Tema 2.

Principios de Gnetica

Conceptos:

DNA cido nucleico que contiene instrucciones genticas usadas en el desarrollo y
funcionamiento de todos los organismos vivos conocidos y algunos virus, y es responsable de
su transmisin hereditaria

GENSegmento de ADN que contiene la informacin necesaria para la sntesis de una
protena. Desde el punto de vista de la gentica clsica, son las unidades estructurales y
funcionales de la herencia, transmitidas de padres a hijos a travs de los gametos y que regulan
la manifestacin de los caracteres heredables.

CROMOSOMA diminuta estructura filiforme formada por cidos nucleicos y protenas
presente en todas las clulas vegetales y animales

GENOTIPO Conjunto de genes que contiene un organismo heredado de sus progenitores.
FENOTIPOEs la manifestacin externa del genotipo, lo que vemos; es decir, la suma de los
caracteres observables en un individuo.
El genotipo es invariable e idntico en todas las clulas de un organismo; pero el fenotipo
puede no ser el mismo en todas ellas, pues es el resultado de la interaccin entre el genotipo y
el ambiente: Fenotipo = Genotipo + Accin ambiental

FARMACOGENETICA es el estudio de la respuesta farmacolgica del individuo segn el
genotipo

BIOLOGIA MOLECULAR

La transcripcin es un proceso por el cual las secuencias de nucleotidos del DNA se copian a
RNA, de modo que puedan dirigir la sntesis de las protenas, un proceso conocido como
traduccin .

La estructura general del RNA se diferencia de la del DNA en tres aspectos:
El RNA es una molcula de cadena simple en lugar de doble
el azcar presente en cada nucle.tido de RNA es ribosa en lugar de desoxirribosa
en vez de la base timina, el RNA posee uracilo
3 Tipos de RNA: mRNA, tRNA y rRNA. Los tres tipos de RNA se sintetizan en el ncleo mediante
enzimas RNA polimerasas bajo la direccin del DNA.

RNA mensajero (mRNA) Es la plantilla para la sntesis de protenas. Es una molcula larga
que contiene desde varios cientos a varios miles de nucletidos. Cada grupo de tres nucletidos
forma un codn que se complementa exactamente con el triplete de nucletidos del DNA. El
mRNA se forma mediante un proceso denominado transcripcin.

RNA de transferencia (tRNA)La molcula de tRNA con forma de trbol contiene slo 80
nucletidos, y su funcin consiste en aportar la forma activada de los aa a molculas de
protena en los ribosomas.
RNA ribosmico (rRNA) El ribosoma es la estructura f.sica en el citoplasma en la que tiene
lugar la sntesis de protenas. El rRNA constituye el 60% del ribosoma; el resto est. formado por
prote.nas estructurales y enzimas necesarias para la sntesis de protenas. El rRNA se sintetiza
en el nucleo, pero a diferencia de los otros tipos de RNA, este proceso se realiza en el nuclolo.
El rRNA formado se combina prote.nas ribosmicas del ncleo para producir el ribosoma, el
cual ms tarde es transportado al citoplasma.

Transcripcin
Es el proceso por el que un segmento de DNA que codifica la serie de aa, integrantes de una
protena, transcribe este informacin a una cadena de mRNA cuyas bases tendrn una
secuencia complementaria a las del DNA: C-G y A-U

De las dos cadenas de ADN que se separan slo una es utilizada para la sntesis del ARNm y se
llama hebra molde .
La sntesis de la cadena complementaria del ARNm est catalizada por la enzima ARN-
polimerasa II, que opera de la misma forma que la DNA polimerasa, moviendose en direccion 3
a 5 , sintetizando una nueva cadena complementaria de nucletidos en la direccin 5 a 3. Sin
embargo, a diferencia de la DNA polimerasa, la
RNA polimerasa no requiere cebador para comenzar la sntesis de RNA, ya que es capaz de
iniciar una nueva cadena uniendo dos ribonucletidos.
Cuando va a iniciar la transcripcin, la RNA polimerasa se une al DNA en una secuencia
especfica denominada secuencia promotora o promotor ; luego, la hlice de DNA es abierta por
un juego complejo de protenas y, as, quedan expuestos los nucleotidos; Inmediatamente,la
enzima va aadiendo ribonucletidos, movindose a lo largo de la cadena molde, desenrollando
la hlice y exponiendo nuevas regiones con las que se aparearean los ribonucle.tidos
complementarios.
El proceso de elongacin de la nueva cadena de mRNA contina hasta que la enzima encuentra
otra secuencia especial en el transcrito naciente, la seal de terminacin .
En este momento, la polimerasa se detiene y libera a la cadena de DNA molde y la recin
sintetizada cadena de mRNA

TRADUCCION
Es el proceso especfico de la sntesis de protenas. Tiene lugar en el citosol y para ello es
necesario que las cadenas del ARNm salgan del ncleo y se desplacen
Se necesitan los siguientes tipos de molculas:
Ribosomas, soporte fsico para el proceso de la sntesis de protenas.
ARNm, que lleva la informacin para sintetizar cada protena.
ARNt, que aporta cada uno de los aa.
Los aa que se necesitan como eslabones de cada protena.
Enzimas para catalizar cada una de las reacciones involucradas.

La traduccin se realiza en tres etapas diferenciadas:
1. Iniciacin . La cadena del ARNm se fija a un ribosoma en el RER.
2. Elongacin . Los ARNt se unen a travs de sus bases de formaecomplementaria a la cadena
deleARNm fijada en el ribosoma y loseaa que se van colocandoesecuencialmente se unen entre
s mediante el enlace peptdico (-CO-NH). Este proceso tiene lugar por orden de un triplete de
bases iniciador (starting codon ) que tiene la secuencia AUG que, a su vez, es reconocido por
el ARNt-iniciador. El ribosoma se va desplazando por el ARNm codn a codn y en cada paso
fija el anticodn correspondiente de ARNt.
3. Finalizacin . La lectura del ltimo codn que da la se.al de final de cadena termina el
proceso y suelta la cadena de la protena recin sintetizada en el citosol. En este proceso se
sintetiza una cadena de aa con una secuencia espec.fica, que es la estructura primaria de la
protena, pero una vez en el citosol, esta cadena lineal sufre una serie de modificaciones que se
conocen como modificaciones postraduccionales, que son cambios de su estructura lineal a una
secundaria, debidos a la unin de diversos aa mediante puentes de hidrgeno, y una estructura
terciaria, mediante una serie de repliegues sobre s misma por mecanismos que se conocen
como hlice alfa y hoja plegada, que transforman la cadena lineal
inicial en una molcula tridimensional con mltiples zonas de pliegues y repliegues, que
definitivamente conforman la protena en su configuracin funcional. Este proceso se conoce
como protein folding .

REPARACIN DEL DNA
Los mecanismos de reparacin comprenden las enzimas que simplemente revierten las
modificaciones qumicas de las bases y tambin los sistemas multienzimticos ms
complicados que dependen de la redundancia inherente de la informacin en la doble hebra del
DNA para recuperar la
molcula daada.
Reversin directa del dao Varias enzimas reconocen y revierten ciertos tipos de dao al
DNA. Una caracterstica comn de las enzimas que alteran qumicamente las bases del DNA
como parte de las vas de reparacin o del metabolismo normal (por ejemplo, metilacin de
citosina) es catalizar el salto de las bases .
Reparacin por escisin de una base Las bases daadas que no pueden repararse en forma
directa pueden eliminarse y reemplazarse mediante un proceso que se conoce como reparacin
por escisin de una base
Reparacin por escisin de nucletidos Todas las clulas tienen una va ms elaborada, la
reparacin por escisin de nucletidos (NER), para corregir los dmeros de pirimidina y otros
daos al DNA en los que las bases estn desplazadas de su posicn normal o tienen
sustituyentes muy voluminosos.
NER es la defensa principal contra dos carcingenos importantes, la luz solar y el humo del
cigarrillo.
Reparacin de apareamientos erroneous Cualquier apareamiento erroneo de la replicacin
que haya eludido las funciones de edicin de varias de las DNA polimerasas participantes
puede corregirse por un proceso conocido como reparacin de apareamientos errneos (MMR.
La importancia de la reparaci.n de los apareamientos errneo se pone en evidencia porque los
defectos en el sistema de reparacin de apareamientos errneos en seres humanos da como
resultado una incidencia elevada de cncer
Reparacin proclive al error La presencia de polimerasas proclives al error proporciona un
mecanismo infalible para replicar DNA estirados que no pueden ser corregidos por la
maquinaria de replicacin est.ndar. De hecho, esas DNA polimerasas alternativas generalmente
exceden en n.mero a las polimerasas dedicadas a la replicacin normal.

TECNOLOGIA DE DNA RECOMBINANTE
La hibridacin in situ consiste en la utilizacin de secuencias especficas de DNA o RNA para
localizer genes que no se expresan en el cultivo celular. El DNA y el RNA se pueden marcar con
marcadores radiactivos o fluorescentes. Estas secuencias marcadas se utilizan como sondas
para detectar la localizacin de los genes. La sonda se agrega a una distribucin cromosmica
(spread ) despus de separar las cadenas del DNA. Si la sonda es idntica al DNA
complementario de un
segmento del cromosoma, se hibrida y permanece en un lugar preciso del mismo

Transferencia de Southern
Se emplea para saber si se han eliminado o reordenado ciertos genes. Tambien para detectar
polimorfismos en la longitud de los fragmentos de restriccin. El DNA se digiere con
endonucleasas de restriccin y se separa mediante electroforesis sobre gel. A continuacin, se
transfieren los fragmentos a una membrana y se
detectan tras su hibridacin con sondas radiactivas de DNA.

Transferencia Northern
Se emplean para analizar las pautas y los niveles de expresin gnica en los distintos tejidos.
Mediante esta tcnica, el mRNA se separa sobre un gel y se transfiere a una
membrana; los transcritos especficos se detectan mediante sondas de DNA marcado.

La clonacin gentica consiste en la seccin de una molcula de DNA para modificar y
reordenar sus fragmentos y producir copias del DNA modificado, su mRNA y su producto
gentico. La molcula de DNA se cliva mediante una enzima bacteriana llamada enzima de
restriccin que se fija al DNA en sitios en los que encuentra una secuencia corta de pares de
bases dada y cliva la molcula en un sitio especfico de la cadena de nucletidos.
El fragmento gentico seleccionado se replica mediante la insercin en un microorganismo
unicelular; por ejemplo, una bacteria. Para ello se utiliza un vector de clonacin del tipo de un
virus bacteriano o un pequeo crculo de DNA que se encuentra presente en la mayora de las
bacterias y se conoce con el nombre de plsmido . Los virus y los plsmidos utilizados como
vectores se replican en forma autnoma en la clula bacteriana husped. Durante la clonacin
gentica, un vector bacteriano y el fragmento de DNA se mezclan y a esta mezcla se agrega una
enzima especial denominada DNA ligasa. Los vectores recombinantes formados se introducen
en un cultivo de bacterias apropiado y luego se permite que las bacterias se repliquen y
expresen el gen vector recombinante.

En la actualidad se utilizan diversos vectores y anfitriones para la clonacin (p. ej., pl.smidos,
fagos, bacterias y cromosomas artificiales de levaduras). Muchos de ellos sirven para crear
bibliotecas ,es decir, acumulaciones de clones de DNA. Una biblioteca genmica representa un
conjunto de clones derivados del DNA genmico. Estos fragmentos solapantes de DNA
conforman el genoma completo y se pueden
disponer segn su orden lineal.