Determinar el nmero de bacterias aerobias mesfilas viables.

Conocer y aplicar los diferentes mtodos para la determinacin del

nmero de bacterias.
Realizar una numeracin de bacterias aerobias mesfilas viables en un
alimento como un indicador microbiano de la calidad de los mismos.

RESULTADOS:
Terminando la incubacin de las diferentes placas dentro delas 24 y 48
horas y su respectivo resultados se realizara el clculo de la siguiente
forma:
Para siembra en profundidad: Se encoge 2 placas, correspondientes a una
dilucin, que presenten entre 30 a 300 colonias. Contar todas las colonias de
cada placa utilizando un contador de colonias. Hallar la media aritmtica de
los valores y multiplicarla por el factor de dilucin. Dar el valor obtenido
como el recuento estndar en placa.
Para siembra en superficie: calcular el nmero de unidades formadoras de
colonias (UFC) por gramo o ml, multiplicando el nmero de colonias en la laca
por el factor de dilucin.
Cuando la prueba es negativa se expresa como <10 UFC/g ml.
Cuando la prueba es positiva se multiplica el nmero de colonias por el
factor de dilucin.












Computo del recuento estndar en placa:

DILUCIN N de
repeticiones
MTODO
Siembra en
profundidad
Siembra en
superficie
Siembra por
goteo
24h 24h 24h
10
-1
1 - incontable -
2 - - -
10
-2
1 240 incontable incontable
2 329 - -
10
-3
1 74 incontable incontable
2 118 - -
10
-4

1 5 - -
2 5 - -



1) cmputo de recuento estndar en placa. metodos por
profundidad

El cmputo es cuando se hace seleccin de placas que est entre 30 300
colonias y se utiliza un contador de colonias.
Lectura 24 horas
10
-2
240 329
10
-3
74 118
10
-4
5 5
Promedio de diluciones
240 + 329 = /2 = 284.5
74 + 118 = 192/2 = 96
5 + 5= 10/2 = 5

Luego: (

Mayor a 2 se toma la dilucin ms baja en este caso 10
-4
.
Menor a 2 se toma la dilucin ms alta en este caso 10
-3
.

Entonces si es mayor a 2:
(

)




(

El resultado sera: Numeracin de bacterias aerobias mesfilas viables
es 5 x 10
4
ufc/mL.


















Lectura 48:
10
-2
incontable
10
-3
97 133
10
-4
9 9
97 + 133 = 230 /2 = 115
9 + 9 = 18/2= 9

(

Entonces:

Mayor a 2 se toma la dilucin ms baja en este caso 10
-4
.
Menor a 2 se toma la dilucin ms alta en este caso 10
-3
.

(

)




(

El resultado sera: Numeracin de bacterias aerobias mesfilas viables
es 9 x 10
4
ufc/mL.

2) Siembra en superficie

3) Siembra por el mtodo de goteo:

Estos mtodos no se realizaran porque sus colonias son incontables.
JAJAA




CUESTIONARIO:

1. Qu otros diluyentes se utilizan para alimentos?
Entre los ms utilizados tenemos:
Solucin salina fisiolgica: que como lo dice su nombre sirve para
mantener viables las muestras de contenidos fisiolgicos tales como
secreciones. Adems sirve para diluir muestras fisiolgicas.
Contiene:
Fosfato slico 0.02 ml.
Cloruro sdico 0.9 %
pH final 7.4
Esterilizar a 131 C/15
Agua peptona (para diluciones), til en diluir muestras de alimentos ya
que permite mantenerla con sus caractersticas sin alterarla contiene:
Peptona 1 gr.
Agua destilada 1l.
pH 7 0.1
Tratamiento en autoclave a 121 C/15
Adems se pueden utilizar otros diluyentes aparte de los utilizados en
clase como: agua de grifo y solucin tampn fosfato.

2.-Ventajas y Desventajas de los mtodos de siembra en profundidad,
en superficie y por goteo.

a) Recuento en Placa por Mtodo de Siembra en Profundidad:
Ventajas:
Es el mejor mtodo para el desarrollo de
microaerfilos.
Hay un mayor aprovechamiento de nutrientes.
Mayor cantidad de la muestra.
Menor error.
Facilita el aislamiento de algunas especies
caractersticas como Clostridium.

Desventajas:
La temperatura del agar puede afectar a algunos
microorganismos sensibles al calor.
Hay dificultades al subcultivar colonias.
Si no se emplea el medio translucido la visualizacin
de colonias se ve afectada.

b) Recuento en Placa por Mtodo de Siembra en Superficie:
Ventajas:
Permite un fcil estudio de las diferentes colonias
tanto en su morfologa como en su recuento.
Hay facilidad para realizar el subcultivo de colonias.
No es necesario que el medio sea claro o traslucido.
Desventajas:
Debido al pequeo volumen de muestra utilizada el
alimento suspendido puede interferir como nutriente o
ejerciendo efecto inhibitorio sobre los
microorganismos.
c) Recuento en Placa por Mtodo de Siembra en Goteo:
Ventajas:
Es fcil de realizar el estudio morfolgico y la
caracterizacin de los diversos tipos de colonias.
Se comprueba fcilmente con exactitud del sistema de
dilucin.
Los microorganismos son inactivos por el calor.
No es necesario que el medio sea traslucido.
Desventajas:
Debido al pequeo volumen de muestra utilizada el
alimento suspendido puede interferir como nutriente o
ejerciendo efecto inhibitorio sobre los
microorganismos.
Solo da buenos resultados en muestras demasiado
contaminadas






CONCLUSIONES
En este anlisis se lleg a la conclusin de que la muestra de leche
cruda colectada del Mercado de modelo de Lambayeque se
obtuvo por el mtodo de siembra en profundidad

a las 24 horas y las 48 horas

, con lo que se
determina que la muestra no es apta para el consumo humano.
Se determin el nmero de bacterias aerobias mesfilas viables a
travs del mtodo de profundidad en el trabajado de prctica.
Se pudo determinar el nmero de microorganismo presentes en la
muestra leche cruda.