Processos de sinalizao celular

Transduo de sinais
Cncer
Diabetes
Alzheimer
AIDS
Angina
Clera
.entre outras
Transduo de sinais
A mensagem deve ser convertida de uma forma em outra durante
a sua jornada e reter o seu contexto original
CRESCIMENTO
SOBREVIVNCIA
PROLIFERAO
Molcula sinalizadora
TRANSDUO DE
SINAIS
DIFERENCIAO
MIGRAO
(1) Sntese da molcula sinalizadora por
uma clula
(2) Liberao da molcula pela clula
sinalizadora
(3) Transporte da molcula sinalizadora
para a clula alvo
(4) Interao da molecla sinalizadora
com um receptor celular na clula alvo
(5) Desencadeamento da sinalizao
intracelular
(6) Alterao do metabolismo, funo,
expresso gnica ou desenvolvimento
da clula alvo
(7) Remoo do sinal e consequente
trmino da resposta celular
Passos envolvidos na comunicao
clula-clula
Sinalizao endcrina
Vaso sanguneo
Secreo do hormnio
pela glndula endcrina no
vaso sanguneo
Clulas alvo distantes
Sinalizao parcrina
Clula secretora
Clula alvo adjacente
Sinalizao clula-clula
Clula sinalizadora Clula alvo adjacente
Molculas sinalizadoras podem atuar
localmente ou a distncia
Sinalizao autcrina
Stios alvos sobre a mesma clula
Sinal extracelular
Receptor
Agentes sinalizadores
1. Peptdeos e protenas (insulina e
PDGF)
2. Esterides (estradiol, testosterona)
3. Gases solveis (NO, CO)
4. Nucleotdeos, retinides, derivados
de cidos graxos
5. Luz
Natureza das molculas sinalizadoras
Hidroflicas
Hidrofbicas
Receptores de superfcie
Receptores intracelulares
Molcula
hidroflica
receptor
m. plasmtica
Molcula
hidrofbica
carreador
ncleo
Receptor intracelular
Hormnios esterides e seus receptores intracelulares
inibidor
DT
DL
DT
DL
Ncleo
citoplasma
DNA
Receptores de superfcie
Receptores de canais inicos
Receptores acoplados a protena G
Receptores com atividade quinase Receptores sem atividada
quinase
1
3
2
RECEPTORES ACOPLADOS A PROTENA G
(GPCR)
1. Odor e paladar
2. Percepo da luz
3. Neurotransmissores
4. Funes endcrinas
5. Quimiotaxia
6. Exocitose
7. Controle da presso arterial
8. Embriognese
9. Crescimento e diferenciao celulares
10. Oncognese
Funes Biolgicas dos GPCRs
Metade de todas as drogas conhecidas utilizam
como alvo os GPCRs
O projeto genoma revelou um vasto nmero de
novos GPCRs (receptores orfos - possveis
alvos para novas drogas)
Domnios de
interao
com a protena G
extracelular
intracelular
Receptores acoplado a protena G (GPCR)
A classe mais numerosa de receptores superfcie (fungos - mamferos)
Mamferos: clulas olfatrias usam de 500 a 1000 diferentes GPCrs
e outras clulas usam outros 500 diferentes tipos de GPCRs para responder a
diversos estmulos
Porcentagem
Estimada
No genma
Protena G trimrica
Diferentes tipos de subunidades G
2. Diversity.
-large variety of different agonists
TARGET TISSUE HORMONE MAJ OR RESPONSE
Thyroid gland thyroid-stimulating hormone
(TSH)
thyroid hormone synthesis and
secretion
Adrenal cortex adrenocorticotrophic hormone
(ACTH)
cortisol secretion
Ovary luteinizing hormone (LH) progesterone secretion
Muscle adrenaline glycogen breakdown
Bone parathormone bone resorption
Heart adrenaline increase in heart rate and force
of contraction
Liver glucagon glycogen breakdown
Kidney vasopressin water resorption
Fat adrenaline, ACTH, glucagon,
TSH
triglyceride breakdown
2. Diversity (of physiological responses to GPCR stimulation)
M. Plasmtica Protena G
GPCR
Molcula
Sinalizadora
Espao
extracelular
citosol
Protena G ativada
Subunidade

ativada
Mecanismo de ativao
dos GPCRs
Subunidade
ativada
Protena alvo
Ativao da protena alvo
Pela subunidade
inativao
Reconstituio da
protena G trimrica
Protena alvo inativa
subunidades G apresenta atividade
GTPsica = so capazes de hidrolizar
GTP em GDP
Subunidade
ativada
Enzima ativada
Sntese de molculas mensageiras que atuam
em protenas alvo intracelulares
Substrato
Enzima
substratos
Segundos
mensageiros
Protena G

pode ativar ativa canais inicos
Canal de K
+
Substratos alvos ativados pelos
GPCRs
Os maiores segundo
mensageiros produzidos a
partir da ativao dos
GPCRs:
cAMP
Inositol trifosfato
(IP3)
Diacilglicerol (DAG)
Canal de K+
Adenilato
ciclase
cAMP
PKA
PLC-
IP3 DAG
Ca
2+
PKC
Mecanismo de ativao
da Adenilato-ciclase por GPCRs
Molcula
sinalizadora
Adenilato-ciclase
ativada
receptor
Subunidade
ativada
AMP cclico
Protena quinase A
(PKA) inativa
Protena quinase A
(PKA) ativa
Protena quinase A
(PKA) ativa
Poro nuclear
Fosforila e ativa o fator de
transcrio CREB que regula
a expreso gnica
CREB inativo
Gene alvo ativado
Transcrio
Traduo
Nova protina
Mecanismo de ativao
da Adenilato-ciclase
AMP cclico-PKA estimula a quebra de glicognio
mas inibe a sua sntese
Aumento do AMPc
Estimulao da quebra de
glicognio
Inibio da sntese de
glicognio
Enzimas fosfodiesterase
catalizam:
AMPc + H
2
O AMP
A fosfodiesterase que cliva o
AMPc ativada pela PKA
Assim, o AMPc estimula a sua
prpria degradao levando a
uma rpida dimuio do sinal
gerado pelo AMPc
N
N
N
N
NH
2
O
OH
O
H
H
H
H
2
C
H
O
P
O
O-
1'
3'
5'
4'
2'
cAMP
GPCR
Gs
Adenilato-ciclase
AMPc
PKA
GPK
GP
Glucose 1- fosfato
GS
CREB
Transcrio gnica
Quebra do glicognio
Inibio da sntese de glicognio
PKA = protena quinase A
GPK = quinase glicognio fosforilase
GP = glicognio fosforilase
GS = glicognio sintase
= ativao
=inibio da
ativao
P
P
P
P
Fosfodiesterase
de
AMPc
Ncleo
citoplasma
adrenalina
Algumas Respostas celulares mediadas pelo
AMP cclico
Molcula sinalizadora Tecido-alvo Resposta principal
Adrenalina cardaco Aumento da taxa e fora
de contrao cardaca
Adrenalina muscular Degradao de glicognio
ACTH e glucagon adiposo Degradao de gordura
Receptor
-adrenrgico
Receptor
-adrenrgico
Complexo G
estimulatrio
Complexo G
inibitrio
Controle da ativao da Adenilato-ciclase
depende da classe de protena G trimrica ativada
Hormnio
estimulatrio
Hormnios
inibitrios
Adenilato
ciclase
Efeito de exotoxinas bacterianas sobre a ativao
dos GPCRs
Interage com resduos de arginina de Gs
e inibe a sua atividade GTPsica trancando
Gs no seu estado ativo
Interage com resduos de cistena de Gi
impedindo a sua interao com GPCR
permanecendo no estado inativo
Toxina do clera
Toxina pertussis
Mecanismo de ativao da Fosfolipase C
atravs da ativao do GPCR
Molcula sinalizadora
GPCR
Fosfolipase C-
fosfatidil inositol
bi-fosfato (PIP2)
diacilglicerol
subunidade G
ativada inositol tri-fosfato
protena quinase C
(PKC)
Canal de Ca
+2
Lmem do reticulo
endoplasmtico
Mecanismo de ativao da fosfolipase C
calmodulina
Ca/calmodulina
Quinase
Inativa
ativa
ativa
Inativa
Domnio
cataltico
Ca
+2
/calmodulina
Ativa Ativao
total
Auto-fosforilao
calmodulina
Protena fosfatase
Domnio inibitrio
Mecanismo de ativao da Calmodulina quinase (CaM-quinase)
GPCR
Fosfolipase C
DAG IP3
Ca
+2
PKC
Calmodulina
Calmodulina
Quinase
CaM-quinase abundante nas sinapses
Importantes para a memria
Proliferao celular
Sinalizao induzida pela luz em clulas
Fotorreceptoras bastonadas da retina
Bastonete da retina
Luz
citosol
lmem
Disco
Fosfodiesterase
inativa
Fosfodiesterase
ativa
Membrana
plasmtica
dos
bastonetes
Fechamento do canal inico
abertura do canal inico
Diminui a conc.
De GMPc
aumenta a conc.
de GMPc
Adaptada ao escuro
rodopsina
Classe da
protena G
Efetor alvo 2 mensageiro Ex. de receptores
Gs
Adenilato-ciclase AMPc (aumento)
Receptor -adrenrgico,
Receptor para glucagon,
serotonina, vasopressina
Gi
G
Adenilato-ciclase
Canal de K+
AMPc (diminuio)
Receptor -adrenrgico,
receptor acetilcolina
Golf
Adenilato-ciclase AMPc (aumento)
Receptores de olfato
Gq
Fosfolipase C IP3 e DAG
(aumento)
Receptores 2-
adrenrgico
Gt
GMPc
fosfodiesterase
GMPc (diminuio)
Rodopsina (receptores de
luz)
Principais classes de protena G trimrica
e seus efetores
Atenuao da ativao dos GPCRs
1- Protena G se descomplexa do receptor em resposta
fosforilao do receptor;
2- Internalizao dos receptores em compartimentos
intracelulares;
3- Down regulation da sntese de novo receptor
4- Degradao lisossomal dos receptores internalizados
Molecular mechanisms involved in the
GRK- and -arrestin-dependent desensitization
and internalization of GPCRs
-Arrestin-dependent regulation of GPCR trafficking
and the mechanisms involved in GPCR resensitization
Model depicting the regulation of 2AR internalization,
trafficking, dephosphorylation, and recycling
NO signaling
The Nobel Prize in
Physiology or
Medicine 1998
"for their discoveries concerning nitric oxide as a signalling
molecule in the cardiovascular system"
Robert F.
Furchgott
Louis J.
Ignarro
Ferid Murad
USA USA USA
SUNY Health
Science Center
Brooklyn, NY,
USA
UCLA School of
Medicine
Los Angeles, CA,
USA
University of Texas,
Health Science
Center
Dallas, TX, USA
1916 - 1941 - 1936 -
xido ntrico (NO)
- Diversas atividades biolgicas (funciona como segundo mensageiro)
NOS 1 ou NOS neuronal
NOS 2 ou NOS endotelial
NOS 3 ou NOS induzida
Arginina
+
O
2
Citrulina
NOS
(nNOS, eNOS, iNOS)
NO
NO sintases (NOS)
Ca
+2
acetilcolina
GPCR
Fosfolipase C
Relaxamento da
musculatura lisa
Clulas da musculatura lisa
Clulas
endoteliais
Lmem do vaso
sanguneo
Estimulao
sexual
Guanilato
ciclase
fosfodiesterase
Relaxamento
da
musculatura lisa
Ereo
NO
GMP cclico
GMP
PKG
Relaxamento da
musculatura lisa
Guanilato ciclase
GMPc
Fosfodiesterase
xido ntrico (NO)
NO Cys SNO
+
Modificao ps-traducional
Processo reversvel
(depende do equilibrio redox)
NO e nitrosao protica
Importante na sinalizao celular
Protenas G
Quinases
Fosfatases
Metaloproteases
Caspase 3
J oan B. Mannick
JCB., Vol. 278, 2003
Casp.3-SNO
Mito
Estmulo apopttico
sobrevivncia
Casp-3-SNO
apoptose
1 - Receptores com atividade quinase intrnsica
Receptores tirosina quinase (RTK)
(Receptores de fatores de crescimento)
Receptores serina/treonina quinase
(Receptores da famlia TGF-)
2- Receptores sem atividade enzimtica
(Receptores de citocinas)