Quimica Viva. Vullo

Qumica Viva
Universidad de Buenos Aires

quimicaviva@qb.fcen.uba.ar
ISSN (Versin en lnea): 1666-7948
ARGENTINA

2003
Diana L. Vullo
MICROORGANISMOS Y METALES PESADOS: UNA INTERACCIN EN BENEFICIO
DEL MEDIO AMBIENTE
Qumica Viva, diciembre, ao/vol. 2, nmero 003
Universidad de Buenos Aires
Buenos Aires, Argentina
pp. 93-104

Red de Revistas Cientficas de Amrica Latina y el Caribe, Espaa y Portugal
Universidad Autnoma del Estado de Mxico
http://redalyc.uaemex.mx

Revista QumicaViva- Nmero 3, ao 2, diciembre 2003- quimicaviva@qb.fcen.uba.ar

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MICROORGANISMOS Y METALES PESADOS: UNA
INTERACCIN EN BENEFICIO DEL MEDIO AMBIENTE

Dra. Diana L. Vullo*

Recibido 30 de octubre de 2003
Aceptado 12 de noviembre de 2003

La acumulacin de desechos, sobre todo en reas urbanas, genera la dispersin de gran
diversidad de compuestos en suelos, aguas superficiales y aire, con la consecuente filtracin de
los mismos hacia las aguas subterrneas: los acuferos que constituyen la reserva de agua
potable.
Cmo solucionamos el problema generado por la dispersin de contaminantes en el medio
ambiente? La respuesta es lo que llamamos remediacin. Para definir este trmino podemos
decir que es el uso intencional de procesos de degradacin qumicos o biolgicos para eliminar
sustancias contaminantes ambientales que han sido vertidos con conocimiento o
accidentalmente en el medio ambiente. Los procesos de remediacin pueden efectuarse in situ,
o sea en el mismo lugar donde ha ocurrido el derrame, o bien ex situ, separando la porcin
contaminada y trasladndola a un reactor. Tal es el caso de efluentes industriales o domiciliarios
que se tratan previamente al vertido al medio ambiente.
Cuando escuchamos la radio, usamos una linterna, arrancamos el motor de nuestro automvil,
nunca pensamos que todos estos elementos contienen metales pesados. Somos conscientes
del destino que corren cuando se descarten? Sabemos qu ocurre cuando tiramos apenas una
pila a la basura? Cul es el destino de los metales pesados durant e la fabricacin de pilas y
bateras y en otros procesos industriales?
Las actividades industriales generan una contaminacin a gran escala con metales pesados
(Cu, Zn, Pb, Cd, Cr, Ni, Hg, Co, Ag, Au) y radionuclidos (U, Th) en el medio ambiente. En el
caso particular de los suelos, suelen afectar la fertilidad y/o el uso posterior de los mismos,
mientras que en el caso de los acuferos y aguas superficiales, pueden comprometer seriamente
el uso de este recurso como fuente de agua para el consumo humano. La remediacin de estos
ambientes contaminados mediante la utilizacin de mtodos qumicos involucra procesos de
costos excesivamente altos debido a la especificidad requerida. Adems, este tipo de solucin
no es aplicable en procesos de remediacin in situ, ya que es imposible tratar un metal
determinado debido a la competencia existente por la presencia de otros. La aplicacin de
mtodos de remediacin efectivos depende del conocimiento de los factores hidrolgicos y
geolgicos del sitio, la solubilidad y especiacin de los metales pesados, los procesos de

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atenuacin e inmovilizacin y la medida en que los metales puedan dispersarse tanto horizontal
como verticalmente a medida que migran por el suelo. Por otra parte, la utilizacin de mtodos
biolgicos para remediar un ambiente contaminado (biorremediacin) ofrece una alta
especificidad en la remocin del metal de inters con flexibilidad operacional, tanto en sistemas
in situ como ex situ.

IMPACTO AMBIENTAL

El impacto ambient al de los contaminantes metlicos en suelos y sedimentos es estrictamente
dependiente de la capacidad de complejamiento de stos con componentes del medio ambiente
y su respuesta a las condiciones fisicoqumicas y biolgicas de su entorno. Los metales son
especies qumicas no degradables. Por tal motivo, una vez volcados al medio ambiente, slo
pueden distribuirse entre los entornos aire - agua - suelo, a veces cambiando su estado de
oxidacin, o incorporarse a los seres vivos. Los procesos de adsorci n y la formacin de
complejos en medios naturales son responsables de que la mayor parte de los vestigios de
metales pesados se acumulen en los slidos en suspensin, incorporndose rpidamente a los
sedimentos, donde se presentan los mayores niveles de concentracin de estos contaminantes.
Como resultado de estas interacciones, los sedimentos juegan un papel muy importante en la
regulacin de la calidad del agua. Por su parte, las aguas intersticiales, en contacto directo con
los sedimentos, actan como fuente o sumidero de estos contaminantes y en ellas se observan
concentraciones intermedias entre las aguas superficiales y los sedimentos (5, 11, 14, 16)

BIODISPONIBILIDAD

La toxicidad de los metales pesados es muy alta. Su accin directa sobre los seres vivos ocurre
a travs del bloqueo de las actividades biolgicas, es decir, la inactivacin enzimtica por la
formacin de enlaces entre el metal y los grupos -SH (sulfhidrilos) de las protenas, causando
daos irreversibles en los diferentes organismos. Para que los metales pesados puedan ejercer
su toxicidad sobre un ser vivo, stos deben encontrarse disponibles para ser captados por ste,
es decir que el metal debe estar biodisponible. El concepto de biodisponibilidad se encuentra
ntimamente relacionado con las condiciones fsicoqumicas del ambiente, que determinan la
especiacin y por lo tanto la concentracin de metal libre y lbil. Por ello es fundamental al
determinar el grado de contaminacin por metales pesados de un ambiente, conocer su
biodisponibilidad, es decir, la concentracin de metal libre y lbil presente en la muestra (3, 15,
17, 22, 24).
Los mtodos electroqumicos permiten determinar la especiacin de un metal y analizar la
disponibilidad del mismo en diferentes ambientes. En particular la aplicacin de las tcnicas de
Voltamperometra de Preconcentracin (4, 8, 9) que permiten evaluar la existencia de complejos
entre el metal y ligandos presentes en el medio ambiente natural y la labilidad de los mismos.
Por medio de las curvas de intensidad de corriente registrada en una muestra en funcin del
potencial aplicado a la misma, se evidencia la presencia de metales a travs de la aparicin de
picos, cuyas reas y alturas son proporcionales a las concentraciones de los mismos en estado
libre en esas condiciones de lectura. Las Figuras 1.A., 1.B y 1.C (6) muestran una serie de
voltamperogramas realizados en nuestro laboratorio de Electroqumica, para muestras naturales
de aguas subterrneas (Figura 1.A), intersticiales (Figura 1.B) y superficiales (Figura 1.C), con y
sin tratamiento de destruccin fotoqumica de materia orgnica de manera de eliminar todo
ligando presente, en las cuales se evalu la presencia de Cu, Cd, Pb y Zn.


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Figura 1a

Figura 1b

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Figura 1c

Se ve claramente como cambia el perfil de las muestras antes y despus de la destruccin de
ligandos de origen orgnico, como consecuencia de la liberacin de metales de sus complejos
estables. Es decir que en toda muestra natural la concentracin de metal total se halla alejada
de la disponible y ese alejamiento se debe al complejamiento existente con los componentes
naturales de la muestra.

TRANSFORMACIONES MEDIADAS POR MICROORGANISMOS

Todas las interacci ones entre los microorganismos y los metales u otros elementos como
carbono, nitrgeno, azufre y fsforo son componentes fundamentales del ciclos biogeoqumicos.
Las interacciones metal-microbiota son estudiadas entonces en profundidad en el contexto de la
biotecnologa ambiental, con el objeto de implementar mtodos de remocin, recuperacin o
detoxificacin de metales pesados y radionclidos (10, 20, 21, 30) .
Dependiendo del estado de oxidacin que se presente un metal y la especie que est
conformando, un microorganismo puede realizar dos transformaciones posibles. Una
correspondera a la movilizacin del metal, es decir el pasaje de un estado insoluble inicial
(metales asociados a suelos, sulfuros u xidos metlicos, por ejemplo) correspondiente a una
fase slida, a un estado soluble final, en fase acuosa. Este proceso se conoce con el nombre de
lixiviacin microbiana. El otro corresponde a la inmovilizacin del metal, es decir el pasaje de un
estado soluble inicial en fase acuosa a uno insoluble final en fase slida. A su vez existen en la
naturaleza diferentes mecanismos por los cuales la inmovilizacin del metal puede llegar a
ocurrir. Veamos entonces un poco ms en detalle estas interacciones metales pesados -
microorganismos.


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MOVILIZACIN DE LOS METALES PESADOS

Biolixiviacin
Este mecanismo de solubilizacin es utilizado en la industria minera. Por intermedio de la
accin microbiana, los metales presentes en los minerales resultan extrados en fase acuosa.
Tal es el caso de la obtencin de Cu por la oxidacin de las menas de Cu2S (calcocita) a
CuSO4 por intermedio de la accin de las bacterias Thiobacillus ferroxidans y Thiobacillus
thiooxidans [Figura 2, (23)].

Figura 2

Desde el punto de vista de la biorremediacin, el biolixiviado puede utilizarse dentro de la
perspectiva de la hidrometalurgia, recuperando metales a partir de materiales slidos
contaminados como suelos, cenizas resultantes de quema de desechos, sedimentos acuticos,
etc. Este proceso se ha aplicado con xito utilizando bacterias oxidadoras del hierro o sulfuros,
como Thiobacillus ferroxidans o Thiobacillus thiooxidans , respectivamente, en la recuperacin
de Cu, Ni, Zn y Cd, tanto en condiciones aerobias como anaerobias, ya que estos
microorganismos pueden utilizar el catin Fe3+ como ltimo aceptor de electrones en lugar del
O2 (2). Las bacterias del gnero Thiobacillus son microorganismos acidfilos, es decir,
requieren un pH = 2,5 para crecer en condiciones ptimas, lo cual resulta adecuado para
mantener a los metales en solucin, sobre todo al Fe3+. Con valores de pH mayores a 5,5,
estos microorganismos no se desarrollan, por lo tanto la lixiviacin no sera efectiva. Pero como
era de esperar, existen otros microorganismos en la naturaleza capaces de lograr una
solubilizacin efectiva de metales tales como Mn, Fe, Zn, Cd y Pb a pH mayores a travs un
mecanismo diferente. Se ha comprobado que este mecanismo ocurre a travs de la liberacin

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de compuestos orgnicos capaces de complejar y as solubilizar metales, tales como cidos
carboxlicos o los compuestos llamados siderforos (10, 20, 21). Algunos hongos como
Trichoderma harzianum pueden solubilizar MnO2, Fe2O3 y Zn metlico mediante la liberacin
de agentes quelantes. Ralstonia eutropha (Alcaligenes eutrophus) es una bacteria capaz de
acumular metales pesados, previa solubilizacin de los mismos mediante la liberacin de
siderforos. Los siderforos son pptidos con capacidad complejante que son liberados al medio
con el objeto de captar Fe, que es utilizado como oligoelemento dentro del metabolismo celular.
La biosntesis de siderforos, si bien se induce en ausencia de Fe en el medio, tambin ocurre
en presencia de otros metales, con el fin de detoxificar el entorno celular (7, 12, 31). Otro caso
interesante resulta la utilizacin de una combinacin de la solubilizacin microbiana del Pb de la
piromorfita, Pb5(PO4)3Cl, mediada por el hongo Aspergillus niger con la acumulacin del metal
disuelto por parte de plantas que crecen en suelos contaminados con dicho mineral (10). Este
ltimo fenmeno es conocido por fitorremediacin, donde la retencin del metal es mediada por
la acumulacin en vegetales.

INMOVILIZACIN DE METALES PESADOS

Dentro de la amplia diversidad microbiana, existen microorganismos resistentes y
microorganismos tolerantes a metales. Los resistentes se caracterizan por poseer mecanismos
de detoxificacin codificados genticamente, inducidos por la presencia del metal (27). En
cambio, los tolerantes son indiferentes a la presencia o ausencia de metal. Tanto los
microorganismos resistentes como tolerantes son de particular inters como captores de
metales en sitios contaminados, debido a que ambos pueden extraer los contaminantes. La
resistencia o tolerancia experimentada por microorganismos es posible gracias a la accin de
diferentes mecanismos [Figura 3, (21)]. Estos fenmenos son: biosorcin, bioacumulacin,
biomineralizacin, biotransformacin y quimiosorcin mediada por microorganismos.

Figura 3

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Biosorcin
La biosorcin es un fenmeno ampliamente estudiado en la biorremediacin de diversos
metales pesados como el cadmio, cromo, plomo, nquel, zinc y cobre (13, 19, 28, 29). Los
microorganismos utilizados como biosorbentes, aislados a partir de ecosistemas contaminados,
retienen los metales pesados a intervalos de tiempo relativamente cortos al entrar en contacto
con soluciones de dichos metales. Esto minimiza los costos en un proceso de remediacin, ya
que no requiere el agregado de nutrientes al sistema, al no requerir un metabolismo microbiano
activo. La biomasa capaz de participar en estos procesos es fcilmente extrable de sistemas
acuosos como cursos de aguas o efluentes de diversos orgenes, por lo que el proceso global
de biorremediacin sera rentable. Es por ello que la bsqueda de este tipo de microorganismos
se encuentra en crecimiento constante, junto con el estudio de sistemas biosorbentes como por
ejemplo la utilizacin de consorcios microbianos, o sistemas mixtos formados por
microorganismos y macromolculas (polmeros) sorbentes, que incrementaran los rendimientos
en la captacin de mezclas de metales pesados (1, 18, 25, 33, 34).
Los fenmenos de biosorcin se caracterizan por la retencin del metal mediante una
interaccin fsicoqumica del metal con ligandos pertenecientes a la superficie celular. Esta
interaccin se produce con grupos funcionales expuestos hacia el exterior celular pertenecientes
a partes de molculas componentes de las paredes celulares, como por ejemplo carboxilo,
amino, hidroxilo, fosfato y sulfhidrilo. Es un mecanismo de cintica rpida que no presenta una
alta dependencia con la temperatura y en muchos casos puede estudiarse en detalle mediante
la construccin de los modelos de isotermas de Langmuir y Freundlich.

Bioacumulacin
Este mecanismo celular involucra un sistema de transporte de membrana que internaliza al
metal pesado presente en el entorno celular con gasto de energa. Este consumo energtico se
genera a travs del sistema H+-ATPasa. Una vez incorporado el metal pesado al citoplasma,
ste es secuestrado por la presencia de protenas ricas en grupos sulfhidrilos llamadas
metalotionenas o tambin puede ser compartimentalizado dentro de una vacuola, como ocurre
en hongos.
Algunos ejemplos de este proceso son muy interesantes, como el caso de acumulacin de
uranio por la bacteria Pseudomonas aeruginosa, el cual fue detectado ntegramente en el
citoplasma, al igual que en la levadura Saccaromyces cerevisiae (21).

Biomineralizacin
Los microorganismos son capaces de precipitar metales y radionuclidos como carbonatos e
hidrxidos, mediante un mecanismo de resistencia codificado en plsmidos. Este mecanismo
aparece por el funcionamiento de una bomba que expulsa el metal txico presente en el
citoplasma hacia el exterior celular en contracorriente a un flujo de H+ hacia el interior celular.
Esto produce una alcalinizacin localizada sobre la superficie celular externa y por lo tanto la
precipitacin del metal pesado (Figura 3.).
Otra forma de precipitar los metales es a travs de la formacin de sulfuros o fosfatos, como
resultado de alguna actividad enzimtica celular. Un ejemplo de ello es la precipitacin de
sulfuros metlicos en reactores con cultivos mixtos de bacterias reductoras de sulfato (10, 21) o
la acumulacin de CdS en la pared celular de las bacterias Klebsiella planticola y Pseudomonas
aeruginosa (26, 35).


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Biotransformacin
Este es un proceso que involucra un cambio qumico sobre el metal pesado, como por ejemplo
en el estado de oxidacin o metilacin. Esta transformacin biolgica de los metales pesados
que resultan txicos mediada por enzimas microbianas puede dar como resultado compuestos
poco solubles en agua o bien compuestos voltiles. El ejemplo ms claro es el ciclo del Hg en
la naturaleza, donde la bacteria Pseudomonas aeruginosa puede reducir el catin Hg2+ a Hg0,
y otros organismos pueden luego metilarlo dando como producto el CH3Hg+ y (CH3)2Hg, que
son voltiles y an ms txicos que el propio Hg (Figura 4.).

Figura 4

Las reducciones de V(V) a V(III), Au(III) a Au(0) y Cr(VI) a Cr(III), conducen a la precipitacin
del metal bajo condiciones fisiolgicas. Entre estos ltimos el Cr es el metal ms ampliamente
utilizado en la industria de aceros, automviles, equipamiento de hospitales y curtiembres, entre
otras. El Cr(VI) es un contaminante de prioridad 1 catalogado por la Agencia de Proteccin
Ambiental de los Estados Unidos (EPA: www.epa.gov), ya que es estable en solucin acuosa y
por lo tanto de alta movilidad en diferentes ambientes, con un alto potencial mutagnico y
carcinognico. El pasaje a Cr(III) produce la inmovilizacin por precipitacin de hidrxidos y la
disminucin en la mutagenicidad. La utilizacin de microorganismos resitentes a Cr con
capacidad de bioconversin Cr(VI) en Cr(III) es de fundamental importancia en el tratamiento
biolgico de efluentes industriales (21, 28).

Quimiosorcin mediada por microorganismos
Dentro de este trmino se pueden describir aquella clase de reacciones en donde los
microorganismos biomineralizan un metal, formando un depsito primario. Este depsito
primario funciona como ncleo de cristalizacin, con la subsecuente deposicin del metal de

101
inters, promoviendo y acelerando as el mecanismo de mineralizacin (Figura 3).
Un ejemplo de este proceso es el agregado de Fe en un efluente a tratar, en presencia de
bacterias reductoras del sulfato. Estos microorganismos producen sulfuros que precipitan en
forma de FeS, sobre la superficie celular. Los otros metales contaminantes utilizan el FeS
formado como soporte y cristalizan sobre sus cristales. Luego, aprovechando las propiedades
magnticas del Fe, pueden separarse fcilmente de la fase soluble, decontaminando as el
material (21).

Cualquiera de los mecanismos microbianos descriptos remueve los metales pesados de
efluentes contaminados. Los microorganismos autctonos que sobreviven en sitios
contaminados han desarrollado mecanismos de resistencia y/o tolerancia que nos son tiles a la
hora de la implementacin de procesos de biorremediacin. Pseudomonas fluorescens 200H,
aislada en nuestro laboratorio a partir de aguas superficiales contaminadas del arroyo Las
Catonas (Partido de Moreno, Buenos Aires) logra la separacin de la fase acuosa del 65% de
Cd y 32% de Zn presentes en el medio de cultivo (Figura 5.).

Figura 5

Si bien la mayor parte de Cd y Zn aparece retenida en las fracciones correspondientes a pared
celular, experimentos posteriores nos revelaron que el porcentaje de metal biosorbido es muy
bajo, alrededor del 7%. Evidentemente existe la posibilidad de que ocurra una biomineralizacin
del metal, la cual requiere un metabolismo celular activo, que tendremos que estudiar ms a
fondo. ste es slo un ejemplo. A diario realizamos nuevos aislamientos, con el objeto de reunir
la mayor cantidad de microorg anismos que en cultivos puros o mixtos logren una separacin
eficiente de los metales de nuestro estudio, Cu, Pb, Cd y Zn y con ellos disear sistemas de
biorremediacin ex situ de efluentes lquidos (32).

En conclusin, el rol de los microorganismos es fundamental en los ciclos biogeoqumicos de

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los metales y su utilizacin en los procesos de biorremediacin de desechos slidos y lquidos
es esencial para el cuidado del medio ambiente.

* la autora es Jefe de Trabajos Prcticos del rea Microbiol oga, Departamento de Qumica
Biolgica, Facultad de Ciencias Exactas y Naturales (UBA) y Profesora Adjunta del rea
Qumica del Instituto de Ciencias de la Universidad Nacional de General Sarmiento (J.M.
Gutirrez 1150, B1613GSX, Los Polvorines, Provi ncia de Buenos Aires), integrante del proyecto
de investigacin en Qumica Ambiental: "Influencia de la capacidad complejante del medio en la
remediacin de aguas contaminadas con metales pesados mediante el empleo de
microorganismos autctonos". E-mail: dvullo@qb.fcen.uba.ar dvullo@ungs.edu.ar

Agradecimientos

Quisiera agradecer a mis compaeras de trabajo Lic. Helena Ceretti y Dra. Silvana Ramrez por
su ayuda en la confeccin de este artculo.

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