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2 Oferta tecnolgica:
Control biolgico de plagas y enfermedades vegetales
RESUMEN
El grupo de Fitopatologa de la Universidad de Alicante investiga y desarrolla hongos (nematfagos y entomopatgenos) como agentes de control biolgico contra plagas y enfermedades de cultivos. Tambin estudia su compatibilidad con el quitosano, as como las interacciones de hongos susceptibles de ser utilizados en biotecnologa con otros organismos. El grupo posee una gran experiencia en la produccin y preparacin de formulados de agentes de control biolgico, diseo de sondas moleculares, produccin de anticuerpos mono y policlonales, deteccin e identificacin de fitopatgenos y desarrollo de sustratos fluorescentes para quitinasas y cutinasas, entre otras. Su aplicacin ms inmediata se encuentra en la agricultura sostenible, jardinera de ornamentacin, industria marisquera, medicina, biotecnologa, etc.
DESCRIPCIN TCNICA
INTRODUCCIN
El continuo crecimiento de la poblacin humana requiere la bsqueda de nuevos caminos para incrementar la produccin de alimentos. Una forma de conseguir este objetivo es la reduccin de las prdidas en cultivos agrcolas provocadas por organismos causantes de enfermedades y plagas (fundamentalmente insectos, nematodos y hongos patgenos de vegetales).
Uno de los mtodos que ms se utilizan para contrarrestar estos males es el uso de agroqumicos. Estos productos representan un papel muy importante en la reduccin de los daos econmicos en los cultivos. Sin embargo, la toxicidad elevada de algunos de ellos, su persistencia en el medio y su mal uso han llevado a un replanteamiento de las estrategias de control de plagas.
Por ello, actualmente se desarrollan formulados de agentes de control biolgico, es decir, organismos vivos que reducen la poblacin de insectos plaga y patgenos que afectan a los cultivos o depredacin. Existen hongos,
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3 bacterias y virus antagonistas de los agentes que provocan plagas y enfermedades vegetales. Estos organismos (los hongos en particular), despiertan el inters de las empresas y rganos de investigacin por su papel en el control de plagas y enfermedades de cultivos sin daar el medio y la salud.
En 1888 se descubri por primera vez que un hongo (Arthrobotrys oligospora) era capaz de infectar nematodos. Muchos de sus huspedes, los nematodos, son parsitos de plantas o de animales que afectan a los cultivos y al ganado. Por tanto, resulta muy interesante la posibilidad de usar hongos nematfagos y entomopatgenos como agentes de control biolgico frente a los agroqumicos clsicos.
Los hongos nematfagos son microorganismos con capacidad de atacar, matar y digerir nematodos (huevos, juveniles y adultos). Aparte de su habilidad nematfaga, muchos de estos hongos pueden vivir tambin saprofticamente en materia orgnica muerta, atacar a otros hongos (micoparsitos) y colonizar races de plantas como endfitos. Hay ms de 300 especies de hongos nematfagos descritos. La mayora de los nematodos fitopatgenos viven en el suelo y atacan a las races de las plantas.
Los hongos nematfagos se dividen en cuatro grupos dependiendo de su modo de infectar nematodos. El resultado de la infeccin es siempre el mismo: un nematodo completamente digerido. Los nutrientes que provienen de los nematodos son utilizados para formar nuevas estructuras fngicas (hifas, esporas, etc.). Los cuatro grupos son:
Hongos atrapadores de nematodos: forman varios tipos de rganos atrapadores en sus hifas.
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4 Hongos endoparsitos: utilizan sus esporas para infectar nematodos.
Hongos parsitos de huevos: infectan estados no mviles (huevos) de nematodos.
Hongos productores de toxinas: las hifas de estos hongos contienen una gota de toxina. Cuando el nematodo se pone en contacto con la toxina, ste es rpidamente inmovilizado y la hifas del hongo crecen quimiotrpicamente a travs de la boca del nematodo, digirindolo.
Los hongos entomopatgenos pueden eliminar o mantener las plagas en niveles que no ocasionan daos econmicos en los cultivos. Estos hongos se encuentran en rastrojos de cultivos, estircol, suelo, plantas, etc., logrando un buen desarrollo en lugares frescos, hmedos y con poco sol. Constituyen, adems, el grupo de mayor importancia en el control biolgico de insectos plaga. Prcticamente, todos los insectos son susceptibles a algunas de las enfermedades causadas por hongos.
Se conocen aproximadamente 100 gneros y 700 especies de hongos entomopatgenos. Para poder utilizar estos hongos como insecticidas, en primer lugar, se deben producir cantidades masivas de ste, y en segundo lugar, aseguran su capacidad infectiva por un perodo de tiempo considerable. La explotacin de los hongos para el control de plagas implica una amplia
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5 investigacin multidisciplinar: gentica, fisiologa, ecologa, patologa, produccin masiva, etc.
PRINCIPALES LNEAS DE INVESTIGACIN
El grupo de investigacin Fitopatologa de la Universidad de Alicante posee la infraestructura y los conocimientos necesarios para abordar con xito cualquier proyecto de I+D+i (tanto con financiacin pblica como privada) en cualquier rea relacionada con:
1) Estudio del comportamiento endoftico de hongos agentes de control biolgico. El grupo es pionero a escala mundial en el estudio a nivel molecular, celular y ecolgico de hongos nematfagos y entomopatgenos que crecen en tejidos vegetales. Conocen perfectamente su funcionamiento, lo que les ha permitido mejorar su aplicacin en el control de plagas y patgenos vegetales.
2) Hongos agentes de control biolgico como inductores de las defensas de las plantas (mediante estudios de Protemica y Transcriptmica). Actualmente se investiga si estos hongos pueden actuar de forma preventiva frente a plagas y enfermedades, como lo hacen las vacunas en los sistemas animales.
3) Diversidad de hongos endfitos de vegetacin natural bajo estrs (en plantas de saladares y arenales). Algunas cepas inhiben el crecimiento de patgenos radiculares y reducen sus sntomas en plantas. Como se trata de mutualistas no obligados (a diferencia de los hongos micorrcicos), se pueden cultivar fcilmente. Por ello, tienen gran potencial en la restauracin
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6 de la vegetacin mediterrnea y en el control biolgico de plagas y enfermedades vegetales.
4) Control biolgico de plagas y enfermedades de palmceas (picudo rojo -Rhyncophorus ferrugineus-, cochinilla roja -Phoenicococcus marlatti-, podredumbre rosa -Penicillium vermoesenii-). Estos insectos y hongos amenazan con destruir el palmeral de Elche (Patrimonio de la Humanidad), los palmerales del Magreb y de otras zonas, as como la industria viverista que desarrolla las palmceas como plantas ornamentales.
5) Biologa de hongos nematfagos y hongos entomopatgenos como agentes de control biolgico. Se trata de organismos vivos que reducen la poblacin de insectos plaga y patgenos que afectan a los cultivos. Estos organismos (hongos en particular) juegan un papel importantsimo en el control de plagas y enfermedades de cultivos sin daar el medio y la salud. Su uso supone una alternativa a la utilizacin de productos qumicos txicos. Algunos, como el bromuro de metilo, son peligrosos para la salud humana y son causa del cambio climtico global.
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6) Bases celulares y moleculares de la accin del quitosano. El quitosano es un agente antimicrobiano natural que se obtiene del caparazn de animales marinos (es un desecho de la industria marisquera). Esta lnea tiene un gran inters bsico y aplicado en agricultura, medicina, etc.
Hongo patgeno del tomate: Fusarium oxysporum f. sp. radicis-lycopersici.
7) Estudio de hongos endfitos (autctonos y alctonos) de algas marinas. Se pretende desarrollar una estrategia de control biolgico de Caulerpa racemosa, un alga invasiva tropical que amenaza a los ecosistemas litorales mediterrneos.
8) Biotecnologa: produccin y formulacin de hongos antagonistas. Marcadores moleculares para hongos nematfagos.
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9) Estudios integrales: modo de accin, defensas del husped, adhesivos y penetracin, enzimas degradadoras de cubiertas del husped, metabolitos secundarios, etc.
VENTAJAS E INNOVACIN DEL GRUPO
El grupo est dotado con la infraestructura ms vanguardista disponible en el mercado para afrontar con xito cualquier proyecto empresarial. Posee una amplia variedad de aparatos de anlisis y medida en sus laboratorios, entre los que cabe destacar:
Autoclaves (3). Lupas (2). Cmaras de flujo (2). Microscopa ptica y de fluorescencia. Criomicrotomo. Fitotrones. Termociclador. Liofilizador. Equipamiento para separacin y purificacin de protenas. Equipamiento de electroforesis para protenas (1 y 2D) y cidos nucleicos. Clulas para dilisis y concentracin de molculas orgnicas (Amicon). Espectrofluormetro (Genios). Centrfugas. Estufas. Incubadoras. Cmara acoplada a microscopio para captura de imgenes. Capturador de geles de protenas y cidos nucleicos.
La observacin directa de hongos nematfagos en suelo, y en general de cualquier microorganismo, resulta muy compleja. No obstante, mediante microscopa de barrido a baja temperatura, el grupo ha sido capaz de estudiar in situ en el suelo el crecimiento, la formacin de trampas, la captura y la digestin de nematodos por hongos nematfagos.
Junto a la infraestructura propia de los Servicios Tcnicos de Investigacin (SSTTI), lo sitan entre los mejores grupos a nivel nacional e internacional en el estudio del comportamiento endoftico de hongos agentes de control biolgico.
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ESTADO ACTUAL DE LA TECNOLOGA
Tras ms de dieciocho aos de investigacin, el grupo est suficientemente consolidado para ejecutar con xito cualquier tipo de proyecto de I+D+i, tanto con financiacin pblica como privada. As lo avalan los ms de 30 proyectos llevados a cabo con distintos organismos.
Descubrimientos recientes de biologa moderna, especialmente avances y aplicaciones en tcnicas moleculares en el estudio de la patognesis fngica, han aumentado exponencialmente el conocimiento sobre hongos agentes de control biolgico (tanto a escala ecolgica como molecular), aumentando as sus posibilidades de uso en el control de nematodos e insectos fitopatgenos.
DERECHOS DE PROPIEDAD INTELECTUAL
La tecnologa se encuentra protegida bajo el know-how del grupo de investigacin, siendo objeto de futura patentabilidad los resultados que se obtengan de los proyectos de I+D+i que actualmente se estn ejecutando.
Fruto de su dilatada experiencia investigadora de alto nivel, se han conseguido las siguientes patentes:
Mtodo para la determinacin de la actividad quitinasa basado en la utilizacin de sustratos fluorescentes // Method for determining chitinase activity based on usage of fluorescent substrates involves incubation of simple of enzyme with chitinase activity or of preparation containing such enzyme in presence of appropriate substrate (ES2186560) [consultar patente].
Procedimiento para la produccin de hongos entomopatgenos a partir de la utilizacin del mesocarpo de la almendra // Process for the preparation of entomopathenogenic fungi through the use of almond mesocarp (ES2134174) [consultar patente].
Uso del quitosano para incrementar la esporulacin de hongos (nmero de solicitud: P200700461; fecha de solicitud: 22/02/2007).
Composicin fitosanitaria que comprende un hongo entomopatgeno perteneciente a la especie B. bassiana y triturados o fragmentados de dtiles, mtodo de elaboracin y uso de la misma (nmero de solicitud: P200701550; fecha de solicitud: 05/06/2007).
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10 SECTORES DE APLICACIN
Los conocimientos adquiridos por el grupo de investigacin se pueden aplicar directamente en reas tales como: agricultura sostenible (suelos agrcolas, hortofrutcolas y forestales), industria marisquera, medicina, biotecnologa, etc.
Entre las principales capacidades del grupo, ste se caracteriza por ser experto en: Producir y preparar formulados de agentes de control biolgico (hongos nematfagos, entomopatgenos y endfitos contra plagas y enfermedades vegetales). Disear sondas moleculares (anticuerpos y cidos nucleicos). Diagnosticar de forma precoz enfermedades en plantas. Analizar (microscpica y molecularmente) la interaccin entre hongos y otros organismos. Genmica y Protemica de hongos. Aislar e investigar hongos endfitos. Biotecnologa del quitosano (fungicida natural).
COLABORACIN BUSCADA
El grupo busca empresas/organismos para:
Establecer proyectos de I+D+i con organismos de investigacin (pblicos o privados), con el objetivo de abrir nuevas lneas de investigacin o implementar novedosos desarrollos tecnolgicos.
Licenciar las patentes a aquellas empresas interesadas en adquirir los derechos de explotacin (tanto en exclusiva como parcialmente), o la titularidad de la misma.
Realizar informes tcnicos y asesora cientfica para empresas (estudios de actuacin para la regeneracin ecolgica de determinadas zonas, formulacin y produccin de hongos antagonistas, etc.).
Ofrecer formacin especfica en el control biolgico de plagas y enfermedades vegetales.
Servicios de normalizacin, calibracin, elaboracin de normas tcnicas nacionales e internacionales, etc.
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Ofrecer apoyo tecnolgico en aquellas tcnicas que requieren una alta capacitacin o instrumental sofisticado que no est al alcance de la empresa solicitante.
Intercambio de personal por perodos de tiempo definidos (para el aprendizaje de una tcnica, etc.).
Alquiler del equipo interno a los clientes que deseen llevar a cabo sus propios ensayos (infraestructura propia del laboratorio del Departamento de Ciencias del Mar y Biologa Aplicada, o de los Servicios Tcnicos de Investigacin (SSTTI) de la Universidad de Alicante).
PERFIL DEL GRUPO DE INVESTIGACIN
El grupo de investigacin Fitopatologa de la Universidad de Alicante se cre en el ao 1990. Actualmente, est formado por 24 miembros (entre investigadores y colaboradores). Posee una extensa experiencia investigadora en el modo de accin de hongos agentes de control biolgico (principalmente parsitos de nematodos e insectos) a escala ecolgica, celular y molecular.
Se han publicado ms de 200 artculos en revistas y libros con impacto internacional. Tambin se han desarrollado y patentado diversos mtodos para la produccin y formulacin de hongos agentes de control biolgico basados en residuos agrcolas y marinos.
El grupo colabora activamente con distintos grupos de investigacin, tanto nacionales como internacionales (Alemania, Amrica Central, Australia, Brasil, Canad, Finlandia, Holanda, Italia, Reino Unido, Rusia y USA), as como con empresas de reconocido prestigio tales como Viveros Huerto del Cura, entre otras.
Fruto de estos aos de experiencia, a continuacin se detallan los principales proyectos ejecutados con financiacin pblica:
Cellular and molecular interactions between nematophagous fungi, roots and plant-parasitic nematodes (proyecto europeo). Aproximacin sinergstica al control de enfermedades radiculares utilizando agentes de biocontrol endfitos y quitosano. Biologa y taxonoma de hongos del suelo, identificacin de cepas de hongos relacionadas con el control biolgico.
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12 Caracterizacin de la actividad nematocida de la proteasa P32: transformar plantas y hacerlas resistentes a la infeccin por nematodos. Control biolgico de la cochinilla roja (Phoenicoccus marlatti) de las palmceas. Control biolgico de la plaga de las palmceas, Rhynchophorus ferrugineus, mediante el uso de hongos agentes de biocontrol. Control biolgico de nematodos fitopatgenos. Control biolgico de plagas de insectos de plantas con inters ornamental por patgenos, parasitoides y depredadores naturales. Investigaciones sobre metabolitos antifngicos del hongo entomopatgeno Beauveria bassiana. Mecanismos y aplicaciones prcticas de la promocin del crecimiento vegetal y control de enfermedades por quitosano y endfitos fngicos.
DATOS DE CONTACTO lvaro Berenguer Berenguer SGITT-OTRI (Universidad de Alicante) Telfono: +34 96 590 3467 Fax: +34 96 590 3803 E-Mail: otri@ua.es URL: http://www.ua.es/otri/es/areas/ttot/ttototac.htm