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ESCUELA SUPERIOR DE
CIENCIAS QUMICAS
MANUAL DE LABORATORIO
MICOLOGA
MICOLOGA
NOMBRE____________________________________________________
GRADO____________
GRUPO__________
SECCIN_____________
ESCUELA____________________________________________________
PROFESOR___________________________________________________
EVALUACIN
No.
1
NOMBRE DE LA PRCTICA
Morfologa de los hongos
Dermatofitos
Microcultivo
CALIFICACIN
FIRMA
CALIFICACIN FINAL___________________
UNIVERSIDAD DE PUEBLA
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MICOLOGA
NDICE
Pg.
I.
Reglamento de Laboratorio
II
Normas de seguridad
III
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IV
Prctica No 2: Dermatofitos
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V.
Prctica No 3: Microcultivo
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VI
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VI.
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VII.
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MICOLOGA
REGLAMENTO DE LABORATORIO
CAPTULO I
GENERALIDADES
Artculo 1.-El presente reglamento es de observancia general para los
alumnos de UNIPUEBLA que contemplen en su plan de estudios alguna
materia de carcter experimental
CAPTULO II
DE LOS DERECHOS
Artculo 2.-Los alumnos tienen derecho a recibir el nmero de prcticas
especificadas al inicio de cada curso.
Artculo 3.
-Igualmente el alumno tiene derecho a:
1. Recibir una explicacin terica previa a cada sesin, donde se orienta al
estudiante sobre cmo desarrollar el trabajo experimental.
2. Que se le proporcione el material y reactivos analticos especificados en el
formato que contiene las instrucciones y procedimientos para el desarrollo
de la prctica.
3. Ser orientado por parte del profesor durante el proceso de la prctica.
4. Solicitar asesora posterior a la prctica, para elaborar adecuadamente su
reporte.
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MICOLOGA
CAPTULO III
DE LAS OBLIGACIONES
Artculo 4.-Los alumnos que permanezcan en el laboratorio debern portar
bata. No se permitir la estancia en el laboratorio a personas que no
cumplan con este requisito.
Artculo 5.-Queda prohibido el ingreso de alumnos de UNIPUEBLA que no
tengan motivos acadmicos para permanecer durante el desarrollo
experimental.
Artculo 6.-Se prohbe estrictamente a los alumnos introducir al rea de
laboratorio personas ajenas a UNIPUEBLA.
Artculo 7.-Se considera faltante al alumno que a los diez minutos de iniciada
la prctica no est presente, no permanezca en el laboratorio, ni efecte
la prctica.
Artculo 8.-El alumno deber tener el 100% de asistencia para que tenga
derecho a acreditar el laboratorio, con la excepcin de que la falta se
justifique y sea validada por el personal acadmico.
Artculo 9.-Para abandonar temporalmente el laboratorio durante el desarrollo
de la prctica, deber solicitarse permiso al profesor responsable de la
misma.
Artculo 10.-En la primera prctica que se efecte, se formarn los grupos de
trabajo, los cuales sern fijos durante el curso. Se modificarn
temporalmente slo cuando el profesor lo considere conveniente en
funcin de un mejor desempeo del trabajo experimental.
Artculo 11.-La eleccin de los integrantes de los grupos de trabajo quedar a
discrecin de los alumnos, y una vez formados dichos grupos, no se
permitir cambio alguno.
Artculo 12.-Los alumnos slo podrn adquirir material y reactivos de
laboratorio mediante un vale que especifique con claridad sus
caractersticas y propiedades, estando acompaado por el nombre y
firma de un responsable del equipo.
Artculo 13.-Los alumnos llevarn al laboratorio el material y sustancias que el
profesor le solicite, mismos que cumplirn con las caractersticas de no
ser muy especializados y costosos.
Artculo 14.-Por razones de seguridad de los propios alumnos, queda
terminantemente prohibido ingerir alimentos en el laboratorio.
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MICOLOGA
CAPTULO IV
DE LAS SANCIONES
Artculo 17.-Los alumnos sern responsables del material de laboratorio que
se les facilite, mismo que debern de entregar en buenas condiciones
cuando finalice la sesin de trabajo.
A) Los alumnos que no cumplan con el tiempo especificado para la devolucin
del material sern suspendidos en las prcticas siguientes
B) En el caso de que el material sea daado, los alumnos debern reponerlo
en la siguiente sesin. En caso de no hacerlo sern suspendidos en las
prcticas siguientes
Artculo 18.-Se expulsar del laboratorio a los alumnos que no guarden el
comportamiento debido o hagan mal uso de los reactivos y material de
laboratorio que provoque algn accidente en contra de los asistentes a
la prctica.
CAPTULO V
DE LA EVALUACIN
Artculo 19.-La evaluacin del laboratorio ser determinada al inicio del curso,
y quedar a criterio del profesor, con la aclaracin de que para efecto de
calificacin final del curso, el no aprobar el laboratorio quita derecho a la
calificacin terica.
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MICOLOGA
RECOMENDACIONES GENERALES
Revisar que las llaves de agua y gas estn bien cerradas al finalizar cada
prctica.
Abstenerse de fumar, jugar e ingerir alimentos en el laboratorio.
Utilizar bata, guantes y, cuando sea necesario, lentes de proteccin lateral.
Mantener limpios el rea de trabajo, los aparatos y el equipo.
Emplear los reactivos slo despus de cerciorarse de que son los
requeridos.
Poner atencin a las indicaciones de riesgos impresas en las etiquetas.
No utilizar reactivos que carezcan de etiquetas.
No probar las sustancias ni aspirar de manera directa los vapores que
desprenden.
Tapar de inmediato los frascos de reactivos.
Al preparar una solucin etiquetar de inmediato el frasco, anotando la fecha
de preparacin, y si se conoce, el tiempo probable de caducidad.
Manejar con cuidado las sustancias inflamables, corrosivas o txicas, como
el cido sulfrico, los perxidos orgnicos y los xidos de nitrgeno. Estos
ltimos se generan cuando el cido ntrico se pone en contacto con algunos
metales como el cobre o con materiales orgnicos como el algodn y el
papel.
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MICOLOGA
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MICOLOGA
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MICOLOGA
PRCTICA No. 1
MORFOLOGA DE LOS HONGOS
OBJETIVO
Al finalizar la prctica el alumno ser capaz de:
1.-Sembrar y teir hongos.
2.- Identificar las diferentes estructuras de un hongo.
INTRODUCCIN
Las micosis o enfermedades micticas son causadas por hongos. Estos
microorganismos relativamente grandes, parecidos a las plantas y que no
poseen clorofila comprenden las variedades generalmente llamadas Levaduras
y Mohos y un grupo numeroso llamado Fungi Imperfecti (hongos imperfectos).
La clasificacin de los hongos se basa principalmente en la morfologa de estos
microorganismos; cuando se desarrollan fuera del organismo se observa una
red de hilos ramificados llamados hifas que crecen formando una masa
enmaraada (micelio). Generalmente se encuentran esporas o corpsculos
reproductores.
MATERIAL
Muestra problema (hongos)
Agar de papa dextrosa
Hojas de bistur
Pinzas
Portaobjetos y cubreobjetos
Caja de petri con puente en forma de tringulo
PROCEDIMIENTO
1.- En una caja de petri con puente en forma de tringulo se le coloca el
portaobjetos, y en este mismo se deposita un cuadrito del agar de papa
dextrosa con el respectivo cubreobjetos.
2 Con un asa con punta en forma de L se toma una parte del hongo y se
deposita picando los cuatro lados del agar.
3.- Se incuba a 37C por 4 das.
4.- Se quita el agar que se encuentra en el portaobjetos y se adicionar una
gota de azul de metileno o azul de lactofenol y se tapa con el mismo
cubreobjetos.
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MICOLOGA
PRECAUCIN
Trabajar siempre con el mechero encendido.
CUESTIONARIO
1.- Cul es la diferencia entre un moho y una levadura?
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2.- A qu se llama dimorfismo de los hongos?
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3.- Describir las caractersticas morfolgicas de los hongos filamentosos.
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MICOLOGA
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5.- Nombrar y describir 2 tipos de esporas sexuales y 2 asexuales de los
hongos.
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6.- Hacer un dibujo lo ms exacto posible de tus hallazgos al microscpico.
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MICOLOGA
PRCTICA No 2.
DERMATOFITOS
OBJETIVOS:
Al finalizar la prctica el alumno ser capaz de:
1.-Identificar el desarrollo de los dermatofitos en el laboratorio, y que observe
las estructuras que les caracterizan.
INTRODUCCIN
El tipo de infeccin por hongos ms comn en el hombre es la dermatofitosis,
infeccin superficial de la epidermis y anexo epidrmicos queratinizados, pelo y
uas. Los agentes responsables de las mismas son microorganismos cuyas
numerosas variedades estn ntimamente relacionadas y se ha demostrado
que varios tienen una etapa sexual (y por tanto un estado perfecto).
La diferenciacin primaria que hay en los tres gneros importantes, son:
Trichophyton, Microsporum y Epidermophyton, es morfolgica, basada en el
carcter de los conidios y estructuras accesorias.
En medios adecuados estos microorganismos crecen lentamente, en forma de
colonias densas, cubiertas de hifas areas, lo que les da aspecto felpudo.
MATERIAL
Muestras de crecimiento de dermatofitos de piel, pelo o uas.
Agar
Mechero bunsen
Asa bacteriolgica
Pinzas de diseccin
Colorante azul de metileno
PROCEDIMIENTO
1.- Con abatelenguas o la punta de unas tijeras descame respectivamente
la piel o la ua del paciente y el producto de la descamacin se deja caer en el
medio de transporte o de cultivo.
2.- Incube a 370 C por 1-2 semanas, revisando peridicamente.
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MICOLOGA
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5.- Formas comunes de micosis superficiales son:
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6.- La tia cruris se manifiesta clnicamente por los siguientes signos y
sntomas.
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CONCLUSIONES.
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PRCTICA No. 3
MICROCULTIVO
OBJETIVO
Al finalizar la prctica el alumno ser capaz de:
1.- Identificar las diferentes estructuras de un hongo.
INTRODUCCIN
Las micosis o enfermedades micoticas son causadas por hongos. Estos
microorganismos relativamente grandes, parecidos a las plantas y que no
poseen clorofila comprenden las variedades generalmente llamadas Levaduras
y Mohos y un grupo numeroso llamado Fungi Imperfecti (hongos imperfectos).
La clasificacin de los hongos se basa principalmente en la morfologa de estos
microorganismos; cuando se desarrollan fuera del organismo se observa una
red de hilos ramificados llamados hifas que crecen formando una masa
enmaraada (micelio). Generalmente se encuentran esporas o corpsculos
reproductores.
MATERIAL
Muestra problema (hongos)
Agar de papa dextrosa
Hojas de bistur
Pinzas
Portaobjetos y cubreobjetos
Caja de petri con puente en forma de tringulo
PROCEDIMIENTO
1.- En la caja de petri con puente en forma de tringulo se le coloca el
portaobjetos, y en este mismo se deposita un cuadrito del agar de papa
dextrosa
con el respectivo cubreobjetos.
2.- Con una asa con punta en forma de L se toma una parte del hongo y se
deposita picando los cuatro lados del agar.
3.- Se incuba a 37 C por 4 das.
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PRECAUCION
Trabajar siempre con el mechero encendido.
Con cubrebocas doble y lentes de proteccin con pared lateral.
CUESTIONARIO
1.- Cul es la diferencia entre un moho y una levadura?
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2.- A qu se llama dimorfismo de los hongos?
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3.- Describir las caractersticas morfolgicas de los hongos filamentosos.
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4.- Describir las caractersticas morfolgicas de los hongos levaduriformes.
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5.- Nombrar y describir 2 tipos de esporas sexuales y 2 asexuales de los
hongos.
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6.- Hacer un dibujo lo ms exacto posible de tus hallazgos microscpico.
CONCLUSIONES
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PRCTICA No. 4
TUBO GERMINATIVO EN SUERO
OBJETIVO.
Al terminar la prctica el alumno ser capaz de:
1.- Identificar el desarrollo de un tubo germinativo de C. albicans comparando
la muestra con otras levaduras que no lo producen.
INTRODUCCIN
Esta tcnica es utilizada como prueba diferencial entre los gneros de
levaduras de Candidas y Candida albicans. Es una prueba de Diagnstico
comn en el Laboratorio de Anlisis Clnicos cuando a travs del examen en
fresco se observan levaduras y estas son recuperadas en un cultivo es una
prueba que debe de hacerse para finalizar el trabajo. Recordar que la Candida
albicans es considerada habitante saprofito de los humanos y se puede
encontrar en el agua alimentos y otros fomites sin embargo esta afirmacin
pierde su fuerza cuando C. albicans causa daos graves en los pacientes que
estn infectados, tales como dermatitis, infecciones balnicas, vaginales,
gastrointestinales, ticas y sistmicas. Los ms afectados como en el resto de
las micosis son pacientes inmuno-deprimidos, nios, ancianos, mujeres
embarazadas diabticos, etc.
MATERIAL
Cepas de C. albicans y otras levaduras crecidas en agar Biggy o Sabouraud.
Asas Bacteriolgicas
Tubos de ensaye con 1 ml de Suero Humano (mantenidos a temperatura de
bao Mara- 37 C)
Lugol o azul de algodn
Bao Mara
Mecheros
Portaobjetos y Cubreobjetos
Microscopio Elctrico
PROCEDIMIENTO
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DIBUJOS
CONCLUSIONES.
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PRCTICA No. 5
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DIBUJOS
CONCLUSIONES
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PRCTICA No. 6
EFECTO DE ANTIFNGICOS SOBRE LEVADURAS.
OBJETIVO
Al terminar la prctica el alumno ser capaz de:
1.- Efectuar un anlisis antimicolgico y explicar la utilidad de la misma en el
tratamiento de un paciente.
INTRODUCCIN
Una levadura es un microorganismo aislado de una muestra sembrada en agar
y puede presentar diferentes grados de sensibilidad a un antimictico o incluso
ser resistente al mismo. La resistencia a los antimicticos puede transferirse
por segmentos de DNA extracromosmicos
(como los plsmidos, por
ejemplo), lo que hace variar esa susceptibilidad. En el estudio antifngico se
busca determinar el grado de sensibilidad o resistencia de una levadura a uno
o un grupo de antimicticos a los que normalmente es sensible. Sin embargo
es preciso tener en mente que las condiciones bajo las que se efecta ste
examen no son las mismas que prevalecen en el organismo humano como son:
los antagonismos , el pH, los mecanismos defensivos por parte del husped, la
temperatura, etc.
MATERIAL
Cultivos de levaduras
Cajas petri con agar papa Dextrosa Saboraud o Biggy
Tubos con solucin salina isotnica
Mechero bunsen
Asas bacteriolgicas
Hisopos estriles
Pinzas de diseccin
Sensidiscos de varios antimicticos
PROCEDIMIENTO
1.- Trabajando siempre junto al mechero encendido, tom una o ms colonias
que sean idnticas, segn lo indique el instructor con una asa bacteriolgica en
punta, estril, y descargarlas en un tubo que contiene solucin salina isotnica.
2.- Sin hablar, y con mucho cuidado para no contaminar se humedece un
hisopo con la suspensin que se hizo en el tubo, se abre la caja petri que
contiene el medio de papa dextrosa Sabouraud y se descarga el contenido del
hisopo en toda la placa con un movimiento rpido y suave y sin perforar el
medio de cultivo.
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MICOLOGA
3.- Con pinzas de diseccin estriles o una asa bacteriolgica tambin estril
tome un sensidisco y colquelo en la caja sembrada, presionando ligeramente
para asegurar su contacto con la superficie; procure que los discos queden
separados unos de otros y de las paredes de las cajas de cultivo.
4.- Incube a 370 C por 24 horas y despus lea sus resultados.
PRECAUCIONES
Despus que se haya sembrado el inculo, no deje pasar ms de 15 minutos
para colocar los sensidiscos. Y una vez realizado esto colocar en la incubadora
a 28 C por dos a cuatro das dependiendo del tiempo de crecimiento de las
levaduras.
La interpretacin de sensibilidad es una zona de inhibicin alrededor del
sensidisco.
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