TECNOLGICO DE ESTUDIOS SUPERIORES DE ECATEPEC

DIVISIN DE INGENIERA QUMICA Y BIOQUMICA

ANLISIS DE DATOS EXPRMENTALES.
POFRA. YANIN GABRIELA SANDOVAL GOMZ.
GRUPO: 4351

PRCTICA DE LABORATORIO No. 2
ESPECTROFOTOMETRA DETERMINACINDE HIERRO.

EQUIPO No. 2
ESTRADA ROCHA VERONICA.
FLORES PREZ DANIELA.
GRANADOS RODRIGUEZ NORA ALEJANDRA.
HUEZO SANCHEZ CAROLINA IVETTE.
VARGAS CASTELLANOS PAULTTE.






OBJETIVO
Determinar la concentracin de hierro por medio de un mtodo
espectrofotomtrico (complejo hierro- Orto fenantrolina).
FUNDAMENTO TEORICO.
Uno de los primeros anlisis colorimtricos fue el mtodo Nessler para el
amoniaco en 1856, Nessler observ que cuando se aada una solucin alcalina
de HgI
2
a una disolucin diluda de amoniaco, se produca un coloide amarillo o
pardo rojizo, dependiendo de la concentracin de amoniaco. Para determinar la
concentracin, se utiliz la comparacin del color de la muestra con la de una
serie de patrones, los colores se comparaban mirando los tubos que los contenan
desde arriba, y estos estaban colocados en una gradilla con base iluminada. La
colorimetra en que una muestra absorbe luz visible, es un ejemplo del anlisis
espectrofotomtrico.
A finales del siglo XIX la espectrofotometa se limitaba a la absorcin, emisin y
dispersin de la radiacin electromagntica visible, ultravioleta e infrarroja.
Durante el siglo XX, el mtodo se fue ampliando para incluir otras formas de
radiacin electromagntica como los rayos X, las microondas y las ondas de radio,
as como partculas de energa tales como los electrones y los iones.
Espectrofotemetra se refiere al uso de luz para medir las concentraciones de
sustancias qumicas; cuando una molcula absorbe un fotn para de un estado
basal o fundamental, a un estado excitado (la energa de la molcula se
incrementa), as, la intensidad de los fotones que pasan a travs de una muestra
que contienen el analito, se atena debido a la absorcin, la medida de esta
atenuacin, que recibe el nombre de absorbancia, es la que sirve de seal.
CURVA DE CALIBRACIN
Una curva de calibracin es la representacin grfica de una seal que se mide en
funcin de la concentracin de un analito. La calibracin incluye la seleccin de un
modelo para estimar los parmetros que permitan determinar la linealidad de esa
curva. y, en consecuencia, la capacidad de un mtodo analtico para obtener
resultados que sean directamente proporcionales a la concentracin de un
compuesto en una muestra, dentro de un determinado intervalo de trabajo. En el
procedimiento se compara una propiedad del analito con la de estndares de
concentracin conocida del mismo analito (o de algn otro con propiedades muy
similares a ste). Para realizar la comparacin se requiere utilizar mtodos y
equipos apropiados para la resolucin del problema de acuerdo al analito que se
desee determinar.
Determinacin de hierro por medio de la formacin de un complejo con Orto-
fenantrolina.
La ortofenantrolina reacciona con el Fe2+,originando un complejo de color rojo caracterstico
(ferrona) que absorbe notablemente en las regiones del espectro visible de alrededor
de 505 nm. El Fe3+ no presenta absorcin a esa longitud de onda y debe ser
reducido a Fe 2+ mediante una gente reductor apropiado, como la hidroxilamina, (en
forma de clorato para incrementar su solubilidad). (Boumans, 1997)

La reduccin cuantitativa de Fe3+ a Fe2+ ocurre en pocos minutos en un medio cido (pH
3-4) de acuerdo a la siguiente ecuacin:




Despus de la reduccin del Fe 3+ a Fe2+, se da la formacin de un complejo con
La adicin de ortofenantrolina. En un medio acido la ortofenantrolina se encuentra en su
forma protonada como ion 1,10-fenantrolin (FenH +).

La reaccin de complejacin puede ser descrita por la siguiente ecuacin: (La
Estructura qumica del complejo se muestra en la figura 2.













Funcin de la hidroxilamina en el mtodo de determinacin de hierro por
formacin de complejos con O-fenantrolina.

Antes de que se forme el complejo de hierro (II) colorido, todos los Fe
3+
presentes
se deben reducir a Fe
2+
. Esta reduccin se alcanza usando un exceso de
clorhidrato de hidroxilamina.
FICHAS TCNICAS
Reactivo Ficha tcnica
o-fenantrolina Formula qumica C12H8N2H2O
Estado: Polvo cristalino
Color: blanco
Olor: inodoro
Punto de fusin: 93-94
O
C
Punto de ebullicin: Indeterminado
Inflamabilidad: No inflamable
Clorhidrato de hidroxilamina Formula qumica NH2OH.HCl
Olor: inodoro
Aspecto: Higroscpico
pH: 3.2 (solucin 0.2M)
Densidad: 1.67gr/cm
3
Peso molecular: 69.5 g/mol
Punto de fusin:155-157C
Punto de ebullicin: 305.6C
Corrosivo
Acetato de sodio Formula qumica CH3COONa
Apariencia: cristales incoloros, inodoro,
eflorescente
Olor: Inodoro
Punto de fusin: 324C
pH: 11
Acido actico Formula qumica CH3COOH
Estado: Lquido,
Olor: caracterstico (vinagre)
Color: Incoloro
Punto de fusin: 16
O
C
Punto de ebullicin: 118
O
C
Densidad: 1.05 1.67gr/cm
3

Toxicidad: Corrosivo, inflamable,
provoca quemaduras.


METODOLOGA
MATERIAL Y REACTIVOS.
Materiales por grupo de laboratorio.
Cuatro balones aforados de 100 ml.
Dos vasos de precipitados de 150 ml.
Un frasco lavador.
Un mortero con mano.
Pipeta de 1.0 ml.
Material y reactivos generales. (volmenes calculados para 10 grupos de
laboratorio).
Solucin de orto-fenantrolina al 0.1% en envase ambar (1 litro).
Solucin patrn de hierro (0.04 mgFe/ML (0.2807 g FE(NH
4
)
2
(SO
4
)
2
6H
2
O
en 1L)).
Solucin de clorhidrato de hidroxilamina al 10% (100ml)
Solucin buffer 0.1 M de acetato-actico pH 3.5 (1L).
Solucin problema.
Espectrofotmetro.
Celdas de cuarzo.
Tres buretas de 25 ml.
Tres pinzas para bureta.
Tres pipetas aforadas de 10 ml.
Tres pipetas aforadas de 1 ml.
12 vasos de precipitados de 150 ml.
Cinta de enmascarar.
Papel secante o de cocina.
Propipetas.
PROCEDIMIENTO
1. Espectro de absorcin de varias sustancias:
En un vaso de precipitados de 100 ml coloque de 20 ml a 50 ml de solucin de las
siguientes sustancias y segn las indicaciones del profesor, tmeles el espectro de
absorcin en el rango de longitud de onda deseado. Observe las partes del
espectrofotmetro y los espectros.
Fenolftaleina en medio bsico.
Fenoftaleina en medio neutro.
Verde de bromo cresol en medio bsico.
Verde de bromo cresol en medio cido.
Gelatina o BSA.
Permanganato de potesio.
Complejo de hierr- orto-fenantrolina.
















Figura 1. Solucin de
Hidrxido de Sodio para
hacer el medio bsico en
la fenolftalena y en el
verde de bromocresol
Estas son las soluciones que se utilizaron la de color amarillo
es el permanganato de potasio; la de color azul es el verde
de bromo cresol en medio cido; las de color fiusha una
pertenece a la fenolftalena en medio bsico y la otra al verde
de bromo cresol en medio bsico; la solucin transparente de
la izquierda es la fenolftalena en medio bsico y por ltimo la
solucin de la derecha es la gelatina.

En esta parte se le tom el espectro de absorcin a
cada una de las soluciones, utilizando un
espectrofotmetro ya que arrojaba ademas de los
resultados la grfica de Longitud de onda vs Absorcin.



2. Preparacin de la curva de calibracin para la determinacin de hierro:
En matraces aforados de 100 ml adicionar las cantidades correspondientes de los
reactivos a utilizar segn la tabla No: 1, despus completar con agua destilada
hasta el volumen correspondiente, homogenizar y dejar reposar 5 minutos para el
desarrollo del color.

TUBO. PPM
(Fe).
ml
SIN PATRN
(Fe).
ml
HIDROXILAMINA
ml
BUFFER
pH 3.5
ml
O-FENANTROLINA.
Blanco 0 0.0 1 10 10
1 0.6 1.5 1 10 10
2 1 2.5 1 10 10
3 2 5.0 1 10 10
4 4 10.0 1 10 10
5 6 15.5 1 10 10
6 8 20.0 1 10 10
7 10 25.0 1 10 10
8 14 35.0 1 10 10
9 20 50.0 1 10 10
TABLA No. 1.
Lavar muy bien las celdas de medicin y para calibrar el equipo al 100% de
transmitancia coloque la longitud de onda en la cual se va a medir la absorbancia
(510 nm) y se usa como referencia el blanco de la reaccin. Cuide que sobre las
paredes de la celda no queden huellas digitales, manchas , rayones muy fuertes, u
otros que impidan el paso adecuado de la luz.
Mida la absorbancia de las soluciones patrn de hierro a 510 nm, entre cada
medida lave la celda con suficiente agua destilada y limpie cuidadosamente las
paredes externas.
Haga una grfica de absorbancia vs concentracin de hierro en ppm y linealcela.
3. Determinacin de la cantidad de Fe presente en una gragea de sulfato
ferroso: (solucin problema)
Pese una gragea de sulfato ferroso y luego colquela en un mortero con mano,
adicione 20 ml de agua destilada y realice la extraccin. Filtre la solucin obtenida
a travs del papel de filtro y lave el residuo con 30 ml de agua destilada.
Transvase el filtrado a un baln aforado de 100 ml (solucin No.1)
De la solucin anterior tome 1.0 ml y colquelo en un baln de 100 ml, adicione
luego 1 ml de hidroxilamina, 10.0 ml de solucin buffer y 10.0 ml de orto-
fenantrolina; lleve a volumen con agua destilada y deje en reposo por 15 min. Lee
la absorbancia de la solucin a 510 nm. Calcule la concentracin de sulfato ferroso
y la concentracin de hierro elemental, por gragea.

















Solucin buffer:
Primero se prepar una solucin con 8.2
gramos de acetato de sodio a 100mL, y una
solucin con 6mL de cido actico en 100 mL,
posteriormente para hacer la solucin buffer
se agregaron 18 ml de la solucin del acetato
de sodio a los 100 mL de la solucin de cido
actico, se obtuvo el pH de 3.5
Estndares utilizados para la
preparacin de la curva de
calibracin, los cuales fueron
elaborados de acuerdo a la
tabla No 1.
Solucin blanco, a la cual no se
le agreg solucin patrn.















A la gragea triturada se le agregaron 20 ml de agua, despus se filtr la
solucin obtenida, el residuo se lav con 30 mL de agua destilada, y
despus se pas a un baln aforado de 100 mL, de ah se tom 1mL.







Gragea de fumarato ferroso triturada. Que va
a ser utilizada para nuestra muestra
A la muestra de 1mL, se le agreg
1mL de hidroxilamina, 10 mL de
solucin buffer, 10 mL de orto-
fenantrolina, y se llev a volumen en
un baln aforado de 100 mL,
esperamos 15 min. Y se le ley la
absorbancia a una longitud de onda de
510 nm.


RESULTADOS
PRIMERA PARTE
ESPECTRO DE ABSORCIN DE VARIAS SUSTANCIAS




SEGUNDA PARTE
CURVA DE CALIBRACIN CON ADICIN DE ESTNDARES:

Concentracin (ppm) Absorbancia
0 0.008
1 0.185
4 0.739
8 1.441


















y = 0.1795x + 0.0098
0
0.2
0.4
0.6
0.8
1
1.2
1.4
1.6
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9
Absorbancia vs Concentracin
Concentracin (ppm)
A
b
s
o
r
b
a
n
c
i
a

Determinacin de la cantidad de Fe presente en una gragea de sulfato
ferroso
MUESTRA
Longitud de onda (nm) Absorbancia
510 0.101
510 0.096
Promedio 0.0985

Frmula

Para calcular la concentracin:

Valores:
m=0.179
Seal del analito(

=0.0985
b= 9.78x10
-3

r= 0.99

=0.4956 ppm







CONCLUSIONES
Primera parte:
En la regin visible apreciamos el color visible de una solucin y que corresponde
a las longitudes de onda de luz que transmite, entonces al medir el espectro de
absorcin de cada una de las soluciones, observamos que de acuerdo al color que
presentaba cada solucin corresponda a la longitud de onda a la que se refleja
ese color, por ejemplo la solucin de verde de bromocresol presentaba un color
azul, por lo que ese color se reflej mas o menos a una longitud de onda de entre
450 y 480 nm. En el caso de agua y de la gelatina de anis las cuales no presentan
color, tienen un espectro de de absorcin en el espectro IR (infrarrojo) y no en el
espectro visible.

Segunda parte
Al hacer la curva de calibracin eliminamos el ltimo valor, el cual presentaba una
absorbancia muy alta (1.654), ya que el ltimo estndar tena un color muy oscuro,
por lo que ya no cumpla con la ley de Lamber y Beer. Al obtener la curva de
calibracin pudimos obtener la cantidad de hierro en nuestra muestra que fue de
0.4956 ppm, lo que podra significar 0.4956 mg/L.

BIBLIOGRAFAS.
Skoog D.A West D.M 2001. Qumica analtica, sptima edicin, Mc Graw
Hill. Mxico
Willar H.merritt L, Dean J y Settle F. 1991. Mtodos instrumentales de
analisis, grupo editorial Iberoamericana, Mxico.
Skoo D.A, Holler J.F, Nieman T.A, 2001.Principios de anlisis instrumental,
quinta edicin, Mc Graw Hill/ interamericana.
http://es.scribd.com/doc/52162235/Determinacion-de-Hierro-Con-
Ortofenantrolina
http://iio.ens.uabc.mx/hojas-
seguridad/clohidrato%20de%20hidroxilamina.pdf