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Fisiologa Animal Aplicada PRCTICAS 1 y 2

Influencia de la salinidad sobre la eclosin de Artemia
Introduccin
Artemia sp. es un crustceo branquipodo utilizado en acuariofilia como alimento
vivo para la cra de peces tropicales. Es muy utilizado asimismo en ecofisiologa debido a
su naturaleza eurihalina. Sin embargo, a pesar de ser capaz de adaptarse a diversos
ambientes salinos, la eclosin de los nauplios es relativamente sensible a la salinidad del
medio.
En esta prctica vamos a evaluar el efecto de distintas salinidades sobre la
eficiencia de eclosin de huevos desencapsulados de Artemia obtenidos a partir de un
proveedor comercial. Estudiaremos la medida de la carga osmtica de una solucin por
osmometra, e incorporaremos una cantidad similar de huevos a una serie de cmaras de
eclosin, mantenidas en las mismas condiciones ambientales, a excepcin de la
salinidad. Transcurridas 24 horas, evaluaremos el porcentaje de eclosin de larvas en las
distintas condiciones.
Preparacin de soluciones
Se usarn concentraciones de cloruro de sodio variables entre 0,1 y 1 M.
Partiendo de 500 ml de solucin 1 M de NaCl (58,5 g/1000 ml), efectuar las diluciones
oportunas para conseguir 20 ml de cada una de las siguientes concentraciones: 1 M, 0,75
M, 0,5 M, 0,25 M y 0,1 M. Cada grupo prepara 20 ml y se junta lo de dos grupos para
cada cmara de eclosin (40 ml).
Medicion de la salinidad: Osmometra
La osmolalidad es una medida del nmero total de partculas presente en una
solucin. Los puntos de fusin y ebullicin resultan afectados por la concentracin
osmtica. La medicin de la osmolalidad de una solucin se realiza habitualmente
utilizando el descenso crioscpico provocado por la presencia de los solutos. En esencia,
la muestra cuya osmolalidad se va a determinar sufre un rpido superenfriamiento y el
instrumento registra el calor de fusin liberado tras la induccin de la congelacin, que es
proporcional a la osmolalidad. Las unidades de la osmolalidad son miliosmoles por
kilogramo de disolvente.
Se determinar la osmolalidad de las soluciones de NaCl empleadas.
Preparacin de cmaras de eclosin
Utilizaremos tubos Falcon como cmaras de eclosin. En cada uno de ellos
incluiremos 40 ml de solucin y los mantendremos a 28 C en un bao termostatizado. Es
importante asegurar a) una aireacin constante, para lo cual se utilizarn una serie de
tubos conectados a una bomba de aire, y b) una iluminacin constante, para lo cual se
mantendr una lmpara encendida cerca del conjunto.
Incluiremos una cantidad de 50 mg de huevos de Artemia en cada cmara de eclosin.
Dejaremos transcurrir al menos 24 h antes de observar los resultados.
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Resultados
Una vez transcurrido el tiempo de incubacin, procederemos a efectuar el recuento
de nauplios eclosionados.
Mientras an se estn aireando las cmaras, extraeremos una muestra de 1 ml de
cada cmara con ayuda de una pipeta de 5 ml, y depositaremos exactamente 1 ml sobre
un papel de filtro al efecto, procurando que el lquido quede homogneamente distribuido.
Los nauplios y huevos quedarn as fijos al papel para posibilitar su recuento.
El recuento se realiza colocando el filtro sobre una lupa, sobre la que previamente
se ha dispuesto un acetato provisto de un retculo para ayudar en el proceso.
Se repite el proceso con tres muestras de 1 ml para cada cmara de incubacin, y
el resultado final ser la media de cada muestra. Conocido as el nmero de nauplios por
ml, nos queda conocer el nmero de nauplios en la cmara de incubacin, dato que
obtendremos multiplicando aqul por el volumen total de la cmara de incubacin. Y
puesto que conocemos la cantidad de huevos en cada cmara, podemos estimar el
nmero de nauplios por gramo de material original incorporado a cada cmara.
Finalmente, conocida la cantidad de huevos por gramo (aprox. 300.000) en dicho
material, podremos estimar el rendimiento de la eclosin. Anotaremos los datos en la
tabla siguiente:

Cmara
n
Salinidad
mM
NaCl
Osmolalida
d
mOsm/kg
Nauplio
s
/ml (1)
Eclosin
% (1)
Nauplio
s
/ml (2)
Eclosin
% (2)
Nauplios/m
l (3)
Eclosin
% (3)
Nauplios
/ml
(media)
Eclosin
%
(media)
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10

Cuestiones
a) Cul es la salinidad que origina un mayor grado de eclosin?


b) Cules son los porcentajes relativos de eclosin para el resto de salinidades?


c) Explicar las posibles causas de las diferencias observadas en el rendimiento de
eclosin.


d) Qu factores, adems de la salinidad, cabra suponer que influyen en el grado de
eclosin?