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GOBIERNO DE CHILE

MINISTERIO DE OBRAS PUBLICAS


DIRECCIN GENERAL DE AGUAS
DPTO. DE CONSERVACIN Y PROTECCIN DE REC. HDRICOS




















REALIZADO POR:

CENTRO NACIONAL DEL MEDIO AMBIENTE


S.I.T. N 207
Tomo II de V.





SANTIAGO, MARZO 2010
ANLISIS DE LA COMPOSICIN
FSICO QUMICA DE LOS
SEDIMENTOS FLUVIALES Y SU
RELACIN CON LA
DISPONIBILIDAD DE METALES EN
AGUA

INTRODUCCIN - METODOLOGA






ACCIN DE APOYO: ANLISIS DE LA COMPOSICIN FSICO QUMICA DE LOS SEDIMENTOS FLUVIALES Y SU RELACIN CON LA
DISPONIBILIDAD DE METALES EN AGUA; INFORME FINAL: INTRODUCCIN - METODOLOGA.

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Ministro de Obras Pblicas
Ingeniero Civil Sr. Sergio Bitar Chacra

Director General de Aguas
Abogado Sr. Rodrigo Weisner Lazo

Jefe Departamento de Conservacin y Proteccin de Recursos Hdricos,
Direccin General de Aguas
Ingeniero Civil, MSc. Mesenia Atenas Vivanco

Inspector Fiscal
Ingeniero Civil Srta. Mnica Musalem Jara

Ingeniero Ambiental Sr. Fernando Aguirre Zepeda
Ecloga Paisajista Srta. Sonia Mena Jara

CENTRO NACIONAL DEL MEDIO AMBIENTE - CENMA

Jefe de Proyecto
MCs. Biolgicas c/m Ecologa Sra. Ximena Molina Paredes

Ingeniero Ambiental Srta. Ximena Rodrguez Bustamante
Dra. Adriana Arnguiz Acua

UNIVERSIDAD DE CHILE

Depto. Qumica Ambiental, Lab. Qumica Orgnica y Cromatografa, Fac. Ciencias
MCs. Qumica Sra. Sylvia Copaja Castillo
Qumico Ambiental Srta. Roxana Tessada Seplveda

Dpto. de Ingeniera Civil, Fac. de Ciencias Fsicas y Matemticas
Dr. Yarko Nio Campos
Ingeniero Civil Cristin Godoy

Grupo Asesor y Revisor

Universidad de Santiago de Chile (USACH)
Dra. Mara Anglica Rubio

Universidad de Chile, Lab. de Limnologa
MSc. Irma Vila Pinto






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INDICE GENERAL






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INDICE DE CONTENIDOS

I. INTRODUCCIN 8

II. OBJETIVOS 11
1. OBJETIVO GENERAL 11
2. OBJETIVOS ESPECFICOS 11

III. GENERALIDADES 12

1. ASPECTO HIDRODINMICO 12

2. ASPECTO QUMICO 13
2.1. Aguas superficiales y metales pesados 13
2.2. Sedimentos y metales pesados 14

3. ASPECTO BIOLGICO 16
3.1. Bioensayos 16
3.1.1. Bioensayos en Sedimentos 17
3.2. Bioindicadores 19

IV. METODOLOGA 23

1. CRITERIOS DE SELECCIN DE CUENCAS, SELECCIN DE REAS Y
CRITERIOS DE MUESTREO EN LAS CUENCAS DE ESTUDIO 23
1.1. Seleccin de Cuencas. 23
1.2. Criterios para la seleccin de los sitios de muestreo 25

2. METODOLOGA ASPECTO HIDRODINMICO 27
2.1. Clculos Hidrulicos 27
2.1.1. Estimacin de la topografa (forma) del lecho en la zona de inters. 27
2.1.2. Estimacin de las caractersticas friccionales del cauce. 28
2.1.3. Estimacin de las alturas de escurrimiento para distintas condiciones hidrolgicas 28
2.1.4. Estimacin del esfuerzo de corte de fondo. 28

2.2. Anlisis Granulomtrico 28

2.3. Capacidad de Transporte y Resuspensin 29

2.4. Capacidad de Intercambio (Transferencia de Masa) entre Lecho y Columna de Agua 29

3. METODOLOGA ASPECTO QUMICO 30

3.1. Metodologa de Aguas superficiales y metales pesados 30
3.1.1. Muestreo de Aguas Superficiales 30
3.1.2. Determinacin y/o Anlisis de parmetros fsicos y qumicos en laboratorio. 31

3.2. Metodologa de Sedimentos fluviales y metales pesados 32
3.2.1. Muestreo de sedimentos fluviales 32

3.2.2. Caracterizacin de Sedimentos 32
3.2.2.1. Tratamiento de las muestras 32






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3.2.2.2. Anlisis granulomtrico de sedimentos 34
3.2.2.3. Determinacin de pH y conductividad elctrica (CE) 34
3.2.2.4. Anlisis de componentes mayoritarios: carbonatos, silicatos y materia 35
orgnica 35

3.2.3. Anlisis de metales pesados en sedimentos fluviales 41
3.2.3.1. Extraccin secuencial BCR 42
3.2.3.2. Extraccin de metales solubles o unidos a carbonatos 43
3.2.3.3. Extraccin de metales totales, mtodo de agua regia 43
3.2.3.4. Determinacin de xidos de hierro, manganeso y aluminio. 43

3.2.4. Relacin porcentual metales pesados solubles en sedimento y metales pesados
disueltos en agua 44

4. METODOLOGA ASPECTO BIOLGICO 46

4.1. Biocriterio: Nivel Comunitario in-situ, Evaluacin de la calidad del agua bajo
enfoque de integridad ecolgica 46
4.1.1. Recoleccin de muestras de Macroinvertebrados bentnicos 46

4.1.2. Procedimiento de laboratorio, Anlisis de las muestras de macroinvertebrados
bentnicos. 47

4.1.3. Indices aplicados 47
4.1.3.1. Enfoque de diversidad 47
4.1.3.2. Enfoque bitico 48

4.1.4. Anlisis de resultados 49

4.2. Bioensayos: Evaluacin toxicolgica de la calidad del agua. 50
4.2.1. Metodologa para Bioensayos Campaa primavera y verano 50
4.2.1.1. Test de Toxicidad Aguda (Duracin: 48 horas) 50

4.2.2. Metodologa para Bioensayos Campaa otoo 50
4.2.2.1. Preparacin de Eludo a partir de las muestras de sedimentos 50
4.2.2.2. Test de Toxicidad Aguda (Duracin: 48 horas) 51
4.2.2.3. Test de Toxicidad Crnica (Duracin: 14 das) 51

4.2.3. Anlisis de datos 51
4.2.3.1. Anlisis bioensayos agudos 51
4.2.3.2. Anlisis bioensayos crnicos 52

5. ESQUEMA RESUMEN DE LOS ASPECTOS ANALIZADOS EN EL ESTUDIO EN
LAS TRES CUENCAS HIDROGRFICAS 56

V. REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS 58










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INDICE DE TABLAS


Tabla 1. Criterios de seleccin cuencas 24

Tabla 2. Criterios para seleccin de reas y estaciones de muestreo 25

Tabla 3. Monitoreo de calidad de agua superficial. Componentes a evaluar. 30

Tabla 4. Normas utilizadas para el muestreo y anlisis de agua superficial 30

Tabla 5. Parmetros y metodologa de anlisis qumico para compuestos y/o elementos fsicos
y qumicos en agua superficial 31

Tabla 6. Descripcin del muestreo cuantitativo de macroinvertebrados bentnicos. 46

Tabla 7. Rangos de tolerancia IBF y calidad de agua 48

Tabla 8. Resumen de metodologa qumica 57







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INDICE DE FIGURAS


Figura 1. Diagrama que muestra procesos interaccin sedimento - agua 9

Figura 2. Esquema de procesos fsicos que determinan el proceso de transferencia de
metales entre los sedimentos del lecho y la columna de agua 12

Figura 3. Componentes del enfoque de Integridad biolgica. 20

Figura 4. Transporte de sedimento segn zona fluvial 26

Figura 5. Esquema de muestreo de sedimentos en las cuencas estudiadas 32

Figura 6. Proceso de preparacin de muestra 34

Figura 7. Esquema de extraccin secuencial, mtodo BCR 42

Figura 8. Red Surber 47

Figura 9. Grafo de ciclo de vida de dos estados 54

Figura 10. Esquema resumen de los aspectos considerados en el estudio para la evaluacin de la
calidad del agua. 56






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I. INTRODUCCIN

La calidad del agua es un trmino relativo que depende del uso final que se le d al
recurso en relacin a las actividades desarrolladas en una cuenca hidrogrfica. La cuenca
se define como el espacio de drenaje y volmenes de agua donde opera el flujo hdrico,
el que se encuentra definido por sistemas topogrficos y geolgicos, los cuales
determinan territorialmente una superficie de drenaje comn donde interactan los
sistemas fsicos, biticos y socioeconmicos.

La calidad del agua en nuestro pas ha ido decreciendo en gran parte por las actividades
productivas que se desarrollan en las cuencas (deforestacin, ruptura de tierras
marginales, minera, pesquera, agricultura, extraccin de ridos), por un desequilibrio
entre oferta y demanda, por un inadecuado uso del recurso por parte de los usuarios,
como por ejemplo al verter residuos sobre los cuerpos de agua (Vila et al, 1996; OECD-
CEPAL, 2005). Los productos qumicos agrcolas, domsticos e industriales se han visto
incrementados en los ltimos aos por el aumento en especial de la actividad minera y
agrcola aumentando los riegos de contaminacin de las aguas.


En nuestro pas uno de los mayores impactos sobre el recurso hdrico en los sistemas
fluviales ha sido la contaminacin por metales pesados, principalmente por la actividad
minera las cuales han afectado las aguas y sedimentos. La actividad minera modifica el
espacio, genera grandes volmenes de residuos minerales, que histricamente han sido
descargados en algunos ros.

Un mayor incremento de metales pesados en agua est determinado en parte por las
condiciones del lugar, la naturaleza de los minerales, el proceso de extraccin minera y
factores medioambientales. En ros de la zona central histricamente se ha desarrollado
la actividad minera, y se han detectado altas concentraciones de metales totales en las
aguas superficiales. Por ejemplo asociado al material particulado se detect arsnico,
cobre, molibdeno en los ros Maipo (RM), Aconcagua (V regin) y Cachapoal (VI
regin), de origen natural y producto de vertidos mineros (Vila et al, 1996).

En Chile se esta desarrollando el proceso de establecimiento de Normas Secundarias de
Calidad Ambiental para Aguas Continentales Superficiales NSCA, para lo cual el
Departamento de Control de la Contaminacin de la Comisin Nacional del Medio
Ambiente (CONAMA) ha diseado una Gua para el Establecimiento de Normas
Secundarias de Calidad Ambiental para Aguas Continentales Superficiales, NSCA
(CONAMA, 2004). Estas normas tienen como uno de los objetivos principales el servir
de proteccin y conservacin de las comunidades acuticas y para los usos prioritarios
del agua. Para poder aplicar esta normativa se debe realizar una buena evaluacin de la
calidad del agua superficial, determinando los componentes fsicos y qumicos que la
afectan, lo que significa incorporar al componente sedimento. Como tambin tener
presente que su composicin cambia en funcin del tiempo y del espacio.

Hoy en da se evala la calidad del agua determinando los componentes fsicos y
qumicos slo de la columna de agua superficial, sin considerar a los sedimentos
propiamente tal, que la influencian directamente, a travs de la dinmica interfaz
sedimento-agua. Por otro lado conocer la calidad del agua evaluando los componentes






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Interfaz
Sumidero Fuente
Componente Qumico
disuelto o suspendido
Biota
Resuspensin
Sedimentacin
Bioacumulacin

Otros:
Bioindicacin
fsicos y qumicos del sistema da una mirada instantnea de la condicin del recurso
faltando incorporar la temporalidad en la evaluacin, siendo posible a travs de la
incorporacin de las variables biolgicas. Estas reflejan la historia acumulativa del lugar,
generando una mirada integral en el tiempo, lo que podra darse con las futuras NSCA,
las que incluyen el criterio biolgico, como una herramienta de aproximacin para
determinar impactos.

El anlisis de sedimentos se ha usado ampliamente como un indicador medioambiental
para evaluar la magnitud de la contaminacin en un sistema acutico, como estos
continuamente interaccionan con la fase liquida, es conveniente combinar anlisis de
sedimento y agua. Los sedimentos actan como portadores y posibles fuentes de
contaminacin, comportndose como un reservorio de contaminantes (FDEP, 1994;
Calmano, 1996). Bajo determinadas condiciones fsicas y qumicas estos pueden tener
efectos adversos sobre la biota la cual servira de bioindicadora, como tambin
transfiriendo compuestos txicos a lo largo de la cadena trfica por bioacumulacin
(U.S. EPA, 1998), como por ejemplo metales pesados (Fig. 1). La movilizacin y
disponibilidad de componentes dependen de procesos fsicos, qumicos y biolgicos.
Estos dependen en gran medida del intercambio de masa en la interfase sedimento -
columna de agua.

















Fuente: modificado de Buffle & De Vitre, 1994.

Figura 1. Procesos interaccin sedimento - agua

La sedimentacin del material particulado permite almacenar diferentes especies
qumicas, tanto metales como de otros tipos de contaminantes, influyendo en la
composicin del agua superficial. Adems del movimiento del material particulado a
travs de la columna de agua, tambin provoca un flujo de especies qumicas desde los
sedimentos hacia la solucin natural.

Los sedimentos pueden ser movilizados a la columna del agua por cambios en las
condiciones ambientales tales como pH, potencial redox, oxigeno disuelto o la presencia






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de quelatos orgnicos (Frstner, 1981; Sing et al., 1987; Carignan y Tessier, 1988;
Vaithiyanathan et al., 1993; Singh et al., 1999). Por otra parte, numerosos estudios han
demostrado el poder quelatante del EDTA, que disuelve metales de los sedimentos
incorporndolos a la columna del agua (Frimmel et al., 1989; Alder et al., 1990; Gonsior
et al., 1997). Otra posibilidad es que la presencia de ciertos componentes de las
formulaciones de detergentes como son los tensioactivos, agentes blanqueadores,
estabilizantes, entre otros, participen en la movilizacin de los metales pesados (Wiener
et al., 1984; El Falaki et al., 1994).

Por tanto, el anlisis de metales pesados en sedimentos nos permite detectar otra fuente
de contaminacin que incide en la calidad de las aguas y tambin proporciona
informacin a cerca de las zonas crticas del sistema acutico (Frstner y Salomons,
1980; Baudo y Muntau, 1990; Belkin y Sparck, 1993; Frstner et al., 1993; Chen et al.,
1996; Moalla et al., 1998). De la concentracin total del metal, slo ciertas formas
qumicas son txicas para los organismos, estas incluyen iones libres y metales
liposolubles (Morrison et al. 1989; Chen et al., 1996). Es importante considerar la
hidrodinmica del sistema que permita establecer las condiciones de transporte de las
partculas en la zona de interfaz y sus posibles repercusiones en la columna de agua
(Rosas, 2001).

Respecto al componente biolgico, la NSCA establece la incorporacin del criterio
biolgico a travs del uso de bioindicadores y/o bioensayos, como herramienta de
aproximacin para determinar el impacto producido por situaciones de emergencia
relacionadas con la proteccin de comunidades acuticas.

En este estudio se realiz un diagnstico de cuencas de la zona central del pas
pertenecientes a la zona hidrolgica semirida y subhmeda (Niemeyer & Cereceda,
1994) que contasen con proceso de norma secundaria en desarrollo y que presentaran
actividad minera, con el fin de realizar un estudio integral para la evaluacin de la
calidad del agua. Este estudio integral consisti en generar metodologas para relacionar
las matrices sedimento - agua superficial, tomando en cuenta la dinmica fsica y
qumica, la composicin comunitaria de la biota in situ y poblacional in vitro a travs de
bioensayos. Con ello se contribuye a generar informacin para aporte a la planificacin
del recurso hdrico de acuerdo a los estndares actuales de proteccin ambiental que se
desarrollen en el pas.








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II. OBJETIVOS

1. OBJETIVO GENERAL

Obtener una caracterizacin fsica y qumica de los sedimentos en cuencas con
Normativa Secundaria de Calidad Ambiental (en adelante NSCA), y analizar la
influencia de los sedimentos en la calidad del agua superficial, fundamentalmente en
metales, estableciendo la relacin sedimento-agua.


2. OBJETIVOS ESPECFICOS

Identificar las principales fuentes de contaminacin en las reas de estudio de las 3
cuencas.
Analizar y caracterizar la calidad del agua en las reas definidas en las cuencas
seleccionadas.
Analizar y caracterizar en sus aspectos fsicos y qumicos los sedimentos de las reas
definidas en las cuencas seleccionadas.
Establecer relaciones para metales en la matriz sedimento y en la matriz agua.
Evaluar la calidad del agua bajo enfoque de integridad ecolgica.
Evaluar toxicolgicamente el agua poral obtenida de sedimentos.








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III. GENERALIDADES

1. ASPECTO HIDRODINMICO

La interaccin entre el escurrimiento y el lecho en un cauce natural determina el
comportamiento de los sedimentos al interior del sistema. Es en la interfaz agua/lecho en
donde se realiza un intercambio constaste de masa, calor, energa y momentum, a
distintas escalas espaciales y temporales. El intercambio de masa disuelta entre los
sedimentos de fondo y la columna de agua determinan en gran medida la calidad de esta
ltima, debido a la capacidad de los sedimentos de adsorber contaminantes, como por
ejemplo, metales pesados. Actualmente, existe suficiente evidencia que indica que la
turbulencia de la columna de agua es un factor muy importante que determina dichas
tasas de intercambio (e.g., Hondzo, 1998; Steinberger & Hondzo, 1999) en conjunto con
otros parmetros qumicos. Por ejemplo, en el caso de los metales pesados, los procesos
qumicos bsicamente determinan la disponibilidad de los solutos para ser transferidos
desde los sedimentos a la columna de agua, pero la turbulencia domina los flujos
msicos en la interfaz sedimento/agua. En particular, la turbulencia controla la existencia
de vrtices que perturban la capa lmite difusiva forzando tasas de intercambio mayores
que las que se tendran por efectos puramente moleculares (Huettel & Webster, 2001).

Los procesos de depositacin y erosin de material fino presente en el lecho, que son
controlados tambin por la turbulencia del flujo (Nio et al., 2003), determinan la
posibilidad de retener los contaminantes adsorbidos en las partculas de sedimento en el
lecho (en el caso de la sedimentacin) aumentando sus tiempos de residencia o, por el
contrario poner material fino en la columna favoreciendo procesos de desorcin (en el
caso de procesos de erosin o suspensin de partculas desde el lecho).

As, se hace necesario estudiar las caractersticas hidrulicas y turbulentas que se
presentan en los sitios que sern estudiados, para evaluar tanto los procesos de
intercambio de masa en la interfaz sedimento/agua, como los procesos de transporte de
sedimento asociados. Con este fin resulta tambin relevante caracterizar la granulometra
del lecho y de los sedimentos transportados en dichos sitios. La Fig. 2 muestra
esquemticamente los procesos fsicos recin mencionados.

ADSORCION - DESORCION
TRANSPORTE, RESUSPENSION, SEDIMENTACION
DE PARTICULAS DE SEDIMENTO
TRANSFERENCIA DE MASA
DISUELTA
MEZCLA TURBULENTA
h
v

d
s
LECHO
COLUMNA DE AGUA


Figura 2. Esquema de procesos fsicos que determinan el proceso de transferencia de metales
entre los sedimentos del lecho y la columna de agua






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En la figura 2, v denota velocidad del flujo, h altura de escurrimiento, esfuerzo de corte
de fondo, d
s
tamao del sedimento.


2. ASPECTO QUMICO

En los sistemas acuticos se disuelven numerosas sales y sustancias de acuerdo a sus
solubilidades. La presencia en el terreno de diferentes materiales y estructuras
geolgicas son fuente de una gran variedad de iones disueltos en aguas superficiales, los
que nos permitiran saber, de no haber existido la actividad humana, que tipo de suelo
atraviesa un cauce de agua. Algunos de estos iones se encuentran en forma mayoritaria,
respecto a los dems elementos en todas las aguas continentales: Na
+
, K
+
, Ca
2+
, Mg
2+
,
Cl
-
, SO
4
2-
, CO
3
2-
, mientras que otros se hallan a niveles de trazas, como es el caso de los
metales pesados, siendo algunos de ellos necesarios para el correcto desarrollo de los
microorganismos, plantas y animales. La importancia de los metales pesados en aguas y
sedimentos es por su elevada toxicidad, alta persistencia y rpida acumulacin por los
organismos vivos.

2.1. Aguas superficiales y metales pesados

En la actualidad se estima que ms de un milln de sustancias diferentes son
introducidas en las aguas naturales a travs de los vertidos antropognicos (Frstner,
1993), las que pueden alterar las caractersticas organolpticas del agua, perturbar
severamente el ecosistema y/o ser directamente nocivas para el hombre.

La disponibilidad y calidad qumica de las aguas naturales de los ros de Chile ha estado
influenciada por diversos factores, tales como: el clima ocenico (temperaturas,
precipitaciones y viento), el comportamiento hidrolgico de los escurrimientos
superficiales y subterrneos. Por litologa los ros del Norte de Chile poseen rangos
naturales de concentraciones altas de metales disueltos, en la zona central hay alta
concentracin de boro, cobre, hierro, molibdeno en parte por origen natural y por
vertidos agrcolas y mineros (DGA, 1996; OECD-CEPAL, 2005). En 1990 se determin
que de 102 acuferos, 45 presentaron alto nivel de nitrato y 35 altos concentraciones de
hierro y manganeso. Ha aumentado la erosin, el ingreso de material particulado y el
vertimiento de riles y agroqumicos al cauce, modificando los tramos medios y bajos de
los ros (Molina y Vila, 2006).

Los contaminantes orgnicos y los metales pesados no se eliminan de los ecosistemas
acuticos en forma natural debido a que no son biodegradables (Frstner & Witmann,
1981; Murray, 1996). Los metales pesados en los sistemas acuticos como los ros
tienden a formar asociaciones con sustancia minerales (carbonatos, sulfatos, etc.) y en
mayor grado con sustancias orgnicas mediante fenmenos de intercambio inico,
adsorcin, quelacin, formacin de combinaciones qumicas etc., acumulndose
principalmente en los sedimentos (Frstner & Witmann, 1981; Dekov et al., 1998).










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2.2. Sedimentos y metales pesados

Los sedimentos se van formando por acumulacin de materiales de origen detrtico,
qumico u orgnico, resultantes de la erosin de rocas, precipitacin de elementos
disueltos en el agua, acumulacin de materia orgnica; depositndose al disminuir la
energa del fluido que los transporta (agua o viento). Su composicin depende de los
materiales que lo originan por procesos de meteorizacin u otros influenciados por el
hombre, (Mc Bride, 1994; Domnech, 1997).

En general, la composicin qumica de un sedimento resulta de un componente orgnico
(microorganismos, residuos, detritus) e inorgnico. Los inorgnicos son generados en la
erosin de las rocas, en los materiales sueltos y consolidados, adems de compuestos
generados por precipitacin de sales disueltas, tales como sulfatos, carbonatos y slice
(Hakanson, 1983).

La naturaleza qumica primaria de un sedimento est determinada por los procesos de
meteorizacin que lo han originado y de fraccionamiento mecnico (lavado) por efecto
del transporte y la deposicin (Welcomme, 1985). La composicin original puede
cambiar despus de la deposicin por procesos de diagnesis, litificacin y
metamorfismo (Huerta, 2006).

Origen y composicin qumica de sedimentos

De acuerdo al transporte, los sedimentos pueden ser de material disuelto, suspendido y
depositado, lo cual depender del tamao de la partcula y de la turbulencia de la
corriente. Las partculas en suspensin son importantes en el sedimento, puesto que
estn constituidas por partculas finas mantenidas por la hidrodinmica del sistema las
que se pueden asentar al disminuir la velocidad de la corriente o por presencia de
partculas de mayor tamao que se redepositan por gravedad. Estas partculas pueden
contener elementos txicos como metales pesados, o servir como nutrientes o ser de
naturaleza orgnica. Los metales pesados en los sedimentos estn asociados a las
arcillas partculas de tamao entre 2 - 0,45 m, con carga negativa que intercambian
cationes y dada su gran rea superficie/volumen, son altamente reactivas (Juregg y col,
1982; Singh y col, 1999). La fraccin arcilla generalmente contiene cuarzo, feldespatos,
xidos de hierro y carbonatos, adems de los minerales arcillosos (Huerta, 2006). Los
contaminantes y nutrientes estn adsorbidos sobre las partculas a la forma de material
orgnico, carbonatos y sulfuros, incluida en la matriz mineral de minerales especficos
tales como apatita o fosfato de calcio, silicatos y otros no alterables (Alfaro, 1986).

La lnea base natural de un sedimento, representado por el material litognico, vara
geogrficamente y temporalmente de acuerdo a las caractersticas geolgicas, climticas
y biolgicas (vegetacin) (Ayers, 1985; Gonzlez, 1986). Se ha encontrado que la
concentracin promedio de elementos tales como Si, Al, Fe, K, Ga, Hg, Ta, Ti y U no
vara, contrario al Ca, Cs, Cu, Li, Mo, Ni, Pb, Sr y Zn (Sigg et al., 1987; Singh y col.,






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1999), lo que se atribuye a la intensidad del proceso de intemperizacin. Por otra parte,
al comparar la razn entre los elementos detectados en la fase disuelta y fase particulada,
mostraron que respecto al contenido total, ms del 90% de P, Ni, Si, Co, Mn, Cr, Pb, V y
Cs fue transportado por las partculas.

Propiedades qumicas de la superficie de las partculas

Genricamente los mecanismos de adsorcin presentes en la interfase slido-lquido, se
pueden clasificar en los siguientes:

a) Adsorcin fsica, debido a fuerzas no especficas de atraccin (tales como las
fuerzas de Van der Waals) que involucran las nubes electrnicas tanto del metal
como del adsorbente.

b) Adsorcin electrosttica (intercambio de iones) debido a la atraccin por fuerzas
de Coulomb entre la carga del soluto.

c) Adsorcin especfica, resultado de las fuerzas de atraccin responsable de los
enlaces qumicos a sitios especficos de la superficie del adsorbente.

d) Coprecipitacin o formacin de solucin slida, cuyo resultado puede conducir a
la remocin de la especie metlica desde la solucin.

Los procesos de adsorcin son influenciados por las caractersticas fsicas y qumicas de
la solucin natural. El pH, potencial redox, temperatura, concentracin de agentes
complejantes, concentracin de elementos traza, especiacin de stos, propiedades
enlazantes, fuerza inica, composicin y propiedades de la superficie, son factores
significativos en la asociacin de la interfase. Sin embargo, el factor ms relevante en
esta interaccin es el pH, por ejemplo los iones metlicos que se hidrolizan a pH inferior
a 8,5 pueden ser adsorbidos por el material particulado (Frstner & Solomons, 1980;
Bejarano, 1992; Chen y col, 1996; Moalla y col., 1996).

La composicin de los sedimentos es altamente heterognea e incluye tanto minerales
como materia orgnica. Los metales ingresan a travs de procesos de precipitacin,
intercambio inico, coprecipitacin y adsorcin. Ciertas formas de metales son
resistentes al intercambio con el agua, mantenindose estables por largos perodos de
tiempo (entre stos se destacan los provenientes de restos rocosos y de matriz arcillosa)
(Fuenzalida, 1965; Klohn, 1972; Golterman, 1983). En los sedimentos puede haber
remobilizacin de especies hacia la columna de agua, porque los procesos qumicos
estn fuertemente determinados por la degradacin de materia orgnica que origina una
secuencia de reacciones de xido-reduccin. Esta secuencia redox se origina al
reaccionar la materia orgnica (en exceso) con el oxgeno, nitratos, sulfatos y
bicarbonatos (proceso que remueve el oxgeno disuelto) dando lugar a la formacin de
especies reducidas (anhdrido carbnico, amonio, sulfuros y metano). Dichos productos






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provocan cambios en la qumica de los sedimentos reduciendo los metales oxidados, as
a la forma soluble se mobilizan a la columna de agua. Ejemplos tpicos son las
trasformaciones que experimentan las especies oxidadas de hierro y manganeso, que en
ambientes sedimentarios son reducidos y trasformados en especies solubles e ingresan a
la solucin (Castro, 1982; Alonso, 1983; Gonzlez, 1991).

Varias actividades productivas, tales como la minera metlica y la agricultura, han
modificado la calidad de los sedimentos repercutiendo en la calidad del agua superficial
en los ros. Esto constituye un riesgo ambiental puesto que con estas mismas aguas se
debe abastecer a la poblacin y regar los suelos agrcolas.


3. ASPECTO BIOLGICO

La evaluacin de la calidad del agua en el pas se ha estado realizando en base a anlisis
fisicoqumicos y bacteriolgicos a travs del cumplimiento de la NCh 1333. Sin
embargo, los recursos hdricos en el pas estn en deterioro, para lo cual hoy en da se
est desarrollando el proceso de Norma Secundaria de Calidad para la Proteccin de las
Aguas Continentales Superficiales en el cual uno de los objetivos es la proteccin de
los ecosistemas y de las comunidades acuticas. El cumplir con este objetivo genera una
serie de necesidades que en algunos casos no es de fcil cumplimiento. Es importante
para normar el conocer el estado natural del recurso, pero este factor est enmascarado
por la contaminacin histrica de los cauces, establecer los componentes que influyen en
la evaluacin de la calidad de agua y determinar el nivel de estado del recurso en el
tiempo. Para ayudar a dilucidar estos aspectos es que la Gua de CONAMA representa
una oportunidad, el establecer el uso de bioensayos y/o bioindicadores para evaluar la
calidad de agua.

3.1. Bioensayos

Histricamente, la evaluacin de contaminantes en sedimentos, mediante el uso de
organismos acuticos, se ha enfocado en pruebas de eludos (elutriates) y agua
intersticial (pore water).

Las aguas intersticiales se han utilizado extensamente, asumiendo que a menudo los
contaminantes de los sedimentos estn en equilibrio con el agua intersticial. Sin
embargo, la qumica del agua intersticial puede ser alterada durante su extraccin de los
sedimentos. Los test con agua intersticial pueden sobrestimar la toxicidad de los metales
por la oxidacin de los sulfuros, los cuales de otro modo estaran ligados a metales, o
subestimar la toxicidad si los metales se precipitan con hierro durante la extraccin.
Adicionalmente, muchas especies bentnicas ingieren sedimentos y esta va alimenticia
de exposicin a los contaminantes no es medida en test con aguas intersticiales.

Se ha desarrollado un reciente nfasis en el desarrollo de test de toxicidad en conjunto
con los sedimentos (whole-sediments) con especies bentnicas que viven en contacto o
insertos en los sedimentos. La mayora de los test son agudos (usualmente de 10 das) y
determinan la sobrevivencia de los organismos en sedimentos contaminados. Sin






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embargo, ha aumentado la necesidad de test crnicos que midan crecimiento y
reproduccin en largos periodos. (Simpson et al., 2005).


3.1.1. Bioensayos en Sedimentos

Similar a los test de toxicidad en especies acuticas, las diversas especies bentnicas
tienen distintas sensibilidades a los txicos; por lo tanto es importante en evaluaciones
de calidad de sedimentos utilizar un conjunto test con organismos que tengan diferentes
estrategias de alimentacin y de comportamiento para cubrir todas las rutas potenciales
de exposicin. Esta pueden incluir una especie bentnica que viva en la interfase del
sedimento, un alimentador de los depsitos epibentnicos, e.g. anfpodos (ingestin de
sedimentos), un anfpodo excavador (consumo de agua y sedimentos), un bivalvo
bentnico (consumo de agua y sedimentos) y un gusano poliqueto (ingestin de
sedimentos) (Simpson et al, 2005).

Los test de toxicidad desarrollados en conjunto con los sedimentos colectados de terreno
y la dosificacin de estos en laboratorios es una lnea esencial que evidencia que los
contaminantes de los sedimentos pueden producir efectos observables en las
comunidades bentnicas.

Estos protocolos miden toxicidad aguda a corto plazo (10 das) en macroinvertebrados
bentnicos, tales como anfpodos y quironmidos. Lamentablemente, la mayora de los
test de toxicidad de sedimentos estn enfocados en toxicidad aguda (tiempos cortos de
exposicin) y no en toxicidad crnica (tiempos largos de exposicin), ya que su larga
duracin aumenta los costos e impide su aceptacin generalizada (Simpson et al, 2005).
Los primeros bioensayos en sedimentos fueron realizados a comienzos de los 1970 y
demostraron la conducta de evasin de los anfpodos a sedimentos contaminados.
Muchos de los trabajos que demostraron los efectos de los sedimentos contaminados
llegaron en 1980. A mediados del 1990, se publicaron los mtodos estandarizados para
evaluaciones en conjunto con los sedimentos con US EPA, American Society for
Testing and Materials (ASTM) y Environmental Canada. (Burton y Landrum, 2003).

Las especies de agua dulce que han sido utilizadas en Estados Unidos incluyen especies
bentnicas y de la columna de agua, como: Selenastrum capriconutum, Daphnia magna,
Ceriodaphnia dubia, Pimephales promelas, Hyalella asteca, Chironomus tentans y C.
riparius, y Hexagenia limbata (ASTM, 2005).

La seleccin del organismo de prueba tiene la mayor influencia en la relevancia, xito e
interpretacin de los test, ms an si consideramos que no existe un organismo que sea
el ms adecuado para todos los sedimentos.

Otra manera de poder evaluar efectos de toxicidad es a travs de anlisis de ciclo de
vida. Una metodologa clsica de comprensin de ciclos de vida est dada por anlisis de
tablas de vida, que corresponde a un registro de mortalidad y reproduccin en el tiempo
para una cohorte de organismos mantenidos en laboratorio. Una tabla de vida dinmica o
de cohorte corresponde al seguimiento de una nica cohorte de individuos, i.e. a un






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grupo de individuos nacido dentro de un mismo intervalo de tiempo breve, desde el
nacimiento hasta la muerte del ltimo sobreviviente (Begon et al, 2006).

Las pruebas de toxicidad son herramientas esenciales para la evaluacin de la capacidad
de un material de causar efectos adversos (letales o subletales) en organismos vivos
acuticos, esto debido a que son indicadores sensibles y ecolgicamente relevantes (NCh
2083). En este tipo de procedimiento, las respuestas (fisiolgicas, demogrficas o
poblacionales) de organismos acuticos son usadas para detectar o medir la presencia o
efecto de una o ms sustancias, desechos o factores ambientales, solos o combinados.

Diversos grupos de organismos han sido utilizados en bioensayos estandarizados, para la
evaluacin de la condicin tanto de agua como de sedimentos, entre ellos se encuentran
algas, fitoplancton, protozoos, rotferos, cladceros, anlidos, moluscos, artrpodos,
decpodos, insectos y peces.

En general, las principales consideraciones para la seleccin de organismos a utilizar en
pruebas de toxicidad son (APHA, 1998):
a) Su distribucin geogrfica, abundancia y disponibilidad en amplios perodos del ao,
b) su importancia recreacional, econmica y/o ecolgica,
c) sus caractersticas ecolgicas, e.g. requerimientos y duracin de su ciclo de vida,
d) la facilidad de cultivo, y
e) sus condiciones fsicas generales.

Exhaustivamente se han desarrollado pruebas de toxicidad aguda y crnica sobre
organismos planctnicos, entre ellos se mencionan: efecto de metales pesados sobre
poblaciones de rotferos (Rao & Sarma 1986, 1990; Luna-Andrade et al., 2002; Gama-
Flores et al., 2007); efecto de pesticidas sobre rotferos (Gama-Flores et al., 1999, 2004;
Sarma et al., 1998; Sarma et al., 2001a, 2001b, 2001c); efecto de insecticidas sobre
coppodos (Jonson, 1978); efecto de enriquecimiento orgnico sobre cladceros
(Martnez-Jernimo & Garca-Gonzlez, 1994; Mangas-Ramrez et al, 2002); efecto de
metales de pesados en sedimentos sobre poblaciones de cladceros (Burton et al., 2001);
entre otros. Dada la facilidad de cultivo y las respuestas sensibles a diversidad de
agentes, este tipo de ensayos se encuentra ampliamente validado.

A pesar de la validez y pertinencia del uso bioensayos con organismos zooplanctnicos,
en Chile la normativa regula tan slo el uso de cladceros en ensayos de toxicidad aguda
para evaluar la calidad de agua. Se han asumido, por tanto, las metodologas propuestas
por agencias internacionales, como U.S. EPA, OECD, etc. para su uso en ensayos
crnicos que permitan evaluar la mortalidad y natalidad asociada a concentraciones
estandarizadas de algn contaminante.

Sin embargo, esta aproximacin resulta reduccionista si se evala la definicin original
de ecotoxicologa propuesta por Truhaut en 1969, quien la defini como "la rama de la
toxicologa enfocada en el estudio de efectos txicos causados por contaminantes
naturales y sintticos, sobre los componentes de los ecosistemas, animales, vegetales y
microbiota, en un contexto integral (Truhaut, 1977). Caswell (1996) ha sealado al
respecto que los procesos ecolgicos en cierto nivel jerrquico son determinados por
mecanismos presentes en niveles inferiores, y cuya respuesta se evidencia en un nivel






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inmediatamente superior. Bajo esta consideracin, una crtica al uso de bioensayos
crnicos es la desvinculacin entre efectos de contaminantes sobre los niveles de
organizacin celular/molecular y organsmico y sus posibles consecuencias en los
niveles de organizacin superior (Bridges & Dillon, 1993).

Una alternativa propuesta y exitosamente utilizada en evaluacin de contaminantes y sus
efectos sobre parmetros demogrficos e historias de vida, es el acercamiento
poblacional matricial, y complementariamente los anlisis de sensibilidad tanto
prospectivos (sensibilidad y elasticidad) como retrospectivos (LTRE), los que
permitiran establecer enlaces entre visiones puramente individuales y sus efectos a nivel
poblacional (Bridges & Dillon, 1993; Caswell, 1996; Levin et al., 1996; Benton &
Grant, 1999; de Kroon et al., 2000; Barata et al., 2002; Caswell, 2001; Pardo et al.,
2007, Ramos-Jiliberto & Arnguiz-Acua, 2007).

Ya que el diseo experimental de los ensayos crnicos altera fuertemente la estimacin
cuantitativa de las tasas vitales y de los rasgos de historia de vida, la aproximacin
matricial propuesta permite comparar diferencias de respuestas demogrficas entre
concentraciones de muestra (tratamientos) tomando los beneficios del cuerpo terico y
tcnico desarrollado actualmente en el anlisis de Experimentos de Respuesta de Tabla
de Vida, LTRE (Caswell, 2001).


3.2. Bioindicadores

Uno de los problemas al evaluar la calidad del agua son las escalas espaciales y
temporales adecuadas. La evaluacin qumica refleja las condiciones instantneas de un
cuerpo de agua, sin embargo los organismos permiten detectar condiciones ambientales
especficas incorporando criterios biolgicos que son valores numricos o expresiones
narrativas que describen la integridad biolgica de la estructura y funcin de las
comunidades de aguas destinadas a diferentes usos (U.S. EPA, 2003) (Fig. 3).

Hay varios ejemplos de la incorporacin de comunidades acuticas para la evaluacin de
la calidad del agua de sistemas fluviales, situacin que es realidad en Estados Unidos y
Europa (DMA, 2000; U.S. EPA, 2003) y en pases de Latinoamrica estn el proceso de
incluirlas (Panam, Venezuela, Brasil, Colombia) (Davis & Simon, 1995) habiendo ya
desarrollado una serie de estudios donde han demostrado su utilidad (Roldan, 2003). En
su mayora se han usado a los macroinvertebrados bentnicos, puesto que corresponden
alrededor del 80% del bentos fluvial (Rosenberg & Resh, 1993). Los
macroinvertebrados bentnicos, o bentos (macro = grande; invertebrado= animal sin
huesos; bentos = fondo) son organismos que habitan en el fondo de los cuerpos de agua
y que sirven como indicadores biolgicos de la calidad del agua (Prat et al., 2009).

La U.S. EPA (U.S. Environmental Protection Agency) sugiere la aplicabilidad de los
indicadores ambientales desde los aos setenta en adelante para dar informacin de la
estructura y funcin de las comunidades biolgicas presentes y/o sus cambios histricos,
realizando cambios para incorporar la salud de los sistemas biolgicos a los programas
en vas a restaurar y mantener la integridad de las aguas (Clean Water Act, 1972).







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Fsica
Qumica

IE
Biologa
La biota estara representada por los macroinvertebrados bentnicos, los cuales son
bioindicadores. Estos responden a cambios fsicos y qumicos del sistema, reflejando la
integridad biolgica (IB), la cual se define como la capacidad de un ecosistema acutico
para soportar y mantener un balance integrado, una comunidad de organismos adaptada
teniendo una composicin de especies, diversidad y organizacin funcional comparable
al del hbitat natural de una regin (Davis & Simon, 1995), Fig. 3.













Figura 3. Componentes del enfoque de Integridad ecolgica (I.E.).

Los bioindicadores reflejan cambios fsicos y qumicos del sistema. Se define integridad
biolgica como la capacidad de un ecosistema acutico para soportar y mantener un
balance integrado, una comunidad de organismos adaptada teniendo una composicin de
especies, diversidad y organizacin funcional comparable al del hbitat natural de una
regin (Davis & Simon, 1995).

En general, el concepto de especie indicadora es ampliamente aceptado y est definido
como: especie (o conjunto de especies) que tienen un particular requerimiento en
relacin a variables fsicas o qumicas, tales que los cambios en la presencia/ausencia,
nmero, morfologa, fisiologa o de comportamiento de esas especies indican que las
variables fsicas o qumicas consideradas, estn por fuera de los lmites acostumbrados o
normales (Rosemberg & Resh, 1993).

El indicador biolgico es un detector que muestra la existencia de condiciones que son
complejas de interpretar y resultan de una multitud de factores difciles de medir
directamente. Como pueden utilizarse ms de uno, en la interpretacin del proceso,
todos ellos se combinan dentro de un ndice simple llamado ndice Biolgico (Ghetti,
1986).

Se distinguen tres enfoques principales para evaluar la respuesta de las comunidades de
macroinvertebrados a la contaminacin. Estos son: el de diversidad, el saprobio y el
bitico.






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El enfoque de diversidad considera tres componentes fundamentales de la comunidad:
riqueza, uniformidad y abundancia. La comunidad natural sin perturbacin presenta gran
diversidad de especies y bajo nmero de individuos por especie; o bajo nmero de
especies y muchos individuos de stas especies. A pesar de la claridad del concepto sus
resultados pueden variar dependiendo del mtodo de muestreo, naturaleza del sustrato y
poca del ao. Se han desarrollado varios ndices para medir la calidad del agua, siendo
uno de los ms conocidos el de Shannon Weaver (1949, 1963); el de Simpson (1949) y
el de Margalef (1951).

El enfoque saprobio se incorpor en medidas de calidad del agua desde 1909 por
Kolkwitz & Marsson, en Alemania. Se refiere a la capacidad que tenan ciertos
organismos de vivir en determinados niveles de contaminacin, distinguiendo tres zonas:
Polisaprbica, Mesosaprbica y la Oligosaprbica; esta ltima es para lugares donde los
procesos oxidativos son los predominantes. Se incorpora a los organismos desde los
hongos y algas hasta vertebrados y se incorporan aspectos fisicoqumicos DBO
5
, amonio
y oxgeno disuelto. Puede ser aplicado a todo tipo de ros, pero se requiere nivel de
especie, lo cual no siempre es disponible en el neotrpico, dado el conocimiento
taxonmico del cual se dispone. Hoy en da se usa en Alemania para la evaluacin de la
calidad del agua donde cada cinco aos se actualizan los mapas de calidad de agua, lo
que est a cargo de la LAWA (Asociacin de los Estados para el trabajo sobre el Agua).

El enfoque bitico abarca los aspectos de saprobiedad, combinando diversidad de
especies con informacin cualitativa sobre la sensibilidad ecolgica de taxones de
individuos en una expresin numrica. En la mayora de los ndices se calcula un puntaje
basado en la tolerancia de cada taxn de una comunidad de macroinvertebrados y en una
medida de su abundancia. Se han usado distintos niveles de categora taxonmica para
asignar los puntajes de tolerancia, sin embargo se sabe que el grado de tolerancia de
muchos macroinvertebrados bentnicos difiere dentro de la familia y ms an entre
gneros. Estos ndices se han incorporado en varios pases en los monitoreos biolgicos,
algunos de los ms usados son el Biological Monitoring Working Party (BMWP)
(1970), el ndice de Hilsenhoff (1988).

En Latinoamrica los ndices ms ampliamente aplicados son los siguientes:

BMWP (Biological Monitoring Working Party) adaptado y modificado a la
fauna del sur occidente Colombiana por la Universidad del Valle (Ziga de
Cardoso, 1997 en Domnguez & Fernndez, 1998)

BMWP (Biological Monitoring Working Party) de Armitage et.al. (1983) en
Domnguez & Fernndez (1998) utilizado en el ro de Tucumn Argentina,

EPT (Ephemeroptera, Plecptera y Trichoptera) de Carrera & Fierro (2001)
aplicado en el ro Angosturita en Argentina y,

Indce Bitico de Familia aplicado en la Cuenca del estero Peu Peu, Chile
(Figueroa et al., 2003).







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En el pas ya se han iniciado experiencias mediante el uso de bioindicadores a travs de
uso de ndices biticos para ros de diferentes zonas hidrolgicas. Han sido aplicados
con mayor frecuencia en la zona subhmeda y hmeda (CENMA, 2006; Sabando y
Pealoza, 2006; Figueroa et al, 2003; Figueroa, 2004; Figueroa et al, 2007). La cuenca
del ro Bo Bo es la ms adelantada en este aspecto, puesto que el uso de bioindicadores
se considera como parte del programa de vigilancia en el Anteproyecto de NSCA.
Actualmente CONAMA ha formulado diversos estudios en el cual uno de los objetivos
es la aplicacin de bioindicadores para evaluar la calidad de aguas.







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IV. METODOLOGA

1. CRITERIOS DE SELECCIN DE CUENCAS, SELECCIN DE REAS Y
CRITERIOS DE MUESTREO EN LAS CUENCAS DE ESTUDIO

1.1. Seleccin de Cuencas.

Para la seleccin de las cuencas de estudio se realiz una recopilacin y posterior
revisin de informacin bibliogrfica disponible sobre las posibles cuencas de inters
pertenecientes a la Zona Central de nuestro pas (entre la IV y la VI regin). En la
seleccin de las cuencas de estudio se consideraron los siguientes criterios descritos a
continuacin:

Cuencas incorporadas en los Programas Priorizados de Normas Secundarias de
Calidad Ambiental y/o en desarrollo de dicho proceso normativo.

Cuencas que presentaran actividad minera, ya sea pasada, presente o que tengan
en cuenta a futuro contar con esta actividad.

Cuencas que por su naturaleza geolgica poseen en sus aguas un contenido
natural de metales.

Cuencas que contasen con registros de aspectos fsicos, qumicos y biolgicos.

Informacin generada en las cuencas.

Cuencas de inters a ser sugeridas por el equipo de expertos del proyecto.

Experiencia del equipo de trabajo.

Las cuencas propuestas y la informacin recopilada de estas fue obtenida de diversas
fuentes de informacin, tales como estudios de servicios pblicos, publicaciones y otros
antecedentes provenientes de universidades, Juntas de Vigilancia e informes generados
por el mismo equipo consultor. Se revis el estudio Diagnstico y Clasificacin de
cursos y cuerpos de agua segn Objetivos de Calidad (DGA, 2004) y se recopil
informacin sobre estaciones de monitoreo vigentes en las cuencas a proponer
(Estaciones de Monitoreo de Calidad de agua (Red de Calidad de Agua), Estaciones
Fluviomtricas y Sedimentomtricas). Con la informacin disponible y los criterios
descritos anteriormente, se propusieron cuencas de inters en la zona central del pas, los
cuales fueron formalizados y discutidos en un Panel de expertos realizado el da 24 de
octubre del ao 2007 para definir las cuencas de estudio (Tabla 1).








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Tabla 1. Criterios de seleccin de cuencas

Cuenca del Ro Choapa
Cuenca incluida en el Dcimo Programa Priorizado de NSCA (etapa inicial, se debe
redactar anteproyecto).
Se encuentra aproximadamente en un 100% intervenido por la actividad minera.
En proyecto, futura construccin de embalses (efecto acumulador de sedimentos).
Existe actividad minera activa en ejecucin
Se cuenta con informacin de calidad de aguas, fluviomtrica y sedimentomtrica, DGA.
Cuenca del Ro Aconcagua
Proyecto Definitivo de NSCA en elaboracin (Direccin Ejecutiva, Direccin Regional)
Cuenca con extensas reas de actividad agrcola, contaminacin difusa difcil de evaluar.
La primera zona del ro est representada por 40 minas, 13 plantas y una fundicin que
produce 144.000 ton/ao de cobre fino (Lara y Romo, 2002; MINMIN, 2006)
(Hormazabal, 2006).
Ro con altos niveles de metales pesados, especialmente cobre.
Cuenca de inters para la Estrategia Nacional de Cuencas, coordinada por CONAMA.
Se cuenta con informacin disponible de calidad de agua, fluviomtrica y
sedimentomtrica, DGA.
Cuenca con intensa extraccin de ridos. El estudio permitira visualizar en una primera
instancia la problemtica de esta actividad para la cuenca.
Cuenca del Ro Cachapoal
Proyecto Definitivo de NSCA en Direccin Ejecutiva para Tramitacin.
Amplia experiencia del equipo de trabajo en la cuenca.
Se contar con la informacin disponible de la Red de Calidad de Agua, DGA.
Actualmente se est trabajando en la subcuenca del ro Tinguiririca, lo que permitira, en
primera instancia, explicar aportes con informacin actual de dicho tramo y por otro lado,
abarcar la cuenca Rapel en su totalidad.


En base a estos criterios, la discusin y opinin del panel de expertos, el mandante y la
consulta efectuada a la contraparte Tcnica, las cuencas seleccionadas para el estudio
fueron la Cuenca del ro Choapa, Cuenca del ro Aconcagua y Cuenca del ro Cachapoal.








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1.2. Criterios para la seleccin de los sitios de muestreo

Los criterios usados para establecer los tramos a evaluar se indican en la Tabla 2. Se
complementaron estos criterios para la definicin de los tramos con los antecedentes del
estudio tcnico Diagnstico y Clasificacin de cursos y cuerpos de agua segn
Objetivos de Calidad (DGA, 2004) (caso cuenca del ro Choapa) y de acuerdo a los
tramos asignados en los Anteproyectos de Norma Secundaria (para las cuencas del ro
Aconcagua y Cachapoal) (Anexo I). Con las reas de muestreo ya definidas, se ejecut
en cada cuenca una primera campaa que sirvi de diagnstico, cuyo objetivo fu
georreferenciar las estaciones de muestreo para la ejecucin de las campaas de terreno.
Esto fue realizado para cada tramo definido anteriormente y determinado segn las
caractersticas observadas en terreno. Se establecieron seis estaciones de muestreo para
cada cuenca de estudio, cada estacion es representativa del tramo seleccionado con
anterioridad.

Tabla 2. Criterios para seleccin de reas y estaciones de muestreo

Aspecto Fsico Aspecto Qumico Aspecto Biolgico
Condiciones hidrodinmicas
favorecen sedimentacin
(zonas de baja velocidad,
zonas de aguas muertas,
zonas de circulacin) y/o
resuspensin (zona de
mayor velocidad)
Tipo de sustrato observado,
informacin granulomtrica
Presencia de barras y
parches de material fino.
Composicin material litognico.
Tipo de sustrato observado,
informacin granulomtrica.
Observacin de condiciones que
favorecen sedimentacin
Actividad productiva especialmente
minera por su aporte en metales
pesados.
Informacin de uso de suelo
Cambios de nivel del agua que
determina pocas de crecidas o de
estiaje.

Presencia de metales basados en la
informacin existente.
Contaminacin orgnica e inorgnica
detectadas en el ro mediante
monitoreos de calidad de agua.
Presencia de estacin de calidad de
agua, DGA.
Tipo de sustrato
Tamao de las partculas
Aporte material alctono.
Contaminacin orgnica e
inorgnica detectadas en el
ro mediante monitoreos de
calidad de agua.
Nivel del agua que
determina pocas de
crecidas o de estiaje.
Informacin de la biota.
Accesibilidad del lugar.




Segn la forma de los sistemas fluviales de la zona central, el ritrn corresponde a
sectores de gran pendiente, con altas velocidades de corrientes, temperaturas bajas y
estables, y altas concentraciones de oxgeno, lo que favorece la presencia de un gran
nmero de especies. El potamn presenta temperaturas ms altas, menor concentracin






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de oxgeno, corriente de tipo laminar. En la parte donde se encuentra el ritrn, se genera
un gran transporte de sedimentos a travs de la cuenca debido a la pendiente en la zona
alta, y en el sector del potamn ocurre una sedimentacin importante en el ro debido a
la disminucin de la pendiente.

La Figura 4 muestra las formas de los sistemas fluviales, basados en los dos conceptos
antes mencionados.



Figura 4. Transporte de sedimento segn zona fluvial

Las campaas de terreno fueron realizadas en tres etapas, una en temporada de alto
caudal (perodo primavera octubre/noviembre 2007), otra temporada de bajo caudal
(perodo verano enero 2008), y una tercera en bajo caudal (perodo otoo 2008), esto
debido a que muchos procesos, como por ejemplo la concentracin de metales, es
fuertemente dependiente del caudal del ro.

Se distribuyeron seis sitios de muestreo, a lo largo del ro que abarcaron las distintas
zonas: ritrnica, media y potmica. Las zonas se diferenciaron en sus aspectos
hidrodinmicos, dinmica qumica y grado de perturbaciones antrpicas.




Epiritrn
Medio Ritrn Potamn

> Transporte de
sedimento
< Transporte de sedimento;
> Sedimentacin
Ritrn
<< Transporte de
sedimento;
>> Sedimentacin

Km de distancia desde la cordillera
Altura






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2. METODOLOGA ASPECTO HIDRODINMICO

Para determinar los intercambios producidos en la interfaz agua/lecho, es necesario
estudiar las caractersticas hidrulicas y turbulentas que se presentan en los sitios que
sern estudiados, para evaluar tanto los procesos de intercambio de masa en la interfaz
sedimento/agua, como los procesos de transporte de sedimento asociados. Con este fin
resulta tambin relevante caracterizar la granulometra del lecho y de los sedimentos
transportados en dichos sitios.

Objetivo General

Determinar las caractersticas hidrulicas y la capacidad de transporte de sedimento e
intercambio de masa en la interfaz sedimento/agua asociadas a los sitios seleccionados
de los cauces en estudio, con el fin de establecer los aspectos fsicos que contribuyen a la
presencia de metales en las aguas intersticiales y en la columna de agua en dichos sitios.

Objetivos Especficos

- Desarrollar un estudio de terreno en cada uno de los cauces y sitios seleccionados con
el fin de obtener antecedentes respecto a la granulometra de los sedimentos arrastrados
por el cauce y sus caractersticas topogrficas, morfolgicas y de rugosidad.

- Determinar a partir de antecedentes de rugosidad, topografa e hidrologa de los cauces
en estudio las caractersticas hidrulicas, hidrodinmicas y de turbulencia presentes en
cada sitio de muestreo.

- Determinar, a partir de estas ltimas caractersticas: i) la capacidad de transporte y
resuspensin de sedimentos presentes en el lecho; y ii) la capacidad de intercambio o
transferencia de masa disuelta entre el lecho y la columna de agua.


A continuacin se resume la metodologa seguida para caracterizar los aspectos fsicos
de los sistemas en estudio. En el Anexo III se presentan las ecuaciones y frmulas
utilizadas en los clculos especficos.


2.1. Clculos Hidrulicos

La caracterizacin de las condiciones del escurrimiento en cada sitio de muestreo
contempla la estimacin de los siguientes parmetros:

2.1.1. Estimacin de la topografa (forma) del lecho en la zona de inters.

La informacin topogrfica se obtuvo principalmente de antecedentes disponibles y
estudios previos, contemplndose una verificacin de terreno de esta informacin. En
particular se utiliz la informacin cuantitativa (dimensiones planimtricas y niveles)
obtenida de Google Earth. Si bien la precisin obtenida por este medio no es muy alta,
se considera adecuada para los propsitos de caracterizacin hidrodinmica que requiere






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el presente estudio. En particular se desea determinar propiedades como ancho del
cauce, sus caractersticas morfolgicas y la pendiente media del lecho en el tramo. Una
ventaja del uso de Google Earth, es que permite considerar la variabilidad espacial de
las caractersticas del cauce en el entorno de los sitios de muestreos, proporcionando un
rango de valores de las caractersticas geomtricas del cauce.

2.1.2. Estimacin de las caractersticas friccionales del cauce.

Las caractersticas friccionales del cauce se expresan a travs del coeficiente de
Manning. Este se estim a partir del anlisis granulomtrico de cada sitio, en conjunto
con otras caractersticas del cauce, como presencia de obstrucciones, vegetacin, etc.,
utilizando el Mtodo de Cowan (Chow, 1959).

2.1.3. Estimacin de las alturas de escurrimiento para distintas condiciones
hidrolgicas

A partir de la informacin de caudales disponible para cada sitio, se calcularon las
alturas de escurrimiento asociadas en la zona correspondiente a cada sitio de estudio
seleccionado. Se realizaron anlisis para distintas condiciones hidrolgicas, tanto
normales como correspondientes a crecidas, obtenindose un rango de valores de las
propiedades hidrodinmicas del flujo en cada sitio de muestreo. El clculo de las alturas
de escurrimiento se realiz suponiendo que prevalece un escurrimiento uniforme en la
zona de anlisis.

2.1.4. Estimacin del esfuerzo de corte de fondo.

Las caractersticas fsicas del lecho en conjunto con las condiciones de flujo aportan la
informacin necesaria para la estimacin del esfuerzo de corte de fondo. Este valor,
expresado en trminos del parmetro denominado velocidad de corte y que se obtiene
directamente de los clculos hidrulicos, es de gran importancia ya que determina
directamente la capacidad de arrastre y resuspensin del material del fondo as como de
la tasa de transferencia de masa disuelta desde los intersticios del lecho hacia la columna
de agua. Dada la variabilidad morfolgica e hidrolgica de los sitios analizados, antes
comentada, este anlisis proporciona un rango de valores del esfuerzo y velocidad de
corte en cada sitio de muestreo.

2.2. Anlisis Granulomtrico

Dados los objetivos del presente estudio, se considera necesario caracterizar slo el
sedimento superficial o coraza del cauce. Es esta coraza la que determina tanto los
sedimentos gruesos disponibles para ser transportados (Wilcock & Crowe, 2003) como
el intercambio de sedimentos finos entre la columna de agua y el lecho (Grams &
Wilcock, 2007). Es en la capa superficial, tambin donde se produce el intercambio de
masa disuelta entre el lecho y la columna de agua (Boudreau, 1997).

Para caracterizar la granulometra del lecho en los sitios seleccionados, se realiz una
calicata de aproximadamente 0,5 m x 0,5 m en superficie y profundidad variable entre
los 0,2 y 0,3 m. La profundidad de excavacin se asocia al espesor de la coraza del






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lecho, el cual es semejante al tamao de los mayores elementos en superficie. Todo el
material excavado es tamizado a travs de un tamiz montado en terreno, cuyo tamao de
abertura es de 25,4 mm. Los elementos ms gruesos extrados de la calicata son pesados
individualmente in situ y las fracciones menos gruesas retenidas en el tamiz son
clasificadas en grupos de tamao homogneo para ser contabilizadas y pesadas en
conjunto tambin in situ. De las fracciones que pasan el tamiz, se extrae una muestra
representativa a travs de un procedimiento de cuarteo, registrando el peso del total de
esta fraccin. La muestra rescatada, de tamao inferior a 25,4 mm, es llevada a
laboratorio para la determinacin de su granulometra la que, dado el pesaje in situ,
permite determinar la curva granulomtrica integral de la coraza.

Adicionalmente, se realiza una caracterizacin de los sedimentos superficiales mediante
la utilizacin de fotografas y escalamiento de ellas. Los elementos de mayor tamao son
medidos independientemente, estimando sus dimensiones utilizando una huincha y
midiendo su peso. Con esta informacin y la granulometra de la calicata se construye la
curva granulomtrica integral del lecho a ser utilizada en el anlisis.


2.3. Capacidad de Transporte y Resuspensin

La capacidad de transporte y resuspensin de los sedimentos por parte del flujo se
estim mediante la utilizacin de frmulas ad hoc a los resultados de la granulometra en
cada sitio de terreno. Es as como se escogi la forma de anlisis tras la obtencin de la
granulometra, descripcin del sedimento suspendido y la caracterizacin de terreno del
cauce. Algunas formulaciones comnmente utilizadas en el anlisis de transporte,
corresponden a las planteadas por Parker (1990) o Wilcock & Crowe (2003) para
sedimento graduado y Meyer-Peter y Muller (1948) o Ackers & White (1973) para
sedimento uniforme (Nio, 2005). En los casos estudiados se utiliz la metodologa de
Wilcock & Crowe, ya que ella se adapta mejor a la granulometra gruesa y extendida
caracterstica de los lechos de los cauces en estudio. Para la estimacin de la capacidad
de resuspensin se recurri a la relacin propuesta por Nio et al. (2003). Para la
utilizacin de estas frmulas se requiere contar con la informacin hidrulica y
granulomtrica del escurrimiento, la cual fue obtenida como se explic en las secciones
previas.

2.4. Capacidad de Intercambio (Transferencia de Masa) entre Lecho y Columna de
Agua

La capacidad de intercambio o transferencia de masa disuelta entre el lecho y la columna
se determin a partir de la estimacin de un coeficiente de transferencia de masa (Dade,
1993). Este coeficiente depende de parmetros hidrulicos que caracterizan la
turbulencia de la columna de agua, como el esfuerzo de corte actuando en el lecho, as
como tambin propiedades moleculares como la viscosidad del fluido y el coeficiente de
difusin molecular de las sustancias a ser transferidas desde el lecho a la columna. Para
ello se utilizaron frmulas como las revisadas por Fries (2007) y Hondzo (1998). Este
coeficiente y las condiciones hidrulicas obtenidas de anlisis previos, permiten estimar
escalas de tiempo asociadas a la transferencia y mezcla de masa en la columna de agua.






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3. METODOLOGA ASPECTO QUMICO

3.1. Metodologa de Aguas superficiales y metales pesados

3.1.1. Muestreo de Aguas Superficiales

Para las tres cuencas de estudio se determin un mnimo de componentes a muestrear en
agua superficial, los cuales fueron basados en Gua para el establecimiento de Normas
Secundarias de Calidad ambiental agua superficial de CONAMA, los cuales se
mencionan en la Tabla 3.

Las actividades requeridas tales como toma de muestras, preservacin y transporte y
anlisis de los diversos parmetros muestreados se efectuaron en base a los protocolos
establecidos por las Normas Chilenas Oficiales del Instituto Nacional de Normalizacin
(INN). A continuacin se presenta un detalle de las normas utilizadas para este apartado
(Tabla 4).

Tabla 3. Monitoreo de calidad de agua superficial. Componentes a evaluar.

Indicadores Fsicos y
Qumicos
Componentes
Inorgnicos
Metales totales y
disueltos
pH
Conductividad elctrica
Oxigeno Disuelto
Temperatura
Potencial redox
DBO
5

Cationes
Aniones
Slidos disueltos
Slidos suspendidos
Amonio
Nitrgeno
Fsforo
Arsnico
Alumnio
Boro
Cadmio
Cobre
Cromo
Hierro
Manganeso
Molibdeno
Nquel
Plomo
Cinc


Tabla 4. Normas utilizadas para el muestreo y anlisis de agua superficial

Norma Ttulo
NCh 411/2.Of. 96
Calidad del agua - Muestreo - Parte 2: Gua sobre tcnicas
de muestreo
NCh 411/3.Of. 96
Calidad del agua - Muestreo - Parte 3: Gua sobre la
preservacin y manejo de las muestras
NCh 411/6.Of. 98
Calidad del agua - Muestreo - Parte 6: Gua para el
muestreo de ros y cursos de agua
NCh-ISO Of.
17025
Requisitos generales para la competencia de laboratorios de
ensayo y calibracin








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3.1.2. Determinacin y/o Anlisis de parmetros fsicos y qumicos en laboratorio.

Tanto el muestreo como el anlisis y/o determinacin de los distintos parmetros fsicos
y qumicos en el agua superficial estuvo a cargo del Laboratorio de Qumica y
Referencia Ambiental del Centro Nacional del Medio Ambiente (CENMA), el cual se
encuentra acreditado segn la norma ISO/IEC 17025 otorgada por el Ministerio de
Desarrollo Sostenible, Medio Ambiente y Parques de Qubec, Canad y por el Instituto
Nacional de Normalizacin de Chile, respectivamente. Los mtodos de determinacin
y/o analsis utilizados fueron aquellos descritos en APHA (1998) y se detallan a
continuacin:

Tabla 5. Parmetros a evaluar y mtodos para la determinacin de compuestos y/o elementos
fsicos y qumicos en agua superficial

Parmetro Mtodo anlisis y/o determinacin
pH
Potencial redox (ORP)
Temperatura
Potenciomtrico. pHmetro/termmetro/ORP de terreno
marca Hanna modelo Combo
Conductividad elctrica
Potenciomtrico. Conductivimetro marca Hach modelo CO
150
Fsicos y
Qumicos
in- situ
Oxigeno Disuelto Oxigenmetro de terreno marca YSI modelo 95/10
Cationes y aniones 4110 Determination of Anions by Ion Chromatography
Slidos disueltos 2540 C Total disolved Solids dried at 180C.
Slidos suspendidos 2540 D. Total Suspended Solids Dried at 103-105C
Amonio 4110 Determination of Anions by Ion Chromatography
DBO
5
5210 B. 5-Day Test
Nitrgeno Total Kjeldahl 4500-NH
3
F. Phenate Method
Inorgnicos
Fsforo Total 4500-P E. Ascorbic Acid Method
Metales
totales (t) y
disueltos (d)
Arsnico, Alumnio, Boro,
Cadmio, Cobre, Cromo, Estao,
Hierro, Manganeso, Molibdeno,
Nquel, Plomo y Cinc
3125 B Inductively couple Plasma/Mass spectrometry
(ICP/MS) Method








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3.2. Metodologa de Sedimentos fluviales y metales pesados

3.2.1. Muestreo de sedimentos fluviales

La forma en que se procedi a tomar las muestras se sealan en la siguiente figura:













Figura 5. Esquema de muestreo de sedimentos en las cuencas estudiadas

Para la distribucin de los sitios de muestreo, se utiliz el siguiente criterio:

Ritrn: se busca obtener una muestra con la menor intervencin antrpica, es decir, una
muestra que se puede considerar como lnea base, que represente la carga litognica de
metales en el ro,

Curso Medio del ro: estos sitios caracterizan los sedimentos y aguas con intervencin
antrpica, los puntos de muestreo estarn relacionadas con las descargas mineras de cada
una de las cuencas en estudio.

Potamn: en esta zona el proceso de sedimentacin es relevante frente al transporte, por
lo tanto, se puede realizar con mayor facilidad una caracterizacin de la interfase
sedimento/agua de la cuenca.


3.2.2. Caracterizacin de Sedimentos

Las muestras de sedimentos recolectadas en las cuencas fueron caracterizadas en sus
aspectos fsicos y qumicos y de distribucin de especies trazas metlicas (ETMs). Para
esto, se analiz en los sedimentos la granulometra, cationes y aniones solubles, materia
orgnica, pH, conductividad elctrica, silicatos y metales.

3.2.2.1. Tratamiento de las muestras

- Secado de muestras

Hay diversidad de criterios para fijar una temperatura de secado de los sedimentos.
Algunos investigadores como Crecelius et al., (1975) y Welz & Meicher (1978) no
Muestreo en cuenca

6 sitios
de
muestreo
por
cuenca
sitio en Ritrn
sitios en curso medio
sitios en Potamn
Zonas de
meandros






3 puntos de
muestra por sitio,
muestras tomadas
con pala segn
protocolo EPA






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encuentran prdidas de mercurio a 60C de temperatura, aunque no hay un acuerdo
general, si hay prdidas de metales voltiles a temperaturas moderadas entre 50-60 C,
dependiendo de la naturaleza del sedimento, en consecuencia del tipo de enlaces que se
forman (elemental, inico, rgano metlico, etc.). Por otro lado, hay autores que realizan
el secado a temperaturas inferiores a 50C (Belkin y Sparck, 1993).

En este estudio todas las muestras de sedimentos fueron colocadas en bandejas de
polietileno a temperaturas inferiores a 40 C (seco al aire), en proporciones necesarias
para realizar los anlisis en el laboratorio.

- Tamizado de sedimentos

La determinacin del contenido de metales pesados no se realiza en los sedimentos
totales, sino en su fraccin de tamao inferior a 63 m, la cual incluye arcillas (<2 m) y
limos (2-63 m). Segn estudios de diversos autores, en esta fraccin se concentra
prcticamente la totalidad de la materia orgnica y de los metales pesados (Frstner &
Salomons, 1980; Frstner & Wittmann, 1981; Sakai et al., 1986). Los sedimentos se
pasan a travs de un tamiz de tefln de 63 m de luz de malla, al mismo tiempo
conseguimos la homogenizacin del material a estudiar (Frstner & Salomons, 1980;
Salomons & Frstner, 1984; Horowitz & Elrick, 1987; Calmano et al., 1996; Monhen,
1997; Vesk & Allaway, 1997; Uriarte et al., 1998).

Posterior a la recoleccin de las muestras en los sitios antes descritos, estas son tratadas
de acuerdo a un protocolo de secado y tamizado a una fraccin fina del sedimento. El
protocolo se puede esquematizar de la siguiente manera:

a) Secado de las muestras en bandejas de poliuretano a 35 C hasta que sequedad
completa.

b) Se muele la muestra utilizando un mortero, con el fin de lograr partculas lo mas
finas posible.

c) La muestra ya molida se hace pasar por un tamiz de 1 mm de espesor, se dispone
en una bandeja rectangular tambin de poliuretano- y se realiza un cuarteo
que consiste en la recoleccin de muestra significativa a travs de cuatro
cuadrantes bien definidos (ver figura 6).

d) Se realiza una muestra compuesta que contiene la misma cantidad de los tres
puntos que se recolectaron en cada sitio de muestreo.

e) La muestra compuesta antes descrita se hace pasar por un tamiz de 63 m y se
almacena en bolsas plsticas para su conservacin.







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Figura 6. Proceso de preparacin de muestra

Con este procedimiento la muestra ya esta preparada para los anlisis posteriores.

3.2.2.2. Anlisis granulomtrico de sedimentos

Los sedimentos de un ro estn formados por un conjunto de materiales de tamaos muy
variables, cuya proporcin nos da la textura del mismo. El estudio granulomtrico se ha
llevado a cabo con el objetivo de conocer la distinta distribucin de tamaos de grano
que existen, los cuales pueden ser de mayor inters como aporte de metales pesados.
Entre sedimentos las proporciones varan considerablemente dependiendo de las
caractersticas de la cuenca, de la geografa y orografa del mismo, de las condiciones
hidrolgicas, fsico-qumicas y biolgicas del curso de las aguas superficiales.

La realizacin de los ensayos granulomtricos se ha llevado a cabo en todos los puntos
de muestreo, en los sedimentos secados a temperatura ambiente. Para este ensayo se ha
utilizado un juego de tamices con las siguientes luces de malla (mm): 2,0 - 1,0 - 0,85 -
0,5 - 0,355 - 0,212 - 0,106 - 0,063

Materiales
Batera de tamices mecnica, modelo USA Standard Testing Sieve
Balanza de precisin.

Procedimiento
Para la realizacin del anlisis granulomtrico se toman 100 gramos de muestra inicial
seca que se colocan en el tamiz de malla superior (2 mm) y se mantiene tamizando a una
velocidad de 10 rpm hasta constancia de peso, generalmente entre 45 - 60 minutos.

Tras esta operacin se pesan las distintas fracciones retenidas en cada tamiz y, a partir de
estos valores se calculan los porcentajes que pasan por cada uno de ellos.


3.2.2.3. Determinacin de pH y conductividad elctrica (CE)

La determinacin de pH y CE en muestras de sedimentos se harn en una proporcin
1:2,5 sedimento/agua.

Secado Cuarteo Tamizado






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Materiales

Balanza analtica, modelo Shimadzu AUX220
Potes plsticos
Agua desionizada
Potencimetro, modelo , Hanna HI 111
Electrodo de vidrio
Conductivmetro
Agitador orbital, modelo Boeco 05-20 Orbital Shaker

Procedimiento

20 g de cada una de las muestras de sedimentos fueron agitadas durante 2 horas, luego el
pH y la Conductividad elctrica es medida.


3.2.2.4. Anlisis de componentes mayoritarios: carbonatos, silicatos y materia
orgnica

La determinacin de los componentes mayoritarios de un sedimento ayuda a conocer las
caractersticas de ellos, al mismo tiempo que ayuda a elegir el tipo de digestin a llevar a
cabo. Los parmetros que se determinan para este fin son los carbonatos, silicatos y Ia
materia orgnica.

- Anlisis de carbonatos
Se realiza este anlisis junto con el anlisis de sales solubles por IE-HPLC.

Bureta de Automtica (Brand) de 25 ml.
Erlenmeyer de clase A de 100 mL.
Balanza do precisin, modelo Shimadzu AUX220
Acido clorhdrico de 0.1 N (Tritisol Merck).
Indicador Amarillo de metilo

Procedimiento

10 mL del sobrenadante del extracto de saturacin es titulado con acido clorhdrico 0,1
N utilizando amarillo de metilo con indicador, el volumen correspondiente al cambio de
color corresponde a los meq de bicarbonato en el extracto de saturacin.

- Anlisis de silicatos

El porcentaje de silicatos en los sedimentos es de gran inters por ser un parmetro que
indica el grado de dificultad de ataque de la muestra y por tanto del proceso de digestin,
as como por considerarse el silicio un elemento conservador no influido por Ia
contaminacin ambiental (Salomons & Frstner, 1984; Casas, 1989). La determinacin
de Ia slice en los sedimentos se lleva a cabo por doble insolubilizacin con HCI y






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evaporacin a sequedad, precipitando de esta forma el Si0
2
hidratado, de acuerdo con el
procedimiento descrito por Kolthoff et al., (1979).

Es necesario para realizar esta determinacin, contar con una serie de materiales y
soluciones, adems de preparar el sedimento adecuadamente, esto es, secar la cantidad
aproximada de 1,5 g de sedimento de cada sitio muestreado y tratado segn el punto
2.1.3 en una estufa de secado por al menos 24 horas, buscando de esta manera reducir
al mximo el contenido de humedad.

Materiales

Estufa de secado marca Jinghong modelo ZHG-9147A
Balanza analtica marca Shimadzu modelo AUX-220
Mufla de calcinacin marca Brnstead Internacional modelo FB1300
Baos de arena
Capsulas de porcelana
Solucin de cido clorhdrico
Filtros de papel libres de ceniza marca Whatman, dimetro 125 mm
Probetas graduadas clase A
Crisoles de porcelana resistentes a altas temperaturas
Varillas de agitacin
Placas Petri

Procedimiento

Preparacin de soluciones

Para realizar la digestin cida a la que son sometidas las muestras de sedimento se
utiliza una solucin de HCl 1:1. La preparacin para un litro de esta solucin se puede
esquematizar como sigue:

Se mide en una probeta graduada la cantidad de 500 mL de agua desionizada, la que se
agrega a un matraz de aforo de 1 L. En la misma probeta anterior se agregan 500 mL de
cido clorhdrico fumante al 37% LabGrade, marca Merck, los que se adicionan al
matraz que contiene el agua, lenta y cuidadosamente. Se deja enfriar la solucin, se
corrige el aforo y se lleva a una botella mbar para su almacenamiento.

Digestin cida para la determinacin gravimtrica de silicatos

Se masa 1g de sedimento en balanza analtica y se dispone en una cpsula de porcelana.
Se regula el bao de arena hasta los 110 C. Se adiciona a la cpsula con el sedimento 20
mL de la solucin de cido clorhdrico. Se inicia la digestin en el bao de arena por
espacio de 24 horas. Habindose completado el punto anterior, se agregan otros 20 mL
de cido por 10 min. Se retira la cpsula del bao de arena y se filtra el sedimento en el
filtro libre de cenizas con sucesivos lavados de agua desionizada para retirar todo exceso
de cido. Lavado el sedimento, se almacena junto a su filtro en capsulas de Petri para su
posterior calcinacin.






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Calcinacin de la muestra

La calcinacin a la que se somete la muestra busca destruir todas las sustancias que
puedan estar contenidas en ellas, sublimndolas, quedando solamente los silicatos que
son altamente resistentes a temperaturas elevadas. Por lo tanto expresaremos la cantidad
de silicatos presentes en la muestra de manera porcentual, respecto de la masa inicial
sometida a la digestin acida y calcinacin.

El procedimiento de calcinacin de sedimentos se esquematiza como sigue:

a) Antes de comenzar la calcinacin es fundamental conocer la masa exacta de cada
crisol, para esto es necesario haberle quitado toda humedad en estufa de secado
a 105 C por 24 horas

b) Se traspasa cada muestra desde su capsula de Petri hacia un crisol cuidando de no
perder nada de material

c) Se ingresan los crisoles a la mufla -cuidando de mantener una distancia de al
menos 1 cm entre uno y otro- programada a 1050 C por espacio de 3 horas como
mnimo (el tiempo de calcinacin depender exclusivamente de la resistencia
temperatura-tiempo que tenga la mufla de la que dispone)

Se espera a que la mufla llegue a temperatura ambiente, se masan los crisoles y se repite
el c) hasta obtener masa constante. Teniendo masa constante se expresa el contenido de
silicatos porcentualmente, tomando como el 100% la masa inicial de sedimento.

- Determinacin del factor de humedad

Este es un parmetro corrector de la humedad del sedimento seco, corrige el peso seco a
la estufa.

Materiales

Estufa de secado, modelo Jinghono
Vasos de vidrio
Balanza analtica, modelo Shimadzu AUX220
Desecadora

Procedimiento
Tara el vaso de vidrio hasta masa constante, colocar 20 g del sedimento y masar, luego
dejar en la estufa a 105
0
C durante 24 h, masar hasta obtener una masa constante.

- a peso en g del suelo seco al aire + recipiente
- b peso en g del suelo seco a 105
o
C + recipiente
- c peso en g del recipiente

El factor de correccin por humedad (f h) para los resultados analticos es:






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- Determinacin de materia orgnica

La materia orgnica de un sedimento es el conjunto de materiales ms o menos alterados
qumicamente, denominados sustancias hmicas, que poseen una capacidad de
complejacin de los metales pesados (Craig, 1986; Calmano et al., 1993; Frstner, 1993;
Grousset et al., 1999). Asimismo tiene una gran influencia en las propiedades qumicas y
fsicas de los sedimentos, tales como la capacidad de retencin de agua, capacidad de
intercambio inico, etc. Una de las caractersticas fundamentales de las sustancias
hmicas es su habilidad de interactuar con la arcilla, iones metlicos, xidos, hidrxidos,
para formar asociaciones solubles o insolubles (Stevenson, 1982).

La extraccin de la materia orgnica se har por mtodo volumtrico para el carbono
fcilmente oxidable, para obtener el porcentaje de materia orgnica se multiplica el valor
de carbono orgnico por 1,7224. Mtodo Walkley y Black.

Materiales

Potencimetro con electrodo de platino (Hanna HI 111)
Sulfato de Hierro (II) (Merk p.a.)
Acido sulfrico conc.. (Merck p.a.)
Dicromato de potasio (Merk p.a.)
Acido fosfrico conc. (Merk p.a.).
Agua desionizada (Mili Q)
Material volumtrico clase A (pipetas, matraces erlenmeyer, probeta)
Bureta digital (Brand, 25 mL)
Agitador, magntico

Procedimiento

A 0,5 g de cada muestra se agrega 10 mL de solucin de dicromato de potasio 0,167 M y
20 mL de acido sulfrico concentrado, se deja esperar 30 min., luego se agrega 180 mL
de agua desionizada y 10 mL de acido fosforito concentrado. Se titula con sulfato de
hierro (II) 0,5 N. El anlisis se realizo por duplicado y adems se analizo un blanco con
el objeto de corroborar la concentracin de la solucin de Hierro (II)
a - b
HUMEDAD (%) = -------- x 100
b - c
100 + humedad (%)
f h = ------------------------------
100






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- V1 mL de solucin de sulfato ferroso gastados en el blanco

- V2 mL de solucin de sulfato ferroso gastados en la muestra

- M molaridad de la solucin de sulfato ferroso

-0,39 3 x 100 x 1,3/1000 (3 = peso equivalente del carbono

- S peso en g de la muestra seca al aire

- fh factor de humedad







Nota: El factor 1,3, es un factor de compensacin por la combustin incompleta de
la materia orgnica en este procedimiento.

La conversin del % de carbono a % de materia orgnica se realiza con el factor
emprico de 1,724:





- Determinacin de cationes y aniones solubles

La determinacin de sales solubles se realizo en el extracto de saturacin que representa
en forma real la forma qumica en que se encuentran estas sales.

La determinacin de iones solubles se har por cromatografa HPLC con detector de
conductividad. Los iones solubles para analizar son:

Cationes solubles: K
+
, Na
+
, Ca
2+
, Mg
2+

Aniones solubles: Cl
-
, CO
3
2-
, NO
3
-
, SO
4
2-

La identificacin de los compuestos se realizar por coincidencia de tiempos de
retencin (t
R
) con estndares.

Materiales

Potes plstico
Vasos de precipitado
Centrifuga (Boeco U-320)
V1 V2
C (%) = ------------- x M x 0,39 x fh
S
Materia orgnica (%) = 1,724 x carbono (%)






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Tubos de centrifuga
Agua desionizada
Filtros 45 m
Estufa de secado (Jinhong)
Equipo HPLC (Waters 1515)
Detector de conductividad (Waters 432)
Fase mvil A: 200 L de acido ntrico suprapur (merck) y 29,6 mgr. de EDTA en
un litro de agua, para el anlisis de cationes
Fase mvil B: 20 mL de concentrado (LiOH, Acido Brico, acido glucnico)
mas 200 mL de acetonitrilo grado HPLen un litro de agua desionizada
Columna IC-Pak
tm
Cation M/D
Columna IC-Pak
tm
Anion HC
Volumen de inyeccin de 50 L
Estndares tritisol de: Sodio, Potasio, Amonio, Calcio, Magnesio, Cloruro,
Carbonato, Nitrato, Sulfato.

Procedimiento

10 g de cada muestra son saturados con 20 mL de agua desionizada hasta forma una
pasta de saturacin, se deja descansar 24 h y luego se centrifuga a 5000 rpm por 30 min.
El sobrenadante se filtra e inyecta en las condiciones adecuadas para cationes o aniones.

La concentracin de los cationes y aniones fue determinada a travs de una curva de
calibracin, realizada con estndares. Las concentraciones obtenidas se convierten en
gg
-1
mediante correccin con la pasta de saturacin (determinacin semejante a la
realizada para el factor de humedad).



- Anlisis de fsforo disponible

El fsforo disponible se mide por el mtodo de extraccin Olsen, el cual se basa en la
extraccin de fsforo como in monocido por bicarbonato de sodio ajustado a pH 8,5.

La medicin del fsforo se realiza por colorimetra por medio de la formacin de
complejo del fsforo con molibdato de amonio (color azul).

Materiales

Reactivo mezclado (tartrato de antimonio, molibdato de amonio, cido ascrbico,
cido sulfrico).
Bicarbonato de sodio ajustado a pH 8,5
Frasco plsticos agitables
Tubos de ensayo
Solucin estndar de fsforo









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3.2.3. Anlisis de metales pesados en sedimentos fluviales

El trabajo analtico para la determinacin de metales a niveles de traza, requiere tomar
una serie de precauciones. Tanto los materiales como los tcnicos deben tener unas
caractersticas de limpieza y control meticulosos para evitar introducir cualquier
contaminacin en el proceso analtico. Los equipos y aparatos utilizados en el
laboratorio son generalmente una fuente de contaminacin de las muestras objeto de
anlisis y en consecuencia la limpieza se ha cuidado en extremo.

Para el anlisis de los metales pesados en los sedimentos, es necesario poner la muestra
en solucin, exceptuando las tcnicas de medida directa en muestras slidas como son el
anlisis por Fluorescencia de Rayos X y la de Activacin Neutrnica (Bern & Ryan,
1984; Feng & Ryan, 1985; Leyen et al., 1985; Baborowski et al., 1990; Enquix et al.,
1996; Leoni y Sartori, 1997). Existe un gran nmero de mtodos para la digestin de
sedimentos los cuales se clasifican en dos grandes grupos, los basados en la fusin
alcalina y en la digestin cida, que ha sido el mtodo elegido para este trabajo.

Tambin es importante estudiar la distribucin de los metales pesados en un sistema es a
travs de una extraccin secuencial. Este mtodo permite realizar un anlisis cualitativo
de la posible biodisponibilidad de los contaminantes asociado a sedimentos.

Despus de revisar sistemas de especiacin las distintas fases existentes de ETM en
sedimentos como Tessier et al., 1979, Community Bureau of Reference (BCR), se ha
observado que todas las extracciones secuenciales tienen prcticamente el mismo
procedimiento. La utilizacin de diversos extractantes y su forma de aplicacin, hizo que
la Community Bureau of Reference (BCR) de la comisin de las Comunidades Europeas
en 1992 realizara un estudio para la armonizacin de las diferentes tcnicas empleadas
bajo el nombre Especiacin de metales pesados en suelos y sedimentos.


























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3.2.3.1. Extraccin secuencial BCR

Este mtodo se divide en 4 etapas de acuerdo al siguiente esquema:






































Figura 7. Esquema de extraccin secuencial, mtodo BCR

Una vez separados los metales en las diferentes fracciones, se determin la
concentracin de stos por ICP-OES.

En este estudio se realiz la extraccin de metales solubles y unidos a carbonatos,
debido a que estos son los ms susceptibles de ingresar al sistema acutico y quedar
disponibles para la biota.
1 g sedimento +
40 mL HOAc 0,11
Residuo + 40 mL
NH
2
OHHCl 0,1 M
Residuo + 10 mL
H
2
O
2
8,8 M
Residuo + 50 mL
NH
4
OAc 1 M
Residuo + 5 mL
HCl + 15 mL HNO
3

Residuo + 10 mL
H
2
O
2
8,8 M
Agitar y
centrifugar
Agitar y
centrifugar
Extracto de iones
intercambiables
y unidos a
carbonatos
Extracto de
elementos
unidos a xidos
de Fe-Mn
Agitar a T ambiente y a 85 C
Agitar a 85 C y reducir a bao
Mara
Agitar y
centrifugar
Extracto de
elementos
ligados a la MO y
Sulfuros
Agitar y
centrifugar
Extracto de
elementos
unidos a la fase
residual






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Tambin se realizar el anlisis de metales totales en el sedimento para poder tener
referencia del porcentaje del total de metales que es soluble o fcilmente disponible. La
extraccin de metales totales se har por digestin cido con agua regia (3:1), cido
clorhdrico: cido ntrico.


3.2.3.2. Extraccin de metales solubles o unidos a carbonatos

Esta fraccin es la que con mayor facilidad pasara a la columna de agua, por esto son
los que corresponden a los elementos de mayor peligrosidad, tanto para la calidad del
agua, la vida acutica y los seres humanos.

Para ello se acidifica el sedimento con cido actico, se centrfuga y filtra. Se analiza el
extracto en ICP-AES, donde la cuantificacin de metales se realiz con curvas de
calibracin individual para cada fraccin utilizando los mismos reactivos de las etapas
de extraccin para obtener una matriz similar y minimizar las interferencias.

Para validar los resultados obtenidos se utiliz material de referencia de sedimentos.

3.2.3.3. Extraccin de metales totales, mtodo de agua regia

Se realiz el anlisis de metales totales en el sedimento para poder tener referencia del
porcentaje del total de metales que es soluble o fcilmente disponible. La extraccin de
metales totales se hizo por digestin cida con agua regia; HCl: HNO3. Se masa 3 g de
sedimento y se acidifica para oxidar la materia orgnica, se centrifuga y se filtra. El
extracto lquido se analiza por ICP-AES, donde la cuantificacin de metales se realiz
con curvas de calibracin individual para cada fraccin utilizando los mismos reactivos
de las etapas de extraccin para obtener una matriz similar y minimizar las
interferencias. Se us el protocolo ISO 11466 usado en Rauret et al., (2000).

Para validar los resultados obtenidos se utilizar un material de referencia de
sedimentos.

3.2.3.4. Determinacin de xidos de hierro, manganeso y aluminio.

Para la determinacin de xidos de Fe, Mn y Al en sedimentos se sigue el mtodo
descrito por Mehra & Jackson (1960).

Los xidos se miden en Espectrofotometra de absorcin atmica preparando curvas de
calibracin en solucin de citrato-bicarbonato-ditionito con diferentes concentraciones
de Fe, Mn y Al en forma individual. Se utiliza el mismo extractante para minimizar el
efecto matriz de las muestras.

Estos xidos se determinan como metal total (Fe, Mn y Al) y se calculan como xidos
por estequiometra, es decir Fe a Fe
2
O
3
en porcentajes.

De la misma forma se analizan los extractos de las muestras para obtener los resultados
de xidos.






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3.2.4. Relacin porcentual metales pesados solubles en sedimento y metales pesados
disueltos en agua

Se ha considerado que los sedimentos son un reservorio de descargas en las aguas
superficiales y deposiciones atmosfricas, y a la vez ellos son fuente de elementos hacia
la columna de agua si las condiciones qumicas e hidrodinmicas del sistema lo
permiten.

Se estableci la relacin porcentual metales pesados solubles en sedimento v/s metales
pesados disueltos en agua. Para esto se ha calculado el porcentaje de metal disuelto en
agua con relacin a la concentracin de la fraccin del metal soluble en sedimento,
considerando el sedimento como la fuente principal de estos elementos en el agua. Se
seleccionaron los metales pesados de mayor concentracin en todas las estaciones y en
las cuatro campaas.

Los metales pesados totales en sedimentos corresponden a las diferentes especies
qumicas, es decir, metales con posibilidad de solubilizarse, intercambiables o ligados a
carbonatos, metales adsorbidos por xidos, metales ligados o complejados con la materia
orgnica y metales residuales. Estos pueden ser transferidos a la columna de agua en dos
formas solubles o como material suspendido as, los metales totales en agua
correspondern a aquellos elementos correspondientes a la fraccin soluble y a aquellos
elementos no solubles pero presentes en el material en suspensin.



METALES DISUELTOS
(contribuye la fraccin soluble,
transferida desde el sedimento)
SEDIMENTOS Columna de agua

(metales totales) (metales totales)
MATERIAL EN SUSPENSIN
(contribuye las diferentes formas
qumicas No Solubles de los metales
pesados en el sedimento



Para este anlisis se han seleccionado los metales pesados totales mayoritarios en todas
las estaciones: Zn, Cu Al, Mn y Fe, tanto en sedimento como en agua. Al igual que para
los metales solubles se ha considerado el porcentaje de metales pesados en el agua con
relacin al contenido de metales pesados totales en el sedimento. Solamente se ha
considerado la campaa de verano para las tres cuencas.










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3.2.5. Anlisis de resultados:

Se usaron paquetes estadsticos Stadistics 6.0: MVSP.

1.- Componentes en el sedimento y en las aguas superficiales.

Se realiz un anlisis de correlaciones para establecer las siguientes asociaciones:
- Entre los componentes mayoritarios de sedimento y metales solubles. Las correlaciones
fueron significativas con p0,05.

- Entre metales totales disueltos entre el sedimento y las aguas superficiales

- Para analizar agrupaciones entre estaciones de muestreo se construy un dendrograma
de distancia Euclidiana. Las estaciones ms similares presentan menor diferencias entre
distancias.










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4. METODOLOGA ASPECTO BIOLGICO

4.1. Biocriterio: Nivel Comunitario in-situ,
Evaluacin de la calidad del agua bajo enfoque de integridad ecolgica

4.1.1. Recoleccin de muestras de Macroinvertebrados bentnicos

Se tomaron muestras lo ms representativas posible, representando homogeneidad de
hbitat y sustrato definido entre otros en las diferentes estaciones de muestreo a lo largo
del curso de agua, con el fin de estandarizar el muestreo. Se seleccionaron zonas cuyo
sustrato fue en promedio del tipo bolones y clastos, con un flujo de agua suficiente para
mantener la columna de agua mezclada, evitando zonas estancadas, lo ms alejado
posible de la orilla, (Jimez-Cullar et al., 2002), lejos de descargas, de construcciones
como puentes que afectaran la representatividad del lugar y la calidad del hbitat (EPA,
2002).

Se seleccion una estacin limpia por cuenca, definida como la que represent el menor
grado de perturbacin en base a las actividades antrpicas documentadas. As se puede
estimar el impacto de la contaminacin realizando comparaciones ro arriba de la
estacin ms limpia y ro abajo despus de la perturbacin (Hauer & Lamberti, 1996),
teniendo en cuenta las limitaciones por las condiciones fsicas y qumicas inherentes a la
geomorfologa del plano de inundacin. Por lo tanto dentro de lo posible, las diferencias
biticas entre esta estacin de referencia con respecto a las otras se podra atribuir a
perturbaciones ambientales que estuviesen afectando la calidad del agua superficial y
pudiese ser reflejado en la estructura comunitaria (Plotnikoff & Wiseman, 2001), o
ndice bitico. En nuestro pas en la zona central se presenta la dificultad que las
estaciones a mayor altura a menudo estn intervenidas por la actividad minera.

Establecidos los tramos previamente en forma terica, se recorren en terreno y en cada
uno se establece una estacin de muestreo. En terreno en cada sitio se localiza una zona
representativa del tramo, en la cual se mide con una huincha 20m a 25 m paralelo al ro.
Al azar en este transecto perpendicular a la lnea de ribera se extraen las rplicas
correspondientes (Molina & Vila, 2006), mediante una red Surber (Fig. 8), tomando 3
rplicas, cuyas caractersticas se muestran en la Tabla 6.

Tabla 6. Descripcin del muestreo cuantitativo de macroinvertebrados bentnicos.

Observaciones Muestreo Cuantitativo
Objetivo
Recoleccin organismos del bentos
en un rea determinada.
Ventaja
La composicin de la comunidad de
organismos puede ser estandarizada
respecto a un rea determinada.
rea de muestreo Un rea definida 0,09 m
2
.
Red para
muestreo
Red Surber de 500 m, se usa para
cauces de diferentes caudales.
Fuente. Roldn, 2003; Molina & Vila, 2006.






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Figura 8. Red Surber
Fuente. Molina & Vila, 2006.

Los sustratos en los que habitan los macroinvertebrados, tales como piedras, troncos,
races y/o masas de algas deben ser limpiados o lavados con la mano para que se
liberen los organismos que all pudiesen habitar. El material recolectado se vierte en un
frasco y se fij en etanol al 70%, luego debidamente etiquetado fue transportado al
laboratorio para su identificacin taxonmica al nivel de familia.


4.1.2. Procedimiento de laboratorio, Anlisis de las muestras de
macroinvertebrados bentnicos.

El material colectado en terreno se limpi y separ con cuidado para no romper las
estructuras de validez taxonmica de los organismos. Posteriormente los organismos se
cuantificaron y clasificaron mediante claves taxonmicas (Domnguez & Fernndez,
2001; Lopretto & Tell, 1995; Roldn, 2003).


4.1.3. Indices aplicados

Se determinaron las abundancias de cada familia por sitio de muestreo y se calcularon
diferentes ndices bajo el enfoque de diversidad y bitico.

4.1.3.1. Enfoque de diversidad

Se aplic el ndice de Shannon Wiener (Shannon & Weaver, 1963) basado en la teora
de la informacin, es el ms usado para medir la entomofauna, sin embargo es poco
sensible a los cambios en el nmero de especies raras en la comunidad (Segnini, 1981).
Mientras ms uniforme es la distribucin entre especies, mayor es su valor.

Frmula:
S`
H = - (ni / n) ln (ni / n)
i = 1

Donde:
H = ndice de diversidad






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ni = nmero de individuos por especie
n = nmero total de individuos
ln = logaritmo natural

4.1.3.2. Enfoque bitico

A: Se aplic el Indice de Hilsenhoff (1988) el cual se origin del ndice de Chutter
(1972), luego fue modificado por Hilsenhoff (1988). Se aplic en ros de Norteamrica y
fue modificado para ros de Chile mediterrneo, Ch IBF, por diversos autores en base a
la tabla de Hauer & Lamberti (1996) (Figueroa et al., 2003). Se conoce como ndice
bitico de familia, porque con un bajo nivel taxonmico (Familia), se ha podido aplicar,
afirmacin que para Chile debe ser corroborada con una mayor data disponible. Este
ndice ha sido aplicado en ros del Sur de Chile en la cuenca del ro Damas X Regin
(Figueroa, 1999), en el estero Peu Peu (Figueroa et al., 2003), en el ro Traigun
(Weisser, 2003), en la cuenca del ro Chilln (Figueroa et al., 2007), y en estudios
ambientales aplicados a ros de la regin hidrolgica subhmeda (SAG-CENMA, 2006).
Es de bajo costo en trminos de tiempo (identificacin de insectos) y dinero, por tales
motivos es recomendable su aplicabilidad. Se ha correlacionado con alteraciones
antropognicas (Eaton, 2001).

Frmula:
IBH= n
i
_a
i

N
Donde:
n
i
= nmero de individuos del taxn "i".
a
i
= Valor de tolerancia del taxn "i".
N = nmero total de individuos de la muestra

Se han determinado los valores de calidad de agua segn el grado de sensibilidad basado
en la categora de Familia de acuerdo al grado de contaminacin orgnica. En la Tabla 7
se muestran los valores del ndice (de 0 a 10) usados por Figueroa et al. (2004) basado
en (Hauer & Lamberti, 1996), estos valores fueron ajustados segn los valores fsicos y
qumicos de cada cuenca.

Tabla 7. Rangos de tolerancia IBF y calidad de agua

Rango del Indice Bitico
de Familia (IBF)
Caracteristicas de Calidad de
agua/ Tipificacin de color
0 - 3,75 Excelente
3,76 - 4,25 Muy buena
4,26 - 5,0 Buena
5,01 - 5,75 Aceptable
5,76 - 6,5 Regularmente mala
6,51 - 7,25 Mala
7,26 - 10 Muy mala
Fuente: Hauer & Lamberti, 1996; Figueroa et al., 2003








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Los valores del ndice Bitico de Familia (Ch IBF) van desde 0 a 10 (Hauer & Lamberti,
1996, adaptado por Figueroa, et al (2004). Cada color corresponde a un rango del IBF
que tipifica una clase de calidad de aguas. En Chile la aplicacin del Ch IBFha indicado
ser un ndice sensible a perturbaciones Figueroa et al. (2007).

Con los datos generados del IBF se construyeron mapas de calidad de agua para cada
cuenca en estudio, donde dicho color corresponde al segmento inmediatamente superior
al punto donde se determin el ndice.


4.1.4. Anlisis de resultados

Se usaron programas computacionales estadsticos, Stadistics 6.0: MVSP.

- Se realiz anlisis de estadstica no paramtrica para establecer diferencias
significativas entre parmetros comunitarios y estaciones de muestreo.

- Para analizar agrupaciones entre estaciones de muestreo se construy un dendrograma
de Bray Curtis de similitud de abundancia por familia.

- Se realiz un anlisis de correlaciones para establecer las siguientes asociaciones entre
las variables biolgicas y componentes fsicos y qumicos. Se us el coeficiente de
correlacin de Spearmann con p0,05.

- Para analizar la asociacin entre el conjunto de biota y las variables ambientales
(fsicas y qumicas) se realiz un anlisis multivariado CCA; CANOCO 3.12.
Se observan tendencias entre familias de macroinvertebrados bentnicos con alguna
variables fsica y qumica, de acuerdo a una grfica que arroja los dos ejes de
ordenamiento principales. Sin embargo es importante recalcar que este anlisis se
refuerza con una mayor data que la generada en estas dos campaas, por lo que la
informacin desprendida contiene limitaciones para generar una conclusin.








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4.2. Bioensayos: Evaluacin toxicolgica de la calidad del agua.

4.2.1. Metodologa para Bioensayos Campaa primavera y verano

Contando con la disponibilidad de Daphnia magna en el Laboratorio de Bioensayos y
Microbiologa del CENMA, se implement el bioensayo en esta especie para evaluar la
toxicidad aguda y crnica de las muestras de sedimentos colectada en terreno. Se
utilizaron los protocolos descritos por ASTM (E 1706-05 2005) en la Gua para
Conducir Test de Toxicidad de Sedimentos con Daphnia magna y Ceriodphnia dubia.
A continuacin se presenta el detalle de la metodologa utilizada en ensayos de toxicidad
aguda y crnica.

4.2.1.1. Test de Toxicidad Aguda (Duracin: 48 horas)

Las pruebas de bioensayo se realizan bajo una relacin de 1:4 de sedimento agua. Los
vasos son mantenidos a 25C con fotoperodo 16:8 (lux). La prueba se realiza con tres
rplicas. El resultado se expresa en gramos de peso hmedo. Adicionalmente, se
determina el peso seco de las alcuotas usadas de sedimento, para expresar los gramos de
peso seco por mL. El agua sobrenadante se adiciona suavemente a cada recipiente,
minimizando la resuspensin de sedimentos, luego de un perodo de sedimentacin, se
adicionan, aleatoriamente 10 organismos en cada recipiente.


4.2.1.2. Test de Toxicidad Crnica (Duracin: 7 das)

Los vasos de prueba son mantenidos en cmara de cultivo a 25C con fotoperodo 16:8
(lux). El test es realizado en vasos precipitados y 10 replicas por cada tratamiento. Se
adiciona 1 individuo de 4 a 5 das de nacido por cada vaso, luego del perodo de
sedimentacin. Cada 24 horas los organismos son removidos y puestos en un contenedor
con agua control, se cuentan los individuos recin nacidos y se caracterizan parmetros
de calidad de agua. Se retiran suavemente agua sobrenadante y se renueva con agua
dulce estndar con el alimento, luego se devuelven los organismos al vaso de prueba. El
test termina a los 7 das o cuando el 60% de los controles tenga su primera postura de
neonatos.

4.2.2. Metodologa para Bioensayos Campaa otoo

Para evaluar la toxicidad de las muestras, se prepararon eludos a partir de los
sedimentos, de acuerdo a los protocolos descritos por EPA (2001) y Simpson (2005).
Con los eludos obtenidos se llevaron a cabo ensayos agudos y crnicos en D. magna. A
continuacin se presenta el detalle de la metodologa utilizada.

4.2.2.1. Preparacin de Eludo a partir de las muestras de sedimentos

Los eludos son prepararon de acuerdo a lo descrito por EPA (U.S. EPA 2001) y
Simpson (2005), 1 parte de sedimento se mezcl con 4 partes de agua reconstituida
(APHA, 1998), esta mezcla se homogeneiz por lo menos 1 hora y se dej decantar
durante toda la noche a 4 1C. Luego de esto se colect el sobrenadante cuidando de






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no arrastrar parte del sedimento. El sobrenadante se pas a travs de un tamiz de 250
m, se distribuy en alcuotas de volumen suficiente para los cambios de medio
correspondientes y se congel a -20 1C hasta su uso.

4.2.2.2. Test de Toxicidad Aguda (Duracin: 48 horas)

El ensayo de toxicidad aguda fue llevado a cabo de acuerdo a la NCh2083 Of1999 con
modificaciones, esto es, se utiliz el agua reconstituida recomendada por la APHA
(APHA, 1998). Se prepararon 5 diluciones a partir de la muestra de eludo; cada una de
ellas con 4 rplicas, se depositaron 5 neonatos de Daphnia en cada vaso, y se llevaron a
oscuridad por 48 horas. Se registr la inmovilidad de los individuos a las 24 y 48 horas
de realizado el ensayo y se calcul la concentracin efectiva 50 (EC
50
), concentracin en
la cual el 50% de los individuos se inmoviliza. Adems, se registraron los parmetros de
oxgeno disuelto, pH y temperatura de la muestra, al inicio y trmino del ensayo.


4.2.2.3. Test de Toxicidad Crnica (Duracin: 14 das)

El ensayo de toxicidad crnica fue llevado a cabo de acuerdo a la OECD (2002). Se
prepararon 3 o ms diluciones con el eludo obtenido de los sedimentos con un total de
10 rplicas por dilucin. El nmero de diluciones utilizadas dependi de los resultados
obtenidos en los ensayos agudos. A cada uno de los vasos experimentales se les agreg
un neonato, cada dos das se realiz cambio de medio y se adicion alimento a cada vaso
(Selenastrum sp en densidad de 250 celmL
-1
e YTC en volumen propuesto en NCh2083
Of1999). El ensayo se mantuvo con fotoperodo controlado de luz/oscuridad de 16:8
horas con una intensidad lumnica de 800 100 lux y a una temperatura de 20 2C. Se
mantuvo un registro de la viabilidad y la reproduccin por 14 das, se registraron los
parmetros de oxgeno disuelto, pH y temperatura de cada una de las diluciones
utilizadas al inicio del ensayo, en cada cambio de medio y al finalizar el ensayo.


4.2.3. Anlisis de datos

4.2.3.1. Anlisis bioensayos agudos

Se calcul el porcentaje de individuos inmovilizados durante el ensayo, evaluados a las
24 y 48 h tras el inicio de la prueba. Se estim la relacin entre porcentaje de individuos
inmovilizados y tiempo, mediante una regresin lineal, cuya pendiente se presenta como
una tasa de inmovilizacin.

Se estim tambin la concentracin efectiva o concentracin letal 50% (LC50), como la
concentracin de muestra que inmoviliza el 50% de los organismos en 48 h. Para esto se
realiz una regresin logstica mediante el ajuste de un modelo Probit utilizando el
programa Probit 1.5.







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4.2.3.2. Anlisis bioensayos crnicos

Los ensayos realizados generaron registros diarios de mortalidad y fecundidad de
individuos nicos seguidos por un periodo aproximado de 21 das, por tanto se
consideraron cada uno de estos registros como tablas de vida individuales. Se calcularon,
por tanto, las variables l
x
y m
x
, correspondientes a funciones de sobrevivencia y
maternidad en la edad x, respectivamente (Caswell 2001, Begon et al., 2006).

Dado que el anlisis de ciclos de vida corresponde a una respuesta de tipo poblacional,
se calcul una nica tabla de vida poblacional como el promedio de las variables l
x
y m
x

entre las 10 rplicas individuales. Se obtuvieron estimados clsicos de tablas de vida
como son:

Tasa neta reproductiva



Tiempo generacional



Tasa intrnseca de crecimiento poblacional, segn la ecuacin de Euler-Lotka:




Modelo matricial edad-estructurado

Para cada concentracin de agua de muestra se construy un modelo matricial edad-
estructurado a partir de las funciones de sobrevivencia y maternidad registradas en las
tablas de vida. Los coeficientes de entrada en la matriz de proyeccin son las
probabilidades de sobrevivencia (P
i
) y fertilidad (F
i
), obtenidas de acuerdo a las
formulas propuestas por Caswell (2001) para poblaciones con nacimientos en flujo:

) 1 ( ) (
) ( ) 1 (
+
+ +
=
i l i l
i l i l
P
i


) (
2
)) 1 ( ) 0 ( (
1
2
1
+
+ =
i i i i
m P m
l l
F

La tasa de crecimiento poblacional fue calculada como autovalor dominante () de la
matriz de proyeccin, y los autovectores derecho e izquierdo asociados corresponden a
la estructura edad-estable (w), y valor reproductivo (v), respectivamente.







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Modelo estado-estructurado

En base al modelo edad-estructurado se desarroll un modelo simplificado de dos
estados con juveniles y adultos como variables estado (Fig. 1), donde los juveniles
sobreviven con probabilidad P
J
para alcanzar la madurez, destinando unidades de
tiempo en hacerlo. Los adultos sobreviven con probabilidad P
A
durante un intervalo de
proyeccin, esto es:

1
=
J
P

2
=
A
P

De acuerdo a Levin et al. (1996) y Ramos-Jiliberto & Arnguiz-Acua (2007), fue
calculada como la clase de edad previa a la primera fertilidad distinta de cero en la
matriz edad-estructurada. Se defini m como la clase de edad a la madurez (Ramos-
Jiliberto & Arnguiz-Acua 2007), calculada de las tablas de vida individuales como la
media aritmtica de la primera clase de edad con maternidad no cero.
P
J
fue considerada como la probabilidad de sobrevivir a la clase de edad m, i.e.

=
m
i
i
P
1
.

La sobrevivencia de los adultos (
2

) y la fertilidad de los adultos ( F ) fue calculada de


acuerdo a Levin et al. (1996) como:

=
=
m i
i
m i
i i
w
P w
2

=
=
m i
i
m i
i i
w
F w
F


Las sensibilidades de a cambios n estos parmetros pueden ser derivados de la
ecuacin caracterstica del modelo matricial (Caswell 1996, Levin et al. 1996):

1
2
1
1
1
) 1 (

+
=

2 2
) 1 ( +
=










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1
2
1 1 2
1
) 1 (
) log ( log log

+
+
+ +
=

F



1
2
1
) 1 (

+
=



F


















Figura 9. Grafo de ciclo de vida de dos estados

Donde:
: edad de primera reproduccin
P
J
: probabilidad de sobrevivencia a la madurez
P
A
: probabilidad de sobrevivencia de adultos
F: fertilidad de los adultos, y
: tasa de crecimiento poblacional.


LTRE (Life table response experiments) de una va

Para cada concentracin de muestra, el efecto de cada concentracin sobre fue medido
respecto del tratamiento control, para el cual fue obtenida una matriz de referencia A
(r)
.
El efecto total de la concentracin de muestra sobre es descompuesto en
contribuciones de las cuatro tasas vitales definidas a las diferencias observadas del valor
de del tratamiento respecto de la referencia
(r)
. Cada contribucin est compuesta por
el cambio observado en los parmetros de tasas vitales causado por el agua de muestra, y
la sensibilidad de a los cambios en el parmetro,

( )

+
i
P
i
r
i
k
i
r k
p
p p
2 /
) ( ) ( ) ( ) (










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donde p
i
son los parmetros de tasas vitales en el tratamiento k y la referencia r, y las
sensibilidades son evaluadas en el promedio de ambos sets de parmetros.

Se utiliz un procedimiento de remuestreo bootstrap para calcular intervalos de
confianza del 95% para , 1, 2, y
F
a travs del mtodo de percentiles con un
tamao de remuestreo de 5000 iteraciones (Meyer et al. 1986, Manly 1997).

Las rutinas requeridas para este procedimiento fueron programadas en MatLab 6.0
(Mathworks, Inc.).








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5. ESQUEMA RESUMEN DE LOS ASPECTOS ANALIZADOS EN EL ESTUDIO
EN LAS TRES CUENCAS HIDROGRFICAS.



















Figura 10. Esquema resumen de los aspectos considerados en el estudio para la evaluacin de la
calidad del agua.


Se determin por cada sitio en estudio variables hidrodinmicas, y qumicas tanto del
agua superficial como de sedimentos. La dinmica fsica y qumica es esperable
modifiquen la calidad del agua superficial usando a la biota bentnica como
bioindicadora. Se evala la biota bentnica en su estructura comunitaria y el ndice
bitico cuantitativo Ch IBF el cual ha resultado ser sensible a perturbaciones.


Biota
Bioensayos en sedimento
Bioindicadores con
Macroinvertebrados bentnicos
Hidrodinmica
Hidrologa, Granulometra, Topografa
Qumica
Agua superficial:
metales pesados y otros indicadores.

Sedimentos:
caracterizacin y distribucin de metales pesados.

Relacin metales disueltos:
Matriz Agua superficial Matriz Sedimento






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Tabla 8. Resumen de metodologa qumica

Matriz Actividad Componentes
Mediciones in situ pH; CE; T ; O
2
Agua superficial
Determinaciones Laboratorio Metales totales y disueltos
cationes, aniones, slidos suspendidos y
slidos disueltos, amonio, DBO
5,
N total,
P total.
Mediciones in situ pH, potencial redox
Determinaciones Laboratorio Metales totales y disueltos
Caracterizacin de Sedimentos

pH, conductividad elctrica,
granulometra, cationes, aniones,
materia orgnica, carbonatos, silicatos,
fsforo disponible.
Sedimento
Distribucin cualitativa de Metales
pesados por mtodo BCR.

Para valorar los metales pesados se
determina la concentracin de estos
en cada fraccin por el mtodo ICP-
OES.
Fracciones
Iones intercambiables y unidos a
carbonatos. Fraccin soluble analizada
Unidos a xidos de Fe-Mn.
Ligados a materia orgnica y sulfuros.
Unidos a fase residual. Fraccin
asociada a la fase litognica.







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Pginas Web consultadas:

COMISIN NACIONAL DEL MEDIO AMBIENTE. www.conama.cl
DIRECCIN GENERAL DE AGUAS. www.dga.cl
SISTEMA NACIONAL DE INFORMACIN AMBIENTAL. www.sinia.cl
CORPORACIN NACIONAL FORESTAL www.conaf.cl

Softwares utilizados:
ArcView GIS 3.2
MatLab 6.0
Probit 1.5
Stadistics 6.0.

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