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METODOS DE SIEMBRA

I. INTRODUCCION
El primer paso a seguir en la identificacin de un microorganismo es proceder a su
obtencin en cultivo puro, pues es obvia que las reacciones de cultivos mixtos no
podrn ser usadas en la identificacin. El mtodo ms comn de obtencin de un
cultivo puro consiste en tomar una sola colonia del medio de aislamiento y proceder a
su siembra por agotamiento.





II. DIFERENTES MTODOS DE SIEMBRA

- Sembrar: Es el acto de colocar el material bacteriolgico en el medio de cultivo para
promover su crecimiento y desarrollo, y subsiguiente multiplicacin.
El resultado de una siembra se llama: Cultivo



Las siembras pueden ser:
- Primarias: cuando el material es inoculado en los medios por primera vez
- Secundarias: cuando el material a inocular procede de una siembra primaria

Mtodos Generales:
1) Siembra por dilucin: Se toma el tubo de ensayo con medio lquido, como el
caldo simple. Se toma el material a diluir y se siembra en el tubo con el uso del
asa cargada con el material bacteriolgico, se agita, con movimientos
moderados.
Medio de cultivo: Lquido.
Instrumento: Asa.
Finalidad: poner la bacteria en suspensin.

2) Siembra por estras en superficie: Se siembra el material en la superficie del
agar inclinado en un tubo de ensayo, all se extiende por toda la superficie con el
asa bacteriolgica, previamente esterilizada y cargada con el material a sembrar,
haciendo estras no muy amplias, pero tampoco muy estrechas. Se inicia por la



parte ms profunda de la superficie inclinada y se termina la estra en la parte
ms cerca de la boca del tubo.
Medio de cultivo: agar base inclinado.
Instrumento: asa o aguja bacteriolgica


3) Siembra por estra por agotamiento:
Con ste procedimiento se puede conseguir una buena separacin de las colonias
y aislarlas fcilmente. Para ello se funde el medio de cultivo, se vuelca en caja
de Petri y se deja solidificar. Con el asa previamente esterilizada se toma
material de un cultivo heterogneo y se descarga sobre la superficie del medio
formando estras. Esto puede realizarse de varias formas:
a) Al comienzo se coloca el inoculo, luego se contina con las estras.
Cuando se quiere obtener colonias muy separadas se puede utilizar dos o
tres placas de Petri, para lo cual se repite la operacin sin tomar con el
asa nuevo material.
b) Se puede dividir la placa de Petri en cuatro cuadrantes; una vez
depositado el material en el primero, siguiendo el sentido de las agujas
del reloj, se hace una estra luego en el segundo, tercero y cuarto
cuadrante sin cargar nuevamente el asa; en el ltimo cuadrante
aparecern las colonias aisladas
c) El inculo se extiende sobre una pequea zona de la placa, prxima al
borde, se esteriliza el asa y se traza otra estra a partir del depsito y as



sucesivamente.
Medio de cultivo: solido en placa de Petri
Instrumento. Asa
Finalidad. Obtener colonias aisladas


4) Por picadura o puncin: Con una aguja se toma el material que se quiere
sembrar y se lo introduce en el tubo, con medio semislido. Introducir la aguja
hasta el fondo, formando un canal de puncin, trayecto por el cual la retiraremos
luego. Este mtodo se utiliza para estudiar la movilidad de las bacterias.
Medio de cultivo. Semislido.
Instrumento: aguja bacteriolgica.
Finalidad: Estudiar la movilidad de las bacterias




5) Siembra en TSI: (Por picadura y estras en superficie): el TSI (Triple Sugar
Iron) es un medio que contiene glucosa, sacarosa y lactosa, hierro y un indicador
que es el rojo fenol.
En este medio sembraremos por picadura y estras en superficie, como ya
conocemos, para estudiar los cambios que ocurrirn en superficie y profundidad.
A lo largo del canal se desarrollan los microorganismos, y segn lo hagan en la
parte superior o inferior del tubo, estarn indicando su comportamiento frente a
los azucares, los cambios indican lo siguiente:
















III. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
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http://datateca.unad.edu.co/contenidos/201504/micro/3_4_3recuento.htm.
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