2014

DETERMINACIN DE FOSFATOS POR COLORIMETRA

(MTODO AZUL DEL CIDO ASCRBICO).
1. INTRODUCCIN.
La forma ms frecuente de encontrar el fosforo en las aguas naturales y
aguas residuales es los ortofosfatos, los fosfatos condensados
(pirometafosfatos y polifosfatos) y fosfatos orgnicos. Estas formas de
fosfatos provienen de una gran cantidad de fuentes, tales como productos
de limpieza, fertilizantes, procesos biolgicos, etc. siendo estos los
responsables del crecimiento y proliferacin de formas nocivas de algas,
lemnas y otros microorganismos. Por este motivo hay un gran inters en
eliminarlos. !dems tambin son los responsables de la eutro"zacin de las
aguas, lo #ue provoca una prdida de la calidad del agua tanto sanitaria
como ecolgica.
El fsforo es un nutriente esencial para el crecimiento de organismos, por lo
#ue la descarga de fosfatos en cuerpos de aguas puede estimular el
crecimiento de macro y microorganismos fotosintticos en cantidades
nocivas.
Los fosfatos se presentan en los sedimentos y lodos biolgicos, en forma de
precipitados inorgnicos e incorporados dentro de compuestos orgnicos.
$n mtodo de digestin para determinar el fsforo total debe ser capaz de
o%idar la materia orgnica e"cazmente para liberar el fsforo como
ortofosfato disuelto.
Este mtodo se aplica a la determinacin de P inorgnico u ortofosfatos. &e
basa en la reaccin en medio cido entre el anin fosfato y el molibdato
amnico en presencia de tartrato de ' y &b, para generar cido
fosfomol(bdico el cual es reducido mediante cido ascrbico generando una
coloracin azul debida al )olibdato y susceptible de determinacin
colorimtrica.
2. OBJETIVO.
*.+ ,eterminar la concentracin de fsforo total en muestras de agua.
*.* -nterpretar los resultados obtenidos.
3. FUNDAMENTO TERICO
Los compuestos de fsforo, sobre todo el ortofosfato P.
/
01
, son
considerados en la mayor(a de las aguas estancadas y corrientes como el
nutriente limitador. $n aumento de la concentracin mediante una
mayor entrada o aportacin de fsforo (aguas residuales, erosin del
suelo, etc.) implica directamente una mayor carga de nutrientes 2
3eutro"zacin4 de las aguas con efectos como, un mayor crecimiento de
algas y un agotamiento del o%(geno #ue puede llegar hasta la ano%ia en
las zonas profundas, etc.
3.1.Compuestos de fsforo en el aua
El fsforo aparece en 0 compuestos en las aguas naturales5
Ortofosfato inorgnico disuelto
compuestos orgnicos de fsforo disuelto
fsforo en part(culas (ligado en la biomasa o depositado en part(culas),
cuya suma nos da el !onten"do total de fsforo o #tot, #ue es un
parmetro importante para las operaciones de las plantas de
tratamiento de e6uentes.
!mbos mtodos se basan en la medicin del ortofosfato. Por lo tanto,
para la determinacin del contenido total de fsforo es indispensable la
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d"est"n de las fracciones disueltas y orgnicas as( como de las
fracciones de fsforo en part(culas.
,e igual modo, la captacin de la muestra debe realizarse sin una
"ltracin previa para incluir todos los slidos en el proceso de digestin.
3.2.Curva de calibracin
Esta curva se obtiene relacionando la absorbancia de luz de los comple7os
desarrollados por las concentraciones crecientes y conocidas de fosfatos
preparados a partir de una sal de fosfato patrn primario (debe
asegurarse #ue se cumpla la ley de Lambert y 8eer)5 se encuentra la
ecuacin de regresin y con ella se calcula la concentracin de fosfato en
la muestra.
El mtodo est basado en reacciones especi"cas para el
ortofosfatos, y dependiendo del pretratamiento hecho a la muestra,
se pueden determinar diversas formas de fosforo como son fsforo
y ortofosfatos total y disuelto.
El mtodo del cido ascrbico es aplicable en el intervalo de 9,9+ a : mg
P;L. La determinacin se realiza por espectrofotometr(a de absorcin de
luz, mida la absorbancia a <<9nm, usando un blanco en la celda de
referencia. ! mayor concetracin de fosfatos en la muestra, mayor
formacin de comple7o por consiguiente mayor absorvancia.
4. PARTE EXPERIMENTA
MATERIAE!
Probeta de +99 mL
=asos de *>9 mL
?iola de >9, +99 y >99 ml.
Pipeta graduadas de +9 *9 mL
Pipeta volumtrica de +, *, 0, >, +9 y *9 mL
: )atraz de *>9 mL
probeta
Piceta con agua destilada
REACTIVO!
"I#E!TION
cocinilla elctrica
@cido sulfArico concentrado5 !diciona sobre +99 mL de agua
destilada, 0+ mL de cido sulfArico concentrado comercial.
&olucin cido sulfArico 9,> )
,isolucin de hidr%ido de sodio + )5 ,isuelve /9 g de slido en agua
destilada, enrasando a +999 mL
M$TO"O A%& "E 'CI"O A!C(RBICO
D"solu!"n de mol"$dato amn"!o al %&' ,isuelve *9 g de
(BC
/
)
:
)o
D
.
*/
E /C
*
. en agua destilada y enrasa a >99 )l).
D"solu!"n de (!"do as!r$"!o5 ,isuelve +,D: g de slido en
agua destilada y enrasa a +99 mL. Esta disolucin es fcilmente
alterable y se debe preparar cada vez #ue vaya a utilizar.
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D"solu!"n de tartrato do$le de potas"o ) ant"mon"o'
,isuelve +,0D+> g de '(&b.)F
/
C
/
.
:
E+;*C
*
. en agua destilada y lleva la
solucin a un total de >99 mL.
Rea!t"*o Com$"nado (se debe preparar cada vez #ue se
aplica el mtodo) )ezcla >9 mL de disolucin de sulfArico >B, > mL de
solucin de tartrato de amonio y potasio, +> mL de solucin de
molibdato amnico y 09 mL de solucin de cido ascrbico. !gite bien
despus de la adicin de cada reactivo. Los reactivos deben prepararse a
la temperatura del ambiente, 7usto antes de ser mezclados, siguiendo el
orden dado. El reactivo es estable / horas. ,esecha este reactivo si
presenta coloracin azulada o verdosa.
D"solu!"n sto!+ de 1,,, m-. de fsforo5 ,isuelve *+G,>
mg de fosfato de potasio anhidro 'C
*
P.
/
slido puro en agua destilada,
enrasa a +999 mL5 + ml 2 >9Hg P./ IP.
D"solu!"n estandar de fsforo' ,iluya +99 mL, de solucin
stocJ de fosfato a +999 ml. Fon agua destilada, +99 ml 2 9,> Hg P./ IP.
E)&IPO! &TII%A"O!
8alanza anal(tica calibradaK
Espectrofotmetro o color(metro calibrado, e#uipado para lecturas a
<<9 nm con cubetas de * cm. de paso ptico.
Estufa,
*.PROCE"IMIENTO EXPERIMENTA
*.+. "ETERMINACION "E ,O!,ATO! TOTAE!-
1. Lome *> mL de la muestra en un erlenmeyer de +*> ml, y lleve a +99
mL con agua destilada. &i la muestra esta muy concentrada, prepare
una dilucin y tome *> ml de esta.
/. !diciones +9 de reactivo combinado, recientemente preparado, agite
para #ue desarrolle el color azul.
3. ,e7e reposar +9 minutos pero no mas de 09 minutos.
%. EfectAa las lecturas en el espectrofotmetro a <<9 nm de longitud de
onda, usando un blanco de reactivo como solucin de referencia.
0. Mealizar todos los pasos anteriores para las otras diluciones en la
determinacin de la curva de calibracin.
*.2. PREPARACI(N "E A C&RVA "E E!T'N"AR
1. Lome de la solucin estndar > ppm los siguientes volAmenes #ue
indica la tabla + y diluya a *> ml en "ola, proceda como en el
caso de las muestras.
Labla +5 Estableser la curva estandar
N1 Est(ndar
ml solu!"n
est(ndar de
fosfatos 20
ppm3
m #-.
2ppm3
Cant"dades a me4!lar
9 9 9
+ +,9 9,*
* *,9 9,/
0 0,9 9,:
/ >,9 +,9
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1. Lome *> mL de la solucin estndar y adicione una gota de
fenolftale(na.
/. &i aparece un color ro7o, adicionar gota a gota cido sulfArico
concentrado hasta #ue desaparezca el color.
3. !dicionar > mL de reactivo combinado, recientemente preparado,
agite para #ue desarrolle el color azul.
%. ,e7e reposar +9 minutos pero no ms de 09 minutos.
0. EfectAa las lecturas en el espectrofotmetro a <<9 nm. de longitud de
onda, usando un blanco de reactivo como solucin de referencia.
5. Mealizar todos los pasos anteriores para las otras diluciones en la
determinacin de la curva de calibracin.
.. RE!&TA"O!
Cuadr/+. TRAN!MITANCIA0AB!ORVANCIA "E A !O&CIONE!
PATRON
E123nd
ar
!2.4 !2.+ !2.2 !2.3 !2.4
5T
A
Cuadr/2. TRAN!MITANCIA0AB!ORVANCIA "E A! M&E!TRA!
E123nd
ar
BANC
O
R.+ R.2 R.3 R.4
5T
A
Cuadr/3. CAC&O! "E CONCENTRACION "E ,O!,ATO! EN
A! REPETICIONE! "E A! "I&CIONE! 6 A M&E!TRA
ORI#INA.
Re7e2ici
n
BANC
O
R.+ R.2 R.3 R.4
778 P
dil.
778 7
en la
8ue12ra
9. C'C&O!
Falcular la concentracin de la muestra por medio de la ecuacin
obtenida de la curva de calibracin y #ue es representada por la
siguiente ecuacin5
N 2 mO P b
,onde5
m 2 pendienteK
b 2 ordenada al origenK
N 2 es la absorbancia, y
O 2 concentracin (mg P;L).
En caso de haber dilucin de la muestra a lo largo del desarrollo del
mtodo (digestin y al(cuota de muestra), utilizar la siguiente
ecuacin5
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mg P;L 2 concentracin % ?actor de dilucin
Meportar los resultados en mg P;L con dos dcimas, con la precisin
correspondiente.
:. C&E!TIONARIO-
+. Mealice las reacciones #ue se produ7eron en la determinacin de
fosfatos por el mtodo ascrbico.
*. Qra"#ue la curva de calibracin para los estndares de fosfatos.
0. RSu otros mtodos e%isten para determinar fosfatos totales en
aguaT
G. Meferencias5
+. !PC!, !UU!, UE?. &tandard methods for the e%amination of Vater and
VasteVater. *9Lh Edition.