UNIVERSIDAD AUTNOMA DE TLAXCALA

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

LICENCIATURA EN QUMICA CLNICA

BIOLOGA CELULAR Y TISULAR (PRACTICA)
ALUMNO: RAMIREZ LIMON EFRAIN
DR. ESTHELA CUEVAS ROMERO
PRACTICA 1: MICROSCOPA
GRADO: 1 GRUPO: B
OBJETIVOS
1. Aprender a utilizar adecuadamente el microscopio, y los cuidados que este
requiere.
2. Observar preparaciones temporales o permanentes en el microscopio ptico.

INTRODUCCIN
El microscopio es un instrumento ptico que amplifica la imagen de un objeto
pequeo. Mediante un sistema de lentes y fuentes de iluminacin se puede hacer
visible un objeto microscpico. Los microscopios pueden aumentar de 100 a
cientos de miles de veces el tamao original. Los diversos elementos que existen
en la naturaleza, presentan tamaos, formas y composiciones distintas, la mayora
de ellas pueden verse, algunas a simple vista, y otras mediante instrumentos. Para
poder observar a la clula es necesario recurrir a equipos como el microscopio, de
este existen diversas variedades, los cuales estn diseados a lo que
pretendemos observar y como ejemplo tenemos a:

Microscopio ptico
Es un instrumento (de un lente o varios lentes), que amplifica una imagen y
permite la observacin de mayores detalles. El poder de resolucin del ojo
humano es de 0,2 mm es decir que para ver dos objetos separados estos deben
estar como mnimo a esa distancia. El microscopio aumenta la imagen hasta el
nivel de la retina, para captar la informacin. La resolucin depende de la longitud
de onda de la fuente luminosa, el espesor de la muestra, la calidad de la fijacin y
la intensidad de la coloracin. Tericamente la mxima resolucin que se puede
alcanzar es de 0,2 m dada por una luz con longitud de onda de 540 nm, la cual
pasa por un filtro verde (sensible por el ojo humano) y con objetos condensadores
adecuados. El ocular aumenta la imagen producida por el objetivo, pero no puede
aumentar la resolucin. Existen distintos microscopios pticos generales y de
investigacin que se diferencian en factores, tales como la longitud de onda de la
iluminacin, la alteracin fsica de la luz que incide en la muestra y procesos
analticos que se aplican a la imagen final.
El microscopio compuesto est formado por tres sistemas: 1. Sistema de
iluminacin; 2. Sistema ptico y 3. Sistema mecnico.

Sistema de iluminacin
Fuente de iluminacin: Es una lmpara halgena (6V) que permite el
encendido o el apagado con un interruptor y cuya intensidad puede ser graduada.
Puede tener en su parte superior un anillo para permitir la colocacin de filtros que
facilitan la visualizacin.
Diafragma de campo. Est situado en la base del microscopio y su funcin
es la de regular el dimetro de la emisin de la luz a fin de que se ilumine solo el
rea de campo visual, es decir, controla la cantidad de luz que atraviesa la
preparacin.
Condensador: Es un sistema de lentes situado bajo la platina que permite
concentrar la luz de la fuente de iluminacin hacia la preparacin.
Diafragma iris: Est en el interior del condensador y sirve para limitar el haz
de rayos que atraviesa el sistema de lentes eliminando los rayos demasiado
desviados (regula la luz y ajusta la apertura numrica).

Parte ptica
Oculares: Estn colocados en la parte superior del tubo y su funcin es
captar y ampliar la imagen obtenida por los objetivos. Actualmente se suelen usar
los microscopios binoculares que tienen dos oculares unidos por un mecanismo
que permite ajustar la separacin inter-pupilar. Son normalmente de x10 y x12.
Objetivos: Estn colocados en la parte inferior del tubo insertados en el
revlver y obtienen la imagen real aumentada e invertida. Son lentes que captan la
imagen a observar, estn construidos de cristal o fluorita, poseen aumento propio,
apertura numrica y est diseada para trabajar con diferentes campos. Todos los
objetivos tienen anillos de colores y nmeros grabados sobre el tubo metlico, que
nos permite saber a detalle cules son sus ventajas, la disposicin de estos
caracteres es la siguiente:
El anillo de color superior indica los aumentos

Aumentos Color anillo
superior
1.0X Negro
2.5X Pardo
4.0X Rojo
6.3X Anaranjado
10X Amarillo
16X Verde claro
25X Verde oscuro
40X Azul Claro
63X Azul oscuro
100X Blanco

El lado superior izquierdo indica el nmero de aumentos que se puede
lograr en un microscopio se obtiene multiplicando el nmero de aumentos que
tiene el ocular por el nmero de aumentos que tiene el tubo y por el nmero de
aumentos que tiene el objetivo con el que se est observando.
El lado superior derecho la apertura numrica. Es una medida de la
amplitud del cono luminoso que se forma por las lentes del microscopio, ya sea del
condensador o del objetivo.
El lado inferior la distancia mecnica que es la distancia que recorre a luz
por el interior del microscopio desde que penetra por el objetivo, pasando por los
tubos y espejos, hasta llegar al ocular, la distancia mecnica se mide desde la
superficie de la rosca del objetivo hasta la base del ocular, esta distancia en el
caso de nuestro microscopio es de 160 mm.
El lado inferior derecho el espesor del cubreobjetos. En ocasiones el
objetivo puede traer en lugar de 0.17, el nmero 1, el cual indica que: Acepta
cubreobjetos desde 0,17 a 0,22 mm de espesor, 10= No requiere cubreobjetos o
0,11 0,27 = Es ajustable a diferentes espesores de los cubreobjetos, desde 0,11
mm hasta 0,27 mm.
El anillo de color inferior indica en qu medio se hace la inmersin del
objetivo.

Poder de resolucin.El poder de resolucin de una lente se define como la
capacidad que tiene para discernir entre dos puntos muy cercanos entre s y que
puedan verse separada. El poder de resolucin del ojo humano es de 0,2 mm, el
microscopio ptico de 0,2 y el microscopio electrnico de 6 ngstrom.

Parte mecnica
Pie: Sirve de apoyo y para darle estabilidad al microscopio. En l est
integrada la fuente luminosa.
Brazo o estativo: Es una columna que parte del pie sirve para sujetar el
tubo. Puede ser recto o arqueado.
Tubo: Es una cmara oscura que est unida al brazo. En su parte inferior
est el revolver son los objetivos y en su parte superior los oculares.
Platina: Es una plataforma horizontal sobre la que se engancha con dos
pinzas el portaobjetos. Tiene en su zona central un orificio que permite el paso de
la luz y un sistema de cremallera manejado por dos tornillos que permiten el
movimiento de la muestra.
Revolver: Sujeta los objetivos y gira para permitir el cambio de objetivo.

Sistema de ajuste
Tornillo macromtrico: Tornillo de enfoque que mueve la platina hacia arriba
y hacia abajo de forma brusca y poco precisa.
Tornillo micromtrico: Tornillo de enfoque que mueve la platina hacia arriba
y hacia abajo de forma lenta y muy precisa.

PROCEDIMIENTO

Uso y manejo del microscopio ptico
1. Tomar el microscopio por el lado del brazo y de la base, nunca del lado o por la
platina porque se puede caer y daarse alguna de sus piezas pticas.
2. Asegrese de que estn limpias las piezas pticas.
3. Cuando se hagan las observaciones en inmersin, asegurarse de que el
objetivo sea el de inmersin, si se emplea otro objetivo y el aceite hace contacto
con ste puede desprender la lente. En las observaciones por inmersin el
aceite si hace contacto con el objetivo.
4. Para observar una preparacin lo que hay que hacer primero es:
5. Con el objetivo 10X, subir al mximo la platina sin perder de vista la separacin
de la preparacin y el objetivo.
6. Con la mirada en a travs de los oculares ir bajando la platina con el tornillo
macromtrico hasta encontrar la imagen.
7. Cuando ya se haya observado con ese objetivo, girar el revolver para observar
con el objetivo de 40X y observar.
8. Cuando ya se haya observado se gira nuevamente el revolver para observar
con el objetivo 100X que en esto microscopios, es el mximo aumento.
9. Para obtener una mejor visibilidad maneje el diafragma y la lmpara para una
mejor iluminacin.
10. Una vez enfocado la imagen, mover el tornillo micromtrico para una mejor
nitidez.
11. Al terminar de hacer las observaciones, limpiar escrupulosamente el ocular
con papel de seda especial para lentes, al igual que el objetivo.
12. Colocar los frotis en recipientes de punzocortantes, si son montados
entregarlos al profesor.
13. Apague el foco y desconecte,
14. Suba la platina a la posicin ms alta, transprtelo con ambas manos.

Tcnica de iluminacin mtodo Khler
A fin de evitar toda serie de inconvenientes y poder utilizar lmparas de
filamento espirilado, Khler propone un mtodo que actualmente es utilizado. Su
iluminacin comporta dos diafragmas: un diafragma denominado de campo,
situado generalmente a nivel de la lmpara colectora y un diafragma llamado de
abertura, situado generalmente debajo del condensador.

Pasos a seguir para la iluminacin de Khler en un microscopio
1. Se enfoca la muestra con el objetivo de menor aumento (4X o 10X)
2. Se sube completamente el porta-condensador con la lente frontal alineada.
3. Se cierra el diafragma de campo al mximo.
4. Se acerca el porta-condensador hasta obtener la mxima nitidez de la imagen
de diafragma de campo (polgono)
5. El condensador est en posicin correcta cuando se ven los anillos de Newton.
6. Se centra el polgono que se observa en el campo visual utilizando los tornillos
de centrado del condensador.
7. Se cierra el diafragma de iris a apreciacin personal (cuando la imagen sea
ntida)
8. Se abre el diafragma de campo hasta que desaparezca el polgono observado
en el borde del campo visual.

ANLISIS Y DISCUSIN DE RESULTADOS
La iluminacin Khler elimina la iluminacin dispareja en el campo de observacin
para que todas las partes de la fuente de luz contribuyan a la iluminacin del
espcimen. Existen dos tipos de iluminacin Khler, un mtodo en el cual la luz es
transmitida a travs del espcimen (transmitida) y otro mtodo cuando la luz es
reflejada desde el espcimen (incidente). La iluminacin Khler transmitida es
usada para especimenes transparentes o semitransparentes, mientras que la
iluminacin Khler incidente es til para objetivos como el metal, los cuales no
transmiten luz.
La iluminacin Khler requiere un lente colector en o cercano a la caseta lmpara
que pueda ser ajustado para enfocar la imagen del filamento de la lmpara al
frente del plano focal del condensador donde se posiciona el diafragma de
apertura. Si la imagen del filamento de la lmpara est centrado apropiadamente y
llena por completo la apertura, la iluminacin del plano del espcimen es brillante y
uniforme. Para asegurar que el filamento de la imagen aparezca en plano focal del
condensador, la altura del condensador debe ser ajustada con frecuencia. Este es
un ajuste crtico que junta los dos conjuntos de planos conjugados (referidos como
el conjunto de campo y el conjunto de apertura) en ubicaciones fsicas precias
dentro del tren ptico del microscopio, y maximiza el desempeo del microscopio.
Ventajas y desventajas de microscopios
MICROSCOPIO
DE LUZ
MICROSCOPIO
ELECTRONICO
Iluminacin Haz de luz Haz de electrones
Longitud de onda 2000 - 7500 0.037 - 0.086
Lentes Vidrio Electromagnticas
Medio Atmsfera Vaco
Resolucin 2000 3
Magnificacin 10 x - 2000 x 100 x - 450000 x
Focalizacin Mecnica Elctrica
Contraste Absorcin - Reflexin Scattering


CONCLUSIONES
Al finalizar esta prctica pude entender el porqu el microscopio es una de las
herramientas creadas para el desarrollo de la investigacin microscpica. Ya que
el microscopio se utiliza para examinar objetos muy pequeos situados a muy
corta distancia del lente objetivo.
Durante el desarrollo de esta prctica conoc las diferentes partes del microscopio,
sus usos, ventajas y desventajas de los mismos, en este caso del microscopio
ptico compuesto.
Con ayuda de este reporte pude observar diversos y diferentes tipos de clulas,
permitindome conocer su forma y su desplazamiento en su medio.

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
http://es.wikipedia.org/wiki/Microscopio_compuesto
http://html.rincondelvago.com/microscopio_8.html
http://colegiocristorey.com/nenuca/uca/biologia/biologia_2_bcc/biologia_2_bcc_apuntes_micros
copio.pdf
http://bioservice77.fullblog.com.ar/ventajas-y-desventajas-entre-el-microscopio-electr.html