, pero no lactosa, y no
producen ureasa. 8o tienen metabolismo fermentati$os.
Es un agente productor de 7oonosis de distribuci!n uni$ersal. Se transmite
por contacto directo o contaminaci!n cru7ada durante la manipulaci!n, en
el procesado de alimentos o en el hogar, tambin por $a se*ual.
9lgunas salmonellas son comunes en la piel de tortugas y de muchos
reptiles, lo cual puede ser importante cuando se manipulan a la $e7 este
tipo de mascotas y alimentos.
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E!e"#!#a ol#
E. coli redirige aqu. ara el !ro"o#oario co$ la %i&%a a're(ia"ura) (*a&e
E$"a%oe'a coli
.
#a Escherichia coli 4pronunciado :es;e<ri;ia <;oli:6, tambin conocida por la
abre$iaci!n de su nombre, E. coli, es qui7.s el organismo procariota m.s
estudiado por el ser humano. Se trata de una enterobacteria que se
encuentra generalmente en los intestinos animales, y por ende en las aguas
negras, pero se lo puede encontrar en todos lados, dado que es un
organismo ubicuo. Fue descrita por primera $e7 en (++/ por =heodore $on
Escherich, bacteri!logo alem.n, quien la denomin! Bac"eriu% coli.
>osteriormente la ta*onoma le adudic! el nombre de E&c+eric+ia coli, en
honor a su descubridor.
Esta y otras bacterias son necesarias para el funcionamiento correcto del
proceso digesti$o, adem.s de producir las $itaminas ? y @. Es un bacilo que
reacciona negati$amente a la tinci!n de Aram 4gramnegati$o6, es anaerobio
facultati$o, m!$il por 3agelos peritricos 4que rodean su cuerpo6, no forma
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esporas, es capa7 de fermentar la glucosa y la lactosa y su prueba de BMCBC es
DD--.
Es una bacteria utili7ada frecuentemente en e*perimentos de gentica y
biologa molecular
Col#$o"me%
#a denominaci!n genrica ol#$o"me% designa a un grupo de especies
bacterianas que tienen ciertas caractersticas bioqumicas en comEn e
importancia rele$ante como indicadores de contaminaci!n del agua y los
alimentos.
Coli,or%e signi"ca co$ ,or%a de coli, re"rindose a la bacteria principal del
grupo, la Escherichia coli, descubierta por el bacteri!logo alem.n =heodor $on
Escherich en (+FG. Con Escherich la bauti7! como 'ac"eriu% coli 4Hbacteria del
intestinoH, del griego IJKJL, -olo$, HintestinoH6. Con posterioridad, la
microbiologa sistem.tica nombrara el gnero E&c+eric+ia en honor a su
descubridor.
III. E&UIPOS, MATERIALES Y REACTIVOS
E'(#)o%*
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- Contador de colonias
- ?alan7a analtica
- Estufa
Ma+e"#ale%*
- >ipetas de / ml
- >laca petri
- =ubo de ensayo
- >robeta
Rea+#,o% e #n%(mo%*
- 9A9M N#O
- 9gar mac con;ey
- #ea
M(e%+"a*
- Pueso sui7o
IV. PROCEDIMIENTO E-PERIMENTAL
ANE-O 0.
Can+#/a/ /e m(e%+"a nee%a"#a 0 on/##one% /e on%e",a#1n 0
+#em)o /e +"an%)o"+e
TIPO DE ENSAYO* MBCMQ?BQ#QABCQ.
TIPO DE MUESTRA* EM?R=BOQS
TIPO DE ENVASE* ?Q#S9 OE >#9S=BCQ >MBMEM RSQ.
CANTIDAD DE MUESTRA* ,GGg.
CONSERVACION* 4G
G
C a -
G
C6.
TIEMPO MA-IMO DE TRANSPORTES OE8=MQS OE #9S ,- 5QM9S.
ANE-O 02
Fo"ma+o /e e+#'(e+a
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IDENTIFICACION *PRESQ =. SRBTQ OE
>#9S=BCQ
LU3AR DE MUESTREO* Metro %
9#FQ8SQ RA9M=E
FECHA * 245065.2
HORA*.0*00am
TEMPERATURA* -
G
C.
LOTE* 777
MUESTREADO POR* Elena Maman#
T#)(la
PREPARACION DE LA MUESTRA
Fecha de inicio de la siembraS lunes ,- de setiembre, (G.-Gam =U'0
G
C
>rimero se preparo la soluci!n salina al G.+V de sal de mesa.
(. #uego se separa (G g de muestra en una bolsa de primer uso de
cierre hermtico 4TB>#QC6.
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,. Seguidamente se agrego WGml de la soluci!n salina, para luego
obtener diluciones de las muestras hasta (G
-'
.
'. Bnmediatamente se calienta por separado los siguientes agares S El
9gar N#O para Salmonella, el 9gar Mac- Con;ey tanto para Esterichia
Coli como para Coliformes .
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-. #uego usamos (/ml de cada 9gar, los cuales chanos a sus
respecti$as placas petri, esperamos a que se enfri y por ultimo
colocamos (ml de muestra de concentraci!n (G
-'
en cada unos de
ellos, hacindolo de tal manera que toda esta se espar7a.
FQ=QS OE C9O9 MRES=M9 CQ8 #QS 9A9MES
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/. >or Eltimo Bncubar a '01C durante , das y reali7ar lectura.
FQ=QS OE #QS 9A9MES 59CBE8OQ E# CQ8=EQ Q #9 BM9AE8 OE#
MESR#=9OQ
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E!e"#!a ol#
ol#$o"me%
Salmonella
V. RESULTADOS Y ANALISIS DE ACUERDO A LA NORMA
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I.8 &(e%o% no ma/("o% 9'(e%o
$"e%o,man+eo%o,"#o++a,a:a;a ,"ema,
)e+#+ %(#%%e,mo<a"ella, (a0al#no,o+"o%.=
En n(e%+"o an>l#%#%
A?en+e
m#"o:#ano
L#m#+e )o" ?"amo
m M Mesultado Concentraci!
n
.. Col#$o"me% /X(G
'
(G
'
>QSB=BCQ F-X(G
'
2. E%!e"#!#a
Col#
' (G >QSB=BCQ ',X(G
'
@. Salmonella. 9usencia:,
/g
--- >QSB=BCQ 0GX(G
'
(. Coliformes
SegEn la norma sobre esta en el lmite, pero de todas formas encontramos la
presencia de coliformes y nos puede hacer da&o. >orque con el resultado
sobre pasa el lmite m.*imo M, es riegoso para el consumo humano.
,. Escherichia coli
Como la muestra de queso fue de (G g menor que ,/ g segEn la norma si
debi! encontrarse la presencia de eschericha coli, lo que se quiere que mi
muestra anali7ada es mayor a M signi"ca que mi producto no es apto para el
consumo humano, es riegoso

'. Salmonella
Como nuestra muestra fue de (G g, menor que ,/g segEn la norma no debi!
encontrarse salmonella, lo cual quiere decir que nuestro queso est. contaminado y
lo pudo haber hecho por nuestras condiciones de trabao o por el mismo ambiente
del laboratorio.
VI. RECOMENDACIONES
Colocarse los guantes y la mascarilla durante la e*periencia.
=ratar de esparcir correctamente todo el 9gar en la muestra al inicio.
Rna $e7 obtenida el culti$o tenerlo lo m.s hermtico posible.
5acer la lectura cuando el culti$o este frio, pero que no pase mucho
tiempo.
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