Instituto Politcnico Nacional.

Unidad Profesional Interdisciplinaria en Ingeniera y

Tecnologas Avanzadas.
Instrumentacin Clnica y de Laboratorio
EnsayoGlucosayLactosa.
Por:
A. Manzanrez-Salmern y R. Bayareh-Mancilla
2014

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Glucosa (C6, H12, O6).
Definicin
La glucosa es un monosacrido con frmula molecular C6H12O6. Es una hexosa, es decir, que contiene 6
tomos de carbono, y es una aldosa, esto es, el grupo carbonilo est en el extremo de la molcula. Es una
forma de azcar que se encuentra libre en las frutas y en la miel. Su rendimiento energtico es de 3.75
kilocaloras por cada gramo en condiciones estndar, est presente en la sangre humana en concentracin
de 65-110 mg/100 ml.

Introduccin
La glucosa es una de las principales molculas que sirven como fuentes de energa para las plantas y los
animales. Se encuentra en la savia de las plantas y en el torrente sanguneo humano, donde se conoce
como "azcar en la sangre". La concentracin normal de glucosa en la sangre es de aproximadamente
0,1%, pero se vuelve mucho ms alta en personas que sufren de diabetes.

Cuando se oxida en el cuerpo en el proceso llamado metabolismo, la glucosa produce dixido de carbono,
agua, y algunos compuestos de nitrgeno, y en el proceso, proporciona energa que puede ser utilizada
por las clulas. Como fuente de energa primaria en el cuerpo, no requiere digestin y, a menudo se
proporciona a las personas en hospitales como nutriente, por va intravenosa.
La energa a partir de la glucosa se obtiene por medio de la reaccin de oxidacin:

C6H12O6 + 6O2 --> 6CO2 + 6H2O
La glucosa es la principal fuente de energa para el metabolismo celular. Se obtiene fundamentalmente a
travs de la alimentacin, y se almacena principalmente en el hgado, el cual tiene un papel primordial en
el mantenimiento de los niveles de glucosa en sangre (glucemia). Para que esos niveles se mantengan y
el almacenamiento en el hgado sea adecuado, se precisa la ayuda de la insulina, sustancia producida por
el pncreas. Cuando la insulina es insuficiente, la glucosa se acumula en sangre, y si esta situacin se
mantiene, da lugar a una serie de complicaciones en distintos rganos. Esta es la razn principal por la
que se produce aumento de glucosa en sangre, pero hay otras enfermedades y alteraciones que tambin
la provocan.
Por tanto, la determinacin de glucosa en sangre (glucemia) es til para el diagnstico de numerosas
enfermedades metablicas, fundamentalmente de la diabetes mellitus. Tambin es necesaria esta
prueba, una vez diagnosticada la diabetes, para controlar la dosis de insulina que se debe administrar para
tratarla.
La determinacin de glucosa en orina (glucosuria), suele formar parte del anlisis de orina rutinario. En
condiciones normales, no debera haber glucosa en la orina, pero cuando la cantidad en sangre supera un
determinado lmite, empieza a ser eliminada a travs del rin con la orina.
Cuanta ms cantidad de glucosa haya en la sangre, ms se eliminar por la orina. La determinacin en
orina es menos exacta y menos til que la determinacin en sangre.




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- Glucemia en condiciones basales:
Esta prueba precisa un periodo previo de ayuno de no menos de 8 horas y no ms de 16 h.; se puede
beber agua. Si la persona que se va a realizar la prueba se inyecta insulina o toma antidiabticos orales,
no deber usarlos hasta despus de obtener la muestra de sangre. Dicha muestra puede obtenerse de
una vena del brazo (cuando se van a cuantificar ms parmetros adems de la glucemia) o por puncin
digital (en la yema de uno de los dedos de la mano) para medir solamente la glucemia poniendo en
contacto la muestra con una tira reactiva.
En cualquiera de los dos casos se aplicar presin unos minutos en el punto de puncin tras la extraccin
de la muestra, y despus se comprobar que no haya hemorragia. Es aconsejable que el paciente coma
algo despus de la prueba.

- Glucosuria:
El paciente debe orinar 30 - 60 minutos antes de una comida, despreciar esa muestra, beber dos vasos de
agua y volver a orinar unos minutos despus. Esta segunda muestra es la que se utilizar para cuantificar
la glucosa en orina.

Resultados
Glucemia normal:
- Recin nacidos: 30 - 60 mg/dl
- Lactantes: 40 - 90 mg/dl
- Nios menores de 2 aos: 60 - 100 mg/dl
- Nios mayores de 2 aos y adultos: 70-105 mg/dl

- Glucosuria normal:
- Muestra de orina tomada al azar: negativa
- Muestra de orina de 24 horas: < 0.5 g/da

A qu se deben los valores anormales?
La hiperglucemia o elevacin de los niveles de glucosa en sangre, puede estar causada por diversas
enfermedades o situaciones anormales:
- Diabetes mellitus
- Situaciones de estrs agudo
- Enfermedad de Cushing
- Feocromocitoma
- Hiperparatiroidismo
- Pancreatitis
- Tratamiento con frmacos diurticos
- Tratamiento con corticoides
- Acromegalia

- La hipoglucemia o disminucin de los niveles de glucosa en sangre puede estar causada por las
siguientes enfermedades:
- Insulinoma
- Hipotiroidismo
- Hipopituitarismo
- Enfermedad heptica extensa

- Los niveles de glucosuria pueden estar aumentados a causa de:

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- Diabetes mellitus
- Sndrome de Cushing
- Estrs severo
- Infeccin
- Frmacos
- Embarazo
- Umbral renal bajo

Diabetes Mellitus

La diabetes mellitus (DM) es un conjunto de trastornos metablicos, que comparten la caracterstica
comn de presentar concentraciones elevadas de glucosa en la sangre (hiperglicemia) de manera
persistente o crnica. La American Diabetes Association, clasifica la diabetes mellitus en 3 tipos: la
diabetes mellitus tipo 1, en la que existe una destruccin total de las clulas , lo que conlleva una
deficiencia absoluta de insulina; la diabetes mellitus tipo 2 o no insulinodependiente, generada como
consecuencia de un defecto progresivo en la secrecin de insulina, as como el antecedente de resistencia
perifrica a la misma; la diabetes gestacional, la cual es diagnosticada durante el embarazo; y otros tipos
de diabetes ocasionados por causas diferentes.

La causan varios trastornos, siendo el principal la baja produccin de la hormona insulina, secretada por
las clulas de los islotes de Langerhans del pncreas endocrino, o por su inadecuado uso por parte del
cuerpo, que repercutir en el metabolismo de los hidratos de carbono, lpidos y protenas. La diabetes
mellitus y su comorbilidad constituyen una importante causa de preocupacin en salud pblica.

Los sntomas principales de la diabetes mellitus son emisin excesiva de orina (poliuria), aumento anormal
de la necesidad de comer (polifagia), incremento de la sed (polidipsia), y prdida de peso sin razn
aparente. En ocasiones se toma como referencia estos tres sntomas (poliuria, polifagia y polidipsia o regla
de las 3P) para poder sospechar diabetes tipo 2 ya que en su mayora son los ms comunes en la poblacin.



GLUCOMETROS

Un glucmetro es un instrumento de medida que se
utiliza para obtener la concentracin de glucosa en
sangre (glucemia), de forma instantnea.
La mayora de los glucmetros en la actualidad
realizan esta lectura a travs de la reaccin de una
enzima que se llama glucosa oxidasa que se
encuentra en las tiras reactivas aunque tambin se
utilizan otras enzimas, esto provoca la oxidacin de
la glucosa generando un cambio de color que vara
dependiendo de la cantidad de glucosa que hay en la
sangre, entre ms oscuro es el color, mayor ser la
cantidad de glucosa.

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Los glucmetros porttiles presentan una serie de ventajas con respecto a la rapidez en la obtencin del
resultado y a la cercana al paciente, que en teora, permiten una mejor estrategia para su manejo.
Desde el inicio de la utilizacin de los dispositivos porttiles para la medicin de glucemia se han
modificado las caractersticas de la prueba para conseguir fundamentalmente determinaciones mas
fiables pero tambin para lograr otra serie de ventajas, como la utilizacin de menor volumen de muestra,
menor tiempo de reaccin, y mayor seguridad en cuanto a la exactitud de la medida. La medicin de la
concentracin de glucosa con dispositivos porttiles es un mtodo invasivo aunque sea de forma mnima,
ya que precisa una puncin con microagujas o microlancetas. No obstante, en los ltimos aos se estn
desarrollando otro tipo de instrumentos que evitan la puncin, como la utilizacin de biosensores
transdrmicos.
Despus, la forma en que se obtiene el resultado puede variar, algunos glucmetros utilizan un proceso
llamado fotometra de reflectancia que mide la cantidad de luz reflejada por la tira una vez que ha
reaccionado con la sangre, esto es, verifica el color que ha adoptado la sangre y presenta el valor
correspondiente a dicho color.
Otros glucmetros utilizan tecnologa electroqumica para conocer el resultado: una vez que se ha dado
la oxidacin de la glucosa, se pasa una corriente elctrica a travs de la tira, la cantidad de corriente que
pase ser proporcional a la concentracin de glucosa en la sangre y a continuacin se muestra en pantalla
el resultado.
Tipos de mtodos de medida en funcin del sistema de deteccin
Mtodos electroqumicos
El producto de la reaccin resultante del proceso redox se acopla mediante una transmisin de electrones
para producir una seal que es directamente proporcional a la concentracin de glucosa. Se aplica a los
mtodos basados en la glucosa oxidasa y en la GDH.
Mtodos fotomtricos
El producto de la reaccin se acopla con un cromforo, que al cambiar su estado de oxidacin,
experimenta un cambio de color que se mide por un detector mediante fotometra de reflectancia, y se
establece una relacin directa entre el cambio de color y la concentracin de glucosa. Es aplicable a los
mtodos basados en la glucosa oxidasa.


Figure 1: proceso de deteccin de glucosaa mediante la tcnica amperomtrica

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Hemoglobina Glicolisada (HbA1c)
La prueba de hemoglobina glucosilada (HbA1c) es un anlisis de sangre. Permite medir la cantidad de
hemoglobina glucosilada en la sangre. La hemoglobina es una protena que se encuentra en la sangre y se
asocia con la glucosa. La prueba mide la cantidad de glucosa o azcar en la sangre.
La HbA1c revela los niveles de azcar en la sangre durante los ltimos tres meses y permite compararlos
con los niveles normales. Esta informacin y el autocontrol de la glucosa pueden ayudar al mdico a
determinar en qu medida usted est respondiendo al tratamiento. Los tratamientos pueden incluir
medicamentos y cambios en el estilo de vida. Las personas con diabetes no tratada o tratada
deficientemente corren riesgo de sufrir complicaciones. Esto incluye daos en los ojos, los riones, el
corazn, los nervios, los pies y los vasos sanguneos. Hay suficientes pruebas que respaldan que el control
de la diabetes a un nivel de HbA1c inferior al 7% permite reducir las complicaciones.
La HbA1c tambin puede utilizarse como anlisis para la deteccin de la diabetes. El mdico puede indicar
la prueba si usted tiene factores de riesgo para la diabetes. Hasta un 30% de los estadounidenses con
diabetes no estn diagnosticados. Una herramienta de deteccin confiable puede ayudar a diagnosticar y
a tratar una mayor cantidad de personas.
Resultado
Niveles de hemoglobina glucosilada:
En las personas que no padecen diabetes, los valores normales de HbA1c varan de 4% a 6%.
El nivel deseado en una persona que recibe tratamiento para la diabetes es inferior al 7%.

Las pruebas cientficas revelan una constante reduccin de las complicaciones cuando los niveles se
acercan a los normales. Consulte a su doctor para saber cul es el ndice para usted. Si los niveles de HbA1c
son altos, puede necesitar un cambio en el tratamiento. Esto puede involucrar el cambiar sus
medicamentos para la, aumentar su nivel de actividad fsica y/o modificar su dieta.
De acuerdo con la Asociacin Estadounidense para la Diabetes:
Las personas con un buen control de la diabetes (nivel de HbA1c inferior al 7%) deben realizarse
la prueba dos veces al ao.
Las personas sin un buen control o cuyos regmenes de tratamiento hayan cambiado deben
realizarse la prueba cuatro veces al ao.
El mdico puede indicarle esta prueba con mayor frecuencia si el diagnstico de la diabetes es
reciente o si est embarazada y tiene diabetes.




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Lactosa (C12, H22, O11).
Generalidades.
La lactosa es un carbohidrato clasificado como un disacrido formado por la unin de una molcula de
glucosa y otra de galactosa (figura 2). Los disacridos son un tipo de glcidos formados por la unin de
dos azcares monosacridos iguales o distintos. En la lactosa intervienen una -D-galactopiranosa y una
D-glucopiranosa unida por los carbonos 1 y 4 respectivamente.

Figure 2: Lactosa.
Fsicamente se encuentra como un polvo blanco cristalino, cuando la molcula de lactosa forma cristales
retiene una molcula de agua.
La lactosa, tambin conocida como azcar de la leche, se produce en 4.6% en la leche de vaca y 8.5% en
la leche humana. Tambin es un subproducto en la fabricacin de queso. Es responsable del gusto
ligeramente dulce de la leche y de otros productos lcteos. Tambin se ha encontrado en las frutas de
algunos miembros de la familia de las Sapotaceae.
A diferencia de la glucosa, la lactosa requiere de una enzima intestinal lactasa para digerirla. La enzima se
produce en el intestino delgado.
Los azcares, como la glucosa y la galactosa, son fuentes de energa celular. Favorece la absorcin
de calcio y magnesio. Las bacterias del cido lctico incluyen, entre otras, las especies de los
gneros Streptococcus y Lactobacillus que producen yogur. La biosntesis de la lactosa consiste en el
acoplamiento de la galactosa con la glucosa mediante un enlace -1, 4-glicosdico. Se sintetiza en la
glndula mamaria a partir de la glucosa de la sangre. Esta se puede considerar como uno de los
componentes de la leche que menores fluctuaciones presenta en su contenido y cuando esto ocurre nos
indica anormalidades en la glndula mamaria del animal. La sntesis de la lactosa regula en gran parte el
volumen de leche segregada; es decir, que la cantidad de leche producida depende de las posibilidades
de sntesis de la lactosa en la mama.


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Patologas.
Intolerancia a la lactosa.

La intolerancia a la lactosa se presenta en casos genticos en los que la deficiencia de lactasa est
presente desde el nacimiento y es permanente, aunque la mayora de los intolerantes a la lactosa son
diagnosticados en la edad adulta. En ocasiones, la intolerancia comienza a aparecer como consecuencia
del envejecimiento de las clulas responsables de la produccin de lactasa pero en otras esta afeccin es
un efecto directo de enfermedades que afectan al intestino, daando la mucosa y disminuyendo la
superficie de absorcin de las vellosidades intestinales. Una de las enfermedades que ms se relaciona
con la intolerancia a la lactosa en el sndrome del colon irritable.
La lactosa digerida parcialmente o no digerida pasar al intestino grueso y es all que es descompuesta
por las bacterias del intestino grueso, generando las sustancias de desecho Hidrgeno (H2), Anhdrido
carbnico (CO2), Metano (CH4) y cidos grasos de cadena corta que provocan los siguientes sntomas:
dolores, hinchazn abdominal, diarrea, etc. Tambin es conocida como intolerancia a productos lcteos,
deficiencia de disacaridasa, deficiencia de lactasa, intolerancia a la leche.
Celiaquia.
Suele asociarse a la intolerancia al azcar de la leche, la inflamacin intestinal que provoca daa la
mucosa y afecta la descomposicin de la lactosa en el intestino. La intolerancia puede ser de origen
gentico habiendo una prdida progresiva de lactasa a lo largo de la vida o presentarse unaintolerancia
transitoria recuperable cuando la produccin de la enzima lactasa es ms baja o nula si existe un dao
intestinal causado por una grastroentertis, infecciones vricas y otras enfermedades que afecten al
intestino delgado como la celiaqua, debido a la atrofia vellositaria
Instrumentacin.
Biosensor amperometrico.
El mtodo de determinacin de lactosa mediante la tcnica de amperometra est basado en la
interaccin de lactosa y la enzima -galactosidasa (-Gal) cuando se hidroliza la lactosa en glucosa y
galactosa en personas intolerantes a la lactosa.
Para los biosensores de este tipo se utiliza la -gal inmovilizada en capas electrolticas de etilenimina en
electrodos de xido de indio y estao.
La -Gal cataliza la hidrolisis de la lactosa y produce glucosa, esta se oxida en cido glucnico y H2O2 en
presencia de glucosa oxidasa (GOD). La peroxidasa (HRP) y el mediador tetratiafulvaleno (TFF) se
inmovilizan a travs de una membrana de dilisis con el fin de que la TTF se reduzca liberando un electrn
para generar una seal amperomtrica proporcional a la concentracin de latosa (figura 3).

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Figure 3: proceso de deteccin de lactosa mediante la tcnica amperomtrica.


Bibliografa
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http://www.saludalia.com/analisis-clinicos/glucosa
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http://www.diabetesbienestarysalud.com/como-funciona-el-glucometro/
http://www.asvidia.org/como-funciona-un-medidor-de-glucosa/
http://es.wikipedia.org/wiki/Diabetes_mellitus
http://redpacientes.com/social/posts/view/44207/25740
http://bioclinicahoy.wikispaces.com/Efectos+metab%C3%B3licos+de+la+insulina+y+el+glucag%C3%B3n
+en+los+diferentes+tejidos
http://escuela.med.puc.cl/paginas/cursos/tercero/IntegradoTercero/ApFisiopSist/nutricion/NutricionPD
F/DiabetesMellitus.pdf
F. Izquierdo Quirce, D. Fatela Cantillo, M. P. Chueca Rodrguez, M. Daz Ondina. Deteccin de
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10
Diaz de la Vega, Luis. Tecnologa de la leche y sus derivados, Tomo 1, Editorial Pueblo y Educacin.
Hogenauer C, Hammer HF. Maldigestion and malabsorption. In: Feldman M, Friedman LS, Sleisenger MH,
eds.Sleisenger & Fordtran's Gastrointestinal and Liver Disease. 9th ed. Philadelphia, Pa: Saunders Elsevier;
2010: chap 101.
Lactose intolerance. The National Digestive Diseases Information Clearinghouse (NDDIC). NIH Publication
No. 09-2751. June 2009, updated April 12, 2012.
Semrad CE. Approach to the patient with diarrhea and malabsorption. In: Goldman L, Schafer AI, eds. Cecil
Medicine. 24th ed. Philadelphia, Pa: Saunders Elsevier; 2011:chap 142.