Instituto de Qumica de So Carlos Instituto de Qumica de So Carlos IQSC IQSC

Universidade de So Paulo Universidade de So Paulo

Disciplina: Bioqumica II
Disciplina: Bioqumica II
Docente: Profa. Dra. Fernanda
Docente: Profa. Dra. Fernanda
Canduri
Canduri
Gliclise
Gliclise
Fermentaes alcolica e ltica
Fermentaes alcolica e ltica
Via das pentoses
Via das pentoses
-
-
fosfato
fosfato
Contedo
Contedo
Difesto de carboidratos
Viso geral da gliclise
As reaes da gliclise
Fermentao: destino anaerbico do piruvato
Fermentao homoltica
Fermentao alcolica
Energtica da fermentao
Controle da gliclise
Metabolismo de outras hexoses
Frutose
Galactose
Manose
Via das Pentoses-fosfato
A digesto de carboidratos inicia
A digesto de carboidratos inicia
-
-
se na boca
se na boca
Durante a mastigao, a -amilase salivar atua
brevemente sobre o amido da dieta, rompendo
ligaes (14)
Amilopectina e glicognio possuem ligaes
(16), e sendo assim, o produto da digesto da -
amilase contm uma mistura de molculas de
oligossacardeos menores e ramificados.
A digesto dos carboidratos cessa temporariamente
no estmago, devido ao pH que inativa a -amilase
salivar
A digesto
A digesto
subsequente
subsequente
ocorre no intestino
ocorre no intestino
delgado
delgado
No intestino delgado, o contedo gstrico neutralizado pelo
bicarbonato secretado pelo pncreas, e a -amilase pancretica
continua o processo digestivo
A digesto final dos carboidratos ocorre pela ao de enzimas da
mucosa intestinal dissacaridases e oligossacaridases
A absoro de monossacardeos pelas clulas da mucosa
intestinal o duodeno e o jejuno superior absorvem a maior parte
dos acares da dieta
Viso geral da
Viso geral da
gliclise
gliclise
A glicose presente no sangue resultado da quebra de
polissacardeos, como o glicognio do fgado, ou o
amido e o glicognio da dieta.
Ou ainda de sua sntese a partir de precursores no
glicdicos a gliconeognese
A glicose entra na clula por meio de transportador
especfico
Enzimas da gliclise esto localizadas no citosol da
clula
A
A
gliclise
gliclise
pode ser dividida em dois
pode ser dividida em dois
estgios:
estgios:
1. Investimento de energia. A glicose fosforilada e
clivada para gerar duas molculas de triose
gliceraldedo-3-fosfato (GAP). Processo que consome 2
ATPs.
2. Recuperao de energia. As duas molculas de
gliceraldedo-3-fosfato (GAP) so convertidas em
piruvato com a produo de 4 ATPs, tendo um saldo
lquido de 2 ATPs.
Investimento de energia
Investimento de energia
Recuperao de energia
Recuperao de energia
A reao total
A reao total
Glicose + 2 NAD
+
+ 2 ADP + 2 Pi
2 piruvato + 2 NADH + 2 ATP + 2 H
2
O + 4 H
+
O NADH formado nesse processo deve ser reoxidado
continuamente para manter a via abastecida com seu
principal agente oxidante, o NAD
+
.
As reaes da gliclise
Hexoquinase a primeira utilizao do ATP
Reao 1: transferncia de um grupo fosfato do ATP para a
glicose, formando glicose-6-fosfato (G6P)
Mudana conformacional da hexoquinase na presena
da glicose
A hexoquinase catalisa a fosforilao de hexoses como D-glicose, D-
manose e D-frutose
O segundo substrato para a hexoquinase o complexo Mg
2+
-ATP
A primeira reao
A primeira reao
A segunda reao
A reao 2 a converso da G6P em frutose-6-fosfato (F6P)
por meio da fosfoglicose-isomerase (PGI) isomerizao de
uma aldose para uma cetose
Fosfofrutoquinase
Fosfofrutoquinase
: segunda utilizao de ATP
: segunda utilizao de ATP
Na reao 3, a fosfofrutoquinase (PFK) fosforila F6P
para formar frutose-1,6-bifosfato (FBP ou F1,6P)
Esta enzima catalisa o ataque nucleoflico do grupo C1-
OH sobre o tomo eletroflico -fsforo do complexo
Mg
2+
-ATP
A fosfofrutoquinase desempenha um papel fundamental
no controle da gliclise porque catalisa uma das reaes
determinantes do fluxo dessa via
Pode ter a atividade aumentada pelo AMP e inibida pelo
ATP e citrato
As trs
As trs
primeiras
primeiras
reaes da
reaes da
gliclise
gliclise
Aldolase
Aldolase
A aldolase catalisa a quarta reao
Cliva a frutose-1,6-bifosfato para formar duas
trioses gliceraldedo-3-fosfato (GAP) e
diidroxiacetona-fosfato (DHAP)
(GAP)
(DHAP)
(F1,6P)
Formao de duas trioses pela
Formao de duas trioses pela
aldolase
aldolase
Triose
Triose
-
-
fosfato
fosfato
-
-
isomerase (TIM)
isomerase (TIM)
Somente um dos produtos da reao, o gliceraldedo-3-
fosfato, continua na via glicoltica
Ambos, gliceraldedo-3-fosfato (GAP) e diidroxiacetona
fosfato (DHAP), so ismeros cetose-aldose, assim com
a F6P e a G6P
GAP e DHAP so interconvertidos por uma reao de
isomerizao com um intermedirio enediol
Reao de isomerizao com um intermedirio
enediol
A triose-fosfato-isomerase catalisa esse processo na
reao 5 da gliclise, a reao final da etapa 1.
Balano da etapa 1 da
Balano da etapa 1 da
gliclise
gliclise
Uma molcula de glicose foi transformada em duas
molculas de GAP
2 ATPs foram consumidos na gerao de intermedirios
fosforilados
O investimento de energia ainda no foi compensado
Gliceraldedo
Gliceraldedo
-
-
3
3
-
-
fosfato
fosfato
-
-
desidrogenase
desidrogenase
(GAPDH)
(GAPDH)
Formao do primeiro intermedirio de alta energia
A reao 6 a oxidao e a fosforilao do GAP por
NAD
+
e P
i
catalisada pela GAPDH
Reao exergnica que promove a sntese do acil-
fosfato de alta energia, 1,3-bisfosfoglicerato (1,3-BPG)
acil-fosfato compostos com alto potencial de
transferncia de grupos fosfato
Sntese do 1,3
Sntese do 1,3
-
-
bisfosfoglicerato
bisfosfoglicerato
Reao 6 primeira reao da segunda etapa
Fosfoglicerato
Fosfoglicerato
-
-
quinase
quinase
(PGK)
(PGK)
Primeira gerao de ATP
A reao 7 produz ATP junto com 3-fosfoglicerato
(3PG), em uma reao catalisada pela fosfoglicerato-
quinase
Esta mesma quinase realiza a reao inversa, que
uma transferncia de grupo fosfato do ATP para o
3PG, formando 1,3-BPG.
fosfoglicerato-quinase
A reao realizada pela PGK
A reao realizada pela PGK
Acoplamento entre as reaes de GAPDH e PGK
Acoplamento entre as reaes de GAPDH e PGK
Uma reao levemente desfavorvel pode ser acoplada a uma
reao altamente favorvel, de forma que ambas ocorram no sentido
direto
Nas reaes 6 e 7, o 1,3-BPG o intermedirio comum
GAP + P
i
+ NAD
+
1,3-BPG + NADH G
0
= +6,7kJ/mol
1,3-BPG + ADP 3PG + ATP G
0
= -18,8 kJ/mol
GAP + P
i
+ NAD
+
+ ADP 3PG + NADH + ATP
G
0
= -12,1 Kj/mol
Exemplo de fosforilao ao nvel do substrato
Fosfoglicerato
Fosfoglicerato
-
-
mutase
mutase
Na reao 8, o 3-fosfoglicerato convertido em 2-fosfoglicerato
(2PG) pela fosfoglicerato-mutase (PGM).
As mutases catalisam a transferncia de um grupo funcional de
uma posio para outra em uma mesma molcula.
Esta reao uma preparao para a prxima reao da via.
Enolase
Enolase
Formao do segundo intermedirio de alta energia
Na reao 9, o 2-fosfoglicerato desidratado a fosfoenolpiruvato
(PEP)
Piruvato
Piruvato
quinase
quinase
(PK)
(PK)
Segunda gerao de ATP
Na reao 10, a reao final, a PK acopla a energia livre da
clivagem do fosfoenolpiruvato a sntese de ATP durante a formao
do piruvato
A reao altamente exergnica, fornecendo energia
livre suficiente para promover a sntese de ATP
Outro exemplo de fosforilao ao nvel do substrato
O alto potencial de transferncia de grupo fosfato do
PEP reflete a alta liberao de energia livre ao converter
o produto enolpiruvato em piruvato.
Piruvato
Piruvato
quinase
quinase
(PK)
(PK)
Avaliao da etapa 2 da
Avaliao da etapa 2 da
gliclise
gliclise
O investimento da primeira etapa pago em dobro na
segunda etapa
Duas unidades C3 fosforiladas so transformadas em
dois piruvatos, com a sntese acoplada de 4 ATPs
GLICOSE + 2 NAD
+
+ 2 ADP + 2 Pi
2 PIRUVATO + 2 NADH + 2 ATP + 2 H
2
O + 4H
+
Os trs destinos metablicos comuns do
Os trs destinos metablicos comuns do
piruvato
piruvato
Fermentao: o destino anaerbico do
Fermentao: o destino anaerbico do
piruvato
piruvato
O piruvato deve ser convertido em um produto final
reduzido para reoxidar o NADH produzido pela reao
de GAPDH
Em leveduras, o piruvato descarboxilado para produzir CO
2
e
acetaldedo, o qual reduzido a NADH para produzir NAD
+
e
etanol fermentao alcolica
A fermentao ocorre em vrios microrganismos e a fermentao
alcolica em algumas plantas
Em condies anaerbicas em msculos, o piruvato
reduzido a lactato para gerar novamente NAD
+
em um
processo conhecido como fermentao homoltica
Na gliclise anaerbica, a energia livre de oxidao
dissipada sob a forma de calor.
Tipos de fermentao
Alcolica - produo
de etanol
Ltica - homoltica:
produo de cido
ltico, e heteroltica:
produo de cido
ltico, etanol e CO
2
Propinica - produo
cido propinico
Frmica - vrios
cidos
Butrica - cido
butrico, butanol,
acetona, isopropanol
Actica - cido actico
Fermentao
Fermentao
homoltica
homoltica
Nos msculos, durante atividade fsica vigorosa, a
demanda de ATP alta e o suprimento de O
2
e baixo
A lactato desidrogenase catalisa a oxidao de NADH e
a reduo do piruvato produzindo NAD
+
e lactato
Esta reao reversvel, de forma que as
concentraes de piruvato e lactato so prontamente
equilibradas
Fermentao
Fermentao
homoltica
homoltica
O processo geral pode ser representado
como:
GLICOSE + 2 ADP + 2 P
i

2 LACTATO + 2 ATP + 2 H
2
O + H
+
Fermentao
Fermentao
homoltica
homoltica
O lactato pode ser exportado da clula como convertido
novamente a piruvato
Grande parte do lactato transportado pelo sangue at
o fgado, onde usado para sintetizar glicose
Fermentao alcolica
Fermentao alcolica
Nas leveduras, o piruvato convertido em
etanol e em CO
2
O etanol o ingrediente ativo dos vinhos e
destilados de bebidas
O CO
2
produzido faz crescer o po
As duas reaes
As duas reaes
consecutivas
consecutivas
A descarboxilao de
piruvato a acetaldedo
e CO
2
pela piruvato-
descarboxilase
A reduo de
acetaldedo a etanol
pelo NADH pela lcool-
desidrogenase
Energtica da fermentao
Energtica da fermentao
Para a fermentao homoltica
GLICOSE 2 LACTATO + 2 H
+
G
0
= -196 kJ/mol
Para a fermentao alcolica
GLICOSE 2 CO
2
+ 2 etanol G
0
= -235 kJ/mol
A fermentao resulta na produo de 2 ATPs por glicose, ao passo
que a fosforilao oxidativa produz at 38 ATPs por glicose
A velocidade de produo de ATP pela gliclise anaerbica pode
ser at 100 vezes mais rpida que a da fosforilao oxidativa
Quando o msculo consome ATP, ele volta a ger-lo quase
completamente pela gliclise anaerbica
No h desperdcio de glicose, pois o lactato aerobicamente
reconvertido em glicose pelo fgado
Energtica da fermentao
Energtica da fermentao
Controle da
Controle da
gliclise
gliclise
Enzimas que operam longe das condies de equilbrio
so potenciais pontos de controle
Identificao dos modificadores alostricos das enzimas
que catalisam as reaes determinantes da velocidade
da via efeito sobre a cintica da enzima
Variao da concentrao dos metablitos
Variaes fisiolgicas reais de energia livre
Variaes fisiolgicas reais de energia livre
associadas a cada reao da via
associadas a cada reao da via
Reao Enzima G (kJ/mol)
1 Hexoquinase -20,9 -27,2
2 PGI +2,2 -1,4
3 PFK -17,2 -25,9
4 Aldolase +22,8 -5,9
5 TIM +7,9 +4,4
6 + 7 GAPDH + PGK -16,7 -1,1
8 PGM +4,7 -0,6
9 Enolase -3,2 -2,4
10 PK -23,0 -13,9
Apenas trs reaes funcionam com grandes variaes Apenas trs reaes funcionam com grandes variaes
negativas de energia livre no msculo cardaco negativas de energia livre no msculo cardaco
Hexoquinase
Fosfofrutoquinase
Piruvato quinase
So pontos de controle da via
As outras reaes funcionam prximo ao equilbrio,
sendo sensvel s mudanas na concentrao dos
intermedirios da via, e acomodando-se s mudanas
no fluxo geradas pelas etapas determinantes da
velocidade
Hexoquinase, Fosfofrutoquinase e Piruvato quinase so
pontos de controle da via
Alguns efetores das enzimas que agem longe do equilbrio
A A fosfofrutoquinase fosfofrutoquinase o principal ponto de controle da via o principal ponto de controle da via
glicoltica glicoltica
Regulao pela frutose
2,6-difosfato:
ativador mais potente da
PFK
inibidor da frutose 1,6-
bifosfatase
as aes recprocas
asseguram que ambas as
rotas no estejam
completamente ativas ao
mesmo tempo
Metabolismo de outras hexoses
Metabolismo de outras hexoses
As hexoses frutose, galactose e manose so
combustveis metablicos importantes
Estes so convertidos em intermedirios glicolticos, os
quais so metabolizados pela via glicoltica
Metabolismo da frutose
Metabolismo da frutose
Metabolismo da galactose
Metabolismo da galactose
Metabolismo da
Metabolismo da
manose
manose
A manose o epmero C2 da glicose
A hexoquinase reconhece a manose e a converte em manose-6-
fosfato
A fosfomanose isomerase a converte em F6P
Viso geral do metabolismo de outras hexoses
Viso geral do metabolismo de outras hexoses
A via das pentoses
A via das pentoses
fosfato
fosfato
Tambm denominada desvio
hexose-monofosfato
O NADP gerado pela
oxidao de G6P por meio de
uma via alternativa a gliclise
- a via das pentoses fosfato
Presente nos tecidos mais
envolvidos na biossntese de
lipdeos, como fgado,
glndulas mamrias, tecido
adiposo e crtex adrenal
Presente em microrganismos
fermentativos
Via das pentoses
Via das pentoses
-
-
fosfato
fosfato
Compreende trs estgios:
1. reaes oxidativas que
produzem NADPH e
ribulose-5-fosfato (Ru5P)
2. Reaes de
isomerizao e
epimerizao que
transformam Ru5P em
ribose-5-fosfato ou
xilulose-5-fosfato
3. Reaes de clivagem e
de formao de ligaes
carbono-carbono
Via das pentoses
Via das pentoses
-
-
fosfato
fosfato
Reaes no-oxidativas
1
2
3
Bibliografia:
Voet, D. & Voet, J., Pratt, C.W. (2000) Fundamentos de
Bioqumica, 2 Ed. ArtMed, 1050p.
Lehninger, Nelson, Cox. (2006) Princpios de Bioqumica 4
o
ed.
Editora Sarvier.
Berg, Tymoczko, Stryer. (2002). Bioqumica. 5
o
ed. Editora.
Guanabara Koogan S.A.