Actividades antioxidantes y antiproliferativos de pitaya roja Li-chen Wu , , Hsiu-Wen Hsu ,Yun-Chen Chen ,Chih-Chung Chiu ,Yu-En Lin ,Ja-un Ho Annie ,
DOI: 10.1016 / j.foodchem.2005.01.002 Obtener los derechos y contenidos
Resumen La pitaya rojo, rico en micronutrientes, ha generado recientemente una gran cantidad de inters de los consumidores, por lo tanto, este documento fue diseado para estudiar el contenido fenlico total, la actividad antioxidante y actividad antiproliferativa de pitaya roja en las clulas del melanoma y para determinar si es una valiosa fuente de antioxidantes y un agente anticancergeno. El contenido de fenoles totales de carne (42,4 0,04 mg de equivalentes de cido glico (GAE) / 100 g de carne de peso fresco) y la cscara (39.7 5.39 mg de GAE / 100 g de cscara de peso fresco) fueron similares. El contenido de flavonoides de la carne y la piel de no varan mucho (7,21 0,02 mg vs 8.33 0.11 mg de equivalentes de catequina / 100 g de materia de carne y cscara). Las concentraciones de betacianinas expresadas como betanina equivalentes por 100 g de carne fresca y la cscara fueron 10,3 0,22 y 13,8 0,85 mg, respectivamente. La actividad antioxidante, medida por el DPPH mtodo en el CE 50 , fue de 22,4 0,29 y 4,12 118 mu mol de vitamina C equivalentes / g de carne y extracto de piel seca; los valores de CE 50 , determinadas por el ABTS + enfoque, fueron 28,3 0,83 y 175 15.7 mmol de equivalentes Trolox capacidad antioxidante (TEAC) / g de carne y extracto de cscara seca, respectivamente. El estudio antiproliferativo sobre las clulas del melanoma B16F10 revel que la cscara (CE 50 25,0 g de la materia cscara) componente fue un inhibidor ms fuerte del crecimiento de clulas de cncer de melanoma B16F10 que la carne. Los resultados indicaron que la carne y la cscara son ricos en polifenoles y eran una buena fuente de antioxidantes. La cscara de pitaya roja cumpli su promesa de inhibir el crecimiento de las clulas del melanoma. Abreviaturas GAE , equivalentes cido glico ; TEAC , capacidad antioxidante equivalente Trolox ; CHD , enfermedad cardiaca coronaria ; MTT , 3 (4,5-dimetiltiazol-2-il) -2,5-difeniltetrazolio Palabras clave Compuestos fenlicos ; Pitaya roja ; Los polifenoles ; La actividad antioxidante ; DPPH , ABTS + ; Clulas de melanoma B16F10
1. Introduccin Las principales causas de muerte en los Estados Unidos son las enfermedades cardiovasculares y el cncer. Del mismo modo, en Taiwn, en torno al 27% de las muertes son por cncer y el 18% de las muertes son por enfermedades cardiovasculares y del corazn ( Departamento de Salud Web, 2004 ). Se estim porWillet (1994) que aproximadamente el 32% (rango de 20% -42%) de las muertes por cncer podra evitarse mediante modificacin de la dieta. Los estudios epidemiolgicos han sugerido fuertemente que la dieta juega un papel importante en la prevencin de las enfermedades crnicas ( Bauman, 2004 , Parillo y Riccardi, 2004 y Willet, 1995 ). Polifenoles, tioles, carotenoides, tocoferoles, y glucosinolatos se encuentran comnmente en frutas, verduras y granos, proporcionar efectos quimioprotectores para combatir el estrs oxidativo en el cuerpo y mantener el equilibrio entre oxidantes y antioxidantes para mejorar la salud humana ( Adom y Liu, 2002 , Dragsted et al ., 1993 , Jia et al., 1999 y Wolfe et al., 2003 ). Un desequilibrio causado por el exceso de oxidantes conduce al estrs oxidativo, lo que podra daar el ADN y la protena y un mayor riesgo de enfermedades degenerativas como el cncer ( Farombi et al., 2004 , Llpiz et al., 2004 , , Moller y Loft 2004 ,Sander et al., 2004 y van Meeteren et al., 2004 ). El consumo de frutas y verduras frescas, as como cereales, se ha asociado con un menor riesgo de enfermedad cardiaca coronaria (CHD) ( Bazzano et al., 2003 , Joshipura et al., 2001 , Polidori, 2003 y Srinath Reddy y Katan, 2004 ), accidente cerebrovascular ( Gillman et al., 1995 y Voko et al., 2003 ), los sntomas de la enfermedad pulmonar obstructiva crnica ( Fabricius y Lange, 2003 y Liu et al., 2004 ), y diferentes tipos de cncer, incluyendo cncer de mama y de ovario cncer ( Duncan, 2004 , Hakimuddin et al., 2004 , Khanzode et al., 2004 y Larsson et al., 2004 ) y cncer de colon ( Frydoonfar et al., 2003 y McCullough et al., 2003 ). Los compuestos polifenlicos, ampliamente distribuidos en las plantas superiores, se han encontrado que tienen potenciales beneficios para la salud que se cree que surgen principalmente de su actividad antioxidante ( Liu, 2003 ). Existe un considerable inters cientfico y pblico en el importante papel que los antioxidantes pueden desempear en la atencin de la salud, como por ejemplo, actuando como quimiopreventivo del cncer y agentes anti-inflamatorios y por la reduccin del riesgo de mortalidad cardiovascular ( Cos et al., 2004 y Siddiqui et al. , 2004 ). Numerosos estudios han informado de la antioxidante y actividades antiproliferativas de diferente fresco produce, tales como manzanas ( Wolfe et al., 2003 ), semillas de uva ( Calliste et al., 2001 y Chidambara Murthy et al., 2002 ), las fresas ( Meyers, Watkins , Pritts, y Liu, 2003 ), las verduras comunes ( Chu, Sun, Wu, y Liu, 2002 ), frutos de arndano ( Gunes, Liu, y Watkins, 2002 ), y las frambuesas ( Liu et al., 2002 ). Sin embargo, la actividad antioxidante de algunos alimentos de origen vegetal no ha sido bien estudiado. Por lo tanto, de inters la investigacin de sus caractersticas antirradicales es, principalmente para descubrir nuevas fuentes prometedoras de antioxidantes naturales, alimentos funcionales, y nutracuticos. Los frutos de Hylocereus cactus, conocida como pitaya roja o pitahaya, han llamado recientemente la atencin de los productores en todo el mundo, no slo por su color rojo-prpura y valor econmico como productos alimenticios, sino tambin por su actividad antioxidante de los contenidos betacianina (Wybraniec y Mizrahi, 2002 ). El Hylocereus gnero consiste en la escalada o epfitas cactus de Amrica tropical con angular tallos y en su mayora blancos, que florece de noche, flores fragantes. La pitaya, fruto de algunas cepas de esta familia de los cactus, que es nativa de las regiones de bosques tropicales de Mxico y Amrica Central y del Sur ( Mizrahi Nerd, y Nobel, 1997 ) y se menciona como una fruta azteca popular en documentos histricos, tiene un largo linaje en el hemisferio occidental. La piel est cubierta por brcteas, o "escalas" - de ah el nombre de la fruta de dragn. Ellos estn siendo cultivadas actualmente en el comercio en Taiwn, Nicaragua, Colombia, Vietnam, Israel, Australia y los EE.UU.. En cactus, los pigmentos de frutas ms importantes son los betacianinas y betaxantinas ( Wybraniec et al., 2001 ). Betalanas, compuestos por betacianina rojo-violeta y betaxantinas amarillas, son pigmentos solubles en agua que proporcionan los colores de las flores y los frutos. El conocido betacianina pigmentos de Hylocereus polyrhizus carne se betanina, phyllocactin (6'- O -malonylbetanin), y un betacianina, hylocerenin recientemente descubierta (de 5 O - [6'- O - (3 "hidroxilo-3" -metil- glutaril) -- D -glucopiranosido) ( Wybraniec y Mizrahi, 2002 y Wybraniec et al., 2001 ). Betacianina, con 5- O -glicsidos (betanina) o 6 O -glicsidos, se detecta comnmente en las plantas. Ms complicado-esterificacin de 5- O -glicsidos con cidos tales como hidrocinmico ferlico o p cidos -coumaric ( Strack, Steglich, y betalanas, 1993 ) y cido malnico ( Kobayashi et al., 2000 y Minale et al., 1996 tienen) tambin han estudiado. Se ha informado de que betalainas de Amaranthus ( Cai, Sun, y Corke, 2003 ) y las races de remolacha (Escribano, Pedreo, Garca-Carmona, y Muoz, 1998 ) demostraron actividad antirradical y antioxidante.Betanina, a partir de remolacha roja, inhibe eficazmente la peroxidacin lipdica y la descomposicin del hemo, lo que sugiere que estos pigmentos pueden proporcionar cierta proteccin contra la oxidacin trastornos relacionados con el estrs ( Kanner, Harel, y Granit, 2001 ). Polifenoles, por otro lado, juegan un papel importante en la actividad antioxidante ( Wu, Chen, Ho, y Yang, 2003 ). Ellos han demostrado evidentemente actividad antiproliferativa o citotoxicidad para las clulas humanas de cncer orales (Seeram, Adams, Hardy, y Heber, 2004 ), clulas de melanoma ( Rodrguez et al., 2002 ), y metstasis de pulmn inducida por clulas de melanoma B16F10 ( Menon, Kuttan, y Kuttan, 1995 ). Se han hecho esfuerzos para estudiar la qumica de betalanas en H. polyrhizus ( Stintzing FC et al, 2004. ,Wybraniec et al, 2001. y Wybraniec y Mizrahi, 2002 ); Sin embargo, hay poca informacin disponible sobre su contenido fenlico, actividad antioxidante, y la actividad antitumoral. Los objetivos de este estudio fueron evaluar la calidad nutricional de la carne roja componente pitaya y la cscara. Contenido fenlico total, capacidad antioxidante y efecto antiproliferativo sobre las clulas del melanoma B16F10 se cuantificaron y compararon con aquellas caractersticas de la betanina en relacin a la misma clula de cncer. Adems, tambin se pudo determinar si la cscara de pitaya roja, el producto de desecho de la fabricacin de jugos, podra ser utilizado como una alternativa potencial para diversas fuentes de nutrientes o antioxidantes para mejorar la salud humana. 2. Materiales y mtodos 2.1. Productos Qumicos Reactivo de Folin-Ciocalteu, nitrito de sodio, catequina, cido glico, Sephadex G-25, MTT (3 [4,5- dimetiltiazol-2-il] -2,5-difeniltetrazolio), y todos los dems productos qumicos y disolventes orgnicos se comprado a Sigma Chemical Co. (St. Louis, MO). LH-20 se obtuvo de Amersham Biosciences (Uppsala, Suecia). Papel de filtro Whatman No. 1 fue comprado de Fisher Scientific (Fair Lawn, Nueva York).Acetonitrilo de grado HPLC y cido actico procedan de Merck (Darmstadt, Alemania). Las clulas de melanoma B16F10 se obtuvieron de la Coleccin Americana de Cultivos Tipo (ATCC) (Rockville, MD). Suero bovino fetal (FBS) se adquiri de Gibco Life Technologies (Grand Island, NY), y el estndar betanina se obtuvo de TCI (Tokio, Japn). 2.2. Preparacin de la muestra Red pitaya, H. polyrhizus , utilizada en este estudio se obtuvo a nivel local a partir de cuatro porciones de frutas (Puli, Nantou, Taiwan), que se lavaron y se almacenan a -20 C antes del anlisis. La fruta se pel antes del anlisis. El contenido fenlico, de los diferentes componentes de pitaya rojo, se determin mediante la extraccin de 50 g de los componentes de carne y cscara con 200 g de solucin enfriada acetona 80% en un mezclador Waring durante 10 min ( Wolfe et al., 2003 ). La suspensin se filtr a travs de papel de filtro Whatman N 1 en un embudo Buchner bajo vaco. Los slidos se volvieron a extraer con 150 g de acetona al 80% y se homogeneizaron de nuevo por un adicional de 5 min antes de refiltrando.Despus, el filtrado se evapor usando un evaporador rotorary a 45 C hasta menos de 10% del volumen inicial se mantuvo. El extracto se sec por congelacin y se congelaron a -70 C antes del anlisis. 2.3. Determinacin del contenido total de fenlicos El contenido total de fenlicos de muestras de carne y piel de pitaya roja se determinaron usando un mtodo de Folin-Ciocalteu modificado ( Wolfe et al., 2003 ). Una parte alcuota de 125 l de una dilucin conocida del extracto se aadi al tubo de ensayo y se combin con 0,5 ml de reactivo de Folin-Ciocalteu. Los tubos se agitaron con vrtex durante 15 s y luego se dej reposar durante 6 min a 20 C. Acerca de 1,25 ml de solucin de carbonato sdico al 7%, entonces se aadi a los tubos de ensayo, y la mezcla se diluy con 3 ml con agua destilada, desionizada. Color desarrollado durante 90 min, y la absorbancia se midi a 760 nm usando el Hewlett Packard espectrofotmetro UV-Vis (Palo Alto, CA). La medicin se compara con una curva estndar de soluciones de cido glico preparados y se expresa como equivalentes de cido glico en miligramos. Determinaciones por triplicado se realizaron en cada muestra; datos que se muestran ms adelante representan las medias de tres mediciones. 2.4. Determinacin del contenido de flavonoides (ensayo de la vainillina-HCl) La cantidad de flavonoides (taninos condensados) se midi por el ensayo de la vainillina ( Price, van Scoyoc, y Butler, 1978 ). Alcuotas de un mililitro de extractos de cscara y carne fueron dispensadas en tubos de ensayo. Los tubos se incubaron en el bao de agua a 30 C. Se aadieron cinco mililitros del reactivo de vainillina (1% de vainillina en metanol) a intervalos de 1,0 min para un conjunto de muestras, y se aadieron 5,0 ml de la solucin de HCl 4% a intervalos de 1,0 min para el segundo conjunto de muestras.Despus de 20 min de incubacin, se extrajeron las muestras y la absorbancia a 500 nm se ley. El contenido de taninos condensados (flavonoide) se expres como equivalentes de catequina en miligramos.Determinaciones por triplicado se realizaron en cada muestra; datos que se muestran ms adelante representan las medias de tres mediciones. 2.5. La cuantificacin de betacianinas Red contenido de pigmento pitaya se midi de una manera similar a la descrita por Wybraniec y Mizrahi (Wybraniec y Mizrahi, 2002 ). El contenido betacianina de extractos secos, determinado por el mtodo espectrofotomtrico, se calcula y se expresa como betanina equivalentes (mg / 100 g de materiales frescos) por las siguientes frmulas: concentracin de betacianinas (mg / g de peso extractos secos) = A 538 ( MW)V (DF) 100 / LW . A 538 es la absorbancia a 538 nm ( max ); L (longitud del camino) = 1,0 cm; DF es el factor de dilucin; V es el volumen de la solucin de pigmento (ml); W es el peso pigmento seco (g). Para betanina, (coeficiente de extincin molar) = 65.000 y PM = 550. contenido de pigmento individuales fue expresado como el porcentaje de rea del pico determinado por HPLC. 2.6. Determinacin del contenido de antocianina Se midi el contenido de antocianina monomrica de componentes de carne pitaya y cscara roja utilizando un protocolo de diferencial de pH espectrofotomtrico ( Boyles y Wrolstad, 1993 ). Los extractos de cscara de pitaya y carne roja se mezclaron a fondo con cloruro de potasio 0,025 M (pH 1,0) en una dilucin conocida. La absorbancia de la mezcla se midi a 515 y 700 nm utilizando agua destilada a cero el espectrofotmetro. Los extractos de cscara de pitaya y carne roja se combinaron despus con 0,4 M de tampn de acetato de sodio (pH 4,5), y las absorbancias se midieron a las mismas longitudes de onda. La absorbancia de la muestra diluida ( A ) era como sigue: A = ( A 515 - A 700 ) pH 1,0 - ( A 515 - A 700 ) pH 4,5.El contenido de antocianina se calcul como el total de pigmento antocianina monomrica (mg / litro) = ( A MW 1000 DF) / ( 1), donde A es la absorbancia de la muestra diluida y DF es el factor de dilucin.MW y en esta frmula se corresponden con la antocianina predominante en la muestra. Dado que la composicin de la muestra era desconocido, se calcul el contenido de pigmentos como cianidina-3-glucsido, donde MW = 449,2 y = 26.900. 2.7. Determinacin cromatogrfica de betanina Betanina estndar, que contiene betanina y isobetanin, se obtuvo comercialmente y se prepar en un procedimiento de dos etapas antes del anlisis HPLC ( Wybraniec y Mizrahi, 2002 ). Brevemente, los extractos se separaron primero por filtracin en gel en una columna Sephadex G-25 (40 x 2,2 cm) pre-equilibrada con cido actico al 1%. Las fracciones de cido actico al 1%, eluyeron a un caudal de 1,0 ml / min, se recogieron y examinaron espectrofotomtricamente a 538 nm para la presencia de betanina. Las fracciones con absorbancia 538 nm se recogieron y se liofilizaron para una purificacin adicional. El residuo se volvi a disolver en agua y posteriormente se purific en una columna LH-20 (40 x 2,2 cm) con agua como eluyente. Las fracciones que mostraban 538 nm de absorbancia se recogieron y se liofilizaron para anlisis por HPLC. Un mtodo de cromatografa lquida de alto rendimiento fue empleado para analizar el contenido betanina de cscara y carne componentes de pitaya roja ( Wybraniec y Mizrahi, 2002 ). Un sistema Agilent 1100 de cromatografa de lquidos (Palo Alto, CA), equipado con un detector de matriz de fotodiodos y un Rheodyne (Cotati, CA) modelo 7125 con un inyector de bucle de muestra de 20 l, se utiliz, junto con un Agilent ChemStation para LC. Integracin de la seal final se realiz con la Agilent ChemStation para LC se ejecuta en un ordenador Pentium-4. Un Hypersil ODS (Supelco Inc., Bellefonte, PA), 5 m, la columna de ID 250 4,6 mm se utiliz para determinar el contenido de betanina, y el programa de elucin consisti en un 35 min de elucin isocrtica de 90% de disolvente A (0,5% acuosa de TFA en agua) con 10% de disolvente B (acetonitrilo) con un flujo de 0,5 ml / min. Para cada anlisis, 15 l de los extractos filtrados se inyect directamente en la columna cromatogrfica. Las identidades de los diferentes picos cromatogrficos fueron confirmadas por sus caractersticas espectrales visibles en comparacin con los estndares y tiempos de retencin. 2.8. DPPH la actividad de captacin de radicales Una alcuota de 0,1 ml del extracto de acetona preparada anteriormente se mezcl con 3,9 ml de un 80% etanlica 0,6 mM DPPHsolucin. Los tubos se agitaron con vrtex durante 15 s y se dejaron reposar durante 180 min, como se describe por Cai et al. (2003) , despus de lo cual se midi la absorbancia de la mezcla a 515 nm utilizando el Hewlett Packard espectrofotmetro UV- Vis (Palo Alto, CA). Los compuestos ms probados deben hacerse reaccionar completamente dentro de 180 min en esta condicin ( Cai et al., 2003 ) y el tiempo de reaccin para la vitamina C es de menos de 1 min debido a su rpida oxidacin. Etanol (80%) se utiliz como una solucin en blanco y DPPH solucin sin muestras de ensayo (3,9 ml de DPPH + 0,1 ml de etanol al 80%) sirvi como el control. Todas las pruebas se realizaron por triplicado. La actividad antioxidante de las muestras de ensayo se expres como (i) la concentracin efectiva media para la actividad de captacin de radicales (CE 50 ): fenoles totales (mg) de antioxidante (muestra de ensayo) necesarios para una disminucin del 50% en absorbancia de DPPH radicales, y (ii) la inhibicin (%) de DPPH= absorbancia ( A de control - A prueba ) x 100 / A de control . Una parcela de absorbancia de DPPHse hizo vs.concentration de antioxidante para establecer las curvas estndar (curvas de dosis-respuesta) y para calcular CE 50 . Una de control es la absorbancia del control (DPPHsolucin sin la muestra de ensayo), yuna prueba es la absorbancia de la muestra de ensayo (DPPHsolucin ms 0,1 ml de compuesto de ensayo 5 M). La vitamina C sirve como un estndar, y los resultados del ensayo se expresaron en relacin a la vitamina C equivalente. 2.9. ABTS + ensayo Para ABTS + generacin de la sal ABTS, 2,45 mM de persulfato de potasio (K 2 S 2 O 8 ) se hizo reaccionar con la sal 7 mM de ABTS en 0,01 M de solucin salina tamponada con fosfato, pH 7,4, durante 16 h a temperatura ambiente en la oscuridad. El ABTS resultante + catin radical se diluy con 0,01 M de solucin salina tamponada con fosfato, pH 7,4, para dar una absorbancia de alrededor de 0,70 a 734 nm. El patrn y los extractos de cscara pitaya roja y carne de muestra se diluyeron 100 X con el ABTS + solucin a un volumen total de 1 ml y se dej reaccionar durante 3 min ( Re et al., 1999 ). La absorbancia se midi espectrofotomtricamente a diferentes intervalos de tiempo. Control (sin un estndar o muestra) se utiliz como blanco y 990 l de PBS se aadieron a estas muestras de control en su lugar. Trolox, el -tocoferol soluble en agua (vitamina E) analgicos, sirvi como un estndar, y los resultados del ensayo se expresa en relacin con Trolox en trminos de TEAC (Trolox capacidad antioxidante equivalente). 2.10. Determinacin de la inhibicin de la proliferacin de clulas de melanoma B16F10 Los extractos de las muestras de carne y piel de pitaya roja se utilizaron para medir su capacidad para inhibir la proliferacin de clulas de melanoma B16F10 ( Nakano et al., 1998 ). Los cultivos celulares se expusieron a diversas concentraciones de los extractos durante un perodo de crecimiento de 48 h. La proliferacin celular se mide por la capacidad de clulas viables para reducir 3 (4,5-dimetiltiazol-2-il) -2,5-difeniltetrazolio (MTT) en formazn, cuya absorbancia puede ser analizado espectrofotomtricamente a 570 nm. Todas las mediciones se realizaron por triplicado. La absorbancia se midi usando el Hewlett Packard espectrofotmetro UV-Vis (Palo Alto, CA). La dosis efectiva media (CE 50 ) se determin y se expres como miligramos de carne pitaya roja y muestras de cscara SD. 2.11. El anlisis estadstico Los resultados se expresan como la media desviacin estndar de tres repeticiones. De Student t test fue utilizado para el anlisis estadstico de la diferencia observada. 3. Resultados y discusin 3.1. Contenido de compuestos fenlicos El contenido total de fenlicos de la carne y piel de la pitaya roja se midieron de acuerdo con el mtodo de Folin-Ciocalteu. El reactivo de Folin-Ciocalteu determina fenoles totales (y otras sustancias fcilmente oxidables), produciendo un color azul mediante la reduccin de aniones amarillo heteropolyphosphomolybdate-tungstato. Este mtodo proporciona una medida general de contenido fenlico, ya que no es completamente especfica para compuestos fenlicos y no todos los compuestos fenlicos presentan el mismo nivel de actividad en el ensayo. Los fenlicos se extrajeron de carne pitaya roja o la cscara con un 80% de acetona. El contenido total de fenlicos extrables fueron 42,4 0,04 y 39,7 5,39 mg de GAE / 100 g de carne y la cscara, respectivamente. Las cantidades de fenoles totales por cada 100 g de carne o pieles fueron similares, mientras que las cantidades de fenoles totales por gramo de extracto de carne y la cscara fueron 4,55 0,03 y 25,4 2,10 mg de GAE, respectivamente. Aunque el contenido fenlico total por gramo de extracto en la cscara fue de alrededor de seis veces ms que en la carne, el rendimiento de los extractos del mismo peso de las materias primas (9,91 y 1,56 g de 100 g de materias primas) disminuy las diferencias en total compuestos fenlicos. Es probable que algunos de los compuestos fenlicos no fueron co-extrados de carne, la cual bulked el extracto. Betacianinas, los pigmentos que se encuentran en Hylocereus cactus, tambin contribuyeron a los fenoles totales, debido a una estructura de fenol en la molcula. Las concentraciones de betacianinas, expresados como equivalentes de betanina en carne y la cscara, fueron 10,3 0,22 y 13,8 0,85 mg / 100 g de carne y la cscara, respectivamente. El cromatograma HPLC de betacianinas de carne de la fruta y la cscara despus de la purificacin se fij en 538 nm en la figura. 1 . Al menos cuatro tipos diferentes de betacianinas se separaron por el C 18 columna y detectados por el fotodiodo detector de matriz del sistema de HPLC.Mediante la comparacin con estndares obtenidos comercialmente betanina, picos 1 y 1 'se betanina y isobetanin con tiempos de retencin de 6,5 y 8,3 min, respectivamente. Era probable que el pico 2 es una contribucin de phyllocactin ( t R = 15.7 min) si se compara con los resultados de Wybraniec y Mizrahi (Wybraniec y Mizrahi, 2002 ), lo que represent el ms abundante clase de betacianina en la carne y la cscara (51% y 58%, respectivamente). El porcentaje de isobetanins (1,3%) en Peel fue menor que en la carne (4,4%).
Higo. 1. Cromatgrafos HPLC de betacianinas de carne de H. polyrhizus (a) y la cscara (b). Pico 1 representa betanina (tiempo de retencin: 6,5 min); Pico 1 'se isobetanin (tiempo de retencin: 8,3 min). Opciones Figura El contenido de flavonoides de carne y la cscara fueron 7,21 0,02 y 8,33 0,11 mg de equivalentes de catequina / 100 g de carne y la cscara, respectivamente. El contenido de flavonoides por gramo de extracto en la cscara eran aproximadamente cinco veces mayor que los de carne (5,33 0,31 frente a 0,77 0,02 mg equivalentes de catequina), que fue similar a los resultados de medir el contenido fenlico total. Sin embargo, no se detectaron antocianinas. El nivel no detectable de antocianinas en pitaya roja podra ser debido a la ausencia de antocianina monomrica en pitaya roja. El color rojo-violeta de pitaya roja podra ser atribuido a betacianinas, pero no a anthrocyanin. Betacianinas son una clase de pigmentos solubles en agua que proporcionan los colores en una amplia variedad de flores y frutas ( Strack, Vogt, y Schliemann, 2003 ).Ellos no se pueden encontrar en las plantas que contienen pigmentos de antocianina, y estructuralmente no estn relacionados. Poco se sabe sobre el papel de betacianina, y la ganancia y la prdida de antocianinas y betalainas durante la evolucin de plantas siguen siendo un misterio ( Clemente y Mabry, 1996 ). 3.2. Evaluacin de la actividad antioxidante De los varios mtodos para la medicin de la actividad antioxidante que podran haber sido utilizados, tales como DPPH ( Cai et al., 2003 ), TEAC ( Miller, Rice-Evans, Davies, Gopinathan, y Milner, 1993 ), TOSC (Winston, Regoli, Dugas, Fong, y Blanchard, 1998 ), ORAC ( Cao, Alessio, y Cutler, 1993 ), FRAP ( Pulido, Bravo, y Saura-Calixto, 2000 ), y TRAP ( Ghiselli, Serafini, Maiani, Azzini, y Ferroluzzi, 1995 ), el DPPH enfoque y ABTS + ensayo de captacin de radicales fueron escogidos para este estudio. El DPPH enfoque es simple y ampliamente aplicado para la medicin de la actividad antioxidante de los polifenoles y colorantes ( Cai et al., 2003 y Shi y Le Maguer, 2000 ). El ABTS + ensayo de captacin de radicales, que emplea una absorbancia especfica a una distancia de longitud de onda de la regin visible y requiere un tiempo de reaccin corto ( Lee, Kim, Lee, & Lee, 2003 ), puede ser utilizado tanto en sistemas de disolventes orgnicos y acuosos. Se sugiere que el ABTS + enfoque es mejor para la evaluacin de la actividad antioxidante de fitoqumicos fenlicos que el DPPH ensayo antioxidante con ( Awika, Rooney, Wu, Prior, y Cisneros-Zevallos, 2003 ). La relacin entre el contenido fenlico y la capacidad antioxidante de la carne y la cscara de pitaya se muestra en la fig. 2 . Patrones similares se encontraron en la actividad antioxidante medida por ABTS + ensayo. Las concentraciones eficaces (CE 50 ) determinado por la actividad de radicales DPPH de captacin para la carne y la cscara fueron 22,4 0,29 y 4,12 118 mu mol equivalentes de vitamina C / g de extracto seco, respectivamente, y los valores de CE 50 para el enfoque ABTS fueron 28,3 0,83 y 175 15.7 mmol TEAC / g de extracto seco, respectivamente. Extracto de piel fue un mejor antioxidante que la carne debido a su ligeramente mayor contenido de polifenoles. Se encontr que el aumento en el contenido fenlico de los dos extractos de carne y la cscara que se correlaciona linealmente con la capacidad antioxidante. En el DPPH ensayo, como los compuestos fenlicos totales aumentaron 0,7 a 3,5 mg de equivalentes de cido glico de carne y 0,12 a 0,6 mg equivalentes de cido glico de la cscara, el porcentaje de actividad de los radicales de captacin de ambos aument linealmente aproximadamente 4,8 veces ( R 2 = 0,99 ).
Higo. 2. La actividad antioxidante de Hylocereus cactus determinada por DPPH . (A) carne; (B) la cscara. Opciones Figura Los fenlicos tambin influyen en la medicin antioxidante-actividad. Interfieren con el proceso de oxidacin por reaccin con radicales libres, quelantes de metales catalticos, y barrido de oxgeno. El efecto de la carne y la cscara sobre la actividad antioxidante podra ser el resultado de los tipos de polifenoles que contenan. Un aumento en el nmero de grupos hidroxilo (-OH) u otros grupos donadores de hidrgeno ( NH, SH) en la estructura molecular condujo a una mayor actividad antioxidante ( Cai et al., 2003 ). Betanins contienen grupos imino y grupos hidroxilo y contribuiran actividad antioxidante, lo que podra explicar, en parte, que la cscara es un mejor antioxidante debido al mayor nivel de betanina en la cscara. 3.3. Efecto inhibidor de los extractos sobre la proliferacin de clulas de melanoma B16F10 Ensayo de MTT se utiliz para estudiar la actividad antiproliferativa de pitaya roja. MTT se reduce a un formazn prpura insoluble por deshidrogenasa mitocondrial. La actividad proliferativa celular se midi por comparacin de la formacin de color prpura. Las clulas muertas, por otro lado, no forman el formazn prpura debido a su falta de la enzima. El efecto de la carne pitaya roja y cscara en el crecimiento de las clulas B16F10 in vitro se muestra en la fig. 3 (a). Las clulas se cultivaron durante 48 h con varios niveles de extractos de carne o cscara. Las curvas muestran que el crecimiento de clulas cancerosas de melanoma se inhibi de una manera dependiente de la dosis. El valor de CE 50 de la actividad antiproliferativa del extracto de piel era 10,0 g de GAE (25,0 mg de materia cscara), mientras que la CE 50valor de la carne no puede ser calculado a partir de la curva de dosis-respuesta. La diferencia puede atribuirse a los diferentes tipos de polifenoles presentes en las muestras. La evidencia indica que los flavonoides hidroxilados sin el doble enlace C2-C3 no podan inhibir el crecimiento de lneas celulares de melanoma, tales como B16F10, mientras que la presencia de al menos tres grupos metoxilo adyacentes conferira un efecto antiproliferativo ms potente ( Rodrguez et al., 2002 ). Adems, los flavonoides, tales como miricetina, baicalena, y cido glico inhibieron significativamente el crecimiento de B16F10 despus de 72 h de exposicin. Se ha sugerido que la presencia de un doble enlace-C2 C3 y tres grupos hidroxilo adyacentes en la A-flavonoide o B-anillos confiere mayor actividad antiproliferativa a la flavonoide ( Martnez et al., 2003 ). Betanina tambin tendra una influencia en el efecto antiproliferativo. Como la fig. 3 (b) indica, con el aumento de la concentracin de betanina, se observ mayor efecto inhibitorio. Esto podra ser debido a los efectos estructurales moleculares similares a los observados en flavonoides.
Higo. 3. La inhibicin de la proliferacin de las clulas del melanoma B16F10 por los extractos fitoqumicos de Hylocereus cactus carne () y la cscara () (a) y betanina (b). El crecimiento de las clulas de los grupos tratados se estandarizaron con el grupo control sin tratar como A / A 0 (%), donde A es el valor de A 570 generado a una concentracin dada de extractos o betanina mediante el ensayo de MTT, y un 0 es del grupo control no tratado . Opciones Figura En resumen, se encontraron cantidades considerables de compuestos fenlicos en carne pitaya roja y cscara. Para nuestro conocimiento, esta es la primera vez que se han medido el contenido fenlico total y la actividad antioxidante de carne pitaya roja y la cscara. Nuestros resultados mostraron que, adems de las semillas de la uva, la cscara de pitaya roja, un producto de desecho no comestibles de fabricacin de jugo, podra ser otra buena fuente de antioxidantes y un agente antimelanoma. Residuos pitaya cscara debe ser considerado como un producto valioso y tiene potencial como un ingrediente de valor aadido econmico que pueden ayudar en la prevencin de enfermedades crnicas. Agradecimientos Los autores agradecen el apoyo financiero del Consejo Nacional de Ciencia de Taiwn, NSC el Programa Comn de Investigacin Taichung General de Veteranos de la Universidad Hospital Nacional Chi Nan-bajo 92-2113-M-260-012 y Grant TCVGH-NCNU-92-79- 06. Referencias 1. o Adom y Liu, 2002 o KK Adom, RH Liu o Actividad antioxidante de Granos o Journal of Agricultural and Food Chemistry, 50 (2002), pp. 6.182 a 6.187 o Ver Registro en Scopus | Texto completo a travs de CrossRef | Citando los artculos (486) 2. o Awika et al., 2003 o JM Awika, LW Rooney, X. Wu, RL Antes, L. Cisneros-Zevallos o Mtodos de deteccin para medir la actividad antioxidante de sorgo (sorgo bicolor) y productos de sorgo o Journal of Agricultural and Food Chemistry, 51 (2003), pp. 6.657 a 6662 o Ver Registro en Scopus | Texto completo a travs de CrossRef | Citando los artculos (279) 3. o Bauman, 2004 o AE Bauman o La actualizacin de la evidencia de que la actividad fsica es buena para la salud: una revisin epidemiolgica 2000-2003 o Diario de Ciencia y Medicina en el Deporte, 7 (2004), pp. 6-19 o Artculo | PDF (1132 K) | Ver Registro en Scopus | Citando los artculos (302) 4. o Bazzano et al., 2003 o LA Bazzano, MK Serdula, S. Liu o La ingesta de frutas y verduras y el riesgo de enfermedad cardiovascular o Informe actual aterosclerosis, 5 (2003), pp. 492-499 o Ver Registro en Scopus | Texto completo a travs de CrossRef | Citando los artculos (161) 5. o Boyles y Wrolstad, 1993 o MJ Boyles, RE Wrolstad o Composicin Anthrocyanin de jugo de frambuesa roja: influencia de cultivar, procesar y factores ambientales o Journal of Food Science, 58 (1993), pp. 1135-1141 o Ver Registro en Scopus | Texto completo a travs de CrossRef | Citando los artculos (2) 6. o Cai et al., 2003 o Y. Cai, M. Sun, H. Corke o La actividad antioxidante de betalanas de plantas de la Amaranthaceae o Journal of Agricultural and Food Chemistry, 51 (2003), pp. 2288-2294 o Ver Registro en Scopus | Texto completo a travs de CrossRef | Citando los artculos (183) 7. o Calliste et al., 2001 o CA Calliste, P. Trouillas, D.-P. Allais, A. Simon, JL Duroux o Actividades de barrido de radicales libres medidos por espn de electrones espectroscopia de resonancia y celulares b16 comportamientos antiproliferativos de siete plantas o Journal of Agricultural and Food Chemistry, 49 (2001), pp. 3321 hasta 3327 o Ver Registro en Scopus | Texto completo a travs de CrossRef | Citando los artculos (74) 8. o Cao et al., 1993 o G. Cao, HM Alessio, RG Cutler o Absorbancia ensayo de la capacidad de oxgeno radical de antioxidantes o Biologa de Radicales Libres y Medicina, 14 (1993), pp. 303-311 o Artculo | PDF (654 K) | Ver Registro en Scopus | Citando los artculos (810) 9. o Chidambara Murthy et al., 2002 o KN Chidambara Murthy, RP Singh, GK Jayaprakasha o Actividades antioxidantes de la uva Vitis vinifera Ectracts Orujo o Journal of Agricultural and Food Chemistry, 50 (2002), pp. 5909-5914 o Ver Registro en Scopus | Texto completo a travs de CrossRef | Citando los artculos (91) 10. o Chu et al., 2002 o Y. Chu, J. Sun, X. Wu, Liu RH o Actividades antioxidantes y antiproliferativos de verduras comunes o Journal of Agricultural and Food Chemistry, 50 (2002), pp. 6.910-6.916 o Ver Registro en Scopus | Texto completo a travs de CrossRef | Citando los artculos (288) 11. o Clemente y Mabry, 1996 o JS Clemente, TJ Mabry o Evolucin del pigmento en las Caryophyllales: una revisin sistemtica o Botanica Acta, 109 (1996), pp. 360-367 o Ver Registro en Scopus | Texto completo a travs de CrossRef | Citando los artculos (63) 12. o Cos et al., 2004 o P. Cos, T. De Bruyne, N. Hermans, S. Apers, DV Berghe, AJ Vlietinck o Las proantocianidinas en el cuidado de la salud: actual y nuevas tendencias o Qumica Medicinal actual, 11 (2004), pp. 1345-59 o Ver Registro en Scopus | Texto completo a travs de CrossRef | Citando los artculos (165) 13. o Departamento de Salud Web, 2004 o Departamento de Salud Web (Taiwn). <http://www.doh.gov.tw/statistic/data/ > (consultado junio de 2004). o 14. o Dragsted et al., 1993 o LO Dragsted, M. Strube, JC Larsen o Factores protectores contra el cncer en las frutas y verduras: fondo bioqumica y biolgica o Farmacologa y Toxicologa, 72 (1993), pp. 116-135 o Ver Registro en Scopus | Texto completo a travs de CrossRef | Citando los artculos (252) 15. o Duncan, 2004 o AM Duncan o El papel de la nutricin en la prevencin del cncer de mama o AACN Problemas clnicos, 15 (2004), pp. 119-135 o Ver Registro en Scopus | Texto completo a travs de CrossRef | Citando los artculos (22) 16. o Escribano et al., 1998 o J. Escribano, MA Pedreo, F. Garca-Carmona, R. Muoz o Caracterizacin de la actividad antirradical de betalanas de Beta vulgaris L. races o Anlisis fitoqumico, 9 (1998), pp. 124-127 o Ver Registro en Scopus | Texto completo a travs de CrossRef | Citando los artculos (133) 17. o Fabricius y Lange, 2003 o P. Fabricio, P. Lange o Dieta y cncer de pulmn o Archivos Monaldi de la enfermedad en el pecho, 59 (2003), pp. 207-211 o Ver Registro en Scopus | Citando artculos (6) 18. o Farombi et al., 2004 o EO Farombi, M. Hansen, G. Ravn-Haren, P. Moller, LO Dragsted o Comnmente consumen y producen de forma natural sustancias dietticas afectan a los biomarcadores de estrs oxidativo y el dao del ADN en ratas sanas o Food and Chemical Toxicology, 42 (2004), pp. 1315-1322 o Artculo | PDF (298 K) | Ver Registro en Scopus | Citando los artculos (29) 19. o Frydoonfar et al., 2003 o HR Frydoonfar, DR McGrath, Spigelman AD o El efecto variable sobre la proliferacin de una lnea celular de cncer de colon por el flavonoide naringenina ctricos o Enfermedad colorrectal, 5 (2003), pp. 149-152 o Ver Registro en Scopus | Texto completo a travs de CrossRef | Citando los artculos (37) 20. o Gillman et al., 1995 o MW Gillman, LA Cupples, D. Gagnon, BM Posner, RC Ellison, WP Castelli o Un efecto protector de frutas y verduras en el desarrollo de ictus en los hombres o Revista de la Asociacin Mdica de Estados Unidos, 273 (1995), pp. 1113-1117 o Ver Registro en Scopus | Texto completo a travs de CrossRef | Citando los artculos (345) 1. o Ghiselli et al., 1995 o A. Ghiselli, M. Serafini, G. Maiani, E. Azzini, A. Ferroluzzi o Un mtodo basado en la fluorescencia para la medicin de la capacidad total de plasma anti- oxidante o Biologa de Radicales Libres y Medicina, 18 (1995), pp. 29-36 o Artculo | PDF (663 K) | Ver Registro en Scopus | Citando los artculos (298) 2. o Gunes et al., 2002 o G. Gunes, RH Liu, CB Watkins o Efectos de atmsfera controlada en la calidad postcosecha y la actividad antioxidante de los frutos de arndano o Journal of Agricultural and Food Chemistry, 50 (2002), pp. 5932 hasta 5938 o Ver Registro en Scopus | Texto completo a travs de CrossRef | Citando los artculos (27) 3. o Hakimuddin et al., 2004 o F. Hakimuddin, G. Paliyath, K. Meckling o Citotoxicidad selectiva de un vino de uva fraccin flavonoide roja contra las clulas MCF-7 o Breast Cancer Research y tratamiento, 85 (2004), pp. 65-79 o Ver Registro en Scopus | Texto completo a travs de CrossRef | Citando los artculos (71) 4. o Jia et al., 1999 o Z. Jia, M. Tang, J. Wu o La determinacin del contenido de flavonoides en la mora y sus efectos eliminadores de radicales superxido o Food Chemistry, 64 (1999), pp. 555-559 o 5. o Joshipura et al., 2001 o KJ Joshipura, FB Hu, JE Manson, MJ Stampfer, EB Rimm, D. Spiegelman, et al. o El efecto de la ingesta de frutas y vegetales en riesgo de enfermedad cardiaca coronaria o Anales de Medicina Interna, 134 (2001), pp. 1106-1114 o Ver Registro en Scopus | Texto completo a travs de CrossRef | Citando los artculos (731) 6. o Kanner et al., 2001 o K. Kanner, S. Harel, R. Granito o Betalanas - Una nueva clase de antioxidantes dietticos cationizados o Journal of Agricultural and Food Chemistry, 49 (2001), pp. 5178-5185 o 7. o Khanzode et al., 2004 o SS Khanzode, MG Muddeshwar, SD Khanzode, GN Dakhale o Enzimas antioxidantes y la peroxidacin lipdica en diferentes etapas de cncer de mama o Investigacin de Radicales Libres, 38 (2004), pp. 81-85 o Ver Registro en Scopus | Texto completo a travs de CrossRef | Citando los artculos (61) 8. o Kobayashi et al., 2000 o N. Kobayashi, J. Schmidt, M. Nimtz, V. Wray, W. Schliemann o Betalanas de cactus de Navidad o Fitoqumica, 54 (2000), pp. 419-426 o Artculo | PDF (363 K) | Ver Registro en Scopus | Citando los artculos (30) 9. o Larsson et al., 2004 o SC Larsson, L. Holmberg, A. Wolk o Consumo de frutas y vegetales en relacin con la incidencia de cncer de ovario: el sueco Mamografa Cohorte o British Journal of Cancer, 90 (2004), pp. 2167-2170 o Ver Registro en Scopus | Citando los artculos (23) 10. o Lee et al., 2003 o KW Lee, Kim YJ, HJ Lee, Lee CY o Cocoa tiene fitoqumicos fenlicos ms y una mayor capacidad antioxidante que el t y el vino tinto o Journal of Agricultural and Food Chemistry, 51 (2003), pp. 7.292-7295 o Ver Registro en Scopus | Texto completo a travs de CrossRef | Citando los artculos (279) 11. o Liu et al., 2002 o M. Liu, XQ Li, C. Weber, CY Lee, J. Brown, RH Liu o Actividades antioxidantes y antiproliferativos de frambuesas o Journal of Agricultural and Food Chemistry, 50 (2002), pp. 2926-2930 o Ver Registro en Scopus | Texto completo a travs de CrossRef | Citando los artculos (240) 12. o Liu, 2003 o RH Liu o Beneficios para la salud de las frutas y verduras son a partir de combinaciones de aditivos y sinrgicos de los fitoqumicos o American Journal of Clinical Nutrition, 78 (2003), pp. 517S-520S o 13. o Liu et al., 2004 o Y. Liu, T. Sobue, T. Otani, S. Tsugane o Hortalizas, el consumo de frutas y el riesgo de cncer de pulmn entre los hombres y las mujeres japonesas de mediana edad: estudio JPHC o Causas y Control del Cncer, 15 (2004), pp. 349-357 o Ver Registro en Scopus | Texto completo a travs de CrossRef | Citando los artculos (26) 14. o Llpiz et al., 2004 o N. Llpiz, F. Puiggrs, E. Cspedes, L. Arola, A. Ardevol, C. Blade, MJ Salvado o Efecto antigenotxicas de extracto de uva procyanidin semilla en clulas FAO present al estrs oxidativo o Journal of Agricultural and Food Chemistry, 52 (2004), pp. 1083-1087 o Ver Registro en Scopus | Texto completo a travs de CrossRef | Citando los artculos (45) 15. o Martnez et al., 2003 o C. Martnez, J. Yez, V. Vicente, M. Alcaraz, O. Benavente-Garca, J. Castillo, J. Lorente, JA Lozano o Efectos de varios flavonoides polihidroxilados sobre el crecimiento de melanoma B16F10 y lneas celulares Melan-A melanocitos: influencia del estado de oxidacin secuencial de la cadena de flavonoide o Melanoma Research, 13 (2003), pp. 3-9 o Ver Registro en Scopus | Texto completo a travs de CrossRef | Citando los artculos (20) 16. o Menon et al., 1995 o LG Menon, R. Kuttan, G. Kuttan o La inhibicin de la metstasis de pulmn en ratones inducida por clulas de melanoma B16F10 por los compuestos polifenlicos o Cancer Letters, 95 (1995), pp. 221-225 o Artculo | PDF (394 K) | Ver Registro en Scopus | Citando los artculos (138) 17. o Meyers et al., 2003 o KJ Meyers, CB Watkins, MP Pritts, RH Liu o Actividades antioxidantes y antiproliferativos de fresas o Journal of Agricultural and Food Chemistry, 51 (2003), pp. 6.887-6.892 o Ver Registro en Scopus | Texto completo a travs de CrossRef | Citando los artculos (205) 18. o McCullough et al., 2003 o ML McCullough, AS Robertson, A. Chao, EJ Jacobs, MJ Stampfer, DR Jacobs, WR Diver, EE Calle, MJ Thun o Un estudio prospectivo de granos enteros, frutas, verduras y el riesgo de cncer de colon o Causas y Control del Cncer, 14 (2003), pp. 959-970 o Ver Registro en Scopus | Texto completo a travs de CrossRef | Citando los artculos (92) 19. o Miller et al., 1993 o NJ Miller, CA Arroz-Evans, HV Davies, V. Gopinathan, A. Milner o Un nuevo mtodo para medir la capacidad antioxidante y su aplicacin a la supervisin del estado antioxidante en los recin nacidos prematuros o Clininal Science, 84 (1993), pp. 407-412 o Ver Registro en Scopus | Citando artculos (1565) 20. o Minale et al., 1996 o L. Minale, M. Piattelli, S. De Stefano, RA Nicolaus o Pigmentos de Centrospermae-VI. Betacianinas acilados o Fitoqumica, 5 (1996), pp. 1037-52 o 1. o Mizrahi et al., 1997 o Y. Mizrahi, A. Nerd, PS Nobel o Cacti como cultivos o Horticultural Reviews, 18 (1997), pp. 291-320 o 2. o Moller y Loft, 2004 o P. Moller, S. Loft o Las intervenciones con antioxidantes y nutrientes en relacin con el dao oxidativo del ADN y la reparacin o Mutation Research, 551 (2004), pp. 79-89 o Artculo | PDF (115 K) | Ver Registro en Scopus | Citando los artculos (89) 3. o Nakano et al., 1998 o Y. Nakano, H. Matsunaga, T. Saita, M. Mori, M. Katano, H. Okabe o Constituyentes antiproliferativos en plantas Umbelliferae II. La deteccin de poliacetilenos en algunas plantas umbelferas, y el aislamiento de panaxynol y falcarindiol de la raz de Heracleum Moellendorffii o Biolgica y Pharmaceutical Bulletin, 21 (1998), pp. 257-261 o Ver Registro en Scopus | Texto completo a travs de CrossRef | Citando los artculos (60) 4. o Parillo y Riccardi, 2004 o M. Parillo, G. Riccardi o Composicin de la dieta y el riesgo de diabetes tipo 2: epidemiolgica y evidencia clnica o British Journal of Nutrition, 92 (2004), pp. 7-19 o Ver Registro en Scopus | Texto completo a travs de CrossRef | Citando los artculos (90) 5. o Polidori, 2003 o MC Polidori o Micronutrientes antioxidantes en la prevencin de enfermedades relacionadas con la edad o Journal of Postgraduate Medicine, 49 (2003), pp. 229-235 o Ver Registro en Scopus | Citando los artculos (37) 6. o Price et al., 1978 o ML Precio, S. van Scoyoc, LG mayordomo o Una evaluacin crtica de la reaccin de la vainillina como un ensayo para el tanino en grano de sorgo o Journal of Agricultural and Food Chemistry, 26 (1978), pp. 1214-1218 o Ver Registro en Scopus | Texto completo a travs de CrossRef | Citando los artculos (548) 7. o Pulido et al., 2000 o R. Pulido, L. Bravo, F. Saura-Calixto o La actividad antioxidante de los polifenoles de la dieta tal como se determina por un ensayo de reduccin de frrico modificado de potencia / antioxidante o Journal of Agricultural and Food Chemistry, 48 (2000), pp. 3396-3402 o Ver Registro en Scopus | Texto completo a travs de CrossRef | Citando los artculos (602) 8. o Re et al., 1999 o R. Re, NP Pellegrini, A. Proteggente, A. Pannala, M. Yang, C. Rice-Evans o La actividad antioxidante aplicacin de un ensayo de decoloracin mejorada catin radical ABTS o Biologa de Radicales Libres y Medicina, 26 (1999), pp. 1231-1237 o Artculo | PDF (158 K) | Ver Registro en Scopus | Citando artculos (4698) 9. o Rodrguez et al., 2002 o J. Rodrguez, J. Yez, V. Vicente, M. Alcaraz, O. Benavente-Garca, J. Castillo, J. Lorente, JA Lozano o Efectos de varios flavonoides sobre el crecimiento de B16F10-1 y SK-MEL lneas celulares de melanoma: relacin entre la estructura y la actividad o Melanoma Research, 12 (2002), pp. 99-107 o Ver Registro en Scopus | Texto completo a travs de CrossRef | Citando los artculos (49) 10. o Sander et al., 2004 o CS Sander, H. Chang, F. Hamm, P. Elsner, JJ Thiele o Papel del estrs oxidativo y la red de antioxidantes en la carcinognesis cutnea o International Journal of Dermatology, 43 (2004), pp. 326-335 o Ver Registro en Scopus | Texto completo a travs de CrossRef | Citando los artculos (236) 11. o Seeram et al., 2004 o NP Seeram, LS Adams, ML Hardy, D. Heber o Extracto de arndano total frente a sus componentes fitoqumicos: efectos antiproliferativos y sinrgicos contra lneas de clulas tumorales humanas o Journal of Agricultural and Food Chemistry, 52 (2004), pp. 2512-2517 o Ver Registro en Scopus | Texto completo a travs de CrossRef | Citando los artculos (189) 12. o Shi y Le Maguer, 2000 o J. Shi, M. Le Maguer o Licopeno en los tomates: propiedades qumicas y fsicas afectadas por la elaboracin de alimentos o Critical Reviews in Food Science and Nutrition, 40 (2000), pp. 1-42 o Ver Registro en Scopus | Texto completo a travs de CrossRef | Citando los artculos (276) 13. o Siddiqui et al., 2004 o IA Siddiqui, F. Afaq, VM Adhami, N. Ahmad, H. Mukhtar o Los antioxidantes de la bebida de t en la promocin de la salud humana o Antioxidacin y Redox Signalling, 6 (2004), pp. 571-582 o Ver Registro en Scopus | Texto completo a travs de CrossRef | Citando los artculos (72) 14. o Srinath Reddy y Katan, 2004 o K. Srinath Reddy, MB Katan o Dieta, nutricin y prevencin de la hipertensin y enfermedades cardiovasculares o Nutricin en Salud Pblica, 7 (2004), pp. 167-186 o 15. o Stintzing FC et al., 2004 o FC Stintzing, J. Conrad, I. Klaiber, U. Beifuss, R. Carle o Investigaciones estructurales sobre pigmentos betacianina por RMN LC y espectroscopa de RMN 2D o Fitoqumica, 65 (2004), pp. 415-422 o Artculo | PDF (290 K) | Ver Registro en Scopus | Citando los artculos (50) 16. o Strack et al., 2003 o D. Strack, T. Vogt, W. Schliemann o Los recientes avances en la investigacin betalain o Fitoqumica, 62 (2003), pp. 247-269 o Artculo | PDF (1318 K) | Ver Registro en Scopus | Citando los artculos (194) 17. o Strack et al., 1993 o D. Strack, W. Steglich, Wray, V. Betalanas o PG Watermann (Ed.), Mtodos en Bioqumica Vegetal, vol. 8Academic Press, Londres, Reino Unido (1993), pp. 421-450 o 18. o van Meeteren et al., 2004 o ME van Meeteren, JJ Hendriks, CD Dijkstra, EA van Tol o Compuestos dietticos prevenir el dao oxidativo y la produccin de xido ntrico por las clulas implicadas en la enfermedad desmielinizante o Biochemical Pharmacology, 67 (2004), pp. 967-975 o Artculo | PDF (249 K) | Ver Registro en Scopus | Citando los artculos (38) 19. o Voko et al., 2003 o Z. Voko, M. Hollander, A. Hofman, PJ Koudstaal, MM Breteler o Los antioxidantes dietticos y el riesgo de accidente cerebrovascular isqumico: el Estudio Rotterdam o Neurology, 61 (2003), pp. 1273-75 o Ver Registro en Scopus | Texto completo a travs de CrossRef | Citando los artculos (51) 20. o Willet, 1994 o WC Willet o Dieta y salud: qu debemos comer o Science, 254 (1994), pp. 532-537 o 1. o Willet, 1995 o WC Willet o Dieta, Nutricin y cncer evitable o Environmental Health Perspectives, 103 (1995), pp. 165-170 o 2. o Winston et al., 1998 o GW Winston, F. Regoli, AJ Dugas, JH Fong, KA Blanchard o Un ensayo rpido de cromatografa de gases para determinar la capacidad de captacin de oxiradical de antioxidantes y fluidos biolgicos o Biologa de Radicales Libres y Medicina, 24 (1998), pp. 480-493 o Artculo | PDF (529 K) | Ver Registro en Scopus | Citando los artculos (235) 3. o Wolfe et al., 2003 o K. Wolfe, X. Wu, Liu RH o Actividad antioxidante de cscaras de manzana o Journal of Agricultural and Food Chemistry, 51 (2003), pp. 609-614 o Ver Registro en Scopus | Texto completo a travs de CrossRef | Citando los artculos (499) 4. o Wu et al., 2003 o LC Wu, YC Chen, JA Ho, CS Yang o Efecto inhibidor de koji rojo extrae en tirosinasa de champin o Journal of Agricultural and Food Chemistry, 51 (2003), pp. 4240 hasta 4.246 o Ver Registro en Scopus | Texto completo a travs de CrossRef | Citando los artculos (23) 5. o Wybraniec et al., 2001 o S. Wybraniec, I. Platzner, S. Geresh, HE Gottlieb, M. Haimberg, M. Mogilnitzki, et al. o Betacianinas de cactus vid Hylocereus polyhizus o Fitoqumica, 58 (2001), pp. 1209-1212 o Artculo | PDF (140 K) | Ver Registro en Scopus | Citando los artculos (70) 6. o Wybraniec y Mizrahi, 2002 o S. Wybraniec, Y. Mizrahi o Carne de la fruta betacianina pigmentos en Hylocereus cactus o Journal of Agricultural and Food Chemistry, 50 (2002), pp. Desde 6086 hasta 6089 o Ver Registro en Scopus | Texto completo a travs de CrossRef | Citando los artculos (61) Autores correspondientes. Tel .: +886 49 2910960; fax: +886 49 291 7956. Copyright 2005 Elsevier Ltd. Todos los derechos reservados