Manual Hepatitis

1
HEPATITIS VIRALES
MANUAL DE LAORATORIO
Progrumu NucionuI de ControI de Heputitis ViruIes
Servicio Heputitis y Sustroenteritis
Depurtumento ViroIogu
Luborutorio NucionuI de Referenciu
Instituto NucionuI de Enfermedudes Infecciosus
A,N,L,I,S, "Dr, CurIos S, MuIbrn"
Octubre Z000
Segundu Edicin
Z
SERVICIO HEPATITIS Y SASTROENTERITIS
DEPARTAMENTO VIROLOSIA
Instituto NucionuI de Enfermedudes Infecciosus {INEI}
Administrucin NucionuI de Luborutorios e Institutos de SuIud {ANLIS} "Dr, CurIos S, MuIbrn"
PERSONAL PROFESIONAL Y TECNICO
Dr. JOP0E EMPIQUE 0OMZALEZ
Dro. SAPA MOEMI VLADIMIPSIY
Dro. MAPIA SILVIMA MUMME
Sr. LUCIO OSCAP OTE0UI
Sr. PAUL EMPIQUE CASTPO
Sr. LEOMAPDO SEP0IO 8PAJTEPMAM
Srfo. SOMIA SOLEDAD SOTO
TE / FAX {011} 430Z 04
4301 74Z
E muiI : gegonzuIezunIis,gov,ur
3
Indice
VIPUS DE HEPATITIS A (HAV) ......................................................................................................................................... o
I.- A0EMTE ETIOLO0ICO..................................................................................................................................................... o
Z.- ASPECTOS CLIMICOS...................................................................................................................................................... o
3.- EPIDEMIOLO0IA............................................................................................................................................................... o
4.-DIA0MOSTICO VIPOLO0ICO ......................................................................................................................................... o
b.- PESPUESTA IMMUME....................................................................................................................................................... 7
o.- MEDIDAS DE COMTPOL Y EPPADICACIOM................................................................................................................ 8
VIPUS DE HEPATITIS 8 (H8V) .......................................................................................................................................... 9
I.-Agenfe efioIogico................................................................................................................................................................. 9
Z. - ASPECTOS CLIMICOS..................................................................................................................................................... 9
3.-EPIDEMIOLO0A................................................................................................................................................................. 9
4.- DIA0MOSTICO VIPOLO0ICO...................................................................................................................................... I0
0rofico I: Morcodores de uno Hepofifis 8 ogudo................................................................................................................ II
0rofico Z: Morcodores de uno Hepofifis 8 cronico............................................................................................................. II
0rofico 3: Hepofifis cronico 8 con seroconversion fordo de sisfemo "e"...................................................................... II
b.- MEDIDAS DE COMTPOL................................................................................................................................................. IZ
VIPUS DE HEPATITIS C (HCV) .......................................................................................................................................... I3
I.-A0EMTE ETIOLO0ICO.................................................................................................................................................... I3
Z.-ASPECTOS CLIMICOS ..................................................................................................................................................... I3
3.-EPIDEMIOLO0IA.............................................................................................................................................................. I3
4.-DIA0MOSTICO VIPOLO0ICO ....................................................................................................................................... I3
b.- MEDIDAS DE COMTPOL................................................................................................................................................. I3
o.-MAPCADOPES COM VALOP PPOMOSTICO EM IMFECCIOM POP HCV.................................................................. I4
0rofico I: Morcodores de uno Hepofifis C .......................................................................................................................... I4
VIPUS DE HEPATITIS D (DELTA) (HDV) ......................................................................................................................... Ib
I.- A0EMTE ETIOLO0ICO.................................................................................................................................................... Ib
Z.- ASPECTOS CLIMICOS.................................................................................................................................................... Ib
3.- EPIDEMIOLO0IA............................................................................................................................................................. Ib
4.- DIA0MOSTICO VIPOLO0ICO...................................................................................................................................... Ib
b.- MEDIDAS DE COMTPOL................................................................................................................................................. Ib
0rofico I: Morcodores de HDV............................................................................................................................................. Ib
VIPUS DE HEPATITIS E (HEV) .......................................................................................................................................... Io
I.- A0EMTE ETIOLO0ICO.................................................................................................................................................... Io
Z.- ASPECTOS CLIMICOS.................................................................................................................................................... Io
3.- EPIDEMIOLO0IA............................................................................................................................................................. Io
4.- DIA0MOSTICO VIPOLO0ICO...................................................................................................................................... Io
b.- MEDIDAS DE COMTPOL................................................................................................................................................. Io
0rofico I: Morcodores de Io Hepofifis E............................................................................................................................. Io
HEPATITIS Mo-A Mo-8 Mo-C............................................................................................................................................... I7
APEMDICE DE MOMEMCLATUPA DE MAPCADOPES SEPOLO0ICOS......................................................................... I8
TA8LA I.Hisforio de Io icfericio y de Ios Hepofifis viroIes. Descub V Hepof Humonos. ............................................. I9
TA8LA Z. Toxonomo viroI, 0enofipos y Serofipos de Ios Virus Hepofofropicos Humonos. ......................................... I9
TA8LA 3. Propiedodes de Ios Viriones de Ios Virus Hepofofropicos Humonos. ............................................................. I9
TA8LA 4. Propiedodes de Ios 0enomos de Ios Virus Hepofofropicos Humonos. ............................................................Z0
TA8LA b. Propiedodes 8ioIogicos de Ios Virus Hepofofropicos Humonos. ......................................................................Z0
Z. - PAUTAS 0EMEPALES DE PPOCEDIMIEMTO............................................................................................................ ZI
Z.I. - O8TEMCIOM DE MUESTPAS PAPA ESTUDIO SEPOLO0ICOS.......................................................................... ZI
4
Z.Z. - AL0OPITMO EST MAPC VIP PAC C/CUADP COMP C/HEPATITIS V A0UDA (ADULTOS). ZZ
Z.3. - AL0OPITMO EST MAPC VIP PAC PEDIATP C/CUADP COMP C/HEPATITIS VIPAL A0UDA. ...................ZZ
3.- FUMDAMEMTOS Y TECMICAS UTILIZADAS EM EL DIA0MOSTICO DE HEPATITIS VIPALES...................Z3
3.I.- METODOS SEPOLO0ICOS .........................................................................................................................................Z3
3.I.I.- DETECCIOM DE Ac. ESPECIFICOS COMTPA HAV CLASE Ig0. (onfiHAV-Ig0) ..............................................Z4
3.I.Z.-DETECCIOM DE Ac ESPECIFICOS COMTPA HAV CLASE IgM. (onfiHAV-IgM)..............................................Zb
3.I.3.- DETECCIOM DE Ac ESPECIFICOS COMTPA EL Ag COPE DEL H8V. (onfiH8c)..............................................Zo
3.I.4.- DETECCIOM DE Ac ESPECIFICOS COMTPA Ag COPE DEL H8V CLASE IgM (onfiH8c-IgM)......................Z7
3.I.b.- DETECCIOM DE Ag DE SUPEPFICIE DEL H8V ..................................................................................................Z7
3.I.o DETECCIOM DE Ac ESPECIFICOS COMTPA EL Ag DE SUPEPFICIE DEL H8V. (onfiH8s) .............................Z8
3.I.7.- DETECCIOM DE Ag e (H8eAg) DEL H8V. (comercioI) ..........................................................................................Z8
3.I.8.- DETECCIOM DE Ac ESPECIFICOS COMTPA EL Ag e DEL H8V. (onfiH8e) (comercioI)................................Z9
3.I.9.- DETECCIOM DE Ac ESPECIFICOS COMTPA EL HDV (onfiHDV) (comercioI) ..................................................Z9
3.I.I0.- DETECCIOM DE Ac ESPECIFICOS COMTPA EL HCV .(onfiHCV) (cIose Ig0).................................................Z9
3.I.II.- DETECCIOM DE Ac COMTPA EL HCV (cIose Ig0) ...............................................................................................Z9
METODOS SUPLEMEMTAPIOS. .........................................................................................................................................Z9
3.Z.-8IOLO0IA MOLECULAP APLICADA AL DIA0MOSTICO.......................................................................................30
3.Z.I - Defeccion de HCV PMA por PT-nesfed PCP ...........................................................................................................30
3.Z.Z.- DETECCIOM DE H8V DMA POP HI8PIDIZACIOM MOLECULAP. ....................................................................30
3.Z.3.- OTPAS MET. MOLEC. APLICADAS AL DIA0. DE LAS HEPATITIS VIPALES. .............................................. 3I
METODOS DE AMPLIFICACIOM PAPA LA DETECCIOM DE HCV-PMA.......................................................................3Z
METODOS PAPA 0EMOTIPIFICAP EL HCV......................................................................................................................33
4.-PPEVEMCIOM Y VACUMACIOM......................................................................................................................................34
4.I.- MEDIDAS DE PPEVEMCIOM PAPA HEPATITIS 8 y C............................................................................................34
4.I.I.- MOPMAS PAPA EL PESEPVOPIO (POPTADOP CPOMICO). ...............................................................................34
4.I.Z.- MOPMAS A MIVEL VIAS DE TPAMSMISIOM. ....................................................................................................34
4.I.3.- PEPSOMAS COM PIES0O IMCPEMEMTADO DE IMFECCIOM. .........................................................................3o
4.Z.-TAMIZAJE DE LAS EM8APAZADAS EM EL TEPCEP TPIMESTPE.....................................................................3o
4.3.- PPEVEMCIOM DE LA TPAMSMISIOM PEPIMATAL DE HEPATITIS 8...............................................................3o
4.4.- VACUMACIOM COMTPA H8V .....................................................................................................................................37
4.4.I.- TAMIZAJE PPE-VACUMACIOM..............................................................................................................................37
4.4.Z.- COMDICIOMES DE ESTA8ILIDAD DE LA VACUMA..........................................................................................37
4.4.3.- PE0ISTPO DE VACUMACIOM. ................................................................................................................................37
b.- TPATAMIEMTO................................................................................................................................................................38
b.I HEPATITIS CPOMICA 8: ...............................................................................................................................................38
b.Z.- HEPATITIS CPOMICA C: ............................................................................................................................................38
o.- 0APAMTIA DE CALIDAD Y EVALUACIOM DEL COMTPOL DE CALIDAD.............................................................40
ConfroI inferno y curvos de confroI .....................................................................................................................................40
ConfroI exferno....................................................................................................................................................................... 4I
7.- 0UIA DE 8IOSE0UPIDAD EM EL LA8OPATOPIO DE VIPOLO0IA......................................................................43
7.I- MECAMISMOS COMUMES DE COMTA0IO...............................................................................................................43
7.Z.-MEDIDAS DE SE0UPIDAD Y/O PPEVEMCIOM DE ACCIDEMTES.......................................................................43
TA8LA I ...................................................................................................................................................................................47
TA8LA Z...................................................................................................................................................................................48
AMEXO I..................................................................................................................................................................................b0
AMEXO II................................................................................................................................................................................ bI
AMEXO III..............................................................................................................................................................................bZ
8ibIiogrofo ..............................................................................................................................................................................b3
INTRODUCCION
Los virus reconocidomenfe hepofofropos mos imporfonfes descripfos hosfo eI presenfe son: virus de
hepofifis A (HAV), virus de hepofifis 8 (H8V), virus de hepofifis C (HCV), virus de hepofifis D (HDV) y
virus de hepofifis E (HEV). Cobro ogregor o esfo Iisfo Ios virus on no descripfos, pero con fuerfes
evidencios cInicos y experimenfoIes de su exisfencio, engIobodos con eI nombre generico de virus de
Hepofifis MoA-MoE (MA- EV) o virus de hepofifis X (HXV).
Exisfen odemos, ofros virus cousonfes de cuodros cInicos de hepofifis, si bien esfo no es Io pofoIogo
mos imporfonfe que producen. (virus cousonfes de fiebres hemorrogicos, rubeoIo, sorompion, efc.).
Tombien debe mencionorse eI virus de Epsfein 8orr (E8V) y eI CifomegoIovirus (CMV), en Io produccion
de un cuodro cInico de hepofifis, como os fombien eI Herpes SimpIex (HSV), sobre fodo en neonofos.
Es imporfonfe desfocor que Io evoIucion cInico de Ios hepofifis sero diferenfe poro codo individuo.
Esfo se debe o Io nofuroIe;o propio de Ios virus, porosifos infroceIuIores obIigodos. Por Io fonfo, Io
evoIucion dependero de Io reIocion que se esfobIe;co enfre Ios meconismos pofogenicos deI virus y Io
respuesfo inmune deI huesped.
VIPUS de HEPATITIS.
| HAV
EMFEPMEDAD A0UDA | HEV
| Hepofifis F 7 (fenfofivo)
EMFEPMEDAD A0UDA Y CPOMICA (HCC) | H8V.......HDV.
| HCV
H0V / H08V (A, 8, C) // TTV // SEM-V 777777
VIRUS DE HEPATITIS A {HAV}

1,- ASENTE ETIOLOSICO
Desde su descripcion se Io reIociono por sus
corocfersficos fisicoqumicos y bioIogicos con eI
genero Enferovirus perfenecienfe o Io fomiIio
Picornoviridoe, designondoseIo como Enferovirus
fipo 7Z. Sin emborgo, esfudios genomicos,
fisicoqumicos, bioIogicos y de respuesfo inmune
hon permifido diferenciorIo de Ios infegronfes deI
genero Enferovirus. Por ese mofivo se creo eI
genero Hepornovirus, siendo HAV, hosfo eI
momenfo su nico miembro.
EI virus de Io hepofifis A (HAV) es un virus
pequeo, desnudo y de simefro icosoedrico, su
virion mide enfre Z7-3Z nm. Con eI microscopio
eIecfronico pueden observorse porfcuIos vocos y
IIenos.
EI virion esfo consfifuido por uno codeno IineoI de
PMA de simpIe codeno y poIoridod (+) de
oproximodomenfe 7.b00 nucIeofidos. Lo copside
que Io confiene esfo formodo por 4 profenos, VPI,
VPZ, VP3 y VP4 con corocfersficos simiIores o Ios
de Ios ofros miembros de Io fomiIio.
Z,- ASPECTOS CLINICOS
Lo hepofifis por eI virus A es uno enfermedod
benigno, oufoIimifodo y sin evoIucion o Io cronicidod.
Si bien se hon descripfo cosos de hepofifis
persisfenfes con un curso proIongodo de hosfo un
oo, es uno enfermedod que no dejo secueIos y
confiere uno inmunidod de por vido.
EI fiempo de incubocion osciIo enfre Z y o semonos
y eI cuodro ogudo en Ios cosos sinfomoficos, es de
oporicion obrupfo y corocferi;odo por un morcodo
oscenso deI niveI de ocfividod de fronsominosos,
con o sin icfericio, onorexio, incIusive con nouseos y
vomifos, y en oIgunos cosos, fiebre, hipocoIio y
osfenio.
3,- EPIDEMIOLOSIA
Lo hepofifis por virus A es endemico en cosi fodo eI
mundo y uno de Ios corocfersficos de Io
enfermedod es presenforse en formo de epidemio o
brofes oisIodos. Esfo generoImenfe ocurre en eI
perodo ofoo-invierno y esfo reIocionodo con su
formo de fronsmision. Lo principoI vo es Io fecoI-
oroI y, por Io fonfo, su epidemioIogo esfo
reIocionodo direcfomenfe con Ios condiciones
higienico-soniforios de Io pobIocion.
Esfos corocfersficos deferminon que su incidencio
vore de region o region en un mismo pos y enfre
poses con disfinfo grodo de desorroIIo. Lo hepofifis
por virus A es uno infeccion enferico y su
diseminocion se debe o Io excrecion de virus en
moferio fecoI por eI individuo infecfodo, en Io
Ifimo efopo deI perodo de incubocion.
Esfo virocuprio fiene su moximo expresion
generoImenfe enfre b o I0 dos onfes de Io
oporicion de snfomos cInicos de enfermedod,
ounque en oIgunos cosos se ho defecfodo hosfo Z-3
semonos onfes, y se exfiende hosfo b-7 dos Iuego
de Io oporicion de Io icfericio o eIevocion deI niveI
de ocfividod de fronsominosos (ufiIi;ondo fecnicos
de defencion mos sensibIes es mos proIongodo).
Esfo corocfersfico fiene imporfoncio
epidemioIogico-soniforio yo que consfifuye eI
perodo de moyor confogio y Io infeccion no se hoce
evidenfe hosfo Io oporicion de snfomos.
En ;onos endemicos, Ios individuos se infecfon en
Ios primeros oos de vido, consfifuyendo uno
enfermedod de Io primero y segundo infoncio y/o
odoIescencio y roro ve; de oduIfos. De monero que
generoImenfe en esfos comunidodes Io prevoIencio
de onficuerpos especficos, en oduIfos, oIcon;on
cifros superiores oI 807.
Cobe desfocor que generoImenfe un o0-707 de Ios
pocienfes son osinfomoficos cuondo Io infeccion se
produce en Ios primeros oos de vido, en combio en
odoIescenfes y/o oduIfos jovenes, eI 907 o mos son
formos icfericos y con sinfomofoIogo imporfonfe.
Lo morfoIidod es menor oI 0.I7 de Ios cosos y
generoImenfe osociodo o ofros pofoIogos o
desordenes mefoboIicos, en su moyoro en neonofos
y nios de corfo edod.
4,-DIASNOSTICO VIROLOSICO
Puede hocerse por mefodos direcfos o indirecfos,
eI primero se boso en Io defeccion de virus en
moferio fecoI (inmunomicroscopo eIecfronico, hoy
en desuso, PIE y ELISA poro onfgenos) y eI
7
segundo en Io defeccion de Ios onficuerpos
especficos confro eI virus, originodos en Io
respuesfo inmune humoroI deI individuo infecfodo.
Los mefodos seroIogicos son opropiodos poro
confirmor un diognosfico yo que medionfe Io
defeccion de onficuerpos especficos de cIose IgM,
se puede deferminor efico;menfe uno infeccion en
su efopo ogudo. Los niveIes defecfobIes con Ios
fecnicos ufiIi;odos (PIE y EIE) se exfienden por 3
o 4 meses oproximodomenfe, de ocuerdo o Io
sensibiIidod de Ios mismos, ounque dependero
fundomenfoImenfe de Io respuesfo deI sisfemo
inmune deI individuo ofecfodo. A Ios Ib o Z0 dos
deI inicio deI cuodro cInico comien;on o eIevorse
fombien Ios ffuIos de onficuerpos especficos de
cIose Ig0 (onfiHAV-Ig0) que permoneceron
defecfobIes procficomenfe de por vido,
consfifuyendo Io cicofri; inmunoIogico de Io
infeccion.
,- RESPUESTA INMUNE
Lo respuesfo inmune deI huesped,
que en definifivo es Io que confribuye en moyor
medido o Io pofogenesis de Io hepofifis cousodo por
esfe virus, es imporfonfe fonfo o niveI humoroI
como o niveI ceIuIor.
Si bien numerosos evidencios demuesfron oIfos
ffuIos de onficuerpos fonfo de cIose IgM primero y
cIose Ig0 Iuego, os como fombien Io presencio de
inmunocompIejos y niveIes disminuidos de
compIemenfo en un cuodro ogudo, Ios esfudios
reoIi;odos in vifro fundomenfoImenfe, indicoron
que Io respuesfo inmune ceIuIor es eI principoI
meconismo invoIucrodo en Io pofoIogo hepofico
0rofico I: Morcodores de uno hepofifis A
,- MEDIDAS DE CONTROL Y
ERRADICACION
Por eI fipo de fronsmision deI virus en eI individuo
infecfodo, son mos imporfonfes Ios medidos
higienico-soniforios en eI confroI de Io
diseminocion de Io enfermedod, en un brofe o
epidemio, que Io odminisfrocion indiscriminodo de
gommogIobuIino normoI (MIg), oIfernofivo
ompIiomenfe difundido en esfos cosos.
Esfos medidos comprenden: eI oisIomienfo de Ios
cosos sinfomoficos, eI seguimienfo de Ios
confocfos mos cerconos, eI frecuenfe Iovodo de
monos, sobre fodo Iuego de usor Ios boos
(incIusive con cepiIIo poro uos,
fundomenfoImenfe en nios), Io correcfo Iimpie;o
de Ios boos con hipocIorifo de sodio (Iovondino) y
principoImenfe revisor Io pofobiIidod deI oguo.
Inmunizucin Pusivu:
Se Iogro medionfe Io odminisfrocion de
gommogIobuIino normoI (MIg) yo que esfo posee
onficuerpos especficos confro eI HAV en
confidod suficienfe (oproximodomenfe I00
UI/mI) como poro profeger o un individuo, si es
ufiIi;odo pre-exposicion (niveI mnimo profecfor
I0 mUI/mI). Dos dosis seporodos por 30 dos, en
concenfrocion que dependero deI peso deI
individuo o inmuni;or, confieren inmunidod por
oproximodomenfe 3 meses.
Moyores dosis pueden proIongor esfe perodo,
pero no don moyor profeccion. Su eficocio posf-
exposicion es Iimifodo, si bien se ho deferminodo
que, dependiendo deI perodo fronscurrido uno
ve; ocurrido eI confogio, se consigue ofenuor Io
sinfomofoIogo o suprimirIo ounque no se Iogre
evifor Io seroconversion. Obviomenfe cuonfo mos
femprono seo su opIicocion mejores resuIfodos se
obfendron.De fodos moneros son muy pocos Ios
sifuociones en que se indico su ufiIi;ocion posf-
exposicion. EIIos son: confocfos personoIes muy
esfrechos (convivienfes, porejos), personoI de
guorderos, confocfos esfrechos en insfifuciones
de fiempo compIefo, oqueIIos personos que por su
frobojo deben monipuIor oIimenfos poro ser
consumidos sin coccion y/o oguo.
A su ve; esfos y ofros sifuociones de confocfo
deben ser muy bien evoIuodos en cuonfo o riesgo
de infeccion, de ocuerdo con Io descripfo en
epidemioIogo y vos de fronsmision.
Inmunizucin Activu:
Se encuenfro disponibIe Io vocuno confro esfe
virus. Es uno vocuno o virus inocfivodo, con
exceIenfe niveI de respuesfo, cuondo es
odminisfrodo en Io ;ono deIfoideo fonfo en nios
como en oduIfos, en sus dos formos pediofrico y
oduIfo.
Por ser uno vocuno de respuesfo dosis-
dependienfe, Ios esquemos de inmuni;ocion voron
de ocuerdo o Io concenfrocion de Io dosis
opIicodo. Pueden ser fres dosis o fiempo 0, I y o
meses, o Z dosis con un infervoIo de o o IZ meses,
poro Ios formos mos concenfrodos.
EI niveI de onficuerpos oIcon;odo y su durocion,
son muy superiores o Ios que se Iogro con Io
odminisfrocion de gommogIobuIino sfondord o
normoI (MIg).
9
VIRUS DE HEPATITIS {HV}
1,-ASENTE ETIOLSICO
EI H8V presenfo un virion de formo esferico de
oproximodomenfe 4Z nm de diomefro oI que se
denomino porfcuIo de Done. Presenfo odemos uno
esfrucfuro inferno eIecfronicomenfe denso de
oproximodomenfe Z7 nm de diomefro, denominodo
"core", consfifuyendo Io nucIeocopside que confiene
eI genomo DMA de dobIe codeno incompIefo.
Posee cuofro onfgenos que producen respuesfo
inmune en eI individuo infecfodo : eI onfgeno de
superficie (H8sAg), conocido onfiguomenfe como
onfgeno ousfroIiono, eI onfgeno "core" (H8cAg), eI
onfgeno "e" (H8eAg) nucIeoprofeno derivodo deI
H8cAg y Io profeno X, cuyo funcion es mofivo de
fuerfes confroversios hosfo eI momenfo, ounque se
Io osocio o uno funcion reguIoforio.
Por su corocfersficos se Io cIosifico como miembro
de Io fomiIio Hepodnoviridoe, siendo eI nico
miembro conocido que infecfo oI hombre, si bien oI
presenfe se hon reconocido ofros cuofro virus que
infecfon onimoIes (momferos y oves) que
comporfen corocfersficos nicos que dieron origen
o esfo fomiIio.
Z, - ASPECTOS CLINICOS
Presenfo fodo Io gomo de cuodros cInicos posibIes
en uno infeccion viroI. Desde Ios individuos que son
refrocforios o Io infeccion hosfo oqueIIos que hocen
uno hepofifis fuIminonfe y mueren por foIIo
hepofico ogudo con uno necrosis mosivo de hgodo.
Si bien en oduIfos eI 907 de Ios hepofifis por esfe
virus fienen resoIucion cInico e inmune, exisfe un
porcenfoje que osciIo enfre eI I0 y eI IZ7 de Ios
cosos que evoIucionon o Io cronicidod, con disfinfos
corocfersficos y pronosfico finoI, en su moyoro, de
cirrosis y en menor proporcion, de concer de
hgodo.
Los disfinfos pronosficos, uno ve; producido Io
infeccion, esfon reIocionodos con Io coIidod de Io
respuesfo inmune deI huesped y Io evoIucion o Io
cronicidod esfo reIocionodo fundomenfoImenfe con
uno foIIo en Io respuesfo inmune ceIuIor.
EI fiempo de incubocion es voriobIe, de o semonos
hosfo o meses y Io presenfocion deI cuodro ogudo
cosi insidioso, generoImenfe con osfenio, onorexio,
con o sin icfericio y oIferocion deI en;imogromo
hepofico. Esfo es voIido cuondo es sinfomofico, yo
que en un b0-o07 de Ios cosos es subcInico o
osinfomofico.
Lo morfoIidod roro ve; supero eI I7 de Ios cosos
(hepofifis fuIminonfes).
3,-EPIDEMIOLOSA
Es un virus de disfribucion mundioI, si bien pueden
diferenciorse ;onos endemicos de oIfo prevoIencio
como por ejempIo : sudesfe osiofico, cierfos ;onos
de Africo y en Sudomerico Io region omo;onico.
Exisfen fombien ;onos de mediono o bojo
prevoIencio, como son : Europo cenfroI, poses
escondinovos, Conodo, EEUU y AusfroIio y ofros
;onos de Ios que se corece de dofos cierfos o
confiobIes.
En nuesfro pos, de ocuerdo o Ios dofos que
provienen deI fomi;oje que se reoIi;o en Ios boncos
de songre, esforomos en ;ono de bojo endemicidod
yo que Io prevoIencio poro H8sAg es menor oI Z7
(0,8-I,I7) (I99o). Aunque cobro revisor esfos
dofos yo que es exfropoIor dofos de bonco de
songre o pobIocion generoI, cuondo exisfe
oufoexcIusion y soIo es dodor oqueI que no hoyo
fenido "hepofifis". Ademos, o pesor de ser uno
enfermedod comunicobIe, se coIcuIo que Io
subnofificocion osciende o un b07 y Ios
comunicociones sobre hepofifis, en gron proporcion,
no especificon eI ogenfe efioIogico cousoI.
Lo principoI vo de fronsmision poro esfe virus es Io
porenferoI, o seo por songre y/o derivodos, si bien
no se descorfon ofros vos yo que ho podido ser
demosfrodo Io presencio de H8sAg en fodos Ios
Iquidos bioIogicos en individuos ofecfodos, yo seo
en efopo ogudo, como en oqueIIos pocienfes con
hepofifis cronico.
Lo ofro vo imporfonfe es Io sexuoI. Se esfimo que,
en generoI, un fercio de Ios infecciones ocurren por
esfo vo.
Tombien revisfe imporfoncio Io vo de fronsmision
perinofoI sobre fodo en ;onos endemicos, donde
modres con H8sAg Posifivo con H8eAg (morcodor
10
de oIfo repIicocion viroI) en eI momenfo deI porfo,
se esfimo fienen un 907 de probobiIidodes de
fronsmifir Io infeccion oI neonofo.
Esfo fiene gron imporfoncio epidemioIogico yo que
un 907 de Ios cosos de neonofos infecfodos
evoIucionoron o uno hepofifis cronico, cirrosis y
fienen uno oIfo probobiIidod de desorroIIor un
corcinomo hepofoceIuIor. Esfo ho sido demosfrodo
por numerosos evidencios epidemioIogicos donde
mos deI 807 de Ios cosos de concer hepofico fienen
oIgn morcodor posifivo poro esfe virus.
4,- DIASNOSTICO VIROLOSICO
Se boso en Io defeccion de Ios profenos viroIes
como eI H8sAg y eI H8eAg, (eI H8cAg no soIe o
circuIocion) y de Ios onficuerpos especficos confro
esfos fres onfgenos.
Los fiempos que Ios disfinfos morcodores
permonecen en niveIes defecfobIes en circuIocion
dependeron de codo huesped en porficuIor, yo que
esfon direcfomenfe reIocionodos con Io coIidod de
Io respuesfo inmune.
0eneroImenfe eI onficuerpo (Ac) confro eI H8cAg
(onfiH8c) de cIose Ig0 permonece defecfobIe
procficomenfe de por vido, consfifuyendo Io
cicofri; inmunoIogico de Io infeccion, pero no indico
resoIucion y/o inmunidod, soIo que hubo infeccion.
Por Io fonfo si defecfomos eI Ac de cIose IgM
(onfiH8c-IgM) nos indicoro uno infeccion recienfe.
Lo negofivi;ocion deI H8sAg consfifuye Io primer
evidencio deI cese de Io repIicocion viroI y posferior
resoIucion de Io infeccion. Con Io oporicion deI Ac
confro esfe Ag (AnfiH8s) fenemos Io cerfe;o de
resoIucion e inmunidod, ounque muchos veces su
oporicion en niveIes defecfobIes es bosfonfe corfo
en eI fiempo y por Io fonfo de difciI defeccion.
Cuondo Io negofivi;ocion deI H8sAg no se produce
en un perodo proIongodo de evoIucion (onfes se
fomobo como Imife seis meses, eI criferio ocfuoI no
es fon esfricfo y evoIo Io sinfomofoIogo e imogen
hisfoIogico) podemos sospechor Io que denominomos
uno hepofifis cronico.
En esfos pocienfes Io infeccion no se resueIve y eI
virus confino su repIicocion. Esfo puede esfor
ocompoodo de sinfomofoIogo, consfifuyendo uno
hepofifis cronico ocfivo o persisfenfe donde Io
sinfomofoIogo es infermifenfe, si bien poro
cIosificor uno hepofifis cronico es necesorio confor
con Io imogen hisfoIogico.
Puede fombien ser osinfomofico, deferminondo un
"porfodor sono". 0eneroImenfe Io moyoro
evoIuciono o cirrosis y en menor proporcion puede
desorroIIor un hepofocorcinomo en eI curso de Zb o
30 oos.
Es muy imporfonfe evoIuor medionfe Io defeccion
de Ios disfinfos morcodores eI curso de infeccion y
pronosfico (sisfemo H8eAg-onfiH8e) y deferminor
en uno hepofifis cronico si se ho producido Io
infegrocion deI genomo viroI oI hepofocifo (efopo no
repIicofivo).
Esfo puede deferminorse medionfe eI empIeo de
sondos geneficos (hibridocion moIecuIor) u ofros
fecnicos moIecuIores (b-DMA o PCP) mos sensibIes,
que permifen Io defeccion deI DMA viroI de Ios
viriones en circuIocion si es que dicho infegrocion
no ho ocurrido. Permife odemos Io corocferi;ocion
de Io oporicion de mufonfes e-. Es decir en oIgunos
hepofifis cronicos como resuIfodo de Io respuesfo
inmune deI individuo se seIecciono uno cepo mufonfe
que no sinfefi;o H8eAg, pero sigue repIicondo en
oIfo ffuIo, incIusive o pesor de fener onfiH8e
posifivo. 0eneroImenfe esfos pocienfes presenfon
sinfomofoIogo cInico (eIevocion deI niveI de
ocfividod de fronsominosos e hisfoIogo hepofico
con ocfividod). Lo presencio de esfos mufonfes
puede cerfificorse odemos empIeondo fecnicos de
8ioIogo moIecuIor como eI LiPA, Hibridocion
diferencioI Iuego de PCP y fombien por
secuenciocion.
11
Srfico 1: Murcudores de unu Heputitis ugudu
Srfico Z: Murcudores de unu Heputitis crnicu
Srfico 3: Heputitis crnicu con seroconversin turdu de sistemu "e"
1Z
,- MEDIDAS DE CONTROL
u} Inmunizucin Pusivu: Io confiere uno
gommogIobuIino hiperinmune (H8Ig) confro esfe
virus, que posee oIfo ffuIo de Ac onfiH8s, cuondo
es odminisfrodo pre-exposicion. Lo gommogIobuIino
normoI (MIg) no es efico; porque no fiene o es muy
bojo eI ffuIo de Ac profecfores (onfiH8s).
Lo H8Ig cuondo es usodo posf-exposicion, debe
odminisfrorse denfro de Ios 48 horos de producido
Io exposicion (preferenfemenfe denfro de Ios o
horos) por vo infromuscuIor. Deben dorse dos dosis
seporodos por 30 dos. Los dosis esfon reIocionodos
con eI peso corporoI. Posee uno concenfrocion de
b0.000 mUI/mI de onfiH8s poro profeger o un
individuo de Io infeccion.
b)Inmunizucin Activu: yo desde comien;os de Io
decodo de Ios oos ochenfo exisfe Io vocuno confro
eI H8V. Fue Io primer vocuno o porfir de suero
humono (porfodores de H8sAg) ohoro denominodo
de primero generocion, con muy buenos resuIfodos
en cuonfo o inocuidod, inmunogenicidod y respuesfo.
Los esquemos de vocunocion voron segn eI origen
comercioI de Io vocuno, pero bosicomenfe son Z o 3
dosis, o infervoIos de 30 dos y un refuer;o o Ios o
meses o oI oo.
Con eI proposifo de no moIgosfor vocunos puede
reoIi;orse un esfudio previo o Io vocunocion poro
deferminor Ios individuos suscepfibIes de infeccion
y os profegerIos.
Desde fines de Io decodo de Ios oos ochenfo, esfon
disponibIes Ios vocunos de segundo generocion
obfenidos por recombinocion genefico (expresion
deI H8sAg en bocferios o Ievoduros), con
resuIfodos comporobIes o Ios onferiores.
Ambos confieren uno inmunidod promedio de 3 o b
oos.
c)Inmunizucin Pusivu -Activu: es Io conducfo ideoI
poro oqueIIos individuos en Ios cuoIes por exposicion
o riesgo de exposicion, no puede esperorse Io
respuesfo o Io vocunocion soIo. Consisfe en
odminisfror H8Ig y vocuno, en disfinfos Iugores
(ombos deIfoides), simuIfoneomenfe.
13
VIRUS DE HEPATITIS C {HCV}
1,-ASENTE ETIOLOSICO
EI ogenfe efioIogico de Ios ohoro IIomodos hepofifis
C es un virus de Ios que hosfo I988 se denominobon
gIoboImenfe como Ios cousonfes de Ios hepofifis
MoA - Mo8, principoImenfe posf-fronsfusionoIes. Si
bien on no ho sido corocferi;odo desde eI punfo de
visfo morfoIogico, yo que no ho sido visuoIi;odo por
microscopo eIecfronico grocios o Io ingeniero
genefico se ho Iogrodo secuencior su genomo y se
conocen odemos sus corocfersficos fisicoqumicos.
As es que se Io reIociono o Io FomiIio FIoviviridoe
por su fomoo (menor o o0 nm) y su genomo (PMA
de simpIe codeno), odemos presenfo uno envoIfuro
Iipdico (sensibIe o soIvenfes orgonicos).
Z,-ASPECTOS CLINICOS
Posee un fiempo de incubocion voriobIe de 4 o 8
semonos y Io moyoro curso Io efopo ogudo con uno
formo subcInico (7b-807), con moderodo eIevocion
en eI niveI de ocfividod de fronsominosos, e
incIusive con voriocion onduIoforio de Ios niveIes
normoIes. EI porcenfoje de evoIucion o cronicidod
es moyor que en Io infeccion por eI H8V, 70-8b7 de
Ios cosos. Los primeros dofos epidemioIogicos en
;onos endemicos, Io reIocionon fuerfemenfe oI
desorroIIo de corcinomo hepofoceIuIor.
3,-EPIDEMIOLOSIA
Si bien Ios esfudios epidemioIogicos son fodovo
preIiminores y Iimifodos por mefodoIogos y
disponibiIidod fecnico, se ho demosfrodo que esfe
virus fiene disfribucion mundioI y con oIfo
incidencio en Ios grupos de riesgo que son Ios
mismos que poro H8V, yo que su vo de fronsmision
mos imporfonfe es Io porenferoI. Ademos, ounque no
hon sido fodovo fehocienfemenfe demosfrodos Ios
vos sexuoI y perinofoI, seguromenfe fombien esfon
invoIucrodos.
4,-DIASNOSTICO VIROLOSICO
Por primero ve; en Io hisforio de Io MicrobioIogo
se desorroIIo uno pruebo de Ioboroforio copo; de
defecfor Io infeccion por esfe virus sin hoberIo on
corocferi;odo.
Efecfivomenfe, medionfe ingeniero genefico, se
obfuvieron profenos viroIes que se ufiIi;oron como
Ag de copfuro poro defecfor onficuerpos
especficos en eI individuo infecfodo.
Los primeros equipos, IIomodos de primero
generocion, se desorroIIoron ufiIi;ondo uno profeno
no esfrucfuroI deI virus que produce uno
seroconversion fordo (b-o semonos) deI cuodro
ogudo.
Luego Ios equipos, IIomodos de segundo generocion,
que incIuyeron ofros profenos viroIes
(esfrucfuroIes) como onfgeno de copfuro Iogroron
defecfor Ios onficuerpos especficos mos
preco;menfe (Z-3 meses) de producido eI cuodro
ogudo.
AcfuoImenfe se dispone de equipos de fercero
generocion que porecen oporfor mejoros o Io
sensibiIidod, pero no o Io especificidod. Todos
defecfon Ac de cIose Ig0 (respuesfo secundorio).
Tombien se hon desorroIIodo pruebos
supIemenforios ufiIi;ondo Io fecnico de
inmunobIoffing, que inmoviIi;o Ios profenos viroIes
o Ios pepfidos sinfeficos en nifroceIuIoso o nyIon y
defecfo Ios onficuerpos especficos (cIose Ig0) por
en;imoinmunoensoyo (PI8A o LIA). En Ios Ifimos
oos se ho incorporodo como morcodor en Io
evoIuocion de Io evoIucion de Io enfermedod y en
individuos frofodos, Io invesfigocion o defeccion deI
PMA deI HCV por fecnicos moIecuIores (PT-PCP), y
mos recienfemenfe por fecnicos esfondori;odos que
permifen Io cuonfificocion de Io IIomodo "corgo
viroI", mefodoIogos fiIes como focfor pronosfico
fonfo en Io evoIucion como en Io respuesfo oI
frofomienfo.
Mo exisfe por eI momenfo ni profiIoxis posivo ni
ocfivo poro esfe virus. EI confroI de Io songre o
fronsfundir es uno medido fundomenfoI poro
mejoror eI confroI de Io infeccion como osi fombien
Io modificocion de conducfos de riesgo poro Io
infeccion.
14
,-MARCADORES CON VALOR PRONOSTICO EN INFECCION POR HCV
UENOS MALOS
Joven EDAD DE INFECCIN Longevo
Corfo DURACION DE LA INFECCIN Lorgo
MormoI RESPUESTA INMUNE Disminuido
DecIin.Temprono PERFIL ENZIMATICO EIevodo
HCM/HCP HISTOLOSIA HEPATICA INICIAL HCA/HCC
Minguno COFACTORES AIcohoI/H8V/HIV
HCM: hepofifis cronico moderodo
HCP: hepofifis cronico persisfenfe
HCA: hepofifis cronico ocfivo
HCC: hepofocorcinomo
Srfico 1: Murcudores de unu Heputitis C
1
VIRUS DE HEPATITIS D {DELTA} {HDV}
Es un virus defecfivo que depende de Io repIicocion
deI H8V poro poder infecfor y repIicorse. Tomo Io
cubierfo de esfe (H8sAg), ounque fiene un Ag
propio (HDAg).
Lo infeccion puede producirse simuIfoneomenfe con
eI H8V Io que denominoremos como coinfeccion, o
bien en un pocienfe con hepofifis cronico por H8V,
Io que se denomino superinfeccion. Esfo Ifimo
fiene un pronosfico mos grove que Io onferior,
ounque en ombos cosos significo uno enfermedod
hepofico mos severo e incIusive eI desorroIIo de uno
hepofifis fuIminonfe es mos frecuenfe.
3,- EPIDEMIOLOSIA
Lo vo de fronsmision es Io mismo que poro eI H8V o
seo fundomenfoImenfe porenferoI. Pecordor que
poro que eI HDV puedo infecfor, eI H8V debe esfor
repIicondo.
Es endemico de oIgunos ;onos donde fombien Io es
eI H8V (sur de IfoIio, Amo;onos), y fombien
oporece en formo esporodico, generoImenfe en
grupos de riesgo poro eI H8V.
Consisfe en Io defeccion de Ios Ac. especficos
confro eI HDAg. Esfe, si bien soIe o circuIocion, Io
hoce recubierfo con eI H8sAg, de monero que no es
uno deferminocion de rufino, ounque puedo
reoIi;orse.
Como esfo infeccion esfo direcfomenfe reIocionodo
con eI H8V es fiI diferencior si se frofo de uno
coinfeccion o uno superinfeccion, poro eso se Io
reIociono con Ios morcodores deI H8V. EI morcodor
mos fiI es eI onfiH8c-IgM, yo que defermino si Io
infeccion con H8V es ogudo o se frofo de uno
infeccion cronico.
Es Io que se opIico oI H8V, yo que un individuo
inmune poro eI H8V, Io es poro HDV.
Srfico 1: Murcudores de HDV
1
VIRUS DE HEPATITIS E {HEV}
EI ogenfe efioIogico de Ios ohoro IIomodos hepofifis
E es un virus de Ios que, hosfo I988, se indicobo
como cousonfe de Ios hepofifis MoAMo8
fronsmifidos enfericomenfe.
Es un virus pequeo, de oproximodomenfe 30-40
nm y se Io reIociono en un primer momenfo o Io
fomiIio Picornoviridoe. AI secuencior su genomo y
esfudiorIo se Io reIociono con Io fomiIio
CoIiciviridoe, ounque fodovo no hoy uno definicion
oI respecfo. Su genomo es PMA de codeno simpIe.
Produce uno enfermedod muy porecido o Io
hepofifis A, si bien puede fener un curso mos
grove y moyor morfoIidod (Z-37). Mo evoIuciono o
cronicidod ni dejo secueIos.
Porecero uno corocfersfico propio Io oIfo
morfoIidod en emboro;odos en Ios que puede IIegor
oI Ib-Z07.
3,- EPIDEMIOLOSIA
An onfes de disponerse de mefodos diognosficos
poro hepofifis E se hon podido deferminor brofes
epidemicos y epidemios ocurridos en diversos
porfes deI mundo, dodo que Io enfermedod esfobo
perfecfomenfe corocferi;odo desde eI punfo de
visfo cInico y se confobo con pruebos sensibIes y
especficos poro Ios demos virus hepofofropos.
Su principoI vo de fronsmision es Io enferico, es
decir por oguo o oIimenfos confominodos. Tombien
Ios brofes fienen cierfo esfocionoIidod, que
coincide en cierfos ;onos con Ios epocos de
grondes IIuvios.
Se reoIi;o por medio de Io deferminocion de
onficuerpos especficos por en;imoinmunoensoyo.
Los onficuerpos Ig0 onfiHEV oumenfon
coincidiendo con Io eIevocion de Ios
ominofronsferosos y disminuyen con eI fiempo. Lo
durocion de Ios mismos y si esfos onficuerpos
profegen de uno re-infeccion fodovo esfo en
discusion. Lo defeccion de porfcuIos viroIes en
heces y suero por PCP no resuIfo procfico en un
exomen de rufino, pero s puede dor informocion en
Io epidemioIogo deI HEV.
Mo exisfen por eI momenfo, si bien se ho infenfodo
obfener uno inmuni;ocion posivo o froves de sueros
de individuos convoIecienfes, hobifonfes de ;onos
de oIfo endemicidod, pero por ohoro son soIo
infenfos o niveI experimenfoI.
Srfico 1: Murcudores de Iu Heputitis E
17
HEPATITIS No-A No- No-C
Aunque recienfemenfe ho sido posibIe
corocferi;or dos virus (HCV y HEV) de enfre Ios
pofoIogos rofuIodos como MoAMo8, exisfen
evidencios cInicos y experimenfoIes que permifen
suponer Io exisfencio de ofros ogenfes efioIogicos,
odemos de Ios yo descripfos, copoces de cousor uno
hepofopofo como sinfomofoIogo mos imporfonfe.
Teniendo en cuenfo Ios confusiones que ho frodo Io
nomencIofuro de MoAMo8 en Ios hepofifis, se
prefiere ohoro denominorIos como hepofifis por
virus X o hepofifis MoA-E.
Se deben descorfor ofros virus conocidos, copoces
de producir uno hepofopofo con cierfo frecuencio,
como por ejempIo eI cifomegoIovirus (CMV) y eI
virus de Epsfein 8orr (E8V). Ademos es muy
imporfonfe fener en cuenfo Io epidemioIogo deI
coso o evoIuor, como os fombien Io Hisforio CInico
deI pocienfe, yo que si bien eI diognosfico es por
descorfe, es qui;os uno de Ios mos difciIes de
reoIi;or
EVIDEMCIAS DE OTPOS A0EMTES ETIOLO0ICOS DE HEPATITIS.
- DIFEPEMTES PEPIODOS DE IMCU8ACIOM (COPTO Y LAP0O).
- VAPIOS EPISODIOS DE HEPATITIS.
- HEPATITIS CPOMICAS H8V Y HCV ME0ATIVAS.
- MoA8CV CLOPOFOPMO PESISTEMTE.
- DESAFIOS CPUZADOS EM PPIMATES.
- HEPATITIS FULMIMAMTES MoA-E.
HEPATITIS MoAMo8 (HEPATITIS por VIPUS X).CPITEPIOS DE EXCLUSIOM.
- ALCOHOL.
- AUTOIMMUMIDAD.
- EMFEPMEDAD HEPATICA PPEEXISTEMTE.
- TOXICIDAD POP DPO0AS.
- FALLA CAPDIACA.
- E8V, CMV, (HSV) ME0ATIVOS.
- HA8CDEV ME0ATIVOS (HI0ADO Y SUEPO).
OTPOS A0EMTES IMPLICADOS.
TO0AVIPUS.
- FALLA HEPATICA A0UDA.
- FIE8PE HEMOPPA0ICA SEVEPA.
- despues de TPAMSPLAMTE HEPATICO.
PAPAMIXOVIPUS.
- HEPATITIS o CELULAS 0I0AMTES.
1
APENDICE DE NOMENCLATURA DE MARCADORES SEROLOSICOS
HAV - VIRUS DE HEPATITIS A
Anti HAV-IgM: Anficuerpo (Ac.) cIose IgM confro HAV.
Presenfe en Io efopo ogudo de Io enfermedod. Es indicodor de enfermedod ocfuoI
-Anti HAV-IgS: Anficuerpo (Ac.) cIose Ig0 confro HAV. Presenfe en Io convoIecencio. Su posifividod
no indico infeccion ocfuoI por HAV.
HV - VIRUS DE HEPATITIS
-HsAg: Anfgeno de superficie de Io hepofifis 8. Anfiguomenfe IIomodo "Anfgeno AusfroIiono"
(AgAu). Aporece en Io efopo ogudo y se monfiene defecfobIe en Io infeccion cronico. Su presencio indico
infecfividod y generoImenfe repIicocion viroI.
-AntiHs: Anficuerpo confro eI onfgeno de superficie. Aporece en Io convoIescencio. Indico
recuperocion cInico y generoImenfe inmunidod.
-AntiHc: Anficuerpo confro eI onfgeno "core" (onfgeno cenfroI deI H8V). Indico exposicion oI H8V.
Presenfe en Io efopo ogudo y se monfiene en Io convoIecencio. Puede persisfir meses o oos.
-AntiHc-IgM: Ac. cIose IgM confro eI onfgeno "core". Indico exposicion oI H8V. Presenfe en Io efopo
ogudo en oIfos ffuIos, es morcodor de infeccion recienfe. Se monfiene en niveIes defecfobIes, ounque
con bojo ffuIo, en cosi fodos Ios hepofifis cronicos.
-HeAg: Anfgeno "e". Aporece en Io efopo ogudo junfo con eI onfgeno de superficie. Es morcodor de
oIfo repIicocion viroI e infecfividod.
-AntiHe: Ac. confro eI onfgeno "e". 0eneroImenfe indico recuperocion cInico y buen pronosfico.
-DNA-HV: Acido DesoxirribonucIeico deI H8V. Su presencio en suero o pIosmo indico repIicocion viroI
e infecfividod.
HCV - VIRUS DE HEPATITIS C
-AntiHCV-IgS: Anficuerpo cIose Ig0 confro HCV. Indico exposicion oI HCV.
-AntiHCV-IgM: Anficuerpo cIose IgM confro HCV. Presenfe en Io efopo ogudo. Indico infeccion ocfuoI,
ounque en Ios cosos cronicos puede persisfir en ffuIos defecfobIes por meses o oos.
-HCV RNA: Acido ribonucIeico deI HCV. Su presencio en suero o pIosmo indico repIicocion viroI e
infecfividod.
HDV - VIRUS DE HEPATITIS DELTA
-AntiHDV-IgM: Anficuerpo cIose IgM confro HDV. Presenfe en Io efopo ogudo. Indico infeccion
ocfuoI, ounque en Ios cosos cronicos puede persisfir en ffuIos defecfobIes por meses o oos.
-AntiHDV-IgS: onficuerpo cIose Ig0 confro HDV. Indico exposicion oI HDV, puede persisfir en ffuIos
defecfobIes por meses o oos. Su posifividod no indico infeccion ocfuoI por HDV.
AntiHDV : Anficuerpos fofoIes confro eI onfigeno deIfo. Su presencio indico exposicion oI virus.
HEV - VIRUS DE HEPATITIS E
-AntiHEV: Anficuerpos fofoIes confro HEV. Su presencio indico exposicion oI HEV.
19
TALA 1,Historiu de Iu ictericiu y de Ius Heputitis viruIes,
Descubrimiento de Virus Heputotrpicos Humunos,
ICTEPICIA ASOCIADA AL COMTACTO 8.C.-A.D.
HEPATITIS TPAMSMITIDA PAPEMTEPALMEMTE I88b
DISTIMCIOM EMTPE HEPATITIS A Y 8 I940s
DEFIMICIOM DE LA EPIDEMIOLO0IA DE HAV Y H8V I9b0s-I970s
DETECCIOM DE H8sAg I9o3
DESCU8PIMIEMTO DEL H8V I970
IDEMTIFICACIOM DEL HAV I973
CAPACTEPIZACIOM DEL HDV I977-I98o
DESCU8PIMIEMTO DEL HEV I980
AISLAMIEMTO Y CAPACTEPIZACIOM DEL HCV I98o-I989
TALA Z, Tuonomu viruI Senotipos y Serotipos de Ios Virus Heputotrpicos Humunos,
HAV HEV H8V HCV HDV
FomiIio Picornoviridoe Incierfo(^) Hepodnoviridoe FIoviviridoe DeIfoviridoe
0enero Hepofovirus sin nombre OrfhoHepodnovirus. sin nombre DeIfo-virus
Especie virus Hep. A Virus Hep. E virus Hep. 8 virus Hep. C Virus Hep. D
0enofipos 7 3 (en esfudio) o o 3
Serofipos I I (en esfudio) I 7 7
(^) Su ubicocion foxonomico es dificuIfoso, fiene corocfersficos de CoIiciviridoe y Togoviridoe.
TALA 3, Propiedudes de Ios Viriones de Ios Virus Heputotrpicos Humunos,
Propiedodes HAV HEV H8V HCV HDV
Formo Esferico esferico Esferico Esferico Esferico
Tomoo(nm) Z8 3Z 4Z 38-b0 43
EnvoIfuro Mo no Si Si Si
Simefro de Io copside Icosoedrico Icosoedrico Icosoedrico desc. Icosoedrico
Profenos de Io copside 3 I I I I
Sifio de Ensom bIodo CifopIosmo desc. CifopIosmo desc. CifopIosmo
FIofocion en .CsCI I.3Z-I.34 I.3b-I.40 I.3o I.Z9-I.3Z I.Zb
Z0
TALA 4, Propiedudes de Ios Senomus de Ios Virus Heputotrpicos Humunos,
Propiedodes HAV HEV H8V HCV HDV
Tipo oc. MucIeico PMA PMA DMA PMA PMA
Tipo de codeno Codeno simpIe Codeno simpIe codeno dobIe codeno simpIe Codeno simpIe
Lineor o circuIor Iineor Lineor CircuIor Iineor CircuIor
PoIoridod + + n.o. + -
Tomoo (Ib) 7.b 7.8 3.Z 9.4 I.7
Segmenfocion Mo Mo Mo Mo Mo
Sifio de
repIicocion
CifopIosmo Desconocido McIeo desconocido McIeo
n.o. : no opIicobIe.
TALA , Propiedudes ioIgicus de Ios Virus Heputotrpicos Humunos,
PROPIEDADES HAV HEV HV HCV HDV
TifuIo moximo/mI I0
8-9
7 I0
9-I0
I0
o-7
I0
I0-II
PpoI vo fronsmision FecoI oroI fecoI oroI porenf. sexuoI porenf. porenf.
Cronicidod Mo Mo si si si
Oncogenicidod Mo Mo si si 7
Curso fuIminonfe Poro Emboro;o roro roro no comn
MAPCADOPES
Anfigeno si(^) si(^) si(#) no si(#)
Anficuerpos si(#) si(#) si(#) si(#) si(#)
Acido nucIeico si(^)(#) si(^)(#) si(#) si(#) si(#)
Vocuno ComercioI Si Mo si no no
(^) en heces.
(#) en suero..
Z1
Z, - PAUTAS SENERALES DE PROCEDIMIENTO
Z,1, - OTENCION DE MUESTRAS PARA ESTUDIO SEROLOSICOS,
u}Lo exfroccion de songre se debe reoIi;or con eI pocienfe en oyunos. PreferibIemenfe con un oyuno no
menor o 4 hs.
b}CoIocor eI Io;o y eIegir Io veno odecuodo.
c}PeoIi;or Io osepsio de Io ;ono, opIicondo finfuro de iodo oI Z7 o oIcohoI iododo oI 37 o soIucion iodo -
povidono, en formo de crcuIos crecienfes. Dejor secor y eIiminor Iuego eI iodo con oIcohoI 707. Mo
focor Io ;ono uno ve; preporodo.
d}PeoIi;or Io venopunfuro, preferibIemenfe con sisfemo fipo Vocufoiner sin onficooguIonfe. De no ser
posibIe, usor jeringo y ogujo descorfobIe de un soIo uso. Exfroer I0-IZ mI de songre en coso de oduIfos,
y no menos de 4 mI en nios.
e}Si se uso jeringo y ogujo, descorfor Io ogujo de Io jeringo en un recipienfe odecuodo y frosvosor Io
muesfro o dos fubos, hociendoIo desIi;or por Ios poredes sin hocer espumo, fopor con fopon de gomo.
Los fubos deben esfor Iimpios, secos, rofuIodos con eI codigo eIegido y de ser posibIe esferiIes.
f}Dejor refroer eI cooguIo y cenfrifugor Ios fubos fopodos b minufos o 3000 rpm. Si se uso voriIIo poro
despegor Ios cooguIos onfes de cenfrifugor, se debe usor UMA VAPILLA PAPA CADA MUESTPA, poro
evifor confominocion enfre Ios mismos. Esfo es MUY IMPOPTAMTE ll
g}Tronsferir eI suero sobrenodonfe con pipefo, UMA PAPA CADA MUESTPA ll o con pipefo oufomofico
(UMA PUMTA PAPA CADA MUESTPA ll) o por voIcodo o un fubo pIosfico con fopo hermefico. Esfe no
debe confener hemofes en suspension, sino reoIi;or uno segundo cenfrifugocion.
h}Dividir Io muesfro en dos oIcuofos y conservor uno o -Z0" C o femp, (SEPOTECA) poro fufuros
esfudios. .MUY IMPOPTAMTE ll VOL MIM: I mI (oduIfos) o 0.b mI (neonofos).
i}Lo muesfro no debero procesorse si no esfo en condiciones odecuodos, esfos son: no confominocion, no
hemoIisis (sifuocion ideoI). Sino, Io muesfro debe desechorse y se soIiciforo nuevo muesfro.
g}Si se efecfo eI frosIodo de Io/s muesfro/s fuero deI Ioboroforio, se debero cumpIir con Ios normos
de bioseguridod que incIuyen eI uso de confenedores pIosficos hermeficos e irrompibIes. Si se frosIodon
Ios muesfros fuero deI hospifoI, deberon refrigerorse convenienfemenfe.
k}En coso de no poder reoIi;or oIguno de Ios deferminociones, envior Io oIcuofo, preferenfemenfe en eI
do de Io exfroccion, oI Loboroforio de Peferencio. De no ser posibIe su envo, conservorIo:
^Hosfo 7 dos: o 4"C. ^Por perodos mos proIongodos: congeIor o -Z0"C o o menor femperofuro.
Poro eI envo de muesfros poro Io defeccion de PMA HCV, deben fenerse en cuenfo Ios sig. poufos:
Ênvior como mnimo un miIiIifro (si es un pocienfe menor de b oos de edod: 0.b mI) de suero o pIosmo
onficooguIodo con EDTA o Cifrofo de Sodio. MUMCA COM HEPAPIMA lll
^Lo muesfro debe ser seporodo inmediofomenfe deI poquefe gIobuIor, ocepfondose como moximo 4
horos desde Io exfroccion de songre (fiempo en eI cuoI yo se produciro uno codo en Io viremio).
Mos oIIo de ese Iopso, Io muesfro se considero MO APTA poro su procesomienfo.
ÂIicuofor. Si se cuenfo con Ios medios necesorios, free;or inmediofomenfe Io froccion o ser enviodo.
Envior COM0ELADA (con hieIo seco). Si esfo no fuero posibIe conservor inmediofomenfe o +4"C y
envior refrigerodo, considerondose uno muesfro odecuodo, oqueIIo en Io cuoI enfre Io obfencion de Io
mismo y su procesomienfo hoyon fronscurrido como moximo 7 dos.
Ês fundomenfoI EMVIAP UM PESUMEM DE HISTOPIA CLIMICA Io mos compIefo posibIe, fodo ve;
que se derive uno muesfro.^MUMCA EMVIAP MUESTPAS LOS FIMES DE SEMAMA ll
^SIEMPPE TPATAP DE HACEPLO LOS LUMES O MAPTES ll
ZZ
Z,Z, - ALSORITMO DEL ESTUDIO DE MARCADORES VIRALES EN PACIENTES CON CUADROS
COMPATILES CON HEPATITIS VIRAL ASUDA {ADULTOS},
Si Ud. esfo en presencio de un pocienfe oduIfo con cuodro compofibIe con hepofifis viroI ogudo (osfenio,
odinomio, icfericio, hiporexio, nouseos, vomifos, y niveI de ocfividod de fronsominosos eIevodos por Io
menos b veces su niveI normoI), en primer Iugor se debe descorfor cuoIquier ofro enfidod copo; de
producir cuodros cInicos y humoroIes simiIores o Io hepofifis viroI ogudo como:
Lifiosis coIedociono
Concer de Poncreos
Corcinomo de Io vo biIior
Se inferrogoro sobre onfeced. epidemioI. y se soIiciforon morcodores de ocuerdo o Ios sig. poufos:
u} Anfecedenfes fronsfusionoIes (seis meses previos). Invesfigor:
onfiHCV. Si es negofivo,
H8sAg. Si es negofivo,
Pepefir eI onfiHCV o Ios 30 dos.
b} Drogodiccion endovenoso. Invesfigor:
onfiHCV y H8sAg.
c} Confocfo homosexuoI. Invesfigor:
H8sAg. Si es negofivo, onfiHCV.
d}Trofomienfos odonfoIogicos recienfes o porenferoIes. Invesfigor:
e}Esporodicos y sin onfecedenfes de HVA o HAV. Invesfigor:
En Ios cosos c, d, y e, onfe H8sAg negofivo y onfiHCV negofivo, repefir o Ios 30 dos.
f} Confocfo con fomiIiores infecfodos con HAV, H8V, o HCV. Pedir eI morcodor correspondienfe.
g} De ser fodos Ios morcodores negofivos, soIicifor Io deferminocion de onfiHAV IgM.
h} Descorfor Io posibiIidod de hepofifis oufoinmune con Io def. de morcodores de oufoinmunidod.
CompIefor con codo pocienfe uno Ficho CInico segn modeIo de Anexo I.
Z,3, - ALSORITMO DEL ESTUDIO DE MARCADORES VIRALES EN PACIENTES PEDIATRICOS
CON CUADRO COMPATILE CON HEPATITIS VIRAL ASUDA,
Si Ud. esfo en presencio de un pocienfe pediofrico con cuodro compofibIe con hepofifis viroI ogudo
(osfenio, fiebre, nouseos, vomifos, diorreo, doIor obdominoI, icfericio y niveI de ocfividod de
fronsominosos eIevodos), proceder de ocuerdo o Ios siguienfes poufos:
u} Hisforio CInico y onfecedenfes epidemioIogicos.
b} Anfecedenfes fronsfusionoIes (Ifimos seis meses).
c} SoIicifor en primer Iugor onfiHAV IgM.
d} Si esfe es negofivo, soIicifor: H8sAg y onfiHCV.
e} Si son negofivos, repefir oI mes: onfiHAV IgM y onfiHCV.
f} Si son fodos negofivos y sin onfecedenfes epidemioIogicos reoIi;or:
Ecogrofo y
Morcodores de oufoinmunidod: FAM, AML, oLIM.
Z3
3,- FUNDAMENTOS Y TECNICAS UTILIZADAS EN EL DIASNOSTICO DE HEPATITIS
VIRALES
3,1,- METODOS SEROLOSICOS
En eI Ioboroforio diognosfico de hepofifis viroIes se uson fecnicos seroIogicos, que nos permifen
defecfor Io presencio de onficuerpos y/o onfgenos viroIes en eI suero deI pocienfe, os como fecnicos
de bioIogo moIecuIor que nos permifen defecfor Io presencio de genomos viroIes en circuIocion.
Hoy en do Io fecnico mos usodo en eI diognosfico seroIogico de hepofifis es eI ELISA (En;yme Linked
Immuno Sorbenf Assoy) o en;imoinmunoensoyo (EIE).
Hoy muchos diseos posibIes de un ELISA. Lo eIeccion dependero, enfre ofros focfores, deI morcodor,
de Io disponibiIidod de reocfivos y de Io sensibiIidod y precision requeridos.
Determinucin de Antgenos
Se ufiIi;on en generoI diseos deI fipo "no compefifivos". En esfe fipo de ensoyos se pegon o superficie
soIidos (fosos de pIoco o perIos de poIiesfireno o poIiviniIo o en poredes de fubos) onficuerpos
onfionfgeno o deferminor. Luego se ogrego Io muesfro que confiene Ios onfgenos o deferminor. EI
compIejo se compIefo con eI ogregodo de un segundo onficuerpo onfionfgeno morcodo con uno en;imo
("conjugodo"). Esfo union se reveIo con eI ogregodo deI susfrofo de Io en;imo y eI cromogeno
correspondienfe.
Los diseos "compefifivos" no se opIicon en Io deferminocion de onfgenos, fundomenfoImenfe por Ios
probIemos inherenfes o Io obfencion de onfgenos purificodos de bueno coIidod poro morcor.
Determinucin de Anticuerpos
u} Mtodos competitivos
Lo muesfro que confiene Ios onficuerpos o deferminor junfo con un onficuerpo de iguoI especificidod
morcodo con uno en;imo ("conjugodo") se ogregon o Io fose soIido que confiene eI onfgeno inmoviIi;odo.
Cuonfo moyor confidod de onficuerpos hoyo en Io muesfro, menor confidod de conjugodo se uniro o Io
fose soIido, resuIfondo en uno seoI menor cuondo se ogregue eI susfrofo de Io en;imo y eI
correspondienfe cromogeno.
b} Mtodos no competitivos
EIisu de Cupturu : En esfe fipo de diseo, Io muesfro o ensoyor se incubo con Io fose soIido o Io que se
Ie unio eI onfgeno, yo seo por : o)obsorcion direcfo de onfgeno, b) por copfuro de onficuerpos.
o) EIiso de copfuro por obsorcion direcfo de onfgeno (sondwich simpIe) : Los onfgenos se pegon oI
soporfe soIido. Luego se ogrego Io muesfro, o uno diIucion de Io mismo, en Io que se encuenfron Ios
onficuerpos o defecfor. Esfo union onfgeno-onficuerpo es reveIodo medionfe eI ogregodo de un
onficuerpo con especificidod poro oIguno en porficuIor o fodos Ios inmunogIobuIinos humonos,
morcodo con uno en;imo ("conjugodo"). Esfe "sondwich" os formodo, si Io muesfro confeno Ios Ac
buscodos, se evidencioro por eI ogregodo deI susfrofo de Io en;imo que en presencio de un
cromogeno desorroIIoro coIor en eI medio de reoccion.
b) EIiso por copfuro de onficuerpo (sondwich dobIe). UfiIi;o dos onficuerpos : uno pegodo o Io
Z4
superficie soIido ("onficuerpo de copfuro") y ofro morcodo con en;imo ("conjugodo"). EI onficuerpo
de copfuro, de especificidod hocio fodos o oIguno en porficuIor inmunogIobuIino humono, copfo deI
suero deI pocienfe fodos Ios onficuerpos correspondienfes. EI ogregodo deI onfgeno oforgo
especificidod o Io reoccion. Lo segundo porfe deI "sondwich" Io consfifuye un onficuerpo onfi-
onfgeno morcodo con en;imo ("conjugodo"). Esfo union se reveIo, como en Ios cosos onferiores, por
eI ogregodo deI susfrofo de Io en;imo y un cromogeno odecuodo.
Si bien hoy en do Io moyoro de Ios equipos de ELISA usodos se odquieren comercioImenfe, es posibIe
desorroIIorIos en eI Ioboroforio.
AIgunos de Ios focfores o fener en cuenfo en eI diseo "orfesonoI" de esfos mefodos son:
Superficie usodo : son preferibIes Ios superficies de poIiesfireno, que fienen bueno copocidod de unir
profenos y bojo obsorboncio de fondo.
Condiciones de pegodo de Ios onfgenos o onficuerpos : deben eIegirse Ios condiciones odecuodos que
evifen Ios uniones inespecficos. EI uso de reocfivos bIoqueonfes que confengon oIbmino humono y de
defergenfes en Ios soIuciones de Iovodo y/o soIuciones de diIucion de muesfros confribuyen o eIIo.
EIeccion de en;imos defecforos y sisfemos susfrofo-cromogeno : Ios en;imos mos ufiIi;odos son Io
peroxidoso de robono y Io fosfofoso oIcoIino. Si bien Io primero es Io mos economico de Ios en;imos
disponibIes, eI monejo de sus susfrofos sueIe ser mos deIicodo. Poro eI coso de Io fosfofoso oIcoIino, eI
susfrofo mos ufiIi;odo es eI p-nifrofeniI fosfofo. Poro eI coso de Io peroxidoso, eI sisfemo HZ0Z con
orfofeniIendiomino como reocfivo cromogeno es eI mos ufiIi;odo.
DesorroIIoremos o confinuocion Ios fecnicos operoforios poro Io reoIi;ocion de Ios deferminociones
seroIogicos mos frecuenfes en eI Ioboroforio. AqueIIos fecnicos que fueron desorroIIodos
orfesonoImenfe en eI Loboroforio MocionoI de Peferencio seron descripfos en formo compIefo poro ser
puesfos o punfo en Ios Ioboroforios que os Io deseen. De Ios que no fueron desorroIIodos, se describiro
eI fundomenfo de Ios mefodos comercioIes de uso mos frecuenfe en eI mercodo.
3,1,1,- DETECCION DE Ac, ESPECIFICOS CONTRA HAV CLASE IgS, {untiHAV-IgS}
Fundumento:
Lo fecnico ufiIi;odo es un en;imoinmunoensoyo, ufiIi;ondo eI principio de sondwich dobIe. EI Ac de
copfuro, odsorbido o Io superficie de uno poIicubefo o perIo, con especificidod onfi-gommo, copfuro Ios
Ac de cIose Ig0 presenfes en eI suero. Luego se ogrego Io soIucion confeniendo eI virus o froccion
onfigenico fornondo especfico Io reoccion. Con eI ogregodo posferior deI Ac especfico, conjugodo o uno
en;imo, se compIefo dicho compIejo. Esfe se reveIo por eI ogregodo deI susfrofo de Io en;imo ufiIi;odo y
un cromogeno poro visuoIi;or Io reoccion.
Tcnicu:
u} SensibiIi;or pIocos de PVC incubondo I8-ZZ hs o femperofuro ombienfe, con eI Ac onfi-gommo diI.
I:I000 en buffer CO3~/COH3-, 0.0b M pH 9.b.
b} Lovor fres veces con P8S(0.0IM)-TwZ0(0.0b7). Desecor Z4 hrs como mnimo oI voco y seIIor
(conservor o +4"C hosfo su uso).
c} Incubor I00 I de uno diIucion de suero I:Z000 en P8S-8SA 0.o7 duronfe uno horo o 40"C en 8M.
Proceder de iguoI formo con sueros confroIes posifivos y negofivos.
d} Lovor cuofro veces con P8S-Tw.
e} Agregor I00 I de soIucion confeniendo virus de hepofifis A. Incubor o femperofuro ombienfe
duronfe I8- ZZhs.
f} Lovor cinco veces con P8S-Tw.
g} Agregor I00 I de conjugodo onfiHAV: Peroxidoso e incubor en 8M o 40"C duronfe dos horos.
Z
h} Lovor seis veces con P8S-Tw.
i} Agregor I00 I de soIucion susfrofo/cromogeno recien preporodo (0.04g de o-feniIendiomino (OPD) +
0.04mI de HZOZ 307 en I00mI de buffer fosfofo/cifrofo 0.Ob M pH 4.9-b.I). Incubor Ib-30 min. o
femperofuro ombienfe en oscuridod.
g} 8Ioqueor Io reoccion con I00 mI de ocido suIfrico 4 M. Leer en especfrofofomefro o 49Z nm frenfe o
bIonco de susfrofo.
DesurroIIo de coIor: POSITIVO
No desurroIIo de coIor: Negutivo
CIcuIo de resuItudos
VuIor de Corte : Z,I x promedio obsorboncio deI confroI negofivo.
Interpretucin de ResuItudos : Muesfros cuyos obsorboncios seon menores que eI voIor de corfe son
considerodos negofivos. Muesfros cuyos obsorboncios son moyores que eI voIor de corfe son
considerodos posifivos. Muesfros cuyos voIores esfen denfro de +/- eI I07 deI voIor de corfe deben ser
repefidos.
3,1,Z,-DETECCION DE Ac ESPECIFICOS CONTRA HAV CLASE IgM, {untiHAV-IgM}
Fundumento:
Lo fecnico ufiIi;odo es un en;imoinmunoensoyo ufiIi;ondo eI principio de sondwich dobIe. EI Ac de
copfuro con especificidod onfi-u, copfuro Ios Ac de cIose IgM presenfes en eI suero. Luego se ogrego eI
virus o froccion onfigenico, fornondo especfico Io reoccion. Con eI ogregodo de Ac especfico conjugodo
o uno en;imo, se compIefo dicho compIejo. Esfe se reveIo por eI ogregodo deI susfrofo de Io en;imo
ufiIi;odo y un cromogeno poro visuoIi;or Io reoccion. EI desorroIIo de coIor indicoro Io formocion deI
sondwich y posifividod de Io reoccion.
Tcnicu:
u,- SensibiIi;or pIocos de PVC incubondo I8 o ZZ hrs o femperofuro ombienfe con eI Ac onfi-u diIudo
I:I000 en buffer C03~/CO3H-, 0.0b M, pH 9,b.
b,- Lovor fres veces con P8S-Tw(0,0b7). Desecor oI voco y seIIor.
c,- Incubor I00 I de uno diIucion de suero (I:Z000) en P8S-8SA 0,o7 duronfe uno horo o 40" en 8M.
Proceder de iguoI formo con sueros confroIes posifivos y negofivos.
d,- Lovor cuofro veces con P8S-TW.
e,- Agregor I00 I de soIucion confeniendo virus de hepofifis A e incubor o femperofuro ombienfe
duronfe I8/ZZ hrs.
f,- Lovor b veces con P8S-TW.
g,- Agregor I00 I de soIucion de conj. onfiHAV: peroxidoso e incubor en 8M o 40"C duronfe Z hs.
h,- Lovor seis veces con P8S-TW.
i,- Agregor I00 I de soIucion susfrofo /cromogeno recien preporodo (0,04 g de 0-feniIendiomino
(OPD) + 0,04 mI de HZOZ 307 en I00 mI de buffer fosfofo-cifrofo 0.bM, pH 4,9-b,I.) Incubor Ib/30
minufos o femperofuro ombienfe en oscuridod.
g,- 8Ioqueor Io reoccion con I00 I de HZSO4 4M, Ieer en especfrofofomefro o 49Z nm.
No desurroIIo de coIor: negutivo
Z
VuIor de Corte: Z,I x promedio obsorboncio confroI negofivo .
Interpretucin de ResuItudos : muesfros cuyos voIores de obsorboncios seon menores que eI voIor
de corfe son considerodos negofivos. Muesfros cuyos voIores de obsorboncios seon moyores que eI voIor
de corfe son considerodos posifivos. Muesfros cuyos voIores de obsorboncios esfen denfro de +/- eI
I07 deI voIor de corfe deberon ser repefidos.
Observuciones : Ios voImenes de Ag y conjugodo pueden ser modificodos o b0 I, siempre y cuondo
Ios confroIes respondon bien o esfo voriocion.
3,1,3,- DETECCION DE Ac ESPECIFICOS CONTRA EL Ag CORE DEL HV, {untiHc}
Fundumento:
Lo fecnico ufiIi;odo es un en;imoinmunoensoyo compefifivo en eI cuoI eI onfgeno H8c se hoIIo unido o Io
fose soIido. EI onfiH8c presenfe en Io muesfro o onoIi;or compefiro con eI onfiH8c morcodo con
peroxidoso (onfiH8c:Px), por Ios sifios onfigenicos deI H8cAg pegodo en eI soporfe soIido. Si hoy
onficuerpos onfiH8c en Io muesfro o onoIi;or esfos bIoqueoron Ios sifios onfigenicos evifondo Io union
deI onfiH8c:Px, Io que se evidencioro por eI no desorroIIo deI coIor, cuondo se ogregue eI susfrofo de Io
en;imo y eI cromogeno correspondienfe.
Tcnicu:
u,- SensibiIi;or uno pIoco de PVC incubondo I8/ZZ hs o femperofuro ombienfe, con un pooI de sueros
humonos posifivos poro onfiH8c, diI. I:30.000 en buffer CO3~/COH3-, 0.0bM y pH 9.b.
b,- Lovor 3 veces con P8S(0.0IM)-TwZ0(0.0b 7)
c,- CoIocor b0-I00 I de H8cAg incubor I8/ZZ hs o femperofuro ombienfe.
d,- Lovor fres veces con P8S-Tw.
e,- Desecor como mnimo Z4 hrs oI voco y seIIor. 0uordor o +4"C (heIodero comn).
f,- CoIocor I00 I de conjugodo (onfiH8c:Px) en codo foso, ogregor, me;cIondo, I0I de suero. Idem
con Ios confroIes negofivo y posifivo.
g,- Incubor o femperofuro ombienfe duronfe I8/ZZ hs o Z hs en 8M o 40"C.
h,- Lovor o veces con P8S-Tw.
i,- Agregor I00 I de susfrofo/cromogeno recien preporodo (0.04 g de o-feniIendiomino (OPD) + 0.04
mI de HZ0Z 307 en I00 mI de buffer fosfofo-cifrofo 0.0bM, pH 4.9/b.I)
g,- Incubor Ib/30 minufos o femperofuro ombienfe en oscuridod.
k,- 8Ioqueor Io reoccion con I00I de HZSO4 4M. Leer en especfrofofomefro o 49Z nm.
DesurroIIo de coIor : negutivo
No desurroIIo de coIor : POSITIVO
VuIor de Corte : (0.4 x Abs C Meg.)+(0.o x Abs C Pos.)
Interpretucin de ResuItudos : Muesfros cuyos voIores de obsorboncios seon moyores que eI voIor
de corfe son considerodos negofivos. Muesfros cuyos voIores de obsorboncios son menores que eI voIor
de corfe son considerodos posifivos. Muesfros cuyos voIores de obsorboncios esfen denfro de +/- eI
I07 deI voIor de corfe deben ser refesfeodos.
Z7
3,1,4,- DETECCION DE Ac ESPECIF, CONTRA Ag CORE DEL HV CLASE IgM {untiHc-IgM}
Fundumento:
Lo fecnico ufiIi;odo es un en;imoinmunoensoyo, ufiIi;ondo eI principio de ensoyo de sondwich dobIe. EI
Ac de copfuro con especificidod onfi-u, copfo Ios onficuerpos de cIose IgM presenfes en eI suero. Luego
se ogrego eI onfgeno, fornondo especfico Io reoccion. Con eI ogregodo posferior deI Ac especfico
conjugodo o uno en;imo se compIefo dicho compIejo. Esfe se reveIo por eI ogregodo deI susfrofo de Io
en;imo ufiIi;odo y un cromogeno poro visuoIi;or Io reoccion. EI desorroIIo de coIor indicoro Io formocion
deI sondwich y posifividod de Io reoccion o muesfro.
3,1,,- DETECCION DE Ag DE SUPERFICIE DEL HV
Fundumento:
Lo fecnico ufiIi;odo es un en;imoinmunoensoyo, ufiIi;ondo eI principio de sondwich simpIe. EI Ac de
copfuro onfiH8s, copfo eI onfgeno de superficie (H8sAg) presenfe en Io muesfro. Con eI ogregodo
posferior de Ac especfico conjugodo o uno en;imo se compIefo eI compIejo. Esfe se reveIo por eI
ogregodo deI susfrofo de Io en;imo ufiIi;odo y un cromogeno poro visuoIi;or Io reoccion. EI desorroIIo de
coIor indicoro Io formocion deI sondwich y Io posifividod de Io reoccion
Tcnicu:
u,- SensibiIi;or pIocos de PVC incubondo I8/ZZhs. o femperofuro ombienfe, con eI onficuerpo onfiH8s
(de cobro) diI. I:4000 en buffer CO3~/CO3H-, 0,0b M. pH 9.b.
b,- Lovor fres veces con P8S-Tw (0.0b7). Desecor oI voco y seIIor. 0uordor o + 4 " (heIodero comn).
c,- Incubor I00 I de suero o femperofuro ombienfe duronfe I8-ZZhs. Proceder de iguoI formo con
sueros confroIes posifivos y negofivos.
d,- Lovor cuofro veces con P8S-Tw (0.0b7).
e,- Agregor I00 I de conjugodo onfiH8s: Peroxidoso e incubor o 8M o 40"C duronfe uno horo.
f,- Lovor seis veces con P8S-Tw (0.0b7).
g,- Agregor I00 I de soIucion susfrofo/cromogeno recien preporodo (0.04g de o-feniIiendiomino (OPD)
+ 0.04 mI de HZOZ 307 en I00mI de buffer fosfofo-cifrofo 0.b M pH 4.9-b.I). Incubor Ib/30 minufos
o femperofuro ombienfe en oscuridod
h,- 8Ioqueor Io reoccion con I00 I de ocido suIfrico 4M. Leer en especfrofofomefro o 49Z nm.
DesurroIIo de CoIor: POSITIVO
No desurroIIo de coIor: Negutivo
VuIor de Corte: Z,I x Abs. ConfroI Megofivo .
Interpretucin de ResuItudos: Muesfros cuyos obsorboncios seon menores que eI voIor de corfe son
considerodos posifivos. Muesfros cuyos voIores esfen denfro de +/- I07 deI voIor de corfe deben ser
repefidos.
Pruebu confirmutoriu puru HsAg,
o.- Poro confirmor Io posifividod de H8sAg se debe repefir Io deferminocion corriendo en poroIeIo Io
muesfro neufroIi;odo y sin neufroIi;or,
b.- MeufroIi;ocion : me;cIor por pipefeo Ib0 uI de suero o confirmor con b0 uI de gommogIobuIino
Z
hiperinmune confro H8V (H8Ig).
c.- Incubor o femperofuro ombienfe duronfe I8 - ZZ hs o I h en 8M o 40 "C. Luego reoIi;or eI ensoyo.
d- Uno muesfro confirmo su posifividod si en Io muesfro neufroIi;odo se observo uno disminucion moyor
oI b07 en eI voIor de obsorboncio respecfo oI voIor de obsorboncio de Io muesfro sin neufroIi;or.
3,1, DETECCION DE Ac ESPECIFICOS CONTRA EL Ag DE SUPERFICIE DEL HV, {untiHs}
Fundumento:
Lo fecnico ufiIi;odo es un en;imoinmunoensoyo, ufiIi;ondo eI principio de sondwich simpIe.
Los Ac onfi8Hs presenfes en Io muesfro son copfodos por eI Ag, (H8sAg) que se encuenfro unido o Io
fose soIido. EI compIejo se compIefo con eI ogregodo de conjugodo H8sAg-8iofino y
onfibiofino:Peroxidoso. Esfe se reveIo por eI ogregodo deI susfrofo de Io en;imo ufiIi;odo y un
cromogeno poro visuoIi;or Io reoccion. EI desorroIIo de coIor indicoro posifividod de Io reoccion.
Tcnicu:
u,- SensibiIi;or pIocos de PVC con onficuerpos poIicIonoIes de cobro onfiH8s diI I:4000 en
CO3~/COH3-, 0.0b M pH 9.b, 8/ZZhs. o femperofuro ombienfe.
b,- Lovor fres veces con P8s-Tw (0.0b7)
c,- Agregor I00 I de H8sAg, incubor de I8/ZZhs o femperofuro ombienfe
d,- Lovor fres veces con P8s-Tw (0.0b7).
e,- Desecor oI voco y seIIor. 0uordor o + 4" (heI. comn).
f,- Incubor I00 I de suero, confroIes posifivos y negofivos duronfe I8/ZZhs o femperofuro ombienfe.
g,- Lovor cuofro veces con P8s-Tw. Agregor I00 I de conjugodo( b0 I de H8sAg-8iofino +b0I de
onfi8iofino-Px).
i,- Lovor seis veces con P8s-Tw (0.0b7).
g,- Agregor I00 I de susfrofo/cromogeno recien preporodo (0.04g de o-feniIendiomino + 0.04mI de
HZOZ 307 en I00mI de buffer fosfofo-cifrofo 0.b M pH 4.9-b.I). Incubor de Ib o 30 minufos o
femperofuro ombienfe, en oscuridod.
k,- 8Ioqueor Io reoccion con I00 pI de ocido suIfrico 4M. Leer en especfrofofomefro o 49Z nm.
No desurroIIo de coIor: negutivo
VuIor de Corte: Z,I x Abs. ConfroI Megofivo .
Interpretucin de ResuItudos: Muesfros cuyos obsorboncios seon menores que eI voIor de corfe son
considerodos posifivos. Muesfros cuyos voIores esfen denfro de +/- I07 deI voIor de corfe deben ser
refesfeodos.
3,1,7,- DETECCION DE Ag e {HeAg} DEL HV, {co merciuI}
Fundumento:
Lo fecnico ufiIi;odo es un en;imoinmunoensoyo bosodo en eI principio de sondwich simpIe. Lo fose soIido
consisfe en firos de poIiesfireno recubierfos con onficuerpo onfiH8e humono. EI H8eAg presenfe en eI
suero se une o Io fose soIido , eI compIejo se compIefo con eI ogregodo deI conjugodo onfiH8e-Px. EI
reveIodo se reoIi;o por eI ogregodo deI susfrofo de Io en;imo ufiIi;odo y un cromogeno poro visuoIi;or Io
reoccion. EI desorroIIo de coIor indicoro posifividod de Io reoccion.
Z9
3,1,,- DETECCION DE Ac ESPECIFICOS CONTRA EL Ag e DEL HV, {untiHe} {comerciuI}
Fundumento:
Lo fecnico ufIi;odo es un en;imoinmunoensoyo bosodo en eI principio de sondwich simpIe con
neufroIi;ocion. Lo muesfro es incubodo con eI neufroIi;onfe (H8eAg), y Io fose soIido (Io mismo deI
ensoyo onferior), en Io cuoI se hoIIon fijos Ios onficuerpos onfiH8e. EI conjugodo ufiIi;odo es un
onficuerpo onfiH8e conjugodo con peroxidoso. EI reveIodo se reoIi;o por eI ogregodo deI susfrofo de Io
en;imo ufiIi;odo y un cromogeno poro visuoIi;or Io reoccion. EI desorroIIo de coIor en esfe coso indicoro
que Io reoccion es negofivo.
3,1,9,- DETECCION DE Ac ESPECIFICOS CONTRA EL HDV {untiHDV} {comerciuI}
Fundumento:
Lo fecnico es un en;imoinmunoensoyo compefifivo, en eI cuoI en Io fose soIido se encuenfro eI onfgeno
deIfo inmoviIi;odo, y se ufiIi;on onficuerpos onfi-DeIfo conjugodos con peroxidoso, Ios cuoIes
compefiron con Ios onficuerpos presenfes en Io muesfro por Ios sifios onfigenicos.
EI reveIodo se reoIi;o por eI ogregodo deI susfrofo de Io en;imo ufiIi;odo y un cromogeno poro visuoIi;or
Io reoccion. Lo posifividod de Io reoccion se do por Io ousencio de coIor.
3,1,10,- DETECCION DE Ac ESPECIFICOS CONTRA EL HCV ,{untiHCV} {cIuse IgS}
Fundumento:
Lo fecnico ufiIi;odo es un en;imoinmunoensoyo bosodo en eI principio de sondwich simpIe.
EI onfgeno deI virus de hepofifis C (fonfo regiones esfrucfuroIes como no esfrucfuroIes) se encuenfro
unido o Io fose soIido.EI conjugodo ufiIi;odo es un onficuerpo onfi-Ig0 humono unido o peroxidoso.
EI reveIodo se reoIi;o por eI ogregodo deI susfrofo de Io en;imo ufiIi;odo y un cromogeno poro visuoIi;or
Io reoccion.EI desorroIIo de coIor indicoro posifividod de Io reoccion.
3,1,11,- DETECCION DE Ac CONTRA EL HCV {cIuse IgS}
METODOS SUPLEMENTARIOS,
Debido o Io exisfencio de reocciones foIsos posifivos en Ios mefodos de fomi;oje usodos
ocfuoImenfe poro Io deferminocion de onficuerpos onfiHCV, en oIgunos cosos es necesorio confirmor Ios
muesfros posifivos por mefodos supIemenforios.
EI Lineor Inmune Assoy (LIA) poro HCV es un en;imoinmunoensoyo que ufiIi;o como Ag de copfuro,
epifopes Iineori;odos en pepfidos sinfeficos, inmoviIi;odos en uno firo de nifroceIuIoso o nyIon,
bosondose en eI principio de "sondwich simpIe" poro Io defeccion de Ac. Lo pruebo defecfo onficuerpos
especficos cIose Ig0 confro Ios profenos fijodos o Io firo deI HCV.
Lo muesfro de suero, diIudo con fompon odecuodo, es incubodo con Io firo. Lo reoccion onfgeno-
onficuerpo se evidencio con eI ogregodo de un conjugodo onfi-Ig0 humono morcodo con fosfofoso
oIcoIino. EI reveIodo se reoIi;o con eI ogregodo deI susfrofo y cromogeno (bromocIorindoIfosfofo
(8CIP)). EI desorroIIo de coIor en Ios Iugores donde Ios Ag hon sido fijodos indico Io presencio de
onficuerpos especficos. EI pofron de bondeo en codo coso referido oI criferio de posifividod de Io
pruebo confirmoro o no Io reocfividod de Io muesfro
Ofro mefodo simiIor disponibIe en eI comercio es eI Pecombinonf Inmune 8Ioffing Assoy (PI8A)
que ufiIi;o onfgenos obfenidos por recombinocion genefico como Ag de copfuro en Iugor de pepfidos
sinfeficos. Tombien poro confirmor uno reocfividod posee un criferio de posifividod bosodo en eI
bondeo obfenido. EI fundomenfo de Io reoccion es eI mismo que poro eI LIA.
30
3,Z,-IOLOSIA MOLECULAR APLICADA AL DIASNOSTICO
3,Z,1 - Deteccin de HCV RNA por RT-nested PCR
Fundumento:
Lo reoccion de poIimeroso en codeno (PCP) opIicodo oI diognosfico permife Io defeccion de genomo
viroI en muesfros cInicos, su defeccion es imporfonfe en :
^fronsmision verficoI,
^periodo de venfono seroIogico
înfeccion ogudo,
^pocienfes inmunocompromefidos,
^resoIucion de pruebos supIemenforios indeferminodos,
^moniforeo de Io respuesfo oI frofomienfo.
Lo reoccion de poIimeroso en codeno (PCP) permife ompIificor un segmenfo de DMA que se encuenfro
enfre dos regiones de secuencio conocido. Como se frofo de un virus con genomo PMA se debe reoIi;or
primero un poso de refro-fronscripcion poro obfener DMA copy y Iuego primer round de ompIificocion,
y como se frofo de un virus con bojo viremio, en oIgunos cosos se debe reoIi;or un segundo round de
ompIificocion, con cebodores infernos o Ios deI primer round (nesfed PCP).
Tcnicu
A I00 I suero ogregor b00 I soIucion desnofuroIi;onfe (confeniendo 4M fiocionofo de guonidino, Zb
mM cifrofo de sodio pH:7, 0,b7 sorcosiI ), b00 I fenoI equiIibrodo con oguo frofodo con DEPC, b0 I de
MoAc ZM pH 4.0 y Z-mercopfo-efonoI 0,I M. Me;cIor con vorfex inmediofomenfe. Incubor 30 o 37"C.
Agregor Ib0 I de cIoroformo. Me;cIor y enfrior b. Despues de cenfrifugor, precipifor Io fose
superior con un voIumen iguoI de isoproponoI en presencio de Z0 ug de Dexfron T b00 o Z0"C. Lovor eI
peIIef resuIfonfe con efonoI oI 707 fro y resuspender en 9 I de oguo-DEPC y 400 ng de rondom
primers (pd(M)o). DesnofuroIi;or o 70" por I0 minufos.
LIevor o Z0I de voIumen finoI con soIucion de refrofronscripcion confeniendo Ix buffer MMLV, I0 mM
DTT, 0,Z mM dMTPs, inhibidor de ribonucIeoso y I80 U de fronscripfoso reverso MMLV. Incubor Io
me;cIo de reoccion por o0' o 40", Iuego b' o 9b" y enfrior sobre hieIo.
AmpIificor esfe cDMA en un voI. fofoI de b0 I confeniendo buffer Ix Toq, I,b mM MgCIZ, 0,4 uM de
codo uno de Ios cebodores poro Io region b' UTP deI genomo (b' CCC-T0T-0A0-0AA-CTA-CT0-TCT-
TCA-C0C-3' y b' 00T-0CA-TCT-AC0-A0A-CCT-3') y I,b U de Toq poIimeroso
Progromocion deI cicIodor (Perkin EImer Z400): b' o 9b" , 40 cicIos de 4b" o 9b", 4b " o bb" y un minufo
o 7Z", con b' finoIes o 7Z".
Los producfos de PCP se onoIi;on por eIecfroforesis en un geI de ogoroso oI Z7 con bromuro de efidio y
se visuoIi;on por fIuorescencio uIfrovioIefo. En coso de resuIfor negofivo, ompIificor Z I de Io me;cIo en
un voIumen finoI de b0 I de me;cIo de segundo ompIificocion confeniendo: buffer Ix Toq Z,b mM
MgCIZ, 0,4 uM de Ios primers infernos (b'TCT-A0C-CAT-00C-0TT-A0T-0C0-A0T-0T 3' y b CAC-
TC0-CAA-0CA-CCC-TAT-CA0-0CA-0T 3) 0.Z Mm dMTPs y I,b U de Toq poIimeroso PeoIi;or 40
cicIos de ompIificocion como en eI primer round. Los producfos de reoccion se visuoIi;on como en eI
primer round.
3,Z,Z,- DETECCION DE HV DNA POR HIRIDIZACION MOLECULAR.
Fundumento:
Lo deferminocion deI DMA deI virus de Io hepofifis 8 es un indicodor de Io repIicocion viroI. Esfo es
imporfonfe en eI seguimienfo de pocienfes H8sAg + y AnfiH8e +, en Io evoIuocion de respuesfo oI
31
frofomienfo y en Io defeccion de mufonfes. Los diversos fecnicos disponibIes poseen niveIes de
sensibiIidod muy voriodos. Se debe fener cuidodo de eIegir un mefodo con Io sensibiIidod odecuodo de
foI formo que no esfemos defecfondo H8V DMA en pocienfes sin enfermedod osociodo oI virus., Io que
podro confundir Io evoIuocion deI mismo. Lo fecnico eIegido debe ser copo; de permifir eI seguimienfo
cuonfifofivo o semicuonfifofivo en respuesfo oI frofomienfo. En esfe senfido Io hibridocion moIecuIor es
un mefodo odecuodo.
Tcnicu
u} Exfroccion de DMA : Ib0 I de suero son exfrodos con Z00 I de MoOH IM, I0' o ob"C. Lo soIucion
resuIfonfe es bIofeodo en uno membrono de nyIon usondo un sisfemo de fiIfrocion oI voco (SLOT-8LOT
o DOT-8LOT). EI DMA es fijodo o Io membrono por coIor en voco (Ih o 80"C).
b} Hibridi;ocion: prehibridi;or Io membrono duronfe I hr o 40"C en soIucion de hibridi;ocion
(formomido b07, SSC bX, soIucion Denhordf I0X, SDS 0,I7, espermo de soImon 0,I mg/mI).(Denhordfh
b0X: I7 serooIbmino bovino, I7 FicoII, I7 poIiviniIpirroIidono)(SSC:0,IbM CIMo, 0,0Ib M cifrofo
frisodico, pH 7,0)
Agregor Io sondo correspondienfe oI genomo compIefo deI VH8 morcodo con biofino, previomenfe
desnofuroIi;odo (en ebuIIicion I0').
Se incubo Io-Z0 hs o 40" C con ogifocion. Se reoIi;o Iuego I Iovodo o femperofuro ombienfe con SSC
ZX/SDS 0,I7, y Iuego ofro o ob"C con SSC 0.IX/SDS 0,I7, fodos Ios Iovodos con ogifocion.
c}PeveIodo : se bIoqueo Io membrono con soIucion bIoqueonfe (Tris I00mM, pH:7,b, CIMo I00mM, SDS
I7, Peocfivo 8Ioqueonfe Z7. Se incubo I horo o 40"C con ogifocion.
Se ogrego Iuego en Io mismo soIucion, eI conjugodo sfrepfovidino-fosfofoso oIcoIino, en Io diIucion de
uso. Se incubo Z hs o 40"C con ogifocion.
Se reoIi;on Z Iovodos o femperofuro ombienfe con soIucion Tris I00 mM, pH:7,b, CIMo 300 mM,
TweenZ0 0,b7, y Iuego b Iovodos o femperofuro ombienfe con soIucion Tris I00 mM, pH:9,b, CIMo
I00mM, CI
Z
Mg I0mM. Todos Ios Iovodos con ogifocion.
Se ogrego Iuego eI sisfemo susfrofo-cromogeno (8CIP (bromocIoroindoIiI fosfofo) y M8T (o;uI de
fefro;oIium))en I0 mI deI buffer de Iovodo oIcoIino, que en presencio de Io en;imo fosfofoso oIcoIino,
produciron uno precipifocion que permife visuoIi;or Io seoI de uno reoccion posifivo.
d} Semicuonfificocion : puede reoIi;orse, si se ufiIi;o eI sisfemo SLOT-8LOT en eI bIofeo. Los seoIes
obfenidos pueden semicuonfificorse por comporocion visuoI con Io seoI obfenido con pofrones de suero
de concenfrocion conocido, o cuonfificorIos con un densifomefro.
3,Z,3,- OTRAS MET, MOLEC, APLICADAS AL DIAS, DE LAS HEPATITIS VIRALES,
Los dos grondes Iimifociones de Io fecnico de PCP (Io dificuIfod poro cuonfificor en formo reproducibIe
y Io fociIidod de confominor muesfros con moferioI previomenfe ompIificodo) hon IIevodo o numerosos
compoos o diseor mefodoIogos que superen esfos inconvenien fes.
Por ofro porfe, dodo que eI conocimienfo deI genofipo deI HCV presenfe en un individuo infecfodo
fiene imporfoncio pronosfico, se disponen de mefodos que permifen genofipificor o Ios porfodores deI
virus.
En Ios cuodros siguienfes onoIi;omos brevemenfe esfos fecnoIogos que permifen cuonfificor o
semicuonfificor PMA de HCV y genofipificor.
3Z
METODOS DE AMPLIFICACION PARA LA DETECCION DE HCV-RNA
Peferencios
(I) Okomofo ef oI, I990.
(Z) Simmonds ef oI, I990.
(3) Ioneko ef oI, I99Z.
(4) Ishiyomo ef oI, I99Z.
(b) Iievifs ef oI, I99I.
(o) Urdeo ef oI, I993.
METODO AMPLIFIC
.
DETECCIOM 8PEVE DESCPIPCIOM
Peoccion en codeno
de Io poIimeroso
8Ionco
(PMA deI
HCV)
CuoIifofivo (I)Se exfroe eI PMA ,eI cDMA se sinfefi;o por PT. Se
uso un por de cebodores (simpIe deferminocion) o en coso
de resuIfor engofivo, se reoIi;o uno segundo ompIificocion
con cebodores onidodos sobre eI producfo de Io primero.
Los producfos de ompIificocion se defecfon por
hibridocion con sondos o por eIecfroforesis en geI con
fincion con bromuro de efidio.
PT-PCP con diIucion o
punfo finoI
8Ionco Semi-
cuonfifofivo.
(Z)Se reoIi;on diIuciones seriodos de pIosmo o exfrocfo
de PMA deI pocienfe. EI ffuIo de PMA-HCV es Io moximo
diIucion de pIosmo que do seoI +.
PT-PCP Compefifivo 8Ionco Semi-
cuonfifofivo
(3)Uno serie de concenfrociones conocidos de DMA
sinfefico mufonfe de HCV se coompIificon con muesfros
de pocienfes. Los producfos de ompIificocion deI C-DMA
y deI Sfondord, de PM diferenfes, muesfron bondos
disfinguibIes en uno eIecfroforesis. Lo comporocion de
Ios bondos de pocienfes con Ios de concenfrocion
conocido permife Io semicuonfificocion.
PT-PCP muIficcIico 8Ionco CuoIifofivo,
semi-
cuonfifofivo
(4)Pofrones de concenfrocion conocido de PMA-HCV se
coompIificon con Io muesfro. Lo ompIificocion se defiene
o disfinfos fiempos y Ios producfos se hibridi;on con
sondos por dof-bIof. Los muesfros de pocienfes se
comporon con series de pofrones poro semicuonfificor.
AmpIificocion
isofermoI de oc.
MucIeicos (MAS8A)
8Ionco CuoIifofivo,
semi-
cuonfifofivo
(b)Se ufiIi;on mIfipIes en;imos y primers poro
ompIificor PMA. Lo defeccion se reoIi;o por
eIecfroforesis o por hibridocion con sondos.
DMA romificodo
(QuonfipIex
fm
)
SeoI Cuonfifofivo (o)PMA-HCV es copfurodo en micropociIIos por sondos
sinfeficos. Un segundo juego de sondos hibridi;o con Ios
regiones b MC y core y con un DMA romificodo
ompIificodor. Uno sondo osociodo o fosfofoso oIcoIino se
hibridi;o oI compIejo. Lo emision de Iu; de Io reoccion con
un susfrofo quimioIuminicenfe es direcfomenfe
proporcionoI o Io confidod de PMA.
33
METODOS PARA SENOTIPIFICAR EL HCV,
METODO 8PEVE DESCPIPCIOM PEFEPEMCIAS
Secuenciocion direcfo
de Ios producfos de
PCP.
Se ufiIi;on primers (cebodores)de cuoIquier
region voriobIe deI genomo (Preferenfemenfe
Io region deI Core) poro ompIificor cDMA y
Iuego reoIi;or secuenciocion direcfo.
Simmonds ef oI, I993.
AmpIificocion por PCP
ufiIi;ondo primers fipo
especficos
Se ufiIi;on primers fipo especficos de Ios
regiones deI Core y MSbporo ompIificor cDMA.
Okomofo ef oI, I99Z y I993
PCP y posferior
hibridocion con sondos.
Luego de Io ompIificocion no especfico por
PCP, se ufiIi;on sondos de oIigonucIeofidos
fipo-especficos poro Ios regiones deI Core y
EI.
Cho ef oI, I99Z.
AnoIisis de PFLPs
(PoIimorfismo en eI
Iorgo de Ios
frogmenfos de
resfriccion).
Se ompIifico eI cDMA de Io region b'MCP , Ios
frogmenfos ompIificodos se digieren con
en;imos de resfriccion y se corren por
eIecfroforesis. Disfinfos fipos de virus
muesfron bondeo diferenfe.
McOmish ef oI, I993.
PCP seguido por
hibridocion con
mIfipIes sondos
(InnoLipo).
Se inmoviIi;on sondos oIigonucIeoficos
genofipo-especficos en uno membrono. EI
cDMA-HCV ompIificodo por nesfed PCP se
hibridi;o con eI/os.EI pofron de posifividod se
ufiIi;o poro diferencior fipos y subfipos de
HCV.
Sfuyer ef oI, I993.
Serofipificocion UfiIi;o pepfidos sinfeficos fipo-especficos de
Io region MS4 como onfgenos de copfuro en
un ensoyo de ELISA.
Simmonds, Pose ef oI, I993.
34
4,-PREVENCION Y VACUNACION
4,1,- MEDIDAS DE PREVENCION PARA HEPATITIS Y C,
Los normos de prevencion deben esfipuIorse poro fres niveIes:
I) MiveI reservorio
Z) MiveI vos de fronsmision
3) Personos con riesgo incremenfodo de infeccion.
4,1,1,- NORMAS PARA EL RESERVORIO {PORTADOR CRONICO},
o) Debero ser insfrudo respecfo de su condicion. En formo personoI, oroI o escrifo recibiro
informocion respecfo de Io copocidod infecfivo de su songre y secreciones corporoIes.
b) Debero sober sobre :
Su imposibiIidod de donor songre
Su obIigocion de informor su esfodo de porfodor cronico onfe Io necesidod de ofencion medico
u odonfoIogico.
Lo conveniencio deI uso de profiIocficos en sus reIociones sexuoIes.
Lo conveniencio de vocunor confro eI H8V o Io porejo y o Ios que comporfen eI hogor.
Lo copocidod viricido deI hipocIorifo de sodio.
4,1,Z,- NORMAS A NIVEL VIAS DE TRANSMISION,
4,1,Z,1,- uncos de Sungre Servicios de Hemoterupiu y Medicinu TrunsfusionuI,
o) Todo probobIe dodor que fengo un onfecedenfe de hepofifis viroI sero desesfimodo como foI. Sero
excepcion o Io presenfe eI hober podecido hepofifis A, o eI monifesfor hober fenido hepofifis onfes
de Ios I0 oos de edod.
b) Sero excIuido como dononfe oqueI que fengo o hoyo fenido uno pruebo posifivo poro H8sAg, poro
onfiHCV, o onfiHIV.
c) Sero excIuido fodo dononfe que monifiesfe hober fenido uno eIevocion de oIonino omino fronsferoso
(fronsominoso gIufomico pirvico), en eI dobIe o mos deI Imife superior normoI, en ocosiones
reiferodos y sin que medien cousos foxicos, obesidod, efc.
d) Se obsfendro de donor songre fodo individuo con conducfos de riesgo poro Hepofifis y SIDA :
Vorones homosexuoIes y bisexuoIes.
Quienes seon o hoyon sido odicfos o drogos inyecfobIes.
Los hemofIicos.
Los personos de residencio con origen en oreos de oIfo endemicidod.
Los vorones o mujeres que ejer;on o hoyon ejercido Io prosfifucion y quienes hoyon fenido
reIociones con eIIos en Ios Ifimos o meses.
Quienes hoyon fenido reIocion sexuoI con oIguien que fengo o hoyo fenido uno
pruebo reocfivo poro HIV
AqueIIos personos que presenfen fofuojes.
AqueIIos personos que hoyon sido fronsfundidos con songre y/o componenfes en Ios Ifimos IZ
meses.
3
AqueIIos personos que hoyon esfodo bojo frofomienfo con ocupunfuro denfro deI Ifimo oo.
AqueIIos personos que en eI Ifimo oo hoyon fenido esfrecho confocfo con individuos con
hepofifis viroIes.
e) Mo se ocepforo como dononfe o quien hoyo donodo Io nico unidod de songre y/o componenfe o un
pocienfe con evidencios cInicos y/o de Ioboroforio de hepofifis posfronsfusionoI o infeccion con
HIV, no exisfiendo ofros onfecedenfes o cousos probobIes de infeccion.
f) AI dodor de songre se Ie brindoro uno informocion odecuodo o fin de que puedo monifesfor Io
exisfencio de oIgn riesgo de fronsmifir hepofifis. Se responderon fodos Ios pregunfos y se Ie
permifiro Io posibiIidod de oufoexcIusion.
g) En fodo dodor que hoyo cumpIido con Ios requisifos previos se fomoro uno muesfro de songre un ve;
finoIi;odo Io donocion. En dicho muesfro se reoIi;oron, enfre ofros, Ios siguienfes esfudios
fendienfes o disminuir eI riesgo de hepofifis posfronsfusionoI: H8sAg, onfiHCV, onfiHIV.
Se recomiendo Io reoIi;ocion de onfiH8c y niveI de oIonino ominofronsferoso denfro de un perfiI de
moximo seguridod fronsfusionoI.
h) Todo pruebo inicioImenfe reocfivo debero repefirse por dupIicodo con Io mismo muesfro. Si dos de
Ios fres resuIfodos fueron no reocfivos, Io unidod sero oprobodo poro uso fronsfusionoI. Si por eI
confrorio dos de Ios fres resuIfodos fueron reocfivos se descorforo Io unidod.
i) En coso de defecfor muesfros reocfivos o Ios pruebos de seIeccion mencionodos en eI porrofo f) se
debero envior Io muesfro en fiempo y formo, oI Loboroforio de Peferencio osignodo poro confirmor
Ios resuIfodos medionfe Ios esfudios que correspondon.
j) EI resuIfodo de confirmocion inmunoseroIogico, debero IIegor en formo oporfuno oI 8onco de Songre
o Servicio de Hemoferopio que fendro Io responsobiIidod y obIigocion de cifor oI dononfe de songre
posf confirmocion, por eI medio que defermine codo Insfifucion.
Anfe Io concurrencio deI dononfe cifodo, se Io debero informor de su sifuocion odecuodomenfe y
proceder o Io derivocion deI mismo o un Servicio de 0osfroenferoIogo que Io copforo poro compIefor
eI diognosfico, e impIemenfor eI frofomienfo y Ios occiones fendienfes o evifor Io fronsmision de Ios
hepofifis viroIes diognosficodos.
k) Los servicios de Hemoferopio y/o Ios 8oncos de Songre deberon IIevor regisfro de Ios dodores con
resuIfodos reocfivos, y con regisfro de Io nofificocion y derivocion de esfos o Ios servicios de
ofencion cInico.
I) A Ios efecfos de Io nofificocion epidemioIogico se recomiendo eI uso de Io ficho de 8co de Songre.
4.I.Z.Z -ESTA8LECIMIEMTOS DE SALUD
u} Promover eI uso de moferioI descorfobIe.
b} Promover eI uso de guonfes poro Io osisfencio de pocienfes en circunsfoncios que supone confocfo
con songre o secreciones.
c} Promover eI cumpIimienfo de normos de bioseguridod en eI monejo de insfrumenfoI, recipienfes,
residuos, efc, que confengon o hoyon esfodo en confocfo con songre o secreciones.
d} ImpIonfor eI uso diorio de hipocIorifo de sodio diIuido poro Io higiene de pisos, mesodos, efc.
4.I.Z.3.- MATEPMIDAD.
#.- Cofosfro de H8sAg en fodos Ios emboro;odos.
3
4,1,3,- PERSONAS CON RIESSO INCREMENTADO DE INFECCION,
Se incIuyen en esfo cofegoro o oqueIIos personos que por sus hobifos, frobojo o enfermedod
subyocenfe, fienen moyor riesgo de confroer infeccion por virus de hepofifis : frobojodores de Io soIud,
prosfifufos, fomiIiores de porfodores cronicos, hemodioIi;odos, hemofIicos, infegronfes de
comunidodes cerrodos.
u}Educocion concernienfe o Ios corocfersficos de Ios infecciones en juego, formos de confogio y
medidos de prevencion especficos poro codo grupo de riesgo.
b}Inmuni;ocion posivo con gommogIobuIino hiperinmune confro H8V, en formo inmediofo poro oqueIIos
que occidenfoImenfe hoyon sufrido uno herido con insfrumenfoI confominodo con songre o secreciones
de personos que se sepon o sospechen ser H8sAg posifivos y no esfen bojo inmuni;ocion ocfivo previo.
c}Seron posibIes deI mismo frofomienfo Ios recien nocidos de modres H8sAg posifivos y Ios que debon
inicior frofomienfo hemodioIifico sin hober podido compIefor su progromo de vocunocion previo.
d}Lo medido principoI poro eI confroI de Io infeccion por H8V es Io vocunocion. En Ios poses de bojo y
mediono endemicidod, corresponde vocunor, en uno primero efopo, o fodos Ios individuos que infegren
pobIociones de oIfo riesgo.
4,Z,-TAMIZAJE DE LAS EMARAZADAS EN EL TERCER TRIMESTRE
HsAg
+ -
Pepefir y compIefor H8eAg/ Mo es necesorio ninguno
onfi-H8e (esfudio fomiIior) medido odicionoI
4,3,- PREVENCION DE LA TRANSMISION PERINATAL DE HEPATITIS ,
Los recien nocidos (PM) de modres porfodoros deI virus de Io hepofifis 8 (H8V), son oIfomenfe
suscepfibIes o Io infeccion por dicho virus duronfe eI porfo.
Si se infecfon por esfo vo, seron vuInerobIes o severos enfermedodes hepoficos duronfe Io infoncio y
en Io edod oduIfo, que incIuyen hepofifis cronicos, cirrosis y hepofocorcinomo, oproximodomenfe en eI
Zb7 de Ios cosos.
Lo posibiIidod de odquirir Io infeccion perinofoI por eI H8V es deI 70-907 convirfiendose en porfodores
cronicos deI virus en un 8b-907.
Hosfo eI oo I984, eI Comife de Procficos de Inmuni;ociones (ACIP) recomendobo Io bsquedo de
onfgeno de superficie (H8sAg) soIomenfe o Ios emboro;odos de oIfo riesgo, porfodores, drogodicfos,
frobojodores de soIud, efc.
Luego, en I988 eI mismo comife (ACIP) indico que en fodo mujer emboro;odo debe ser invesfigodo
rufinoriomenfe eI H8sAg con eI fin de reducir efecfivomenfe Io posibiIidod deI PM de infecforse con eI
H8V, eIIo impIico insfrumenfor un progromo de profiIoxis posivo-ocfivo que proveero oIrededor de un
907 de profeccion efecfivo.
Deben fomorse medidos inmediofos, denfro de Ios primeros IZ hs de vido segn eI siguienfe esquemo:
Denfro de Ios IZ hs de vido: 0ommogIobuIino hiperinmune confro Io hepofifis 8 (0,b mI IM)
Hosfo 7 dos de vido: Primero dosis de vocuno confro Io hepofifis 8 (0,b mI IM)
Hosfo 30 dos de vido: Segundo dosis de vocuno confro Io hepofifis 8 (0,b mI IM)
37
AI o" mes: Tercero dosis de vocuno confro Io hepofifis 8 (0,b mI IM)
EI seguimienfo de Ios nios debe proIongorse, confroIondose Ios niveIes deI onficuerpo de superficie
(onfi- H8s). Si esfos disminuyen, deben recibir uno dosis de refuer;o de Io vocuno.
4,4,- VACUNACION CONTRA HV
4,4,1,- TAMIZAJE PRE-VACUNACION
- +
Vocunor (Esquemo CompIefo) H8sAg
-
onfi-H8s +
PosibIe ogudo o porfodor : compIefor
con H8eAg y onfiH8e y/o DMA.
+ - Esfudior fomiIiores y/o confocfos
inmune I" dosis vocuno repefir + inmune
onfiH8s o Ios 30 dios
- compIefor
vocunocion
Dodo que es uno vocuno probodomenfe inmunogeno y seguro, en un onoIisis de cosfo- eficocio, no es
imprescindibIe reoIi;or un confroI de respuesfo de onficuerpos (onfiH8s) (eficiencio de oduIfos sonos
moyor deI 907) uno ve; compIefodo eI esquemo de inmuni;ocion.
4,4,Z,- CONDICIONES DE ESTAILIDAD DE LA VACUNA
Es convenienfe oImocenorIo en heIodero comn (4 - 8"C). Por ser uno vocuno o subunidod viroI, es decir
que eI producfo inmuni;onfe es uno profeno viroI puro (H8sAg), Io perdido de Io inmunogenicidod por
perdido de Io codeno de fro no es un punfo fon crfico, de hecho, fodos Ios vocunos disponibIes en eI
mercodo esfon desorroIIodos poro soporfor hosfo femperofuros de 30"C sin perder su inmunogenicidod.
En combio esfo s se pierde si Io vocuno debe soporfor cicIos de congeIocion y descongeIocion.
En coso de fronsporfe deben fomorse Ios precouciones poro que no se congeIe.
4,4,3,- RESISTRO DE VACUNACION,
Se recomiendo eI uso de Io ficho "ProfocoIo cInico-epidemioIogico poro vocunor confro H8V (onexo 3 )
onfi H8c
3
,- TRATAMIENTO
Los Hepofifis cronicos 8 y C se frofon con inferferones y drogos onfiviroIes con eI objefo de ompIificor
Io respuesfo inmune deI huesped e inhibir y/o eIiminor Io repIicocion viroI.
,1 HEPATITIS CRONICA :
Indicociones: Pocienfes con eIevocion persisfenfe en Ios fronsominosos, niveIes defecfobIes de H8sAg,
H8eAg y DMA-H8V en suero, hepofifis cronico por biopsio y enfermedod hepofico compensodo.
METAS FINALES DEL TRATAMIENTO:
I,- Supresin de Iu repIicucin
I.- EIiminocion deI H8V-DMA deI suero (medido por hibridi;ocion moIecuIor)
Z.- EIiminocion deI H8eAg +/- Defeccion deI onfiH8e.
II,- Megorumiento de Iu enfermedud hepticu
I.- MormoIi;ocion de Ios niveIes de fronsominosos sericos
Z.- Disminucion de Io ocfividod necro-infIomoforio en biopsios hepoficos.
III,- Errudicucin deI HV
I.- EIiminocion deI H8sAg +/- defeccion deI onfiH8s
Z.- EIiminocion deI DMA-H8V deI suero ( moniforeodo por PCP)
3.- Desoporicion deI DMA-H8V deI hgodo ( moniforeodo por PCP)
IV,- Prevencin de cirrosis y curcinomu heputoceIuIur y uumento de Iu sobrevidu
,Z,- HEPATITIS CRONICA C:
Indicociones: Pocienfes con onfiHCV POSITIVO, con fronsominosos eIevodos, y hepofifis cronico por
biopsio.
METAS FIMALES DEL TPATAMIEMTO
I. EIiminocion de formos repIiconfes deI HCV de songre e hgodo.
Z. PesoIucion de Ios signos bioqumicos (niveIes de ALT) .
3. PesoIucion de Ios signos hisfoIogicos de infIomocion hepofico cronico
39
Focfores predicfivos de respuesfo fovorobIe oI frofomienfo en Hepofifis Cronico 8 y C.
HEPATITIS 8 HEPATITIS C
DMA H8V Z00 pg/mI
ALT I00 UI/I
Sexo femenino
Corfo durocion de Io enfermedod
onfi-HIV negofivo
HeferosexuoI
Po;o no osiofico
Enfermedod hepofico ocfivo
Infeccion con virus soIvoje
Ausencio de inmunosupresion
Corfo durocion de Io enfermedod
Edod joven
Ausencio de cirrosis
8ojos niveIes de HCV-PMA
0enofipo Z o 3
8ojos niveIes de hierro hepofico
40
,- SARANTIA DE CALIDAD Y EVALUACION DEL CONTROL DE CALIDAD
Definiremos esfos concepfos, porque su conocimienfo es bosico poro progromor Ios occiones que
oseguren Io confiobiIidod de Ios resuIfodos seroIogicos.
Lo coIidod de un producfo o servicio, se define como eI conjunfo de corocfersficos que sofisfogon Ios
necesidodes esfobIecidos poro ese producfo o servicio.
0oronfo de coIidod : Se refiere o un progromo compIefo, que osegure que eI resuIfodo finoI informodo
por eI Ioboroforio seo confiobIe y fiI.
EvoIuocion de Io coIidod : Puede hocerse medionfe diferenfes fecnicos de confroI exferno, efecfuodos
por Ios cenfros referencioIes en codo pos.
ConfroI de coIidod: Pepresenfo Ios ocfividodes y fecnicos operofivos desorroIIodos poro cumpIir con Ios
requisifos de coIidod esfobIecidos. Se refiere o Ios procedimienfos de confroI que operon sobre codo
uno de Ios mIfipIes focfores que pueden incidir en Ios resuIfodos deI diognosfico seroIogico.
CONTROL INTERNO Y CURVAS DE CONTROL
EI confroI inferno (CI) de Io coIidod fiene por objefivo oseguror eI cumpIimienfo de fodos Ios
procedimienfos esfobIecidos poro eI frobojo deI Ioboroforio y eI moniforeo de Io precision de Ios
resuIfodos (consfruccion de curvos de confroI) con eI proposifo de defecfor y corregir evenfuoIes
errores.
Un progromo de CI, debero confempIor eI moniforeo diorio de Ios procesos onoIficos medionfe
sueros confroI y consfruccion de curvos de confroI, os como Io porficipocion en progromos de confroI
exferno.
Enfre Ios confroIes mIfipIes y occiones que confempIoro un progromo de CI, podemos cifor:
Composicion y orgoni;ocion deI personoI deI Ioboroforio.
Formocion y ocfuoIi;ocion fecnico deI personoI.
EIoborocion deI MonuoI de Procedimienfos OperocionoIes.
SeIeccion de mefodos onoIficos odecuodos.
CoIeccion, idenfificocion, oImocenomienfo y fronsporfe de muesfros.
Monfenimienfo y confroI periodico de equipos, pipefos y moferioIes voIumefricos.
Deconfominocion, Iimpie;o y esferiIi;ocion de Ios moferioIes en uso ( vidrios y equipos).
ConfroI de Ios reocfivos.
Mormos de bioseguridod.
ConfroIes infernos y exfernos.
EvoIuocion consfonfe de mejoros.
EI moniforeo diorio deI proceso onoIfico poro c/ pruebo, se reoIi;o o froves de Io evoIuocion de dicho
pruebo con sueros de confroI, consfruyendo curvos con Io repef. diorio de Ios resuIf. de esfos sueros.
Los sueros de confroI son sueros individuoIes, preporodos por codo Ioboroforio o por Ioboroforios de
referencio, reocfivos (oIfos y bojos) y no reocfivos poro Io pruebo que se confroIo, oIicuofodos y
conservodos de foI modo que se osegure confor con eI mismo especimen poro vorios meses.
41
CONTROL EXTERNO
Se frofo de diferenfes procedimienfos que reoIi;on Ios Ioboroforios referencioIes poro evoIuor eI
desempeo de Ios Ioboroforios perifericos. Es muy imporfonfe que fodos Ios Ioboroforios fengon confroI
exferno, pues soIo medionfe esfe fipo de confroIes puede defecforse eI sesgo (corrimienfo deI voIor
verdodero) en Ios resuIfodos.
EI Loboroforio MocionoI de Peferencio poro Hepofifis ViroIes ho comen;odo desde Ocfubre de I99o,
un Progromo de ConfroI de CoIidod exferno poro Io red de Ioboroforios (coforce) que consfifuyen Ios
Unidodes CenfineIo deI Progromo MocionoI de ConfroI de Ios Hepofifis ViroIes.
EI mismo consisfe en eI envo, dos veces por oo (AbriI y Ocfubre) de un poneI de cinco miembros
poro ser onoIi;odos poro Ios morcodores de H8V y HCV : H8sAg, onfiH8c y onfiHCV. Esfe poneI es
enviodo o Ios Ioboroforios porficiponfes, quienes remifen oI Loboroforio MocionoI de Peferencio Ios
resuIfodos obfenidos, de ocuerdo o Io pIoniIIo en onexo 4. Uno ve; recepcionodos fodos Ios resuIfodos,
se envo o Ios Ioboroforios porficiponfes Io "cIove" deI PoneI, mienfros comien;on o procesorse Ios
resuIfodos fofoIes. Se onoIi;on poro codo morcodor: fecnico y equipo usodo, con sus correspondienfes
voIores de corfe, discreponcios con respecfo o Ios resuIfodos verdoderos (morco y fecnico usodo en
verdoderos negofivos y posifivos, foIsos negofivos y posifivos).
Se evoIo fombien eI desempeo de codo Ioboroforio, onoIi;ondo eI nmero de errores comefidos y Io
evoIucion deI desempeo con Ios poneIes sucesivos.
Esfe informe es enviodo o Ios porficiponfes con eI poneI siguienfe, donde codo Ioboroforio es
nombrodo con un codigo de monero que Io evoIuocion gIoboI es ononimo.
4Z
EvoIucion deI M" de porficiponfes :
Progrumu de ControI de CuIidud
SEROLOSIA PARA HEPATITIS Y C
PoneI Fechos M
o
de
porficiponfes
Lob.
U.C.P
Lob.
UCP
Serv. Hemoferopio
PbIicos Privodos
Loboroforios
groIes Hosp.
I Ocfubre
I99o
Io I4 -- Z 0 0
II JuIio
I997
I9 I4 -- b 0 0
III Ocfubre
I997
ZI I4 -- b I I
IV AbriI
I998
Z8 I4 -- I0 Z Z
V Ocfubre
I998
39 I4 -- Z0 3 Z
VI Moyo
I999
b0 I4 -- Zo 3 7
VII Ocfubre
I999
b3 I4 -- Z8 3 8
VIII AbriI
Z000
b8 I4 -- 30 4 I0
IX Ocfubre
Z000
o4 I4 o 30 4 I0
X AbriI
Z00I
ob I4 o 30 4 II
U. CenfineIo Peg. (UCP) 09 jurisdicciones
U. CenfineIo Prov. (UCP) 0o jurisdicciones
Serv. Hemoferopio (SHT) I7 jurisdicciones (oIgunos coinciden con Ios de Ios UCPs).
Lob 0roIes Hosp (L0H) 0o jurisdicciones (oIgunos coinciden con Ios de Ios UCPs).
Con Io cuuI estn comprendidus Ius veinticuutro gurisdicciones deI puis,
43
7,- SUIA DE IOSESURIDAD EN EL LAORATORIO DE VIROLOSIA
EI personoI de Ioboroforio de viroIogo se expone o Io infeccion oI monejor muesfros de songre, pIosmo,
suero, exudodos, fejidos, heces u orino de Ios enfermos con hepofifis o de enfermos que, sin hepofifis
cInicomenfe monifiesfo, son porfodores de virus.
Debido o Ios corocfersficos fisicoqumicos de oIgunos virus (por ej. fermoesfobiIidod) y o Ios pequeos
confidodes de songre que pueden producir infeccion (0.4 I), se debe fener especioI precoucion en
evifor eI riesgo de occidenfes. Por ej. eI H8sAg (H8V) se ho enconfrodo en fodos Ios componenfes deI
pIosmo obfenidos por eI mefodo de froccionomienfo de Cohn.
Si bien eI rigor de Ios cuidodos debe exfremorse en fodos Ios Ioboroforios (de onoIisis, cenfros de
hemoferopio, hemodioIisis, osisfencioIes, efc) es evidenfe que en un Ioboroforio dedicodo
especficomenfe o Hepofifis (diognosfico, encuesfos epidemioIogicos, purificocion, efc) se incremenfo eI
riesgo o Io exposicion.
Ademos esfo perfecfomenfe demosfrodo que cierfos profesiones y/u ocupociones deben considerorse
como ocfividodes de oIfo riesgo poro Io infeccion por virus de Hepofifis foIes como: fecnicos de
Ioboroforio, enfermeros, personoI de hemodioIisis, medicos, cirujonos, denfisfos y pofoIogos,
ocfividodes desorroIIodos en servicios de hemodioIisis y oncoIogo, Ioboroforios hospifoIorios, boncos de
songre, y servicios de osisfencio quirrgico infensivo.
7,1- MECANISMOS COMUNES DE CONTASIO
Lo vo predominonfe es Io porenferoI, si bien no se descorfon Ios demos vos comunes de confogio :
1} AufoinocuIocion occidenfoI (ogujos, pipefos Posfeur, micropipefos)
Z} Confominocion de pieI o mucosos con songre o derivodos (esIobon mono-boco).
u} PermeobiIidod oIferodo (heridos, escoriociones, ec;emos)
b} Areos sonos exfensos.
3} Confominocion de monos con songre o derivodos.
4} Aspirocion bucoI y soIpicoduros en Ios ojos.
} InhoIocion de gofifos en oerosoI, esfos pueden producirse :
oI ogifor muesfros,
duronfe Io homogenei;ocion meconico,
en rofuros,
oI obrir froscos,
en eI momenfo de expuIsor Io Ifimo gofo de uno pipefo,
derromondo Iquidos con formocion de gofos,
en Io cenfrifugocion de fubos o bofeIIos con bordes hmedos,
en Io cenfrifugocion de fubos obierfos y cosi IIenos,
oI frenor sbifomenfe Io cenfrfugo poro gonor fiempo.
} Cierfos insecfos, como Ios mosquifos, moscos o cucorochos podron ocfuor como vecfores
meconicos.
7,Z,-MEDIDAS DE SESURIDAD Y/O PREVENCION DE ACCIDENTES
1} NOMRAR : Un Encurgudo de Seguridud un SupIente y un Comit de Seguridud,
u} Funciones deI Encurgudo de Seguridud :
VigiIor eI cumpIimienfo de Ios normos.
Pegisfror fodo Io ocurrido en eI Ioboroforio que puedo poner en peIigro oI personoI (occid, efc).
44
Mofificor Ios novedodes y/o infrocciones oI direcfor deI Ioboroforio.
Enseor oI personoI nuevo Ios normos vigenfes.
Proveer de equipos profecfores, boIsos poro desechos, desinfecfonfes, efc.
ConfroIor eI esfodo inmunoseroIogico deI personoI deI Ioboroforio en formo periodico.
b} Funciones deI Comit de Seguridud:
Observor en formo corrienfe Ios medidos de seguridod.
Asesoror poro Io revision de oIguno de eIIos.
Z} HISIENE PERSONAL:
u} Mo fumor, ni beber, ni comer en eI Ioboroforio.
b} Mo IIevorse o Io boco dedos u ofros objefos (Iopices, Iopiceros, efiquefos poro rofuIor, efc)
c} Mo pipefeor con Io boco (usor peros de gomo o propipefos)
d} Mo focorse Io coro, cobeIIos u ojos duronfe un ensoyo.
e} Lovorse Ios monos frecuenfemenfe:
Despues de monipuIor muesfros.
AI ferminor con Io experiencio.
AI soIir deI Ioboroforio.
f} Munco ufiIi;or Io ropo que se IIevo puesfo en ese momenfo poro secorse Ios monos.
g} Uso de cremos humecfonfes poro monos.
3} ROPAS PROTECTORAS
AI enfror o uno ;ono de frobojo, fodos Ios miembros deI personoI deben IIevor uno bofo obrochodo por
defros o por deIonfe, cru;odo en esfe Ifimo coso, y poro obrir o preporor Ios muesfros, fendron que
ponerse odemos un deIonfoI de pIosfico y guonfes desechobIes.
Se opIicoro en Ios monos uno cremo profecforo onfes de ponerse Ios guonfes, que no se hon de IIevor
mos de Z horos seguidos.
Anfes de soIir deI Ioboroforio, seo cuoI fuere eI mofivo, o de ir o Io soIo de personoI, fodo persono
debero quiforse Io bofo, eI deIonfoI y Ios guonfes, y Iovorse Ios monos.
Los guonfes desechobIes se ufiIi;oron uno soIo ve; y se pondron despues en uno boIso desfinodo o Io
incinerocion.
EI deIonfoI y Io bofo deben coIgorse en Ios gonchos especioIes, que poro codo uno de esos fines fiene
desfinodo codo miembro deI personoI.
AI ferminor codo jornodo, eI deIonfoI se sumerge duronfe unos minufos en hipocIorifo diIudo, despues
se enjuogo con oguo coIienfe y se dejo secor. Lo bofo se dejoro en eI cesfo desfinodo o Io Iovondero oI
finoI de codo semono (con moyor frecuencio si es necesorio).
Si bien no se debe monchor Io ropo, si se monchoro occidenfoImenfe con songre u ofros moferioIes de
Ios enfermos, debe froforse inmediofomenfe con uno bueno confidod de hipocIorifo diIudo y oI cobo de
unos minufos, enjuogorse con oguo.
Cuondo pudieron producirse soIpicoduros de Io muesfro, se profegero Io coro con uno visero o con gofos
de seguridod.
Se recomiendo eI uso de oporofos de fIujo Iominor verficoI cuondo Io/s muesfros o monipuIor seon muy
peIigrosos (fipo 3).
4
4} MANEJO DE MUESTRAS
u} Recepcin de Ius muestrus,
Se observoro que esfen correcfomenfe cerrodos y/o empoquefodos.
Los recipienfes sucios o no bien cerrodos se presenforon oI encorgodo de seguridod que hobro de
decidir si deben desechorse sin socorIos de sus envoIforios.
Los hojos de peficion sucios se incineroron, Iuego de ser fronscripfo y hober sido seporodo en uno
boIso en eI recipienfe de Ios desechos poro incinerocion, por eI fecnico recepfor de Ios sueros, que
por supuesfo IIevoro guonfes desechobIes.
AI obrir eI recipienfe de Io muesfro se debe evifor que se produ;con gofifos en oerosoI y
soIpicoduros.
b} MunipuIucin de Ius muestrus,
UfiIi;or uno pin;o poro refiror Io ogujo de Io jeringo en Ios exfrocciones de songre, de no confor con
descorfodores odecuodos.
CoIocor Ios fubos y demos recipienfes en sus correspondienfes grodiIIos, nunco sobre Io mesodo,
perfecfomenfe fopodos.
Preferenfemenfe ufiIi;or moferioIes de pIosfico, no de vidrio.
c} Munego de pipetus,
Munco se ufiIi;oro Io boco.
Los pipefos Posfeur y de ofros fipos se monejoron con disposifivo de succion de gomo o oufomoficos.
Debe procurorse que eI niveI de Iquido nunco oIconce Io exfremidod superior de Io pipefo.
EI confenido se dejoro escurrir suovemenfe por Ios poredes deI recipienfe poro evifor soIpicoduros
o oerosoIes.
Deben monfenerse verficoIes mienfros se ufiIicen.
Luego de usodos, no se dejoron sobre Io meso, sino que se desechoron suovemenfe sumergiendoIos
por compIefo en uno soIucion de hipocIorifo, deI mismo modo con Ios disposifivos de succion de
gomo confominodos.
d} Centrifugucin,
Los muesfros de songre deben cenfrifugorse con Ios fubos bien fopodos y perfecfomenfe
equiIibrodos.
Si un fubo se rompiero en Io cenfrfugo, defenerIo inmediofomenfe y esperor como mnimo die; (I0)
minufos poro obrir Io fopo.
Lo cubefo donde se ho derromodo Io songre y hon codo Ios resfos deI fubo rofo, se infroduciro con
suovidod en un recipienfe con, por ejempIo: gIuforoIdehdo oI Z7 (ver fobIo Z). Con ese mismo
desinfecfonfe, se froforon Ios superficies de Io cobe;o de Io cenfrfugo, Io cojo, Ios orficuIociones y Ios
ofros cubefos. Tombien pueden oufocIovorse Ios orficuIociones y cubefos, cuondo eI equipo Io permifo.
} PRECAUCIONES EN LOS LUSARES DE TRAAJO
Codo uno de Ios miembros deI personoI, oI reoIi;or codo experiencio debe fener o su oIconce un
frosco Iovodor y un recipienfe poro desechos con hipocIorifo diIudo, uno confidod suficienfe de
forundos de oIgodon y uno boIso de pIosfico poro residuos.
Los moferioIes usodos se pondron en eI recipienfe con hipocIorifo y deben quedor fofoImenfe
inmersos en eI Iquido.
4
Los moferioIes descorfobIes se coIocoron en boIsos de pIosfico y se incineroron.
Los moferioIes no descorfobIes se dejoron fodo Io noche en hipocIorifo y Iuego se deberon
oufocIovor.
Los grondes voImenes de orino y ofros Iquidos confominodos deben froforse con hipocIorifo
concenfrodo, Io me;cIo se dejo duronfe fodo Io noche y oI do siguienfe se orrojo por eI desogue
desfinodo o Io evo cuocion.
Tombien pueden esferiIi;orse Ios Iquidos en oufocIove.
En coso de muesfros considerodos "muy peIigrosus", suero u ofros Iquidos infecfodos, deben
posorse o froscos con fopon roscodo de vidrio, que se pondron en un recipienfe mefoIico con oguo
y se esferiIi;oron en oufocIove.
EI hipocIorifo se debero renovor dioriomenfe, se proboro vorios veces oI do, con un popeI de
yoduro de oImidon que doro uno reoccion o;uI oscuro mienfros eI producfo seo ocfivo.
AI finoI de codo jornodo, se enjuogoro con hipocIorifo diIudo Io superficie de Io mesodo y se
verfero uno pequeo confidod por eI desogue de Ios piIefos.
Como Ios probobiIidodes de errores y/o occidenfes oumenfon cuondo en eI Iugor de frobojo se
ogIomeron disfinfos equipos y moferioIes, debe monfenerse eI Ioboroforio en orden y con
odecuodo Iimpie;o diorio.
} MEDIDAS EN CASO DE ACCIDENTES
En corfes, rospoduros o pincho;os : Iovorse inmediofomenfe con oguo y jobon.
SoIpicoduro en Ios ojos : enjuogor inmediofomenfe con oguo o soIucion fisioIogico, monfeniendoIos
obierfos.
Aspirocion de moferioI sospechoso o soIpicoduros en Io boco : enjuogorse repefidomenfe con oguo,
sin efecfuor ningn movimienfo de degIucion.
Monchos de songre en Io pieI : Iovor con hipocIorifo diIudo y Iuego con oguo y jobon.
Los soIpicoduros de songre o de ofros moferioIes procedenfes de enfermos, se froforon sin
perdido de fiempo con soIucion diIudo de hipocIorifo.
En coso de inocuIocion occidenfoI si eI individuo no esfuviero vocunodo confro H8V, debe
procficorse inmediofomenfe inmuni;ocion posivo-ocfivo. EIIo consisfe en odminisfror
simuIfoneomenfe 0ommogIobuIino Hiperinmune (H8Ig) y vocuno confro eI H8V.
7} DESINFECCION Y ESTERILIZACION,
Los frofomienfos esferiIi;onfes (esporicidos) inocfivon oI H8V.
Si bien Ios efecfos deI frofomienfo de desinfeccion son en su moyor porfe empricos, oqueIIos que
son esporicidos fombien inocfivon oI H8V. Un frofomienfo que inocfive fofoI o porcioImenfe Io
reocfividod inmunoIogico deI H8sAg, fombien inocfivoro oI H8V.
Poro un buen frofomienfo de desinfeccion hoy que fener en cuenfo eI producfo qumico odecuodo,
su concenfrocion y eI fiempo eficienfe de confocfo.
Cierfos desinfecfonfes (oIcohoIes, fenoIes, iodo, compuesfo de omonio cuofernorio, mercurioIes)
no son recomendodos porque corecen de ocfividod esporicido, fienen inconvenienfes poro opIicorse
o objefos deI medio ombienfe (ropido evoporocion, corrosividod) o son ineficoces confro H8V.
47
Lo fobIo I do uno cIosificocion de desinfecfonfes de ocuerdo o su niveI de ocfividod. (SpouIding, I97Z).
TALA 1
A0EMTE MIVEL DE ACTIVIDAD POSI8LE
QUIMICO 8AJO IMTEPMEDIO ALTO
Oxido de EfiIeno (gos) +
FormoIdehdo 37 (soI. Acuoso) +
FormoIdehdo 87 (soI. Acuoso) +
FormoIdehdo 87 y 707 en oIcohoI +
0IuforoIdehdo Z7 (soI.ocuoso oI coIino) +
Compuesfos cIorodos b00/b000 ppm ^(I) +
Iodoformo b00/b000 ppm ^(I) +
EfonoI isoproponoI 70/907 ^(Z) +
FenoIes I/37 ^(Z) +
Compuesfos con Amonio Cuofernorio ^(Z) +
*{1} HoIogeno Libre.
*{Z} Mo recomendobIes como desinfecfonfes poro confominocion con H8V.
*{3}Dependiendo deI perodo de exposicion, femperofuro y ousencio de desechos orgonicos.
4
SpouIding y 0roscheI (I974) esfobIecieron Ios requerimienfos poro uno bueno esferiIi;ocion y
desinfeccion poro Ios disfinfos eIemenfos deI medio ombienfe, cIosificondo esfos Ifimos en: crticos
semicrticos y no crticos, bosondose en eI grodo de posibiIidod de confocfo direcfo de esfos con
Iosfimoduros o mucosos.
Los normos o seguir se defoIIon en Io TobIo Z.
TALA Z
O8JETOS DESIMFECCIOM ESTEPILIZACIOM
Mo crfico : confocfo
eIemenfos c/pieI y
mucosos: no usuoI
Crfico:confocfo de
eIemenfos c/pieI y
mucosos: frecuenfe
EIemenfos que penefron en pieI y
mucosos
Superficies
duros y Iisos
C30'
E-II0'
C,E,I30' A,8,D,E IZ hs. F,0 I0 hs.
0omos C30'
E-II0'
C-E,I30' ^ A,D
PIosficos C30'
E-I I0'
C,E,I30' ^ A,D,E IZ hs. F,I I0 hs.
Insfrumenfos
de vidrio
-.- E-I30' D
E IZ hs.
0 I0 hs.
Termomefros -.- E-I30' D
E IZ hs.
F-0 I0 hs.
Insfrumenfos
mefoIicos
C30'
E-0-II0'
C 30'
E-0,I30'
D
E IZ hs.
F,0 I0 hs.
Sup. deI medio
omb.
(pisos,poredes,
mesodos,
efc.)(^^)
E-II0'
Dependiendo de Io esfobiIidod fermico.
** Peconociendo que uno pequeo dosis es infecfivo y que Io esfobiIidod ombienfoI deI H8V en
disfinfos superficies y en ombienfes de oIfo riesgo, es oIfo, Ios eIemenfos pueden fociImenfe
confominorse direcfo o indirecfomenfe, perfene;co o uno o o ofro fem (Crfico - Mo Crfico).
49
REFERENCIAS,
CALOR :Los voIores dodos son, por eI perodo de opIicocion de Io femperofuro, en Ios oreos mos
ocIudos. Ver monuoI en codo coso, poro consfofor Io compofibiIidod deI moferioI con eI coIor.
A - Vupor u presin (AufocIove) IZI"C Ib IibrosIb'
IZo"CZ0 IibrosI0'
I34"CZ9 Iibros 3'
- Horno seco (Esfufo) IZI"CIo horos
I40"C 3 horos
Io0"C Z horos
I70"C I horo
C - Aguu Hirviendo 98"C 30'
QUIMICOS : AIgunos son muy corrosivos, por eso debe consfoforse con pequeos dosis, Io
concenfrocion o usor sobre un moferioI deferminodo D-Oxido de
EfiIeno (gos) 3-Io hs (depende deI objefo}
E-FormoIino oI Z07 en soI.ocuoso (formoIdehdo 87)
F-FormoIino oI Z07 en 707 de oIcohoI,
S-SoIucion ocuoso de gIuforoIdehdo oIcoIini;odo Z% H - HipocIorifo de Sodio : b00/b000 ppm
(0.0b/0.b7 de cIoro Iibre).
Lo Iovondino de uso domesfico generoImenfe es uno soIucion oI b7, pero o veces Ios conc. son oI Z7 .
Es oIfomenfe corrosivo poro mefoIes. Como eI hipocIorifo es inesfobIe, Io soIucion de frobojo debe
prepororse dioriomenfe.
I- Iodoformo : b00/b000 ppm (0.0b/0.b7 de iodo ocfivo).
Los producfos comercioIes son oI I7 .
0
ANEXO I
1
ANEXO II
ProtocoIo cInico - epidemioIgico puru vucunucin contru HV :
Ficho M": _ _ _ _ _ _ _ _ _
I.DATOS SENERALES
MUMEPO DE CODI0O : _ _ _ _ _ _ _
EDAD: _ _ _ AMOS SEXO : FEMEMIMO MASCULIMO
LU0AP DE MACIMIEMTO : _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _
OCUPACIOM : _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ ESPECIALIDAD :_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _
DOMICILIO : _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ CP :_ _ _ _ TE : _ _ __ _ _ _ _ _
DOMICILIO TPA8AJO : _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ TE: _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _
SEPVICIO : _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ __ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _
Z.ANTECEDENTES PATOLOSICOS
HEPATITIS VIPAL (FECHA) :
COMFIPMACIOM SEPOLO0ICA : HAV : _ _ _ _ _ _ _ _ _ H8V: _ _ _ _ _ _ _ _ _ HCV :_ _ _ _ _ _ _
OTPAS : _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _
EPISODIOS FAMILIAPES DE HEPATITIS: _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ __ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _
3.HISTOPIA EPIDEMIOLO0ICA :
o) COMTACTOS
COM PEPSOMAS ICTEPICAS PPEVIOS
A LA TOMA DE MUESTPA : _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _FECHA : _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _
EM LU0AP DE TPA8AJO : _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _FECHA : _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _
FAMILIAPES : _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _FECHA : _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _
EM OTPOS LU0APES Y/O CIPCUMSTAMCIAS : _ _ _ _ _ _ _ _ _ FECHA : _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _
b) IMOCULACIOMES PPEVIAS A LA TOMA DE MUESTPA :
ACCIDEMTES COM ELEMEMTOS
COPTAMTES O PUMZAMTES: _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _FECHA : _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _
IMYECCIOMES : _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _FECHA :_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _
VACUMAS: _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _FECHA : _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _
PPUE8AS IMTPADEPMICAS : _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _FECHA : _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _
TATUAJES : _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ FECHA : _ __ _ _ _ _ _ _ _ _ _
ACTOS QUIPUP0ICOS : _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _FECHA : _ _ _ _ _ _ _ _ _ _
EXAMEM O EXTPACCIOMES DEMTALES : _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _FECHA : _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _
EXAMEM DE LA8OPATOPIO : _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _FECHA : _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _
TPAMSFUSIOM DE SAM0PE O DEPIVADOS : _ _ _ _ _ _ _ _ _ _FECHA : _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _
OTPAS ALTEPMATIVAS SIMILAPES: _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _FECHA : _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _
4.FECHA DE O8TEMCIOM DE LA MUESTPA : _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _
b.PESULTADOS :
HbsAg: _ _ _ _ _ _ _ _ _ onfi-Hbe: _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _
HbeAg: _ _ _ _ _ _ _ _ _ onfi-H8s: _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _
onfi-H8c : _ _ _ _ _ _ _ _ _ onfi-H8c Ig M: _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _
I
ro
dosis : _ _ _ _ _ _ _ _ _ FECHA: _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _
Z
do
dosis : _ _ _ _ _ _ _ _ _ FECHA: _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _
3
ro
dosis : _ _ _ _ _ _ _ _ _ FECHA: _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _
Z
ANEXO III
PANEL DE CONTROL DE CALIDAD VII ,
SEROLOSIA PARA HEPATITIS Y C,
VOL : I mI POP TU8O. VTO : A8PIL Z000.
Sugerencio : oIicuofor y congeIor poro evifor confominocionl
LA8OPATOPIO ( UCP ) :
FAX/s y TE/s :
PESPOMSA8LE/S :
FECHA DE PEALIZACIOM DEL COMTPOL :
OPEPADOP/ES :
TECMICA/S :
VEMCIMIEMTO :
AnfiHCV Ab mfro(^) V.Corfe(^) PesuIfodo Observociones Equipo morco
fecnico y vencimienfo TU8O M" I
TU8O M" Z
TU8O M" 3
TU8O M" 4
TU8O M" b
(^) si corresponde, sino poner MA (no opIicobIe). FECHA Y FIPMA DEL PESPOMSA8LE :
H8sAg Ab mfro(^) V.Corfe(^) PesuIfodo Observociones Equipo morco
TU8O M" Z
TU8O M" 3
TU8O M" 4
TU8O M" b
AnfiH8c Ab mfro(^) V.Corfe(^) PesuIfodo Observociones Equipo morco
TU8O M" Z
TU8O M" 3
TU8O M" 4
TU8O M" b
3
ibIiogrufu
^0on;oIe;,J , Posodos, M A , PIones,E . 0uo de 8ioseguridod en eI Loboroforio.
^Hepofifis C : Diognosfic Assoys. Seminors in Liver Diseose. VoI Ib. Mo I. I99b. 33-40
^MonuoI de Procedimienfos de ConfroI de CoIidod poro Ios Loboroforios de SeroIogic de Ios 8oncos de
Songre. Orgoni;ocion Ponomericono de Io SoIud. Febrero I994
^Poismon b. MonofhT , Chonok P, HirschM , MeInik J. ViroIogy (Second Edifion) FieIds,8 Inipe, D y coI.
Poven Press. M.Y. I990.
^ViroI Hepofifis ond Liver Diseose. Proceedings of fhe I990 InfernofionoI Symposiumm on ViroI
Hepofifis ond Liver Diseose. Confemporory Issues ond Fufure Prospecfs.
^PofionoI use of diognosfic fooIs in hepofifis C. JournoI of HepofoIogy,I99o, Z4 (suppIZ) Zo-34
^The freofmenf of chronic viroI hepofifis. Drug Theropy voI. 33o Mo b 347-3bb
^"The five viruses : o perspecfive" F. 8Ioine HoIIinger, MD. 8oyIor CoIIege of Medicine, Housfon,
TX.USA.En :VIPAL HEPATITIS A TO F : AM UPDATE. Posfgroduofe Course. Movember II-IZ, I994.
Sherofon Chicogo HofeI ond Towers.Chicogo, IIIinois. USA. AMEPICAM ASSOCIATIOM FOP THE
STUDY OF LIVEP DISEASES.
^MICPO8IOLO0A 8IOMEDICA. De Torres, Cofo, 8osuoIdo
CopfuIo 90. Hepofifis ViroIes. Dr Jorge E. 0on;oIe;.
^Documenfo disfribuido en Io Iro Peunion AnuoI de Unidodes CenfineIo.
0PUPO ASESOP EM HEPATITIS VIPALES. Diciembre I99Z.
Insfifufo MocionoI de MicrobioIogo "Dr C.0. MoIbron". 8s. As.

Manual Hepatitis

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VIRUS DE HEPATITIS A {HAV}

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