E El la ab bo or ra ac ci i n n d de e p pr re ep pa ar ra ac ci io on ne es s d de e c cr ro om mo os so om ma as s

p po ol li it t n ni ic co os s d de e c c l lu ul la as s d de e g gl l n nd du ul la as s s sa al li iv va al le es s d de e
D Dr ro os so op ph hi il la a m me el la an no og ga as st te er r

O Ob bj je et ti iv vo o: :
Elaborar preparaciones temporales de cromosomas politnicos y observar
las diferentes estructuras que los caracterizan.

M Ma at te er ri ia al l: :
Microscopio estereoscpico
Microscopio ptico
Platina de vidrio
vaso de precipitados de 50 ml
agujas de diseccin (punta fina)
portaobjetos
cubreobjetos
Pipeta Pasteur
aceite de inmersin
papel seda
aceto-orceina
sanitas o toallitas de papel absorbentes
Tiras de papel filtro

o Larvas de tercer estadio de Drosophila melanogaster

M M t to od do o: :
1.- Tomar una larva de tercer estadio de la pared del frasco, fjese que an
se mueva activamente.

2.- Colocar la larva sobre un portaobjetos y este a su vez sobre la platina de
vidrio, poner una gota de agua a la larva para evitar que se seque, colocar
sta en el microscopio estereoscpico para realizar la diseccin de la
manera siguiente:

3.- Sujetar a la larva por la parte media del cuerpo usando una aguja de
diseccin (sin atravesarla), identificar las mandbulas, y con la otra aguja,
sin soltar la larva, clavarla por la mandbula, jalar suave pero firmemente
para separar el tracto digestivo como se muestra en la figura























Las estructuras de ste se muestran en la siguiente imagen:









4.- Identificar las glndulas salivales y separarlas del resto del cuerpo (todo
este procedimiento se debe realizar cuidando que no se seque el material).

5.- Una vez separadas las glndulas, con una tira de papel filtro elimine el
exceso de agua y ponga una gota de colorante.

6.- SIN colocar el cubreobjeto an, observe las glndulas en el microscopio
ptico usando el objetivo de menor aumento (cuide de no manchar el
objetivo con el colorante), cuando los ncleos de las clulas de las
glndulas salivales, sean evidentes y estn bien teidos, hacer el squash
(aplastamiento), el tiempo de tincin puede variar dependiendo que tan
viejo est el colorante.

7.- Para realizar el squash proceda de la manera siguiente: lave
cuidadosamente las glndulas para eliminar el exceso de colorante, utilice
tiritas de papel filtro, ponga gotas de agua y absorba con el papel hasta ver
limpias las glndulas; ponga su preparacin sobre una superficie limpia y
lisa, coloque cuidadosamente el cubreobjetos y sostngalo firmemente con
los dedos por los extremos para evitar que se mueva al realizar el
aplastamiento; presione con fuerza con la yema del dedo o con la goma de
un lpiz nuevo para romper los ncleos y expandir los cromosomas
politnicos.

8.- Revise su preparacin utilizando el objetivo de 10X y localice la zona
donde se encuentran las clulas de la glndula, una vez localizada, observe
con el objetivo de 100X y trate de identificar las siguientes estructuras:
Cromocentro
Brazos
Bandas
Interbandas
Engrosamientos de los brazos de los cromosomas.


.
10.- Lave perfectamente su material.

A An ne ex xe e a a s su u r re ep po or rt te e e el l s si ig gu ui ie en nt te e c cu ue es st ti io on na ar ri io o: :

a ) En qu tipos de organismos se pueden observar los cromosomas
politnicos?
b) Cul es su funcin?
c) Explique brevemente la forma en la que se generan los cromosomas
politnicos.
d) Qu es un Puff y un anillode Balbiani, existe alguna diferencia?
e) En Gentica Qu utilidad tiene los cromosomas politnicos?