Enzimas

E + S ESEP E + P
Caractersticas
Biocatalizadores Aceleran las reacciones qumicas ------ de forma globular
Estreo especificidad Tiene sustratos especficos.
Arginina Arginasa
Urea Ureasa
Lisina, Arginina Pepsina, Tripsina y Amilasa.
Aceleran reacciones 10
3
-10
20
Reacciones Acopladas Catabolismo y anabolismo
Son oligomricas regulan rutas metablicas

Actan en una solucin acuosa tienen un ph y temperatura ptimos







Una enzima puede transformar 1000 molculas de sustrato/ segund
Algunas necesitan de un cofactor














Caractersticas que los catalizadores normales no tienen
Especificidad por el sustrato
Se inactivan por desnaturalizacin
Pueden ser reguladas
Enzimas que requieren elementos inorgnicos
Citocromo oxidasa
Catalasa, peroxidasa
Fe
2+
, Fe
+
,
Citocromo oxidasa Cu
2+

DNA polimerasa
Anhdrasa carbnica
Alcohol deshidrogensa
Zn
2+

Hexoquinasa
Glucosa 6-fosfatasa
Mg
2+

Arginasa Mn
2+

Piruvato quinasa K
+
, Mg
2+

Ureasa Ni
2+

Nitrato reductasa Mo
2+

Pepsina 1.5
Tripsina 7.7
Catalasa 7.6
Arginasa 9.7
Fumarasa 7.8
Ribonucleasa 7.8
Enzima pH ptimo

Proceso de las enzimas
Las enzimas se unen a los reactivos (sustratos) reduciendo la energa de activacin
Cada enzima tiene una forma nica con un sitio o centro activo en el que se une al sustrato
Despus de la reaccin, enzimas y productos se separan.
Las molculas enzimticas no han cambiado despus de participar en la reaccin.

Clases de enzimas



Como detectar una enzima:
1. Actuacin global de la reaccin catalizada.
2. Utilizar un procedimiento analtico para la determinacin de S
que desaparece o los productos de la reaccin que aparecen.
3. Si la enzima requiere cofactores (ines metlicos o coenzimas).
4. La dependencia de la actividad enzimtica con la [S] o sea K
M
del S.
5. El pH ptimo.
6. Un intervalo de temperatura en la que la enzima es estable y
muestra actividad elevada.

Una apoenzima es una enzima sin coenzima que cuando se une a ella se
convierte en holoenzima


Centro Activo
Fijar especficamente al substrato
Transformarlo catalticamente.
La unin del sustrato es muy especfica
Modelos:
Encaje inducido: Tanto la enzima como el substrato sufren una alteracin en su estructura por el
hecho fsico de la unin
Llave cerradura: El sustrato y la enzima se une especificamente como una llave y una cerradura
Estado de transicin: el Centro Activo enzimtico es en realidad complementario estado de
transicin entre ambos.
Estabilizacin del Estado de Transicin el Centro Activo enzimtico es en realidad
Complementario a la transicin entre ambos.


Una enzima puede unir dos sustratos en su sitio activo

CINTICA ENZIMTICA
Anlisis cuantitativo del efecto de cada uno de los factores que intervienen en la actividad enzimtica, que se evala
a travs de la velocidad de la reaccin catalizada.

variables ms importantes son:
Concentracin de enzima, sustratos y productos (inhibidores y/o
activadores)
pH
Temperatura

la velocidad de reaccin (pendiente) disminuye
Desaturacin de la enzima con sustrato, por disminucin de la
concentracin del sustrato
Inactivacin de la enzima por su inherente inestabilidad
Inhibicin por el producto
Desplazamiento del equilibrio, si la reaccin es reversible

Hiptesis de estado estacionario El tiempo de la reaccin en el que la variacin de complejo [ES]
es prcticamente igual a cero - nos da la velocidad para la concentracin de substrato.

La concentracin de sustrato es importante ya que -A mayor Km, menor es la afinidad de la enzima
por el sustrato -A menor Km mayor es la afinidad de la enzima por el sustrato.
Definicin Actividad EnzimticaEs el nmero de moles de sustrato que reaccionan para formar
producto, por mol de enzima y por unidad de tiempo

Enzima est plenamente saturada con sustrato Por tanto que la reaccin se efecta con su
mxima rapidez

El ndice de recambio muestra la eficiencia impresionante de la catlisis enzimtica

Efecto del pH:
1. Sobre la fijacin del substrato al centro activo:
- Grupos disociables de la enzima
- Grupos disociables del substrato
2. Sobre la transformacin cataltica del substrato
3. Sobre la estructura de la protena enzimtica
Cada enzima tiene un pH ptimo para su actividad
El pH afecta las interacciones inicas


ORGANISMOS TERMFILOS Viven

Coenzimas
Las coenzimas son pequeas molculas orgnicas, que se unen a la enzima. Coenzimas colaboran en
la reaccin enzimtica recibiendo transitoriamente algn grupo qumico: H
+
, OH, CH
3
. La enzima sin la
coenzima recibe el nombre de APOENZIMA

Isoenzimas o Isozimas
Son formas moleculares diferentes de una misma enzima
Catalizan la misma reaccin
Ejemplo: Lactato deshidrogenasa
Lactato + NAD ==== Piruvato + NADH
M
4
, M
3
H
1
, M
2
H
2
, M
1
H
3
y H
4

Se diferencian por su movilidad electrofortica
Usadas en clnica: sueros normales y sueros con alguna patologa

Inhibidor:
Efector que hace disminuir la actividad enzimtica, a travs de interacciones con el centro activo u
otros centros especficos (alostricos).
Isostricos: ejercen su accin sobre el centro activo



En este tipo de inhibicin el inhibidor se enlaza al centro activo pero solo despus de que el
sustrato lo haya hecho

Como I solo se une a ES estimula la formacin de ES y, por tanto, incrementa la unin del sustrato
a la enzima, disminuyendo Km. Sin embargo, el complejo ESI no conduce a productos y Vm
disminuye.


Alostricos: ejercen su accin sobre otra parte de la molcula que no es el centro activo.


1. Reactivos de grupos -SH
2. Organofosfricos
3. Ligandos de metales
4. Metales pesados

Tanto la inhibicin como la activacin son reversibles.
El agente modificador acta unindose a la E en un sitio diferente al sitio cataltico
Las enzimas alostricas presentan estructura cuaternaria.
Tienen diferentes sitios activos, unen mas de una molcula de sustrato
La unin del sustrato es cooperativa
la curva de velocidad presenta una forma sigmoidal


Moduladores, modificadores o efectores alostricos no son inihibidores
Positivos o negativos para la AE.
Efector Homotrpico: el propio sustrato acta como efector positivo.
Efector Heterotrpico: efector diferente del sustrato.


Regulacion Enzimatica
La AE en las clulas se ajustan a las necesidades fisiolgicas, cambiantes permanentemente.
A [S] bajas, la AE es proporcional a los niveles de S.
En condiciones fisiolgicas, la [S] se encuentra por debajo o prxima al Km, as los niveles de S,
determinarn la mayor o menor AE.
A mayor [S] mayor AE
La E que cataliza la primera etapa de una va metablica suele ser
Los seres vivos han generado mecanismos para regular las rutas bioqumicas.
La regulacin es esencial por las siguientes razones:
Mantenimiento de un estado ordenado no hay desperdicio de recursos.
Conservacin de la energa utilizacin de la En suficiente en las clulas, para consumir los
nutrientes segn sus necesidades energticas.
Respuesta a variaciones ambientales son los ajustes rpidos que deben realizar las clulas
(pH, [S], TC), por su capacidad de aumentar o disminuir la velocidad de las reacciones
especficas.


Regulacion covalente
Adicin o remocin de grupos fosfato sobre residuos de Serina, Treonina o Tirosina especficos
de la enzima.












La bioenergtica
Es el estudio cuantitativo de las transformaciones
(transducciones) de energa que ocurren en las
clulas vivas, y de la naturaleza y funcin de los
procesos qumicos que sustentan dichas
transformaciones.
Es la disciplina que estudia los aspectos energticos
en los sistemas vivos, tanto a nivel molecular como a
nivel celular.

La energa libre de Gibbs G, representa la energa
que puede realizar trabajo. Si se libera G, los
productos tienen menor G, el cambio es negativo, la reaccin es exergnica.
Si la reaccin es endergnica, el sistema gana G, es positivo

La entalpa, H, representa el contenido de calor del sistema.
Si se libera calor, se trata de una reaccin exotrmica, H es < 0
Si se requiere calor, reaccin endotrmica, H es >0

La entropa, S, es una expresin cuantitativa del desorden o probabilidad del sistema,
A temperatura y presin constante.

Leyes Termodinmicas

Ley :La primera ley es el principio de conservacin de la energa y nos dice que la energa ni se
crea ni se destruye, tan solo se transforma.
2 Ley: Cuando dos cuerpos se encuentran en contacto fluye calor del cuerpo caliente al
cuerpo fro
3 Ley: La entropa de cualquier sustancia pura en equilibrio termodinmico tiende a cero a
medida que la temperatura tiende a cero.

TRANSFORMACIONES ENERGETICAS Fotosntesis respiracin celular, gluclisis

Los seres Vivos convierten la energa de una forma en otra a medida que cumplen funciones
esenciales de mantenimiento, crecimiento y reproduccin

El total de las rx qum. que ocurren en las cl.constituyen el metabolismo

Interacciones Fundamentales
Interaccin Gravitacional (masa-masa)
Interaccin Electromagntica (carga-dipolo)
Interaccin Nuclear Dbil (electrones-ncleo)
Interaccin Nuclear Fuerte (protones-neutrones)
Los Sistemas Biolgicos son guiados fundamentalmente por Interacciones Electromagnticas
Enlaces Covalentes
Enlaces No-covalentes (Interacciones Dbiles):
Puentes de Hidrgeno
Efecto Hidrofbico
Interacciones Inicas
Interacciones In-Dipolo
Interacciones Dipolo-Dipolo
Fuerzas de Van der Waals

Calor: Es la energa cintica que se propaga debido a un gradiente de temperatura, cuya direccin es
de mayor temperatura a menor temperatura

Energa Gibbs
G=H-TS
La energa libre es la fraccin de la energa que se puede utilizar para realizar trabajo en condiciones
de presion, volumen y temperatura constante
dG<0 proceso exergnico (espontneo)
dG>0 proceso endergnico



La entalpa es la fraccin de la energa que se puede utilizar para realizar trabajo
dH<0 proceso exotrmico
dH>0 proceso endotrmico

Es la medida de la energa cintica interna de un sistema molecular ----- Temperatura









Fructosa

Pertenece al subgrupo de las cetohexosas que son de alto inters biolgico. Formaciones: Es
transformada rpidamente en glucosa en el hgado y en el intestino grueso para ser utilizada como
fuente rpida de energa. Forma parte de la sacarosa, junto con la glucosa.

Digestin y absorcin
Los microorganismos en el rumen permiten la vaca obtener energa de los carbohidratos
fibrosos (celulosa y hemicelulosa).
La presencia de fibra en partculas largas es necesaria para estimular la ruminacin. La
ruminacin aumenta la separacin y fermentacin lenta.
bicarbonato de sodio y fosfatos que ayudan a mantener la acidez (pH) del contenido del rumen
en un pH casi neutral.
carbohidratos no-fibrosos (almidones y azucares) fermentan rpidamente y completamente
en el rumen, los carbohidratos no-fibrosos no estimulan la ruminacin.
en exceso pueden inhibir la fermentacin de fibra.As, el equilibrio entre carbohidratos
fibrosos y no-fibrosos es importante.
El rumen, el hgado y la glndula mamaria son los principales rganos involucrados en el
metabolismo de carbohidratos
Bacteria, fermenta los carbohidratos para producir energa, gases (mtano - CH4 y bixido de
carbn - CO2), calor y cidos.El cido actico (vinagre), cido propionico y cido butirico son
cidos grasas voltiles (AGV) y conformen la mayora (>95%) de los cidos producidos en el
rumen
La energa y los iso-acidos producidos durante la fermentacin son utilizados por las bacteria
para crecer (es decir principalmente para sintetizar protena).
El CO2 y CH4 son eructados
Los AGV son productos finales de la fermentacin microbial y son absorbidos a travs de la
pared del rumen.
Acetato, butirato, todo el propionato son transportados al hgado.
Las ketonas son la fuente principal de energa (combustible). provienen principalmente del
butirato producido en el rumen.
Todo el propionato se convierte a glucosa en el hgado
grandes cantidades de concentrados ricos en almidn o una fuente de almidn resistente a la
fermentacin rumenal.
Lactata es una fuente alternativa de glucosa para el hgado.
La produccin de lactata en el rumen ocurre cuando hay un exceso de almidn en la dieta.















Balance energtico