INSTRUMENTAO E CONTROLE

DE BIOPROCESSOS
2
1. Aspectos Gerais
Desenvolvimento eficiente de um bioprocesso
Condies adequadas para o biocatalisador atuar
Objetivos da indstria:
Fazer o processo funcionar com eficincia
Obter produto de alta qualidade
Diminuir custo
Diminuir tempo
Aumentar produo
3
Diminuir tempo
Aumentar produo
Aumentar produtividade
Para se alcanar tais
objetivos preciso
empregar tcnicas
avanadas de controle e
otimizao de processo
Fundamental no
mercado competitivo
4
Para estabelecer as condies adequadas preciso:
MEDIR
ANALISAR
DADOS
CONTROLAR
MEDIR
ANALISAR
DADOS
CONTROLAR
SISTEMA
5
Instrumentos
Dispositivos
Equipamentos
Eletricidade
tica
Mecnica
Eletrnica
Matemtica
Qumica
Fsica
Bioqumica
Biologia
Para os trs casos empregam-se:
6
Qual a principal diferena entre
Medir e Analisar Dados e Controlar?
Obter valores Alterar ou manter valores
No muda
o sistema
Muda o sistema
(No deve mudar o sistema!)
No muda o sistema
7
Medir o que?
Oxignio dissolvido (O.D.)
pH
Conc. de substrato
Conc. de produto
Conc. de clulas
Temperatura
CO
2
Respostas do
biocatalisador
8
Temperatura
Espuma
Massa
Volume
Vazo de gases e lquidos
Presso
Potncia de agitao
Velocidade de agitao
Variveis ou
respostas do
sistema
?
9
Instrumento ou sistema de instrumentao
Possui trs elementos bsicos
1. Detector
2. Dispositivo de transferncia intermedirio
(transdutor)
3. Dispositivo de sada
Dispositivo
de sada
Dispositivo
intermedirio
Detector
10
Aplicaes industriais
Indstrias qumicas
Indstrias do petrleo
Indstrias de Alimentos
Indstrias de papel e celulose
Indstrias de Bioprocessos
11
12
Equipamentos bsicos de medida de um fermentador
padro. F vazo, FO espuma, P presso, RPM velocidade
de agitao (rotaes por minuto), T temperatura, M motor
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Bioprocesso
Qualquer processo que utiliza clulas vivas
ou seus componentes para realizar
mudanas qumicas ou fsicas desejadas.
governado por multifatores, necessitando
de um tratamento multidisciplinar
realizado em biorreatores, de forma a
permitir a obteno de grandes quantidades
do produto de interesse e sem interrupes
14
Grandes quantidades escala industrial
Para isso necessrio realizar o processo
de forma CONTROLADA
Para controlar necessrio MEDIR
Para medir necessrio INSTRUMENTO
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Formas de se medir variveis de bioprocessos:
in situ
in situ com desvio (by-pass)
ex situ
externo (off-line)
Formas de se monitorar um bioprocesso:
-Contnua (on line) (registro contnuo ou descontnuo)
-Descontnua (off line) (com registro descontnuo)
Medida e monitoramento
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Conceitos e definies
Erro: diferena entre valor verdadeiro e valor medido
Os erros podem ser:
Acidentais Devido a causas irregulares, que se
apresentam em grande nmero e so de natureza
complexa. Tem efeito negligencivel no valor da
mdia aritmtica de um conjunto de medies.
17
Sistemticos - influenciam no registro da medida.
Esto geralmente no mesmo sentido.
So da mesma ordem de grandeza.

Causas: erros do instrumento de medio e erros do
operador.
Condio ideal de uma boa instrumentao: todos os
erros reduzidos aos do tipo casual (acidental).
18
Retardamento: Intervalo de tempo entre o instante
em que o sinal gerado e o instante em que o
instrumento indica, registra ou aciona um controle.
Dependendo da durao do retardamento, pode no
haver tempo para a(s) mudana(s) necessria(s),
ocorrendo perda do processo.
Tempo morto: o tempo durante o qual um novo
sinal ou uma variao de um sinal no podem ser
detectados.
Crtico em operaes dinmicas.
O tempo morto de um instrumento no deve exceder
a 10% do retardamento envolvido na medio total.
19
Faixa de medio: Valores inicial e final de medida do
instrumento (por exemplo, 20 a 150
o
C).
Largura da faixa: a diferena entre os valores da
faixa de medio (no exemplo anterior, 130
o
C).

As condies de operao do processo devem ser
bem conhecidas para se possa dimensionar
adequadamente o instrumento, em relao faixa de
medio.
Isso evita o emprego de um instrumento imprprio
ou, por outro lado, o emprego de um instrumento de
capacidade muito acima da necessria.
20
Calibrao: Forma de garantir que os instrumentos
tenham a preciso e a faixa de operao exigidas
para manter sistemas em condies economica-
mente controladas.
Instrumento no calibrado no confivel.
Impossibilidade de calibrao: DEFEITO !!
Tipos de padro
Primrio: unidade de valor absoluto, garantida pelo
INMETRO como estando dentro das especificaes.
Secundrio: obtido por comparao com o padro
primrio ou correspondem a um equipamento que
gera o padro para calibrar outros instrumentos.
Propriedades gerais de um sensor
21
- tima exatido de medida
- Durabilidade
- Facilidade de recalibrao e recondicionamento
- Sensibilidade
- Seletividade
- Resposta rpida
- Estabilidade por longo perodo de trabalho
- Operao contnua
- Insensibilidade a interferentes e outros fatores
ambientais
- Aceitabilidade pelo usurio
- Segurana de uso
- Higiene
- Esterilizao
- Assepsia
- Material de construo
- Insero e remoo
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Requisitos adicionais para sensores de
bioprocessos
SENSORES FSICOS E QUMICOS PARA
MEIOS E GASES
23
Sensores de parmetros fsicos
Temperatura
definida como o grau de agitao trmica das
molculas da matria; uma propriedade intensiva
Pirometria: medio de altas temperaturas, na faixa
em que os efeitos da radiao trmica passam a se
manifestar
Criometria: medio de baixas temperaturas,
normalmente abaixo de zero
Termometria: termo abrangente, que inclui os dois
casos acima
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Transferncia de calor:
Conduo (energia passa de uma molcula a
outra; ocorre em slidos)
Conveco (energia transportada pelas
molculas, ocorre em lquidos e gases)
Irradiao (energia transportada por
ondas eletromagnticas)
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Unidades de temperatura
Celcius (
o
C); Kelvin (K); Fahrenheit (
o
F)
Rankine (
o
R); Reaumr (
o
R)
Escalas

Referncia
Celcius
(
o
C)
Kelvin
(K)
Fahrenheit
(
o
F)
Reaumur
(
o
R)
Rankine
(
o
Ra)
Ebulio
da gua
100 373,15 212 80 671,67
Fuso da
gua
0 273,15 32 0 491,67
Zero
absoluto
- 273,15 0 - 459,67 - 218,52 0
Converso
o
C
o
F 32 K 273,15
o
Ra 491,67
5 9 5 9
= = =
Tipos de termmetros
1. Lquido
1.1. Lquido em vidro
Princpio: expanso volumtrica do lquido
em recipiente de vidro

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Lquido Ponto de
fuso
Ponto de
Ebulio
Faixa de
Uso
Mercrio -39 C +357 -38 / +550
lcool Etlico -115 +78 -100 / +70
Tolueno -92 +110 -80 / +100
Termmetros de lquido (expanso em tubo de vidro)
28
1.2. Lquido em metal
Princpio: expanso volumtrica do lquido
em recipiente metlico



29
Caractersticas
- Tubo de Bourbon
- Grande tempo de resposta
- No recomendvel para controle
30
Termmetro de lquido (expanso em tubo metlico)
31
Mecanismo que emprega tubo de Bourdon.
32
Mecanismo que emprega tubo de Bourdon.
Mecanismo que emprega tubo de Bourdon.
33
34
2. Presso de gs
Princpio: expanso de um gs em
recipiente metlico


Leva em conta o fato de que a variao de
presso linearmente dependente da
temperatura, a volume constante.
Gs mais comum: N
2
Faixa de medio: - 100 a 600
o
C
Suporta presses da ordem de 50 atm
Termmetro de gs
35
36
3. Slidos
3.1. Lmina bimetlica
Princpio: dilatao de metais em funo da
temperatura


Principais ligas: Fe + Ni e lato
Faixa de medio: - 50 a 800
o
C
37
Estrutura de um termmetro de lmina bimetlica.
38
3.2. Termopares
Princpio: efeito termoeltrico
A tenso termoeltrica que ocorre no ponto de compensao
depende do material dos fios termoeltricos e da diferena da
temperatura entre o ponto de medio e o ponto de compensao.
39
Esquema da ligao de um termopar ao instrumento
de medida que indicar uma voltagem proporcional
diferena (T1 - T2).
40
Tipos de termopares
T, J, E, K, S, R, B
Faixa de medio: - 200 a 1600
o
C
Termopares especiais
Faixa de medio: 1600 a 2750
o
C
Diferem em funo dos metais da liga e da
proporo entre eles
41
42
3.3. Termistores
Princpio: variao da resistncia em funo da
temperatura
V = R.i => R = V/i => i = V/R
Resitncia hmica: seu valor numrico
independe da tenso aplicada
Resitncia no hmica: seu valor numrico
depende da tenso aplicada
Semicondutores: materiais que exibem
propriedades de resistncia eltrica a meio
caminho entre os bons condutores e os bons
isolantes.
Apresentam grande coeficiente de variao da
resistncia em funo da temperatura.
Portanto, para uma mesma tenso aplicada (V), a
variao da resistncia (R) resultar uma
variao da corrente (i ).
i =
V
R
Tipos de termistores
NTC: Negative Temperature Coefficient

Sua resistncia diminui acentuadamente com o
aumento da temperatura.
So constitudos de xidos metlicos de nquel,
cobalto ou magnsio ou de sulfeto de ferro.
A curva que define a variao da resistncia em
funo da temperatura tem comportamento
exponencial.
Curvas caractersticas de termistores NTC com faixas de medio de
temperatura distintas.
PTC: Positive Temperature Coefficient

Sua resistncia aumenta com o aumento da
temperatura.
Somente a partir de uma determinada temperatura
exibe uma variao hmica da resistncia com a
variao da temperatura.
So mais sensveis que os termistores NTC.
So constitudos de material cermico base de
titanato de brio.

Termistor tipo PTC.
Diferentes estruturas de termistores.
Perfil caracterstico da variao da resistncia em funo
da temperatura para os termistores NTC e PTC.
- Tambm chamados RTD (Resistance Temperature Detector)
- Alta estabilidade mecnica e trmica
- Resistncia contaminao
- Baixo ndice de desvio pelo envelhecimento e tempo de uso
- So feitos de metais semicondutores (platina, cobre ou nquel)
- Faixa de temperatura 270 a 660
o
C
- necessrio que todo o corpo do bulbo esteja com a
temperatura equilibrada para fazer a indicao corretamente
- A medio feita normalmente por ligao a um circuito de
medio tipo ponte de Wheatstone
50
3.4. Termorresistores
Princpio: variao da resistncia em funo da
temperatura
Esquema geral de um termorresistor.
51
Diferentes tipos de termorresistores.
52
- Utilizado para medir altas temperaturas (como alto-fornos)
- Baseado no princpio da lei de Planck, que prev o fluxo
radiante de energia por unidade de rea de um corpo negro
em funo da temperatura
-Esse princpio vale para todas as substncias que podem
emitir luz ao se tornarem incandescentes
-Seu funcionamento se d por comparao da cor de um
objeto incandescente com a cor de um filamento interno do
aparelho
- A temperatura final medida depende muito da capacidade de
comparao do operador
4. Sensores de radiao
4.1. Pirmetro ptico
Princpio: emisso de energia radiante em funo da
temperatura


Esquema geral de um pirmetro ptico.
54
55
Esquema geral de um pirmetro ptico.
- Faixa de temperatura: - 20 a 1000
o
C
- Ideal para medir temperatura de superfcies
- Leitura digital

56
4.2. Termmetro de infra-vermelho
Princpio: emisso de energia radiante em funo
da temperatura
Caminhos da energia relacionados a um
determinado corpo (item testado).
57
Esquema geral de um termmetro de infra-
vermelho.
58
Alguns modelos de termmetro de infra-vermelho.
59
Medio e controle de temperatura em bioprocessos:

- Termmetros de expanso de lquido (laboratrio)
- Termopares
- Termorresistores
- Termistores (mais precisos)
Finalidades:
-Controle da temperatura do meio de fermentao
-Controle da temperatura durante a esterilizao
-Controle da temperatura ambiente
-Controle da temperatura para conservao de
matrias-primas e suplementos de meios
-Controle da temperatura durante processos de
recuperao de produtos
Potncia
Biorreatores agitados mecanicamente
1. Wattmetro de efeito Hall
Princpio de funcionamento
Gerao de um campo eltrico durante a passagem de uma
corrente num condutor submetido a um campo magntico
Mede no motor o total de energia eltrica consumida pelo
agitador
Esquema bsico de um instrumento eletrodinmico.
Esquema bsico de ligao de um wattmetro.
Imagem de um medidor de tenso tico.
2. Medidor de tenso tico
Outra forma de se estimar a potncia (P)
transmitida por clculo:
P = M
N
.2.N
Onde:
M
N
corresponde ao torque no eixo
N velocidade de rotao da turbina
3. Clculo a partir do torque e da velocidade do eixo
Sensor eltrico de grande versatilidade e preciso
Empregado na extensometria, tcnica para anlise
experimental das tenses e deformaes em estruturas
mecnicas e de alvenaria
Trata-se de um sensor eltrico cujo princpio de
funcionamento a variao da resistncia do material
quando submetido a uma deformao
Consta essencialmente de uma grade metlica sensvel,
ligada a uma base que se cola pea ou estrutura que se
deseja monitorar
Nas extremidades do fio sensvel esto soldados dois
outros de maior dimetro que constituem o elemento de
ligao do extensmetro ao circuito de medio (ponte de
Wheatstone)
4. Extensmetro eltrico de resistncia

Esquema geral de um extensmetro
(strain gage) de fio (a) e de lmina (b).

a
b
Extensmetro de Resistncia Eltrica
instalado para medir deformao.

Sistema de Medio de Torque por Telemetria de
Tamanho Compacto empregando o Extensmetro
de Resistncia Eltrica (strain gage).

Medio e controle de potncia em bioprocessos:

Wattmetro
Medidor de tenso (strain gauges)
Finalidades:
- Manter homogeneidade do meio
- Fundamental para estudos de transferncia de oxignio
- Aplicvel aos estudos de ampliao de escala
Desvantagens do emprego do wattmetro:
Perda de potncia por frico em rolamentos, selos
mecnicos e motor.
Tais diferenas no ocorrem quando a medida
feita com o medidor de tenso pois o sinal de
medida no afetado por frico em selos e
rolamentos.
O medidor de tenso montado dentro do reator no
eixo da turbina.
Exemplo
Um estudo com um fermentador de 270 litros com 200
litros de meio (volume til) revelou uma perda, no eixo
da turbina, de 30% da energia usada pelo motor.
Observou-se que a perda foi maior, quanto maior a
velocidade de agitao.
Velocidade de agitao
Tacmetros

- Tipo gerador
Gera uma corrente eltrica proporcional ao nmero
de rotaes

- Eletrnico
Gera uma corrente alternada que convertida em
corrente contnua
um dispositivo eletromecnico
Chamado tacmetro CC
Esquema de um tacmetro CC.
Princpio:
O aumento da velocidade do eixo acarreta um aumento
de tenso e um comutador converte esta tenso de
corrente alternada em corrente contnua.
- tico
Princpio
Sinais luminosos intermitentes gravados por uma fotoclula
Os sinais chegam fotoclula aps atingirem o papel refletor
Imagem de um tacmetro tico e de contato.
Medio e controle de velocidade de agitao em
bioprocessos:

Tacmetro CC
Tacmetro tico
Finalidades:
- Manter homogeneidade do meio
- Controle do oxignio dissolvido no meio
- Fundamental para estudos de transferncia de oxignio
- Aplicvel aos estudos de ampliao de escala
- Clculo da velocidade da extremidade do impelidor (ND
i
)
para estudos de transferncia de oxignio e ampliao de
escala

Vazo
Vazo de gases e de lquidos
Fluxmetro de corpo flutuante ou Rotmetro
Princpio de funcionamento
Fluxo ascendente do fluido exerce uma fora de
levantamento sobre um corpo flutuante (esfera, cone ou
cilindro).
A fora de levantamento produzida pela diferena de
presso ao longo da cavidade entre o corpo e a parede do
tubo. Assim, a posio do corpo flutuante ser uma funo
da vazo do fluido.
H necessidade de calibrao em condies definidas.
Esquema bsico de um fluxmetro de corpo flutuante
(rotmetro): a coluna cnica, b corpo flutuante.
a
b
Obs.: A posio do flutuador pode ser convertida em sinal
eltrico gerando medidas de vazo em linha.
Alguns tipos de flutuadores com indicao da
posio a ser considerada na leitura da vazo.
Linha de
leitura
Fluxmetro de presso diferencial
Princpio de funcionamento
Queda de presso causada por uma restrio artificial no
tubo onde escoa o fluido
Existem 3 tipos principais:
Tubo de Venturi
Restrio por agulha
Restrio por orifcio
Utilizando-se transdutores de presso possvel obter-
se uma medida de vazo em linha.
Esquema geral dos principais fluxmetros de presso
diferencial: (a) Restrio tipo Venturi; (b) Restrio tipo
agulha; (c) Restrio tipo placa de orifcio.
Esquema de um fluxmetro de presso diferencial tipo
Venturi.
Exemplo de placa de orifcio.
Fluxmetro de rotao ou de turbina
Princpio de funcionamento
Transferncia da energia do fluxo para um corpo rotativo,
sendo a velocidade de rotao proporcional vazo.
O impacto do fluxo pode ser tangencial ou radial
Os dois tipos so empregados para lquidos, enquanto que
para gases somente os tangenciais so empregados.
Os fluxmetros do tipo radial podem ser de linha ou de
insero
Esquema de um fluxmetro de linha do tipo impacto
tangencial.
Foto de um fluxmetro de insero do tipo impacto
tangencial.
Foto de um fluxmetro de insero do tipo impacto radial.
Circulao do fluxo
Entrada Sada
Registrador
(a)
Fluxo
P reta P angulada
Haste
(b)
Esquema de fluxmetros de impacto radial
(a) de medio em linha e (b) de insero.
Medidor trmico de vazo mssica
Princpio de funcionamento
Quantidade de calor (energia) necessrio para manter
constante a temperatura de um fluido.
Estabelece-se uma relao linear entre a vazo e a relao
calor gerado/diferena de temperaturas.
A vazo calculada por um circuito eletrnico e pr-ajustada
com um gs de calibrao.
Como as medidas necessrias (calor e temperatura) so
facilmente convertidas em sinais eltricos, pode-se dispor de
uma medida de vazo em linha.
O medidor pode ser acoplado a um controlador.
Fluxmetro eletromagntico
Princpio de funcionamento
Induo de uma voltagem entre dois eletrodos pela
passagem de um lquido condutor com um fluxo
perpendicular a eles.
A voltagem proporcional velocidade do fluxo (vazo).
A voltagem amplificada em um conversor que fornece um
sinal de corrente linear em funo da vazo.
No requer instalao de partes que possam causar
restrio passagem do fluido.
No h perda de presso em decorrncia da presena do
dispositivo de medida.
Esquema geral de um fluxmetro eletromagntico.
Foto de um fluxmetro eletromagntico.
Foto de um fluxmetro eletromagntico.
Foto de um fluxmetro eletromagntico
instalado em tubulao.
Restries do fluxmetro eletromagntico: O fludo deve ser
condutor e no podem haver bolhas de ar.
Fluxmetro de palheta mvel
Princpio de funcionamento
Transferncia da energia do fluxo para a superfcie de uma
palheta presa a uma haste articulada.
O ngulo da palheta fornece a medida da velocidade do
fluxo (vazo).
Desenho de um fluxmetro de palheta mvel.
Outros medidores

Fluxmetro de Deslocamento Positivo
Fluxmetros Ultrassnicos
Fluxmetros por Efeito Vortex
Fluxmetro por efeito Coriolis
Fluxmetro por fora de arraste
Esquema de um fluxmetro de deslocamento
positivo.
Esquema de um fluxmetro de deslocamento
positivo.
Medio e controle de vazo em bioprocessos:

Rotmetros
Medidor trmico de vazo mssica
Fluxmetro eletromagntico
Fluxmetro de presso diferencial
Fluxmetro de rotao
Finalidades:
- Transferncia de meios
- Fundamental para a realizao de sistemas contnuo e
descontnuo alimentado
- Ajuste de aerao e controle de oxignio dissolvido
- Adio de cidos, bases e antiespumantes
- Medio de gs como produto da fermentao
- Esterilizao contnua

Medida de nvel
Trs tipos:
Medio direta
Medio indireta
Medio descontnua
- Consiste em uma rgua graduada
que tem um comprimento conve-
niente para ser introduzida dentro
do reservatrio a ser medido
- A determinao do nvel feita
pela leitura direta do comprimento
molhado na rgua pelo lquido.
Mtodos diretos
Rgua
Visor de nvel
- Usa o princpio dos vasos
comunicantes
- O nvel observado por um
visor de vidro especial,
podendo haver uma escala
especial acompanhando o
visor
- Usado para tanques abertos
e tanques fechados
Bia ou flutuador
- Consiste numa bia presa a um cabo que
tem sua extremidade ligada a um contrapeso
- No contrapeso est um ponteiro que indica
diretamente o nvel em uma escala
- Normalmente usado em tanques abertos
Esquema de um medidor de nvel tipo bia.
Mtodos indiretos
Medidor de nvel por presso hidrosttica
Neste tipo de medio usa-se a presso exercida pela
altura da coluna lquida, para medir indiretamente o nvel,
de acordo com o Teorema de Stevin: P = h .
Onde: P = Presso em mm H
2
O ou polegada H
2
O;
h = nvel em mm ou em polegadas;
= densidade relativa do lquido na temperatura ambiente
Essa tcnica permite que a medio seja feita
independente do formato do tanque.
Esquema de um medidor de nvel por
presso hidrosttica.
Com o sistema de borbulhador pode-se detectar o
nvel de lquidos viscosos, corrosivos, bem como de
quaisquer lquidos, distncia.
Sistema borbulhador
Nota-se que o medidor pode ser instalado distncia.
O sistema borbulhador engloba uma vlvula agulha,
um recipiente com o lquido pelo qual o ar ou gs
passar e um indicador de presso.
No momento que comea o borbulhamento, com a
injeo de ar ou gs inerte, a presso aplicada
exatamente igual presso exercida pela coluna
lquida. Esta presso diretamente proporcional ao
nvel do lquido.
Esquema de um medidor de nvel por
borbulhamento.
Mede a capacitncia formada pelo eletrodo
submergido no lquido em relao s paredes do
tanque.
Medidor Capacitivo por contato
medida que o nvel do tanque aumenta o valor
da capacitncia aumenta progressivamente, pois
o dieltrico ar substitudo pelo dieltrico lquido
a medir.
A capacitncia convertida por um circuito
eletrnico numa corrente eltrica, sendo este
sinal indicado em um medidor.
Esquema de um medidor de nvel por
capacitncia de contato.
Verso moderna de um sensor de
nvel capacitivo com haste sensora.
A medio de nvel por capacitncia tambm
pode ser feita sem contato, por meio de sondas
de proximidade.
A sonda consiste de um disco compondo uma das
placas do capacitor. A outra placa a prpria
superfcie do produto ou a base do tanque.
Medidor Capacitivo distncia
Esquema de um medidor de nvel por
capacitncia sem contato.
A velocidade do som a base para a medio
atravs da tcnica de eco, usada nos
dispositivos ultra-snicos.
Ultra-som
As sondas so feitas com material piezoeltrico,
que tm a capacidade de produzir uma
frequncia quando submetidos a uma tenso
eltrica, assim como gerar uma tenso eltrica
quando recebem um sinal de frequncia.
Esquema de um medidor de nvel por
ultrassom.
Radiao
Ideal para materiais de manuseio extremamente
difcil e corrosivos, abrasivos, muito quentes, sob
presses elevadas ou de alta viscosidade.
Consiste em uma emissor de raios gama
montado verticalmente na lateral do tanque e
uma cmara de ionizao do outro lado do
tanque, a qual transforma a radiao Gama
recebida em um sinal eltrico de corrente
contnua (contador Geiser).
Esquema de um medidor de nvel por radiao.
- A distncia entre a antena e a superfcie a ser
medida ser ento calculada em funo do tempo
de atraso entre a emisso e a recepo do sinal.
- Antena cnica que emite impulsos eletromagn-
ticos de alta frequncia sobre a superfcie do meio
Radar
- Serve para lquidos e slidos em geral.
- Grande vantagem em relao ao ultrassnico
a imunidade a efeitos provocados por gases, p,
e espuma entre a superfcie e o detector, porm
possuem um custo relativo alto.
Outros:
Presso diferencial em tanques pressurizados
- Elevao de zero
- Supresso de zero

Empuxo
-Adequado para medir nvel da interface entre
dois lquidos no missveis

Mtodos descontnuos
Fornecem indicao apenas quando o nvel atinge
certos pontos desejados, como por exemplo, em
sistemas de alarme e segurana de nvel alto ou baixo.
Nos lquidos que conduzem eletricidade, pode-se
mergulhar eletrodos metlicos de comprimento
diferente ou em alturas diferentes. Quando houver
conduo entre os eletrodos teremos a indicao de
que o nvel atingiu a altura do ltimo eletrodo
alcanado pelo lquido.
Para lquidos no condutores pode-se utilizar o
sistema de bias.
Esquema de um medidor de nvel descontnuo
por condutividade.
Esquema de um medidor de nvel descontnuo
com sistema de bias.
Medida de nvel em bioprocessos
Transferncia de meio entre tanques
Controle auxiliar em sistema descontnuo alimentado
Controle auxiliar em sistema contnuo
Viscosidade
A viscosidade corresponde resistncia de um
lquido em fluir (escoar) por uma superfcie ou duto.
No est diretamente relacionada com a densidade
do lquido, que a relao massa/volume.
Por exemplo, o leo de soja utilizado para cozinhar
mais viscoso que a gua, embora seja menos denso
que esta.
Classificao dos viscosmetros
1. Viscosmetro de escoamento do lquido
2. Viscosmetro de cisalhamento (corpo imerso)
1.1 Viscosmetro de orifcio (Copo Ford)
A viscosidade medida pelo tempo que um volume
fixo de lquido gasta para escoar atravs de um orifcio.
Normalmente empregado para determinar viscosidade
de tintas, adesivos, leos lubrificantes, etc.
O copo Ford fornecido com um conjunto de orifcios-
padro feitos de bronze polido.
Os orifcios de nmero 2, 3 e 4 so utilizados para
medir lquidos de baixa viscosidade, na faixa de 20 a
310 centistokes.
Os de nmero 5, 6, 7 e 8 so usados para lquidos de
viscosidade superior a 310 cst.
Imagem de um viscosmetro de orifcio ou de
copo.
Imagem de um viscosmetro de orifcio com
adaptadores de diferentes dimetros de orifcio.
1.2 Viscosmetro capilar
A viscosidade medida pela velocidade de escoamento
do lquido atravs de um tubo capilar de vidro.

1
. t
1

2
. t
2
=

1
a viscosidade do lquido em teste

2
a viscosidade do lquido referncia

1
a densidade do lquido em teste

2
a densidade do lquido referncia
t
1
o tempo de escoamento do lquido em teste
t
2
o tempo de escoamento do lquido referncia

A viscosidade obtida
pela expresso:
onde:
Imagem de um viscosmetro capilar
tipo Cannon-Fenske.
Algumas concepes do viscosmetro de escoamento capilar.
2.1 Viscosmetro de esfera
A viscosidade medida pela velocidade de queda de
uma esfera dentro de um lquido colocado em um
cilindro vertical de vidro.















g, D,
s
,
f
e V so,
respectivamente, a acelerao da
gravidade, o dimetro da esfera, a
densidade da esfera, a densidade
do fluido e a velocidade terminal
de queda livre.
Imagens de viscosmetros de esfera.
2.2 Viscosmetro rotacional
A viscosidade medida pela velocidade angular de uma
parte mvel separada de uma parte fixa pelo lquido.
A parte fixa , em geral, a parede do prprio recipiente
cilndrico onde est o lquido.
A parte mvel pode ser no formato de palhetas ou um
cilindro.
Imagem de um viscosmetro rotacional.
Parte fixa
(recipiente)
Parte mvel
(cilindro)
Imagem de um
viscosmetro
rotacional.
Parte fixa
(recipiente)
Parte mvel
(cilindro)
Diferentes cilindros (de acordo
com a viscosidade do lquido)
?
2.3 Viscosmetro de ressonncia
praticamente um sensor de viscosidade.
Constitui um medidor de viscosidade em linha.
A parte ativa do sensor uma haste de vibrao, a qual
mantida em oscilao em sua frequncia de ressonncia por
uma tenso eltrica constante.
A amplitude da vibrao varia de acordo com a viscosidade
do produto em que a haste est imersa.
Faixa de medio de 0,1-10 mPa.s a 1000-1.000.000 mPa.s
Imagem de um viscosmetro de ressonncia.
Detalhe da haste vibratria
?
Imagem de um viscosmetro de ressonncia com
dispositivo de leitura.
Viscosmetro capilar de linha
Empregado para se determinar a viscosidade de
lquidos em escoamento em regime laminar e hidro-
dinamicamente desenvolvido.















Q, L, P e D so, respectivamente,
a vazo volumtrica, a distncia
entre as tomadas de presso, a
diferena de presso e o dimetro
do tubo capilar.
Medio de viscosidade em
bioprocessos
Parmetro utilizado em clculo de dimensionamento
de tubo de espera de esterilizador contnuo
Parmetro utilizado em clculo de dimensionamento
de centrfugas para separao de clulas
Parmetro utilizado para a determinao de
caracte-rsticas fluido-dinmicas de meios
(importncia em transmisso de potncia e agitao
e aerao de meios de fermentao)
Parmetro utilizado em dimensionamento de
tubulaes e bombas para transferncia de meios
Medida utilizada para caracterizar formao de
produtos em meios de fermentao (polmeros, p.e.)
- Viscosmetro rotacional
Presso
Corresponde a uma das medidas mais
importantes na indstria
Os princpios usados tambm so aplicados s
medidas de temperatura, nvel e vazo de
lquidos
Princpios, leis e teoremas envolvidos
1. Lei da conservao da energia (Teorema de Bernoulli)
2. Teorema de Stevin (altura da coluna de lquido)
3. Teorema de Pascal (transmisso de fora em um fluido
sob presso)
4. Equao manomtrica (relao entre presso e altura
de colunas de lquido)
Esquema ilustrativo do teorema de
Bernoulli.
Teorema de Stevin: relaciona a presso esttica
de um fluido em repouso com a altura da coluna
deste.
P
A
= P
atm
+ d.g.h
P
atm

Lquido de
densidade d
Esquema para ilustrao do Teorema de
Pascal (transmisso de fora em um fluido
sob presso).

Esquema ilustrativo para deduo da
equao manomtrica (relao entre
presso e altura de colunas de lquido).
Tipos de presses medidas
Presso absoluta (presso atmosfrica +
presso manomtrica)
Presso manomtrica (presso acima da
presso atmosfrica)
Presso baromtrica (presso atmosfrica)
Presso diferencial (diferena de presso entre
dois pontos)
Referenciais de presso.
Algumas unidades de presso
Tipo de Manmetro Elemento de recepo
Manmetro de lquido Tubo em U
Tubo reto
Tubo inclinado
Manmetro elstico Tubo de Bourbon (C, espiral e
helicoidal)
Fole
Diafragma
Cpsula
Medio de presso por manomtrica
A. Manmetros de lquido
Lquidos mais empregados: mercrio e gua
Construo: Basicamente constitudo por
tubo de vidro com rea seccional uniforme,
uma escala graduada e um lquido de
enchimento, tudo suportado por uma estrutura
de sustentao.
Referencial para leitura de menisco de
mercrio e de gua.
A1. Manmetro tipo coluna em U
A leitura pode ser feita simplesmente medindo-se o
deslocamento do lado de baixa presso a partir do
mesmo nvel do lado de alta presso, tomando como
referncia o zero da escala.
A faixa de medio de aproximadamente 0 ~ 2000
mmH
2
O/mmHg.
Foto de um manmetro de tubo em
U.
A2. Manmetro tipo coluna reta vertical
Superfcie do lquido
quando P
1
=P
2
h
2
h
1
l
Coluna
reta
Tanque de lquido
de densidade
A
P
1
P
2
a
j
Um pequeno des-
locamento do l-
quido no tanque
(h
1
) leva a...
... um grande des-
locamento do l-
quido na coluna
reta (h
2
).
A presso obtida
pela expresso:
P
1
P
2
= . h
2
( a + 1)
A
A presso obtida
pela expresso:
P
1
P
2
= . L ( a + sen )
A
Coluna
reta
P
1
P
2
a
A
h
1
l
L

l

Tanque de lqui-
do (densidade )
Superfcie do lquido
quando P
1
=P
2
A3. Manmetro tipo coluna reta
inclinada
Foto de um manmetro de tubo reto
inclinado.
Adequado para baixas
presses (da ordem de
50 mmH
2
O)
A vantagem em
relao ao tubo reto
vertical a expanso
da escala, permitindo
medies de presso
com maior preciso.
Os manmetros de lquido em geral so
adequados nos casos em que o valor da presso
no crucial para o processo e, portanto, no
necessrio investimento em instrumentos mais
sofisticados.
So de construo simples e de baixo custo.
Observaes
Baseiam-se na lei de Hooke, sobre
elasticidade dos materiais
Os medidores de presso tipo elstico so
submetidos a valores de presso sempre
abaixo do limite de elasticidade, pois,
assim, cessada a fora a ele submetida, o
medidor retorna sua posio inicial sem
perder suas caractersticas
B. Manmetros elsticos
Princpio: Medida da deformao elstica
sofrida por um material em decorrncia da fora
resultante da presso a que foi submetido
A deformao provoca um deslocamento linear que
convertido de forma proporcional em um deslocamento
angular por um mecanismo especfico.
Ao deslocamento angular anexado um ponteiro que
percorre uma escala linear e cuja faixa representa a
faixa de medio do elemento de recepo.
Os elementos de recepo que do nome aos
diferentes tipos de manmetros elsticos.
B1. Manmetro tipo Tubo de Bourdon
Tubo com seo oval, que pode estar
disposto em forma de C, espiral ou
helicoidal. Tem uma extremidade fechada
e outra aberta presso a ser medida.
Com a presso agindo em seu interior, o
tubo se deforma, resultando um movimento
em sua extremidade fechada.
Esse movimento, por meio de engrenagens,
transmitido a um ponteiro que indica a
medida da presso em uma escala
graduada.
Representaes e ilustraes dos trs
tipos de tubo de Bourdon.
Esquema bsico do tubo de Bourdon tipo C.
Esquema do tubo de Bourdon tipo C com
indicao dos seus principais componentes.
Fotos de manmetros elsticos com tubo de
Bourdon tipo C.
Selos
Alguns fluidos podem ser corrosivos, txicos,
conter elementos radioativos ou estar a uma
temperatura muito alta, condies que
impossibilitam seu contato com o tubo de
Bourdon.
No caso de fluidos empregados em
bioprocessos deve-se considerar ainda o
envolvimento de microrganismos, tanto no
sentido do meio para o instrumento
(danificao) quanto do instrumento para o
meio (contaminao), alm de vapor dgua.
Alguns tipos de selo para manmetros tipo
Bourdon.
Selo por diafragma
Isto torna necessrio o emprego de selos, os quais
impedem o contato do fluido sob medio com o
instrumento (tubo de Bourdon).
B2. Manmetro tipo Diafragma
Tipo de medidor que utiliza um diafragma para medir
determinada presso, bem como para separar o fluido
medido do mecanismo interno (ou seja, funciona
tambm com um selo).
Diafragma uma membrana fina de material elstico,
metlico ou no que, neste manmetro, fica sempre
oposta a uma mola.
A presso sobre o diafragma causar um deslocamento
deste at um ponto onde a sua fora elstica se
equilibrar com a fora da mola.
Este deslocamento transmitido a um sistema com
indicao (ponteiro) que mostra a medio efetuada.
Esquema simplificado de um
manmetro de diafragma.
Kk









kk
Esquema geral de um manmetro de
diafragma.
Presso
Presso

Diafragma
Setor dentado
Mola plana
Mola espiral
Pinho (engrenagem)
Brao de articulao
Escala
Diafragma uma membrana fina de
material elstico, metlico ou no
que, neste manmetro, fica sempre
oposta a uma mola.
A presso sobre o diafragma
causar um deslocamento deste at
um ponto onde a sua fora elstica
se equilibrar com a fora da mola.
Este deslocamento transmitido a
um sistema articulado (com ponteiro)
que mostra, numa escala, a medio
efetuada.
Concepo alternativa de um manmetro de
diafragma.
Escala
Presso
Haste
Membrana
Setor dentado
Ilustraes de manmetros de diafragma.
Com selo sanitrio (prprio
para indstria alimentcia)
Foles so dispositivos constitudos por um material que
possui rugas ou dobraduras e que tem possibilidade de
expandir-se e contrair-se em funo de presses
aplicadas no sentido de seus eixos.
No caso de manmetros, tais dispositivos so
cilndricos, com rugas ao longo do crculo exterior.
Como a resistncia presso limitada, so usados
para medio de baixas presses.
B3. Manmetro tipo Fole
Esquema simplificado de um
manmetro tipo fole.
Kk









kk
Esquema geral de um manmetro tipo
fole.
ESCALA
BATENTE
PONTEIRO
FOLE
Presso
MOLA
Concepo alternativa de um manmetro de
fole.
Mola
Pinho
Mola espiral
Rugas
Caixa
Setor dentado
Escala
Brao de
articulao
hhhh
Presso

Ilustraes de manmetros de FOLE.
B4. Manmetro tipo Cpsula
Esquema geral de um manmetro tipo cpsula.
Constitui uma variao do manmetro de fole.
Vacumetros
So instrumentos anlogos ao
manmetros de elstico, diferindo na faixa
de medio (presses abaixo da presso
atmosfrica at alto vcuo).
Em muitos casos o instrumento funciona
como manmetro e como vacumetro.
Ilustrao de um vacumetro.
Transdutores de presso
Correspondem a conversores cuja finalidade principal
transformar as variaes de presso detectadas pelos
elementos sensores em sinais padres de transmisso.
Esses dispositivos convertem o sinal de presso
detectado em sinal eltrico padronizado (4 a 20 mA dc).
Os principais tipos de transdutores so: capacitivo,
indutivo, de deformao, tico, piezoeltrico, de fio
ressonante e potenciomtrico.
Assim, esses dispositivos permitem a construo dos
manmetros e vacumetros digitais.
Ilustraes de instrumentos digitais de
medida de presso e vcuo.
Fatores que devem ser
considerados na escolha do
medidor
- Compatibilidade com o fluido
- Faixa de medio
- Temperatura de operao
- Preciso
- Custo
- Estabilidade trmica
- Resistncia corroso (do fluido e do ambiente)
- Interferncias (campos magnticos, vibraes, etc.)
- Facilidade de manuteno e reposio
- Resistncia a sobrecargas e choques
- Confiabilidade
- Interface eltrica
- Etc.
Varivel relacionada com a solubilidade do
oxignio em meio lquido
Controle da presso para operaes em
temperaturas acima de 100
o
C (esterilizao)
Controle do vcuo para evaporaes em
temperaturas abaixo de 100
o
C (concentrao)
Controle do vcuo para filtraes (recuperao)
Medio e controle da presso para avaliao
da perda de carga durante bombeamento de
meios e ar
Medio e controle da presso na cabea do
biorreator (manuteno de presso positiva)
Medio de presso e vcuo em
bioprocessos
- Manmetro tipo diafragma
SENSORES DE PARMETROS
QUMICOS
pH
Potencial redox
Oxignio dissolvido
Gs carbnico dissolvido
pH
Indicadores qumicos
Medidores de eletrodo
- Indicadores qumicos: mudam de cor em funo
da concentrao de ons H
+
- Normalmente a substncia indicadora est
aderida a uma fita de papel ou plstico
- Apresentam a desvantagem de no permitir
leitura nem obteno contnua de valores
Medidores de eletrodo
- So os mais amplamente empregados
- A maioria so do tipo potenciomtrico, no qual a
concentrao de H
+
convertida em sinal
eltrico
- O tipo de eletrodo mais empregado o de vidro
- Normalmente so eletrodos combinados (de
medio e de referncia)
- Para bioprocessos o eletrodo tem que ser
esterilizvel e, de preferncia, do tipo blindado
- Eletrodos para esterilizao in situ devem conter
um compartimento para equilbrio da presso
Esquema de um eletrodo de pH esterilizvel.
Eletrodo de referncia
Diafragma
Eletrodo de medida
Membrana de vidro
Esquema de um eletrodo combinado desenhado
para esterilizao em autoclave.
Medida de pH em bioprocessos
Eletrodos combinados de vidro

Finalidades:
- Preparo de meio de fermentao
- Estudo da condio ideal para um bioprocesso
- Recuperao de produtos
- Manuteno do pH adequado durante um
bioprocesso
- Indicao do trmino do processo

- No determina seletivamente o tipo de oxidante
ou redutor
- Depende muito do valor do pH
Potencial redox
- O potencial redox quantifica a existncia de
agentes oxidantes ou agentes redutores num
lquido.
- A medio deste parmetro relativamente
eficiente tendo em considerao o seu custo, no
entanto tambm tem algumas desvantagens,
como:
- Concretiza-se pela medio do potencial eltrico
(em mV milivolts) entre os diferentes tomos e
molculas presentes num meio lquido
- Medido com um eletrodo combinado de platina e
de referncia
- Existem tambm os eletrodos combinados para
pH e potencial redox
A relao entre o potencial redox e a atividade
celular ainda no est bem estabelecida
Uma das aplicaes o monitoramento de baixos
nveis de oxignio dissolvido (< 1 ppm) em
processos anaerbios, nos quais a formao de
produto pode ser sensvel ao potencial redox
Oxignio dissolvido
- Medido por eletrodo eletroqumico
- Princpio de funcionamento a reduo do
oxignio, o que gera uma corrente que
amplificada e medida ou transformada numa
voltagem que medida, dependendo do tipo de
eletrodo.
- As sondas podem ser:
Galvnica (potenciomtrica)
Polarogrfica (amperomtrica)
Nos dois tipos ocorre a reao de reduo do
oxignio no catodo:
O
2
+ 2 H
2
O + 4 e
-
4 OH
-

Na sonda galvnica, ocorre a reao de oxidao
do chumbo no anodo:
2 Pb 2 Pb
2+
+ 4 e
-

A corrente gerada provoca uma voltagem que
medida e est correlacionada com o fluxo de
oxignio que chega na superfcie do catodo.
Na sonda polarogrfica ocorre a reao de
oxidao da prata no anodo:
2 Ag + 2 Cl
-
2 AgCl + 4 e
-

Nos dois tipos ocorre a reao de reduo do
oxignio no catodo:
O
2
+ 2 H
2
O + 4 e
-
4 OH
-

A corrente resultante medida e est
correlacionada com o fluxo de oxignio que
chega na superfcie do catodo.
Esquema de uma sonda de oxignio dissolvido tipo polarogrfica.
Anodo
Eletrlito
Capa
Isolante
Catodo
Membrana
Esquema de uma sonda de oxignio dissolvido tipo polarogrfica.

Isolamento
Eletrlito
Fio de platina
O-ring
Membrana
Catodo de platina
Anodo
As sondas medem a presso parcial (ou atividade)
do oxignio, e no a sua concentrao
A partir de uma situao de equilbrio, ou seja,
saturao do lquido, a atividade do oxignio est
relacionada com sua presso parcial e as leituras
das sondas so dadas em porcentagem da
saturao
A determinao da porcentagem de oxignio
dissolvido em funo do tempo, uma das
principais funes das sondas de OD.
A solubilidade do O
2
em gua pura, a 25
o
C,
igual a 7,39 mg/L e, a 30
o
C, igual a 7,63 mg/L.
Solubilidade do gs oxignio em gua a vrias temperaturas, na
presso atmosfrica de 1 atm (760 mmHg).
Solubilidade do O
2
em gua, a 1 atm de O
2
, a vrias
temperaturas e solues de sal ou cidos, a 25
o
C.
Medida de oxignio dissolvido em
bioprocessos
Sondas polarogrficas
So feitas medidas em linha (com registro contnuo)

Finalidades:
- Estudo da condio ideal para um bioprocesso (k
L
a)
- Manuteno da concentrao adequada de oxignio
dissolvido durante um bioprocesso
- Estudos de ampliao de escala (k
L
a)
- Balano gasoso em processos fermentativos aerbios
CO
2
dissolvido
- Medido por eletrodo eletroqumico
- Princpio de funcionamento a mudana de pH
de uma soluo de bicarbonato, provocada pela
reao com o CO
2
. O hidrognio quantificado
por um eletrodo de pH comum.
Esquema de uma sonda de CO
2
dissolvido e do
mecanismo de deteco.
Membrana de silicone
Membrana de vidro
Soluo tampo
Eletrodo de referncia Ag/AgCl
Eletrlito
Eletrodo combinado Ag/AgCl
Membrana de vidro
Eletrlito
Membrana de silicone
Fase lquida
Eletrodo de pH
Foto de uma sonda de CO
2
dissolvido.
Medida de CO
2
dissolvido em bioprocessos
Sonda de CO
2
So feitas medidas em linha (com registro contnuo)

Finalidades:

- Balano gasoso em processos fermentativos aerbios
Biosensores
Um biosensor pode ser definido como um sensor
que combina a atividade seletiva de um
elemento biolgico sensvel ao analito de interesse
com um transdutor que converte o sinal biolgico
em um sinal eltrico proporcional concentrao
do analito.
De uma forma geral, so dispositivos base de
substncias como uma enzima, um anticorpo,
uma protena, DNA, etc., cuja funo
determinar, de forma seletiva, as concentraes
de diversas substncias.

Microrga-
nismo ou
enzima
Receptor
bioativo
Transdutor
Amplificao e
tratamento do sinal
Biossensor
Amostra
ou padro
Esquema geral de um biossensor.
Uma das montagens de um biossensor consiste da
imobilizao de um microrganismo ou enzima de forma a
permitir seu contato com o analito. Paralelamente usa-se
um dispositivo (eletroqumico) para quantificar o produto da
ao do agente biolgico (produto de uma reao
bioqumica).
Substrato Enzima Produto
-D-glicose Glicose oxidase H
2
O
2
(O
2
)
Sacarose Invertase H
2
O
2

Lactose -galactosidase H
2
O
2

Uria Urease NH
4
+
, H
2
O
2
Penicilina Penicilinase H
+
Exemplos de sistemas enzimticos em biossensores.
Esquema de um eletrodo para deteco de uria
construdo por imobilizao de urease em um gel fixado
num eletrodo de vidro.
Camada
de gel
com
urease
de
gu
Eletro
do de
vidro
Uria NH4
+

vidro HCO
3
-
Sistema enzimtico com termistor: 1- coluna com enzima,
2- coluna de referncia.
Outra possibilidade o emprego de um calormetro (ou
outra forma de quantificar calor), medindo-se a quantidade
de calor liberada pela reao bioqumica.
Tampo
Amostra
Bomba
Registrador
Medida de
Temperatura
Sada de amostra Sada de amostra
Vantagens de se imobilizar enzimas:
Reuso de enzimas de alto valor
Enzimas imobilizadas so menos susceptveis a
inibio por outros componentes
Quando o analito precisa passar por reaes em multi-
etapas ou reaes acopladas, o sistema com clulas
imobilizadas torna-se de grande importncia.
Clulas imobilizadas proporcionam um meio conveniente,
em muitos casos, para transformar o componente a ser
analisado em um composto detectvel.
Componente
analisado
Organismo
empregado
Princpio de
medida
Dispositivo de
deteco
Amnia Nitrobacter sp Consumo
simultneo de O
2
Sonda de O
2
Cefalosporina Citrobacter
freundii
Liberao de H
+
Eletrodo de pH
cido frmico Clostridium
butiricum
Produo de H
2
Eletrodo de
clulas de
combustvel
cido glutmico Escherichia coli Produo de CO
2
Sonda de CO
2
Exemplos de sensores microbianos para anlise de fluidos.
Anlise de gases de exausto
CO
2
Espectrofotmetro de Infravermelho
Condutibilidade trmica
Cromatografia em fase gasosa
Espectrometria de massa
Espectrmetro de Infravermelho
Todas as substncias, orgnicas e inorgnicas, possuem
espectros de absoro caractersticos na regio do
infravermelho.
Se uma radiao infravermelha passar atravs de uma
amostra, determinados comprimentos de onda de energia
so absorvidos, na proporo das concentraes dos
vrios componentes da amostra.
A avaliao do tipo e da quantidade de energia absorvida
fornece a medida da concentrao de um componente
entre vrios que fazem parte da amostra.
Hlio, hidrognio, oxignio, nitrognio e outros gases
monoatmicos no podem ser dosados por infravermelho.
Esquema de um medidor por radiao
infravermelha.
1. Radiador
2. Tubo separador de
radiaes
3. Cmara de medio
4. a - entrada de amostra
b - sada de amostra
5. Cmara de recepo
6. Canal de interligao
7. Sonda de fluxo
8. Cmara de referncia
4b
4a
Medidor de condutibilidade trmica
- Todos os gases e vapores conduzem e
transferem calor em quantidades diferentes
- Esta caracterstica usada para se determinar a
concentrao de diversos gases
- O funcionamento do medidor se baseia na
alterao da resistncia de um resistor quando
sua temperatura alterada pela troca de calor
com o gs de anlise, a qual ocorre na proporo
direta da concentrao do gs na amostra
- A alterao da resistncia altera a voltagem de
equilbrio num circuito tipo ponte de Wheatstone

Esquema de um medidor por condutibilidade trmica.
O
2
Analisadores paramagnticos
Cromatografia em fase gasosa
Sonda polarogrfica
Espectrmetro de massa
Existem 3 tipos de analisadores paramagnticos
para oxignio:
Analisador por deflexo
Analisador trmico
Analisador de duplo gs
Esquema de um analisador paramagntico por deflexo.
O medidor por deflexo composto por um corpo capaz de
girar livremente em torno de um nico eixo. O oxignio contido
no gs que entra no instrumento atrado pelo campo
magntico, fazendo esse corpo girar. Essa rotao medida
pela deflexo do feixe de luz captado pela foto-clula.
O oxignio atrado para um forte campo magntico. A maioria dos
outros gases no . Este paramagnetismo utilizado para obter
medies rpidas e precisas.
Cria-se um campo magntico concentrado. Qualquer
concentrao de oxignio presente ser atrada para a parte
mais forte do campo magntico.
Duas esferas de vidro preenchidas com nitrognio so afixadas
sobre um suporte rotatrio, dentro de um campo magntico.
Um espelho montado no centro do suporte. Uma fonte de luz incide
sobre o espelho e a luz refletida direcionada para um par de
fotoclulas. O oxignio atrado para o campo magntico deslocar as
esferas de nitrognio, acarretando a rotao do suporte. As fotoclulas
detectaro o movimento e enviaro um sinal.
O sinal gerado pelas fotoclulas repassado para um
sistema de realimentao. Este sistema enviar uma
corrente ao fio instalado em volta das esferas de
nitrognio. Isso causa um efeito motor, que manter as
esferas em sua posio original. A intensidade de
corrente medida no fio ser diretamente proporcional
concentrao de oxignio contido na mistura gasosa.
H
2
Cromatografia em fase gasosa
Espectrometria de massa
Componentes volteis como etanol, acetaldedo
e cidos carboxlicos

Cromatografia em fase gasosa
Espectrmetro de massa
CH
4
Cromatografia em fase gasosa
Espectrometria de massa
Preparo da amostra gasosa
- Sobretudo para determinao do teor de CO
2
e de
O
2
, necessrio desumidificar o efluente gasoso
(amostra) antes de sua entrada nos analisadores
- Isto se faz necessrio para evitar danos clula
de amostra, no caso do espectrofotmetro de
infravermelho (CO
2
), e para evitar desvios de
leitura, no caso do analisador paramagntico (O
2
)
Esquema de um sistema de preparao de
amostra gasosa.
1. Sonda para tomada de gs
2. Vlvula de trs vias
3. Resfriador de gs
4. Recipiente para gua de
condensao
5. Filtro para H
2
S
6. Filtro para H
2
SO
4
7. Filtro de membrana
8. Aparelho analisador
9. Fonte de alimentao
10. Tubo U para teste de
densidade
11. Bomba de aspirao
Esquema de um sistema computadorizado para
anlise de gases de exausto.
Obs.: Embora o esquema anterior seja para anlise
por espectrometria de massa, esta montagem pode
ser feita para anlise dos gases de exausto
empregando-se outros tipos de analisadores
Anlise dos gases de exausto em bioprocessos
Finalidades:
- Balano gasoso em processos fermentativos
- Gases como produto de fermentao (CH
4
, H
2
)
- Compostos volteis como produto de fermentao
- Indicativo de atividade celular (CO
2
)
- Informaes sobre o andamento da fermentao (volteis)
SENSORES EM LINHA PARA
PROPRIEDADES CELULARES
Determinao da concentrao de biomassa

- So medidas indiretas
- Necessitam de uma curva de calibrao (correlao entre a
variao da propriedade medida e a concentrao celular)
- Um dos maiores problemas a falta de linearidade de tal
curva em altas concentraes de biomassa
- No existe um mtodo de aplicao geral, por causa das
restries devido s caractersticas do crescimento e do
meio de cultivo
- A maioria dos mtodos mede a biomassa total
A. Turbidimetria
A turbidez de um meio depende do nmero de partculas que ele
contm, do tamanho e da forma destas partculas
Os mtodos levam em conta que a turbidez do meio
proporcional sua concentrao de biomassa
O feixe de luz incidente na suspenso celular est sujeito a pelo
menos cinco fenmenos:
- Absoro da luz pela biomassa
- Transmisso da luz
- Espalhamento da luz na mesma direo de incidncia do feixe
- Espalhamento perpendicular direo de incidncia do feixe
- Espalhamento na direo contrria ao de incidncia do feixe

Embora existam aparelhos para medir estes fenmenos, a
maioria mede, em meios biolgicos, a luz transmitida
Fenmenos envolvidos na determinao da
biomassa celular.
Fenmenos envolvidos na determinao da
biomassa celular.
Espalhamento 90
o
Espalhamento
frontal

Luz
incidente

Amostra turva

Espalhamento 180
o

Luz transmitida


Esquema de uma sistema de medida de biomassa em linha por turbidimetria.
Medidor
de
turbidez
Biorreator
Meio
Cmara de
desgaseificao
Anlise e
registro
de dados
Diagrama esquemtico de uma clula de fluxo para medida de
luz transmitida (a) e variao da densidade tica com a
concentrao de biomassa para diferentes valores de d (b).
Uma das formas de se determinar concentraes
de biomassa em faixas maiores variar a
espessura do caminho de percurso do feixe de luz.
Tubo interno
Densidade
tica
Entrada da amostra
Sada da amostra
Densidade celular
Esquema de turbidmetro para medida da luz transmitida e da luz
espalhada no sentido de incidncia do feixe (a) e para medida da luz
espalhada no sentido oposto ao de incidncia do feixe (b).
(a)
(b)
Esquema de determinao de biomassa por medida da luz
espalhada no sentido oposto ao de incidncia do feixe: (a)
detalho do instrumento de medida e (b) esquema geral.
a
b
B. Fluorescncia
Princpio do mtodo: fluorescncia do NADH e NADPH de
clulas vivas quando irradiados com luz ultravioleta
Comprimento de onda de incidncia: 340-360 nm
Comprimento de onda de fluorescncia: cerca de 460 nm
A intensidade de fluorescncia afetada pela quantidade
de biomassa, pelo estado metablico das clulas e
tambm por fatores abiticos como bolhas e componentes
fluorescentes do meio
No h circulao de amostra pelo equipamento, o que
indica uma montagem mais simples em relao a outros
O mtodo tem potencial para uso em sistemas com
clulas imobilizadas
Desenho esquemtico de um sensor de fluorescncia.
Fluorescncia de uma cultura de Zymomonas mobilis em funo da
concentrao de biomassa, em diferentes concentraes de glicose.
A produo de calor um parmetro relacionado com
atividade metablica, concentrao de biomassa e
consumo de substrato
O maior problema separar o calor produzido pelas
clulas do calor produzido ou consumido por outros
processos (aerao, agitao, adio de cido/base, ou
nutrientes)
O estado metablico das clulas influencia na
quantidade de calor gerado, alterando os termogramas.
Neste caso, a relao entre calor produzido e
quantidade de biomassa fica comprometida
C. Calorimetria
A concentrao de biomassa pode ser estimada a partir do
volume da torta filtrada, do fluxo de filtrao, do volume de
filtrado e da diferena de presso atravs do sistema de
filtrao
Corresponde a um sistema de medida semicontnuo
Foi demonstrado que a concentrao de biomassa pode ser
obtida pela equao:

X = (1/). V
C
/(V
f
+V
C
)
Onde:
X a concentrao de biomassa (g/L)
v o volume especfico da torta (L/g)
V
C
o volume da torta (L)
V
f
o volume do filtrado (L)
D. Filtrao
Diagrama esquemtico de um sistema de filtrao
para medida de biomassa.
Comparao de dados de biomassa obtidos por filtrao em linha com
os obtidos por mtodos off-line, para o cultivo de Penicillium
chrysogenum.
E. Outros mtodos
Mtodos por viscosidade
Mtodos Eletroqumicos
- Mtodos Impedomtricos
- Sensores potenciomtricos
- Sensores tipo clulas de combustvel
- Sensores amperomtricos
Mtodos acsticos
Determinao de biomassa ativa

- A viabilidade celular pode ser medida em separado por trs
principais mtodos:
- Colorao vital
- Replicao celular
- Atividade metablica

- Tais mtodos demandam tempo considervel
Citometria de fluxo
Tcnica que permite analisar vrias caractersticas celulares ao
mesmo tempo
O aparelho, citmetro de fluxo, capta e digitaliza a disperso de
luz provocada pela passagem de partculas em suspenso
alinhadas uma a uma, num fluxo laminar, frente a um feixe de luz
Componentes bsicos do citmetro de fluxo:
Fluido suspenso de partculas e fluxo laminar
ptico - Fonte de iluminao, Captao da disperso da luz e
da fluorescncia e Filtrao da disperso e da fluorescncia
Eletrnico - Converso do sinal em valores analgico-digitais
Aquisio, Processamento, Anlise e Armazenamento por
computador
Exemplo do que pode ser analisado por citometria de fluxo.
Metabolismos
Receptores
ADN Citoquinas
Enzimas
Antignios celulares
Tamanho
Complexidade
FILTRO DE AR GERA PRESSO AO FLIDO ENVOLVENTE SHEATH
Baixa presso
da amostra
12l/min
Amostra
Fluxo
Laminar
BAIXA PRESSO DIFFERENCIAL
Bainha Bainha
Amostra
Fluxo
Laminar
Bainha Bainha
ALTA PRESSO DIFFERENCIAL
Alta presso
da amostra
60l/min
SISTEMA FLUIDO
FACSCalibur
FL1

Red Diode Laser
~635 nm
SSC
FL3
FL4
670LP
661/16
585/42
488/10
90/10 Beam Splitter
DM 560SP
Fluorescence
Collection Lens
DM 640LP
Half Mirror
488/10
.
488 nm
Blue Laser
FSC Diode
Focusing
Lens
FL2
530/30
Beam Combiner
Flow
Cell
Flow
Cell
SISTEMA TICO
Diagrama esquemtico representando os sistemas
tico e fluido de um citmetro de fluxo.
tica de espalhamento frontal
Sensor de FS
Laser
tica de espalhamento lateral
Laser
Sensor de FS
Sensor SS 90
0
tica de fluorescncia
Laser
Sensor de FS
Detectores de Fluorescncia
(PMT1, PMT4 etc.)
NGULO DE DISPERSO FRONTAL (FSC)
NGULO DE DISPERSO LATERAL (SSC)
LASER
Foto de um citmetro de fluxo.
Foto do sistema tico de um citmetro de fluxo.
Tipos de diagramas (Resposta)
1 parmetro
Histograma
2 parmetros
Grfico de pontos
Grfico de Contorno
Grfico de Densidade
Foto de um citmetro de fluxo.
Anlise por Injeo em Fluxo (Flow Injection Analysis)
Fundamento: Injeo de uma amostra numa corrente lquida
contnua no segmentada.
corrente de amostra so adicionados reagentes, de modo
a formar uma zona de reao que continuamente
transportada para um detector, o qual pode determinar
absorbncia, potencial eltrico ou qualquer outra
propriedade fsica da soluo
A anlise (FIA) compreende trs blocos principais:
- Manipulao da amostra e transporte, que consiste em
retirar uma amostra do reator e condicion-la para a anlise
- Especificao, que consiste na eliminao de interferentes
e outros produtos, de maneira a assegurar a
proporcionalidade da propriedade medida com o analito
- Deteco, que consiste no emprego de um transdutor, de
forma a gerar um sinal proporcional espcie a ser
determinada
Existe uma grande flexibilidade para se compor esses trs
blocos, de modo a se montar distintos sistemas de anlise.
Principais vantagens do sistema FIA:
- Alta frequncia de anlises
- Pequenos volumes da amostra
- Amostragem e preparao da amostra integrados ao sistema
- Calibrao a qualquer momento
- Poucas interferncias
- Confiabilidade
- Longos perodos de operao dos sensores
- Flexibilidade para incorporao de novas tcnicas analticas
Determinao de biomassa em bioprocessos
Essencial para o conhecimento e controle de
bioprocessos
Varivel utilizada para a determinao das
velocidades especficas de crescimento, de
consumo de substrato e de formao de produtos
Modelagem matemtica do crescimento, do
consumo de substrato e da formao de produto
Comportamento cintico do processo