Professional Documents
Culture Documents
TREPONEMA PALLIDIUM
INTRODUCCIN
Las pruebas serolgicas para el diagnstico de la sfilis se dividen en
treponmicas, las que utilizan preparadas de Treponema Pallidium o antgenos
recombinantes y pruebas no treponmicas (de escrutinio) que utilizan un
antgeno homlogo como la cardiolipina; una de estas pruebas es la de USR
(Unheated Serum Reagin) el reactivo es ms estable y no se requiere inactivar
el complemento cada vez, en comparacin a la prueba VDRL.
Los anticuerpos especficos aglutinan las partculas microscpicas de
cardiolipina, lecitina y colesterol.
El antgeno es producido bajo condiciones normales.
Presentaciones
300 pruebas con y sin controles
200 pruebas con controles
Otro material requerido:
Microscopio
Mquina rotatoria
2 tubos con heparina
Centrfuga
Micropipeta 10-100L
Mosaico
Pipeta de 1ml o jeringa estril
Almacenamiento y estabilidad
Conservar el reactivo y sueros control entre 275K a 281K. Los sueros control
una vez hidratados conservarlos entre 275K a 281K. El reactivo mantendr
sus propiedades durante el tiempo indicado en la etiqueta. Los sueros control
hidratados conservan sus propiedades durante 3 meses almacenados entre
275K a 281K.
Prueba cualitativa
Si se requiere hidratar los sueros control adicionar 0.5ml de agua
destilada dejar reposar un agitar manualmente.
Usar sueros o plasmas problema en buen estado (no turbio, no
hemolisado, no lipmico).
Perforar la retapa del frasco gotero con la aguja sin bisel.
Atemperar los reactivos.
1.- Colocar 50l de suero o plasma en un crculo de placa horadada y
distribuirlo.
2.- Adaptar la aguja al inserto. Agitar para homogenizar el reactivo y con el
frasco y aguja en posicin colocar una gota del reactivo sobre el suero
problema.
3.- Mezclar a 180rpm en la mquina rotatoria por 4 min.
4.- Determinar si hay floculacin del cristal al microscopio ptico con el objetivo
seco dbil.
Precauciones
Los sueros control no deben usarse como estndares de calibracin.
La prueba es inespecfica y debe complementarse con una prueba
treponmica y/o antecedentes clnicos.
El antgeno no debe congelarse
Cerrar el recipiente del antgeno para evitar su evaporacin.
Verificar ocasionalmente el reactivo con los controles positivo y negativo.
Manjese los sueros control y problema como si fueran capaces de
transmitir HBsAg, HIV, HCV y otras enfermedades.
Limitaciones
La prueba no es treponmica, su utilidad es de escrutinio para confirmar el
diagnstico, utilizar una prueba treponmica.
RESULTADOS
Se realiz la prueba para T. Pallidium por medio de la tcnica de USR
(Unheated Serum Reagin) para 2 sujetos, sin embargo los resultados no se
lograron observar por la falta de mquina rotatoria la cual sirve para
homogenizar el reactivo de manera adecuada, adems de que no se realiz
adecuadamente la perforacin de la tapa del gotero con los sueros control, por
lo cual no se logr observar la reaccin en el microscopio.
CONCLUSIONES
La U.S.R. (Unheated Serum Reagin) es una prueba no treponmica (de
escrutinio) que utilizan un antgeno homlogo como la cardiolipina la cual es
un reactivo es ms estable y no se requiere inactivar el complemento cada vez,
en comparacin a la prueba VDRL, por lo que esta tcnica corresponde a una
modificacin de la tcnica V.D.R.L. donde la suspensin de antgeno viene lista
para usar y se realiza en una lmina de vidrio con crculos de 14 mm de
dimetro, que se agita durante 4 minutos a 180 rpm en una mquina rotatoria y
se lee al microscopio con aumento 100x para observar si es que hay
positividad agregados por floculacin de los cristales formados.
Se denomina reagina a una protena similar a un anticuerpo, que se une a un
antgeno, como pueden ser la cardiolipina y la lecitina (en este casoi
cardiolipina) en las pruebas no-treponmicas, y se denomina anticuerpos
reagnicos a anticuerpos no-treponmicos, producidos por un individuo
infectado con T pallidum, contra sus propios tejidos o contra clulas de
mamferos. Los anticuerpos especficos aglutinan las partculas microscpicas
de cardiolipina, lecitina y colesterol.
La USR (Unheated serum reagin) tiene la ventaja que es poco costosa,
tampoco requiere de inactivacin de suero por calor y, al igual que otras
pruebas no treponmicas, tiene buena sensibilidad y especificidad
REFERENCIAS
http://www.ops.org.gt/epc/manualepi/Sifilis.pdf
http://www.facmed.unam.mx/deptos/salud/periodico/ets/trepo.html
http://sisbib.unmsm.edu.pe/BVrevistas/dermatologia/v10_sup1/pruebas_lab.htm