Déchets Biodégradable PDF

Aide la dfinition des dchets
dits biodgradables,
fermentescibles, mthanisables,
compostables
RECORD 00-0118/1A
fvrier 2002
RE.CO.R.D.
Cre en 1989 linitiative du Ministre en charge de lEnvironnement, lassociation RECORD

REseau COopratif de Recherche sur les Dchets est le fruit dune triple coopration entre
industriels, pouvoirs publics et chercheurs. Lobjectif principal de RECORD est le financement et la
ralisation dtudes et de recherches dans le domaine des dchets et des pollutions industrielles.
Les membres de ce rseau (groupes industriels et organismes publics) dfinissent collgialement des
programmes dtudes et de recherche adapts leurs besoins. Ces programmes sont ensuite confis
des laboratoires publics ou privs.
En Bibliographie, ce document sera cit sous la rfrence :

RECORD, Aide la dfinition des dchets dits biodgradables, fermentescibles, mthanisables, 2002,
153 p, n00-0118/1A
Etude RECORD n 00-0118/1A
RE.CO.R.D.
ETUDE N 00-0118/1A
RAPPORT FINAL
AIDE A LA DEFINITION DES DECHETS DITS BIODEGRADABLES,

FERMENTESCIBLES, METHANISABLES, COMPOSTABLES
fvrier 2002
R. GOURDON - LAEPSI (INSA de LYON)
www.record-net.org
MOTS-CLES
Biodgradation, dchet, fermentescibilit, compostage, mthanisation,

matire organique, rglementation, normes
RESUME
La nouvelle rglementation sur les dchets issue des lois de 1975 et 1992,
impose lhorizon 2002 une rorganisation de la filire dchet et
notamment un renforcement des procds de valorisation. Mais les
industriels du secteur se retrouvent confronts un problme de
dfinition de termes comme biodgradable, fermentescible, compostable,
mthanisable. Ceux-ci sont employs dans les nouveaux textes
rglementaires sans rpondre une dfinition prcise.
Cette tude bibliographique fait la synthse de ltat de lart sur ces
notions et dans un deuxime temps regroupe laspect rglementaire et
normatif existant ce jour afin daider les professionnels du dchet
mieux apprhender ces notions.
SUMMARY
Stemming from the 1975 and 1992 laws, the new regulations concerning
waste lay it down that the recycling scheme should be reorganized by the
year 2002 or so, and in particular that the recovering process should be
strenghtened. The recycling professionals are now faced with the problem
of defining words such as biodegradability, fermentescibility, composting
and methanization. These words are used in the new laws without being
precisely defined.
This bibliographical study first summarizes these notions and then sums
up the current regulation and normative aspects in order to help the
recycling professionals to better grasp these notions.
Association RE.CO.R.D. Contrat 00-0118/1A

Laboratoire LAEPSI, INSA de Lyon
Sommaire
INTRODUCTION................................................................................................................................................. 8
PARTIE I : DEFINITION GENERALE DE LA BIODEGRADABILITE DE LA MATIERE
ORGANIQUE : BASES BIOCHIMIQUES ET MICROBIOLOGIQUES.................................................... 11
I.1- INTRODUCTION ........................................................................................................................................... 11
I.2- BIODEGRADATION BIODEGRADABILITE BIOTRANSFORMATION ............................................................. 11
I.3- MICRO-ORGANISMES, NUTRITION ET ECOLOGIE MICROBIENNE .................................................................. 12
I.3.1- Micro-organismes .............................................................................................................................. 12
I.3.2- Nutrition et croissance microbienne .................................................................................................. 15
I.3.2.1- Introduction.................................................................................................................................................. 15
I.3.2.2- Nutrition des micro-organismes ................................................................................................................... 15
I.3.2.3- Croissance des micro-organismes ................................................................................................................ 16
I.3.3- Notions gnrales dcologie microbienne et facteurs dinfluence de la croissance......................... 18

I.3.3.1- Introduction lcologie microbienne ......................................................................................................... 18
I.3.3.2- Facteurs environnementaux ......................................................................................................................... 19
I.4- METABOLISMES ENERGETIQUES ................................................................................................................. 23

I.5- RESPIRATION AEROBIE, ANAEROBIE, ET FERMENTATIONS .......................................................................... 26
I.6- BIODEGRADATION DE LA MATIERE ORGANIQUE ......................................................................................... 27
I.6.1- Cycle biogochimique du carbone - Gnralits ............................................................................... 27
I.6.2- Biodgradation de la matire organique ........................................................................................... 28
I.6.2.1- Aspects gnraux ......................................................................................................................................... 28
I.6.2.2- Voies cataboliques des molcules organiques.............................................................................................. 30
a) Hydrolyse des polymres organiques :............................................................................................................ 31
b) Assimilation des oligomres et des monomres.............................................................................................. 32
I.6.3- Biotransformation de la matire organique....................................................................................... 33

I.6.3.1- Biosynthse.................................................................................................................................................. 33
I.6.3.2- Biostabilisation dans les sols : processus dhumification de la matire organique....................................... 34
I.6.4- Notion de biodgradabilit de la matire organique ......................................................................... 37

I.6.4.1- Introduction.................................................................................................................................................. 37
I.6.4.2- Biodgradabilit des composs organiques naturels (biomasse) .................................................................. 38
I.6.4.3- Biodgradabilit des composs organiques de synthse .............................................................................. 39
PARTIE II : NOTION DE BIODEGRADATION DANS LE DOMAINE DE LA GESTION ET DU

TRAITEMENT DES DECHETS ORGANIQUES .......................................................................................... 41
II.1- INTRODUCTION ......................................................................................................................................... 41
II.2- PRINCIPAUX DECHETS CONCERNES ........................................................................................................... 41
II.2.1- Biomasse et dchets organiques ....................................................................................................... 41
II.2.2- Dchets agricoles et agro-alimentaires............................................................................................ 42
II.2.3- Dchets municipaux.......................................................................................................................... 43

II.2.4- Dchets verts de zones urbaines ....................................................................................................... 46
II.2.5- Boues de station dpuration des eaux uses municipales ............................................................... 47
II.2.6- Dchets industriels solides et semi-solides ....................................................................................... 49
II.3- TRAITEMENTS BIOLOGIQUES DES DECHETS ORGANIQUES .......................................................................... 49
II.3.1- Objectif des traitements .................................................................................................................... 49
II.3.2- Traitement biologique arobie : le compostage ............................................................................... 52
II.3.2.1- Historique, dfinitions, objectifs et aspects rglementaires ........................................................................ 52
a) Historique........................................................................................................................................................ 52
b) Dfinitions ...................................................................................................................................................... 52
c) Objectifs.......................................................................................................................................................... 52
d) Rglementation ............................................................................................................................................... 53
II.3.2.2- Principe du compostage.............................................................................................................................. 54
II.3.2.3- Aspects microbiologiques........................................................................................................................... 55
II.3.2.4- Paramtres de compostage et leur volution au cours du traitement........................................................... 57
a) Aration .......................................................................................................................................................... 57
b) Humidit du substrat ....................................................................................................................................... 57
c) Temprature .................................................................................................................................................... 58
d) pH ................................................................................................................................................................... 58
e) Rapport C/N .................................................................................................................................................... 59
II.3.3 Traitement biologique anarobie : la mthanisation ......................................................................... 60

II.3.3.1- Historique, objectifs et aspects rglementaires ........................................................................................... 60
a) Historique........................................................................................................................................................ 60
b) Objectifs.......................................................................................................................................................... 60
c) Aspects rglementaires.................................................................................................................................... 60
II.3.2.2- Principe de la mthanisation ....................................................................................................................... 60
II.3.3.3- Les grandes tapes biochimiques et microbiologiques ............................................................................... 61
a) Hydrolyse et Acidogense............................................................................................................................... 62
b) Lactogense ................................................................................................................................................. 62
c) Mthanogense................................................................................................................................................ 62
II.3.3.4- Facteurs dinfluence ................................................................................................................................... 63
a) Temprature .................................................................................................................................................... 63
b) pH ................................................................................................................................................................... 64
c) Oxygne molculaire et teneur en eau............................................................................................................. 64
d) Potentiel redox ................................................................................................................................................ 64
e) Rapport C/N .................................................................................................................................................... 64
f) Agitation.......................................................................................................................................................... 64
II.4. MISE EN CENTRE DENFOUISSEMENT TECHNIQUE (CET).......................................................................... 65

II.4.1- Introduction ...................................................................................................................................... 65
II.4.2- Contexte rglementaire diffrentes classes de CET.......................................................................... 66
II.4.3- Evolution des dchets organiques en centre denfouissement technique de classe I........................ 66
II.4.3.1- Rglementation spcifique.......................................................................................................................... 66
II.4.3.2- Concept de la dcharge de classe I ............................................................................................................. 67
II.4.3.3- Procds de stabilisation/solidification des dchets.................................................................................... 68

a) Dchets ultimes et dchets stabiliss............................................................................................................... 68
b) Principe ........................................................................................................................................................... 69
c) Procds de stabilisation/solidification ........................................................................................................... 69
d) Stabilisation/solidification de dchets contenant de la matire organique ...................................................... 70
II.4.3.4- Altration biologique des dchets stabiliss par des liants hydrauliques .................................................... 71
a) Introduction..................................................................................................................................................... 71
b) Mcanismes de bioaltration........................................................................................................................... 72
c) Mcanismes de biodtrioration directe .......................................................................................................... 72
d) Mcanismes de biodtrioration indirecte....................................................................................................... 73
i) Production dacide sulfurique..................................................................................................................... 74
ii) Production dacide nitreux et nitrique ....................................................................................................... 74
iii) Production dacides organiques et d'agents complexants ......................................................................... 75
iiii) Production de Fe3+................................................................................................................................... 75
II.4.3.5- Conclusions ................................................................................................................................................ 75
II.4.4. Evolution des dchets organiques en centre denfouissement technique de classe II....................... 76
II.4.4.1- Rglementation spcifique des dcharges de classe II................................................................................ 76
Condition dexploitation des dcharges de classe II............................................................................................ 77
II.4.4.2- Concept classique de dcharge de classe II................................................................................................. 77
II.4.4.3- Concept dcharge de classe II- Bioracteur ................................................................................................ 78
II.4.4.4- Processus de biodgradation/biotransformation de la matire organique dans les dcharges ..................... 80
a) Introduction..................................................................................................................................................... 80
b) Phase arobie .................................................................................................................................................. 80
c) Phase anarobie............................................................................................................................................... 81
II.4.4.5- Biodgradabilit de la matire organique dans les dcharges ..................................................................... 81
PARTIE III : EVALUATION DE LA

BIODEGRADATION/BIOTRANSFORMATION/BIODETERIORATION DES DECHETS SOLIDES
ORGANIQUES ................................................................................................................................................... 82
III.1- INTRODUCTION ........................................................................................................................................ 82
III.2- RAPPEL DE DEFINITIONS DES TERMES LIES A LA NOTION DE BIODEGRADATION ....................................... 82
III.3. RAPPEL DES PRINCIPAUX PARAMETRES ET FACTEURS DETERMINANT LA BIODEGRADATION DUN DECHET
.......................................................................................................................................................................... 86
III.3.1- Paramtres lis au dchet ............................................................................................................... 86
III.3.1.1- Htrognit du dchet ou de la fraction de dchet ................................................................................. 86
III.3.1.2- Etat physique du dchet............................................................................................................................. 86
a) Granulomtrie, porosit................................................................................................................................... 86
b) Teneur en eau et oxygne................................................................................................................................ 87
III.3.1.3- Composition chimique de la fraction organique du dchet........................................................................ 87
a) Introduction..................................................................................................................................................... 87
b) Nature chimique de la matire organique dans les dchets ............................................................................. 88
c) Paramtres globaux de la matire organique ................................................................................................... 90
III.3.2- Facteurs environnementaux de la biodgradation / biodtrioration / biostabilisation dun dchet

..................................................................................................................................................................... 92
III.3.2.1- Facteurs physico-chimiques ...................................................................................................................... 92

III.3.2.2- Facteurs cologiques et physiologiques..................................................................................................... 92
III.4- METHODE DEVALUATION DE LA BIODEGRADATION OU BIODETERIORATION .......................................... 93

III.4.1- Introduction..................................................................................................................................... 93
III.4.2- Techniques dvaluation de la biodgradabilit des substances organiques.................................. 96
III.4.2.1- Principes gnraux .................................................................................................................................... 96
III.4.2.2- Tests dvaluation de la biodgradabilit de molcules organiques .......................................................... 99
a) Tests de biodgradabilit facile ................................................................................................................ 99
Gnralits ..................................................................................................................................................... 99
Description des essais dvaluation de la biodgradabilit facile prsents dans les lignes directrices de
lOCDE :...................................................................................................................................................... 104
Description de la procdure de dtermination de la demande biochimique (ou biologique) en oxygne (DBO)
: .................................................................................................................................................................... 107
b) Tests de biodgradabilit dite intrinsque et de simulation..................................................................... 108
Mthode 302A SCAS modifie ................................................................................................................... 108
Mthode 302B : Essai Zahn-wellens/EMPA................................................................................................ 110
Mthode 302C : Essai MITI modifi (II) ..................................................................................................... 111
Mthode dvaluation de la biodgradabilit intrinsque en conditions anarobies dans les boues de digesteur
..................................................................................................................................................................... 112
Biodgradabilit Intrinsque dans le Sol ................................................................................................ 113
III.4.3- Procdures dvaluation de la biodgradabilit ou de la biodtrioration des matriaux........... 116

III.4.3.1- Principes gnraux .................................................................................................................................. 116
III.4.3.2- Tests dvaluation de la rsistance des matriaux aux agents microbiens ............................................... 117
a) Prsentation gnrale ................................................................................................................................... 117
b) Nature de linoculum .................................................................................................................................... 120
c) Mode d'inoculation........................................................................................................................................ 121
d) Conditions d'incubation ................................................................................................................................ 121
e) Composition du milieu de culture ................................................................................................................. 122
III.4.3.3- Tests de biodgradabilit des matriaux.................................................................................................. 122
a) Prsentation gnrale .................................................................................................................................... 122
b) Tests acclrs dvaluation de la biodgradabilit des matriaux .............................................................. 124
Tests en conditions arobies ........................................................................................................................ 124
Tests en conditions anarobies..................................................................................................................... 126
c) Tests de simulation pour lvaluation de la biodgradabilit des matriaux ................................................. 127
Scnario 1 : Utilisation comme matriau de substitution en BTP ................................................................ 128
Scnario 2 : Station dpuration des eaux uses avec traitement biologique arobie ................................... 129
Scnario 3 : Traitement biologique anarobie (mthanisation) .................................................................... 130
Scnario 4 : Compostage.............................................................................................................................. 131
Scnario 5 : Epandage.................................................................................................................................. 133
Scnario 6 : Mise en dcharge dordures mnagres (classe II)................................................................... 134
Scnario 7 : Mise en dcharge de dchets industriels spciaux (classe I) .................................................... 134
CONCLUSIONS ET PERSPECTIVES DE LETUDE................................................................................. 135

LISTE DES FIGURES ..................................................................................................................................... 137
LISTE DES TABLEAUX ................................................................................................................................. 138

LISTE DES NORMES ET PROCEDURES ................................................................................................... 140
LISTE DES DOCUMENTS REGLEMENTAIRES ...................................................................................... 145
REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUES........................................................................................................ 146

Introduction
Au cours de leurs activits, les partenaires industriels de l'association Record (REseau COopratif de
Recherche sur les Dchets) se trouvent confronts un problme de dfinition de termes tels que
biodgradable, fermentescible, compostable ou mthanisable couramment employs dans les tests
rglementaires et lgislatifs de la communaut europenne et de la France sur la gestion et le
traitement des dchets solides. Que ce soient les lois, arrts ou dcrets portant sur la nomenclature des
dchets, la dfinition des diffrentes classes de dcharge ou ceux concernant llimination et la
valorisation des dchets solides, les termes ci-dessus sont employs sans forcment rpondre une
dfinition prcise de la part du lgislateur. Lobjectif de notre tude est de fournir quelques lments
de rponse concernant la dfinition et lemploi de ces termes dans la rglementation franaise et
europenne et les consquences sur la gestion et le traitement des dchets solides (dorigine
industrielle ou domestique) contenant une fraction non ngligeable de matire organique
potentiellement biodgradable.
La rglementation franaise et europenne concernant le traitement et le stockage des dchets est en
constante volution depuis la circulaire du 22 fvrier 1973 relative lvacuation et au traitement des
rsidus urbains et la loi franaise et la directive europenne du 15 juillet 1975 relative llimination
des dchets et la rcupration des matriaux. Larticle 1er de la loi du 15 juillet 1975 dfinit la notion
de dchet au sens de tout rsidu dun processus de production, de transformation ou dutilisation,
toute substance, matriau, produit ou, plus gnralement, tout bien meuble abandonn ou que son
dtenteur destine labandon . Elle dfinit dautre part, la notion de dchet ultime comme un
dchet rsultant ou non du traitement dun dchet, qui nest plus susceptible dtre trait dans les
conditions techniques et conomiques du moment, notamment par extraction de la part valorisable ou
par rduction de son caractre polluant ou dangereux . Signalons cependant que ces textes lgislatifs
et rglementaires concernent essentiellement les dchets dorigine domestique ou industrielle mais
exclue du champ dapplication les dchets de cadavres danimaux et les dchets agricoles suivants :
matires fcales et autres substances naturelles et non dangereuses utilises dans le cadre de
lexploitation agricole.
Par ailleurs, larticle 1er-III de la loi du 13 juillet 1992 prvoit l'arrt des pratiques de mise en
dcharge en les rservant aux seuls dchets "ultimes" l'horizon 2002. Larrt du 18 dcembre 1992
relatif au stockage de certains dchets industriels spciaux (D.I.S.) ultimes et stabiliss dresse la liste
des dchets admissibles dans les installations de stockage. Ces dchets doivent tre essentiellement
solides, minraux, avec un potentiel polluant constitu de mtaux lourds peu mobilisables et, par
ailleurs, ne doivent pas tre ractifs, volutifs et solubles. Larticle 1er de larrt du 18 fvrier 1994
prcise que un dchet est considr comme stabilis quand sa permabilit leau et sa fraction
lixiviable ont t rduites et quand sa tenue mcanique a t amliore de faon que ses
caractristiques satisfassent aux critres dacceptation des dchets stabiliss . Les articles 6 11 de
larrt du 18 dcembre 1992 prcise les modalits dacceptation des dchets industriels spciaux dans
les installations de stockage avec lobligation de stabiliser les dchets avant leur admission.
Larticle 12 du mme arrt fixe entre autre le caractre fermentescible comme critre de non
admission des dchets en centre de stockage. Lannexe I de larrt du 18 fvrier 1994 fixe les tests
dvaluation du potentiel polluant mettre en uvre sur les dchets solides initialement massifs (ou
gnrs par un procd de solidification) en vue de leur admission en centre de stockage. A lheure
actuelle, les conditions de mise en dcharge des dchets en vue de rpondre la directive 75/422/CEE
du 15 juillet 1975 sont dfinies par la directive 1999/31/CEE publie le 26 avril 1999 au J.O.C.E.
Larticle 5 de la directive du conseil europen prcise que la stratgie nationale des tats membres sur
la rduction des dchets biodgradables mis en dcharge (la mise en dcharge tant place en dernier
recourt) ncessite la mise en place de mesures permettant de rduire le gisement de dchets
biodgradables notamment grce des procds de traitements biologiques. La directive impose donc
la rduction programme de la quantit de dchets biodgradables : daprs larticle 5, en 2006, la
quantit de dchets municipaux biodgradables mis en dcharge doit tre rduite de 75% (massique)
de la totalit des dchets municipaux biodgradables produits en 1995. Ce pourcentage devra tre de
50% et 35% supplmentaires pour 2009 et 2016, respectivement. Signalons galement que les dchets
municipaux sont dfinis dans larticle 2 comme tant les dchets mnagers ainsi que les autres dchets
qui, de par leur nature ou leur composition, sont assimilables aux dchets mnagers. Selon cette article
de la directive europenne, un dchet biodgradable est dfini comme tant tout dchet pouvant
subir une dcomposition anarobie ou arobie, comme les dchets alimentaires et les dchets de
jardins, ainsi que le papier et le carton .
Par consquent, la notion de biodgradation concerne plusieurs champs dapplication dans le domaine
des dchets solides, quil apparat souhaitable de prciser au dbut de cette tude.
En terme de stockage, elle intervient tout dabord dans la dfinition mme de dchet solide dit
biodgradable et, plus prcisment, lvaluation de la biodgradabilit (ou fermentescibilit) de ces
dchets pour leur acceptation en centre denfouissement technique.
Cette notion de biodgradation et dvaluation de la biodgradabilit doit galement tre considre
pour
lorientation
des
dchets
vers
des
filires
de
traitements
biologiques
pour
la
rduction/limination/stabilisation des dchets solides.

Les textes rglementaires se succdant, il savre qu'aucune dfinition prcise des termes
"biodgradable", "fermentescible", "compostable", "mthanisable" ne soit propose. Paralllement, les
organismes franais, europens et internationaux de normalisation dveloppent des programmes de
recherche visant proposer des mthodes standards d'valuation de la biodgradabilit, mais
principalement aujourd'hui tournes vers des molcules (comme les dtergents) ou des matriaux
spcifiques (comme les plastiques).
A partir de ce constat, cette tude se veut tre une aide la dfinition des termes "biodgradable",
"fermentescible", "compostable" et "mthanisable" dans le domaine de la caractrisation et de la
gestion des dchets organiques solides. Pour cela, il nous est apparu utile de raliser une synthse des
processus biologiques impliqus dans la biodgradation de matrices solides. Cette premire partie
nous permettra de dfinir les termes lis la notion de biodgradabilit. La seconde partie de ltude
sera consacre la prsentation dtaille des procdures et normes d'valuation existantes. Dans un
troisime temps, nous prsenterons en dtail les principaux champs dapplication concerns par
lvaluation de la biodgradabilit des dchets solides dcrits ci-dessus.

10
Partie I : Dfinition gnrale de la biodgradabilit de la

matire organique : Bases biochimiques et
microbiologiques
I.1- Introduction
Il est important de prciser au dbut de cette tude que la notion de biodgradabilit concerne les
matrices constitues en grande partie de matires organiques, savoir la fraction organique des
dchets mnagers ou assimils et les dchets industriels organiques. Conformment au cahier des
charges de ce programme, nous excluons du champ de ltude les altrations microbiennes des dchets
minraux, Par ailleurs, en accord avec les tuteurs de ltude, ce travail aborde uniquement la
biodgradabilit des dchets solides ou boueux que nous dfinissons ici comme possdant un taux de
matire sche respectivement suprieur 15% de la masse brute pour les dchets dits solides , et
compris entre environ 3 et 15% en masse pour les dchets dits boueux . Le cas des dchets liquides
ne sera pas abord au cours de cette tude.
Aprs la dfinition du terme biodgradation, de la notion de biodgradabilit des substances
organiques et des termes qui leur sont couramment associs tels que bioaltration, biodtrioration,
nous prsentons un rapide tour dhorizon des diffrentes activits microbiennes (mtabolismes)
impliques dans les mcanismes nergtiques de dgradation biologique de la matire organique.
I.2- Biodgradation Biodgradabilit biotransformation

Gnralement, les termes lis la notion de biodgradation sont dfinis lchelle molculaire et non
lchelle du matriau et concernent dans la plupart des cas des substrats organiques. Le terme
biodgradation gnralement retenu dans la littrature scientifique correspond une action de
dgradation dun compos organique par des agents biologiques (gnralement microbiens) avec
comme seuls rejets, des produits simples tels que H2O, CO2, CH4, H2, Cl-, mais encore des produits
organiques simples (mtabolites) tels que des acides organiques etc. Si la biodgradation du substrat
organique est totale, cest dire formation uniquement de produits inorganiques tels H2O, CO2, CH4,
H2 , on parle de minralisation (Pelmont, 1993 ; Atlas, 1988). Le terme biotransformation implique
la notion de transformation incomplte dun substrat organique mtabolis qui naboutit donc pas
forcment son assimilation totale (Pelmont, 1993). Il peut sagir par exemple dune oxydation
partielle du substrat qui se traduit par un rejet de produits intermdiaires (mtabolites) dans le milieu.
11
Le terme biodgradabilit regroupe les qualits ncessaires une substance pour subir un processus
daltration microbienne.
Laltration microbienne ou bioaltration concerne non seulement les substances organiques mais
aussi les substances inorganiques et rsulte soit dattaques enzymatiques (action directe des microorganismes), soit de modifications chimiques de lenvironnement tels que le pH, sous-produit du
mtabolisme qui ont pour consquence laltration physique et/ou chimique (action directe)
(Bayard, 1993).
La dtrioration, qui est laction de dtriorer ou son rsultat, dsigne une rduction de qualit ou de
valeur du systme (Gourdon et al, 1996). Ce terme est souvent utilis pour les matriaux solides quelle
les plastiques, les pierres, les pices mtalliques etc. (Bayard, 1993). La biodtrioration se dfinie
alors comme la rduction de qualit, de valeur ou de fonctionnalit du systme considr sous laction
directe ou indirecte et/ou partielle dagents biologiques. Cette notion implique donc une apprciation
du systme en termes de valeur ou de qualit partir des fonctions attribues au systme.
Ainsi, la communaut scientifique propose de distinguer la dtrioration, qui dsigne la rduction ou
perte de fonction dun systme, et laltration ou la dgradation qui concernent les modifications des
structures mcaniques et/ou chimiques (minrales ou organiques) du systme considr et qui peuvent
ou non entraner une rduction des fonctionnalits (dtrioration) du systme.
I.3- Micro-organismes, nutrition et cologie microbienne
I.3.1- Micro-organismes
Pour simplifier, la notion de micro-organisme sera ici limite aux bactries, levures, champignons
filamenteux (moisissures) et algues classs en deux groupes, procaryotes et eucaryotes, lensemble
correspondant grosso modo aux protistes.
-
Eucaryotes ou protistes suprieurs : (algues, protozoaires et champignons). Cellule avec un "vrai"

noyau entour d'une enveloppe nuclaire qui contient deux jeux semblables de chromosomes
(cellule diplode).
Procaryotes ou protistes infrieurs (algues bleu-vert ou cyanophycs et bactries). Cellule

dpourvue d'un vritable noyau tous les stades de son dveloppement, un seul chromosome
porteur de la grande majorit de l'information gntique (cellule haplode).
Les bactries et les algues bleues (ou cyanophyces) sont les plus petits organismes connus (diamtre
1 m, env.), dous de mtabolisme et capables de crotre et de se diviser aux dpens de substances
12
nutritives. Les bactries sont des micro-organismes unicellulaires (voir figure 1). La membrane
cytoplasmique joue un rle fondamental dans les mcanismes de respiration et dchanges chimiques
avec le milieu extrieur. Cest une barrire qui empche la fuite de composs intracellulaires et
contrle la pntration des composes extracellulaires. La pntration des lments nutritifs est soit
passive (diffusion selon la Loi de Fick), soit active (transport actif) avec lintervention de protines de
transport, appeles permases, prsentes au niveau de la membrane cytoplasmique.
ADN chromosomique (noyau bactrien)
ADN plasmidique ( ventuel)
Pili
Paroi
Membrane
cytoplasmique
Cytoplasme
Organe locomoteur : flagelle (ventuel)
Ribosome
Capsule (ventuelle)
Figure 1 : Schma gnral dune bactrie.

Les moisissures ou champignons filamenteux sont des micro-organismes eucaryotes mtabolisme
arobie. Dpourvus de pigments chlorophylliens, ils sont incapables d'effectuer la photosynthse des
algues ou des plantes suprieures. Ils tirent leur nergie de l'oxydation de composs organiques. On
les rencontre en trs grand nombre sur la matire organique en dcomposition. Les moisissures sont
des champignons caractriss par une structure myclienne. Leur appareil vgtatif se prsente sous
forme de filaments (hyphes) ramifis, qui constituent le myclium (ou thale) qui peut atteindre
plusieurs mtres de longueur. L'organisation cellulaire est cnocytique : Ces filaments sont des tubes
constitus de parois chitineuses qui constituent une enveloppe protectrice de la masse cytoplasmique
mobile contenant de nombreux noyaux. Les hyphes laissent apparatre des cloisons transversales qui
laisse supposer que ces filaments sont constitus de cellules spares des unes des autres. En fait, les
cellules communiquent entre elles par un pore central.

13
Paroi chitineuse
Noyau
Cytoplasme
Pore
10 m
Figure 2 : Schma de la structure filamenteuse des moisissures.

Contrairement aux bactries qui peuvent disposer de flagelles, les champignons sont incapables de se
dplacer cause de la rigidit des parois des hyphes. Leur dveloppement sur un substrat solide
conduit rapidement un myclium macroscopique gnralement visible. La reproduction a lieu par
production de spores. Elle peut tre sexue ou asexue.
Les levures sont une branche des champignons mineure en nombre d'espces (seulement 350 espces
rparties dans 39 genres). Les levures sont des champignons qui ont perdu la proprit de former un
myclium et qui sont devenus unicellulaires. Depuis des sicles, les levures sont utilises par
l'homme pour produire des boissons alcoolises, pour la panification Elles se dveloppent
principalement dans les milieux riches en sucres. Elles sont robustes, peu exigeantes et croissance
rapide. Sur la figure 3, on voit que, en plus des constituants de la cellule procaryote, on a une
membrane nuclaire, des mitochondries (sige des ractions d'oxydo-rduction, stockage d'ATP),
des structures de reticulum endoplasmique (rle dans l'anabolisme, stockage), et l'appareil de Golgi
(anabolisme pour synthse de complexes polymriques). Notons que les levures ont un mtabolisme
anarobie facultatif. Les levures se reproduisent gnralement par bourgeonnement (processus
asexu).

14
Paroi
Noyau
Membrane cytoplasmique
Nuclole
Mitochondrie
Membrane nuclaire
Reticulum endoplasmique
Ribosomes
Liposome
Polysomes
Appareil de Golgi
Vacuole
1 m
Figure 3 : Schma dune cellule de levure, Saccharomyces cerevisae.
I.3.2- Nutrition et croissance microbienne

I.3.2.1- Introduction
Les micro-organismes se dveloppent et se divisent pour donner naissance des bactries filles qui
hritent de la cellule-mre du mme potentiel d'activit. La croissance microbienne n'est possible que
dans le cas o les micro-organismes peuvent satisfaire leur besoins nutritifs dans leur environnement.
I.3.2.2- Nutrition des micro-organismes
Leurs exigences nutritives aussi varies que la nature des habitats o ils vivent : sol, eau Les
substances lmentaires sont les matriaux constitutifs de la cellule. Les substances nergtiques
permettent la cellule de raliser la synthse de ses propres constituants. Il existe donc un certain
nombre de contraintes nutritionnelles pour permettre un optimum de croissance des microorganismes :
- Les aliments constitutifs pour leurs constituants cellulaires : eau, C, H, N, O, S, P, etc.,
- Les sources d'nergies : lumire ou substances chimiques (organiques et/ou inorganiques),

15
- Les nutriments spcifiques, appels facteurs de croissance car ce sont des substances
indispensables, les micro-organismes tant incapables de les synthtiser eux-mmes.
Ainsi, grce aux aliments qu'on lui fournit et qu'elle dgrade, la bactrie synthtise ses propres
constituants organiques. L'ensemble des changes chimiques qui se produisent alors au niveau
cellulaire constitue le mtabolisme. Les multiples ractions assurant la dgradation d'un substrat
librent simultanment de l'nergie qui servira la biosynthse, la croissance et la reproduction.
Les aliments constitutifs des micro-organismes sont prsents dans le tableau 1 suivant.
Tableau 1 : Les aliments constitutifs des micro-organismes.
Constituant
Rle
Eau
75% du poids cellulaire,

si teneur < 50%, dveloppement limit.
Carbone
45-50% du poids sec cellulaire,

Micro-organismes autotrophes : capables de synthtiser leurs constituants
organiques partir de CO2 ou de bicarbonates,
Micro-organismes htrotrophes : besoin de substances organiques pour se
dvelopper (la majorit des bactries).
Azote
5-10% du poids sec cellulaire,

Quelques bactries fixatrices d'azote (N2) : Rhizobium sp, Azotobacter sp,
Azote utilis sous la forme de nitrates, nitrites (Nitrobacter sp) ou ammonium, mais
principalement, utilisation de l'azote sous forme organique (R-NH2).
Phosphore
3% du poids sec cellulaire,

Constituant des acides nucliques (ADN, ), phospholipides, et des substances
nergtiques telles que ATP.
Soufre
1-2% du poids sec cellulaire

Constituant des acides amins des protines (Cystine et mthionine, S sous la
forme de groupements thiols -SH). Assimilation sous la forme de sulfures (S2-).
(rem. : Oxydation du soufre par Thiobacillus sp : transfert d' des sulfures ou du
soufre vers l'O2 .
Na, K, Mg, Cl,
Rle dans l'quilibre physico-chimique des cellules,
Fe, Mg,
Constituants de certains enzymes et coenzymes (cytochromes, chlorophylles, ).
Ca, Mg, Mn, Cu,
Oligo-lments indispensables sous forme de traces comme cofacteur ou activateur

d'enzymes.
I.3.2.3- Croissance des micro-organismes

La croissance est dfinie comme laccroissement ordonn de tous les composants dun organisme.
Dans le cas de micro-organismes unicellulaires tels que les bactries et les levures, le phnomne de
16
croissance se caractrise par une augmentation du nombre dindividus, entranant progressivement une
modification des caractristiques du milieu de culture (appauvrissement en nutriments, enrichissement
en mtabolites, variation du pH, du potentiel doxydo-rduction ou de la conductivit). Sans
renouvellement du milieu, on assiste un appauvrissement du substrat consommable et un
enrichissement en mtabolites (produits intermdiaires ou finals du mtabolisme). Dans un milieu
liquide homogne, agit et non renouvel, la courbe de croissance microbienne prsente six phases
successives.
Nombre de organismes vivants [X]
6
3
5
d[X]/dt = vitesse de croissance
2
d[X]/([X].dt) = vitesse
spcifique de croissance
Temps d'incubation en heure (t)
Figure 4: Courbe de croissance d'une culture bactrienne

-
La phase 1 correspond une phase de latence durant laquelle les micro-organismes sadaptent au
milieu de culture en synthtisant les enzymes dont ils auront besoin pour coloniser ce substrat. La
dure de cette phase dpend de la nature du substrat et de la "qualit" de lensemencement.
Durant la phase 2, le nombre dorganismes et la vitesse spcifique de croissance (ou taux de

croissance) augmentent.
Au-del dune certaine concentration en substrat (Loi de Monod, 1942), le taux de croissance
demeure constant tandis que le nombre dindividus continue daugmenter. (phase 3).
Au cours de la phase 4, on assiste un puisement du substrat et une accumulation de

mtabolites pouvant tre toxiques.
La phase 5 est une phase stationnaire durant laquelle le nombre dorganismes nouveaux quilibre
parfaitement le nombre de "morts".

17
I.3.3- Notions gnrales dcologie microbienne et facteurs dinfluence de la

croissance
I.3.3.1- Introduction lcologie microbienne
La croissance, la multiplication et la mort des micro-organismes sont influencs par un grand nombre
de conditions environnementales favorables ou dfavorables leur dveloppement (Atlas, 1988). Quel
que soit lenvironnement naturel considr (on parle galement de biotope), une espce microbienne
nest jamais seule. Bien au contraire, elle doit cohabiter ou disparatre face la concurrence
dautres espces microbiennes de caractristiques mtabolites, physiologiques et nutritionnelles qui
peuvent tre parfaitement identiques, similaires ou compltement diffrentes. Lensemble des microorganismes prsents dans un cosystme donn est appel communaut. La communaut est donc un
assemblage de populations microbiennes qui coexistent et inter-agissent les unes entres elles dans un
mme habitat (cohabitation). Un cosystme est un systme autonome incluant les micro-organismes
dune communaut et lenvironnement physico-chimique de cette communaut (Atlas, 1988 ;
Alexander, 1997). Chaque population de la communaut occupe un espace fonctionnel , galement
appel niche cologique au sein de la communaut. Cette notion de niche fonctionnelle est galement
lie la notion de microhabitats qui correspondent des sous-systmes bio-physico-chimiques
particulier au sein de lcosystme ou biotope.
Dune grande diversit mtabolique, les espces microbiennes ne se dveloppent pas toutes dans les
mmes conditions. Chaque espce, voir chaque souche microbienne, a ses propres tolrances pour
chaque paramtre environnemental spcifique en fonction de ses capacits physiologiques et
gntiques (Atlas, 1988). Evidemment, dans une communaut biologique et dans un cosystme
donn, il existe de nombreux types dinteractions entre les diverses populations microbiennes. Il peut
sagir soit dinteractions bnfiques, soit dinteractions dfavorables pour une population donne. Les
principales interactions possibles sont dcrites dans le Tableau 2 suivant.
Tableau 2 :Principales interactions possibles entres diffrentes populations dans un systme
donn (daprs Atlas, 1988 ; Alexander, 1994, 1997).
Interaction
Commensalisme
Comtabolisme
Synergisme (ou
protocoopration)
Description
Interaction unidirectionnelle entre deux populations au bnfice de lune dentre elles.
Exemple : modification dun paramtre physique de lcosystme permettant de crer les conditions
favorables de dveloppement dune autre population microbienne
Transformation dune substance chimique sans profit direct pour le micro-organisme.
Exemple : Cest le cas de nombreuses bactries qui, synthtisant certaines enzymes tels que les
oxygnases pour oxyder et assimiler un premier substrat, vont involontairement oxyder un deuxime
substrat organique qui pourra tre assimil par une autre bactrie.
Coopration bnfique entre deux populations microbiennes sans ncessit dassociation directe.
Exemple : deux populations capables de survivre indpendamment qui se dveloppent avec plus de
facilit conjointement (bnfice bidirectionnel).

18
Syntrophisme
Symbiose ou
mutualisme)
Comptition
Exclusion comptitive
Antagonisme
Cas particulier de synergie o les deux populations microbiennes assurent lune part rapport lautre
leur besoin nutritionnel, de manire indispensable.
Coopration bnfique avec ncessit dune relation directe entre une population microbienne et un
autre organisme. Le mutualisme est une relation synergique particulire.
Exemple : Fixation de lazote par des bactries associes au systme racinaire de certaines plantes
dites fixatrices dazote
Interaction ngative entre deux populations aux dpends de lune dentre elles ou des deux.
Exemple : cest le cas de nombreuses bactries qui utilisent dans un cosystme les mme ressources
nutritives (en particulier, le mme substrat organique).
Comptition particulire entre deux populations occupant la mme niche cologique mais qui nont
pas forcment le mme rle fonctionnel. Cette comptition se traduit par une occupation de la niche
par une population microbienne au dpend de lautre
Interaction ngative entre une population dont le dveloppement inhibe la croissance dune autre
population.
Exemple : Il sagit trs souvent de mtabolites (produits secondaires ou dchet du mtabolisme)
synthtiss par une espce qui ont pour effet dinhiber la croissance dune autre espce.
I.3.3.2- Facteurs environnementaux

Les conditions physico-chimiques de croissance des micro-organismes dpendent de
l'environnement (temprature, pression).
Tableau 3 : Facteurs physico-chimiques de croissance des micro-organismes.
Facteurs
Rle
Temprature
- Organismes psychrophiles : temp. optimale < 1C

- Psychrotrophes : temp. optimale entre 5 et 15C,
- Msophiles : temp. optimale entre 20 et 40C,
- Thermophiles : temp. optimale > 50C.
- pH optimal compris entre 3 et 6 pour les champignons
Neutralit pour la plupart des bactries. Cependant, certaines bactries sont
acidophiles (Thiobacillus thiooxidans avec optimum de croissance pour
pH = 2) ou basophiles (certains Vibrio)
Arobie ou Anarobie (stricte ou facultative)
Dtermine la pression osmotique
Micro-organismes halophiles qui se dveloppent dans les saumures
pH
Oxygne
Salinit
Le caractre biodgradable d'un matriau solide organique ou dune molcule organique dpend d'un
certain nombre de facteurs externes et de paramtres, caractristiques intrinsques au matriau. Ainsi,
en 1992, un rapport de l'association Record (Association RECORD, 1992) proposait une srie de
quatre grandes causes pour expliquer le caractre rcalcitrant de certaines molcules la
biodgradation. Globalement les deux premires causes rejoignent ce qu'on a dsign prcdemment
par "paramtre intrinsque", les deux dernires par le terme "facteur externe".
Plus que de rechercher la biodgradabilit d'un matriau, beaucoup d'tudes s'efforcent de mettre en
avant les critres qui empchent une molcule, un matriau, de se dgrader sous l'action de microorganismes dans un dlai donn.

19
Causes chimiques :
- Poids molculaire, structure, charge : les composs faible masse molculaire et/ou structure
chimique linaire sont plus facilement biodgradables. De mme l'adhsion des micro-organismes peut
tre favorise par l'existence de forces de type Van der Waals et les interactions lectrostatiques.
- Nature, nombre et position des substituants : le Tableau 4 donne quelques exemples de
substituants influenant favorablement ou non la biodgradabilit de la molcule.
Tableau 4. Substituants influenant la biodgradabilit des substrats organiques.
Substituants
dgradation
favorisant
la Substituants gnant la dgradation
OH
COOH
Cl
NH2
NO2
OCH3
CF3
SO3H
Causes physico-chimiques :
-
Solubilit,
Aptitude former ou non des mulsions,
Etat physique inadapt (solide, liquide, gazeux),
Aptitude s'adsorber sur des surfaces,
Aptitude former des liaisons ioniques ou covalentes avec les supports.
D'une manire gnrale, toutes les caractristiques physico-chimiques qui tendent augmenter la
disponibilit et la surface de contact entre le substrat et les micro-organismes facilitent la
biodgradation dudit substrat. Par exemple, un corps soluble sera plus facilement mis disposition de
micro-organismes prsents dans l'environnement aqueux.
Causes environnementales :
-
Concentration trop faible, trop grande ou trop variable. En effet si le substrat dgrader n'est
prsent qu'en trs petite quantit, sa disponibilit auprs des micro-organismes sera limite. A
l'oppos, s'il est surabondant, la faune bactrienne ne pourra plus rpondre efficacement, la
syntrophie ncessaire au bon fonctionnement des processus de dgradation, aborde dans le
paragraphe prcdent, sera brise.
pH : le pH optimal pour les champignons est compris entre 3 et 6. En revanche la plupart des
bactries se dveloppent un pH proche de la neutralit. Ainsi, par exemple, l'activit actogne
est optimale pour des valeurs de pH 7 7,4. (Gourdon, 1987). Seules les bactries acidognes

20
supportent des pH infrieurs 6 et s'adaptent facilement des pH de l'ordre de 4 [20]. Dans le cas
de la mthanisation, les populations les plus sensibles aux variations de pH sont les actognes
(optimum 7,2) et les mthanognes (optimum entre 7 et 8). Les mthanognes sont fortement
inhibes en dessous de 6,5. En milieu trop acide (pH<6) il y a inhibition de la mthanogense et de
l'actogense pouvant entraner l'accumulation d'acides organiques (20).
-
Temprature : on peut distinguer quatre classes d'organisme selon leur tolrance une certaine
plage de temprature. Les psychrophiles dont la temprature optimale est infrieure 1C, les
psychrotrophes entre 5 et 15C, les msophiles entre 20 et 40C et les thermophiles puis
thermophiles extrmes au-del de 60C.
Tableau 5 : Classification physiologique des bactries en fonction de la temprature [30].

Type physiologique
Temprature de croissance (C)

minimale
Maximale
Psychrophile
20
Msophile
>20
< 40
Thermophile modr facultatif
> 41
> 55
Thermophile modr obligatoire
> 55
75
Thermophile extrme
(hyperthermophiles)
> 60
> 80*
(* optimum > 80)
Selon Hartz et al. (1982), la temprature msophile optimale pour la dgradation des ordures
mnagres est comprise entre 35 et 41C. La mthanogense et plus gnralement la croissance
anarobie est relativement lente une temprature infrieure 20C. La temprature est donc un
facteur important surveiller lors de la dgradation de la matire organique, mais il convient de noter
que l'volution de la temprature peut tre aussi une consquence de cette activit microbienne.
-
Aw (water activity) : toutes les bactries ont besoin d'eau pour leur croissance et leur
reproduction. La disponibilit de l'eau est un facteur important de la croissance bactrienne. Par
dfinition, l'eau distille pure a une activit en eau (Aw) de 1,0. Le paramtre Aw est un indicateur
de la quantit d'eau qui est disponible pour les ractions. Elle est quivalente la notion
d'humidit relative dans l'atmosphre. Des phnomnes d'adsorption ou de solubilisation peuvent
rduire la disponibilt de l'eau et donc Aw. Par exemple, une solution sature de NaCl a une
activit en eau de 0,8, l'eau de mer de 0,98. La plupart des bactries ont besoin d'une activit en
eau suprieure 0,9 pour leur mtabolisme (Atlas, 1988). Un dveloppement microbien n'est
possible que dans des milieux ayant des activits en eau comprises entre 0,6 et 0,99 environ
(Gourdon et al, 1996).

21
Potentiel rdox : selon le potentiel oxydant ou rducteur du milieu tudi, certaines ractions
pourront se raliser ou, au contraire, seront impossibles. Cela joue donc galement un rle
important dans la biodgradation de la matire organique. Mais, comme pour la temprature, il
faut noter que l'activit microbienne peut faire varier ce potentiel. Ainsi, une croissance extensive
de bactries htrotrophes utilisant l'oxygne disponible fait baisser le potentiel rdox du milieu de
manire significative (Atlas, 1988).
Nutriments : certains composs comme le calcium, le magnsium, le sodium ou le potassium

stimulent la mthanogense (Gendebien et al., 1992). De mme certains mtaux l'tat de trace
comme le fer, le cobalt, le molybdne, le slnium ou le tungstne stimulent la mthanogense. En
1990, Graindorge montrait que le nickel tait indispensable la croissance des bactries
mthanognes (Graindorge, 1990).
Prsence d'inhibiteurs : certaines molcules trangres aux ractions tudies mais prsentes
dans le milieu peuvent limiter la capacit mtabolique de la micro-faune. Il convient alors de
distinguer les substances interdisant totalement ces ractions de celles qui ne font que les ralentir.
En 1982, Taylor indiquait comme principaux inhibiteurs potentiels de la mthanogense, les
mtaux lourds, les hydrocarbures chlors, les AGV, les dtergents, les substances analogues au
mthane (chloroforme, etc), l'ammoniaque, les oxydants tels que l'oxygne. Un mme compos
pouvant tre toxique ou non (voire mme bnfique et indispensable l'tat de trace) en fonction
de sa concentration et de sa disponibilit dans le milieu.
Causes biologiques :
Absence de la microflore approprie,
Absence d'enzymes exocellulaires ou d'agents mulsifiants,
Incapacit des micro-organismes mtaboliser le produit par impossibilit d'induire les enzymes,
les systmes transporteurs ncessaires ou par production d'intermdiaires mtaboliques
terminaux toxiques.
Enfin le facteur temps est largement prendre en compte dans ces phnomnes de biodgradation.
Beaucoup de molcules peuvent subir une dgradation par des micro-organismes, mais parfois trs
long terme. La notion de biodgradabilit sera donc nuancer en la confrontant la dure d'incubation
ncessaire la dgradation de la molcule ou du dchet envisag. Notons toutefois ici que le caractre
"acceptable" d'un dlai de dgradation est largement dtermin par les contraintes conomiques ou
environnementales du scnario considr.

22
I.4- Mtabolismes nergtiques

Les micro-organismes se dveloppent et se multiplient grce leur mtabolisme nergtique bas sur
des ractions doxydo-rduction. On appelle mtabolisme nergtique lensemble des ractions et
changes chimiques qui se produisent au niveau cellulaire pour permettre la cellule de retirer et
transformer lnergie ncessaire sa vie. On parle de catabolisme pour les ractions de dgradation
qui fournissent la cellule nergie et matire, et danabolisme pour les ractions de biosynthse
(Gourdon et Bayard, 1998). Les ractions doxydo-rduction, cest dire de transfert dlectrons et de
protons, entre un substrat donneur (oxyd) et un ou des accepteurs (rduits) librent en effet de
lnergie en quantit proportionnelle la diffrence de potentiel des couples redox mis en jeu.
Pour quune raction doxydation puisse avoir lieu, il est indispensable quune substance (accepteur)
puisse dans les conditions du milieu se rduire et ainsi capter les lectrons (et gnralement les
protons) librs par la raction doxydation. Cela est thermodynamiquement possible si le potentiel du
couple donneur est infrieur celui du couple accepteur.
Le mtabolisme microbien est constitu de la somme totale des ractions doxydo-rduction de
dgradation ou de synthse molculaire effectues au niveau de la cellule (Leclerc et al, 1983). En fait,
lanabolisme et le catabolisme sont des phnomnes troitement lis tant donn que lnergie
rcupre au cours de loxydation des substrats inorganiques et/ou organiques permet de fournir
lnergie et les molcules intermdiaires (mtabolites) ncessaires la biosynthse de nouvelles
molcules constituant le matriel cellulaire. La diversit des conditions environnementales de la
plante explique la (bio)diversit du monde microbien et la varit et complexit des mtabolismes
nergtiques. Les besoins nergtiques peuvent tre satisfaits soit par la photosynthse o la lumire
est la source dnergie (cas des algues et des bactries photosynthtiques), soit par loxydation des
substances chimiques (voir Figure 5). Les diffrents types de mtabolisme permettent de classer les
micro-organismes en trois catgories trophiques :

23
Lumire
ANABOLISME
Mobilit
Anabolisme
Energie
Catabolisme
Matriel
Cellulaire
Chaleur
Oxydation de substances
chimiques
CATABOLISME
Figure 5 : Mtabolisme nergtique.

-
Autotrophe / htrotrophe : contrairement un autotrophe, un micro-organisme htrotrophe ne

peut pas utiliser le CO2 comme source de carbone. Il doit donc oxyder des composs organiques
afin de rcuprer le carbone qui les compose.
Phototrophe / chimiotrophe : les organismes phototrophes utilisent la lumire comme source

dnergie, tandis que les chimiotrophes la tirent de loxydation des composs chimiques.
Organotrophe / lithotrophe : les organotrophes utilisent, comme substrat nergtique, des

composs organiques. Les micro-organismes lithotrophes utilisent des composs minraux
(inorganique).
Les micro-organismes impliqus dans la biodgradation sont dpourvus doutils mtaboliques leur
permettant dutiliser la lumire comme source dnergie (photosynthse possible seulement avec des
pigments photosynthtiques). Ils utilisent donc a fortiori lnergie libre partir des ractions
doxydation de substrats organiques et inorganiques appels alors donneurs dlectrons. Les ractions
se produisent dans le sens qui permet une libration d'nergie (G < 0), c'est dire si le transfert
d'lectrons s'effectue en remontant les potentiels, des valeurs ngatives vers les valeurs positives. Elles
ncessitent cependant lintervention des enzymes, catalyseur chimiques de nature htroprotique,
synthtiss par les micro-organismes. Les enzymes sont constitues dune partie protique
24
(apoenzyme) qui, par sa conformation, donne la spcificit de lenzyme vis vis de son substrat, et
dune partie minrale ou organique (coenzyme) qui dtermine le type raction chimique catalys par
lenzyme. Dans le cas par exemple des dshydrognases, les coenzymes assurent le transfert successif
des lectrons et des protons du substrat oxyd vers laccepteur final.
100 mV
-
Accepteur de
Red 1
(B/BH2)
E1 (avec E1 > E2)
Ox 1
(B)
Ox 2
(A)
E2
Red 2
Donneur de-
(A/AH2)
100 mV
Bilan :
A/AH2
B/BH2
couples :
nergie
A/AH2
B/BH2
Figure 6 : Principe gnral des ractions doxydo-rduction.

On dfinit Eo comme le potentiel standard pH = 7, lorsque la forme oxyde et la forme rduite sont
concentration molaire, 25C, et la pression de 1 bar. Les lectrons sont transfrs du donneur sous
la forme rduite (Red 2 ou substrat sous la forme AH2, voir Figure 6) vers l'accepteur sous la forme
oxyde (Ox 1 ou substrat sous la forme B). L'opration produit de l'nergie si le potentiel du couple
Ox2 / Red2 (ou A/AH2) est infrieur celui du couple Ox1 / Red1 (B/BH2). Plus grande est la
diffrence entre Eo1 et Eo2, plus grande est l'nergie produite. Le transfert des lectrons et des protons
du donneur vers l'accepteur est en fait ralis par toute une srie dtapes par lintermdiaire de
catalyseurs enzymatiques tels que les dshydrognases et les coenzymes qui forment une chane de
25
transport lectronique (voir Figure 7) Ce sont les coenzymes (cytochromes, etc) qui jouent le rle
d'accepteurs et de donneurs intermdiaires.
Subtsrat donneur
dhydrogne
Co
AH2
Co H2
Co
BH2
Accepteur
dhydrogne
Substrat oxyd
Co H
Enzyme
Co
Co H
Coenzymes
Figure 7 : Chane de transport lectronique.

Ainsi, de nombreuses substances peuvent tre utilises comme source dnergie. Les microorganismes chimio-organotrophes sont capables de dgrader les substances organiques naturelles ou
xnobiotiques pour se procurer lnergie et le carbone organique ncessaire leur croissance. Cest la
principale catgorie trophique susceptible dtre implique dans la biodgradation des dchets solides
et semi-solides contenant de la matire organique.
I.5- Respiration arobie, anarobie, et fermentations

La chane lectronique de transfert des lectrons est universelle pour tous les organismes vivants. La
nature de laccepteur final dlectrons et de protons dtermine le type respiratoire des microorganismes. On distingue trois catgories :
Si l'accepteur est l'oxygne (O2), les micro-organismes sont dits arobies stricts. C'est le cas
des moisissures (champignons filamenteux) et d'un grand nombre de bactries. Le
mtabolisme correspondant est la respiration (arobie). L'oxygne est l'accepteur le plus
favorable par suite de son potentiel lev (E'o = + 810 mV).
Si l'accepteur est une substance minrale autre que O2, on a affaire aux micro-organismes
arobie/anarobie facultatifs (levures, certaines bactries) ou anarobies strictes
(uniquement des bactries). On parle de respiration anarobie (laccepteur final nest ni O2,
ni un compos organique). C'est le cas par exemple de la respiration sur nitrates (NO3-),
utilise quand l'oxygne n'est plus disponible en quantit suffisante.
Si l'accepteur est une substance organique, on a le mtabolisme de fermentation ralis par
des micro-organismes anarobie stricts ou facultatifs. La fermentation est l'ultime procd
lorsqu'une respiration n'est pas possible (dans le cas de l'absence d'un accepteur minral). La
fermentation gaspille beaucoup de substrats pour un rendement nergtique mdiocre.
En milieu arobie, le couple O2/H2O, de potentiel +810 mV par rapport de lENH (lectrode normale
hydrogne) autorise loxydation de beaucoup de substrats et est donc couramment utilis par des
organismes chimiotrophes que lon qualifie alors darobie. Une distinction est faite entre les
26
organismes arobies stricts qui ne peuvent se passer doxygne et les arobies facultatifs qui peuvent
utiliser, dfaut, dautres accepteurs dlectrons.
I.6- Biodgradation de la matire organique
I.6.1- Cycle biogochimique du carbone - Gnralits

La matire organique naturelle est dfinie comme la matire spcifique des tres vivants vgtaux et
animaux est dnomme biomasse (Mustin, 1987). La biomasse dsigne donc lensemble de la matire
organique dorigine vgtale ou animale, morte ou vivante. Lorigine de la biomasse primaire est la
photosynthse qui correspond la synthse de molcules organiques partir dlments minraux en
utilisant lnergie solaire. Seules les plantes et certains micro-organismes telles que les algues sont
capables deffectuer la photosynthse. On distingue la biomasse dite renouvelable correspondant la
matire produite sur la plante (forts, cultures, animaux sauvages et dlevages, organismes du sol,
etc.)et la biomasse dite fossile (charbon, ptrole, etc) galement issue de la biomasse classique
mais accumule pendant les temps gologiques (Mustin, 1987).
La matire organique circule le long de chanes alimentaires (chanes trophiques) trs complexes
qui font intervenir des organismes suprieurs et infrieurs tels que les micro-organismes et de
nombreux compartiments de la biosphre. Le terme de cycles biogochimiques est actuellement
utilis pour ltude du transport et la transformation des substances naturelles dans lenvironnement
(biosphre) (Butcher et al, 1994). La matire organique fait partie du cycle biogochimique du
carbone.
Le sol constitue un compartiment trs important du cycle du carbone en tant que rservoir du carbone
organique. Le sol est la formation superficielle qui recouvre l'corce terrestre. Il se forme sous l'effet
de l'altration de la roche-mre (ou minraux primaires) soumise des agressions physico-chimiques,
mcaniques et climatiques (temprature, humidit...) et biologiques (Duchaufour, 1991). Le sol est un
cosystme biogodynamique complexe dassimilation du carbone atmosphrique sous la forme de
CO2 (assimilation par les organismes autotrophes et photosynthtiques : biosynthse), de
biodgradation et de biotransformation et de la matire organique (Butcher et al, 1994). Dans le
domaine de la gestion et du traitement des dchets organiques, il joue un rle central en tant que
rcepteur potentiel des dchets organiques traits ou non traits.

27
I.6.2- Biodgradation de la matire organique

I.6.2.1- Aspects gnraux
Les processus mtaboliques de l'ensemble des tres vivants reposent sur la biodgradation de la
matire organique. Par exemple, la respiration (dgradation oxydative) produit de l'nergie partir de
matire organique selon l'quation suivante :
C6 H12O6 + 6 O2 6 CO2 + 6 H 2O +
ENERGIE
La circulation de la matire organique le long de chanes trophiques (ou chane alimentaire) est lie
ces phnomnes alimentaires et nergtiques. Le dernier maillon de ces chanes est constitue par les
dcomposeurs qui dgradent la matire organique (djection, tissus morts) non-consomme par les
autres organismes, ampchant ainsi son accumulation : c'est ce mcanisme de dgradation biologique
par l'action de micro-organismes que l'on nomme biodgradation. Les voies cataboliques suivies au
cours de la dgradation de la matire organique dpendent principalement de la concentration en
oxygne, c'est--dire des conditions d'arobiose, d'anarobiose ou d'anoxie du milieu.
- Catabolisme arobie :
Les ractions de dgradation oxydatives consomment l'oxygne du milieu. Ces ractions tant
fortement exothermiques. Elles peuvent s'accompagner d'une lvation de la temprature. Le
mtabolisme arobie peut se poursuivre jusqu' minralisation complte des substrats biodgradables
et conduit alors des mtabolites finaux correspondant aux formes oxydes des diffrents lments
constitutifs de la matire organique (C, H, N, P, S) : dioxyde de carbone, eau, carbonates (CO32-),
bicarbonates (HCO3-), nitrates (NO3-), phosphates (PO43-), sulfates (SO42-) (Vincent, 1991, cit par
Robles-Martnez, 1999).
- Catabolisme anarobie :
L'volution anarobie de la matire organique est relativement complexe et dpend beaucoup de sa
nature, de l'humidit, de la temprature ambiante et du pH du milieu. Les produits terminaux sont
essentiellement le mthane (CH4), le dioxyde de carbone, l'eau et l'ammoniac. En 1983, Ehrig
proposait une formule gnrale pour la dgradation anarobie des molcules organiques complexes :
CnHaObNd + (n-a/4-b/2+d) H2O
d NH4 + (n/2+a/8-b/4-d/2) CH4 + (n/2-a/8+b-4+d-2) CO2
La dgradation anarobie de la matire organique comporte quatre phases distinctes :

28
- Phase d'hydrolyse : les biopolymres (polysacharides, lignine, protines, acides nucliques, lipides)
sont hydrolyss en oligomres et monomres (sucres simples, acides amins, acides gras et
glycrol) qui pourront ensuite servir de substrats aux micro-organismes.
- Phase d'acidogense : des bactries acidognes dgradent les acides gras, acides amins et sucres
pour donner des acides gras volatils (AGV) tels que l'acide actique, propionique ou butyrique (courte
chane carbone) mais aussi des alcools, du dioxyde de carbone ou du dihydrogne. La flore acidogne
est constitue pour une partie de bactries anarobies facultatives (genres Streptocoques, Bacillus,
Micrococcus) mais aussi de bactries anarobies strictes (genre Clostridium).
- Phase d'actogense : les AGV et alcools forms prcdemment sont transforms en actate,
dioxyde de carbone et dihydrogne par un groupe htrogne de trois populations bactriennes : les
bactries fermentatives (genres Selenomonas, Clostridium, Ruminococcus), les bactries productrices
obliges d'hydrogne (OHPA en anglais) (genres Syntrophomonas, Syntrophobacter). Cette flore
neutrogne peut tre inhibe fortement en cas d'accumulation d'AGV (baisse du pH) si les bactries
actognes ne parviennent pas dgrader suffisamment rapidement la production de la phase
d'acidogense.
- Phase de mthanogense : phase strictement anarobie durant laquelle l'acide actique et les autres
composs simples produits sont transforms en dioxyde de carbone et en mthane. Deux voies
simultanes de production de mthane sont possibles, l'une directement partir d'actate ou de
mthanol (actoclastie), l'autre par rduction de l'ion bicarbonate (HCO3-) par l'hydrogne produit lors
des tapes prcdentes. Selon le substrat, on observe alors les ractions suivantes (Dumont et
al.,1993) :
4H2 + CO2 CH4 + 2H2O
CH3COOH CH4 + CO2
HCOOH + 3H2 CH4 + 2H2O
CH3OH + H2 CH4 + H2O
Comme pour la phase d'actogense, un pH trop acide inhibe cette flore neutrophile. Dans un milieu
riche en sulfates (SO42-), la mthanogense peut tre concurrence par un phnomne de sulfatorduction, processus biochimique de respiration anarobie correspondant un transfert d'lectrons et
de protons partir d'un corps rducteur, substrat organique ou hydrogne molculaire, vers un
accepteur minral, l'ion sulfate SO42- (Dumont et al.,1993).
4H2 + SO42- + H+ HS- + 4H2O
CH3COOH + SO42- CO2 + HS-HCO3- + H2O
2CH3CHOCOOH + SO42- 2CH3COOH + 2CO2 + S2- + 2H2O
29
2CH3C2H4COOH + SO42- + H+ 4CH3COOH + HSLes bactries responsables de cette dgradation sont appeles d'une manire gnrale sulfatorductrices (genres Desulfovibrio, Desulfotomaculum notamment) (Dumont et al., 1993). Ainsi,
travers ces diffrents processus, en milieu arobie ou anarobie, les micro-organismes dgradent la
matire organique en transformant les longues chanes carbones en composs lmentaires, l'eau, le
dioxyde de carbone, le dihydrogne, le mthane
I.6.2.2- Voies cataboliques des molcules organiques
Quel que soit le type respiratoire, les micro-organismes chimioorganotrophes ont pour priorit de
cataboliser des substances organiques leur permettant de se procurer lnergie ncessaire leur
croissance et leur multiplication. Les micro-organismes ont galement besoin de carbone pour
synthtiser leur structure telles que la paroi, la membrane, le noyau, etc. Pour cela, les microorganismes disposent de deux sources possibles de carbone :
-
Carbone minral tel que le dioxyde de carbone (CO2) et les carbonates (CO32-) (uniquement le
cas des bactries autotrophes),
Carbone organique sous toutes ses formes possibles (cas des bactries htrotrophes et des
moisissures). Le catabolisme des substances organiques donne naissance de nombreux produits
intermdiaires destins fournir les pices lmentaires pour la (bio)synthse (anabolisme)
des molcules et macromolcules constituants des cellules. La biodgradation de la matire
organique permet non seulement de fournir le carbone mais aussi lnergie ncessaire leur
dveloppement.
Ces ractions mtaboliques de biodgradation ncessitent l'intervention de catalyseurs biologiques qui

sont prsents l'intrieur des cellules. Elles impliquent les enzymes qui sont des structures protiques
(htroprotines) spcifiques catalysant une raction biochimique donne. On les classe en fonction du
type de raction qu'elles catalysent (hydrolases, oxydo-rductases, transfrases,). Loxydation
arobie d'un substrat organique en dioxyde de carbone (CO2) et en eau (H2O) fournit la cellule bien
plus d'nergie que sa dgradation anarobie. Prenons l'exemple d'un sucre, le glucose (glucide) qui
reprsente la substance nergtique la plus facilement assimilable par les micro-organismes
htrotrophes :
- En arobiose :
C6H12O6 + 6 O2
6 CO2 + 6 H2O
-2830 kJ.mol-1
- En anarobiose :
Fermentation lactique :
C6H12O6
2CH3CHOHCOOH -94 kJ.mol-1
Mthanisation :
C6H12O6
3CH4 + 3CO2
-401 kJ.mol-1
30
Ceci explique l'intrt des traitements anarobies pour la valorisation nergtique d'un substrat
organique (qui peut tre un dchet ou pas). En effet, on rcupre alors un produit contenant une grande
partie de l'nergie stocke dans le substrat de dpart. Par exemple, on rcupre avec le mthane (677 96)/677 = 86% de l'nergie potentiellement contenue dans le glucose. En revanche, seule la
biodgradation arobie peut librer suffisamment de chaleur pour lever la temprature du milieu (cas
du compostage par exemple).
a) Hydrolyse des polymres organiques :
Lassimilation des substrats organiques nest possible que dans la mesure o ils peuvent pntrer
lintrieur de la cellule. La plupart des substrats organiques naturel tant des macromolcules de type
polymres et htropolymres complexes, la biodgradation passe ncessairement par une phase
dhydrolyse partielle des polymres. En effet, la membrane cytoplasmique des micro-organismes tant
impermable aux polymres, les micro-organismes doivent obligatoirement les hydrolyser en
monomres (ou oligomres) qui, eux, pourront diffuser ou tre transports l'intrieur de la cellule.
L'hydrolyse est donc forcment effectue l'extrieur des cellules. Il y a intervention d'exoenzymes,
enzymes hydrolytiques exocellulaires excrts par les micro-organismes. L'hydrolyse des polymres
n'apporte pas d'nergie aux cellules. Lassimilation des substrats nest possible que sils pntrent dans
le cytoplasme aprs avoir travers la paroi et la membrane cytoplasmique. Le schma gnral de
lhydrolyse des polymres organiques est prsent dans la Figure 8.
o n o m r e
P o ly m re
A tta q u e
e n z y m a tiq u e
E x o e n z y m e s
A tta q u e
M
e n z y m a tiq u e
o n o m r e
D im r e
A s s im ila tio n
ic ro -o r g a n is m e s
E n z y m e s m e m b r a n a ir e s
( p e r m a s e s )
Figure 8 : Hydrolyse des polymres organiques.

31
Du point de vue biochimique, la matire organique dorigine naturelle peut tre classe en trois
grandes familles de substances : les glucides, les lipides et les protines.
-
Les substances glucidiques (polysaccharides) constituent le groupe des sucres constitus par
dfinition essentiellement de carbone, doxygne et dhydrogne. Les sucres les plus simples
(monomres ou oses) sont les oses tels que le glucose, le fructose. Le saccharose est un diholoside
constitu par un monomre de glucose et un monomre de fructose. Parmi les polymres
glucidiques les plus courant (polyholosides), citons par exemple lamidon, la cellulose et les
hmicelluloses, la pectine et la chitine. Lamidon est constitu de chanes linaires damylose
(formes de gluco-pyranose, liaisons 1-4) et de chanes ramifies damylopectine (formes de
gluco-pyranose, liaisons 1-6). La cellulose est un polymre linaire de monomres de glucose. Les
hmicelluloses sont des htropolysaccharides non linaires. Citons galement la lignine,
polymre aromatique galement constitu de C,H,O abondamment prsent dans la biosphre
(notamment dans les sols) sous la forme de lignocellulose.
Les lipides sont des esters dacides gras prsents abondamment dans la biosphre. La dgradation
des polymres lipidiques sous laction dexoenzymes particulires (les lipases) conduit la
transformation en acides gras et glycrol, produits de faibles poids molculaires assimilables par
les micro-organismes.
Les protines sont des molcules complexes constitus dacides amins. Ces sous-units de 20
types diffrents sont enchans les uns aux autres par des liaisons peptidiques. Les longues chanes
dacides amins forment des molcules trs complexes (structures tridimensionnelles) de hauts
poids molculaires. Lassimilation microbienne de telles structures ncessite galement
lintervention denzymes (protinases) catalysant la coupure des liaisons peptidiques et la
destruction de larrangement molculaire. Les protines dgrades sont ensuite assimiles sous la
forme dacides amins ou sous la forme de peptides constitus de quelques acides amins.
b) Assimilation des oligomres et des monomres

Lhydrolyse des polymres organiques conduit donc la formation de monomres ou de produits de
faible poids molculaire. Lassimilation de ces fragments est possible par diffusion au travers de la
membrane. Cette assimilation est facilite par une pntration active (consommation dnergie) qui
fait intervenir des enzymes membranaires appeles permases (transporteurs membranaires). La
dcomposition des produits dhydrolyse est effectue dans le cytoplasme de la cellule selon le schma
de la Figure 9 suivante. Le catabolisme permet de fournir lnergie sous forme chimique (ATP) et les
lments de base ncessaires pour la biosynthse (anabolisme) des composs constitutifs de la cellule.

32
Glucides
Hexoses
Lipides
Glycrol
Protines
Acides Gras
Acides Amines
Pentoses
Acide
pyruvique
Fermentation
Actyl-CoA
Cycle de lure
(organismes
Mthanisation
Lactate,
thanol,
CH 4, CO 2,
pluricellulaires)
CO 2, H2O,
Figure 9 : Les principales voies cataboliques.

Le mtabolisme des glucides, des protines et des lipides sera pas dtaill dans ce rapport. La Figure 9
permet de souligner que le mtabolisme suit des voies en partie communes pour les diffrents substrats
nergtiques avec pour mtabolite commun, lactyl-CoA.
I.6.3- Biotransformation de la matire organique

I.6.3.1- Biosynthse
Comme nous lavons dj vu prcdemment, le catabolisme permet de fournir aux micro-organismes
lnergie mais aussi les produits qui leur sont ncessaires la synthse biologique (ou biosynthse)
33
des milliers de composs organiques complexes qui les constituent. Cette biosynthse est galement
appele anabolisme ; catabolisme et anabolisme tant indissociables sous le terme global de
mtabolisme (Leclerc et al, 1983). Comme pour les organismes suprieurs, les molcules constitutives
des micro-organismes sont gnralement des macromolcules complexes telles que les polymres
linaires ou ramifis forms de sous-units (ou monomres). Il sagit de glucides, lipides et de
protines entrant dans la composition de la paroi, de la membrane, du noyau et de tous les lments du
cytoplasme.
En terme de traitement des dchets organiques, la biosynthse peut sapparenter une transformation
biologique (biotransformation) permettant de stabiliser biologiquement (biostabilisation) une
matire organique pour rduire les pollutions et les nuisances associes son caractre biovolutif
(Gourdon, 2001). Cette matire organique est en effet transforme sous la forme dune biomasse
microbienne chimiquement et biologiquement plus stable.
I.6.3.2- Biostabilisation dans les sols : processus dhumification de la matire organique
La matire organique sincorpore lentement dans les sols par le processus dhumification qui conduit
la formation dune matire organique stable appele humus (Bonneau et Souchier, 1994). Prsente
naturellement dans les sols, on distingue deux types de matire organique :
- La fraction organique vivante compose de la microflore du sol, de sa faune et des racines des
plantes suprieures,
- La fraction organique morte constitue des dbris organiques, d'origine animale ou dorigine
vgtale, plus ou moins dcomposs en humus sous l'action des micro-organismes du sol.
Les matires humiques proviennent de la dcomposition et de la rorganisation des matires
organiques contenues dans les sols (Wershaw, 1993). Les agents microbiens prsents dans le sol
jouent un rle important dans la dgradation des matires organiques (Domergues et Mangenot, 1970).
La matire organique frache (MOF) constitue la matire premire de lhumus. Elle est forme de
dchets vgtaux et animaux prsents dans les sols. Ces biomolcules de types polyphnols,
carbohydrates, protines et lipides se dcomposent tout dabord sous laction de micro-organismes
puis se condensent sous la forme de macromolcules qui constituent lhumus. La Figure 10 reprsente
schmatiquement le processus dhumification de la matire organique dans les sols.

34
Matire organique frache
Micro-organismes
enzymes
Dgradation
Minralisation
Substances prhumiques
Ions minraux de petites
dimensions
(CO 2, NH 4+, SO 42-,)
Composs hydrosolubles
Composs insolubles
(sucres, peptides, acides organiques)
(cellulose, lignine)
Minralisation rapide
Produits plus ou moins
Humines
solubles (AH et AF)
Rorganisation, synthse
polymrisation
Fraction rsiduelle
Polymrisation
MINERALISATION TRES LENTE
Figure 10 : Processus dhumification de la matire organique dans les sols (Dauthuile, 1982).
L'humus (ou substances humiques SH) se caractrise par sa complexit et la grande varit des
polymres organiques qui le constitue (Duchaufour, 1991 ; Schwoerer, 1998). L'identification de ces
constituants est troitement lie aux techniques d'extraction employes pour leur tude. Gnralement,
on effectue des extractions chimiques en conditions alcalines (Barriuso et al, 1985). Sur la base des
mthodes d'extraction utilises et des caractristiques de solubilit, on distingue trois familles de
molcules, dont les proportions varient suivant les sols : les humines, les acides fulviques AF et les
acides humiques AH. Les acides fulviques sont alcalino-solubles et acido-solubles alors que les acides
humiques sont uniquement solubles en solution alcaline. Les humines correspondent aux composs
organiques insolubles en milieu alcalin. Les acides humiques et fulviques sont des macromolcules
avec des structures molculaires tridimensionnelles trs complexes comprenant des sites hydrophobes
et hydrophiles (Wershaw, 1993). Ces polymres contiennent de nombreux constituants aromatiques.
Les acides humiques ont un poids molculaire 100 fois plus leves que les acides fulviques. Les
acides fulviques se caractrisent par la prsence d'un plus grand nombre de fonctions COOH. Il est
35
difficile de dfinir prcisment la structure spatiale des acides humiques et fulviques en raison d'une
part de leur grande complexit et, d'autre part, de leur variabilit suivant les sols considrs.
Cependant, il existe un certain nombre de modles de structure chimique de ces deux composs. La
Figure 11 et la Figure 12 prsentent respectivement les modles communment employs pour la
reprsentation des acides humiques et fulviques :
Figure 11. Modle de structure des acides humiques propos par Stevenson (1982).
Stevenson (1982) propose un modle base de noyaux aromatiques et de quinones. Les units d'acides
humiques sont associes entres elles formant ainsi des polymres hauts poids molculaires. Les
nombreux groupements chimiques favorisent l'association avec non seulement d'autres composs
organiques mais aussi avec des lments minraux du sol tels que les argiles.
HO
HOOC
OH
OH
COOH
HOOC
OH
OH
HO
O
O
OH
OH
HO
COOH
C
OH
HO
O
O
COOH
COOH
COOH
O
O
OH
OH
HO
OH
OH
O
OH
OH
OH
C
HOOC
COOH
HOOC
COOH
COOH
OH
HO
OH
OH
Figure 12 : Modle de structure des acides fulviques propos par Schnitzer et Khan (1972).
Les acides fulviques se composent de noyaux benzniques et de groupes d'acides carboxyliques et
phnoliques. Les liens entre chaque unit sont assurs par des liaisons hydrognes. Ainsi, la prsence
de nombreux groupements carboxyliques et phnoliques des acides humiques et fulviques facilite les
36
ractions de polymrisation avec d'autres composs organiques et de complexation avec les ions
minraux prsents dans les sols favorisant alors la formation de complexes argilo-humiques.
La plupart des procds de traitement biologique des dchets organiques tels que le compostage ou la
mthanisation doivent permettre dune part la rduction de la masse du dchet et, dautre part,
dassurer sa stabilisation, son hyginisation sous la forme dun produit final qui doit sapparenter
de lhumus (Mustin, 1987). Le compostage reproduit le processus dhumification qui a lieu trs
lentement dans les sols.
La qualit dun compost ou dun digestat dpend de la stabilit de la matire organique rsiduelle. Ces
critres peuvent tre apprcis en valuant le degr dhumification de la matire organique. On utilise
le rapport AH/AF qui augmente en fonction du degr dhumification. Lindice dhumification calcul
partir du pourcentage dacides humiques par rapport au carbone organique total (COT) permet aussi
dvaluer la stabilit des produits finaux de traitement biologique de la matire organique.
I.6.4- Notion de biodgradabilit de la matire organique

I.6.4.1- Introduction
La diversit des habitats aux caractristiques physico-chimiques varis (pH, temprature, salinit,
prsence doxygne, prsences de diverses sources de carbone organique etc.) explique la diversit
physiologique des micro-organismes et leur ubiquit vis vis des sources de carbone organique
biodgradables (Madsen, 1997). En effet, les capacits biodgradatrices des champignons et des
bactries ne se limitent pas seulement aux trois grandes familles de substrats organiques prsents cidessus mais concernent galement des substrats organiques plus difficiles dgrader car peu solubles
dans leau. Il sagit des hydrocarbures (chanes hydrocarbones), de molcules aromatiques, de
phnols, dhtrocycles et dorgano-halogn, (Alexander, 1994). Lactivit humaine a contribu
disperser les espces chimiques naturelles sur lensemble de lcosystme. Les transformations
chimiques du charbon et du ptrole ainsi que la synthse de nouvelles molcules dites xnobiotiques
( trangre la vie ) ont galement contribu augmenter la diversit chimique de notre
cosystme. Devant la transformation des biotopes la suite de lintroduction de molcules toxiques,
les micro-organismes sadaptent en modifiant ou dveloppant de nouvelles stratgies mtaboliques
(Madsen, 1997). La pression slective sur les micro-organismes sexplique par quatre mcanismes
distincts :
1234-
Se procurer une source dnergie et de carbone organique (substrat = nutriment),

Dtoxification dune molcule par attaque enzymatique (substrat = poison),
Attaque enzymatique du substrat sans bnfice pour le micro-organisme (ie comtabolisme),
Dgradation du substrat lie la production de mtabolites ou bien lis aux modifications des conditions
physico-chimiques du milieu.

37
I.6.4.2- Biodgradabilit des composs organiques naturels (biomasse)

Les composs issus de la biomasse comme les aliments ou les dchets verts sont, en principe,
facilement biodgradables. Leur biodgradabilit dpend avant tout des facteurs environnementaux
suivants :
-
Facteurs cologiques et physiologiques : Il sagit des caractristiques biologiques et physicochimiques du milieu qui influencent lactivit des micro-organismes impliqus dans les
mcanismes de biodgradation. Citons le pH, la temprature, le potentiel redox, la quantit
doxygne ou le rcepteur dlectrons adquat disponible et accessible, les composs minraux ou
organiques nutritionnels et les produits ventuellement prsents dans le milieu, la prsence de
micro-organismes inhibiteurs ou cooprateurs (Manf, 1994).
Facteurs structuraux : Ils correspondent la nature mme des polymres organiques. Comme nous
lavons dj expliqu prcdemment, la biodgradabilit dun dchet organique dpend en effet de
sa composition chimique et notamment de la prsence de certaines molcules. La plupart des
composs organiques issus de la biomasse ont une bonne aptitude la biodgradation. Que ce soit
dans le rgne animal ou vgtal, les cellules les plus facilement biodgradables sont les tissus
riches en sucres simples, les muscles, les cellules chlorophylliennes, les tissus reproducteurs. En
rgle gnrale, la complexification des cellules va lencontre de leur biodgradabilit. Ainsi les
polysaccharides vgtaux constituants les parois (lignine, lignocelluloses), les fibres collagnes,
les squelettes des animaux suprieurs sont les tissus et composs organiques les plus difficilement
biodgradables (Mustin, 1987, voir Figure 13).

38
Echelle
logarithmique
du % restant
100
50
Polymres
phnoliques
10
5
Cires
SH
0
Composants :
10
12
15
T en annes
(S) Sucres 15 % Pourcentage litire

(H) Hmicelluloses 15 %
(C) Cellulose 20 %
(L) Lignines 40 %
Cires 5 %
Phnols 5 %
Figure 13 : Taux de biodgradation des composants de la biomasse vgtale dans les sols et
litires (daprs Mustin, 1987)
I.6.4.3- Biodgradabilit des composs organiques de synthse
Les composs chimiques organiques dorigine biologique peuvent tre dgrads par les microorganismes lorsque les conditions environnementales le permettent. La situation est diffrente dans le
cas des molcules organiques synthtises par lhomme et qui sont trangres la nature. Certains de
ces molcules xnobiotiques telles que certains pesticides, ne sont biodgradables quaprs une
ventuelle mutation et adaptation progressive de certains micro-organismes. Pour dautres substances
xnobiotiques rcalcitrantes, la prsence de composs facilement biodgradables est ncessaire
(comtabolisme).
Le caractre rcalcitrant (non biodgradable) des molcules xnobiotiques est mettre en relation avec
lexistence ou non du ou des micro-organismes possdant les enzymes capables dattaquer cette
molcule. Le principe de linfaillibilit microbienne cit par Alexander (1965) et Rogers (1961) dit
39
que pour toute molcule il existe quelque part un micro-organisme capable de le dgrader dans
certaines conditions du milieu .
Le principale mcanisme enzymatique suivie par les micro-organismes pour lassimilation et/ou la
dtoxication de substrats organiques peu dgradables est : loxydation enzymatique par des monooxygnases ou dioxygnases (oxygnases) : il y a formation de groupes polaires qui permettent
daugmenter la solubilit de nombreux substrats organiques peu solubles dans leau (hydrocarbures ou
les hydrocarbures aromatiques polycycliques) et de faciliter ainsi leur assimilation (Cerniglia, 1992 ;
Pelmont, 1993 ; Bossert and Kosson, 1997). Cest galement un mcanisme de biodgradation des
composs nitroaromatiques (Nishino et Spain, 1997) et des substrats organochlors tels que les
chlorobiphnyls (PCB) (Focht, 1997). Pour ces derniers, la dchlorination bactrienne a t dmontre
en condition anarobie avec formation de mtabolites facilement biodgradables en arobiose
(Abramowicz, 1990). Il existe actuellement un certain nombre de travaux qui sintressent la
prdiction informatise de la biodgradabilit partir des ractions connues de biodgradation
(Bollag, 1974 ; Niemi et Veith, 1989 ; SEFA, 1990).

40
PARTIE II : Notion de biodgradation dans le domaine de la

gestion et du traitement des dchets organiques
II.1- Introduction
La premire partie de ltude a permis de mettre en vidence que la notion de biodgradation et de
biodgradabilit et les nombreux termes qui leur sont associs sont lis non seulement aux
caractristiques chimiques des molcules organiques considres mais aussi aux agents microbiens
responsables de la biodgradation et aux condition de milieu. En effet, la biodgradation de la matire
organique est base sur le catabolisme microbien et de lexpression de ce mtabolisme qui dpend
troitement de la nature du substrat organique et des conditions environnementales du biotope de
lcosystme considr (conditions physico-chimiques et biologiques). Par consquent, dans le cas des
dchets solides contenant une fraction non ngligeable de matire organique, la notion de
biodgradation est indissociable de la dfinition et de la description dtaille du scnario considr.
cette seconde partie de ltude est consacre une prsentation des domaines de gestion et de
traitement des dchets o la biodgradation a une incidence, quelle soit recherche comme dans le cas
du compostage ou de la mthanisation ou subie ou souhaitable comme lors de lenfouissement en CET
(Centre dEnfouissement Technique). Le premier paragraphe propose un bref rappel des principaux
types de dchets ou sous-produits concerns par les aspects biodgradation.
II.2- Principaux dchets concerns
II.2.1- Biomasse et dchets organiques

Les micro-organismes sont le dernier maillon de la chane des dcomposeurs. A ce titre, leur rle dans
les cosystmes et les cycles de la matire est fondamental. On appelle biomasse l'ensemble des
vgtaux et des animaux, ainsi que les dchets organiques qui leur sont associs. Depuis trs
longtemps, l'homme utilise la biomasse pour se nourrir, se loger, se meubler, se vtir, se chauffer et
cuisiner, et comme source de composs chimiques.
La notion de biodgradation et de biodgradabilit implique que le matriau ou le dchet solide soit
transformable sous laction de micro-organismes dans des conditions environnementales donnes,
cest dire que la matire qui le constitue puisse tre utilise par les micro-organismes pour leur
permettre de vivre ses dpends. Le terme biodgradation est gnralement rserv aux composs
organiques. Par consquent, seuls les dchets contenant de la matire organique sont potentiellement
41
biodgradables. Pour les dchets minraux susceptibles de subir des agressions microbiennes, on
parlera plutt de biodtrioration. Nous considrons donc uniquement les dchets essentiellement
organiques (teneur en carbone organique de lordre de 40 50% de la masse sche) associs
lexploitation ou la consommation de la biomasse (tels que les sous-produits dlevage, de cultures
ou de lindustrie agro-alimentaire, et les ordures mnagres) qui contiennent une fraction non
ngligeable de matires organiques. Ces dchets sont potentiellement biodgradables car ils sont
constitus de molcules organiques dorigines naturelles susceptibles de sinsrer dans les cycles
biogochimiques de la matire (en particulier, le cycle du carbone). Les dchets industriels peuvent
tre galement concerns dans la mesure o ceux-ci prsentent des concentrations en matire
organique non ngligeables.
En France, la production annuelle de dchets est de lordre de 600 millions de tonnes (environ
10t/habitant/an) dont la provenance est globalement rpartie en rsidus urbains (34 millions de tonnes
dont 21 dordures mnagres), dchets industriels (150 millions de tonnes dont 100 dinertes et 7 de
spciaux), et dchets de lagriculture (400 millions de tonnes dont 280 dlevages et 45 dindustries
agro-alimentaires) (Desachy, 1996, cit par Riachi, 1998).
II.2.2- Dchets agricoles et agro-alimentaires

Les dchets agricoles correspondent aux dchets associs au niveau primaire de production agricole.
Avec une production estime 375 millions de tonnes par an, l'agriculture s'affiche comme le premier
secteur conomique producteur de dchets. Les fumiers, les lisiers et autres dchets dlevage
reprsentent eux seuls 280 millions de tonnes. Les dchets gnrs par les "Industries agroalimentaires" (IAA) sont estims 45 millions de tonnes par an soit un gisement global annuel de
dchets agricoles et agro-alimentaires de 420 millions de tonnes (valuation ADEME, 1999). Ils
peuvent tre classs de deux manires :
Classification au niveau de la production du dchet :

- Dchets agricoles (produits au niveau de la production agricole),
- Dchets agro-alimentaires (produits au niveau du stockage, du conditionnement et de la
transformation des produits agricoles).

42
Classification en fonction de l'origine du dchet :

-
Origine animale :
Dchets d'levage (djections animales, ),
Dchets des abattoirs, de l'quarrissage et des autres industries de la viande,
Dchets des industries de conserverie,
Dchets des industries de la pche,
Dchets de laiteries et de fromageries.
Origine vgtale : (dchets pauvres en azote)

Rsidus de culture,
Dchets des industries agro-alimentaires (IAA : conserveries, brasseries, etc.),
Dchets de l'aquaculture.
Le traitement des effluents des industries agro-alimentaires en station dpuration (STEPI) gnrent
galement des boues riches en matire organique et donc potentiellement biodgradables ncessitant
galement la mise en place de filires de traitement adaptes.
II.2.3- Dchets municipaux

Les dchets municipaux regroupent les ordures mnagres (environ 21 Mt/an en France) dfinies
comme tant "les rsidus de la vie domestique", auxquels s'ajoutent divers types de dchets selon les
modes de collecte : dchets de la voie publique, dchets encombrant des mnages, dchets verts,
dchets de bureaux, dchets de certaines petites et moyennes entreprises et petites et moyennes
industries. Les dchets municipaux se rpartissent parts gales entre les dchets des mnages et les
dchets collectifs comme lindique le Tableau 6 suivant :
Tableau 6 : Composition des dchets municipaux (IFEN, 1998).
Dchets des
communes
Dchets encombrants
Espaces verts,
marchs, nettoiement,
assainissement
4,5
22,5
Dchets des mnages
Dchets des artisans,

commerants,
entreprises.
Ordures Mnagres (sens strict)

Fraction
collecte Fraction collecte en
slectivement
mlange
5
1,5
18,5
ORDURES MENAGERES
DECHETS MUNICIPAUX : 52 (en millions de tonnes)
Parmi ces dchets, certains sont issus de la biomasse et sont ainsi susceptibles dtre biodgradables.
La fraction organique reprsente plus de 55 % du tonnage produit (hors plastiques) comprenant les
dchets de cuisine (dits dchets putrescibles ), les papiers/cartons et certains dchets des espaces
verts et des marchs. La Figure 14 illustre la variation de composition des ordures mnagres entre les
anne 1960 et les annes 1990.

43
40
1960
% m br ut
30
1993
20
10
iv
er
ne
s
Fi
t
au
x
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V
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s
P
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s
Te
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-c
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ut
re
sc
ar
ib
to
ns
le
s
Figure 14 : Composition des ordures mnagres Franaises en 1960 et 1993.

Cette volution s'est accompagne d'une augmentation importante du volume des dchets mnagers et
industriels. La production de dchets mnagers en Europe est en moyenne de 350 kg/hab.an et celle de
la France pour l'anne 1993, (ADEME, 1998) est de 416 kg/hab.an (voir Figure 15 et Tableau 7).
120
119
(kg/hab/an)
100
80
67
60
40
20
54
46
39
6
11
13
14
17
28
2
Te
xt
ile Tex
s
sa tiles
C
ni
om
ta
ire
bu
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to
C
ns
om
po
si
te
s
D
c
he
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ut
re
sc
ib
le
s
Figure 15 : Production moyenne d'ordures mnagres en France, pour l'anne 1993 (en masse
humide produite par habitant et par an) (ADEME, 1998).

44
Tableau 7 : Caractrisation des OM franaises selon la campagne mene par l'ADEME.

Fraction : 12 catgories
Pourcentage massique de chaque fraction (% en poids humide)
Matire organique putrescible
Papiers
Cartons
Matriaux composites
Textiles
Textiles sanitaires
Plastiques
Combustibles non classs
Verres
Mtaux
Incombustibles non classs
Dchets spciaux
28,7
16,2
9,3
1,4
2,6
3,1
11,1
3,3
13,1
4,1
6,8
0,5
Selon l'ADEME (1998), la fraction organique dite putrescible correspond aux dchets alimentaires
(rsidus d'alimentation tels que les pluchures sauf les os, qui sont classs dans la catgorie
"combustibles") et aux dchets verts (dchets de jardin, voir plus loin). En fait, thoriquement, la
fraction traitable par voie biologique ou susceptible dvoluer biologiquement en condition de
stockage regroupe galement les dchets tels que les papiers et cartons, soit en tout plus de la moiti
de la biomasse des ordures mnagres. Les analyses dtailles de la matire organique des OM sont
relativement peu nombreuses. Le Tableau 8 rsume les caractristiques physico-chimiques de la
fraction organique dite putrescible des ordures mnagres. Le Tableau 9 donne certaines de ses
caractristiques chimiques.
Tableau 8 : Caractristiques physico-chimiques des dchets putrescibles contenus dans les
ordures mnagres en 1993 (source ADEME, 1998).
Dchets putrescibles
15,8 % de la masse sche d'ordures
mnagres
Taux d'humidit
Matire organique
Carbone
Hydrogne
Chlore
Soufre
Azote organique
PCI (humide)
PCI (sec)
PCS
Unit
Teneur moyenne
Fourchette de valeur
% MH
% (MS)
% (MS)
% (MS)
g/kg (MS)
g/kg (MS)
g/kg (MS)
kJ/kg (MH)
kJ/kg (MS)
kJ/kg (MS)
63,3
82,2
41,3
5,6
8,1
3,3
17,9
4246
15773
17006
38,8 - 85,3
80 - 83
41 - 45
5,5 - 5,9
6,3 - 8,6
2,5 - 6,6
15 - 26
4057 - 5221
15257 - 18430
16473 - 19717
Tableau 9 : Analyse chimique de la matire organique putrescibles des ordures mnagres.

Produit
Protines
Lipides
Glucides
dont cellulose
Autres
Concentration g/100 g de matire sche totale.

2,06 - 2,6
4,50 - 5,7
46,6 - 59
36
1,15
45
II.2.4- Dchets verts de zones urbaines

Les dchets d'espaces verts rsultent de l'entretien et du renouvellement des espaces verts, zones
rcratives, parcs et jardins, terrains de sport des collectivits territoriales, des organismes
publiques, des particuliers et des socits prives. Il s'agit de tontes de pelouses, de tailles des haies et
d'arbustes, de feuilles mortes, de rsidus d'lagage, de dchets d'entretien des massifs, de dchets de
jardins des particuliers collects sparment ou par le biais de dchetteries. De 1 1,5 millions de
tonnes de dchets vgtaux urbains dits dchets verts sont produits chaque anne en France. Cette
production correspond un ratio national moyen de 0,3 m3/hab/an. Depuis quelques annes le volume
de dchets verts tend augmenter de manire importante, ce qui ncessite dadapter les filires de
traitements. L'limination des dchets verts aboutit trs souvent la mise en dcharge ou
l'incinration avec toutes les nuisances et le gaspillage de matire que cela reprsente.
La valorisation des dchets d'espaces verts doit passer par une collecte spcifique (notamment par le
biais des centres de collecte slective). Les dchets ainsi tris peuvent servir de matire premire d'un
compost de qualit en conformit avec la norme NFU-44-051, utilisable en agriculture, horticulture,
tout en luttant contre le gaspillage de la matire organique et le remplissage rapide des dcharges.
Il faut noter les variations saisonnires de composition et de flux des dchets verts, qui peuvent
entraner des problmes de fonctionnement des units de traitement. En priode estivale, les units de
traitement des O.M. par incinration sont mises contribution pour liminer les surplus (ce qui
entrane souvent des perturbations au niveau de la combustion, par variation du pouvoir calorifique
des O.M.).
Les dchets comprennent des substances organiques facilement biodgradables tels que les rsidus de
tontes de gazon et les feuilles mais galement des matriaux plus rsistants tels que les rsidus de
tailles de haies. Le rapport C /N et lhumidit des dchets vgtaux sont prsents dans le Tableau 10.
Tableau 10 : Rapport C/N et humidit de diffrents dchets de vgtaux (daprs Mustin, 1987).
Gazon
Feuilles mortes
Tailles darbustes
Elagage darbres
Sciures de bois
Rapport C/N
10-20
20-50
50-100
100-200
150-500
Humidit (% massique)
80-90
65
55
40-50
-
Il existe actuellement en Rhne-Alpes, une vingtaine de plates-formes de compostage fonctionnant

pour la majeure partie par fermentation lente arobie en andins avec retournement priodique.
Certaines plates-formes traitent les dchets verts et la fraction fermentescible issue d'une collecte
slective des O.M.

46
II.2.5- Boues de station dpuration des eaux uses municipales

Les stations d'puration ( STEP ) assurent le traitement des eaux uses collectes par le rseau
d'assainissement auquel sont raccords les particuliers, les tablissements de la collectivit, les artisans
et les entreprises. Elles produisent de l'eau pure, dont le rejet dans le milieu naturel est autoris, et
des boues (voir Figure 16).
E ta p e 1 :
D c a n ta t io n
B o u e s p rim a ir e s
E a u x u ses
P r t r a it e m e n ts
( d g r illa g e , d g r a is s e u r s )
C o a g u la t io n f lo c u la tio n
B o u e s p h y s ic o c h im iq u e s
E ta p e 2 :
T r a it e m e n t s b io lo g iq u e s ( b a s s in a r )
+ C la r if ic a t io n
B o u e s b io lo g iq u e s
Figure 16 : Schma d'un centre de traitement des eaux uses. Origine des boues.
On distingue les boues primaires, obtenues par dcantation des eaux uses avant puration, et les
boues secondaires ou boues biologiques, obtenues par dcantation des eaux traites. Les boues
mixtes reprsentent un mlange de boues primaires et de boues secondaires. Les boues primaires et les
boues secondaires sont traites sparment seulement dans le cas d'installations de grandes tailles
(quelques dizaines de milliers d'quivalent habitants au minimum). Les boues de STEP sont
constitues de matires organiques et minrales. En moyenne, une station d'puration produit 2,5 litres
de boues par jour et par habitant raccord au rseau avec une teneur moyenne de 80% en eau.
La composition moyenne des boues de STEP est donne dans le Tableau 11 de la page suivante.
Au niveau europen, on estime la production de boues rsiduaires urbaines 7 millions de tonnes de
matire sche par an. La France possde environ 12000 stations d'puration produisant 850.000 tonnes
de MS soit environ 20 millions de mtre cubes de boues par an. La gestions des mission de dchets
dune installation classe est rglement par larrt ministriel du 17 aot 1998 modifiant larrt du
2 fvrier 1998 relatif aux prlvement et la consommation deau ainsi quaux missions de toute
nature des installations classes pour la protection de lenvironnement soumises autorisation .

47
La valorisation des boues dans le secteur agricole s'effectue gnralement par pandage des boues de
STEP sur les sols de culture. Leur utilisation en tant quamendement agricole peut se justifier par la
prsence de matires organiques et d'lments fertilisants tels que l'azote (3 6% de la MS), le
phosphore (3 8% de la MS), le potassium (0,5 1,5% de la MS). Lajout de matriaux carbon
ratio C/N lev permet de modifier celui des boues relativement bas (entre 5 et 10). Le mlange
obtenu doit, par prfrence avoir un ratio C/N compris entre 25 et 30, un taux dhumidit entre 6075% et un taux doxygne lacunaire de plus de 5% afin dviter les conditions anoxie (faible teneur en
oxygne).
Pour leur pandage sur les surfaces agricoles, les boues doivent respecter la norme AFNOR 44041.
L'pandage des boues sur les sols agricoles est rglement par larrt du 3 juin 1998 modifiant
larrt du 8 janvier 1998 sur les prescriptions techniques applicables aux pandages de boues sur les
sols agricoles pris en application du dcret N97-1133 du 8 septembre 1997 relatif lpandage des
boues issues du traitements des eaux uses .et doit donc sinscrire dans le cadre dun plan pandage.
La prsence de mtaux lourds en fortes teneurs dans les boues les rend souvent inaptes une
valorisation agricole. Le traitement des boues par incinration ou le stockage en dcharge de classe II
aprs leur dshydratation sont des solutions conomiques temporaires qui rpondent mal aux
contraintes rglementaires.
Tableau 11 : Composition moyenne des boues urbaines fraches en Europe (daprs Williams,
1998).
Matire organique
Total
Protines
Lipides
Glucides
Composs hydrocarbons non fibreux
Carbone
Hydrogne
Oxygne
Azote
Phosphore
Potassium
Rapport C/N
% des MS
55-75
30
13
33
24
45-50%
8%
33%
3-6%
3-8%
0,5-1,5%
5-10
Polluants organiques
Esters dacide Phtalique
Hydrocarbures aromatiques polycycliques (HAP)
Polychlrobyphnyl (PCB)
Dieldrine (pesticide)
Lindane (pesticide)
Aldrine (pesticide)
DDT (pesticide)
Concentration (ppm)
1-100
0,01-50,0
0,16-9,11
0,018-3,90
0,025-0,410
0,02-0,24
0,02-0,8

48
II.2.6- Dchets industriels solides et semi-solides

Les principaux dchets industriels solides ou semi-solides contenant une fraction non ngligeable de
matire organique sont les dchets gnrs par :
-
Les industries qui exploitent la biomasse des fins non alimentaires :

-
Industries de la filire bois,
Industries de fabrication du papier et carton,
Industries du textile,
Industries du cuir,
Les industries de la chimie, ptrochimie.
Toutefois, ces industries gnrent, du fait de nombreuses transformations et synthses chimiques et de

la nature mme de la matire organique de base utilise (charbon ptrole ou biomasse lignocellulosique), des dchets organiques peu ou pas biodgradables en raison de la diversit, de la nature
xnobiotique et de lventuelle toxicit des molcules prsentes. Le traitement biologique nest pas
toujours envisageable et il est souvent ncessaire de recourir des techniques concurrentes telles que
lincinration ou la mise en dcharge en centre denfouissement aprs traitement de stabilisation.
Les traitements biologiques, physiques et chimiques des effluents industriels gnrent galement des
boues industrielles dont la teneur et la nature de la fraction organique varient selon leffluent trait et
le procd de traitement (Eckenfelder, 2000). Le traitement des boues organiques industrielles est
ncessaire pour rduire la teneur en matire organique et minimiser ainsi les risques dvolution
biologique des ces dchets (procdure de biostabilisation).
II.3- Traitements biologiques des dchets organiques
II.3.1- Objectif des traitements

Les dchets concerns sont les dchets solides ou semi-solides contenant une fraction non ngligeable
de matire organique constitue principalement de molcules dorigine naturelle sapparentant de la
biomasse et susceptibles de sinsrer dans les cycles biogochimiques de la matire. Il sagit
principalement de la fraction de dchets putrescibles (ou fermentescibles ) et la fraction
papiers/cartons des ordures mnagres, des dchets des espaces verts, de la matire organique prsente
dans les boues de station dpuration. Globalement, il sagit des dchets organiques issus de
lexploitation ou de la consommation notamment alimentaire de la biomasse (constitue par la masse
49
des organismes vivants et de leurs dchets associs) appels galement biodchets (C.E. document de
travail, 2001).
La directive 1999/31/CE de la communaut europenne fixe les objectifs gnraux concernant la mise
en dcharge des dchets. Selon larticle 5, les tats membres de lunion europenne doivent dfinir une
stratgie nationale afin de mettre en uvre la rduction des dchets biodgradables mis en dcharge,
notamment grce des techniques biologiques de traitement des dchets telles que le compostage et la
mthanisation.
Le document de travail de la DG Env.A.2. de la commission europenne (C.E. document de
travail, 2001) dtaille les principaux objectifs atteindre :
-
Promouvoir le traitement biologique des biodchets en harmonisant les dispositions nationales

relatives leur gestion, afin de supprimer ou de rduire tout impact ngatif sur lenvironnement et
dassurer ainsi un niveau lev de protection de lenvironnement . Le terme biodchets est
dfini dans ce document comme tout dchet pouvant faire lobjet dune dcomposition arobie
ou anarobie, tels les dchets alimentaires, les dchets de jardin, le papier et le carton , cest
dire la fraction fermentescible des dchets municipaux (ou dchets urbains, assimilables des
dchets mnagers) et la fraction papier/carton. Les dchets agricoles et agro-alimentaires ne sont
pas cits dans le document.
Protger le sol et faire en sorte que lutilisation de biodchets traits ou non traits soit
bnfique lagriculture ou reprsente un progrs cologique , dans la mesure o les dchets
traits ou non sont destins tre utiliss en tant quamendement organique pour les sols
agricoles.
Veiller ce que lutilisation des biodchets traits ou non traits naffecte pas la sant des
hommes et des animaux et ne soit pas nocive pour les vgtaux . Il sagit dune exigence
dassainissement biologique de dchets (ou hyginisation du dchet),
Lamlioration de la gestion des biodchets dans la communaut europenne passe par le

dveloppement du compostage ou de la fermentation anarobie des biodchets collects sparment,
avec utilisation du compost ou du digestat de manire obtenir un bienfait agricole ou contribuer au
progrs cologique . Nous prsentons dans les paragraphes suivants les deux filires de traitement
dans lesquelles la notion de biodgradabilit est incontournable.
La mise en place de la stratgie de rduction des dchets biodgradables mis en dcharge devrait
entraner lexclusion, relativement court terme, des dchets biodgradables dans les centres
denfouissement technique. Larticle 6 de la directive 1999/31/CE stipule que seuls les dchets ayant

50
subi un traitement pralable seront admis en dcharge. Lannexe II prcise les critres et procdures
dadmission des dchets dans les trois catgories de dcharges.
Ces critres relatifs ladmission dans une catgorie spcifique de dcharges doivent entre autres
reposer sur les considrations suivantes :
-
Limitations de la quantit de matire organique dans les dchets,
Exigences ou limitations relatives la biodgradabilit des composants organiques des dchets.
Cette annexe prcise galement que les futures procdures dadmission vises dans la directive
1999/31/CE seront, autant que possible, fondes sur des mthodes normalises danalyse des dchets
et sur des valeurs limites normalises pour les proprits des dchets admettre.
Lavis du 9 novembre 1997 (JO du 11 novembre 1997) relatif la nomenclature des dchets donne la
liste des dchets annexe la dcision de la commission du 20 dcembre 1993 concernant le
Catalogue europen des dchets. Il existe 20 catgories distinctes de dchets principalement classs
suivant leur origine de production et subdivises en 120 regroupements intermdiaires et 645
dsignations de dchets. Un code de 6 chiffres permet didentifier la nature des dchets et la catgorie
dorigine dans laquelle il sinscrit. Ce catalogue europen constituant une liste non exhaustive de
dchets a t rcemment modifi. Le nouveau catalogue a t adopt par la dcision de la commission
2001/118/CE du 16 janvier 2001 et publi le 16 fvrier 2001 au J.O.C.E..
Le document de travail de la Direction Gnrale ENV, direction A Dveloppement durable et
politique dappui (DG ENV.A.2., 2001) de la Commission europenne sur le traitement biologique des
dchets biodgradables (ou biodchets) prcise la liste complte des dchets qui se prtent en principe
au traitement biologique et/ou lpandage. La liste est prsente dans lannexe I. du document de la
DG ENV.A.2., 2001.

51
II.3.2- Traitement biologique arobie : le compostage

II.3.2.1- Historique, dfinitions, objectifs et aspects rglementaires
a) Historique
Le principe du compostage est trs ancien mais le terme napparat dans un texte rglementaire quau
dbut du XXme sicle (1905). Cette technique s'est dveloppe en France dans les annes 50-60
comme un procd de traitement global des ordures mnagres entre autres. Cependant, ce nest
quavec la crise nergtique de 1973 et les rflexions qui sen suivirent que le compostage sest
impos comme filire part entire de traitement et de valorisation des dchets. Le compostage des
O.M. a ensuite rgress avec la complexit croissante des O.M. et face la concurrence de techniques
moins coteuses (mise en dcharge) ou plus radicales (incinration).
b) Dfinitions
Le compostage est dfini comme tant la dcomposition biologique thermophile, en prsence
doxygne et dans des conditions contrles, de biodchets collects sparment, sous laction de
micro- et de macro-organismes, afin de produire du compost (C.E. document de travail, 2001). Le
compostage consiste en un processus de biodgradation arobie de la matire organique sous laction
dune trs grande diversit de micro-organismes qui prexistent dans les substrats concerns.
Le compost, produit final du compostage, est de la matire humique stable, assainie, riche en
matire organique et non nausabonde, qui rsulte du compostage des biodchets (C.E. document
de travail, 2001). Il est compos pour lessentiel dune fraction organique stabilise et de composs
minraux. Laction de composter est donc de produire de la matire organique de type humique stable
(Mustin, 1987).
c) Objectifs
Le compostage est un traitement biologique des dchets organiques permettant de poursuivre un ou
plusieurs des objectifs suivants :
1- Stabilisation du dchet pour rduire les pollutions ou nuisances associes son volution
biologique, dues principalement la prsence de matires organiques biodgradables. On parle de
stabilisation biologique ou biostabilisation de la matire organique.
2- Rduction du gisement par diminution de la masse de dchet.
3- Production dun compost valorisable comme amendement organique des sols agricoles.
52
d) Rglementation
Le compostage constitue une solution moderne et valable pour llimination des ordures
mnagres , Circulaire du 22 fvrier 1973 sur lvacuation et le traitement des rsidus urbains (J.O.
du 20 mars 1973). En effet, lune des priorits affiches de la politique franaise sur lenvironnement
et les dchets, dveloppe dans la loi du 15 juillet 1975, modifie par la loi du 13 juillet 1992, est la
valorisation, incite par linterdiction lhorizon 2002 de mettre en dcharge tout dchet non ultime :
Est ultime au sens de la prsente loi un dchet, rsultant ou non du traitement dun dchet, qui nest
plus susceptible dtre trait dans les conditions techniques et conomiques du moment, notamment
par extraction de la part valorisable ou par rduction de son caractre polluant ou dangereux , Loi
n 92-646 du 13 juillet 1992, article 1er II. A compter du 1er juillet 2002, les installations
dlimination des dchets par stockage ne seront autorises accueillir que les dchets ultimes , Loi
n 92-646 du 13 juillet 1992, article 1er III. Les dchets comportant une fraction relativement
importante de matire organique ne sont pas considrs comme ultimes. Cette loi a donn un regain
d'intrt au traitement par compostage notamment de la fraction fermentescible des O.M en rduisant
la mise en dcharge directe des O.M.
La directive europenne 1999/31CE relative la mise en dcharge vise rduire la mise en dcharge
des dchets biodgradables afin de limiter les problmes rencontrs tels que par exemple lmission de
rejets liquides (lixiviats) et les gaz de dcharge (biogaz : CO2, CH4, H2S etc.). Cette orientation
implique la promotion du compostage en tant que filire de traitement des dchets organiques
biodgradables.
Afin de prvenir les risques de pollution ventuelle lors de lutilisation agricole de ces amendements,
la qualit du compost produit est rglemente. Cela passe, au dpart, par le contrle des dchets
entrant dans linstallation, par le contrle du procd de compostage, et enfin par le respect de seuil de
qualit du compost produit et commercialis. Le processus de compostage et les seuils de qualit de
lamendement produit sont dfinis en France par la norme AFNOR NF U44-051 (dcembre 1981) sur
les amendements organiques. Cette norme est actuellement en cours de rvision. Des critres
environnementaux tels que les concentrations en mtaux, en polluants organiques, la prsence
dorganismes pathognes ainsi que des critres de qualits agronomiques tels que la stabilit de la
matire organique et la disponibilit de lazote y seront intgrs.
Du point de vue rglementaire, les centres de compostage sont considrs comme des installations
classes (loi n76-663 du 19 juillet 1976, conformment l'article 322 B). Elles sont soumises au
rgime de l'autorisation prfectorale quel que soit le volume ou niveau d'activit. Ce rgime
d'autorisation implique pour l'exploitant d'une installation des contraintes d'autorisation juridiques et
techniques aux diffrents stades de l'installation, de l'exploitation et de la cessation d'activit.
53
II.3.2.2- Principe du compostage

Le compostage est un traitement biologique arobie des dchets organiques sous forme solide ou semisolide. L'quation globale de bio-oxydation de la matire organique est la suivante :
Matire Organique + O2
Compost + CO2 + H2O + Chaleur
Le compostage est une technique permettant le retour de la matire organique dans le sol lorsqu'on
l'utilise comme amendement organique des sols agricoles ou urbains. Il s'agit de la rintgration de la
matire organique dans les cycles biogochimiques de notre environnement. Comme le montre le
schma suivant, le processus de compostage se dcompose en deux grandes tapes, une "fermentation"
chaude et une phase de maturation du compost.
"fermentation" chaude
Dchet organique
(biomasse)
biodgradation de la
fraction organique la
plus biodgradable
(20 40% de la
masse entrante)
augmentation de la
temprature
dure : quelques jours
quelques semaines
maturation
-
biotransformation
de la matire
organique en humus
temprature plus ou
moins constante
dure : quelques
mois
Compost
Figure 17 : Principe du compostage.

Hormis les procds de traitement mcaniques et/ou physico-chimiques divers qui peuvent prcder et
suivre le compostage, le processus de biotransformation de la matire organique au cours du
compostage peut se dcrire de la faon suivante.
Dchets
Compost jeune
organiques
prhumifi
Etape n1
Compost mr
riche en humus
Etape n2
1- Phase de dcomposition, dgradation de la M.O. frache

2- Phase de maturation, biosynthse de l'humus
Figure 18 : Les deux tapes de transformation de la matire organique.
1-
La premire tape biologique dite de fermentation chaude permet de rduire la masse du dchet
traiter. Signalons que le terme fermentation est ici, et dans de nombreux documents
rglementaires voire scientifiques, improprement utilis car il dsigne en toute rigueur un

54
processus microbiologique anarobie. Au cours de cette premire tape, les molcules organiques
simples sont (bio)oxydes sous laction de micro-organismes arobies. Il y a minralisation des
sucres, lipides et protines facilement biodgradables sous laction de bactries acidognes. Les
champignons participent galement cette premire tape en scrtant des enzymes
extracellulaires qui coupent les polymres et certaines molcules dhydrocarbures. Il y a
consommation doxygne et dgagement de chaleur qui se traduit par une lvation de la
temprature permettant ainsi llimination de nombreuses espces pathognes susceptibles dtre
prsentes dans le dchet initial. La dure de la premire tape dpend videmment de la nature du
dchet et des conditions opratoires du compostage. Certains auteurs distinguent deux sous-tapes
de fermentation : fermentation msophile et fermentation thermophile en relation avec les
variations de tempratures au cours du compostage (Mustin, 1987 ; Riachi, 1988).
2-
La seconde tape est la phase de maturation (phase dite froide). La temprature, de lordre de 20
30C, permet le retour des activits msophiles convertissant notamment lammoniac en nitrate.
Les micro-organismes utilisent lazote pour raliser la biosynthse des matires humiques (ou
humus) partir de la matire organique rsiduelle peu biodgradable de la premire tape. Si la
biodgradation est relativement faible au cours de la maturation, cette seconde tape est
primordiale pour transformer et stabiliser la matire organique et lui confrer les proprits de
stabilit de la matire humique (humus, degr dhumification) rencontre naturellement dans les
sols.
II.3.2.3- Aspects microbiologiques
Le compostage est la biooxydation de la matire organique, c'est dire une dgradation de la matire
organique sous l'action d'une population microbienne arobie complexe. La biodiversit des espces
microbiennes impliques dans le compostage dpend troitement de la nature du substrat. Les microorganismes sont gnralement prsents en grande quantit dans le dchet destin tre trait. En rgle
gnrale, l'inoculation du substrat est inutile, mais il peut tre utile de recycler une fraction d'un
compost mr pour en dmarrer un nouveau. On distingue trois catgories principales de microorganismes :
-
Bactries,
Actinomyctes (groupe particulier de bactries),
Moisissures.
Ils reprsentent 95% de l'activit de compostage. Les algues et les protozoaires ont une activit trs
secondaire. La Figure 19 donne quelques indications sur l'volution de la microflore au cours du
compostage (daprs Mustin, 1987). On remarque que la population responsable du phnomne de
compostage est trs varie mais sans relation de chane trophique vritable, ce qui facilite la matrise
55
de ce procd biologique. Le Tableau 12 suivant rsume les caractristiques des principaux microorganismes impliqus dans le processus de compostage.
2
7 0 C
M ic r o -o r g a n is m e s t h e r m o p h ile s
pH
3
3 0 C
8
1
V a r ia tio n d e p H
1 0 C
H u m if ic a t io n
4
T em ps
P h ase
M s o p h ile
P h ase
th e r m o p h ile s
D g r a d a tio n
d o m i n a n te
P h ase d e
m a t u r a tio n
M a tu r a tio n
d o m i n a n te
1- Bactries dominantes (dgradation des composs facilement biodgradables, glucides, lipides, protines).
2- Micro-organismes thermophiles,
3- Champignons, actinomyctes (attaques des polymres complexes tels que lignocellulose etc)
Figure 19 : Evolution de la microflore au cours de compostage.

Tableau 12 : Les micro-organismes du compost.
Groupes
Caractristiques et commentaires
Bactries
Toujours prsentes dans le compost et largement dominantes en qualit et quantit. Forte croissance si C/N bas et
humidit leve. Large spectre d'activit sur une large gamme de pH, surtout en substrat frais. Responsables du
dmarrage de la dgradation de la matire organique et de la rapide monte en temprature. Elles dgradent les produits
facilement oxydables tels que les protines, les glucides (sucres) et les lipides.
Exemples : Gram- (genres Pseudomonas, Azotobacter, Escherichia, Proteus, Serratia, Erwinia),
Gram+ (genres Bacillus, Lactobacillus, Streptococcus, Corynebacterium et Arthrobacter).
Ils sont tous htrotrophes Et anarobie stricts. Ils sont dominants si C/N lev (dgradation de la celluloses et des
lignines). Biomasse suprieure aux bactries dans ces milieux. Ils sont capables de crotre pour des taux d'humidit plus
bas et tolrent une large gamme de pH (de 2 9). Les champignons se dveloppent principalement la superficie des
tas en compostage (dans les 10 15 cm externes) cause de la plus faible aration et de la temprature leve au centre
des tas au cours de la phase thermophile (temp. >60C).
Exemples : Les genres les plus frquents : genres Mucor, Aspergillus, Humicola Chaetomium
Les espces les plus frquentes : Humicola languinga, Chaetomium thermophilus, Aspergillus
fumigatus,
Ils attaquent les substances organiques non dgrades par les bactries et les champignons (chitine ou les tanins par ex.).
Neutrophiles, ils tolrent les pH lgrement basiques et sont peu comptitifs vis vis des autres groupes. Ils se
dveloppent plutt en conditions difficiles ou dans les phases finales de maturation du compost. Ils sont tous
htrotrophes. Beaucoup d'odeurs aromatiques des sols ou composts mrs sont dues aux actinomyctes (odeur de terre).
Exemples : genres Nocardia, Streptomyces, Thermonospora
Organismes chlorophylliens, ils se cantonnent en surface et dans les premiers centimtres de la couche superficielle, en
utilisant les sels minraux. Un milieu humide est ncessaire dans une gamme de pH autour de la neutralit ou
lgrement alcalin.
Grand groupe htrogne d'unicellulaires mobiles. Ils rclament un milieu humide (eau interstitielle). Ils se nourrissent
Champignons
Actinomyctes
Algues
Protozoaires

56
des bactries : ils jouent donc un rle de rgulation de la population bactrienne.

Fixatrices d'azote atmosphrique (micro-organismes arobies).
Cyanophyces
II.3.2.4- Paramtres de compostage et leur volution au cours du traitement

a) Aration
L'aration du dchet est le paramtre fondamental pour russir le compostage. Elle est caractrise par
le taux d'oxygne (O2) lacunaire, c'est dire la quantit d'oxygne disponible dans la porosit de la
masse des dchets en compostage. L'aration dpend de la granulomtrie et de la forme des particules
d'une part, et de la quantit d'eau prsente d'autre part. Le compostage optimal dans les premires
phases est obtenu pour 30 35% d'espaces lacunaire (poroist intergranulaire). Si on traite des dchets
pteux ou trs humides, les espaces lacunaires sont trs rduits et on doit donc apporter
obligatoirement de l'oxygne par agitation ou aration force. Les micro-organismes arobies
consommant de l'oxygne et produisant du dioxyde de carbone, il est ncessaire que l'oxygne puisse
pntrer jusqu' eux. Notons que plus le pourcentage d'espaces lacunaires et la taille des pores sont
grands, plus la circulation de l'air est aise. La granulomtrie du dchet a donc une influence
primordiale sur son aration. Pour que les conditions arobies soient respectes, il faut une teneur en
O2 suprieure 5% (vol/vol) dans les espaces lacunaires. La vitesse de transfert de l'oxygne des
espaces lacunaires vers les micro-organismes dtermine en grande partie la dure du traitement. C'est
la raison pour laquelle le retournement des tas ou laration force est souvent indispensable afin
d'assurer le renouvellement de l'atmosphre du compost. Ce transfert suit la loi de Fick.
b) Humidit du substrat
Il faut une teneur minimales d'environ 50% du poids pour avoir une activit biologique correcte. La
teneur en eau a tendance augmenter par production biologique, mais la monte en temprature
(jusqu' 70-80C) et l'aration schent considrablement le dchet. Ceci est un point positif pour les
dchets trs humides tels que les boues de STEP. Notons que les champignons supportent mieux
l'asschement que les bactries. Ce qui importe, c'est en fait la disponibilit de l'eau pour les microorganismes. Celle-ci est lie l'humidit relative qui est gale au rapport de la pression de vapeur
saturante en eau dans les espaces lacunaires sur la pression partielle de l'eau pure la mme
temprature. Ce paramtre traduit l'quilibre dynamique existant entre leau lie et sa vapeur. La
teneur optimale en eau est d'autant plus leve que la teneur en polymres vgtaux structuraux
(lignine, et cellulose un degr moindre) est forte. Le Tableau 13 ci-dessous donne titre indicatif les
teneurs en eau optimales (en % du poids total) pour divers substrats :
Tableau 13 : Valeurs optimales de compostage de substrats organiques.
Substrat
Sciure ou copeaux de bois
Paille
% H2O
80-90
75-85
57
Papier
Djections animales
Ordures mnagres
Dchets vgtaux frais
60-70
55-65
55-65
45-55
c) Temprature
L'nergie stocke dans les liaisons chimiques des composs contenus dans les dchets traits est
libre partiellement par oxydation biologique de la matire organique. Il y a donc monte en
temprature dans les premiers jours du compostage. Une mauvaise monte de la temprature ou une
chute brutale sont les signes d'un mauvais fonctionnement. La temprature peut dpasser 65C, ce qui
a un effet recherch d'hyginisation du compost. Cette monte en temprature permet d'liminer la
plupart des germes pathognes prsents initialement dans les dchets organiques. La temprature joue
un rle dans la vitesse de dgradation des substrats organiques en intervenant sur l'activit
enzymatique.
d) pH
Au cours du compostage, les dchets organiques connaissent une variation de pH en passant par des
stades dacidification; neutralisation et alcalinisation. La Figure 20 retrace l'volution du pH au
cours du compostage en 3 mois.
pH
Temps en jours
50
100
Phase 1 : Baisse du pH : phase d'acidognse avec une intense production de CO2 et d'acides organiques (flore
msophile dominante).
Phase 2 : Augmentation du pH : phase d'alcalinisation avec hydrolyse bactrienne de l'azote protique et
production d'ammoniac (flore thermophile dominante). Diminution du rapport C/N.
58
Phase 3 : Stabilisation du pH. L'azote est utilis par les micro-organismes pour raliser la biosynthse des
matires humiques. Le compost est en voie de maturation.
Figure 20 : Courbe de variation de pH au cours du compostage.

Le suivi du pH peut donner une bonne information sur le stade d'volution du compost. Ses variations
dpendent beaucoup de la nature du substrat et de l'intensit de l'activit mtabolique des diffrents
organismes prsents. Les conditions optimales de pH correspondent celles qui permettent la
meilleure croissance microbienne. Rappelons que les champignons se dveloppent sur une assez large
gamme de pH compris entre 5,0 et 8,0. Les bactries, quant elles, se dveloppent prfrentiellement
des pH compris entre 6 et 7,5.
e) Rapport C/N
Ce rapport constitue le critre le plus important dans la balance nutritionnelle des agents biologiques
du compostage. Il reprsente la proportion massique de carbone par rapport l'azote dans un substrat
donn. Ainsi, un substrat qui est compos de 20 fois plus de carbone que d'azote sera caractris par
un rapport C/N = 20. Le compostage est jug optimal lorsque ce rapport est compris entre 20 et 40.
Mais ce qui importe avant tout, c'est le rapport "carbone disponible"/"azote disponible". Comme une
partie du carbone de la M.O. n'est pas ou peu biodgradable, le compostage d'un substrat destin un
traitement biologique est optimal pour un rapport compris entre 40 et 70. Puisqu'une bonne partie du
carbone de la M.O. est transforme en CO2 (environ 25 40% suivant les substrats), le rapport C/N
diminue au cours du traitement. L'azote est principalement incorpor sous la forme de nouvelles
cellules microbiennes. Le rapport C/N varie entre 8 et 15 en fin de traitement. Le Tableau 14 donne la
composition en C et N de divers dchets ainsi que le C/N optimum :
Tableau 14 : Composition en carbone et en azote de diffrents dchets organiques.
Substrat
C (% MS)
N (% MS)
C/N
C/N optimum
Paille de crales
45-50
0,3-0,8
60-170
40-50
Dchets ligno-cellulosiques
50
0,5
100
50
Dchets alimentaires
40-45
1,5
30
20
Djections animales
40-45
2,0-5,0
10-20
20-30
Substrats pauvres en N : Pailles, bois, papiers - cartons, et autres dchets ligno-cellulosiques.

Substrats riches en N : Plantes lgumineuses, djections animales, boues de STEP.
Les rapports C/N sont trs diffrents suivant les substrats considrs d'o
l'intrt du mlange de divers dchets pour amliorer la qualit du substrat et
donc tablir un rapport C/N moyen plus favorable.
59
II.3.3 Traitement biologique anarobie : la mthanisation

II.3.3.1- Historique, objectifs et aspects rglementaires
a) Historique
La mthanisation, filire de valorisation des dchets organiques, a pris une importance industrielle
consquente. Plus encore que le compostage, elle est apparue comme une alternative comptitive aux
problmes de dpense nergtique poss aprs la crise ptrolire de 1973.
b) Objectifs
La mthanisation est un processus de digestion anarobie pouvant rpondre un double objectif de
valorisation nergtique par rcupration de mthane (CH4) et de stabilisation des dchets
organiques. Le biogaz est utilis comme combustible et le digestat, produit solide final de la digestion
anarobie, est utilisable comme amendement organique sur les terres agricoles (ventuellement aprs
une opration de maturation arobie complmentaire).
c) Aspects rglementaires
La mthanisation rpond aux objectifs fixs par la loi du 13 juillet 1992 relative llimination des
dchets (journal officiel du 14 juillet 1992) concernant la diminution des volumes de dchets et leur
recyclage. Tout comme les installations industrielles qui reprsentent un danger pour la protection de
la nature et de lenvironnement, les usines de mthanisation sont soumises la loi du 19 juillet 1992
relative aux installations classes pour la protection de lenvironnement (journal officiel du 20 juillet
1992). Les produits issus du procd de la mthanisation doivent galement rpondre aux objectifs
qualit fixs par la norme AFNOR NF U 44-051 sur les amendements organiques destins tre
commercialiss.
II.3.2.2- Principe de la mthanisation
La mthanisation est un procd biologique de digestion anarobie. La digestion anarobie est la
transformation de la matire organique en mthane (CH4), eau (H2O) et gaz carbonique (CO2) par un
cosystme microbien complexe fonctionnant en absence doxygne. Du point de vue industrielle, la
mthanisation doit donc seffectuer en systme noy (fosses, cuves fermes,) pour favoriser
lanarobiose ainsi que la syntrophie obligatoire entre les diffrentes populations microbiennes. La
mthanisation sapplique donc prfrentiellement des dchets trs humides ou alors il faut procder
un ajout deau ou deffluents liquides.

60
II.3.3.3- Les grandes tapes biochimiques et microbiologiques

Contrairement
au processus de compostage, la connaissance des aspects biochimiques et
microbiologiques est fondamentale pour une bonne matrise de la digestion mthanique. La

biodgradation anarobie de la matire organique est en effet un processus squentiel comportant
quatre tapes biochimiques ralises par trois groupes bactriens de caractristiques trs distinctes
fonctionnant en synthrophie (voir Figure 21). Les micro-organismes actifs sont des bactries
anarobies strictes ou facultatives. La mthanisation se droule en 4 tapes biochimiques :
- 1 Hydrolyses,
- 2 Acidogense,
- 3 Actogense,
- 4 Mthanogense.
M atire organiques
(biopolymres)
H ydrolyse
M onomres
Acidogense
Acides gras
volatils (AG V) 2
6 atomes de
carbone
Actogense
CO 2
Actate
H2
M thanogense
CH 4 + H 2 O
CO 2
Figure 21 : Les 4 tapes de la mthanisation (daprs Gourdon, 1987).

Trois groupes distincts de bactries interviennent dans le processus de mthanisation. Il faut donc
maintenir un quilibre dynamique permanent entre ces populations. Lhydrolyse tant ralise
lextrieur des cellules, aucun micro-organisme ne peut vivre au dpend de cette seule tape, et ce sont
donc les mmes bactries qui ralisent lhydrolyse et lacidification.

61
a) Hydrolyse et Acidogense
Lhydrolyse des biopolymres est souvent une tape cintiquement limitante. Lacidogense conduit
la formation dacides gras volatils (AGV), de CO2 et H2. Cette tape peut tre rapide et entrane
lacidification du milieu. Au niveau biochimique, les mcanismes cataboliques sont ceux dcrits dans
le partie I. Le compos pivot des fermentations (acides, alcooliques,) est le pyruvate. Au niveau
microbiologique, ltape dhydrolyse-acidogense est ralise par des bactries anarobies facultatives
ou strictes. Certaines espces ont une activit hydrolytique importante. Les genres suivants sont les
plus reprsents : Bacillus, Clostridium, Pseudomonas, Micrococcus, Alcaligenes. Il est indispensable
que les dchets solides soient correctement broys pour favoriser la biodgradation, et le milieu en
cours de digestion doit tre suffisamment agit pour permettre un bon contact entre les substrats et les
micro-organismes et une bonne syntrophie entre les diffrentes populations. Il est parfois intressant
de sparer les phases dhydrolyse-acidogense et dactogense-mthanogense en 2 racteurs en
srie. Mais cela peut entraner des difficults pratiques quil est parfois difficile de matriser.
b) Lactogense
Lactogense est la transformation des AGV (Acides Gras Volatils) en actate, CO2 et H2
principalement. Ltape dactogense est ralise par un groupe particulier de bactries anarobies
strictes, les bactries Actognes Productrices Obliges dHydrogne (OHPA en anglais). Les
produits de ltape dacidogense autres que les AGV (alcools etc.) sont transforms en acides par
les bactries acidognes, lesquels acides servent de substrats aux bactries actognes.
Toutes les bactries actognes (OHPA) produisent de lhydrogne (H2). Thermodynamiquement, la
dgradation des AGV en actate nest possible qu de faibles pressions partielles en H2. Il faut par
exemple p(H2) < 10-4 atm pour que la transformation du propionate en actate soit possible. Il faut
donc une syntrophie trs troite entre les bactries actognes et dautres bactries capables de
consommer lH2 produit (mthanognes, sulfato-rductrices, ). Les bactries actognes ont des
temps de gnration trs longs : 6 8 jours 30C pour Syntrophobacter wolinii (qui dgrade le
propionate), 90 180 h et 72 96 h respectivement pour Syntrophomonas wolfei et Clostrium bryantii
(qui dgradent le butyrate). Ce groupe de bactries est la charnire fondamentale de lquilibre des
populations bactriennes en cours de digestion anarobie.
c) Mthanogense
Elle est assure par les bactries mthanognes qui sont des anarobies strictes trs particulires
(structurellement et physiologiquement) tel point quon considre quelles correspondent une
classe de bactries tout fait part dans le rgne des protistes. Il sagit des Archaebactries. Ces
bactries ne sont capables dutiliser quun nombre trs rduit de composs carbons.
62
- Le formate pour beaucoup despces,

- Lactate, le mthanol et le mthylamine pour quelques espces.
Presque toutes les espces peuvent produire du mthane partir du mlange : H2 + CO2
suivant la raction :
CH4 + 2 H2O -567 kJ.mol-1
CO2 + 4 H2
La production de CH4 partir dactate a lieu suivant la raction suivante :
CH3COOH + H2O
CH4 + H2CO3
-130 kcal.mol-1
Cette dernire voie est responsable denviron 70% du CH4 produit en digesteur. Le temps
gnration des bactries mthanognes varie de quelques heures sur H2 + CO2 9 jours sur actate
pour Methanothrix soehngenii 35C.
Maturation du digestat :
Cette dernire tape conduit la stabilisation de la matire organique et saccompagne dune baisse de
la production de biogaz. Les molcules faiblement biodgradables se transforment lentement en
molcules complexes et plus stables telles que lhumine, les acides humiques et les acides fulviques
(stabilisation par humification).
Sulfato-rduction :
Il sagit dun processus biochimique de respiration anarobie correspondant un transfert dlectrons
et de protons partir dun substrat organique ou de lhydrogne molculaire, vers un accepteur
minral, lion sulfate (SO42-) (Sgura, 1984). Les micro-organismes impliqus sont les bactries
sulfato-rductrices ou BSR, qui, en condition anarobie stricte, transforment le lactate, le pyruvate et
lthanol. Les produits terminaux essentiels sont lion sulfure S2- ou le sulfure dhydrogne HS- et
leau. En prsence de concentrations leves en sulfates dans les dchets, la sulfato-rduction peut
entrer en comptition avec la mthanognse pour la consommation de lhydrogne form ltape de
lactognse (Robinson et Tiedje, 1984).
II.3.3.4- Facteurs dinfluence
a) Temprature
Le phnomne de mthanisation est peu oxydatif donc peu exothermique. Pour favoriser lactivit
microbienne, il est ncessaire de chauffer et de thermostater les digesteurs, le plus souvent en utilisant
une part du mthane produit. On peut alors choisir un optimum autour de 30-35 C (zone msophile)
63
ou vers 45-55 C (zone thermophile) qui permet daccrotre la vitesse de raction dun facteur 2 4,
mais qui implique en contrepartie une plus grande dpense nergtique.
b) pH
Le pH optimum se situe autour de la neutralit. En de de pH 6, les bactries actognes et
mthanognes sont fortement inhibes. Une chute de pH est le signe dun dysfonctionnement du
systme et ncessite une intervention immdiate, daddition dalcali (lait de chaux, soude, potasse ou
carbonates). Pour conserver une marge de scurit, on travaille gnralement pH 7,5-8.
c) Oxygne molculaire et teneur en eau
Loxygne O2 est toxique pour les bactries anarobies strictes que sont les bactries actognes et
mthanognes. Il faut donc viter toute entre dair en travaillant par exemple en conditions noyes.
La mthanisation est donc un procd particulirement adapt aux dchets fortement humides. La
teneur en eau optimale se situe aux alentours de 90%.
d) Potentiel redox
Les bactries anarobies strictes que sont les mthanognes et actognes, demandent un trs faible
potentiel rdox infrieur 300 mV, avec un optimum aux alentours de 520 mV pour la croissance
des mthanognes.
e) Rapport C/N
Le rapport C/N optimal est proche de celui des conditions arobies soit de lordre de 20-40.
Cependant, il varie galement en fonction de la disponibilit de la source de carbone et surtout de la
source dazote contenues dans le substrat trait.
f) Agitation
Dans ce milieu extrmement humide, lagitation a pour objectif dviter dune part la flottation de
certains dbris (vgtaux par exemple) et dautre part la dcantation de parties plus denses. Cette
agitation, qui na besoin dtre permanente, peut se faire mcaniquement, par pompage priodique ou
par circulation de biogaz comprim.

64
II.4. Mise en Centre dEnfouissement Technique (CET)
II.4.1- Introduction
Contrairement aux filires de traitement biologique des dchets, la mise en dcharge ne profite pas, le
cas chant, du caractre biodgradable dune fraction du dchet trait pour une valorisation agricole
ou nergtique sauf si le biogaz est collect. Pourtant, si le dchet contient de la matire organique, les
conditions particulires de stockage rencontres dans les centres denfouissement technique (CET)
permettront le dveloppement de micro-organismes qui sattaqueront la matire organique par des
phnomnes de dgradation arobie ou anarobie. Le problme de la biodgradabilit des dchets
traits par cette filire sinscrit donc dans le devenir, court, moyen et long terme, de cette fraction
organique et donc de lensemble de la dcharge.
Lors de leur stockage en centre denfouissement technique, les dchets peuvent tre soumis des
agressions microbiennes, quelles soient souhaites ou limites par les conditions de mise en dcharge.
Il apparat donc important de prciser les deux types de scnarios mise en dcharge o la notion de
biodgradation et les nombreux termes qui lui sont associs doivent tre pris en compte. Il sagit
de :
1- La mise en dcharge des dchets mnagers et assimilables dans les dcharges de classe II. La
biodgradation peut tre considre comme tant un procd de rduction du volume de dchets,
de stabilisation de la matire organique dans le massif de dchets, mais aussi de valorisation
nergtique lorsque le biogaz produit est rcupr. Par consquent le caractre fermentescible
est un critre positif et recherch dans le concept dcharge = bioracteur . La biodgradation
est galement considrer au niveau de ladmission des dchets en dcharge de classe II, tant
donn la politique rglementaire europenne qui encourage les tats membres rduire la quantit
de dchets organiques fermentescibles mis en dcharge.
2- La mise en dcharge des dchets dangereux ou industriels spciaux en dcharge de classe I. En
considrant que la mise en dcharge de classe I ne concerne que les dchets dangereux ultimes
ayant un traitement de stabilisation, le risque dune volution biologique est faible mais non nul.
En effet, en condition de stockage, les dchets peuvent tre soumis des agressions dorigines
microbiennes mme si les conditions de stockage sont destines les rduire. Ces agressions
peuvent se traduire par une biodtrioration des dchets solides stocks.

65
II.4.2- Contexte rglementaire diffrentes classes de CET

Jusqu' un pass rcent, la mise en dcharge tait la voie la plus utilise pour traiter les dchets. Il tait
en effet simple et peu onreux de se dbarrasser ainsi d'un dchet indsirable. Dans les annes 70, la
rglementation franaise sur les dcharges s'est adapte l'volution des connaissances scientifiques et
la demande sociale de plus en plus exigeante en matire d'environnement. Les lois du 15 juillet 1975
modifie par la loi du 13 juillet 1992 indiquent ainsi qu' compter du 1er juillet 2002 seuls les dchets
ultimes pourront tre accueillis en dcharge. Paralllement ont t cres trois classes de dcharges,
renommes Centres d'Enfouissement Technique (CET) :
- Les sites de classe III rservs aux dchets inertes (minraux principalement),
- Les sites de classe II rservs aux dchets mnagers et aux dchets industriels assimilables (DIB).
L'arrt du 09 septembre 1997 sur les installations de stockage de classe II fixe la liste des dchets
admissibles et interdits,
- Les sites de classe I rservs certains dchets industriels spciaux (DIS).
A lheure actuelle, la mise en dcharge des dchets est rglemente par la directive europenne
1999/31/CE du 26 avril 1999 publie au JOCE le 16 juillet 1999 et rectifie le 5 novembre 1999. Elle
doit permettre de rpondre aux exigences de la directive 1975/442/CEE (JOCE n L 194 du 25 juillet
1975), modifie par la directive 96/350/CE de la commission (JOCE n L1135 du 6 juin 1996) sur les
mesures et procdures suivre dans la gestion des dchets et des dcharges pour prvenir et/ou rduire
autant que possible les nuisances de la mise en dcharge des dchets. Cette directive prcise entre
autres les dchets admis ou non dans les diffrentes catgories de dcharges. Les caractristiques
techniques des trois catgories de dcharges sont dtailles dans la directive europenne 1996/61/CE
(JOCE n L 257 du 10 octobre 1996).
II.4.3- Evolution des dchets organiques en centre denfouissement technique de

classe I
II.4.3.1- Rglementation spcifique
Les dcharges de classe I (ou dcharges pour dchets dangereux) sont destins recevoir uniquement
les dchets industriels spciaux (ou dchets dangereux, selon la dfinition donne dans la directive
europenne 1975/442/CEE) ayant ventuellement subi un traitement leur permettant dtre considrs
comme des dchets ultimes rpondant aux critres dacceptation de mise en dcharge prciss dans
lannexe II de la directive europenne 1999/31/CE. La liste provisoire des dchets dangereux
admissibles dans les dcharges pour dchets dangereux est donne dans la directive europenne
2001/118/CE (JOCE n377 du 02 fvrier 2001), qui remplace la dcision 1994/31/CEE, JOCE n L
168 du 27 juillet 1994). Cette directive prcise les proprits physiques, chimiques et biologiques des
66
dchets qui les rendent potentiellement dangereux et imposent donc un traitement de stabilisation
avant leur mise en dcharge de classe I. La proprit biodgradable nest pas mentionne comme
une proprit donnant un caractre dangereux aux dchets.
Les critres dadmission des dchets sur les listes de rfrence ou dans une catgorie de dcharges
peuvent tre dfinis par dautres textes lgislatifs que la directive 1999/31/CE. Cette dernire prcise
cependant que ces critres doivent tenir compte du caractre biodgradable de la fraction organique
des dchets et de la ncessit de rduire au mieux la quantit de matire organique dans les dchets
mis en dcharge. En France, larrt du 18 dcembre 1992 (JO, 30 mars 1993) relatif au stockage de
certains dchets industriels spciaux ultimes et stabiliss pour les installations nouvelles (classeI)
prcise dans larticle 12 (chapitre II) la caractristique fermentescible comme critre de non
admission dun dchet en centre de stockage de classe I. La nature fermentescible dun dchet
nest pas dfinie avec prcision dans larrt du 18 dcembre 1992 et aucune norme ou procdure
exprimentale nest propose pour valuer ce critre, mis part la teneur maximale admissible en
carbone organique (COT) qui varie entre 3500 et 5000 mg par kg de dchet selon la catgorie de
dchet considr. Ces teneurs maximales en carbone organique limitent a priori les risques de
biodgradation des dchets ultimes accepts en dcharge de classe I.
Bien que les dchets comportant de la matire organique se soient pas accepts en CET de classe I, la
dfinition du dchet ultime mentionnant les conditions techniques et conomiques du moment peut
permettre dans certains cas de considrer ces dchets organiques comme ultimes. Par exemple si la
part organique est trop faible ou trop difficilement accessible, la valorisation de cette matire
organique devient non faisable ou non rentable d'un point de vue conomique. Aussi pourra-t-on
trouver en CET de classe I certains dchets solides non traitables et contenant une fraction de matire
organique (COT < 5 g/kg). La notion de biodgradabilit ou de fermentescibilit est alors importante
pour dterminer l'volution terme du dchet et les risques que cela engendre (odeurs, chauffement,
explosion).
II.4.3.2- Concept de la dcharge de classe I
Les dcharges de classe I sont bases sur le concept dit hors eau dont lobjectif est de rduire au
minimum le contact eau-dchet en vitant toute entre deau par les dchets eux-mmes ou par les
prcipitations. Les conditions de stockage des dcharges de classe I contribuent rduire les risques
dune volution biologique des dchets solides. La dcharge doit constituer une barrire efficace
autour du dchet dont la stabilisation fournit une deuxime barrire. Lenveloppe de la dcharge,
constitue gnralement dune couche dargile sous-jacente, est considre comme une barrire
passive qui doit tre complte par une barrire active telle quune gomembrane. Ces deux barrires

67
compltes par un dispositif de drainage doivent permettre de rduire considrablement la production

de lixiviats et de leur charge polluante.
II.4.3.3- Procds de stabilisation/solidification des dchets
a) Dchets ultimes et dchets stabiliss
Lvolution de la rglementation concernant le stockage des dchets ultimes, notion dfinie par loi du
15 juillet 1975 modifi le 13 juillet 1992, explique en grande partie le dveloppement des procds de
stabilisation/solidification. Ils doivent permettre de rduire les contacts en le dchet et
lenvironnement (barrire physique) et augmenter la rtention des polluants afin den rduire les rejets
dans lenvironnement. Cette stabilisation est prvue par larrt du 18 dcembre 1992 modifi par
larrt du 18 fvrier 1994. Daprs cet arrt, le dchet est considr comme stabilis quand sa
permabilit leau et sa fraction lixiviable ont t rduites et quand sa tenue mcanique a t
amliore de faon que ses caractristiques satisfassent aux critres dacceptation des dchets
stabiliss . Lefficacit des procds de stabilisation est value par des tests de lixiviation (cf NFX31-210, NFX 31-211 et NXF 31-212). Larrt du 18 dcembre 1992 modifi par larrt du 18 fvrier
1994 impose les conditions dadmission des dchets en dcharge, les dchets industriels spciaux se
rpartissant en trois catgories :
A- Dchets qui devraient tre stabiliss compter du 30 mars 1995,
B- Dchets qui devraient tre stabiliss compter du 30mars 1998,
C- Dchets admis au cas par cas.
Le Tableau 15 prsente la liste exhaustive des dchets Industriels spciaux (D.I.S.) ncessitant une
stabilisation avant leur mise en dcharge de classe I. La rglementation franaise dfinit deux
chances de stabilisation suivant le type de dchets considr. Les dchets prsents dans cette liste
sont pour la grande majorit constitus essentiellement dlments minraux avec un potentiel toxique
tels que les mtaux lourds et les mtallodes. La prsence de polluants organiques est toutefois
possible pour certains dchets industriels spciaux tels que les rsidus de forages, les rsidus de
peintures, les rsidus de traitement deffluents industriels, les sols pollus.
Daprs la rglementation franaise, ces dchets doivent tre essentiellement solides, minraux, avec
un potentiel polluant constitu essentiellement de mtaux lourds peu mobilisables. Ils doivent tre
chimiquement peu ractifs, trs peu volutifs et trs peu solubles. Nous rappelons une fois de plus que
les dchets prsentant la caractristique dtre fermentescible sont interdits dans les sites de stockage
de classe I. Par consquent, dans le cas de dchets contenant de la matire organique et non
susceptibles dtre traits dans les conditions techniques et conomiques du moment, la
68
stabilisation/solidification peut tre considre comme un procd permettant de rduire le caractre

biovolutif ou de fermentescibilit de tels dchets.
Tableau 15 : Liste des dchets industriels spciaux stabiliser (Arrt du 18 dcembre 1992,
modifi le 18 fvrier 1994).
Catgorie
Type de dchets
- Rsidus dincinration : REFIOM (Rsidus dEpuration des
A
Dchets devant tre stabiliss avant stockage depuis le 30 Fumes dIncinration des Ordures Mnagres),
mars 1995
- Rsidus de la mtallurgie (poussires, scories et crasses),
- Rsidus de forage rsultant de lemploi de fluide de forage
base dhydrocarbures,
- Dchets minraux de traitements chimiques (oxydes et sels
mtalliques, catalyseurs uss ).
- Rsidus de traitement deffluents industriels et deaux
B
Dchets devant tre stabiliss avant stockage depuis mars industrielles de dchets ou de sols pollus (boues, rsines
dchangeuses dions),
1998
- Mchefers rsultant de lincinration des dchets industriels
spciaux,
- Rsidus de peinture,
- Rsidus de mtallurgie,
- Rsidus damiante,
- Rfractaires et autres matriaux et minraux uss et souills,
- Rsidus de recyclage daccumulateurs et de batteries.
b) Principe
Les procds de stabilisation/solidification des dchets reposent sur le principe de la rduction des
rejets toxiques par ajouts de ractifs solides ou liquides. Ils permettent la solidification du dchet en
solidifiat (masse solide) permettant dune part de faciliter sa manutention et, dautre part, de limiter au
maximum la dispersion du dchet dans lenvironnement. Ils conduisent galement la stabilisation
des espces polluantes prsentes dans le dchet (rduction de la mobilit). Le pigeage des espces
polluantes telles que les mtaux lourds ou mtallodes dpend de mcanismes dinteractions physiques
et/ou chimiques complexes entre le dchet et le ciment.
c) Procds de stabilisation/solidification
Parmi les mthodes de traitements des dchets, la stabilisation/solidification par des liants
hydrauliques est encore actuellement la technique la plus utilise en raison de son faible cot, de sa
facilit de mise en uvre et de ladquation aux critres slectifs en vue de leur acceptation en centre
denfouissement technique de classe I.
Le ciment est un liant hydraulique form de constituants anhydres, cristalliss ou vitreux, constitu
principalement de silice, dalumine et de chaux. Avec de leau, il forme une pte qui durcit
progressivement (prise hydraulique) la suite de lhydratation des sels anhydres suivie dune
prcipitation des hydrates. Les principaux produits de lhydratation sont les silictes de calcium,

69
lhydroxyde de calcium (ou portlandite) et les sulfo-aluminate de calcium (Sanchez, 1996 ; Serclerat,
1996).
Suivant sa composition chimique et sa structure physique, le dchet peut entraner diverses
perturbations de la prise hydraulique du ciment et baisse des qualits physico-chimiques du solidifiat.
La fixation des mtaux lourds et des mtallodes dans la matrice solide est principalement du trois
mcanismes qui sont (Sanchez, 1996 ; Serclerat, 1996) :
- Rtention physique : Pigeage physique des particules de polluants inorganiques, soit dans une
gangue dhydrates, soit dans des pores ferms,
- Prcipitation: Prcipitation des mtaux sous la forme dhydroxydes mtalliques dans la phase
aqueuse (eau des pores de la matrice) sursature,
- Adsorption sur les hydrates de ciment tels que les minraux phylliteux qui dveloppent une trs
grande surface spcifique charge ngativement en milieu basique (Si-OH) et propice ladsorption
plus ou moins rversible des cations mtalliques.
d) Stabilisation/solidification de dchets contenant de la matire organique
La rglementation franaise impose la teneur maximale en Carbone Organique Total (C.O.T.) de
5000 mg par kg de dchet stabilis ou non pour son acceptation en dcharge de classe I dans le but
dviter tout risque de fermentescibilit. La rglementation amricaine, quant elle, interdit
lutilisation du procd de stabilisation/solidification par des liants hydrauliques lorsque les dchets
solides ou pteux contiennent initialement plus de 1% (pourcentage massique) de matire organique
(Conner, 1990 cit par Portland Cement Association, 1991).
Beaucoup de composs organiques sont insolubles dans leau et sassocient prfrentiellement la
phase solide. A faible teneur, la fraction organique contenue initialement dans le dchet brut peut
facilement tre stabilise lorsque la matrice hydraulique est peu permable. Cependant les composs
organiques peuvent interfrer dans le processus de stabilisation/solidification (Tittlebaum, et al, 1986 ;
Walsh et al, 1986 ; Eaton et al, 1987 ; Sheffield et al, 1987 ; Portland Cement Association, 1991 ;
Bates et al, 1992 ; Brown et al, 1992 ; Cullinane et Bricka, 1993). Dune manire gnrale, les tudes
sur la stabilisation/solidification de dchets contenant de la matire organique montrent que lintensit
des interfrences dpend dune part de la teneur en matire organique et, dautre part, de la nature des
molcules organiques prsentes initialement dans le dchet brut. Cependant, daprs Cullinane et al
(1993), de faibles quantits en produit organique suffisent modifier les caractristiques de la matrice.
La liste suivante donne quelques exemples dinteractions ngatives couramment cits dans la
littrature depuis une quinzaine dannes :
- Action physique des huiles et des graisses (Portland Cement Association, 1991) : les huiles et
graisses contenues dans un dchet brut peuvent empcher la raction entre leau et le ciment en
70
recouvrant ce dernier (les alcools et amides peuvent favoriser lmulsion des huiles et faciliter ainsi la
solidification),
- Retard de lhydratation du ciment lorsque certaines molcules organiques sont adsorbes la
surface du ciment avec pour effet de retarder, voir empcher, la prise hydraulique du ciment
(Portland Cement Association, 1991),
- Influence des molcules organiques ayant des proprits de floculants qui empchent la dispersion
de grains de ciment ncessaires la structuration du ciment (Portland Cement Association, 1991),
- Influence sur la microstructure du ciment (Tittlebaum et al., 1986 ; Walsh et al, 1986 ; Eaton et al,
1987) : des composs organiques tels que lthylne glycol ou le p-bromophnol favorisent
lapparition de lacunes dans le rseau cristallin et laugmentation de la porosit de la matrice.
Globalement, les interfrences observes sexpliquent par leffet retardateur et inhibiteur des
nombreuses familles de molcules organiques sur la prise hydraulique du ciment. Signalons cependant
que lajout de certaines familles de polymres organiques ont au contraire un effet bnfique sur les
qualits physico-chimiques et mcaniques du produit final (Venuat, 1971 ; Joisel, 1973). Ces
adjuvants organiques sont couramment utiliss dans les btons destins aux travaux publics et la
ralisation douvrages dart. Par consquent, dans le cas o un dchet stabiliser contiendrait de la
matire organique en quantit non ngligeable, il est indispensable de connatre les proprits
chimiques des familles de molcules organiques prsentes initialement dans le dchet brut avant la
mise en place du procd de stabilisation/solidification. Le procd doit permettre une rduction
significative de la mobilit des polluants organiques et galement assurer le pigeage des mtaux et
mtallodes galement prsents dans le dchet.
II.4.3.4- Altration biologique des dchets stabiliss par des liants hydrauliques
a) Introduction
Les agressions biologiques des dchets stabiliss sont thoriquement possibles long terme dans la
mesure o les conditions environnementales le permettent (humidit, milieu non strile) ce qui est
envisageable dans le cadre dun scnario de stockage long terme (Gourdon et al, 1996). Lensemble
des agressions subies par le dchet peut conduire, plus ou moins long terme, la diminution partielle
des qualits du solidifiat en tant que structure physique et de son environnement chimique assurant la
rtention des espces polluantes.
La durabilit dun matriau se dfinit par sa capacit maintenir ses qualits sur une longue dure
vis vis dagents physiques, chimiques (Tach, 1998) et microbiologiques (Bayard, 1993).
Laltration ou la dtrioration dsignent une rduction de qualit dun matriau considr (Rose,
1981). La dtrioration rsultant de laction dagents biologiques sera dsigne sous le terme de
biodtrioration (Gourdon et al, 1996). La durabilit, laltration et la dtrioration ncessitent donc
de dfinir la qualit du systme en terme de valeur, de proprit et de fonction du matriau considr.
Dans le cas des dchets solidifis par des liants hydrauliques, la notion de qualit repose sur
limmobilisation des lments polluants (inorganiques et/ou organiques) au sein de la matrice. Les
71
tests de lixiviation tels que NF 31-210, et NF 31-211 sont utiliss comme outils dvaluation de cette
qualit et comme outils didentification des paramtres essentiels contrlant le relargage.
b) Mcanismes de bioaltration
Les principaux agents biologiques de la (bio)altration ou (bio)dtrioration des dchets
stabiliss/solidifis par des liants hydrauliques sont les micro-organismes susceptibles de se
dvelopper dans lenvironnement des dchets. Les micro-organismes sont reconnus comme tant des
agents importants dans la biodtrioration des minraux dans les sols, les btons, les ciments et les
pierres douvrages. De nombreux exemples de dtriorations biologiques sont rapports dans la
littrature scientifique (Berthelin, 1976 ; Krumbein et al, 1978 ; Krumbein, 1988 ; Griffin et al, 1991 ;
Cifferi et al, 2000). En gnral, les micro-organismes accentuent laction dautres agents agressifs
avec de nombreuses synergies entre plusieurs agents agressifs.
Les agressions microbiennes dun matriau reposent sur la biotransformation des constituants de ce
matriau et/ou leffet agressif dagents biochimiques mtaboliss partir des substances se trouvant
dans le matriau lui-mme ou dans son environnement immdiat (Gourdon et al, 1996). Leurs
caractristiques mtaboliques et gnotypiques sont trs varies.
- La biotransformation se dfinit comme tant un mcanisme direct de dtrioration,
- Lattaque biochimique se dfinit comme tant un mcanisme indirect de dtrioration. La
production dagents chimiques par voie mtabolique conduit donc des agressions chimiques de la
matrice.
Biodtrioration directe et indirecte peuvent videmment se produire simultanment.
c) Mcanismes de biodtrioration directe
Pour les matriaux plastiques constitus principalement de polymres organiques trs longues
chanes, la biodtrioration est implicitement lie au processus de biodgradation qui se dfinit comme
lensemble des ractions de transformation ou de destruction des lments constitutifs du matriau
dues laction dagents biologiques (Hilaire, 1994). Dans le cas des dchets stabiliss base de liants
hydrauliques, la biodtrioration directe est lie la mtabolisation de la matire minrale et
organique prsentes dans la matrice. La Figure 22 reprsente schmatiquement les interactions
possibles entre la matrice solide et les micro-organismes.

72
Production
Micro-organismes
denzymes
en suspension dans
extracellualires
leau
H2 O
H2O
Biofilm
Matrice hydraulique
Mtabolisme
Dchet organique
Production
denzymes
extracellualires
Produits de biodgradation
-
produits organiques,
minraux.
Figure 22 : Schma global de la biodtrioration directe dun dchet contenant de la matire

organique et stabilis par des liants hydrauliques.
La bioaltration directe peut tre due soit au mtabolisme des micro-organismes en suspension dans la
phase liquide environnant le matriau, soit au mtabolisme des micro-organismes se dveloppant en
surface sous la forme de biofilms. Les enzymes extra-cellulaires librs par ces micro-organismes
hydrolysent les polymres organiques biodgradables en oligomres ou monomres ce qui offre une
nouvelle source de carbone.
a) Mtabolisation de composs minraux : Les bactries autotrophes (micro-organismes qui utilisent le
CO2 ou le bicarbonate comme source de carbone) sont susceptibles doxyder le fer, le manganse ou le
soufre pour leurs besoins nergtiques.
b) Mtabolisation de composs organiques : la matire organique contenue dans la matrice cimentaire
peut, si elle est accessible, tre directement utilise comme substrat organique (= source dnergie +
source de carbone) par les micro-organismes chimioorganotrophes.
c)
Altrations mcaniques : La croissance et la pntration des myceliums de diverses moisissures vivant

en surface du dchet et lintrieur des pores, peuvent entraner lclatement de ces pores et ainsi
augmenter significativement laltration mcanique du dchet (Gourdon et al, 1996).
d) Mcanismes de biodtrioration indirecte

Dans le cas de la biodtrioration indirecte (voir Figure 23), ce sont les mtabolites (intermdiaires ou
finaux) produits par les micro-organismes partir de substances se trouvant dans leur environnement
ou dans le matriau qui altrent le matriau. Ces manifestations relvent de trois phnomnes en
particulier : 1) la production d'acides minraux ou organiques, 2) la production d'agent complexants et
3) la production d'agents oxydants (Gourdon et al, 1996). Lobservation de nombreux matriaux
altrs a mis en vidence limplication dune microflore varie : des bactries, des champignons et des
algues.
73
H2O
Solubilisation
dions
Micro-organismes
mtalliques
en suspension dans
mtaux
leau
Matrice hydraulique
Biofilm
Oxydation
agents oxydants.
agents complexants,
Complexolyse
acides minraux,
Mtabolisme
produit :
acides organiques,
H2O
Acidification
de la surface
Dchet organique
Conditions favorables
Solubilisation d
pour linstallation de
lments de la
micro-organismes
matrice
acidophiles
Figure 23 : Schma global de la biodtrioration indirecte dun dchet contenant de la matire

organique et stabilis par des liants hydrauliques.
i) Production dacide sulfurique
Lacide sulfurique est produit au cours de loxydation de composs soufrs par des bactries
sulfoxydantes chimiolithotrophes. Lnergie retire de cette oxydation fournit lnergie ncessaire la
croissance de ces bactries. Le genre Thiobacillus est celui le plus impliqu dans laltration du
ciment. En effet ces bactries oxydent lhydrogne sulfur (H2S) pour former de lacide sulfurique qui
dgrade progressivement la matrice cimentaire comme il suit :
H2S+ 2 O2 H2SO4
Chaux du bton Ca (OH)2 + H2SO4 => 2H2O + gypse CaSO4 qui se solubilise ou clate le bton.
ii) Production dacide nitreux et nitrique
Des bactries autotrophes chimiolithotrophes peuvent oxyder l'ammoniac en nitrites puis en nitrates
(nitrification). Les genres impliqus dans l'oxydation de l'ammoniac en nitrites et acide nitreux sont :
Nitrosococcus, Nitrosomonas, Nitrosolobus, Nitrosospira, Nitrosovibrio. L'oxydation des nitrites en
nitrates est assure par les genres Nitrobacter et Nitrospira. Cependant les exemples d'altrations de
matriaux, mettant en cause uniquement des bactries nitrifiantes, sont peu nombreux.

74
iii) Production dacides organiques et d'agents complexants
Une large varit de micro-organismes htrotrophes anarobies peut, en se nourrissant de substrats

organiques, gnrer divers acides organiques. Les acides organiques corrodent les ciments et les
matriaux de mme nature comme les roches et minraux. Les cations de la matrice cimentaire
forment avec les agents complexants et les acides organiques des sels ou des complexes qui sont plus
facilement solubilisables. Ce sont des phnomnes d'acidolyse et de complexolyse (Bayard, 1993).
iiii) Production de Fe3+
Le Fe3+ est un oxydant capable de ragir avec les sulfures mtalliques selon l'quation suivante :
Soit M un mtal divalent
MS + 2 Fe3+
M2+ + 2 Fe2+ + S
Thiobacillus thiooxidans est capable de roxyder Fe2+ en Fe3+ ce qui peut entraner un cycle de
solubilisation du mtal.
II.4.3.5- Conclusions
Un dchet stabilis / solidifi est potentiellement susceptible d'voluer long terme en condition de
stockage. Laltration et la dtrioration du dchet peuvent alors entraner la mobilisation de polluants
ce qui est contraire lobjectif souhait. La prsence de matire organique au sein du dchet peut tre
une source potentielle de carbone et dnergie pour un certain nombre de micro-organismes qui
peuvent se dvelopper au dpend du dchet et acclrer ainsi la solubilisation de polluants de la
matrice cimentaire. Cependant nous ne savons pas dans quelles proportions et sur quelle priode se
produit lvolution biologique du dchet par rapport son altration globale (physique, chimique et
biologique).

75
II.4.4. Evolution des dchets organiques en centre denfouissement technique de

classe II
II.4.4.1- Rglementation spcifique des dcharges de classe II
Jusqu' un pass rcent, la mise en dcharge tait la voie la plus utilise pour traiter un dchet. Il tait
en effet simple et peu onreux de se dbarrasser ainsi d'un dchet indsirable. Dans les annes 70, la
rglementation franaise sur les dcharges s'est adapte l'volution des connaissances scientifiques et
la demande sociale de plus en plus exigeante en matire d'environnement. Les lois du 15 juillet 1975
et du 13 juillet 1992 indiquent ainsi qu' compter du 1er juillet 2002 seuls les dchets ultimes pourront
tre accueillis en dcharge. Paralllement ont t cres les trois classes de dcharge, renommes
Centre d'Enfouissement Technique (CET). Les sites de classe II rservs aux dchets mnagers et aux
dchets industriels assimilables (DIB).
Bien que les dchets comportant de la matire organique se soient pas a priori accepts en CET, la
dfinition du dchet ultime mentionnant "les conditions techniques et conomiques du moment"
permet dans certains cas de considrer ces dchets comme ultimes. Par exemple si la part organique
est trop faible ou trop difficilement accessible, la valorisation de cette matire organique devient non
rentable d'un point de vue conomique. Aussi pourra-t-on trouver en CET (classe II principalement)
une fraction fermentescible. La notion de biodgradabilit est alors importante pour dterminer
l'volution terme du dchet et les risques que cela engendre (odeurs, chauffement, explosion).
L'arrt du 09 septembre 1997 relatif aux dcharges existantes et aux nouvelles installations de
stockage de dchets mnagers et assimils (JO du 2 octobre 1997) fixe la liste des dchets admissibles
(annexe I de larrt) et la liste des dchets interdits (annexe II de larrt).
Les dchets admissibles dans les dcharges de dchets mnagers et assimils sont rpartis, en
fonction de leur comportement prvisible en cas de stockage et des modalits alternatives
d'limination, en deux catgories :
- La catgorie D : dchets dont le comportement en cas de stockage est fortement volutif et conduit
la formation de lixiviats de dcharge et de biogaz par dgradation biologique. La plupart des dchets
mnagers et assimils bruts, tels que collects sans sparation particulire auprs des mnages, issus
des activits dentretien urbain, de certaines activits artisanales, commerciales ou industrielles,
appartiennent cette catgorie. Ces dchets ne sont en gnral pas ultimes, notamment parce que leur
caractre polluant peut encore tre rduit.

76
- La catgorie E : dchets dont le comportement en cas de stockage est peu volutif, dont la capacit
de dgradation biologique est faible .
Les dchets de la catgorie D et de la catgorie E doivent tre stocks, autant que possible, dans des
casiers distincts. Nous rappelons que la directive europenne 1999/31/CE exprime la volont des tats
membres de la communaut limiter progressivement la quantit de dchets biodgradables entrant en
dcharge. La rduction des dchets la source, le tri, le recyclage, la valorisation des dchets sont des
actions prioritaires mener. Ces actions doivent permettre de rduire la quantit de dchets
biodgradables mise en dcharge au niveau national.
Condition dexploitation des dcharges de classe II
LADEME a rcemment publi un guide technique sur les installations de stockage de dchets
mnagers et assimils (ADEME, 1999). Larrt du 9 septembre 1997 prcise les conditions
dexploitation des installations existantes et les exigences concernant la mise en place de nouvelles
installations comme par exemple le contexte gologique et hydrogologique du site, la prsence dune
barrire de scurit passive telle quune couche argileuse de faible permabilit. Linstallation et les
conditions dexploitation doivent limiter autant que faire se peut et les rejets liquides et les
dgagements gazeux dans le respect des dispositions de la loi du 15 juillet 1975 (chapitre Suivi des
dchets). Cest le concept site tanche . La production et la composition chimique des effluents
liquides de la dcharge dpendent troitement de lactivit biologique de dgradation dans le massif de
dchet et des conditions climatiques.
- Les effluents liquides de la dcharge ou lixiviats sont issus de la percolation, travers la dcharge,
des eaux provenants des prcipitations et des dchets eux-mmes. Actuellement, ces lixiviats doivent
ncessairement tre drains, collects, stocks si ncessaire puis traits avant leur rejet. La dilution ou
lpandage des lixiviats sont interdits par larticle 35 de larrt du 9 septembre 1997. La toxicit et la
charge polluante dpend de la composition des dchets solides enfouis et de leur volution biophysico-chimique.
- Les effluents gazeux (biogaz) principalement constitus de CO2, H2S et CH4 sont issus de lactivit
biologique de fermentation anarobie (ou mthanisation) de la fraction organique biodgradable de la
dcharge. Tout comme les lixiviats, la production et la composition du biogaz dpend galement de la
composition des dchets et de leur volution bio-physico-chimique.
II.4.4.2- Concept classique de dcharge de classe II
Au regard de la rglementation franaise (arrt Ministriel du 9 septembre 1997), la dcharge de
classe II doit tre un site tanche avec barrire passive ou active si ncessaire et compactage du massif
77
de dchets, o la circulation de leau est limite afin de rduire la production de lixiviats. La faible
humidit dans le massif conduit rduire la production de biogaz et diminuer galement la
biodgradation et la biostabilisation de la fraction fermentescible dans la dcharge. Par ailleurs, la
rglementation europenne (Directive 1999/31/CE) tend galement rduire la fraction de dchets
organiques mis en dcharge. Le dficit en eau et la rduction de la fraction organique fermentescible
conduit limiter les risques dvolution biologique et physico-chimique des dchets mais ne permet
pas de faciliter la stabilisation de la matire organique prsente dans le massif de dchet.
II.4.4.3- Concept dcharge de classe II- Bioracteur
La fraction fermentescible des dchets mnagers et assimils ne sera sans doute plus, plus ou moins
long terme, accepte dans les dcharges existantes et les nouvelles installations denfouissement de
dchets mnagers et assimils. Cependant, les conditions techniques et conomiques du moment
expliquent lacceptation de dchets fermentescibles dans les CET actuelles. Lvaluation de la
biodgradation est alors importante pour dterminer lvolution long terme des dchets solides
organiques et la nature des rejets produits. Une fois enfouis, la plupart des dchets organiques volue
sous linfluence principale de lactivit biologique des micro-organismes prsents dans les dchets
solides. La biodgradation de la fraction organique fermentescible est due un ensemble complexe de
mtabolismes de communauts arobies et anarobies (Palmisano et Barlaz, 1996). La dcharge peut
donc tre considre comme un racteur biologique (bioracteur) o se succdent une phase arobie
relativement courte puis les phases anarobies dacidogense et de mthanogense qui peuvent durer
des dizaines dannes (Rees, 1980). Le principe de la dcharge = bioracteur est prsent dans la
Figure 24.

78
Compartiment
hydraulique
Dchets
Permabilit du
milieu
-
Biogaz
Destruction de
la matire
Vitesse de percolation
Temps de sjour
etc.
Compartiment
physico-chimique
Solubilisation de la matire
Compartiment
biologique
Lixiviats
Figure 24 : La dcharge : racteur bio-physico-chimique.

La gestion de la dcharge peut alors tre conduite dans lobjectif de stimuler de la production de
mthane (valorisable du point de vue nergtique), et la de biodgradation/biotransformation de la
fraction organique fermentescible susceptible de conduire sa bio-stabilisation. Loptimisation de la
production de mthane est recherche par lapport deau dans la dcharge (Manf, 1994). La
recirculation des lixiviats de la dcharge dans le massif de dchets est une technique permettant
daugmenter lhumidit des dchets et de favoriser ainsi la biodgradation de la fraction organique
fermentescible des dchets solides.

79
II.4.4.4- Processus de biodgradation/biotransformation de la matire organique dans les

dcharges
a) Introduction
Lorsque les matires biodgradables sont mises en dcharge, elles font lobjet dune volution
biologique arobie ou anarobie. Pour lessentiel, compte tenu de la difficult pour loxygne
daccder au cur de la dcharge, les volutions aprs une phase arobie relativement courte, sont
anarobies avec production de biogaz (mthane et dioxyde de carbone) et de mtabolites organiques
ou minraux solubles dans leau (AGV) ou gazeux (H2S, NH3).
Globalement, la biodgradation et la biotransformation de la fraction organique fermentescible des
ordures mnagres sont des mcanismes relativement longs. On assiste des mcanismes squentiels
en raison des mtabolismes distincts qui se succdent ou se superposent et qui dpendent des
conditions
darobiose
et
danarobiose.
On
distingue
principalement
deux
phases
de
biodgradation/biotransformation de la matire organique dans les conditions de mise en

dcharge (Barlaz, 1996) : une phase arobie relativement limite dans le temps et ncessitant de
loxygne et une phase anarobie beaucoup plus longue. Lensemble des processus ncessite donc
lintervention dune grande varit trophique de micro-organismes.
b) Phase arobie
Lvolution de la matire organique est proche de celle observe dans les premires de phases de
compostage. Elle est due lactivit microbienne de micro-organismes arobies (les bactries et les
moisissures) qui se traduit par une lvation de la temprature car les ractions doxydation sont
fortement exothermiques.
Le mtabolisme arobie peut se poursuivre jusqu minralisation complte des substrats
biodgradables. Les mtabolites finaux obtenus sont le gaz carbonique, leau, les carbonates (CO32-) et
les bicarbonates (HCO3-), les phosphates (PO43-) et les sulfates (SO42-). La biodgradation des
oligomres et monomres intermdiaires fournit par ailleurs aux micro-organismes lnergie et la
matire ncessaire leur croissance et leur multiplication au sein de la dcharge (Vincent, 1991). La
biodgradation conduit plus gnralement la formation de mtabolites correspondant des formes
plus ou moins oxydes des diffrents lments constitutifs de la matire organique (C,H,N,P,S). On
parle alors de biotransformation.
La dure de la phase arobie dpend notamment de lhtrognit des ordures mnagres, de leur
granulomtrie, de leur teneur en eau et des conditions de compactage. Lhtrognit du massif
favorise la cration de chemins prfrentiels dcoulement des eaux et de zones pauvres en oxygne
dans lesquelles les conditions sont impropres la multiplication des micro-organismes arobies. Aprs
80
appauvrissement de loxygne prsent dans le compartiment gazeux du massif, la biodgradation est

beaucoup plus lente, les micro-organismes arobies devant ncessairement utiliser loxygne apport
sous forme dissoute par les eaux de percolation. Pratiquement, la phase de biodgradation arobie
perdurer que dans la zone suprieure du massif de dchets, cest dire dans la zone o loxygne
pntre. Sa dure dpend principalement de ce paramtre.
c) Phase anarobie
Aprs la phase arobie, la masse de dchets enfouis subit une srie de phnomnes qui conduisent
des conditions danoxie (faibles teneurs en oxygne) puis danarobiose (absence doxygne) avec,
comme consquence, le dveloppement de lactivit mthanogne. La biodgradation de la fraction
fermentescible de la matire organique en condition anarobie dpend galement de nombreux
paramtres tels que la nature de la matire organique, lhumidit, la temprature ambiante, le pH etc.
Elle conduit la formation de mthane, de gaz carbonique, deau et dammoniac.
Les tapes de la biodgradation anarobie de la matire organique dans les dcharges sont les mmes
que celles prsentes pour le traitement biologique anarobie de la matire organique ( II.3.3
Traitement biologique anarobie : la mthanisation , p60).
II.4.4.5- Biodgradabilit de la matire organique dans les dcharges
Seuls les dchets alimentaires et environ les 2/3 du papier et du carton (essentiellement constitus de
cellulose) sont biodgrads long terme dans une dcharge. La biodgradation des autres composs
est souvent incomplte (Gendebien et al, 1992). Certains produits plus rsistants la biodgradation
tels que les oligomres rsultants de lhydrolyse des chanes de lignine chappent la minralisation et
sont prcurseurs des substances humiques (Gourdon, 1987). Les constituants des membranes et des
parois microbiennes peuvent, la mort des cellules, participer galement au processus de formation
des substances humiques. Ce processus conduit la stabilisation progressive de la dcharge, et
explique que la matire organique initiale nest pas totalement minralise en mtabolites ultimes
(CH4, CO2 et H2O).
Barlaz (1997) rapporte que les principaux polymres biodgradables des ordures mnagres sont la
cellulose et les hmicelluloses. Elment constitutif des parois cellulaires des vgtaux, la lignine est
galement prsente dans les dchets. Trs complexe, ce polymre est difficilement biodgradable en
conditions anarobies (Kayhanian, 1995). Dans les dchets lignocellulosiques, la lignine rduit la
(bio)accessibilit aux micro-organismes des autres polymres plus facilement biodgradables
(Barlaz, 1997).

81
PARTIE III : Evaluation de la

biodgradation/biotransformation/biodtrioration des dchets
solides organiques
III.1- Introduction
Dans le cadre de cette tude qui concerne essentiellement le mode de traitement des dchets (solides et
pteux) comportant une fraction significative de matire organique, nous ferons porter notre analyse
de la notion de biodgradabilit davantage vers les matriaux (dchets) en eux-mmes plutt que vers
telle ou telle molcule spcifique. Le paragraphe suivant est spcialement consacr la dfinition des
termes lis la notion de biodgradation.
Le deuxime paragraphe prsente les principes de prvision de la biodgradabilit d'une molcule
organique ou dun matriau partir des caractristiques physico-chimiques. Il sagit des paramtres
intrinsques lis la nature mme des composs organiques considrs.
De nombreux tests ont t dvelopps pour valuer de la biodgradabilit des molcules ou des
matriaux organiques. Leur principe commun est de mettre en contact le compos tudi avec des
micro-organismes et de suivre dans le temps des paramtres permettant destimer la biodgradabilit.
Le troisime paragraphe est consacr aux principales mthodes les paramtres gnraux de suivi de la
biodgradation.
Dans un quatrime et dernier paragraphe, nous indiquerons les principales procdures et normes sur la
biodgradabilit, en s'efforant de synthtiser et de prsenter la logique de ces tests dans l'optique
d'une utilisation et d'une application de ces procdures dans le cas des dchets organiques qui nous
intresse ici.
III.2- Rappel de dfinitions des termes lis la notion de biodgradation

Les dfinitions donnes ci-dessous ont t tablies partir des deux premiers chapitres de ce rapport et
des
informations
bibliographiques

qui
ont
permis
leur
rdaction.
Le
82
Tableau 16 et le Tableau 17 prsentent respectivement les dfinitions des termes lis la notion de
dgradation et de biodgradation (daprs Pettigrew et Johnson, 1996 ; Pagga, 1998 ; Lematre et al,
1998 ; Vert, 1999).

83
Tableau 16 : Dfinition des principaux termes lis la notion de dgradation.

Terme
Dgradation ou dcomposition
Minralisation
(dgradation ultime)
Transformation
Dtrioration ou altration ou corrosion
Dsintgration
Stabilisation
Dfinition
Conversion de composs organiques en produits plus simples sous laction
de facteurs physico-chimiques.
Dgradation de la matire organique sous laction de paramtres physicochimiques qui aboutit la formation dlments simples tels que le CO2,
CH4, H2O et O2.
Modification de la matire organique sous laction de paramtres
physico-chimiques qui aboutit la formation de produits organiques (si
produits plus simples, transformation = dgradation).
Action de (se) dtriorer ou son rsultat, correspondant la rduction de
qualit ou de valeur du systme considr.
(Le verbe dtriorer provient du latin deterior qui signifie plus
mauvais ).
Dcomposition physique du matriau en petits fragments
Rduction des proprits de dcomposition ou daltration de la matire
organique (ou de dchets).
Tableau 17 : Dfinition des principaux termes lis la notion de biodgradation.

Terme
Biodgradation ou biodcomposition
Biodgradable
Fermentescible ou biovolutif
Biodgradabilit
Biodgradabilit inhrente ou intrinsque
Biodgradabilit pratique
(Bio)minralisation
(biodgradation ultime)
Biominralisable
Biotransformation
Bioassimilation
Biodtrioration ou bioaltration
Biostabilisation
Hyginisation

Dfinition
Conversion de composs organiques en produits plus simples par des microorganismes sous laction denzymes.
= Dgradation biologique
Capable dtre dgrad sous laction de micro-organismes en condition arobie
(en prsence dO2) ou anarobie (en absence dO2).
Capable de subir une dgradation biologique sous laction de microorganismes en condition arobie (en prsence dO2) ou anarobie (en absence
dO2).
Remarque : Il sagit de termes relativement vagues frquemment rencontrs
dans les textes rglementaires franais et europens. Synonyme de
biodgradables.
Potentiel dun compos organique dtre (bio)dgrad en produits plus simples
sous laction de micro-organismes.
sous laction de micro-organismes dans les conditions optimales. Elle dpend
des proprits intrinsques du produit.
sous laction de micro-organismes dans un environnement donn.
Biodgradation de la matire organique sous laction de micro-organismes qui
aboutit la formation dlments simples tels que le CO2, CH4, H2O et O2.
Capable dtre dgrad sous laction de micro-organismes donner au final des
lments simples tels que le CO2, CH4, H2O et O2.
Modification de la structure chimique et ou physique de composs minraux
ou organique sous laction de micro-organismes qui aboutit la formation de
produits ne pouvant pas tre considrs comme plus simples que les composs
de dpart (Ex : rduction des mtaux, mthylation, humification ). Si
produits plus simples, biotransformation = biodgradation.
Biotransformation qui aboutit lutilisation par les micro-organismes des
sous-produits de la dgradation (Ex : rduction assimilative des ulfates).
Rduction de la qualit ou de la valeur dun systme considr sous laction
dagents microbiens.
Remarque : Dans le cas dun matriau contenant de la matire organique, la
biodgradation de celle-ci peut entraner une dtrioration des proprits de
ce matriau.
Rduction de la biodgradabilit de la matire organique sous leffet dagents
microbiens.
Destruction dans un dchet organique des micro-organismes pathognes
nuisibles aux cultures, aux animaux ou lhomme
84
Tableau 18 : Dfinition des principaux termes lis la notion de biodgradation dans les
traitements biologiques des dchets.
Traitement biologique
Compostage ou fermentation arobie
Compost
Mthanisation ou fermentation anarobie
Digestat

Traitement des dchets utilisant des micro-organismes visant rduire

leur volume (ou masse) leurs effets nfastes (stabilisation) ou
augmenter leur valeur (agronomique ou nergtique).
Dgradation biologique arobie thermophile de matire organique suivie
de sa transformation permettant de produire du compost en prsence
doxygne sous laction de micro-organismes.
Remarque : Le terme fermentation, couramment utilis dans les textes
rglementaires doit tre, de prfrence, rserv un mtabolisme
anarobie.
Matire organique stabilise et assainie produite par biodgradation et
biotransformation arobie de la matire organique frache.
Dgradation biologique anarobie de matire organique en absence
doxygne sous laction de micro-organismes et permettant de produire du
biogaz et du digestat.
Matire organique qui rsulte de la fermentation anarobie de matire
organique.
85
III.3.
Rappel
des
principaux
paramtres
et
facteurs
dterminant
la
biodgradation dun dchet

Lvaluation de la biodgradabilit dun dchet solide ou semi-solide contenant une fraction non
ngligeable de matire organique ncessite de dterminer :
- la composition chimique et les caractristiques physiques du dchet,
- les conditions physico-chimiques et cologiques dtermines par le scnario dutilisation, de
traitement, dlimination ou de stockage du dchet.
Lors de l'valuation de la biodgradabilit d'un dchet quel qu'il soit, la premire tape consiste en
l'analyse globale du dchet, c'est--dire la dtermination des paramtres physico-chimiques le
caractrisant. Les principaux paramtres lis au dchet sont lhtrognit du dchet organique, son
tat physique et la nature et la concentration des molcules qui le constituent.
III.3.1- Paramtres lis au dchet

III.3.1.1- Htrognit du dchet ou de la fraction de dchet
Les dchets dits complexes sont constitus de plusieurs matriaux, fractions organiques
(polymres, oligomres, monomres) et, dans de nombreux cas, de fractions inorganiques. Chaque
fraction a alors, en gnral, un comportement particulier vis vis de la biodgradation, qui peut tre
modifi par la prsence dautres fractions, ce qui rend ltude trs complexe. Cest le cas par exemple
de la fraction fermentescible des ordures mnagres.
III.3.1.2- Etat physique du dchet
a) Granulomtrie, porosit
Il convient dobserver laspect extrieur gnral du dchet. Les dchets lisses et massifs seront plus
difficilement biodgradables que les dchets granulaires poreux. En effet, les ractions mtaboliques
se droulent la surface du dchet ou des particules qui le constituent, cest--dire l o les microorganismes sont en contact avec le substrat. Ainsi, laugmentation de la surface spcifique du dchet
par rduction de sa granulomtrie accrot la surface de contact et donc laccessibilit des constituants
nutritifs aux micro-organismes, favorisant la biodgradation. Dans le cas par exemple dun traitement
biologique dun dchet massif ou compact, il peut tre utile de faire prcder le traitement biologique
dun prtraitement mcanique tel que le broyage (Barlaz et al, 1990) permettant de faciliter le contact
entre les micro-organismes et dhomogniser la fraction fermentescible.
86
b) Teneur en eau et oxygne

Les caractristiques physiques du dchet dterminent le taux dhumidit du dchet organique. Une
teneur en eau minimale de lordre de 50% de la masse brute est indispensable pour que le dchet
traiter puisse tre le sige dune bonne activit microbienne (Gourdon, 2001). Cependant, si le dchet
est trop humide, sa porosit lair diminue le rendant plus difficilement biodgradable en conditions
arobies. La teneur en eau optimale est gnralement comprise entre 60 et 80% de la masse brute pour
la plupart des dchets de biomasse.
III.3.1.3- Composition chimique de la fraction organique du dchet
a) Introduction
La biodgradabilit dpend de la composition chimique du dchet et notamment de la prsence de
certaines molcules. Dans la mesure du possible, il est donc utile de caractriser chimiquement la
fraction organique du dchet par des mthodes dextraction chimiques et de dispositifs analytiques
adapts aux diffrentes familles de molcules organiques. Ces techniques sont gnralement
relativement coteuses et difficiles mettre en uvre sur des dchets organiques complexes. Il existe
actuellement de nombreux travaux qui sintressent lvaluation de la biodgradabilit des molcules
organiques en fonction de leur structure chimique et des principales voies mtaboliques connues
(Niemi et Veith, 1989 ; SEFA, 1990 ; Verschueren, 1996). Il est possible sur Internet de consulter des
banques de donnes universitaires qui centralisent de nombreuses donnes fondamentales sur le sujet
(voir Tableau 19). Cependant, il sagit principalement de donnes thoriques sur la biodgradation
dune molcule donne le plus souvent soluble dans leau et qui sont difficilement utilisables dans le
cas de dchets solides complexes.
Tableau 19 : Sites sur Internet sur la biodgradabilit des molcules organiques.
Molcules
Composs organiques
Xnobiotiques
Pesticides
Composs organiques
Monomres organiques
Nom du site
The University of Minnesota
Biocatalysis/Biodegradation
Database
Adresse
http://umbbd.ahc.umn.edu/index.ht
ml
http://umbbd.ahc.umn.edu/predictbt/
International Society for the Study http://www.issx.org/
of Xenobiotics
EXTOXNET.Pesticide Information http://ace.ace.orst.edu/info/extoxnet/
Profiles (PIPs)
pips/ghindex.html
Syracuse Research Corporation
http://esc.syrres.com/efdb/biodeg.ht
m
http://esc.syrres.com/efdb.htm
http://esc.syrres.com/efdb/biolog.ht
m
Metabolic Database
http://cgsc.biology.yale.edu/metab.h
tml

87
b) Nature chimique de la matire organique dans les dchets

La matire organique des dchets peut tre divise en trois classes distinctes :
Polymres organiques naturels ou biopolymres
- Amidon,
- Cellulose,
- Hemicellulose,
- Lignine,
- Chitine et Chitosane,
- Polypeptides et protines,
- Lipides.
Les biopolymres sont les polymres forms dans la nature au cours des cycles de croissance des
organismes. Cest la raison pour laquelle on parle de biopolymres. Leur (bio)synthse implique de
nombreuses ractions mtaboliques catalyses par les enzymes. Ces polymres dorigines animales ou
vgtales constituent la majorit de la biomasse prsente dans les dchets solides ou semi-solides
contenant de la matire organique. Mis part le cas particulier de la lignine, biopolymre trs
complexe dorigine vgtale, ces macromolcules peuvent tre considres comme tant facilement
biodgradables si les conditions physico-chimiques et cologiques adquates sont runies. Leur
(bio)assimilation par les micro-organismes ncessite une hydrolyse en monomres sous laction
dexoenzymes et une oxydation des produits dhydrolyse.
Polymres organiques synthtiques (origine anthropique) :
- Polyesters,
- Polycaprolactones,
- Polyurthanes et polyurases,
- Polyanhydrides,
- Poly(amide-enamione)s,
- Polyvinyl alcool et polyvinyl actate,
- Polyacrylates.
Les polymres organiques synthtiques sont improprement dsigns sous le terme de matires
plastiques (Vert, 1999). Ils constituent une fraction non ngligeable des dchets dorigines
mnagres ou industrielles. Ils proviennent principalement des dchets demballage. Peu
biodgradables, ils ne sont pas inclus dans la fraction dite fermentescible tant donn leur trs
faible biodgradabilit. La biodgradabilit de ces matriaux dpend troitement de leurs proprits
chimiques (structure et nature des monomres, etc.) et de leurs proprits physiques (poids
molculaires, morphologie, etc.). En effet, la biodgradabilit des polymres synthtiques dpend de la
prsence de liaisons covalentes hydrolysable permettant la formation de molcules plus petites
(oligomres et monomres) plus facilement assimilables par les micro-organismes. Certains polymres
synthtiques bioassimilables ont t dvelopps ou sont en cours dtude pour faciliter la gestion des
dchets que gnre lutilisation massive des matires plastiques (Vert, 1999).
88
Autres composs organiques

- Hydrocarbures (HC),
- Hydrocarbures Aromatiques Polycycliques (HAP), et Hydrocarbures nitroaromatiques Polycycliques,
- Polychlorbyphnyls (PCB),
- Polychlorodibenzo-Dioxines et Furanes (PCDD/F),
- Pesticides.
Etc
Ces produits organiques et/ou leur dispersion dans lenvironnement sont gnralement d origine
anthropique. Dans ce cas, il sagit donc de molcules xnobiotiques. Dans le cas de dchets industriels
tels que les boues de station dpuration industrielles (STEPI) ou bien les sols fortement pollus, ces
polluants reprsentent une part importante voire la majorit de la fraction organique du dchet. Dans le
cas des ordures mnagres, il sagit plus gnralement de produits minoritaires appels
micropolluants organiques. Soit, il sagit de substrats organiques assimilables par les microorganismes biodgradateurs, soit, il sagit de produits organiques inhibiteurs de biodgradation
dautres composs organiques. Il convient alors de distinguer les substances et les seuils de
concentration interdisant totalement les ractions de biodgradation de celles qui ne font que les
ralentir. Rappelons que la toxicit dun produit chimique dpend principalement de sa concentration,
de sa disponibilit dans le milieu et du micro-organisme cible. Les substituants permettant des liaisons
avec dautres composs du milieu (type liaison hydrogne) favorisent la biodgradabilit des
molcules organiques en augmentant le contact entre le substrat, le milieu (souvent aqueux) et les
micro-organismes prsents. Au contraire, les substituants trop volumineux ou limitant la solubilit
dans leau de la molcule (substituants halogns par exemple) diminue sa biodgradabilit.
Les principales caractristiques physico-chimiques influanant la biodisponibilit sont les
suivantes :
- Solubilit dans leau,
- Aptitude former ou non des mulsions,
- Aptitude sadsorber sur les surfaces (adsorption physique, liaisons non covalentes),
- Aptitude former des liaisons ioniques ou covalentes avec les supports (adsorption chimique).
Par ailleurs, les molcules organiques biodgradables peuvent tre squestres par des liaisons
covalentes ou non covalentes avec la matire humique (Dec and Bollag, 1997). D'une manire
gnrale, toutes les caractristiques physico-chimiques qui tendent augmenter la disponibilit et la
surface de contact entre le substrat et les micro-organismes facilitent la biodgradation dudit substrat.
Par exemple, un corps soluble sera plus facilement mis disposition de la faune prsente dans
l'environnement aqueux.

89
c) Paramtres globaux de la matire organique

- Rapport massique C/N/P : Lanalyse chimique lmentaire en carbone, azote et phosphore
permettent de caractriser la valeur nutritive du dchet. Le carbone total est analys par des mthodes
de combustion (COTmtre) ou mthode chimique de Anne. Lazote est mesur par la mthode de
Kjelhdahl. Le rapport C/N/P optimal est de lordre de 100/(4-5)/1. Il ne sagit pas seulement dun
ordre de grandeur indicatif, car la disponibilit relle des sources de C, N et P dans dchet en toute
rigueur ne peut tre prise en compte. Ce rapport est une premire valuation de la biodgradabilit
dun dchet.
Il a t estim que les dchets mnagers sont constitus de 41% de papier et carton, 8% de dchets
alimentaires et de 17% de dchets verts (Barlaz et al, 1990). Ces fractions sont principalement
constitues de cellulose, dhmicellulose, de lignine, damidon, de lipides et de protines diverses. Les
polymres constituants les parois des cellules vgtales tels que la lignine, la cellulose et
lhmicellulose sont considrs comme tant plus ou moins biodgradables (Mustin, 1987 : Jeffries,
1994 ; Micales & Skog, 1997). Une revue bibliographique sur la biodgradation de la lignine et de
lhmicellulose a t publie en 1994 par Jeffries.
- Rapport cellulose/lignine : La biodgradabilit de la cellulose varie en fonction de son degr de
polymrisation et de son association avec la lignine (Micales et Skog, 1997). La cellulose prsente
dans les papiers est plus facilement biodgradable que la cellulose frache car elle est spare de la
lignine et la structure primaire de la cellulose est partiellement dtruite au cours de la fabrication du
papier (Rees, 1980). La lignine nest pas mtabolise par les micro-organismes anarobies et se
dcompose donc trs lentement en condition de mise en dcharge (Young & Frazer, 1987 ; Barlaz et
al, 1990 ; Wang et al, 1994) ou en condition de compostage (Tuomela et al, 2000). En condition de
mise en dcharge, la quantit de cellulose et dhmicellulose diminue de manire significative avec le
temps (Bookter et Ham, 1982 ; Ham et al, 1993 ; Wang et al, 1994). Le rapport cellulose/lignine peut
tre un indicateur de la dcomposition des dchets et donne une information sur la biostabilit de la
matire organique. Dans le cas de la fraction fermentescible des ordures mnagres, le ratio
cellulose/lignine est initialement de lordre de 3,8-4,0/1,0. Le fractionnement des diffrentes classes de
polymres organiques prsents dans les dchets peut tre effectu selon la mthode de van Soest et
Robertson, base sur des extractions acides squentielles et quantification par peses des fractions
dhmicelluloses, de cellulose et de lignine (Robertson & van Soest, 1981 ; Scherer et al, 1990).
- Teneur en carbohydrates non cellulosiques : Il sagit dhmicelluloses, de lamidon et des
oligosaccharides et monosaccharides comme le saccharose et le glucose. Les polymres non
cellulosiques peuvent tre quantifis sur un chantillon solide par une hydrolyse acide mnage ou
avec du mthyl-2-benzothiazolinon-hydrazon-hydrochlorure (MBTH) et mesure de labsorbance
635 nm (Uzaki et Ishwatari, 1983 : Pakulski et Benner, 1992).
90
- Teneur en cellulose : la cellulose contenue dans les dchets organiques peut tre dose par
hydrolyses successives avec de lacide sulfurique 24N et du MBTH 2N nm (Uzaki et Ishwatari,
1983 : Pakulski et Benner, 1992).
- Teneur en protines : Les protines contenues dans un solide sont quantifiables aprs hydrolyse
avec de lacide chlorhydrique 6N, raction avec de la ninhydrine et analyse par spectrophotomtrie
570 nm (Stevenson et Cheng, 1970).
- Teneur en lipides : Les lipides prsents dans les dchets sont principalement les huiles et les
graisses animales. Ils sont extractibles par un mlange de chloroforme/mthanol (1 :2) et quantifiables
par pese (Bligh et Dyer, 1959). Les lipides peuvent tre galement isols de dchets solides ou de
compost selon la procdure de Ekman et Ketola (1981) et analyse par GC-MS (Gonzales-Vila et al,
1999).
- Teneur en lignine : La teneur en lignine peut tre value en effectuant pralablement une
dpolymrisation loxyde de cuivre et quantification par chromatographie en phase gazeuse (Kgel
et Bochter, 1985).
- Teneurs en acides humiques, acides fulviques et humine : En science du sol, les acides humiques
sont dfinis comme la fraction organique soluble dans une solution alcaline et quantifiable par
prcipitation acide de lextrait alcalin, alors que les acides fulviques sont solubles dans les acides et les
bases. Lhumine est la fraction organique insoluble dans les solutions acides ou basiques (Schnitzer et
Khan, 1972). Il existe plusieurs protocoles de quantification des acides humiques, fulviques et des
humines dans les sols (Barriuso et al, 1985).
La matire organique prsente dans les dchets solides et, en particulier la fraction humique, peut tre
caractrise par des mthodes non destructives de spectroscopie telles que la spectromtrie infra-rouge
transforme de Fourier (FT-IR) (Tseng et al, 1996 ; Gonzales-Vila et al, 1999 ; Ratajska et Boryniec,
1998) et spectromtrie de Rsonance Magntique Nuclaire sur solide (RMN 13C) (Almendros et al,
1992 ; Kgel-Knaber 1997 ; Weber et al, 1998 ; Gonzales-Vila et al, 1999 ; Almendros et al, 2000 ;
Hedges et al, 2000). Ces techniques sont couramment employes par la caractrisation des fonctions
carbones de la matire organique des sols. Elles pourraient tre galement employes pour valuer le
degr dhumification de la matire organique en fonction de son caractre aromatique. Il existe
galement des mthodes pyrolytiques tel que tel que la pyrolyse couple avec une chromatographe gaz
avec dtecteur de masse (Py-GC-MS) permet galement didentifier les composs de la matire
organique (Gonzales-Vila et al, 1999). Ces auteurs ont dailleurs mis en vidence par spectroscopie
FT-IR, 13C RMN et pyrolyse couple GC-MS que les acides humiques dun compost taient
structurellement diffrents des acides humiques rencontrs dans les sols.

91
III.3.2- Facteurs environnementaux de la biodgradation / biodtrioration /

biostabilisation dun dchet
La caractrisation physique et chimique permet destimer thoriquement la biodgradabilit potentielle
des dchets solides contenant une fraction organique. Comme nous lavons vu dans les chapitres
prcdents, la biodgradation ne dpend pas seulement des paramtres intrinsques lis la nature du
dchet. Elle dpend troitement des facteurs environnementaux dfinis par son scnario dutilisation,
de traitement ou de stockage. Les principaux facteurs influenant la biodgradation des dchets
organiques et, plus gnralement les molcules organiques, peuvent tre classes en deux grandes
catgories.
III.3.2.1- Facteurs physico-chimiques
Ces facteurs sont dfinis partir de lenvironnement du dchet. Il existe 6 types denvironnements
possibles :
- Sol : scnario dpandage dun dchet dans un sol,
- Dcharge de classe I : scnario de stockage des dchets ultimes en site hermtique,
- Dcharge de classe II : scnario de stockage des dchets organiques solides en zone contrle mais
biologiquement active,
- Compost : Scnario de traitement biologique de compostage des dchets organiques,
- Eau : Scnario de traitement biologique arobie des dchets organiques en phase aqueuse (STEP),
- Digestat : Scnario de traitement biologique anarobie des dchets organiques.
Les principaux facteurs physico-chimiques qui influencent les ractions de biodgradation des
composs organiques des dchets sont les suivants : pH, temprature, potentiel redox, la concentration
en oxygne ou en accepteur dlectrons adquat, activit en eau (ou humidit), concentrations et
accessibilit aux micro-organismes des composs minraux ou organiques nutritionnels, prsence de
produits toxiques ventuels ou dinhibiteurs enzymatiques et prsence de molcules qui activent les
enzymes ncessaires ou qui induisent leur synthse.
III.3.2.2- Facteurs cologiques et physiologiques
Le caractre biodgradable dune molcule est mettre en relation avec lexistence du ou des microorganismes (agents biologiques) capables de mtaboliser partiellement ou totalement cette molcule.
Pour cela, lenvironnement, cest dire les conditions physico-chimiques du milieu, doivent permettre
le dveloppement des populations microbiennes dgradantes. Ces conditions optimales de croissance
des micro-organismes dpendent de lcologie de ces populations et de leurs besoins physiologiques.
Lexpression de lactivit biodgradatrice requiert, pour une population microbienne donne, des
conditions particulires dhumidit, de temprature, daration etc
92
III.4- Mthode dvaluation de la biodgradation ou biodtrioration
III.4.1- Introduction
Lvaluation de la biodgradation ou de la biodtrioration des dchets organiques solides et semisolides est un objectif difficile atteindre. Il nexiste pas lheure actuelle de mthodologie gnrale
spcifiquement adapte la problmatique dchet. Les chapitres prcdents nous ont permis de mettre
en vidence la double complexit du problme :
- Caractristiques physico-chimiques du dchet considr,
- Dfinition du scnario de gestion du dchet afin dtablir les conditions environnementales :
Enfouissement ou pandage, valorisation, stockage.
Le premier paragraphe sera consacr la prsentation la plus exhaustive possible des procdures
dvaluation de la biodgradation des molcules organiques et, plus spcifiquement, des matriaux
organiques qui sont dveloppes depuis environ une trentaine dannes. Pour cela, nous effectuerons
une tude approfondie des procdures conseilles par les lignes directrices proposes par la
communaut europenne, lOCDE (Organisation de Coopration et de Dveloppement Economiques)
et lUSEPA (United States Environmental Protection Agency) et les procdures normalises
lchelle nationale, europenne, amricaine et internationale (respectivement normes AFNOR, normes
CEN, normes ASTM et normes ISO). Les adresses lectroniques des organismes de normalisation sont
listes dans le Tableau 20. Les adresses lectroniques des organismes proposant des lignes directrices
concernant les essais dvaluation de la biodgradabilit sont listes dans le Tableau 21.
Tableau 20 : Liste des adresses lectroniques des organismes de normalisation consults.
Organisme
Adresse lectronique
AFNOR (France et Europe)
http://www.afnor.fr/
ANSI (USA)
http://www.ansi.org/
ISO
http://www.iso.ch
Tableau 21 : Liste des adresses lectroniques des organismes dinformations consults.

Organisme
Adresse lectronique
OCDE
http://www.oecd.org
USEPA OPPTS
http://www.epa.gov/docs/OPPTS_Harmonized/835_Fate_Transport_and_Tra
nsformation_Test_Guidelines/Drafts/
ASTM
http://www.astm.org
C.E.
http://europa.eu.int/comm/environment/index_fr.htm
En France comme l'tranger, il semble aujourd'hui ne pas exister de norme ou procdure d'valuation
de la biodgradabilit des dchets solides organiques proprement dits. Nous verrons dans quelle
93
mesure certains travaux en cours peuvent cependant tre exploits dans le cas de lvaluation de la
biodgradabilit des dchets.
Le second chapitre sera essentiellement consacr aux procdures normalises ou non dvaluation de
la biodgradabilit et de la biodtrioration des matriaux tels que les plastiques, emballages,
peintures etc. Il sagit dun domaine trs actif actuellement en terme de normalisation.
Afin den faciliter leur utilisation, on peut proposer trois modes de classement des ces normes.
- Orientation scnario de traitement. Par exemple, des procdures s'efforcent d'orienter leur
protocole vers des conditions de compostage en recrant artificiellement les conditions rencontres
lors de ces traitements. On retiendra, de faon non exhaustive :
Norme europenne : EN 13432 (2000),
Norme internationale : ISO 14855 (1999), ISO/CD 20200 (en projet 2001),
Normes amricaines : ASTM D 5338, 5509, 5512, 5929, 5975, 6003 (1996-1997).
- Orientation milieu dexposition (conditions dexposition environnementales particulires) :
arobie/anarobie, milieu aqueux, sol, sdiments etc. (voir Tableau 22 non exhaustif).
Tableau 22 : Classement des normes suivants les conditions du milieu dexposition.
Anarobie
Arobie
milieu aqueux
Normes internationales : ISO 11734,
ISO/DIS 14853,
Norme amricaine : ASTM D 5210
Normes franaises : AFNOR T 90306, T 90-316, T 90-312, T 90-309, T
90-314, T 90-321,
Normes internationales : ISO 14852,
ISO/DIS 14592, ISO/CD 14854, ISO
10708, ISO 14593, ISO 14851,

dans le sol
Norme internationale : ISO/DIS 15473
Norme franaise : AFNOR X 31-220

Norme internationale : ISO 14239
Norme amricaine : ASTM D 5988
94
- Orientation en fonction de la anture de la substance teste :

Tableau 23 : Classement des normes sappliquant un compos donn.
Substances organiques
Plastiques
Emballages
Normes franaises : AFNOR T 90-309, T 90-313, T

90-302
Normes internationales : ISO 9438, ISO 9888, ISO
7827, ISO 9408, ISO 9887, ISO/DIS 14592, ISO
10707, ISO 10708, ISO 14593, ISO 11734
Norme franaise : AFNOR T51-022
Normes internationales : ISO 14855, ISO 15986,
ISO/DIS 16929, ISO/DIS 17556, ISO 14852, ISO/CD
15854, ISO 14851, ISO/DIS 14853, ISO/DIS 15985,
ISO/CD 20200,
Norme canadienne : CSA Z 218-0
Normes amricaines : ASTM D 5509, D 5512, D 6003,
D 5511, D 5526, D 5209, D 5210, D 5247, D 5271, D
5210, D 5988, D 5338
Normes franaises : AFNOR H 60-000, H 60-005, H
60-140,
Normes europennes : EN 14046 (projet 2001),
98/710671 DC
Dans la suite, nous choisirons le troisime mode de classement des essais dvaluation de la
biodgradabilit des substances organiques et des matriaux (plastiques ou emballages) et des essais
dvaluation de la biodtrioration des matriaux.
La terminologie du CEN dans le domaine de la dgradabilit et la biodgradabilit des polymres et
des matriaux plastiques a t rcemment propose (CEN TC 249 WG 9 Characterization of
degradability N40, 2001).

95
III.4.2- Techniques dvaluation de la biodgradabilit des substances organiques

III.4.2.1- Principes gnraux
Il existe actuellement plusieurs tests de laboratoire permettant dvaluer la biodgradabilit
(Pagga, 1997). Le principe gnral de ces techniques est bas sur les observations des mcanismes de
biodgradation. Comme on la vu dans la premire partie, la biodgradation, en milieu arobie comme
en milieu anarobie, est une succession de ractions bio-physico-chimiques induites par la prsence
des micro-organismes. Les techniques et les tests dvelopps reposent sur le suivi dun paramtre de
ces ractions. Celui-ci doit tre choisi suffisamment significatif de lavancement de la raction, cest-dire prsenter une relative variabilit au cours de la raction et tre suffisamment important pour tre
accessible et facilement dcelable par les mthodes de mesure employes. Cela peut tre soit un ractif
dont on suit la disparition, soit un produit de la raction.
-
Disparition : valuation de la biodgradation primaire sans savoir ce que devient le substrat,
Formation dun produit ultime tels que CO2 ou CH4 : valuation de la biodgradation ultime.
En milieu arobie, les paramtres couramment suivis sont :

- la consommation doxygne : cest le signe dune activit respiratoire donc du mtabolisme des
micro-organismes dgradant la matire organique. On peut suivre la disparition de loxygne par
respiromtrie ou par manomtrie en reprant les variations de pression lintrieur de la fiole d'essai.
- la production de CO2 : les processus respiratoires engendrent une production de dioxyde de carbone.
Par essai manomtrique ou volumtrique, on peut galement suivre la variation de CO2 dans la fiole.
- la production de biomasse : les micro-organismes utilisent les substrats organiques pour se
multiplier. En parvenant quantifier la production de biomasse rsultant de cette activit, c'est--dire
le nombre ou la masse dindividus (cellules) en fonction de la dure dincubation, on a un indicateur
de la biodgradabilit du matriau utilis comme substrat par ces organismes.
En milieu anarobie, on considrera comme indicateur de biodgradation :
- la production de biogaz : les ractions de mtabolisme anarobie s'accompagnent de rejet de dioxyde
de carbone et de mthane. En mesurant la quantit produite (par mthode manomtrique), on peut
quantifier la biodgradation du substrat test,
- la production de biomasse (voir ci-dessus).

96
Depuis dj quelques annes, lOrganisation de Coopration et de Dveloppement Economiques

(OCDE) propose des lignes directrices pour les essais de produits chimiques (OCDE, 1993). La
section 2 du guide OCDE est principalement consacre aux effets des substances chimiques sur les
systmes biologiques. Les tests dvelopps pour lvaluation de la biodgradabilit sont
principalement arobies et sont senss tre appliqus seulement sur des produits purs et, de prfrence,
solubles dans leau et peu volatils. Le principe gnral des mthodes dveloppes dans les lignes
directrices de lOCDE est repris dans les points suivants. Lagence amricaine de protection de
lenvironnement USEPA propose galement un guide sur lvaluation de la biodgradabilit
immdiate des substances chimiques dvelopp par loffice de prvention, pesticides et substances
toxiques (OPPTS). Les lignes directrices du guide OPPTS sont consultables sur internet sous format
PDF ladresse donne dans le Tableau 21. Les tests amricains sont pratiquement identiques ceux
proposs par lOCDE. Ces deux guides proposent de distinguer trois catgories principales de tests
dvaluation de la biodgradabilit (Nyhlom, 1991 ; Cabridenc, 1993) :
- Essais de biodgradabilit immdiate ou facile : Essais rigoureux dans lesquels la possibilit de
biodgradation et dacclimatation est limite dans le temps. On peut affirmer quun produit chimique
qui donne un rsultat positif au cours dun essai de ce type se biodgradera rapidement dans
lenvironnement et peut tre class comme facilement biodgradable . Ces procdures destines
tester la biodgradabilit de composs chimiques en conditions optimales mais rapides sont donc
difficilement applicables pour des matriaux solides ou semi-solides.
- Essais de biodgradabilit intrinsque : Essais qui permettent une exposition prolonge du
compos tudi aux micro-organismes, une proportion plus favorable produit chimique/biomasse ou
dautres conditions favorisant la biodgradation. Un compos donnant un rsultat positif dans un essai
de ce type peut tre class comme intrinsquement biodgradable ; mais cause des conditions
favorables qui ont t employes, on ne peut tre sr que dans lenvironnement, sa biodgradation soit
rapide et sre .
- Essais de simulation : Essais qui fournissent une ide du taux de biodgradation, dans quelques
conditions denvironnement bien dtermines. Les essais de ce genre peuvent tre subdiviss suivant
le type denvironnement quils sont destins simuler : a) traitement biologique (arobie) ; b)
traitement biologique (anarobie), c) rivire ; d) lac, e) estuaire ;f) mer ; g) sol . Dautres types
denvironnement peuvent tre galement ajouts aux simulations. Par dfinition, les essais de
simulation ncessitent en amont un travail permettant la simulation du systme tudi. Par consquent,
il existe actuellement peu de procdures standardises.
NB : les essais de biodgradabilit intrinsque et les essais de simulation peuvent permettre de
qualifier la biodgradation primaire (dans le cas du suivi dun produit de dgradation) ou la
biodgradation ultime (dans le cas du suivi dun produit ultime).
97
Les lignes suivantes donnent la liste des abrviations couramment utilises dans la description des
procdures dvaluation de la biodgradation :
OD : Oxygne dissous (mg). Norme Internationale ISO 5813.1983, Qualit de leau Dosage de
loxygne dissous Mthode iodomtrique. Norme Internationale ISO 5814.1983, Qualit de leau
Dosage de loxygne dissous Mthode lectrochimique la sonde.
DBO : Demande Biologique en Oxygne (mg). Cest la quantit doxygne consomme par des
micro-organismes lorsquils mtabolisent une substance organique. La DBO est gnralement
exprime en mg de doxygne consomm par mg de substance.
DCO : Demande Chimique en Oxygne (mg). Cest la quantit doxygne consomme au cours de
loxydation dune substance dessai par du bichromate de potassium acide chaud. La DCO fournit une
mesure de la quantit de matire oxydable prsent dans une solution. La DCO est galement exprime
en mg doxygne consomm par mg de substance organique. Norme danalyse de la DCO : Norme
Internationale ISO 6060.1989, Qualit de leau Dtermination de la demande chimique en oxygne
(Norme franaise NF T 90-101, identique la norme internationale).
DThO : Demande thorique en Oxygne (mg). Cest la quantit totale doxygne ncessaire pour
parvenir loxydation complte dun produit chimique. Elle est calcule partir de la formule
molculaire et est galement exprime en mg doxygne ncessaire par mg de substance organique.
CO2Th : Dioxyde de Carbone Thorique (mg) : Il sagit de la quantit de dioxyde de carbone, calcule
partir de la teneur en carbone connue ou mesure de la substance organique tudie, qui doit se
dgager lors de la minralisation complte de celle-ci. Le CO2Th est galement exprim en mg de
dioxyde de carbone qui se dgage par mg de substance dessai.
COD : Carbone Organique Dissous. Il sagit du carbone organique prsent dans une solution ou qui
traverse un filtre dune porosit de 0,46 m ou encore qui reste dans le surnageant aprs une
centrifugation de 15 min environ 4 000 g (40 000 m.s-2). Norme danalyse de la DCO : Norme
Internationale ISO 8245 (Qualit de leau : Lignes directrices pour le dosage du carbone organique
total (COT) et carbone Organique Dissous (COD).
CODB : Carbone Organique Dissous Biodegradable. Il sagit du carbone organique prsent dans une
solution ou qui traverse un filtre dune porosit de 0,46 m ou encore qui reste dans le surnageant
aprs une centrifugation de 15 min environ 4 000 g (40 000 m.s-2) et capable dtre biodgrad.
Norme de dtermination de la DCOB : Norme franaise exprimentale XP T 90-318 1995.
CO2 : Dioxyde de carbone (gaz). Le CO2 libr la suite de la minralisation dun substrat organique
et pig dans une solution dhydroxyde de sodium (2 mol.L-1 en gnral) est gnralement dos par
dosage titrimtrique au baryte de sodium (voir annexe B de la norme internationale ISO 9439).
COT : Carbone Organique Total. Le COT dun chantillon liquide est gal la somme du carbone
organique en solution et en suspension. Norme danalyse du COT : Norme Internationale ISO 8245
(Qualit de leau : Lignes directrices pour le dosage du carbone organique total (COT) et carbone
Organique Dissous (COD).
CI : Carbone Inorganique,
CT : Carbone Total. Le carbone total est gal la somme du carbone organique et du carbone
inorganique prsents dans lchantillon liquide.

98
III.4.2.2- Tests dvaluation de la biodgradabilit de molcules organiques

a) Tests de biodgradabilit facile
Gnralits
Les lignes directrices de lOCDE dcrivent six mthodes permettant le classement des substances
chimiques, solubles ou non solubles dans leau, en fonction de leur biodgradabilit facile (ou
immdiate ) en milieu aqueux et en condition dincubation arobie. Les tests dvaluation de la
biodgradabilit facile des substances organiques prsents dans les lignes OCDE sont lists dans le
Tableau 24 suivant. Nous prsenterons galement par la suite la procdure normalise lchelle
europenne de dtermination de la demande biochimique (ou biologique) en oxygne aprs n jours
(DBOn) (EN 1899-1.1998 et EN 1899-2.1998).
Tableau 24 : Mthodes dvaluation de la biodgradabilit facile dune substance organique.
Conditions dapplication des tests. (OCDE, 1993).
Essai
Mthode danalyse
Disparition du
COD (301A)
Dgagement de
CO2 (301B)
MITI (I)
(301C)
Carbone
Organique Dissous
Respiromtrie :
CO2 dgag
Respiromtrie :
Consommation
doxygne
Respiromtrie :
Oxygne dissous
Flacon ferm
(301D)
Essai de
screening
modifi de
lOCDE (301E)
Respiromtrie
manomtrique
(301F)
Approprie pour les composs qui sont :

Faiblement
Volatils
Adsorbables
solubles
+/+
+/-
+/-
Carbone organique
Dissous
+/-
Consommation
dOxygne
+/-

99
Les appareils et les conditions exprimentales spcifiques des procdures dvaluation de la

biodgradabilit facile des substances organiques sont dcrites dans le Tableau 25 suivant.
Tableau 25: Conditions gnrales et particulires des procdures dvaluation de la
biodgradabilit faciles des substances organiques.
Paramtres
Eau
Milieux minraux nutritifs
Substances dessais et de rfrence
Inoculum
Prconditionnement de linoculum
Tmoins abiotiques
Nombre de flacon et dchantillons
Conditions
Eau dminralise (permute) ou distille exempte de substances toxiques des
concentrations inhibitrices. Elle ne doit pas contenir une concentration en carbone
organique suprieure 10% de celle introduite avec la substance organique tester. De
prfrence, utiliser le mme lot deau pour une srie dessai dont la teneur en COD doit
tre analyse au pralable.
Les milieux minraux nutritifs sont prpars partir de solutions-mres contenant du
phosphate de potassium et de sodium, plus chlorure dammonium, chlorure de calcium,
sulfate de magnsium et chlorure de fer (III). Il est possible galement dutiliser des
solutions-mres doligo-lments et de facteurs de croissance.
La mthode dapport de la substance dessai et de rfrence dpend videmment de la
nature du produit chimique, en particulier de sa solubilit dans leau. Dans le cas o la
solubilit est suprieure environ 1 g.l-1, on prpare une solution mre la concentration
approprie et utiliser une aliquote de solution pour les essais. Lorsque la substance
organique est peu soluble, lajouter directement dans le milieu minral.
Plusieurs sources dinoculum possible : Boue active, effluent dune station dpuration,
eaux de surface, eaux de sols (ou mlanges de celles-ci).
Pour les mthodes de disparition de COD (301A), de dgagement de CO2 (301B) et de
respiromtrie manomtrique (301F), les boues actives doivent provenir du traitement
biologique des eaux mnagres uses. Pour lessai Screening (301E), il est prfrable
dutiliser un inoculum plus dilu ne contenant pas de flocs bactrien (exemple : effluent
secondaire dune STEP). Pour la mthode MITI modifie, linoculum est constitu de
plusieurs sources.
Linoculum peut tre prconditionn en fonction des diffrentes conditions
environnementales des diffrentes mthodes. Dans de nombreux cas, le
prconditionnement de linoculum permet damliorer la reproductibilit des essais
Exemple de prconditionnement : aration de la boue active dans un milieu minral
pendant 5 7 jours la temprature de lessai.
Les tmoins abiotiques permettent de quantifier la dgradation de la substance organique
tester en absence de micro-organismes. La strilisation des essais est gnralement
effectue par filtration sur membrane (diamtre de pore de 0,2 m) ou par lajout dune
substance toxique adquate et une concentration approprie (Azoture de sodium ou
chlorure mercurique par exemple). Au cours du suivi des essais, les chantillons doivent
tre prlevs de faon aseptique afin de prserver la strilit.
Il est ncessaire deffectuer au minimum deux rptitions pour chaque essai, cest dire
deux flacons ou rcipient contenant la substance dessai avec linoculum, et au moins
deux autres flacons ne contenant que linoculum. Pour les essais tmoins de toxicit,
tmoin abiotique et tmoin dadsorption dcrits dans les diffrentes procdures, un seul
flacon suffit.
Daprs les lignes directrices de lOCDE (OCDE, 1993) :

- Tmoin physico-chimique : Il sagit dun essai tmoin permettant dvaluer la dgradation abiotique
ou les mcanismes de pertes tels que volatilisation ou adsorption qui se pourraient se produire lors de
lessai. Le tmoin physico-chimique (ou tmoin abiotique) est gnralement effectu en ajoutant dans
le milieu un produit chimique toxique (biocide) tel que le chlorure mercurique ou lazoture de sodium
(Wolf et al, 1990). LOCDE prconise des concentrations en HgCl2 comprises entre 50 et 100 mg.L-1
afin de stopper toute activit microbienne. Ces produits trs toxiques ncessitent dtre manipuls avec
prcaution.
- Tmoin de toxicit : Lorsque lessai indique que la substance teste (ou le dchet) ne semble pas
biodgradable dans les conditions exprimentales de lessai, il est souhaitable deffectuer une
100
valuation de la toxicit de certaines substances prsentes dans le milieu vis vis de linoculum. On
peut pour cela suivre la procdure dcrite par lOCDE et lUSEPA (OCDE 209 ; OPPTS 850.6800) ou
bien la norme internationale (et galement europenne) EN ISO 8192.1995 sur linhibition du taux de
respiration (consommation dO2) de la boue dune station dpuration (Reynolds et al, 1987). Un essai
tmoin de toxicit peut tre galement effectu en parallle avec les essais dvaluation de la
biodgradation pour une procdure donne en utilisant une substance de rfrence connue comme
tant facilement biodgradable laquelle on ajoute la substance (dchet) dessai.
- Prparation des substances organiques avant essai : Il existe actuellement des lignes directrices pour
la prparation et le traitement des composs organiques peu solubles en vue de l valuation de leur
biodgradabilit en milieu aqueux (Norme europenne et internationale EN ISO 10634.1995 Water
Quality Guidance for the preparation and treatment of poorly water-soluble organic compounds for
the subsequent evaluation of thier biodegradability in an aqueous medium qui remplace le fascicule
de documentation NF T 90-313 doctobre 1988).
- La solution ou la suspension de la substance tester dans un milieu minral est ensemence et
incube en arobiose, dans lobscurit ou en lumire diffuse. La quantit de COD dans linoculum doit
tre aussi faible que possible par rapport la quantit de carbone organique provenant de la substance
tester. On prend en compte lactivit endogne de linoculum en ralisant en parallle des tmoins
contenant linoculum mais sans addition de la substance tester. Un essai avec une substance de
rfrence est conduit en parallle afin de contrler lactivit de linoculum. Les substances prconises
sont prsentes dans le Tableau 26 suivant.
Tableau 26 : Substances organiques de rfrence pour lvaluation de lactivit de linoculum
dans les essais de biodgradabilit facile.
Aniline
Actate de sodium
Benzoate de sodium
Hydrognophtalate de potassium
- Suivi des essais : la biodgradation est suivie par la dtermination de paramtres tels que le COD
(Carbone Organique Dissous), la production en dioxyde de carbone ou la consommation doxygne :
les mesures sont effectues des intervalles de temps suffisamment rapprochs pour pouvoir identifier
le dbut et la fin de la biodgradation. Les respiromtres automatiques (tel que lOxymtre ou le
Sapromat) permettent deffectuer des mesures en continu. Le COD est parfois mesur en complment
du suivi dun autre paramtre, mais ceci nest gnralement le cas quau dbut et la fin de lessai.
Une analyse chimique spcifique peut galement servir valuer la biodgradation primaire de la
substance tester et dterminer la concentration de toutes substances intermdiaires (mtabolites)

101
qui se forment au cours de la biodgradation du substrat. Cette analyse est obligatoire dans lessai
MITI modifi (301C).
- Dure des essais : Les essais durent normalement 28 jours. Un essai peut cependant tre interrompu
avant, ds lors que la courbe de biodgradation atteint un plateau qui se prolonge au moins sur trois
mesures. Un essai peut galement tre prolong au-del de 28 jours si la courbe montre que la
biodgradation a commenc sans toutefois avoir atteint un palier, mais dans ce cas, la substance
chimique ne devrait pas tre classe comme facilement biodgradable.
- Informations sur la substance tester : Il est ncessaire de disposer dinformations concernant les
proprits physico-chimiques de la substance tester telles que par exemple la structure chimique de
la molcule, la solubilit dans leau, la pression de vapeur (volatilit). Les paramtres globaux tels que
le COD (Carbone Organique Dissous), le COT (Carbone Organique Total) et la DCO (Demande
Chimique en Oxygne) peuvent galement tre utiles pour interprter les rsultats des essais de
biodgradation de la substance teste. Signalons par ailleurs quil est conseill de consulter la norme
internationale ISO 10634.1995 sur les conditions techniques relatives lutilisation de composs
organiques faiblement solubles dans leau destins tre utiliss dans le cadre dessais de
biodgradation aquatiques.
- Critres dapplication et choix des mthodes : Les mthodes dvaluation de la biodgradabilit
facile sont applicables, de prfrence, aux substances organiques qui sont solubles dans leau des
concentrations dau moins 100 mg.l-1 et condition quelles soient ni volatiles, ni adsorbables. Les
mthodes appropries sont prsentes dans le Tableau 24. LOCDE propose des amnagements des
tests dans le cas de substances volatiles ou faiblement hydrosolubles.
- Reproductibilit des essais : Les mesures doivent tre effectues au moins en double du fait de la
nature du phnomne de biodgradation, de lhtrognit des populations microbiennes utilises
comme inoculum et de la difficult dutiliser dans chaque essai un inoculum dans le mme tat
physiologique. On observe habituellement que, plus la concentration initiale en micro-organismes
ajouts au milieu dessai est importante, plus la variation entre les essais en double est faible. Des
essais inter-laboratoires ont galement montr quil pouvait exister de grandes variations entre les
rsultats provenant de diffrents laboratoires. Mais avec des composs facilement biodgradables, on
obtient normalement une bonne concordance.
- Traitement des rsultats : Le pourcentage de biodgradation est calcul partir de la valeur moyenne
des mesures et des tmoins inoculum pour le paramtre suivi. Lexploitation des donnes est
spcifique chaque procdure dveloppe dans le cadre de lOCDE.
- Critres de validit des essais : Un essai est considr comme valide si les valeurs des critres des
mesures de disparition de la substance dessai, au niveau du plateau, la fin de lessai ou la fin de
102
lintervalle de 10 jours, selon les cas, ne prsentent pas de diffrence de plus de 20%, et si le taux de
biodgradation de la substance de rfrence a atteint le niveau seuil en moins de 14 jours. Si lune des
conditions nest pas remplie, lessai devra tre recommenc. Labsence de biodgradation ne signifie
pas que la substance organique nest pas biodgradable mais indique que des tudes complmentaires
sont ncessaires pour valuer sa biodgradabilit.
- Toxicit de la substance teste : Les procdures dvaluation de la biodgradabilit facile des
substances organiques peuvent tre compltes par des essais dvaluation de sa toxicit. Cette
valuation est obtenue en comparant les rsultats obtenus avec la substances teste et la mme
substance teste en mlange avec la substance de rfrence avec linoculum dans les mmes
conditions dincubation.
Les tests dvaluation de la biodgradabilit facile ont t conus de manire conclure sans
quivoque les rsultats positifs de biodgradation. Un rsultat positif signifie que la substance tudie
est biodgradable dans lenvironnement. En revanche, un rsultat ngatif ne signifie pas
ncessairement que la substance est rcalcitrante mais quil est ncessaire deffectuer de nouveaux
essais tels que ceux proposs par lOCDE pour lvaluation de la biodgradabilit intrinsque.

103
Description des essais dvaluation de la biodgradabilit facile prsents dans les lignes
directrices de lOCDE :
Tableau 27 : Essai de disparition du COD- Mthode 301A OCDE.

Normes et procdures internationales similaires
Principe
Conditions restrictives de lutilisation de la
mthode
Conditions exprimentales
Appareillage particulier
- Norme europenne et internationale EN ISO 7827-1995 qui reprend la norme

internationale ISO 7827.1994.
- Norme projet ISO/DIS 14592-1, remplace la norme franaise NF T 90-312 de novembre
1985,
- Directive CEE 92/69/CEE (Mthode C.4-A).
Suivi de la biodgradation du substrat par lanalyse du carbone organique dissous
(disparition du COD)
- Substance avec Saq 100 mg.l-1,
- Substances non volatiles,
- Teneur en carbone organique = ?
- Milieu liquide aqueux,
- [Substance] de 10 40 mg.l-1 de COD,
- 22 2C et lobscurit,
- Dure : 28 jours
- Suivi de [COD],
- Inoculum : Boues de STEP, Effluents de STEP, Eaux de surface, eaux de sols.
- 8 flacons coniques,
- Analyseur de COD,
- Analyseur de O2 dissous,
- Centrifugeuse.
Tableau 28 : Essai de dgagement de CO2 - Mthode 301B OCDE. (galement connu sous le nom
de test de Sturm Modifi).
Principe

mthode
Substances organiques concernes

- Norme europenne EN 29439.1993 qui reproduit intgralement la norme internationale

ISO 9439.1999 et remplace la norme homologue NF ISO 9439 de juillet 1991,
- Norme franaise T 90-306,
- Norme franaise rfrence inconnue : produits dispersants,
- Procdure USEPA OPPTS 835.3100,
- Directive CEE 84/449/CEE (Mthode C.5).
Suivi de la biodgradation du substrat par lanalyse du dioxyde de carbone.
IL sagit du test de STURM Modifi.
- Aration par passage dair exempt de CO2,
- Pigeage du CO2 dans une base. Dosage du carbonate par titration chimique ou
analyseur de carbone inorganique,
3- En option ; analyse du COD dans le milieu de croissance.
- Substances chimiques non volatiles,
- Teneur en carbone organique connatre de prfrence pour dterminer le CO2th,
- Formule de la substance pour la dtermination de la DthO,
- Sinon, ncessit de dterminer la DCO de la substance.
- Substances chimiques non volatiles,
- Substances chimiques solubles, peu solubles ou insolubles dans leau (polymres
organiques par exemple).
Les substances insolubles doivent tre ajoutes dans le milieu nutritif sous la forme dune
poudre.
- Aration de 30 100 mL.min-1,
- [Substance] de 10 20 mg.l-1 de COD ou de COT,
- Dure : 28 jours
- Suivi du CO2 produit,
- Inoculum : Boues de STEP, Effluents de STEP, Eaux de surface, eaux de sols. Inoculum
de prfrence peu concentr.
- Flacons de 2 5 litres, munis chacun dun tube daration atteignant presque le fond du
rcipient et dun orifice pour lvacuation des gaz (le tube ne doit pas gner lagitateur
magntique, si on en utilise un),
- Analyseur de CO2 ou dispositif de titration (avec HCl 0,05M, dosage de lexcs
dhydroxyde baryum 0,0125M, et phnolphtaline comme indicateur color),
104
Tableau 29 : Essai du MITI modifi (I) - Mthode 301C OCDE.

Normes internationales similaires
Principe

mthode
Suivi de la biodgradation du substrat par valuation de la consommation doxygne.

- Ncessit dutiliser un appareil de mesure automatique de Demande Biologique en
Oxygne par lectrolyse ou respiromtre,
- Pigeage du CO2 mis par de lhydroxyde de baryum ou de sodium,
- Consommation doxygne valuer partir loxygne produit par lectrolyse pour
maintenir la concentration en O2.
- Teneur en carbone organique = ?
- [Substance] de 100 mg.l-1,
- Dure : 28 jours
- Inoculum : Effluent secondaire de STEP, clair de prfrence
- Respiromtre Oxymax ou Sapromat,
- 6 flacons de 300 mL, munis chacun dune coupelle contenant labsorbant en CO2.
Tableau 30 : Essai en flacon ferm - Mthode 301D OCDE.

Principe

mthode

- Norme europenne EN ISO 10707.1997 qui reproduit intgralement la norme

internationale ISO 10707.1994,
- Directive 92/69/CEE (Mthode C.4.-E).
Suivi de la biodgradation du substrat par lanalyse de loxygne dissous dans la solution.
(demande biochimique en oxygne essais en fiole ferme)
- Concentration faible,
- Ensemencement faible.
- Substances chimiques solubles, peu solubles ou insolubles dans leau (polymres
organiques par exemple).
Les substances insolubles doivent tre ajoutes dans le milieu nutritif sous la forme dune
poudre.
- Flacons hermtiques,
- [Substance] de 2 5 mg.l-1,
- Temprature constante 1C (20C conseille),
- Obscurit,
- Dure : 28 jours,
- Aration pralable du milieu pendant 20 min,
- Suivi de O2 consomm,
- Inoculum : effluent secondaire de STEP, concentration faible en micro-organismes.
- 30 flacons de DBO, munis de bouchons de verre, et dun volume de 250-300 ou 100-125
mL,
- Analyse de O2, par la mthode de Winckler,
- Ou analyse de O2, par lectrode O2 couple avec un appareil de mesure.
105
Tableau 31 : Essai de Screening - Mthode 301E OCDE.

Principe

mthode
Suivi de la biodgradation du substrat par lanalyse du carbone organique dissous

(disparition du COD)
Proche de la mthode COD (301A) mais utilisation dun inoculum avec une faible
concentration en micro-organismes.
- Substance avec Saq 100 mg.l-1,
- [Substance] de 10 40 mg.l-1 de COD,
- Dure : 28 jours
- Suivi de [COD],
- Inoculum : Effluent secondaire de STEP.
- Analyseur de COD,
- Analyseur de O2 dissous,
- Centrifugeuse.
Tableau 32 : Essai de respiromtrie manomtrique - Mthode 301F OCDE.

Principe
mthode

- Norme europenne EN 294408.1993 qui reproduit intgralement la norme internationale

ISO 9408 (1999), et remplace la norme NF ISO 9408.1991,
- Directive CEE 84/449/CEE Mthode C7.
Suivi de la biodgradation du substrat par la consommation en oxygne dans un
respiromtre ferm. (dtermination de la demande en oxygne)
- [Substance] de lordre de 100 mg.l-1 soit DthO comprise entre 50 et 100 mg.l-1,
- Rgulation de temprature 1C et obscurit,
- Dure : 28 jours
- Soit suivi de la consommation de O2 (proportionnelle la production par lectrolyse) soit
suivi des modifications des volumes ou des pressions dans le flacon,
- Analyse facultative de la DCO avant et aprs incubation,
- Inoculum : Boue active, effluent de STEP etc.
- Prconditionnement possible de linoculum.
- Respiromtre automatique appropri (Oxymtre ou Sapromat) ou appareil de mesure
des pressions ou des volumes (ou des deux la fois).
106
Description de la procdure de dtermination de la demande biochimique (ou biologique) en

oxygne (DBO) :
La dtermination de la demande biologique ou biochimique en oxygne est une mthode normalise

relativement proche de la mthode OCDE de respiromtrie manomtrique 301F. Les normes EN 18991.1998 et EN 1899-2.1998 permettent de dterminer la DBO dune eau en condition arobie sur de
courtes priodes dincubation (DBO5, DBO2+5 et DBO7). La premire norme indique la procdure
suivre pour valuer la DBO par dilution et ensemencement. Cette mthode prescrit lapport dallyl
thio-ure pour supprimer la nitrification qui peut nuire linterprtation des rsultats. La deuxime
norme est consacre aux chantillons deaux de faibles valeurs de DBO (mthode pour les chantillons
dilus). Les principales caractristiques techniques de ces deux normes sont rsumes dans le Tableau
33 suivant.
Tableau 33 : Dtermination de la demande biochimique en oxygne aprs n jours (DBOn).
Normes ou procdures internationales similaires
Principe

mthode

- Normes europennes EN 1899-1.1998 (remplace la norme franaise NF T 90-103) et EN

1899-1.1998,
- Norme internationale ISO 5815,
- Directive CEE 92/69 CEE C.5.
Suivi de la biodgradation du substrat par la consommation en oxygne (dtermination de
la demande biochimique ou biologique en oxygne)
Mthode de suivi : mesure de la concentration en oxygne dissous (OD).
Uniquement sur chantillons aqueux.
- Echantillons : eau rsiduaire urbaine (DCO < 300 mg.L-1 ou COT < 100 mg.L-1), eau de
rivire ou de lac, effluent dcant de STEP, conservation des chantillons 4C,
- Temprature : 20 1C et obscurit,
- Dure : de 5 7 jours
- Mesure de la consommation de O2.
- Flacons dincubation : flacons DBO cylindro-coniques avec bouchons (250-300 mL ou
100-125 mL),
- Appareil pour la dtermination de la concentration en oxygne dissous (OD) par la
mthode de dosage chimique (iodomtrie) ou bien par la mthode lectrochimique (sonde
oxygne),
- Equipement pour aration initiale des chantillons (bouteille dair sous pression ou
compresseur).
107
b) Tests de biodgradabilit dite intrinsque et de simulation

Nous rappelons que la biodgradabilit intrinsque est value par une exposition de la substance
organique teste une microflore complexe sur une longue dure permettant lacclimatation des
micro-organismes.
LOCDE
propose
quatre
mthodes
distinctes
permettant
dvaluer
la
biodgradabilit intrinsque.
1- Mthode 302A SCAS modifie,
2- Mthode 302B Zahn-Wellens/EMPA,
3- Mthode 302C Essai MITI Modifi (II),
4- Mthode 304A biodgradabilit intrinsque dans le sol .
Les trois premires mthodes permettent destimer la biodgradabilit intrinsque dune substance
organique en milieu aqueux et en conditions arobies.
Simulation dun procd : Certaines mthodes consistent reproduire en laboratoire des conditions
exprimentales dun procd de traitement biologique. Cest le cas de la mthode SCAS modifie
permettant de reproduire sommairement les conditions de traitement des eaux en station dpuration
des eaux uses. Nous prsenterons par la suite galement la norme internationale sur lvaluation de la
biodgradabilit anarobie ultime des composs organiques dans les boues de digesteurs EN ISO
11734.1998.
Simulation de scnario La quatrime mthode OCDE 304A permet de dterminer la biodgradabilit
intrinsque dans le sol en condition arobie, cest dire dans scnario de dversement dun polluant
organique dans un sol. Nous citerons galement les procdures amricaines dvaluation OPPTS
835.5154.
Mthode 302A SCAS modifie
La mthode 302A est une adaptation de la mthode semi-continue en prsence de boues actives
(SCAS) mise au point par la Soap and Detergent Association pour la dtermination de la
biodgradabilit primaire des dtergents en conditions arobies. A lorigine, ce test a t conu pour
simuler les conditions relles de fonctionnement dune station dpuration des eaux uses. Les
concentrations en micro-organismes sont trs leves et la priode dincubation peut tre longue de
plusieurs mois dans la mesure o on introduit de manire intermittente des substances nutritives. Ces
conditions dessais sont donc trs favorables la biodgradation de la substance organique tudie. On
parle donc de biodgradabilit intrinsque.
Le principe de la mthode SCAS modifie est bas sur lutilisation de boues actives provenant dune
station dpuration qui sont places dans une unit daration SCAS. On ajoute ensuite le compos et
108
de leau dgout domestique dcante. Le mlange est ensuite ar pendant 23 heures. Aprs larrt de
laration, on laisse ensuite dcanter la boue et on limine le surnageant. La boue restant dans la
chambre daration est ensuite mlange une nouvelle quantit de substance organique et deau
dgout, puis le cycle est recommenc. Cette technique permet ainsi dadapter la population
microbienne pour la rendre plus apte biodgrader la substance organique teste. La biodgradation
est dtermine par le dosage du carbone organique dissous (COD) dans le liquide surnageant. Cette
teneur est compare celle obtenue pour un essai tmoin sans substance organique effectu en
parallle. Les principales caractristiques du test sont rsumes dans le Tableau 34.
Tableau 34 : Essai de biodgradabilit dite intrinsque Mthode SCAS modifie - Mthode
302A OCDE.
Principe
mthode

- Norme europenne EN ISO 9887.1994 : mthode semi-continue par boues actives

(mthode SCAS). Elle reprend intgralement la norme internationale ISO 9887.1992.
- Procdure USEPA OPPTS 835.5045 (Test SCAC modifi pour substances chimiques
insolubles ou volatiles),
- Directive CEE 87/302/CEE.
Suivi de la biodgradation de la substance organique par mesure de COD.
- Substance non volatile,
- Substance soluble dans leau.
- Milieu liquide aqueux (boues actives),
- [Substance] de lordre de 20 mg.l-1 de carbone pour le compos dessai au dbut de
chaque cycle daration. De prfrence, mesurer la COT des solutions.
- Rgulation de temprature 1C et obscurit,
- Dure effective du sjour : 36 heures,
- Analyse de la DCO avant et aprs incubation dans le surnageant,
- Inoculum : Boue active,
- Prconditionnement possible de linoculum.
- Cellule daration SCAS (racteur de type semi-continu)
109
Mthode 302B : Essai Zahn-wellens/EMPA
La mthode Zahn-Wellens/EMPA consiste mettre en contact la substance organique teste avec des
boues actives en milieu aqueux. Le processus de biodgradation est suivi quotidiennement soit par
dosage du COD, soit par dtermination de la DCO. Les principales caractristiques du test sont
rsumes dans le Tableau 35.
Tableau 35 : Essai de biodgradabilit dite intrinsque Mthode Zahn-Wellens/EMPA Mthode 302B OCDE.
Principe
mthode

- Norme europenne EN 29888.1993 : Essai statique (Mthode Zahn-Wellens),

- Norme internationale ISO 9888,
- Directive CEE 87/302
Suivi de la biodgradation de la substance organique par mesure de COD ou DCO
- Substance non volatile,
- Substance peu adsorbante,
- Substance soluble dans leau,
- Structure chimique de la substance tudie ?
- Boue active en milieu aqueux,
- [Substance] comprise entre 50 et 400 mg.l-1 de COD,
- Ncessit dutilisation dune substance de rfrence pour valuer la capacit
fonctionnelle de la boue active.
- Temprature de 20-25C lobscurit, aration,
- Aration,
- Dure : 28 jours. Il est possible de prolonger lessai au-del de 28 jours,
- Analyse de la DCO avant et aprs incubation dans le surnageant,
- Prconditionnement possible de la boue.
- Rcipients cylindriques en verre dun volume de 1 5 litres munis de systme
dagitation magntique et dun tube de verre de 2 4 mm de diamtre intrieur
introduisant lair environ 1 cm au-dessus du fond du rcipient.
- Alimentation en air comprim,
- Centrifugeuse,
- Appareil danalyse du COD ou DCO.
110
Mthode 302C : Essai MITI modifi (II)
Cette mthode respiromtrique utilise un dispositif de mesure automatis de la consommation

doxygne en circuit ferm de type DBOmtre. Elle sapplique prfrentiellement sur des produits
chimiques peu ou pas volatils. Les micro-organismes ne sont adapts pour dgrader la substance
chimique tester. Les principales caractristiques du test sont rsumes dans le Tableau 36 suivant. La
courte dure des essais semble dire quil sagit plus dun essai dvaluation de la biodgradabilit
facile que de lvaluation de la biodgradabilit intrinsque comme indiqu par lOCDE.
Tableau 36 : Essai de biodgradabilit dite intrinsque Essai MITI Modifi (II) - Mthode
302C OCDE.
Principe
mthode

Suivi de la biodgradation de la substance organique par la mesure de la

consommation de lO2
- Structure chimique de la substance tudie ?
- Eaux uses urbaines,
- Temprature de 252C lobscurit,
- pH du surnageant de 7,01,0,
- [Substance] de 30 mg.l-1 (poids/volume).
- Dure : de 14 28 jours
- Agitation magntique,
- Prconditionnement possible de la boue.
- Appareillage de BDO-mtrie de six flacons de 300 mL,
- Eventuellement dosage du COT rsiduel aprs incubation.
111
Mthode dvaluation de la biodgradabilit intrinsque en conditions anarobies dans les

boues de digesteur
Cette mthode normalise EN ISO 11734.1998 prescrit une mthode pour lvaluation de la
biodgradabilit des composs organiques des concentrations donnes sous leffet de microorganismes anarobies. Il sagit de lvaluation de la biodgradabilit ultime (minralisation) car on
effectue le suivi de la formation des produits ultimes de la biodgradation tels que le dioxyde de
carbone et le mthane. Les essais sont effectus avec des boues digesteurs lavs contenant du carbone
organique en quantit trs faible. Les principales caractristiques du test sont indiques dans le
Tableau 37 suivant.
Tableau 37 : Test dvaluation de la biodgradabilit des composs organiques dans les boues de
digesteurs.
Procdures ou normes internationales
Principe

mthode

- Norme europenne et internationale EN ISO 11734.1998 qui reproduit

intgralement la norme internationale ISO 11734.1995,
- Procdure USEPA OPPTS 835.3400 intitule Anaerobic biodegradability of
organic chemicals .
Minralisation anarobie de substances organiques dans les boues de digesteur.
Mthodes de suivis conseilles : Mesure de laugmentation de la pression due
la production de biogaz (CH4 et CO2) et mesure du carbone inorganique (CI) en
fin dincubation.
- Substances organiques insolubles dans leau,
- Substances organiques ayant un effet inhibiteur sur les micro-organismes du
digestat utilis ( vrifier).
- Boues de digesteur (digestat) contenant du Carbone inorganique (CI) en
quantit trs faible, concentration de 1 3 g.L-1 de boue dans les essais,
- Prconditionnement des boues conseill ( 35C pendant 7 jours au maximum)
afin de rduire la production de biogaz dans les essais tmoins sans substance
organique,
- Temprature : 35C 2C,
- Obscurit,
- [Substance] : de 20 100 mg.L-1 en carbone organique (CO),
- Dure : jusqu 60 jours,
- Suivi analytique : selon les rsultats,
- Tmoin avec substance de rfrence conseill.
- Rcipient hermtiquement clos,
- Appareil de mesure manomtrique (comme par exemple transducteur de
pression),
- Analyseur de carbone inorganique (gamme de concentration comprise entre 1
200 mg.L-1).
112
Biodgradabilit Intrinsque dans le Sol
La mthode 304A de lOCDE consiste valuer la biodgradabilit de substances organiques dans les
sols en conditions arobies. LOCDE prcise galement que la procdure peut tre adapte
techniquement afin de raliser lvaluation de la biodgradabilit anarobie. LUSEPA propose
galement deux procdures similaires, le OPPTS 835.3300 et OPPTS 835.3180, destines
respectivement aux essais sur sols et sur sdiments en arobiose. LUSEPA a galement dvelopp un
test permettant dvaluer la biodgradabilit anarobie des substances organiques en sous-sol
(subsurface). Ces procdures exprimentales doivent sappliquer de prfrence sur des substances
organiques marque au 14C afin dvaluer plus facilement sa minralisation en 14CO2.
- Prparation des produits chimiques : Il existe une norme internationale relative aux conditions dessais de laboratoire pour
la biodgradation de produits chimiques organiques dans le sol en condition arobie : norme franaise FD ISO 11266 1997
intitule Lignes directrices relatives aux essais en laboratoire pour la biodgradation de produits chimiques organiques
dans le sols sous conditions arobies et qui reproduit intgralement la norme internationale ISO 11266.1994.
- Prparation des chantillons de sols : Les conditions dchantillonnage, de stockage et de manipulation des sols sont
dfinies par la norme internationale ISO 10381-6.1994 intitule Qualit du sol Echantillonnage Partie 6 ; : Lignes
directrices pour la collecte, la manipulation et la conservation des sols destins une tude en laboratoire des processus
microbiens arobies .
Les principales caractristiques des procdures dessais dvaluation de la biodgradation arobie dans
les sols ou sdiments sont prsentes dans le Tableau 38 suivant.
Tableau 38 : Test dvaluation de la biodgradabilit intrinsque des substrats organiques dans
les sols ou sdiments et en conditions arobies.
Principe

mthode

- Norme internationale ISO-DIS 14592.2001. Essais par agitation de lots de flacons avec
eaux de surface ou des suspensions eaux de surfaces/sdiments,
- Norme internationale ISO 14239.1997,
- Procdure OCDE 304A,
- Procdure USEPA OPPTS 835.3180 (test de biodgradation en microcosme sdimentseau).
Biodgradation ultime (minralisation) de la substance organique marque au 14C suivie
par la mesure du 14CO2.
Cette mthode peut tre adapte dans le cas o on souhaiterait tudier la minralisation
en conditions anarobie.
- Connatre le site de marquage de la molcule au 14C,
- Facultatif : valuation de la volatilit de la substance,
- Sol (conservation 4C avant essai) 40% de sa capcit maximale en eau, COT du sol,
granulomtrie,
- Utilisation dune substance de rfrence conseille,
- Temprature de 222C lobscurit,
- [Substance] : 50 gouttes de la solution dessai radioactive (environ 100L) ajout la
surface du sol,
- Pige CO2 : KOH 0,1N,
- Analyse du 14CO2 par scintillation liquide,
- Dure : 64 jours,
- Prlvement de la potasse : 1,2,4,8,16,32 et 64 jours,
- Facultatif : valuation de la formation de rsidus en effectuant lanalyse du 14CO2 libr
aprs combustion du sol.
- Flacon biomtre,
- Compteur scintillation liquide,
- Appareil doxydation pour la combustion des produits radioactifs,
- Bain ultrasons de 500 mL,
- Appareil pour extraction Soxhlet,
- Fioles scintillation etc.
113
La procdure amricaine OPPTS 835.5154 intitule Anaerobic biodegradation in the subsurface

prcise que la transformation anarobie des substances dessais peut tre estime en utilisant des
mthodes adaptes des procdures dcrites par Wilson et al (1986). La procdure dessai est prsente
dans le Tableau 39.
Tableau 39 : Test dvaluation de la biodgradabilit intrinsque des substrats organiques dans
les sols et en conditions anarobies.
Principe

mthode

- Procdure OCDE 304A,

- Procdure USEPA OPPTS 835.5154.
Biodgradation de substances organiques dans la couche superficielle du sous-sol
condition anarobie
Mthodes de suivie conseilles :
- Analyse de la concentration en substance dessai dans le sol (concentration rsiduelle),
- Analyse des produits intermdiaires,
- Mesure de la biomasse produite (population htrotrophe, mthanogne, suflatorductrice),
- Mesure de paramtre physique tels que pression P ou V
Conditions dincubation :
- Condition de sulfatorduction,
- Condition mthanogne,
- Echantillon de sol collect en conditions anarobies,
- Echantillon deau de nappe (groundwater) collect en conditions anarobies,
- Facultatif : valuation de la volatilit de la substance,
- Sol (conservation 4C sous N2), COT du sol, granulomtrie, CEC (Capacit dchange
cationique), pH, Eh (potentiel redox),
- Eau de nappe (conservation 4C sous N2), pH, OD, COD, sulfate, phosphate, nitrate,
Conductivit,
- Essais sur mlange Sol-Eau (20 mg dans 80mL),
- Sulfato-rduction : [SO42-] au final 200 mg.L-1,
- Mthanisation : Condition anarobie stricte.
- Temprature : suivant les conditions in situ,
- Obscurit,
- [Substance] : de prfrence trois concentrations diffrentes tester,
- Dure : 64 jours,
- Suivi analytique : 1,4,8,16,32 et 64 jours.
- Bouteille Serum de 160 mL,
- Matriel dextraction (Soxhlet),
- Appareillage analytique,
- Facultatif : appareil de mesure manomtrique ou volumique.
114
Enfin, lUSEPA propose galement la mthode OPPTS 835.3400 intitule Anaerobic

biodegradability of organic chemicals . Cette procdure a t conue pour lvaluation de la
biodgradabilit des substances chimiques dans les digesteurs de traitement des eaux uses. Les
principales caractristiques de cette procdure sont dcrites dans le Tableau 40. Signalons que cette
procdure peut galement tre utilise pour lvaluation de la biodgradabilit anarobie dans les
environnements naturels anarobies tels que les sols et sdiments saturs en eau (test de simulation).
Tableau 40 : Test dvaluation de la biodgradabilit intrinsque des substrats organiques en
conditions anarobies.
Principe

mthode

- Procdure USEPA OPPTS 835.3400.

Biodgradation de substances organiques en conditions anarobies.
Mthode galement utilisable pour les sols et sdiments saturs en eau.
Mesure de la production de gaz (CH4 et CO2)
- COT de la substance pour le calcul de CH4 et CO2 thorique.
- Substances chimiques solubles ou peu solubles dans leau (polymres organiques par
exemple),
- Substances chimiques sans effet inhibiteur sur linoculum.
- Inoculum : boue de digesteur de STEP, conservation 4C jusqu deux semaines. De
prfrence, utilisation dune boue frache,
- Essais sur substance chimique de rfrence conseills telle que lacide benzoque,
- [Substance] = 50 mg.L-1 de COT,
- Temprature : 35 1C,
- Obscurit,
- [Substance] : de prfrence trois concentrations diffrentes tester,,
- Dure : 8 semaines ou jusqu biodgradation complte,
- Utilisation Razurine pour la mise en vidence doxygne (rose),
- Suivi analytique : 1,4,8,16,32 et 64 jours.
- Bouteille Serum de 160 mL avec valve trois voies (type Mininert),
- Matriel dextraction (Soxhlet),
- Appareil danalyse du CH4 et CO2,
- Appareil de mesure manomtrique tel que transducteur de pression ou tout simplement
une seringue gaz de 20 mL.
115
III.4.3- Procdures dvaluation de la biodgradabilit ou de la biodtrioration des

matriaux
III.4.3.1- Principes gnraux
Nous rappelons ici les dfinitions des deux termes dj prsentes dans le Tableau 18.
Biodgradation ou biodcomposition :
Biodtrioration ou bioaltration :
Conversion de composs organiques en produits plus simples sous

laction de micro-organismes.
= Dgradation biologique
Rduction de la qualit ou de la valeur dun systme considr
sous laction dagents microbiens.
Remarque : Dans le cas dun htromatriau contenant de la
matire organique, la biodgradation de celle-ci peut entraner
une dtrioration des proprits de ce matriau.
Rappelons que la biodtrioration dun matriau compos partiellement ou totalement de matire

organique est principalement due la dgradation biologique de la fraction organique qui le constitue. Il
sagit donc de phnomnes mettant en jeu les mmes processus.
On peut considrer deux grandes catgories de tests :
- Tests dvaluation de la rsistance des matriaux aux agents microbiens (tests de
biodtrioration),
- Tests dvaluation de la biodgradabilit dont :
- Tests acclrs (valuation de la biodgradabilit intrinsque),
- Tests de simulation (valuation de la biodgradabilit en scnario).
Les deux types de tests sont bien videmment pas totalement distincts puisque la biodgradation de la
matire organique du matriau est le principal processus conduisant sa biodtrioration.
Tests de rsistance des matriaux aux agents microbiens : Les tests dvaluation de la rsistance des
matriaux aux agents microbiens sont gnralement effectus dans des conditions optimales de
croissance microbienne. La comestibilit est value qualitativement par observation visuelle de la
colonisation biologique de surface du matriau. La biodtrioration du matriau qui rsulte
gnralement de sa biodgradation partielle est value par la diminution (altration) de ses
caractristiques (rduction de sa qualit ou de sa valeur ). Dans le cas des dchets, cest souvent
cet aspect qui est le plus difficile valuer.
Tests dvaluation de la biodgradabilit :
On cherche souvent conduire les tests dans des conditions qui favorisent la multiplication et la
croissance des micro-organismes afin de rduire la dure des tests, et on travaille pour cela en
prsence d'un milieu de culture artificiel. En fonction du degr d'optimisation des conditions
116
exprimentales, on pourra parler, comme on le fait dj pour caractriser la biodgradation des

substances chimiques (Nyholm, 1991 ; OCDE, 1992 ; Cabridenc 1993), de "biodgradation
intrinsque". Outre les conditions optimales de biodgradation (milieu, T, agitation, etc), on se met
dans des conditions (dure, etc) favorisant ladaptation des micro-organismes. Seule la nature du
matriau limite sa biodgradabilit. On parle alors de tests acclrs.
L'influence du milieu extrieur peut tre considrable dans l'volution biologique d'un matriau. Il
s'avre souvent ncessaire de chercher reproduire ou simuler les conditions relles
d'environnement qui seront celles du matriau ou du dchet lors de son utilisation ou de son stockage.
On s'oriente alors vers des "tests de simulation", permettant dvaluer la biodgradabilit dun
matriau dans des conditions de scnario donn. Ces procdures sont gnralement plus longues et
plus complexes que les tests acclrs. Ces tests ne sont donc pas forment effectus dans des
conditions optimales. Ils doivent reproduire plus ou moins fidlement les principaux facteurs du
scnario.
Il nexiste pas notre connaissance, en France comme ltranger, de procdures normalises
spcifiques lvaluation de la biodgradabilit des dchets solides, granulaires ou pulvrulents
contenant une fraction non ngligeable de matire organique. Les tests proposs au Canada par le
Wastewater Technology Center (WTC, 1990) pour lvaluation des dchets stabiliss et solidifis sont
les tests amricains dvelopps par lAmerican Society for Testing and Materials (ASTM) destins en
fait lvaluation de la biodgradation des plastiques. Les articles scientifiques publis sur le sujet
rapportent gnralement des recherches portant sur la biodtrioration ou sur les mcanismes de
biodtrioration davantage que sur les mthodes dvaluation.
La transposition des procdures mises au point pour un type de matriau (gnralement les plastiques
ou les peintures dans les procdures normalises) un autre type de matriau (les dchets considrs
ici) n'est envisageable qu'aprs adaptation des conditions exprimentales. Les principaux facteurs qui
doivent tre considrs sont la nature de l'inoculum, le mode d'inoculation, les conditions d'incubation,
et la composition du milieu d'incubation.
III.4.3.2- Tests dvaluation de la rsistance des matriaux aux agents microbiens
a) Prsentation gnrale
Il existe en revanche, en France et ltranger, des procdures normalises destines valuer la
rsistance des matriaux aux agents biologiques. Il sagit de normes relativement anciennes encore
utilises pour valuer ce quon peut appeler la comestibilit des matriaux et valuer son influence
(biodgradation et biodterioration). En gnral, lvaluation de la biodtrioration des matriaux est

117
base sur les modifications daspects et les altrations de certaines proprits fonctionnelles
(Trmillon, 1998).
Ces tests d'valuation de la rsistance des matriaux aux agents microbiens ont comme principale
caractristique d'tre des tests trs simples mettre en uvre. Ils consistent mettre en contact le
matriau avec une microflore dans un environnement favorable leur croissance. En gnral, ces tests
sont raliss sur milieu nutritif solide. Les tests normaliss ont t mis au point d'une part pour valuer
les effets des micro-organismes sur les matriaux et d'autre part pour tester l'efficacit des traitements
chimiques employs pour la conservation de ceux-ci. Comme nous le verrons par la suite, ils ne sont
pas forcment adapts l'tude de rsistance de tous les matriaux. Nous citerons les tests normaliss
les plus couramment utiliss pour l'valuation de la biodtrioration des matriaux solides. Il s'agit
principalement des deux normes de l'American Society for Testing and Materials, ASTM G22-76 et
ASTM G21-90. Il existe galement une norme europenne, ISO 846-1978, des normes franaises
NF X 41-513, NF X 41-514, NF X 41-515 et une norme allemande DIN 53 739. Elles sont prsentes
en dtail dans le tableau 41.
Toutes les normes cites comprennent des tests simples de dtermination du comportement des
plastiques sous l'action de micro-organismes. La dtermination de l'influence des conditions de culture
est une tape indispensable pour la mise au point d'un test d'valuation de la rsistance d'un matriau.
L'objectif est de dterminer les conditions optimales d'altration du matriau. Il s'agit souvent des
conditions qui favorisent la multiplication et la croissance des micro-organismes. La biodgradation va
dpendre de la nature de l'inoculum, des conditions d'incubation et de la composition du milieu de
culture.

118
Tableau 41 : Procdures normalises dvaluation de la rsistance des matriaux aux agents

microbiens en milieu solide (tests en bote de Petri sur milieu glos).
Tests proposs
Inoculum
Standard
practice
for Polymres
determining resitance of de plastique
synthetic
polymeric
material to Fungi
Test en bote de
Petri sur milieu
gelos sans carbone
exogne
Standard
practice
for Matriaux
determining resitance of plastiques
plastic to bacteria
Test en bote de
Petri sur milieu
gelos sans carbone
exogne
Rsistance des matires Matriaux

plastiques aux agents de plastiques
dgradation biologiques
Test en bote de
Petri sur milieu
gelos synthtique.
Norme
Titre
ASTM G21-90
(1990)
ASTM G22-76
(1976)
DIN 53739
(1967)
Matriaux
tests
Ensemencem
ent
Temprature
(C)
Humidit
(%)
Dure (jour)
Suspension
de Pulvrisation 28-30
spore
de de
la
champignon
suspension
(5 souches pures)
85
21
Suspension
bactrienne
Pseudomonas
aeruginosa
(souche pure)
85 minimum
21
28
85
28
Inoculum
30
incorpor
une
glose
fondue
et
refroidi
45C
95
14 28
Suspension
30
de
spores
dpose avec
une pipette
sur
chantillons.
Suspension
bactrienne
Ou
inoculum mlange la
bactrien
(P. glose
aeruginosa).
>90
28 maximum
Inoculum
mixte
compos
dune
suspension de spores
de champignons : 10
souches pures soit
dans leau distille
soit dans milieu
nutritif sans carbone
organique.
Incbation
14
dans un tuve
95%
dhumidit
Inoculum
37
de incorpor
une
glose
fondue
et
refroidi
45C
Inoculum mixte Pulvrisation

compos
dune ou talement
suspension
de
spores
de
Mthode A : sans
champignons : 5
carbone,
espces.
Mthode B : avec
carbone
Protection des matires Matires

plastiques Partie 1 plastiques
Mthode
dessai
de
rsistance des constituants
aux
micro-organismes
(valuation du degr de
comestibilit
et
effet
fongistatique)
Test en bote de
Petri sur milieu
gelos avec ou sans
source de carbone
organique exogne
Inoculum mixte
compos
dune
suspension
de
spores
de
champignons : 12
souches pures.
Protection des matires Matires

plastiques Partie 2 plastiques
Dtermination
du
comportement
sous
laction des champignons
et
des
bactries
Evaluation par estimation

visuelle ou par mesurage
des variations de masse ou
des
caractristiques
physiques
Test en bote de
Petri sur milieu
gelos avec ou sans
source de carbone
organique exogne
pour
essai
champignon et sans
carbone organique
pour essai bactrie
Inoculum mixte
compos
dune
suspension
de
spores
de
champignons : 5
espces
(DIN
53739)
NF X41-515
Mthode
dessai
de Divers
rsistance des matriels et
appareillages aux microorganismes
Cf NF X41-513
NF X41-520
Protection Mthode Peintures

dessai de rsistance des
peintures et de leur
pouvoir de protection
Test en bote de
Petri sur milieu
gelos avec (action
fongistatique)
ou
sans source de
carbone organique
exogne
(comestibilit)
NF X41-513
ISO 846-1978
NF X41-514
ISO 846-1978
(1968)

Pulvrisation 30
de
la
suspension
ou
dpt
avec
une
pipette
119
b) Nature de linoculum
Il existe trois type dinoculum exogne :
- utilisation dune souche pure,
- utilisation dun mlange de souches pures,
- utilisation dune microflore complexe.
On peut galement envisager un quatrime cas de figure o aucun inoculum exogne n'est apport.
Cette approche peut tre intressante dans le cas des dchets puisqu'elle permet d'valuer l'activit
potentielle des micro-organismes endognes. Elle prsente cependant l'inconvnient majeur de rendre
ncessaire des temps d'incubation parfois trs longs.
Souches pures exognes :
Il s'agit de micro-organismes bien tudis et qui ont la proprit d'tre ubiquistes comme par exemple
Pseudomonas aeruginosa (utilis dans le test ASTM G22-76). Dans le cas des dchets qui sont
susceptibles de contenir un mlange de diffrentes substances organiques et minrales, l'utilisation
d'une souche pure peut s'avrer trop restrictive. En effet, la souche en question risque de ne pas tre
capable de dgrader l'ensemble des polluants organiques considrs, et certains polluants organiques
peuvent n'tre biodgradables que par un consortium de micro-organismes diffrents. Ainsi il nous
apparat plus judicieux de travailler avec des micro-organismes susceptibles de mtaboliser les
polluants organiques tudis, plutt qu'avec une souche recommande a priori.
Mlange de souches pures exognes :
C'est le cas des tests amricains de biodtrioration des plastiques ASTM D 5247-92 et G21-90 et du
test franais de rsistance aux champignons NF X 41-514, dont l'objectif est d'valuer l'action des
champignons sur les matriaux polymres synthtiques. Dans les 2 dernires procdures, l'inoculum
recommand est une suspension de spores de diffrents champignons. La procdure D 5247-92 laisse
quant elle le choix entre un mlange de 3 espces du genre Streptomyces (bactries), une moisissure
(Phanerochaete chrysosporium), ou tout(s) autre(s) micro-organisme(s) jug(s) adquat(s). Ces tests
sont nettement moins restrictifs que les tests de rsistance aux bactries qui n'emploient qu'une seule
souche. Il nous semble cependant, d'une manire gnrale, plus judicieux d'utiliser une microflore
complexe.
Microflore complexe (exogne et endogne) :
C'est l'approche choisie par de nombreuses procdures mises au point pour lvaluation de la
biodgradabilit des substances chimiques en milieu aqueux (Essai de Sturm modifi, Essai MITI
modifi, essai de Screening de l'OCDE, etc). Les tests consistent travailler avec la microflore dj
120
prsente dans le milieu rcepteur ou l'effluent, ou provenant d'autres milieux naturels ayant dj t en
prsence de la substance tudie, ou plus gnralement apporte par une boue de station d'puration
urbaine.
c) Mode d'inoculation
Il dpend de la nature du test. On peut envisager d'apporter l'inoculum sous forme d'une suspension de
micro-organismes ou de spores fongiques qui sera soit dilue dans le milieu d'incubation (tests en
milieu liquide noy), mlange la glose en surfusion (tests en botes de Ptri) ou asperge la
surface du dchet solide (tests en chambre d'incubation ou sur botes de Ptri).
d) Conditions d'incubation
Les conditions d'incubation dpendent de la nature du test et du type d'inoculum utilis. Elles sont
choisies pour favoriser la croissance des micro-organismes et optimiser la biodtrioration (tests
acclrs) ou pour simuler les conditions relles de stockage ou d'utilisation du matriau. On distingue
plusieurs critres :
- Dure de l'incubation : 28 jours dans la plupart des cas. Pour les dchets, cette dure peut tre
notablement accrue (jusqu' plusieurs mois).
- Temprature : 25-30C si on utilise des micro-organismes msophiles (cas gnral).
- Aration : Ncessaire pour les essais arobies, elle est obtenue par agitation ou insufflation d'air dans
les essais en milieu liquide, ou par contact avec l'air dans les autres cas. Les essais de biodgradation
anarobie doivent, eux, tre conduits en l'absence totale d'oxygne (anarobie stricte), ce qui fait
prfrer les tests en milieu noy d'o l'oxygne dissous est purg initialement l'azote.
- Lumire : elle est ncessaire si on travaille avec des micro-organismes phototrophes. Au contraire,
l'obscurit est prfre si l'inoculum est constitu de micro-organismes chimiotrophes (cas gnral)
afin d'viter les phnomnes ventuels de photodgradation. Pour les tests anarobies, l'obscurit est
indispensable car le dveloppement d'algues est proscrire pour viter la libration d'oxygne par
photosynthse.
- Humidit relative : au moins 85%,
- pH du milieu : entre 6 et 8 en gnral. Notons que le dchet test peut influencer le pH du milieu de
culture, ce qui conduit utiliser des milieux tamponns ou contrler le pH en cours de test.
- Contact matriau/micro-organismes/milieu de culture : Il doit tre le meilleur possible si l'on cherche
acclrer les phnomnes pour rduire la dure des tests. Pour les dchets solides, on est conduit
souvent rduire la granulomtrie pour augmenter les surfaces de contact. Cependant, les dimensions
121
des chantillons tests dpendent des dterminations que l'on veut effectuer sur le matriau aprs la
priode d'incubation.
e) Composition du milieu de culture
La vitesse de biodtrioration des dchets dpend, entre autres facteurs, de la disponibilit des
nutriments minraux et de la source de carbone pour les micro-organismes.
- Nutriments minraux : Dans les tests en milieu liquide ou sur bote de ptri, le milieu nutritif apporte
gnralement les nutriments ncessaires aux micro-organismes afin d'acclrer la biodtrioration
ventuelle du dchet.
- Source de carbone organique : Dans la plupart des tests, aucun substrat carbon exogne n'est ajout
au milieu. Les micro-organismes htrotrophes ne peuvent alors satisfaire leur besoin en carbone
organique qu' partir des matriaux tests. Toutefois, l'altration de certains composs requiert la
prsence d'une source de carbone supplmentaire qui permet d'induire une activit microbienne et rend
possible soit une biodtrioration indirecte, soit un mtabolisme fortuit des polluants du dchet
(phnomne de comtabolisme). Signalons les normes europenne ISO 846-1978 et franaise NF
X 41-514 qui proposent l'exposition des plastiques aux micro-organismes avec ou sans source de
carbone supplmentaire dans le milieu.
III.4.3.3- Tests de biodgradabilit des matriaux
a) Prsentation gnrale
Globalement, la plupart des procdures concernent lvaluation de la biodgradabilit des
matriaux plastiques. La biodgradabilit des plastiques a t pendant longtemps value par de
simples tests de croissance microbienne leur surface (Seal & Pankte, 1986). Cependant, la croissance
de surface est plus vraisemblablement due la consommation dadditifs ou de plastifiants par les
micro-organisme qu une vritable biodgradation du polymre en surface (Itvaara & Vikman,
1995). De nombreux travaux normatifs ont t raliss ces dernires annes sur les matriaux
polymres et la mise au point de tests permettant dvaluer leur biodgradabilit dans diffrentes
conditions environnementales (Sawada, 1998). Le Comit Europen de Normalisation (CEN) a
rcemment propos une norme cadre sur les emballages intitule Emballage Exigences relatives
aux emballages valotisables par compostage et biodgradation Programme et critres dvaluation
de lacceptation finale des emballages (EN 13432.2000). Selon Avella et al (2001), cette norme
fournit le cadre de travail dutilisation de normes internationales pour tablir la dclaration de
conformit dun emballage aux exigences essentielles relatives aux emballages devant tre mis sur le
march selon la Directive du Parlement europen et du Conseil sur les emballages et aux dchets
122
demballages (Directive 94/62/CE). Parmis les tests proposs, nous distinguerons lvaluation de la
biodgradabilit intrinsque (ou tests acclrs) et les tests de simulation. En complment citons
galement la norme EN 13193.2000 Emballage Emballage et environnement Terminologie et
la norme EN 13427.2000 Emballage et environnement Exigences relatives lutilisation des
normes europennes dans le domaine de lemballage et des dchets demballage . Il existe galement
une norme cadre en projet EN xxyyzz sur les plastiques intitule Plastics Evaluation of
compostability Test scheme for final acceptance and specifications qui na malheureusement pas
pu tre consulte. Les normes conseilles par la norme cadre EN 13432.2000 sur les emballages sont
des procdures normalises internationales pour valuer la biodgradabilit des plastiques dans des
conditions arobies ou anarobies (voir respectivement le Tableau 42 et Tableau 43) :
Tableau 42 : Evaluation de la biodgradabilit des matriaux plastiques dans des conditions
arobies.
Norme
Titre
ISO 14851.1999* (TA)
Evaluation de la biodgradabilit arobie ultime des matriaux plastiques en milieu aqueux Mthode
par dtermination de la demande en oxygne dans un respiromtre ferm
ISO 14852.1999* (TA)
par analyse du dioxyde de carbone
ISO/CD 14854 (TA)
par dtermination de la demande en oxygne et de la production de biomasse et de carbone organique
dissous, dans un respiromtre ferm
Non normalise
ISO 14855.1999* (TS)
Evaluation de la biodgradabilit arobie ultime et la dsintgration des matire plastiques dans des
conditions contrles de compostage Mthode par analyse du dioxyde de carbone libr
ISO 14855.1999/DAM 1
Evaluation de la biodgradabilit arobie ultime et la dsintgration des matire plastiques dans des
conditions contrles de compostage Mthode par analyse du dioxyde de carbone libr
(TS)
Amendement 1 : Utilisation du lite minral la place dun compost nature

ISO/CD 20200
non normalise
Plastics Determination of the disintegration of plastic materials under simulated composting

condition in a laboratory-scale test
(TS)
ISO 14239.1997
(TS)
ISO/DIS2 17556
(TS)
ISO/DIS 16929
non normalise
Qualit du sol Mthode de mesure de la minralisation de produits chimiques organiques dans le sol
sous conditions arobies, au moyen dun systmes dincubation de laboratoire
Plastiques Dtermination de la biodgradabilit arobie ultime dans le sol par esure de la demande
en oxygne dans un respiromtre ou de la teneur en dioxyde de carbone libr
Plastiques Dtermination de la dsintgration des matriaux plastiques dans des conditions de
compostage dfinies lors dun essai lchelle pilote
(TS)
* Normes cites dans la norme cadre EN 13432.2000.
(TA) Tests acclrs (valuation de la biodgradabilit intrinsque),
(TS) Tests de simulation (valuation de la biodgradabilit en scnario).
Tableau 43 : Evaluation de la biodgradabilit des matriaux plastiques dans des conditions

anarobies.
Norme
ISO 11734.1995* (TA)
(EN ISO 11734.1998)
ISO 14853.1999*
(TA)
ISO/DIS 15985*
(TS)
Titre
Qualit de leau Evaluation de la biodegradabilit anarobie ultime des composs organiques
dans les boues de digesteurs
Evaluation de la biodgradabilit anarobie ultime des matriaux plastiques en milieu aqueux
Mthode par dtermination de la production de biogaz
Plastiques Evaluation de la biodgradabilit anarobie ultime et de la dsintgration dans des
conditions de digestion anarobie teneur leve en solides Mthode par analyse du biogaz libr
* Normes cites dans la norme cadre EN 13432.2000.

(TA) Tests acclrs (valuation de la biodgradabilit intrinsque),
(TS) Tests de simulation (valuation de la biodgradabilit en scnario).

123
b) Tests acclrs dvaluation de la biodgradabilit des matriaux

Parmi ces tests de biodgradabilit des polymres, on trouve des tests acclrs (TA) dvaluation de
la biodgradabilit facile qui sont effectus en milieu aquatique (phase aqueuse) en conditions
arobies ou anarobies (Itvaara & Vikman, 1996). Ils constituent des tests prliminaires (ou tests de
screening) simples et utiles effectuer avant de se lancer sur des tests plus complexes de simulation
(Van der Zee et al, 1994 ; Itvaara & Vikman, 1995). Ils permettent dvaluer la biodgradabilit des
matriaux polymres.Il existe actuellement plusieurs tests standards qui sont trs largement inspirs de
ceux proposs pour les produits chimiques tels que ceux bass sur la production de CO2 ou la
consommation de lO2 en conditions arobies, et la production et CH4 et CO2 en conditions anarobies
(lignes directrices de lOCDE et tests de lUSEPA-OPPTS). Les principales normes nationales ou
internationales dvaluation de la biodgradabilit des matriaux polymres ont t tudies en dtail
dans le cadre de la prsente tude. Les tableaux suivants prsentent leurs principales caractristiques.
Il est conseill de consulter la norme internationale ISO 10634.1995 qui propose des informations
techniques relatives lutilisation de composs organiques faiblement solubles dans leau destins
tre utiliss dans le cadre dessais de biodgradation aquatiques.
Tests en conditions arobies
Tableau 44 : Evaluation de la biodgradabilit arobie des matriaux plastiques en milieu

aqueux Mthode par suivi de la production du dioxyde de carbone (biodgradation ultime).
Principe

mthode

- Norme internationale ISO 14852 (1999),

- Inspire de la procdure OCDE 301B (Sturm modifi),
- Norme amricaine ASTM D5209-92.
Suivi de la biodgradation du substrat par lanalyse du dioxyde de carbone.
- Essais en phase aqueuse,
- Aration par passage dair exempt de CO2,
- Pigeage du CO2 dans une base. Dosage du carbonate par titration chimique ou
analyseur de carbone inorganique,
- En option ; analyse du COD dans le milieu de croissance.
- Composition du matriau, et formule des diffrentes substances,
- Teneur en carbone organique connatre de prfrence pour dterminer le thCO2.
Matriaux polymres (matriaux plastiques).
- Milieu liquide nutritif aqueux sans source de carbone organique,
- [Matriau dessai] de 100 2000 mg.l-1 de COT (unique source de C.O.),
- Matriau de rfrence : cellulose ou poly--hydroxybutyrate,
- Inoculum : boue active, suspensions de compost ou de sol bioactives,
- Aration de 30 100 mL.min-1, avec air exempt de CO2 pendant toute la dure de lessai
(pigeage avec KOH ou NaOH),
- Dure dincubation : 6 mois maximum,
- Obscurit,
- Temprature : 23 2C
- Suivi du CO2 produit : pigeage dans NaOH et analyse du carbone inorganique dissous
(CID)
- Fioles en verre pouvant tre purges par un gaz et scous ou agites et comprenant une
tubulure tanche au CO2.
- Appareillage analytique pour la dtermination du CO2 : analyseur de CO2 (IR) ou CID
ou dispositif de dosage titrimtrique (hydroxyde de baryum) aprs absorption complte
dans une solution basique.
124
Tableau 45 : Evaluation de la biodgradabilit arobie des matriaux plastiques en milieu

aqueux Mthode par dtermination de la demande en oxygne dans un respiromtre ferm.
Principe

mthode
- Norme internationale ISO 14851 (1999),

- Norme internationale ISO/CD 14854 (1995) non normalise (projet de norme),
- Inspire de la procdure OCDE 301F.
Suivi de la biodgradation du substrat par valuation de la consommation doxygne
(DBO) :mesure de la quantit doxygne ncessaire pour amintenir un volume de gaz
constant dans le respiromtre,
- Flacons ferms (respiromtre).
- Teneur en carbone organique connatre de prfrence pour dterminer le DthO.
- Attention la nitrification.
- [Matriau dessai] de 100 2000 mg.l-1 de COT (unique source de C.O.),
- Matriau de rfrence : cellulose ou poly--hydroxybutyrate,
- Inoculum : boue active, suspensions de compost ou de sol bioactives,
- Obscurit,
- Suivi de la consommation doxygne (DBO).
- Respiromtre ferm. De prfrence respiromtre automatique appropri (Oxymtre ou
Sapromat par exemple) avec agitateurs incorpors,
- Appareillage analytique pour la mesure du COT et du COD,
- Apparaillage de analytique de mesure du nitrate et du nitrite.
Les procdures ISO 14851.1999 et ISO.14582.1999 dvaluation de la biodgradabilit arobie des

matriaux plastiques en milieu aqueux sont bases sur les tests standards de biodgradation des
composs organiques ISO 9408.1999 et ISO 9439.1999 mis au point depuis quelques annes dj. Ces
tests sur les plastiques se distinguent par la dure dincubation, le pouvoir tampon du milieu nutritif
plus lev, loptimisation de linoculum et la possibilit dans certains cas deffectuer un bilan matire
du carbone (Pagga et al, 2001).

125
Tests en conditions anarobies
Il nexiste actuellement notre connaissance aucun test normalis dvaluation de la biodgradabilit

anarobie pour les matriaux plastiques. La norme europenne cadre EN 13432 conseille lutilisation
de la procdure internationale ISO 14853 ;1999 prsents dans le Tableau 46 ci-dessous :
Tableau 46 : Evaluation de la biodgradabilit anarobie des matriaux plastiques en milieu
aqueux Mthode par dtermination de la production de biogaz (biodgradation ultime).
Principe
mthode

- Norme internationale ISO 14853.1999,

- Inspire de la norme internationale ISO 11734.1995,
Biodgradation de matriaux plastiques en conditions anarobies.
- Mesure de la production de biogaz (CH4 et CO2).
- Teneur en carbone organique connatre de prfrence pour dterminer le thCO2.
- [Matriau dessai] de 20 200 mg.l-1 de COT (unique source de C.O.) sous forme de
poudre si possible,
- Matriau de rfrence : cellulose ou poly--hydroxybutyrate ou polythylne-glycol 400,
- Essais de contrle dinhibition facultatif,
- Inoculum : boue digre lave dun digesteur dune STEP deaux domestiques. Faible
qnatit de carbone inorganique (CI). Si ncessaire, dilution pour une concentration en
matire solide de 1 3 g.L-1.
- Prdigestion de la boue avant mise en route des essais : jusqu 7 jours 35 2C,
- Dure dincubation : jusqu 60 jours de prfrnce ou 90 jours maximum,
- Obscurit,
- Suivi du biogaz produit,
- Analyse du carbone inorganique CI : prlvement au dbut et en fin de priode dessai.
- Rcipients en verre rsistant la pression, dune taille nominale comprise entre 0,1 et 1
L, et quip dun septum tanche au gaz pouvant rsister environ 2000 hPa. Le volume
despace de tte de 10 30% du volume total,
- Appareillage analytique pour la dtermination du CI sur un chelle de 1 200 mg.L-1,.
- Appareil danalyse du CH4 et CO2,
- Ou Appareil de mesure manomtrique tel que transducteur de pression ou tout
simplement une seringue gaz de 20 mL.
- Manomtre raccord au flacon avec une aiguille seringue approprie ou bien vanne 3
voies tanches au gaz pour vacuer la pression en excs,
- Ou Mesure du biogaz laide de mthodes volumtriques (rservoir dexpansion).
126
c) Tests de simulation pour lvaluation de la biodgradabilit des matriaux

Gnralement effectus aprs lvaluation de la biodgradabilit facile en phase aqueuse, les tests de
simulation ont pour objectif de reproduire le plus fidlement possible le scnario dutilisation ou du
devenir en fin de vie du matriau ou dtudier linfluence de certains facteurs du scnario. Dans le cas
des dchets, on peut distinguer plusieurs scnarios possibles :
- Scnario 1 : Utilisation ou valorisation du matriau dans le domaine de la construction et des
travaux publiques : ce scnario regroupe en fait un ensemble de scnarios trs varis.
- Scnario 2 : Station dpuration des eaux uses avec traitement biologique arobie,
- Scnario 3 : Traitement biologique anarobie (mthanisation),
- Scnario 4 : Compostage,
- Scnario 5 : Epandage,
- Scnario 6 : Mise en dcharge dordures mnagres (classe II),
- Scnario 7 : Mise en dcharge de dchets industriels spciaux (classe I).
Nous avons effectu une recherche bibliographique concernant principalement les matires plastiques
et les tests normaliss ou non dvaluation de leur biodgradabilit suivant les principaux scnarios
dfinis prcdemment.

127
Scnario 1 : Utilisation comme matriau de substitution en BTP
Le scnario est en fait un ensemble de scnarios trs divers. En effet, le contact avec lenvironnement
sera trs diffrent dans le cas dun soubassement routier, dun canal, ou dun mur. Quil sagissent de
polymres plastiques, de peinture ou de dchets, la filire valorisation dans le domaine de la
construction ncessite de tenir compte du caractre biovolutif ventuel des matriaux susceptibles
dtre exposs aux agressions des agents microbiens. Il est donc ncessaire de dfinir lenvironnement
du dchet en fonction du scnario. Nous pouvons dfinir plusieurs cas diffrents selon la nature de
lenvironnement considr :
- Matriau au contact du sol : dans ce cas, se rfrer au scnario 5 pandage et aux procdures
existantes dvaluation de la biodgradabilit des matriaux dans les sols.
- Matriau au contact de leau : Il sagit ici dvaluer la biodgradabilit du matriau dans un milieu
aqueux en conditions arobies ou anarobies. Pour cela, il est conseill dutiliser les procdures
normalises prsentes dans le Tableau 42 et le Tableau 43 et de les adapter, si ncessaire, aux
conditions environnementales dfinies par le scnario. En outre, il est ncessaire deffectuer les essais
sur des dures plus importantes que celles prconises dans les procdures normalises dvaluation
de la biodgradabilit facile en milieu aqueux.
- Matriaux au contact de lair : Il existe notre connaissance principalement deux tests normaliss de
simulation en chambre climatique atmosphre contrle (Norme amricaine ASTM D3273 et norme
franaise NF 41-520) pour valuer la rsistance des peintures et leur pouvoir de protection vis vis
des agressions fongiques. Il sagit de tests qualitatifs bass sur lobservation de la colonisation des
surfaces par les champignons. Les principales caractristiques des deux tests normaliss sont
prsentes dans le Tableau 47. Ces essais sont gnralement effectus en complment de tests
dvaluation des agressions microbiennes sur bote de Ptri. Nous citerons galement la norme ISO
846.1997 non consulte et intitule Plastics : Determination of behavior under the action of fungus
and bacteria (qui na malheureusement pas pu tre consulte).
Tableau 47 : Procdures normalises dvaluation de la rsistance des peintures aux agressions
fongiques en chambre sous atmosphre humide contrle (95C).
Norme
Titre
Inoculum
ASTM
D3273
Resistance to growth of mould on

the surface of interoir coating in an
environmental chamber
Suspension de spore de champignon Non

(5 souches pures)
NF 41-520
Protection Mthode dessai de

rsistance des peintures et de leur
pouvoir de protection
Au fond de la chambre, terreau et

feuilles
en
dcomposition
+
suspension de spores de 10 espces
fongiques

Ensemencement
Temprature (C) Dure (jour)

?
Pulvrisation de la 30
suspension
de
spores, au moment
de la premire mise
en service de la
chambre
De 1
6 mois
128
Ces tests sont parfaitement adaptables la problmatique dchets solides massifs tels que par exemple
les dchets contenant une fraction organique et stabiliss par des liants hydrauliques (Bayard, 1993).
Scnario 2 : Station dpuration des eaux uses avec traitement biologique arobie
Il sagit ici de comprendre le devenir de certains dchets (les normes existent pour les polymres
plastiques) en phase aqueuse en prsence de micro-organismes prsents dans les effluents et les boues
de stations dpuration des eaux uses domestiques. Lvaluation de la biodgradabilit des matriaux
plastiques peut seffectuer par lutilisation des normes dvaluation de la biodgradabili arobie en
milieux aquatiques. Nous ne reviendrons pas sur ces tests qui ont dj t prsents dans le Tableau
42. Cependant, nous prsentons dans le Tableau 48 la norme amricaine ASTM D 5271-93 intitule
Standard Test Method for Determining the Aerobic Biodegradation of Plastic Materials in an
Activated-Sludge-Wastewater-Treatment System qui permet dvaluer la biodgradabilit des
matriaux plastiques dans le scnario traitement des eaux . Cette norme est en partie base sur la
norme amricaine ASTM D5209-92 intitule Test Method for Determining the Aerobic
Biodegradation of Plastics Materials in the Presence of Municipal Sewer Sludge .
Tableau 48 : Evaluation de la biodgradabilit arobie des matriaux plastiques dans une boue
active de station dpuration deaux uses domestiques.
Norme :
Principe

mthode
- Norme amricaine ASTM D 5271 93,

- Norme internationale ISO 14851 (1999).
Suivi de la biodgradation du matriau plastique par valuation de la consommation
doxygne : mesure de la quantit doxygne ncessaire pour maintenir un volume de gaz
constant dans le respiromtre,
- Flacons ferms (respiromtre).
- Teneur en carbone organique connatre.
- Attention la nitrification.
- [Matriau dessai] de < 500 mg.l-1 de COT (unique source de C.O.),
- Inoculum : boue active,
- Dure dincubation : 4 6 semaines minimum,
- Obscurit,
- Suivi de la consommation doxygne (DBO).
- Respiromtre ferm avec agitateurs incorpors (1200 mL avec 1000 mL de milieu),
- De prfrence respiromtre automatique appropri (Oxymtre ou Sapromat par
exemple) : mesure de la demande en oxygne et maintient de la teneur ennoxygne dans le
milieu,
- Appareillage analytique pour la mesure du COD.
En fait, la procdure amricaine est pratiquement identique la procdure internationale ISO 14851
(1999) intitule Evaluation de la biodgradabilit arobie ultime des matriaux plastiques en milieu
aqueux Mthode par dtermination de la demande en oxygne dans un respiromtre ferm
prcdemment dcrite dans le tableau 45.

129
Scnario 3 : Traitement biologique anarobie (mthanisation)
Lobjectif est de comprendre le devenir des dchets dans un digesteur anarobie. Daprs le groupe de
travail europen CEN TC 249 WG 8 Characterization of degradability , lvaluation de la
biodgradabilit des matriaux plastiques peut seffectuer dune part par lutilisation des normes
dvaluation de la biodgradabilit anarobie en milieux aquatiques (ISO 11734.1995 et ISO
14853.1999) mais galement par la norme ISO/DIS 15985.1999 encore actuellement en projet et
intitule Plastiques Evaluation de la biodgradabilit anarobie ultime et de la dsintgration
dans des conditions de digestion anarobie teneur leve en solides Mthode par analyse du
biogaz libr qui sapparente un test de simulation du comportement des matriaux plastiques dans
un digesteur. Signalons quil existe galement une norme amricaine ASTM D5511-94 intitule
Standard Test Method for determining Aerobic Biodegradation of Plastics Materials under HighSolids Anaerobic-Digestion Conditions . Cette norme, qui na malheureusement pas pu tre
consulte, a t utilise pour llaboration de la norme internationale ISO/DIS 15985 (Sawada, 1998)
prsente dans le Tableau 49.
Tableau 49 : Plastiques - Evaluation de la biodgradabilit anarobie ou de la dsintgration
dans des conditions de digestion anarobie teneur leve en solides Mthode par analyse du
biogaz libr pour le suivi de la biodgradation anarobie ultime.
Principe

mthode

- Norme internationale ISO/DIS 15985,

- Inspire des normes internationales ISO 11734.1995 et ISO 14853.1999 et inspir de la
norme amricaine ASTM D5210-92,
- Norme amricaine ASTM D5511-94,
Simulation optimise dun processus de digestion anarobie intensif et valuation de la
Biodgradabilit ultime et de la dsintgration de matriaux plastiques. Mesure du biogaz
(CH4 et CO2) produit.
COT du matriau afin destimer la quantit maximale de biogaz susceptible dtre produit
par le matriau.
- [Matriau dessai] : 20 g de matire sches totales contenant 8 g de COT par digesteur,
surface maximale de 2cmx2cm,
- Matriau de rfrence : cellulose sous la forme de particules de diamtre < 20m,
- Inoculum obtenu partir dun digesteur anarobie fonctionnant convenablement avec
des dchets mnagers prtraits (tri, broyage et tamisage) comme unique substrat
(lments < 60 mm). De prfrence utiliser un digesteur fonctionnant dans des conditions
sches (solides totaux > 20%),
- Conditionnement de linoculum : postfermentation denviron 7 jours en condition
potimale afin de rduire leffet de la fermentation de linoculum lui-mme,
- Prparer environ 10 kg dinoculum : 500 g de masse humide dans chaque digesteur,
- Caractristiques finales de linoculum recommandes :
- pH compris entre 7,5 et 8,5,
- [AGV] < 1 g.kg-1 de masse humide,
- [NH4+] comprise entre 0,5 et 2 g.kg-1 de masse humide.
- Dure dincubation : 15 jours ou plus si ncessaire,
- Obscurit ou sous lumire diffuse,
- Suivi du biogaz produit par mesure volumique,
- Fin de priode digestion : laisser le montage refroidir, mesure la temprature ambiante et
pression atmosphrique,
- Pour valuer les pertes en matriau : peser avant et aprs incubation,
- Dsintgration : observations visuelles.
- Digesteurs : ballons ou fioles coniques munis de raccords tanches pour empcher toute
perte de gaz (volume minimal de 750 mL),
- Dispositif danalyse du biogaz facultatif,
- Dispositif danalyse des acides gras volatils (AGC) facultatif,
- Mesure du volume biogaz laide de mthodes volumtriques (rservoir dexpansion ou
ou tout simplement une seringue gaz de 20 mL).
130
Il existe galement des tests non normaliss dvelopps par de nombreux laboratoires de recherche
afin de dterminer la capacit de production de biogaz dun compos ou dun mlange de composs
organiques tel que le test BMP (Biochemical Methane Potential) dvelopp par Owen et al (1979).
Daprs Lin et al (1999), ce test est bien adapt pour valuer lefficacit dun procd de digestion de
boues actives. Ce test trs proche de la procdure amricaine normalise ASTM D5511-94 peut
galement tre utilis pour dautres types de dchets tels que les dchets ptroliers (Stewart et al,
1995) ou les ordures mnagres (Owens & Chynoweth, 1993 : Wang et al, 1994 ; Chynoweth &
Pullammanappallil, 1996).
Scnario 4 : Compostage
Le compostage est sans doute lun des procds ayant le plus davenir pour la rduction de la fraction
fermentescible des ordures mnagres (Pagga, 1998). Le groupe de travail du CEN TC 249 WG 9
tudie actuellement la mise en place dune procdure globale dvaluation de la compostabilit
(CEN TC 249 WG 9 Characterization of degradability N29, 2000). Des travaux comparables sont
encore actuellement en cours au niveau international par le comit technique sur les plastiques
(ISO TC 61) ou au niveau national par lorganisation allemande de standardisation DIN (Pagga, 1998).
Trois caractristiques importantes des matriaux plastiques doivent tre tudie :
1) Biodgradabilit,
2) Dsintgration au cours du procd de compostage,
3) Effet sur le compostage et influence sur la qualit du compost.
La caractrisation de la biodgradabilit peut ncessiter lutilisation dune part de tests acclrs

tels que les essais dvaluation de la biodgradabilit ultime en phase aqueuse (ISO 14851 et
ISO 14852) dj dcrits ou bien des tests de simulation tels que la norme ISO 14855.1999 intitule
Evaluation de la biodgradabilit arobie ultime et la dsintgration des matires plastiques dans
des conditions contrles de compostage Mthode par analyse du dioxyde de carbone libr .
Daprs les travaux effectus par Van der Zee et al (1998), ces tests dvaluation en milieu aqueux ne
permettent pas de prdire correctement la biodgradation des matriaux polymres au cours de
procds biologiques de traitement des dchets.
Le test de simulation de compostage ISO 14855.1999 sest largement inspir des normes amricaines
ASTM D 5338-98e1 Standard Test Method for Determining Aerobic Biodegradation of Plastics
Materials Under Controled Composting Conditions , ASTM D5988-96 Standard Test method for
Determining Aeobic Biodegradation in Soil of Plastic Material or Residual Material after
composting et celle de linstitut allemand de normalisation (DIN) DIN 54900 Testing of the
compostability of polymeric materials . Le Tableau 50 prsente les caractristiques de ce test.

131
Tableau 50 : Evaluation de la biodgradabilit arobie et de la dsintgration des matriaux

plastiques dans des conditions contrles de compostage - Mthode analyse du dioxyde de
carbone libr pour le suivi de la biodgradation arobie ultime.
- Norme internationale ISO 14855 1999,

- Inspire de la norme amricaine ASTM D5338-98e1 et ASTM D5988-96,
- Inspire de la norme allemande DIN.54900 parts 1-4 (Draft january 1997).
- Norme amricaine ASTM D6340-98a,
- Norme amricaine ASTM D5988-96b.
Simulation optimise dun processus de compostage (condition arobie) et valuation de
Principe
la Biodgradabilit ultime (mesure du CO2 libr) et de la dsintgration de matriaux
plastiques.
COT du matriau afin destimer la quantit maximale de CO2 susceptible dtre produit
mthode
par le matriau.
- Matriau de rfrence : cellulose sous la forme de particule de diamtre < 20m,
- Inoculum : compost stabilis et mature. Par exemple compost issu du compostage de la
fraction organiques des dchets municipaux solides de 2 4 mois,
- Conditions optimales dincubation :
- pH compris entre 7 et 9,
- Temprature :
- Humidit comprise entre 45 et 50%
- Temprature constante de 52 2C,
- Tmoins : essai compost sans matriau plastique,
- Suivi en continu du CO2 produit.
- Analyse directe du CO2 avec dtecteur IR ou bien analyse du CO2 pig dans NaOH par
dosage du carbone organique dissous (CID).
a Norme ASTM D6340-98 Standard Test Methods for Determining Aerobic Biodegradation of Radiolabeled Plastic Materials in an
Aqueous or Compost Environment non consulte.
b Norme ASTM D5988-96 Standard Test method for Determining Aeobic Biodegradation in Soil of Plastic Material or Residual Material
after composting .
La dtermination de la dsintgration (transformation dun matriau en fragments de plus petite

taille) peut tre faite exprimentalement avec le test normalis ISO 16929 Plastiques
Dtermination de la dsintgration des matriaux plastiques dans des conditions de compostage
dfinies lors dun essai lchelle pilote . Ce test qui ne permet pas de diffrencier la dsintgration
et la biodgradation a t spcialement conu pour des essais pilotes dans des conditions de
compostage dfinies et normalises. En fin dincubation, la maturit du compost peut tre valuer
suivant la quotation Rottegrad base sur la mesure de temprature maximale dans un essai dautochauffement utilisant des vases de Dewar. La dsintgration du matriau plastique est dtermine par
tamisage du compost final (tamis de 2 et 10 mm) et pese des particules plastiques de diamtre
suprieure 2 mm.
La qualit du compost est gnralement base sur plusieurs critres tels que la prsence de microorganismes pathognes, et les effets cotoxicologiques des produits de biodgradation et de
dsintgration des plastiques. Le document CEN TC 249 WG 9 N29 (2000) conseille pour ce dernier
critre dutiliser le test dcotoxicit sur plantes suprieures propos dans les lignes directrices de
lOCDE (OCDE 208) avec quelques amnagements. Nous rappelons quil nexiste pas notre
connaissance de normes sur la qualit cotoxicologique du compost.
132
Scnario 5 : Epandage
Le groupe de travail du CEN TC 249 WG 9 characterization of degradation a galement tudi la

mise en place dune procdure globale dvaluation de la dgradabilit des matriaux plastiques dans
les sols (CEN TC 249 WG 9 N39, Charaterization of bio( ?)degradability in soil, 2001). Il prconise
dutiliser de prfrence la norme internationale actuellement en projet ISO/DIS(2) 17566 Plastiques
Dtermination de la biodgradabilit arobie ultime dans le sol par mesure de la demande en
oxygne dans un respiromtre ou de la teneur en dioxyde de carbone libr ou bien, si ncessaire, la
norme internationale ISO 14239.1997 Qualit du sol Mthode de mesure de la minralisation de
produits chimiques organiques dans le sol sous conditions arobies, au moyen dun systme
dincubation de laboratoire . Deux caractristiques importantes des matriaux plastiques doivent tre
tudie daprs le CEN TC 249 WG 9 :
1) Biodgradabilit,
2) Effet des produits de biodgradation sur les qualits du sol (cotoxicit en particulier).
Le Tableau 51 donne les principales caractristiques de la norme ISO/DIS(2).17566 inspire de la

norme amricaine ASTM D5988-96 Standard Test method for Determining Aeobic Biodegradation
in Soil of Plastic Material or Residual Material after composting dveloppe pour valuer la
biodgradabilit des matriaux plastiques exposs aux sols. La biodgradabilit des matriaux
plastiques dans les sols ne peut pas tre prdite partir des rsultats obtenus par des essais en milieu
aqueux (Yakabe et al, 1992) tant donn la complexit dun tel cosystme (Domergues et
Mangenot, 1970).
Tableau 51 : Plastiques Dtermination de la biodgradabilit arobie dans le sol par mesure de
la demande en oxygne dans un respiromtre ou de la production de dioxyde de carbone libr
(biodgradabilit arobie ultime).
Principe

mthode

- Norme internationale ISO/DIS.17556.2,

- Normes internationales ISO 14239.1997 et ISO 11266.1999,
Simulation optimise denfouissement dans un sol (condition arobie) et valuation de la
Biodgradabilit ultime et de la dsintgration de matriaux plastiques : Mesure de la
quantit de CO2 libr ou bien la consommation dO2.(demande en oxygne ou DBO).
COT du matriau afin destimer la quantit maximale de CO2 libr ou la consommation
dO2 (DBO).
- Matriau de rfrence : cellulose ou poly--hydroxybutyrate),
- Inoculum : pas dinoculum,
- Sol :
- pH compris entre 4 et 8,
- Teneur en argile : 5-25%,
-TOC : 1 4%,
- CEC : suprieure 10 mq/100g,
- Prlvement selon la norme NF ISO 10381-6,
- Conservation : 5C,
- Humidit : 40 60% de la capacit de rtention en eau,
- Biomasse du sol : entre 107 et 109 organismes/g de sol sec,
- Pr-incubation du sol : 2 jours entre 20 et 24C,
- Temprature constante de 20 25C 1C,
- Suivi en continu du CO2 produit ou O2 consomm.
- Suivi de O2 : utilisation respiromtres automatiss permettant de suivre automatiquement
la consommation dO2 et produire par lectrolyse lO2 ncessaire pour compenser
(Sapromat, Oxymtre etc.) ou bien,
- Suivi de CO2 : Analyse directe du CO2 avec dtecteur IR ou bien analyse du CO2 pig
dans NaOH par dosage du carbone organique dissous (CID) (titrimtrie ou analyseur de
CID).
133
Scnario 6 : Mise en dcharge dordures mnagres (classe II)
Il nexiste pas notre connaissance de norme internationale dvaluation de la biodgradation

correspondant spcifiquement au scnario de mise en dcharge dordures mnagres. Dans le cas du
scnario de mise en dcharge, il sagit surtout dvaluer la biodgradabilit des matriaux ou des
dchets en conditions anarobies ou microarobie (ou anoxie) qui prdominent dans les dcharges
dordures mnagres (Barlaz, 1996). La norme amricaine D 5529-94 intitule Standard Test
Method for Determining the Anaerobic Biodegradation of Plastic Materials under Accelerated
Landfill Conditions propose un test de simulation du comportement des matriaux plastiques en
conditions denfouissement dans les dcharges. En fait, il sagit dune procdure pratiquement
identique celle dcrite dans le Tableau 49 sur lvaluation de la biodgradabilit des matriaux
plastiques au cours dun procd de digestion anarobie. De nombreux essais pilotes lchelle du
laboratoire ont t raliss pour tudier la biodgradation des matriaux plastiques et des dchets en
conditions simules de mise en dcharge (Barlaz, 1996 ; Pettigrew & Johnson, 1996 ; Robles, 1999 ;
Robles et Gourdon, 1999 ; Robles et Gourdon, 2000).
Scnario 7 : Mise en dcharge de dchets industriels spciaux (classe I)
Actuellement, il nexiste pas doutils dvaluation de lvolution biologique des dchets stabiliss/
solidifis par des liants hydrauliques susceptibles dtre utiliss dans le cas dun scnario de stockage
en dcharge de classe I. Leffet de facteurs biologiques sur les qualits des solidifiats nest donc pour
linstant pas pris en compte. Toutefois, la mise au point de telles procdures pourraient sinspirer des
procdures classiques de lixiviation sur dchets bruts ou broys en tenant compte du facteur temps et
des facteurs biologiques susceptibles soit de modifier les caractristiques physico-chimiques de la
matrice (effet direct), soit de modifier lenvironnement chimique de la matrice (effet indirect). Ces
procdures permettraient dans un premier temps dvaluer le potentiel dvolution biologiques des
dchets stabiliss/solidifis et de rflchir sur la mise au point dune procdure tenant compte non
seulement des proprits physico-chimiques particulire de tels dchets mais aussi du scnario de
stockage en dcharge de classe I.

134
Conclusions et perspectives de ltude

Ltude avait pour objectif de fournir les informations ncessaires la dfinition et lemploi des
termes lis la notion de biodgradabilit des dchets solides ou semi-solides contenant une fraction
significative de matire organique. Elle est justifie par lessor depuis quelques annes de la notion de
dchets biodgradables/fermentescibles florissant dans les tests rglementaires concernant la gestion et
le traitement des dchets. Actuellement, il nexiste pas de dfinition prcise des termes
biodgradable ,
fermentescible ,
compostable ,
mthanisable
et
des
procdures
dvaluation correspondantes. Le problme nest pas simple rsoudre car il est possible de distinguer
deux niveaux de dfinition :
-
le niveau scientifique : La dfinition des termes sur une base scientifique est gnralement lie la
comprhension des mtabolismes biologiques complexes tudis lchelle molculaire. Ce
niveau conduit la mise au point de procdures universelles standardises dvaluation de la
biodgradabilit de substances ou de matriaux dans diffrentes conditions dincubation et qui
peuvent, si ncessaire et dans la mesure du possible, tre utilisables pour les dchets organiques
solides ou semi-solides.
le niveau technique : Elle considre les filires de traitement biologique des dchets organiques. Il
est ncessaire de dfinir certains termes en relation avec le procd lui-mme tels que le
compostage et la mthanisation et/ou denvisager des procdures dvaluation diffrentes.
Cette dmarche peut galement conduire la mise au point de procdures standardises
dvaluation de la capacit des dchets organiques tre traits par voie biologique.
Lambigut des textes rglementaires sur la gestion et le stockage des dchets repose sur lutilisation
des termes lis la notion de potentiel de biodgradation sans dfinition prcise (soit lchelle
procd, soit lchelle scientifique) et sans recours des procdures recommandes (voire
normalises) dvaluation de la biodgradabilit des dchets dans le cadre prcis de scnarios de
gestion et de traitement des dchets.
Notre tude a donc consist tout dabord :
-
fournir les informations de base en biochimie et microbiologie permettant de donner une dfinition
scientifique gnrale de la biodgradation de la matire organique et des termes associs,
Prciser dans quels domaines de gestion et de traitement des dchets organiques intervient cette
notion de biodgradation.
Nous avons propos une liste de dfinitions scientifiques et techniques des termes lis la notion de
biodgradation et une liste de procdures dvaluation de la biodgradabilit.
135
En outre, nous avons tabli une premire liste non exhaustive de scnarios concerns par la notion de
biodgradation pour lesquels nous avons bauch quelques pistes dutilisation de tests dvaluation de
la biodgradabilit en scnario.
En conclusion et au regard du travail dj ralis dans le cadre de ce contrat RECORD 00-0118/1A, il
nous apparat utile de poursuivre ltude en privilgiant lapproche scnario pour la mise au point
dune mthodologie globale permettant la slection et la hirarchisation des tests dvaluation de la
biodgradabilit adapte au domaine de la gestion et du traitement des dchets organiques solides ou
semi-solides :
Lapproche serait divise en 6 tapes :
1- Dfinition des principaux scnarios de gestion et de traitement des dchets,
2- Slection de certaines procdures existantes dvaluation de la biodgradabilit et adaptation de
ces procdures lvaluation dans les principaux scnarios de gestion et traitement des dchets,
3- Hirarchisation des procdures pour chaque scnario,
4- Mise au point si ncessaire de nouvelles procdures dvaluation de la biodgradabilit en
scnario,
5- Validation des tests sur deux dchets organiques en fonction des scnarios de gestion et de
traitement possibles :
-
Tests dvaluation de la biodgradabilit facile,
Tests dvaluation de la biodgradabilit intrinsque,
Tests de simulation tenant compte des conditions du scnario pour lvaluation de la

biodgradabilit en scnario.
6- Elaboration de la mthodologie globale de slection des tests pour un dchet donn en fonction
des scnarios de gestion et de traitement possibles.

136
Liste des figures

Figure 1 : Schma gnral dune bactrie. ............................................................................................................ 13
Figure 2 : Schma de la structure filamenteuse des moisissures........................................................................... 14
Figure 3 : Schma dune cellule de levure, Saccharomyces cerevisae.................................................................. 15
Figure 4: Courbe de croissance d'une culture bactrienne .................................................................................... 17
Figure 5 : Mtabolisme nergtique...................................................................................................................... 24
Figure 6 : Principe gnral des ractions doxydo-rduction. ............................................................................... 25
Figure 7 : Chane de transport lectronique. ......................................................................................................... 26
Figure 8 : Hydrolyse des polymres organiques. .................................................................................................. 31
Figure 9 : Les principales voies cataboliques........................................................................................................ 33
Figure 10 : Processus dhumification de la matire organique dans les sols (Dauthuile, 1982). .......................... 35
Figure 11. Modle de structure des acides humiques propos par Stevenson (1982). .......................................... 36
Figure 12 : Modle de structure des acides fulviques propos par Schnitzer et Khan (1972)............................... 36
Figure 13 : Taux de biodgradation des composants de la biomasse vgtale dans les sols et litires (daprs
Mustin, 1987)................................................................................................................................................ 39
Figure 14 : Composition des ordures mnagres Franaises en 1960 et 1993. ..................................................... 44
Figure 15 : Production moyenne d'ordures mnagres en France, pour l'anne 1993 (en masse humide produite
par habitant et par an) (ADEME, 1998)........................................................................................................ 44
Figure 16 : Schma d'un centre de traitement des eaux uses. Origine des boues. ............................................... 47
Figure 17 : Principe du compostage...................................................................................................................... 54
Figure 18 : Les deux tapes de transformation de la matire organique. .............................................................. 54
Figure 19 : Evolution de la microflore au cours de compostage. .......................................................................... 56
Figure 20 : Courbe de variation de pH au cours du compostage........................................................................... 59
Figure 21 : Les 4 tapes de la mthanisation (daprs Gourdon, 1987). ............................................................... 61
Figure 22 : Schma global de la biodtrioration directe dun dchet contenant de la matire organique et
stabilis par des liants hydrauliques. ............................................................................................................. 73
Figure 23 : Schma global de la biodtrioration indirecte dun dchet contenant de la matire organique et
stabilis par des liants hydrauliques. ............................................................................................................. 74
Figure 24 : La dcharge : racteur bio-physico-chimique..................................................................................... 79

137
Liste des Tableaux

Tableau 1 : Les aliments constitutifs des micro-organismes................................................................................. 16
Tableau 2 :Principales interactions possibles entres diffrentes populations dans un systme donn (daprs
Atlas, 1988 ; Alexander, 1994, 1997). .......................................................................................................... 18
Tableau 3 : Facteurs physico-chimiques de croissance des micro-organismes. .................................................... 19
Tableau 4. Substituants influenant la biodgradabilit des substrats organiques. ............................................... 20
Tableau 5 : Classification physiologique des bactries en fonction de la temprature [30].................................. 21
Tableau 6 : Composition des dchets municipaux (IFEN, 1998).......................................................................... 43
Tableau 7 : Caractrisation des OM franaises selon la campagne mene par l'ADEME. ................................... 45
Tableau 8 : Caractristiques physico-chimiques des dchets putrescibles contenus dans les ordures mnagres en
1993 (source ADEME, 1998). ...................................................................................................................... 45
Tableau 9 : Analyse chimique de la matire organique putrescibles des ordures mnagres. .............................. 45
Tableau 10 : Rapport C/N et humidit de diffrents dchets de vgtaux (daprs Mustin, 1987)....................... 46
Tableau 11 : Composition moyenne des boues urbaines fraches en Europe (daprs Williams, 1998). .............. 48
Tableau 12 : Les micro-organismes du compost................................................................................................... 56
Tableau 13 : Valeurs optimales de compostage de substrats organiques. ............................................................. 57
Tableau 14 : Composition en carbone et en azote de diffrents dchets organiques............................................. 59
Tableau 15 : Liste des dchets industriels spciaux stabiliser (Arrt du 18 dcembre 1992, modifi le 18
fvrier 1994).................................................................................................................................................. 69
Tableau 16 : Dfinition des principaux termes lis la notion de dgradation..................................................... 84
Tableau 17 : Dfinition des principaux termes lis la notion de biodgradation................................................ 84
Tableau 18 : Dfinition des principaux termes lis la notion de biodgradation dans les traitements biologiques
des dchets. ................................................................................................................................................... 85
Tableau 19 : Sites sur Internet sur la biodgradabilit des molcules organiques. ............................................... 87
Tableau 20 : Liste des adresses lectroniques des organismes de normalisation consults. ................................. 93
Tableau 21 : Liste des adresses lectroniques des organismes dinformations consults. .................................... 93
Tableau 22 : Classement des normes suivants les conditions du milieu dexposition. ......................................... 94
Tableau 23 : Classement des normes sappliquant un compos donn. ............................................................. 95
Tableau 24 : Mthodes dvaluation de la biodgradabilit facile dune substance organique. Conditions
dapplication des tests. (OCDE, 1993).......................................................................................................... 99
Tableau 25: Conditions gnrales et particulires des procdures dvaluation de la biodgradabilit faciles des
substances organiques. ................................................................................................................................ 100
Tableau 26 : Substances organiques de rfrence pour lvaluation de lactivit de linoculum dans les essais de
biodgradabilit facile................................................................................................................................. 101
Tableau 27 : Essai de disparition du COD- Mthode 301A OCDE. ................................................................... 104
Tableau 28 : Essai de dgagement de CO2 - Mthode 301B OCDE. (galement connu sous le nom de test de
Sturm Modifi)............................................................................................................................................ 104
Tableau 29 : Essai du MITI modifi (I) - Mthode 301C OCDE........................................................................ 105
Tableau 30 : Essai en flacon ferm - Mthode 301D OCDE. ............................................................................. 105
Tableau 31 : Essai de Screening - Mthode 301E OCDE. ............................................................................ 106
Tableau 32 : Essai de respiromtrie manomtrique - Mthode 301F OCDE. ..................................................... 106
Tableau 33 : Dtermination de la demande biochimique en oxygne aprs n jours (DBOn). ............................. 107
Tableau 34 : Essai de biodgradabilit dite intrinsque Mthode SCAS modifie - Mthode 302A OCDE. .. 109
Tableau 35 : Essai de biodgradabilit dite intrinsque Mthode Zahn-Wellens/EMPA - Mthode 302B OCDE.
.................................................................................................................................................................... 110
138
Tableau 36 : Essai de biodgradabilit dite intrinsque Essai MITI Modifi (II) - Mthode 302C OCDE. .... 111
Tableau 37 : Test dvaluation de la biodgradabilit des composs organiques dans les boues de digesteurs.. 112
Tableau 38 : Test dvaluation de la biodgradabilit intrinsque des substrats organiques dans les sols ou
sdiments et en conditions arobies. ........................................................................................................... 113
Tableau 39 : Test dvaluation de la biodgradabilit intrinsque des substrats organiques dans les sols et en
conditions anarobies.................................................................................................................................. 114
Tableau 40 : Test dvaluation de la biodgradabilit intrinsque des substrats organiques en conditions
anarobies. .................................................................................................................................................. 115
Tableau 41 : Procdures normalises dvaluation de la rsistance des matriaux aux agents microbiens en milieu
solide (tests en bote de Petri sur milieu glos). ........................................................................................ 119
Tableau 42 : Evaluation de la biodgradabilit des matriaux plastiques dans des conditions arobies............. 123
Tableau 43 : Evaluation de la biodgradabilit des matriaux plastiques dans des conditions anarobies. ........ 123
Tableau 44 : Evaluation de la biodgradabilit arobie des matriaux plastiques en milieu aqueux Mthode par
suivi de la production du dioxyde de carbone (biodgradation ultime). ..................................................... 124
Tableau 45 : Evaluation de la biodgradabilit arobie des matriaux plastiques en milieu aqueux Mthode par
dtermination de la demande en oxygne dans un respiromtre ferm....................................................... 125
Tableau 46 : Evaluation de la biodgradabilit anarobie des matriaux plastiques en milieu aqueux Mthode
par dtermination de la production de biogaz (biodgradation ultime)....................................................... 126
Tableau 47 : Procdures normalises dvaluation de la rsistance des peintures aux agressions fongiques en
chambre sous atmosphre humide contrle (95C)................................................................................... 128
Tableau 48 : Evaluation de la biodgradabilit arobie des matriaux plastiques dans une boue active de station
dpuration deaux uses domestiques........................................................................................................ 129
Tableau 49 : Plastiques - Evaluation de la biodgradabilit anarobie ou de la dsintgration dans des conditions
de digestion anarobie teneur leve en solides Mthode par analyse du biogaz libr pour le suivi de la
biodgradation anarobie ultime. ................................................................................................................ 130
Tableau 50 : Evaluation de la biodgradabilit arobie et de la dsintgration des matriaux plastiques dans des
conditions contrles de compostage - Mthode analyse du dioxyde de carbone libr pour le suivi de la
biodgradation arobie ultime..................................................................................................................... 132
Tableau 51 : Plastiques Dtermination de la biodgradabilit arobie dans le sol par mesure de la demande en
oxygne dans un respiromtre ou de la production de dioxyde de carbone libr (biodgradabilit arobie
ultime). ........................................................................................................................................................ 133

139
Liste des Normes et procdures

Liste de normes sur la
biodgradabilit
(en gris, les normes encore en projet la date indique)
N normes
Date
Rfrence
publication Publication AFNOR
Intitul
Condition
d'application
98/710671 DC 31/07/19
98
New European Standart. Packaging. Requirements

for packaging recoverable through composting and
biodegradation. Test scheme and evaluation criteria
for the final acceptance of packaging.
ASTM D 5210 01/12/19

98
Test method for determining the

anaerobic biodegradation of plastic
materials in the presence of municipal
sewage sludge
Test method for determining the
aerobic biodegradability of degradable
plastic by specific microorganisms
Test method for detemining the aerobic

biodegradation of plastic materials an
activated sludge wastewater treatment
system
Test method for determining aerobic
biodegradation of plastic materials
under controlled composting conditions
ASTM D 5247 01/07/19

92
ASTM D 5271 01/09/19

93
ASTM D 5338 01/08/19

99
ASTM D 5509 01/08/19
96
ASTM D 5511 01/04/19
94
Nature / Objectif
du test
Paramtre
d'valuation
Objet d'application
compostage,
biodgradation
emballages
arobie
biodgradabilit CO2/CH4
plastique
arobie
biodgrababilit
Mw, MP
(molecular
weight,
mechanica
l
properties)
plastique
arobie
biodgradabilit
O2
plastique
arobie
compostage
CO2
plastique
Practice for exposing plastics to a simulated compost compostage

environment
Test method for determining anaerobic anarobie
biodgradabilit
under high-solids anaerobic-digestion
conditions
Practice for exposing plastics to a simulated compost compostage
environment using an externally heather reactor
plastique
ASTM D 5526 01/11/19

94
Test method for determining anaerobic anarobic

under accelerated landfill conditions
biodgradabilit
plastique
ASTM D 5988 01/09/19

96
Test method for determining aerobic

biodegradation in soil of plastic
materials or residual plastic materials
after composting
biodgradation dans les

sols
plastique
ASTM D 6003 01/02/19

97
Test method for determining weight loss from plastic compostage

materials exposed to simulated municipal solid waste
(MSW) aerobic compost environment
plastique
ASTM D5209 01/09/19

92
Standart Test Method for Determining

the Aerobic Biodegradation of Plastic
Materials in the Presence of Municipal
Sewage Sludge
biodgradabilit
plastique
ASTM D5210
Standart Test Method for Determining anarobie

the Anaerobic Biodegradation of Plastic
Materials in the Presence of Municipal
Sewage Sludge
biodgradabilit
plastique
ASTM D 5512 01/08/19

96
1992
arobie
arobie
ASTM E 1196 01/12/19

92
Test method for determining the anarobie

anaerobic biodegradation potential of
organic chemicals
ASTM D 5929 01/05/19

96
ASTM D 5975 01/10/19
96
Standart test method for determining biodegradability compostage

of materials exposed to municipal solid waste
composting conditions by compost respirometry
Test method for determining the stability of compost compostage
by measuring oxygen consumption
ASTM E 1279
Test method for biodegradation by a shake-flask die-away method
CEN ENV
12920
1989
plastique
plastique
produits chimiques
organiques
11/1997 XP ENV 12920 Caractrisation des dchets. Mthodologie pour la dtermination du comportement la lixiviation
d'un dchet dans des conditions spcifies
(06/1998)
indice de

140
classement
X 30-421
N normes
Date
Rfrence
Intitul
Condition
d'application
Nature / Objectif
du test
Paramtre
d'valuation
Objet d'application
CEN TC 249 28/03/20

WG 9 N 39
01
Plastics. Evaluation of (bio?)degradability in soil. Test scheme for final

acceptance and specifications
plastique
CEN TC 249
WG 9 N29
Plastics. Evaluation of compostability.

arobie
compostage
Test scheme for final acceptance and
specifications
Plastics. Evaluation of anaerobic anarobie
treatability. Test scheme for final
acceptance and specifications
Pastics. Terminology in the field of degradable and biodegradable Polymers and
Plastics
plastique
10/11/20
00
CEN TC 249 WG 9 N38
CEN TC 249 WG 9 N40

CSA Z 218-0
(Canada)
EN 13193
EN 13427
EN 13432
EN ISO 846
FD ISO/TR
15462
1993
Test method for determining the anarobie

anaerobic biodegradability of plastic
materials
01/05/20 NF EN 13193 Emballage. Emballage et environnement. Terminologie
00
(01/08/2000)
indice de
classement
H 60-000
01/09/20 NF EN 13427
00
(01/11/2000)
indice de
classement
H 60-005
01/09/20 NF EN 13432
00
(01/11/2000)
indice de
classement
H 60-140
15/01/19
94
NF EN ISO
10707
(01/04/1998)
indice de
classement
T 90-321
ISO
10708:1997
01/01/19
97
ISO 11733
15/12/19
95
NF EN ISO
11733
(01/11/1998)
ISO 11734
14/12/19
95
NF EN ISO
11734
(01/11/1998)
ISO
14593:1999
15/03/19
99
plastique
plastique
emballages
Emballage et environnement. Exigences relatives l'utilisation des normes

europennes dans le domaine de l'emballage et des dchets d'emballage
emballages
Emballage. Exigences relatives aux emballages compostage

valorisables par compostage et biodgradation.
Programme d'essai et critres d'valuation de
l'acceptation finale des emballages
emballages
01/06/19 NF EN ISO Plastics. Evaluation of the action of microorganisms

97
846 (01/08/97)
indice de
classement
T 51-022
1997
Qualit de l'eau. Slection des essais de
biodgradabilit
ISO 10707
biodgradabilit
plastique
Qualit de l'eau. Evaluation en milieu

aqueux de la biodgradabilit arobie
"ultime" des composs organiques.
Mthode par analyse de la demande
biochimique en oxygne (essai en fiole
ferme)
ultime des composs organiques.
Dtermination
de
la
demande
biochimique en oxygne en fiole
ferme deux phases.
Qualit de l'eau. Evaluation de
l'limination et de la biodgradabilit
des composs organiques en un milieu
aqueux. Essai de simulation des boues
actives.
biodgradabilit
arobie
milieu
aqueux
biodgradabili
t ultime
DBO
composs
organiques
arobie
milieu
aqueux
biodgradabilit
ultime
DBO
composs
organiques
milieux
aqueux
Qualit de l'eau. Evaluation de la anarobie

biodgradabilit anarobie "ultime" des
composs organiques dans les boues
de digesteurs. Mthode par mesure de
la production de biogaz
arobie
milieu
aqueux
ultime des composs organiques.
Mthode par analyse du carbone
inorganique
dans
les
rcipients
hermtiquement clos (essai au dioxyde
de carbone dans l'espace de tte)
plastique
limination
biodgradabilit
biodgradabili
t ultime
biogaz
libr
biodgradabilit analyse du
ultime
carbone
inorganique
composs
organiques
composs
organiques
composs
organiques
141
N normes
Date
Rfrence
Intitul
Condition
d'application
Nature / Objectif
du test
Paramtre
d'valuation
Objet d'application
ISO 7827
14/09/19
94
NF EN ISO
7827
(01/02/1996)
indice de
classement
T 90-312
Qualit de l'eau. Evaluation, en milieu

aqueux, de la biodgradabilit arobie
Mthode par analyse du carbone
organique dissous (COD)
arobie
milieu
aqueux
biodgradabilit
ultime
analyse
COD
composs
organiques
ISO 9408
01/08/19
99
NF EN ISO
9408
(01/10/1999)
indice de
classement
T 90-309
NF EN ISO
9439
(01/09/2000)
indice de
classement
T 90-306

Mthode par dtermination de la
demande en oxygne dans un
respiromtre ferm
Qualit de l'eau. Evaluation de la
biodgradabilit arobie ultime en
milieu
aqueux
des
composs
organiques. Essai de dgagement de
dioxyde de carbone
arobie
milieu
aqueux
biodgradabilit
ultime
demande
O2
composs
organiques
ISO 9439
01/02/19
99
arobie
milieu
aqueux
biodgradation
ultime
CO2 mis
composs
organiques
ISO 9887
30/11/19
92
NF EN ISO
9887
(01/02/1995)
indice de
classement
T 90-314

des composs organiques. Mthode
semi-continue
par
boue
active
(Mthode SCAS)
arobie
milieu
aqueux
biodgradabilit
SCAS
composs
organiques
ISO 9888
01/06/19
99
NF EN ISO
9888
(01/09/1999)
indice de
classement
T 90-316

des composs organiques. Essai
statique. Mthode Zahn-Wellens
arobie
milieu
aqueux
biodgradabilit
ZahnWellens
composs
organiques
Evaluation de la biodgradabilit
arobie des composs organiques
prsents en faibles concentrations.
Partie 1: essai par agitation de lots de
flacons avec des eaux de surface ou
des
suspensions
eaux
de
surface/sdiments
biodgradabilit arobie des composs
organiques
prsents
en
faibles
concentrations. Partie 2 : Modle de
cours d'eau courant continu avec
biomasse associe
Qualit de l'eau. Lignes directrices pour
la prparation et le traitement de
composs organiques peu solubles
dans l'eau en vue de l'valuation de
leur biodgradabilit en milieu aqueux
arobie
milieu
aqueux
biodgradabilit
composs
organiques
arobie
milieu
aqueux
biodgradabilit
composs
organiques
milieux
aqueux
biodgradabilit
composs
organiques peu
solubles
Dtermination de la biodgradabilit
ultime des matriaux plastiques dans
un milieu aqueux. Mthode par
dtermination de la demande en
oxygne dans une enceinte ferme
arobie ultime des matriaux plastiques
dans un milieu aqueux. Mthode par
analyse du dioxyde de carbone mis
arobie ultime et dsintgration des
matires
plastiques
dans
des
conditions de compostage contrles.
Mthode par analyse du dioxyde de
carbone mis. Amendement en projet :
utilisation d'un lit minral la place d'un
compost nature
milieux
aqueux
biodgradabilit
ultime
demande
O2
plastique
arobie
milieu
aqueux
biodgradation
ultime
CO2 mis
plastique
arobie
biodgradation
ultime
compostage
CO2 mis
plastique
arobie
compostage
ISO/DIS 14592-1
ISO/DIS 14592-2
ISO 10634
15/08/19
95
ISO 14851
15/05/19
99
ISO 14852
15/05/19
99
ISO 14855
15/05/19
99
ISO 15986
NF EN ISO
10634
(01/01/1995)
indice de
classement
T 90-313
(cite dans ISO/DIS Plastiques. Evaluation de l'aptitude au

16929)
compostage.
Plan
d'essai
pour
l'acceptation finale

plastique
142
N normes
Date
Rfrence
ISO 17556 (DIS 2)
ISO/CD 14854 24/03/19

95
ISO/CD 20200
ISO/DIS 14853
02/04/2001
1999
ISO/DIS 15985
Intitul
Condition
d'application
Nature / Objectif
du test
Paramtre
d'valuation
Objet d'application
Plastics. Determination of the ultimate

aerobie biodegradability of plastic
materials in soil by measuring the
oxygen demand in a repirometer or the
amount of carbon dioxyde evolved
arobie
biodgradabilit
ultime
demande
O2 CO2
mis
plastique
biodgradabilit demande
Plastiques. Evaluation en milieu
arobie
ultime
aqueux de la biodgradation arobie
milieu
02,
aqueux
ultime des matriaux plastiques.
production
Mthode par dtermination de la
biomasse,
COD
demande en oxygne et de la
production de biomasse et carbone
organique
dissous,
dans
un
respiromtre ferm
Plastics. Determination of the disintegration of plastic compostage
materials under simulated composting conditions in a
laboratory-scale test.
Plastiques.
Evaluation
de
la anarobie biodgradabilit
biogaz
ultime
libr
biodgradabilit anarobie ultime en
milieu
aqueux
milieu
aqueux.
Mthode
par
dtermination de la production de
biogaz
plastique
NF EN 13193
(01/08/2000)
indice de
classement
H 60-044
Plastiques.
Evaluation
de
la anarobie
biodgradabilit anarobie ultime et de
la dsintgration dans des conditions
de digestion anarobie teneur leve
en solides. Mthode par analyse du
biogaz libr.
ISO/DIS 16929
Plastiques.
Dtermination
de
la
arobie
dsintgration des matriaux plastiques
dans des conditions de compostage
dfinies lors d'un essai chelle pilote
ISO 11266
01/10/19 NF ISO 11266 Qualit du sol. Lignes directrices
arobie
94
(01/04/1997) relatives aux essais en laboratoire pour
indice de
la
biodgradation
de
produits
classement chimiques organiques dans le sol sous
X 31-220
conditions arobies.
ISO 14239
01/06/19
97
Qualit du sol. Mthode de mesure de

arobie
la minralisation de produits chimiques
organiques dans le sol sous conditions
arobies, au moyen de systmes
d'incubation de laboratoire
Soil quality. Guidance on laboratory anarobie
testing for biodegradation of organic
chemicals in soil under anaerobic
conditions
Emballage.
Evaluation
de
la
arobie
biodgradabilit arobie ultime et de la
dsintgration
des
matriaux
d'emballage dans des conditions
contrles de compostage. Mthode
par analyse du dioxyde de carbone
libr
Qualit du sol. Evaluation de la
arobie
biodgradabilit arobie ultime, dans
les sols, de composs organiques.
Mthode par dosage du dioxyde de
carbone dgag
ISO/DIS 15473 12/1999
NF EN 14046:2001
NF oct 2000
biodgradabilit
ultime,
dsintgration
biogaz
libr
compostage
plastique
plastique
plastique
plastique
produits chimiques
organiques dans
les sols
minralisation
produits chimiques
organiques dans
les sols
produits chimiques
organiques dans
les sols
biodgradabilit CO2 mis
ultime,
dsintgration,
compostage
biodgradation
ultime
CO2 mis
emballages
composs
organiques dans
les sols
WI 261 074
Evaluation of the disintgration of packaging compostage

materials in practical oriented tests under defined
composting conditions
plastique
WI 261 085
Evaluation of the ultimate aerobic biodegradability compostage

and disintegradation of packaging materials under
controlled composting conditions. Method by analysis
of released carbon dioxyde
plastique
01/08/19
77
NF
indice de
classement
T 90-302
Essais des eaux. Mthode d'valuation

en milieu aqueux de la biodgradabilit
dite "totale" des produits organiques

milieux
aqueux
biodgradabilit totale
composs
organiques
143
N normes
Date
Rfrence
Intitul
Condition
d'application
Nature / Objectif
du test
Paramtre
d'valuation
Objet d'application
NF
indice de
classement
T 90-309

biodgradabilit arobie ultime des
composs organiques en milieu aqueux
par dtermination de la demande en
oxygne dans un respiromtre ferm
arobie
milieu
aqueux
biodgradabilit
ultime
demande
02
composs
organiques
EN 1899-1
NF EN 1899-1
(01/05/1998)
indice de
classement
T 90-103-1
Qualit de l'eau. Dtermination de la

demande biochimique en oxygne
aprs n jours (DBOn). Partie 1:
mthode
par
dilution
et
ensemencement avec apport d'allyl
thio-ure
dilu
DBOn
EN 1899-2
01/03/19 NF EN 1899-2
98
(01/05/1998)
indice de
classement
T 90-013-2
Qualit de l'eau. Dtermination de la

demande biochimique en oxygne
aprs n jours (DBOn). Partie 2:
mthode pour les chantillons non
dilus
non dilu
DBOn
01/02/19
98
ISO 5663
ISO 6060
ISO 8245
XP T 90-318
1984
NF EN 25663 Qualit de l'eau. Dosage de l'azote Kjekdhal.

(01/01/1994) Mthode aprs minralisation au slnium
indice de
classement
T 90-110
1989
NF
Qualit de l'eau. Dtermination de la DCO
(01/02/2001)
indice de
classement
T 90-101
01/03/19
Qualit de l'eau. Guide pour le dosage du carbone
99
organique total (COT)
1995
1995
NF
indice de
classement
T 90-319
NK
DCO
COT
Essais des eaux. Evaluation en milieu aqueux du

carbone organique dissous biodgradable. Mthode
par bactries en suspension
COD
Essais des eaux. Evaluation en milieu

aqueux du carbone organique dissous
biodgradable (mthode par bactries
fixes)
COD

milieux
aqueux
144
Liste des documents rglementaires

Type
Date
Rfrences
Circulaire
22/02/1973
Directive
15/05/1975
n 75/442/CEE
Loi
15/07/1975
75-633
Intitul
Evacuation et traitement des rsidus urbains
Dchets
Elimination des dchets et rcupration des
JO
20/03/1973
JOCE n L 194 25/07/75
16/07/1975
matriaux
Circulaire
18/05/1977
Service d'limination des dchets des
09/07/1977
mnages
Circulaire
15/07/1981
Intervention du Ministre de l'Agriculture et de
non publi
l'ANRED pour le valorisation des dchets

Circulaire
17/02/1992
DEPPR/SEJ n12-22 Installations classes pour la protection de
l'environnement - Evolution de la
rglementation concernant les dcharges de
classe II
Arrt
18/12/1992
NOR : ENV P 92
50386 A
Stockage de certains dchets industriels
30/03/1993
spciaux ultimes et stabiliss pour les

installations nouvelles
Arrt
18/12/1992
NOR : ENV P 92
50387 A
Stockage de certains dchets industriels
30/03/1993
spciaux ultimes et stabiliss pour les

installations existantes
Loi
02/02/1995
n 95-101
NOR : ENV X
Renforcement de la protection de
l'environnement
9400049L
Arrt
09/09/1997
NOR : ATE 97 60348 Dcharges existantes et nouvelles installations

A
Avis
11/11/1997
02/10/1997
de stockage de dchets mnagers et assimils
NOR : ATE 97 60427 Nomenclature des dchets
11/11/1997
S
Directive
26/04/1999
n 1999/31/CE
Mise en dcharge des dchets
JOCE n L 182 16/07/99

JOCE n L 282 05/11/99
Circulaire
05/01/2000
DPPR/SDPD n 99011
Nomenclature des installations classes,

classement des installations de compostage et
BO MATE n2000/3
02/03/2000
des points d'apport volontaire de dchets

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151

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Aide la dfinition des dchets

Cre en 1989 linitiative du Ministre en charge de lEnvironnement, lassociation RECORD

En Bibliographie, ce document sera cit sous la rfrence :

Etude RECORD n 00-0118/1A

AIDE A LA DEFINITION DES DECHETS DITS BIODEGRADABLES,

R. GOURDON - LAEPSI (INSA de LYON)

Biodgradation, dchet, fermentescibilit, compostage, mthanisation,

Association RE.CO.R.D. Contrat 00-0118/1A

I.3.3- Notions gnrales dcologie microbienne et facteurs dinfluence de la croissance......................... 18

I.4- METABOLISMES ENERGETIQUES ................................................................................................................. 23

I.6.3- Biotransformation de la matire organique....................................................................................... 33

I.6.4- Notion de biodgradabilit de la matire organique ......................................................................... 37

PARTIE II : NOTION DE BIODEGRADATION DANS LE DOMAINE DE LA GESTION ET DU

II.2.3- Dchets municipaux.......................................................................................................................... 43

II.3.3 Traitement biologique anarobie : la mthanisation ......................................................................... 60

II.4. MISE EN CENTRE DENFOUISSEMENT TECHNIQUE (CET).......................................................................... 65

II.4.3.3- Procds de stabilisation/solidification des dchets.................................................................................... 68

PARTIE III : EVALUATION DE LA

III.3.2- Facteurs environnementaux de la biodgradation / biodtrioration / biostabilisation dun dchet

III.3.2.1- Facteurs physico-chimiques ...................................................................................................................... 92

III.4- METHODE DEVALUATION DE LA BIODEGRADATION OU BIODETERIORATION .......................................... 93

III.4.3- Procdures dvaluation de la biodgradabilit ou de la biodtrioration des matriaux........... 116

CONCLUSIONS ET PERSPECTIVES DE LETUDE................................................................................. 135

LISTE DES TABLEAUX ................................................................................................................................. 138

Association RE.CO.R.D. Contrat 00-0118/1A

rduction/limination/stabilisation des dchets solides.

Association RE.CO.R.D. Contrat 00-0118/1A

Partie I : Dfinition gnrale de la biodgradabilit de la

I.2- Biodgradation Biodgradabilit biotransformation

I.3- Micro-organismes, nutrition et cologie microbienne

Eucaryotes ou protistes suprieurs : (algues, protozoaires et champignons). Cellule avec un "vrai"

Procaryotes ou protistes infrieurs (algues bleu-vert ou cyanophycs et bactries). Cellule

ADN plasmidique ( ventuel)

Organe locomoteur : flagelle (ventuel)

Figure 1 : Schma gnral dune bactrie.

Association RE.CO.R.D. Contrat 00-0118/1A

Figure 2 : Schma de la structure filamenteuse des moisissures.

Association RE.CO.R.D. Contrat 00-0118/1A

Figure 3 : Schma dune cellule de levure, Saccharomyces cerevisae.

I.3.2- Nutrition et croissance microbienne

Association RE.CO.R.D. Contrat 00-0118/1A

75% du poids cellulaire,

45-50% du poids sec cellulaire,

5-10% du poids sec cellulaire,

3% du poids sec cellulaire,

1-2% du poids sec cellulaire

Na, K, Mg, Cl,

Rle dans l'quilibre physico-chimique des cellules,

Constituants de certains enzymes et coenzymes (cytochromes, chlorophylles, ).

Ca, Mg, Mn, Cu,

Oligo-lments indispensables sous forme de traces comme cofacteur ou activateur

I.3.2.3- Croissance des micro-organismes

Figure 4: Courbe de croissance d'une culture bactrienne

Durant la phase 2, le nombre dorganismes et la vitesse spcifique de croissance (ou taux de

Au cours de la phase 4, on assiste un puisement du substrat et une accumulation de

Association RE.CO.R.D. Contrat 00-0118/1A

I.3.3- Notions gnrales dcologie microbienne et facteurs dinfluence de la

Association RE.CO.R.D. Contrat 00-0118/1A

I.3.3.2- Facteurs environnementaux

- Organismes psychrophiles : temp. optimale < 1C

Association RE.CO.R.D. Contrat 00-0118/1A

la Substituants gnant la dgradation

Aptitude former ou non des mulsions,