Facultad de Ciencias Agrarias

E.A.P. Ingeniera Agroindustrial

CURSO :

DOCENTE:

AO:


ALUMNO:








BIOQUIMICA
AGUIRRE CUBILLAS LISBETH
CAQUI CABALLERO JOSE
MEZA RODRIGUEZ DIANA
REYES DEL VALLE ROY
OLIVARES RIOS DAVID

INFORME DE PRACTICA 5, 6, 7,8 Y 9
Ing. SolrzanoGutirrez Mara
2do











DEDICATORIA

A todos los docentes por su sabidura y esfuerzo que comparten,
todos los das buscando una calidad de enseanza y aprendizaje
en el campo de la Investigacin e Innovacin Educativa.




























GRADECIMIENTO
Al docente del curso de bioqumica de la Facultad de Ciencias agrarias
de la escuela acadmica profesional ingeniera agroindustrial de la
UNHEVAL; quien nos incentiva para hacer este tipo de trabajos; por
nuestro bien y para los estudiantes y la juventud que nos espera en el
camino, con quienes seguiremos la misin de ser ingenieros.






















INDICE
LABORATIO DE BIOQUIMICA

I. INFORME N 5 -RECONOCIMIENTO DE LIPIDOS CON EL
REACTIVO DE SUDAN III
II. INFORME N 6 - SAPONIFICACION DE GRASAS
III. INFORME N 7 - RECONOCIMIENTO DE PROTEINAS
IV. INFORME N 8 - DESNATURALIZACION DE PROTEINAS
V. INFORME N 9 - ANALISIS CUANTITATIVO DE ENZIMAS
VI. INFORME N 10- ACCION DE LA ENZIMA CATALASA










INFORME N5


RECONOCIMIENTO DE LIPIDOS CON EL REACTIVO DE
SUDAN III

I. OBJETIVO
Determinar la presencia de lpidos en alimentos.
Poner de manifiesto ciertas propiedades de los lpidos,
algunas de las cuales pueden servirnos para su
identificacin.

II. MATERIALES , MATERIA PRIMA Y REACTIVOS

- MATERIALES
- Tubo de ensayo
- Vaso de precipitado con agua
- Aceite vegetal
- Gradillas
- Solucin de sudan III en frasco de cuentagotas
guinda, rojo, cereza.
- matraz Erlenmeyer
- Alcohol
- MATERIA PRIMA
- clara de huevo
- yema de huevo
- aceite
- REACTIVOS
- SUDAM III

III. PROCEDIMIENTO

1) aceite
+
Reactivo sudan III


2) clara de huevo


+
Sudan III


3) Yema de huevo
+
Sudan III


ACEITE 1ml
CLARA 1ml
YEMA 1ml

IV. RESULTADOS
Segn la muestra analizada

V. CONCLUCION
- El reactivo Sudn III, por contener un solvente orgnico,
solubiliza la grasa, permitiendo la determinacin
cualitativa de lpidos.
VI. ANEXOS.









PRACTICA N 6


SAPONIFICACION DE GRASAS
Grasas esteres hidrolisisacido Base

I. OBJETIVO
- Elaboracin de jabn a partir de grasas y aceites caseros por
medio de la reaccin de saponificacin.

II. MATERIALES , MATERIA PRIMA Y REACTIVOS
Materiales.
Tubos de ensayo
Pipeta
Gradilla
Mechero Bunsen
Pinzas para tubo de ensayo
MATERIA PRIMA
aceite
REACTIVOS
NaOHEtanol
HCl 0,2 N Aceite vegetal
H2SO4(cido sulfrico)
Agua destilada

III. PROCEDIMIENTO

1) ACEITE
+ CALENTAR.
NaOH


2) SOL SAPO
+ 5 GOTAS + Cl Na
H2 S04

IV. RESULTADOS


Cuando hemos disuelto la sosa que estaba en estado slido en el agua,
hemos observado que ha tenido lugar una reaccin exotrmica ya que
la disolucin del agua con NaOH se calienta al desprender calor. Al
mezclar el aceite con NaOH obtenemos una mezcla de color
amarillento-marrn, y cuando mezclamos la grasa con NaOH
obtenemos una mezcla de color ms blanquecino.
Cuando hemos calentado estas mezclas y pasado un tiempo, hemos
podido observar en el recipiente 3 capas: la inferior que contiene la
solucin de sosa sobrante con la glicerina formada; la intermedia,
semislida, constituida por jabn, y la superior, amarilla de aceite que
no ha reaccionado. Esta reaccin ha tenido lugar por un proceso de
saponificacin en la que a partir de grasa y NaOH obtenemos jabn y
glicerina.
V. CONCLUSIONES:
- Los jabones se forman por saponificacin que es la hidrlisis
en medio bsico de las grasas.
- Las conclusiones a las que hemos llegado tras la realizacin
de la prctica son que los jabones se forman mediante una
reaccin denominada saponificacin. Esta reaccin
consiste en una hidrlisis en medio bsica de las grasas, que,
de este modo, se descomponen en sales de potasio o sodio
(jabones) y glicerina..

VI. ANEXO :


INFORME N 07


RECONOCIMIENTO DE PROTEINAS

I. OBJETIVO
Determinar la presencia de protenas
Extraer la casena de la leche y reconocer su naturaleza
proteica.
Utilizar misma tcnica para reconocer la naturaleza
proteica de otras muestras.
Identificar a travs de pruebas bioqumicas las protenas
existentes en soluciones problemas.

II. MATERIALES , MATERIA PRIMA Y REACTIVOS
MATERIALES:
Tubos de ensayo
Pipeta
Gradilla
Mechero
Vasos de precipitados

MATERIA
PRIMA:
Glicina
Albmina
Chocho
Arveja

REACTIVOS:
NaOH
HNO3
CuSO
4


III. PROCEDIMIENTOS

a) REACCION DE BIORET.
Entre las reacciones coloreadas especficas de las protenas, que sirven
portanto para su identificacin, destaca la reaccin del Biuret. Esta
reaccin laproducen los pptidos y las protenas, pero no los
aminocidos ya que se debea la presencia del enlace peptdico CO-NH
que se destruye al liberarse losaminocidos.


El reactivo del Biuret lleva sulfato de Cobre (II) y sosa, y el Cu, en un
mediofuertemente alcalino, se coordina con los enlaces peptdicos
formando uncomplejo de color violeta (Biuret) cuya intensidad de
color depende de la concentracin de protenas.
Valina + NaOH obs + CuSo4 = azul, negro

Glicina + NaOH obs + CuSo4 = verde oscuro, negro

Albumina + NaOH obs + CuSo4 = lila y protena


Chocho + NaOH obs + CuSo4
= celeste, v erde y tiene protena y
lila

Arveja + NaOH obs + CuSo4 = verde claro + protena y lila

b) REACCION XANTOPROTEINA

Valina + NaO3 obs + NaOH
Glicina + NaO3 obs + NaOH = se ha hecho negativo
Albumina + NaO3 obs + NaOH = blanco + la protena se separa

Chocho + NaO3 obs + NaOH = se ha hecho positivo


Arveja + NaO3 obs + NaOH
= normal se ha vuelto hinchar en
blanco y es positivo.


IV. RESULTADOS Y DISCUCIONES
Cmo se manifiesta la desnaturalizacin de la clara de huevo?
La desnaturalizacin de protenas se da en la clara de los huevos, que
son en gran parte albminas en agua. En los huevos frescos, la clara es
transparente ilquida; pero al cocinarse se torna opaca y blanca,
formando una masa slida intercomunicada. Esa misma


desnaturalizacin puede producirse a travs de una desnaturalizacin
qumica, por ejemplo volcndola en un recipiente con acetona
Desnaturalizacin irreversible de la protena de la clara de huevo y
prdida disolubilidad, causada por la alta temperatura (mientras se la
fre)
Cul de los tres agentes utilizados tiene mayor poder de
desnaturalizacin?
El efecto de la temperatura, cuando la temperatura es elevada aumenta
la energa cintica de las molculas con lo que se desorganiza la
envoltura acuosa de las protenas y, se desnaturalizan.
Cmo podramos saber que una sustancia desconocidas una
protena?
Para saber si una sustancia desconocida, es una protena se utiliza el
Reactivo de Biuret es aquel que detecta la presencia de protenas,
pptidos cortos y otros compuestos con dos o ms enlaces peptdicos
en sustancias de composicin desconocida. Est hecho de hidrxido
potsico (KOH) y sulfato cprico (CuSO4), junto con(KNaC4O64H2O).
El reactivo, de color azul, cambia a violeta en presencia de protenas, y
a rosa cuando se combina con polipptidos de cadena corta. El
Hidrxido de Potasio no participa en la reaccin, pero proporciona el
medio alcalino necesario para que tenga lugar.
Qu coloracin da la reaccin del Biuret?
La coloracin que presenta es el color violeta, indicando la presencia
de protenas.
Una protena coagulada podra dar la reaccin del Biuret?
Las protenas, debido al gran tamao de sus molculas, forman con el
agua soluciones coloidales. Estas soluciones pueden precipitar con
formacin de cogulos al ser calentadas a temperaturas superiores a
los 70 C o al ser tratadas con soluciones salinas, cidos, alcohol, etc. Si
una protena coagulada podra dar la reaccin de Biuret, porque el
reactivo reacciona con cualquier protena, liquida o slida, por ejemplo
cuando haces una cuantificacin de protenas en suero (liquida) o
cuando haces una prueba cualitativa en huevos, carne, papas, etc,
Si se realiza la reaccin del Biuret sobre un aminocido cmo la
Glicina es positiva o negativa? Por qu?


La glicina no reaccion con el reactivo de Biuret porque est en forma
libre y no hay enlaces peptdicos con los que pueda reaccionar este
reactivo. De esta manera, la glicina dio una prueba negativa. Adems en
la reaccin xantoprotica da negativo porque carece de grupos
aromticos.
V. RECOMENDACIONES
Este siguiente practica su uso es muy importante ya que se
para asi saber el reconocimiento de dicho producto.

VI. CONCLUCION
La albmina, el chocho y la arveja contienen protenas y la
glicina no por ser un aminocido.
Las protenas constituyen una de las molculas
ms importantes en el organismo ya que cumplen muchas
funciones
Las protenas estn constituidas por aminocidos por
los cuales los mtodos se basan en el reconocimiento de
los aminocidos
Al realizar las diferentes pruebas con la albmina se pudo
comprobar experimentalmente efectivamente que se trata
de una protena
Las protenas son sensibles con las sales metlicas pesadas
(mercurio, cobre ,plomo) formando precipitados
En las reacciones donde se obtuvo precipitacin se debi a
un cambio en el estado fsico de la protena , mientras que
en la coagulacin se ha producido un cambio en el estado
fsico y en la estructura qumica por eso es irreversible





VII. ANEXOS





















































INFORME N 07
DESNATURALIZACION DE PROTEINAS

I. OBJETIVO
Identificar los diferentes factores que afectan la estabilidad de las
protenas
Observar el comportamiento de una protena globular
hidrosoluble en solucin acuosa en funcin de la fuerza
inica.

II. MATERIALES, MATERIA PRIMA Y RACTIVOS
MATERIALES:
Tubos de ensayo
Pipeta
Gradilla
Mechero Bunsen
Pinzas para tubo de ensayo
MATERIA PRIMA:
Albmina
REACTIVOS:
HCl
NaOH
HNO3
CuSO4

III. PROCEDIMIENTO


1) Clara de huevo
+ Albumina
H20





2) albumina
+ calentar NaOH
HCl



3) Albumina
+ Calentar NaOH
HNO3



4) Albumina
+ Calentar NaOH
Cu SO4 enfriar



5) albumina
+ + Cu SO4
NaOH



6) albumina
+ calentar
Acetado de plomo





IV. RECOMENDACIONES
MUESTRAS OBSERVACIONES
Albmina con Acetona se desnaturaliz, qued como
peganda en las paredes del
vaso
Albmina con Etanol se desnaturaliz. Se separ un
poco y una parte qued
flotando sobre el etanol
Albmina con Bicarbonato de
Na Saturado.
se desnaturaliz una parte ya
que se vea slo de unas partes
como separado
Albmina con Jugo de Limn si se desnaturaliz
Albmina con Aceite de cocina no se esnaturaliz, se vea
normal pero grasoso y ya
Albmina con Jugo de Naranja no desnaturaliz, no pas nada
Albmina con Cloruro de Na
Saturado.
si se desnaturaliz un poco
Albmina con Vinagre si hay desnaturalizacin.

V. CONCLUCION
Existen diversos factores que contribuyen a la desnaturalizacin de las
protenas, por ejemplo cambio de temperatura, pH de las sustancias,
etc. en este caso vimos ms con pH, cuando el pH es cido hay una
desnaturalizacin o por lo menos ms notoria al instante y en medio
bsico por lo regular no ocurre nada.
VI. ANEXOS














INFORME N 08
ANALISIS CUANTITATIVO DE ENZIMAS

I. OBJETIVO

Determinar la presencia de enzimas en productos de origen
animal o vegetal mediante reacciones qumicas especficas.
Identificar la accin de la catalasa, perxidos y tirosidasa.

II. MATERIALES
3.1 Muestra
Papa cruda.
Trocitos de tomate
Jugo de limn


Zanahoria
Carne cruda
Rbano

3.2 Material de vidrio

Tubos de ensayo
Gradilla
Varillas de vidrio
Mechero
Cocina elctrica
Rejilla de asbesto por cocina
Vasos de precipitado de 150 250
ml (12 unidades)
Pipetas
Rallador
Cronmetro
Embudo
Papel de filtro alimentario
(para infusiones filtrantes)
Gasa
Mortero

3.3 Reactivos



Perxido de hidrgeno (Agua Oxigenada)
III. PROCEDIMIENTO Y RESULTADOS,

1) hojas
+
Perxido de H


2) papas
+
Perxido de H


3) hojas papas
+ Perxido + perxido
Lega de H. lega de H.

IV. RECOMENDACIN

En esta prctica de laboratorio de bioqumica que con
las diferentes muestras que tenamos solamente
algunas reaccionaban dando asi la presencia de enzimas
en ellas.

V. CONCLUCION
los agentes precipitantes inhiben la actividad enzimtica por
desnaturalizacin de la enzima.
La velocidad de una reaccin enzimtica depende de varios factores.
Entre estos est el pH. Cada enzima tiene un rango de pH en el que su
actividad enzimtica es ptima. Fuera de este rango la enzima por ser
una protena empieza a desnaturalizarse por la protonacin o
desprotonacin de susaminocidos constituyentes.
La temperatura es otro factor importante en la actividad enzimtica. Se
puededecir que a mayor temperatura aumenta la velocidad de la


reaccin hasta quellega un punto en el que la velocidad disminuye con
el aumento en el calor.
Otro factor fundamental en la velocidad a la que se realiza una reaccin
es laconcentracin de enzima y de sustrato. Esto se sabe tericamente
debido aque todas las reacciones cumplen con la reaccin de Michaelis-
Menten, donde si la concentracin de sustrato o de enzima es muy baja,
la velocidadaumenta proporcionalmente al aumento de concentracin
VI. ANEXOS.




PRACTICA N 10
ACCION DE LA ENZIMA CATALASA

I. OBJETIVO
Determinar la accin de la enzima catalasa en diferentes
sustancias orgnicas


Comprobar si la enzima catalasa contenida en los
peroxisomas del hgado y rin degrada el perxido de
hidrgeno.

II. MATERIALES , MATERIALES Y RACTIVOS

MATERIALES:
Tubos de ensayo
Pipeta

MATERIA PRIMA:
Papa
Hgado
Hojas

REACTIVOS:
Perxido de hidrgeno
HCl

III. PROCEDIMIENTO
1). PAPA
Obs + perxido de H
HCl

2). Hgado
Obs. + Perxido de H.
HCl

3). HOJAS
Obs + perxido de H
HCl



4).


Papa hojas hgado

Perxido dePerxido de Perxido de
H H H

IV. CONLUCION
hemos logrado cumplir con nuestro objetivo, es decir
comprobar la actividad catalasica en diversos tejidos animales
y vegetales.
El equipo llego a la conclusin, que el cambio de ph si afecta la
actividad enzimtica por que cuando se le agrego el hcl
disminuyeron las reacciones con las muestras, por lo
consiguiente, con el perxido de hidrogeno ya que el hcl
desnaturalizo a la catalasa que esta es una protena. tambin
en el caso del azcar y la sal no hubo reaccin ya que estos
son seres no vivos por lo tanto no tiene enzimas. Una reaccin
para ver la presencia de catalasa en nuestro organismo es
Cuando sufrimos una cortada y en ese momento le agregamos
agua oxigenada muchas personas solo saben que es para
matar a las bacterias, pero no porque hay efervescencia y el
motivo es por la presencia de catalasa en nuestros tejidos.

V. ANEXOS















CUESTIONARIO
1. QUE SON ENZIMAS?
2. ENZIMAS HOLOSTRICAS
3. ENZIMAS LUDUCIBLES
4. COFACTOR
5. COENZIMA
6. APOENZIMA
7. MENCIONE UNA TCNICA DE RECONOCIMIENTO DE ENZIMAS

1. Qu son enzimas?

Sustancia macromolecular, natural o sinttica, compuesta
principalmente de protena, que cataliza una o ms reacciones
bioqumicas de forma ms o menos especfica, a temperaturas


relativamente bajas. En algunos casos, lasenzimas poseen iones
metlicos, grupos prostticos o carbohidratos unidos de forma
covalente o fuertemente asociados. Los RNA con actividad
cataltica (ribosomas) tambin se incluyen en esta categora.

Se encuentran en todo tipo de clulas y catalizan las reacciones
qumicas de los seres vivos (biocatalizadores).Un catalizador es
una sustancia que aumenta la rapidez o velocidad de una reaccin
qumica, sin verse alterada ella misma en el proceso global. Son
por tanto, las responsables del metabolismo celular. Son
especficas de las reacciones que catalizan y de los sustratos que
intervienen.

Los enzimas son catalizadores muy potentes y eficaces (aumentan
la velocidad de las reacciones entre 10
3
y 10
9
veces). No llevan a
cabo reacciones que sean energticamente desfavorables, no
modifican el sentido de los equilibrios qumicos, sino que aceleran
su consecucin. Simplemente se alcanza ms rpido el estado de
equilibrio.

2. Qu son Enzimas Alostricas?

Las enzimas alostricas son las que adquieren otras formas, otra
conformacin, por la unin de moduladores. Estos moduladores
pueden ser inhibidores o activadores que se unen a la enzima en
un sitio diferente al sitio activo e inducen un cambio
conformacional en la estructura de la enzima tal que cambia la
estructura del sitio activo.


3. Que son Enzimas Inducibles?

Enzima sintetizada por la clula en cantidades muy pequeas y
cuya velocidad de sntesis puede ser aumentada por otra molcula
denominada inductor.
Son aquellas enzimas que se sintetizan cuando su sustrato est
presente en la clula.

4. Qu son Cofactores?

Son sustancias de caractersticas no proteicas que, actan junto
con la enzima y el sustrato, en algunas reacciones.
Estas sustancias:
no se modifican al finalizar la reaccin,
si sufren alguna modificacin durante la reaccin, pero se
regenera en una reaccin acoplada.



Tipos de cofactores:

Iones: manejan las cargas de los sitios activos. Ej.: Mg es
cofactor de las enzimas que transfieren grupos fosfato.
Coenzimas: produce interacciones dbiles y colaboran con
los procesos anexos a las funciones catalticas en s. Ej.: NAD,
NADH y ATP.
Grupos prostticos: Son sustancias que se unen en forma
covalente con la enzima siendo imposible separarlas.
Holoenzima = Apoenzima + Grupo prosttico

Ej.: En las catalasas y peroxidasas de los peroxisomas, es el Hemo.
Las flavinas (FAD, FMN).

5. Que son Coenzima?
Muchas enzimas realizan su funcin cataltica en presencia de
otras molculas generalmente ms pequeas, no proteicas y
denominadas coenzimas (algunos las denominan grupos
prostticos si la asociacin de estas con la enzima es de carcter
covalente). El complejo resultante se denomina holoenzima
donde la parte proteica se llama apoenzima (termolbil, no
dializable) y la parte no proteica y relativamente pequea se
denomina coenzima (termoestable, no proteica).
Tanto oxido reductoras, isomerasas y ligasas requieren de
coenzimas. Las coenzimas participan activamente en la reaccin,
por ejemplo en las oxidorreductasas aceptan o ceden hidrgenos o
electrones y en las transferasas aceptan o ceden los grupos.
Adems se asocian a vitaminas (como las del grupo B) lo que
demuestra la importancia fisiolgica de las mismas y su ingesta
Luego, tenemos que una coenzima no es especfica para un tipo de
reaccin sino que la porcin de la enzima que da la especificidad
es la apoenzima
Por ejemplo, el lactato deshidrogenasa, malato deshidrogenasa y
glutamato deshidrogenasa utilizan NAD como coenzima (aceptora
de H) as como tambin otras oxidorreductasas
6. Que son Apoenzima?

Parte proteica de una enzima que, para ser activa, requiere estar
unida a la correspondiente coenzima. Tambin se
denomina apoprotena. No puede llevar a cabo su accin cataltica
desprovista de los cofactores necesarios, ya sean iones metlicos
(Fe, Cu, Mg, etc.) u orgnicos, que a su vez puede ser


una coenzima o un grupo prosttico, dependiendo de la fuerza de
sus enlaces con la apoenzima. La apoenzima, es por tanto,
catalticamente inactiva, hasta que se le une el cofactor adecuado.


7. MENCIONE UNA TCNICA DE RECONOCIMIENTO DE
ENZIMAS

HIDRLISIS DEL ALMIDN

Mediante esta experiencia, vamos a ver la
actividad de otra enzima, la amilasa o ptialina, presente
en la saliva. Esta enzima acta sobre el polisacrido
almidn, hidrolizando el enlace O-glicosdico, por lo que
el almidn se terminar por transformar en unidades de
glucosa. Es importante recordar las reacciones
caractersticas de glcidos para comprender esta
experiencia.