INSTITUTO TECNOLGICO SUPERIOR DE LA REGIN SIERRA.

INGENIERIA DE BIORREACTORES.
EXAMEN GLOBAL
CATEDRTICO (A):
MC. LETICIA ALMEIDA LOPEZ

ALUMNA:
LUCIA GUADALUPE ZARATE MOSCOSO

CARRERA:
ING.BIOQUIMICO.

UNIDAD 6:
CASOS DE ESTUDIOS.








ESTRATEGIAS DE BIOINGENIERIA PARA LA RECUPERACION PRIMARIA DE
PRODUCTOS BIOLOGICOS.
ENSAYO:
La competencia entre las empresas por sacar al mercado nuevos productos
farmacuticos, las ha obligado a buscar nuevas estrategias para el desarrollo de
bioprocesos. El incremento en los espacios huecos de la cama permite el paso
con mayor facilidad de partculas biolgicas que en una columna de cama
empacada, por lo que se elimina la necesidad de pre-clarificar la muestra. En el
presente trabajo se muestra algunos de los casos experimentales en los que se
presenta la implementacin de las estrategias de integracin e intensificacin de
bioprocesos de empleado las tcnicas ATPS y/o EBA.
La recuperacin de protenas intracelulares de levaduras y del aroma de coco
producido por Trichoderma harzianum, el desarrollo de un proceso simplificado
para l recuperacin de c-ficocianina a partir de sperulina mxima y un enfoque
novedoso para la recuperacin de cuerpos de inclusin.
Estas dificultades pueden ser minimizadas y en algunos casos eliminadas si se
emplea la extraccin con ATPS y EBA. Conjuntamente, el uso d la estrategia de
integracin de procesos en las operaciones unitarias de ruptura celular y
recuperacin primaria puede mejorar el rendimiento y la calidad de los productos.
La alternativa de fermentacin extractiva empleando ATPS permite superar el
problema de inhibicin del crecimiento del microorganismo durante la
fermentacin, causado por el aumento de concentracin del producto d inters en
el caldo d fermentacin. Este y otros ejemplos del uso de ATPS para
recuperacin de productos proteicos del caldo de fermentacin.
El proceso propuesto simplifica grandemente el camino tradicional mediante el
cual protenas expresadas como cuerpos de inclusin pueden ser recuperadas,
con una visin practica de implementacin comercial.




Es claro que la implementacin genrica de estas estrategias para desarrollar
procesos d bioseparacion identificara oportunidades para la emergente industria
biotecnolgica y la comercializacin de sus productos.
EQUIPOS:
Los equipos utilizados en el presente artculo son el uso de molienda manual y el
uso de cromatografa.
OBJETIVO:
Una de las principales funcin para realizar el proyecto es el inters actual de las
empresas por desarrollar procesos biotecnolgicos escalables y eficientes, que les
permitan traer rpidamente al mercado nuevos productos econmicos, la
produccin de c-ficocianina ( una protena pigmentada azul) a partir de spirulina
mxima. Es claro que la implementacin genrica de estas estrategias para
desarrollar procesos de bioseparacion identificara oportunidades para la
emergente industria biotecnolgica y la comercializacin de sus productos.
ESTRATEGIAS:
El creciente inters de las empresas farmacuticas de desarrollar procesos
eficientes y escalables que les permitan sacar rpidamente el mercado nuevos
productos las ha obligado a desarrollar nuevas estrategias de bioingeniera. Una
de las tendencias actuales es utilizar los enfoques de integracin e intensificacin
de bioprocesos para el desarrollo de sistemas de recuperacin y purificacin de
productos biolgicos, particularmente protenas. Los casos experimentales
involucran: la recuperacin de protenas intracelulares de levaduras , la
recuperacin de 6-pentil-a pirona (aroma de coco) producida por thichoderma
harzianum, el desarrollo de un proceso prototipo para la recuperacin de c-
ficocianina a partir de spirulina mxima y un enfoque nuevo que facilita la
recuperacin y procesamiento de protenas expresadas como cuerpos de
inclusin.





CONCLUSION:
Es evidente que las estrategias de bioingeniera tradicionales para la recuperacin
de protenas exhibe una serie de limitaciones para el emergente tipo de productos
biotecnolgicos. La tendencia en el desarrollo de sistemas de recuperacin
demanda el uso de las nuevas estrategias de integracin e intensificacin de
procesos para la purificacin de los productos de alto valor o la optimizacin de los
procesos convencionales. Para concluir estas estrategias facilitaran el
escalamiento y los requerimientos comerciales establecidos por las empresas para
sacar al mercado nuevos productos.
















REVISION DE LA MODIFICASION QUIMICA DEL ALMIDON CON ACIDOS
ORGANICOS.
ENSAYO:
La funcionalidad y propiedades del almidn, como la resistencia mecnica y la
flexibilidad, relacionadas con el carcter de la regin cristalina, dependen de la
relacin entre la amilasa y la amilopectinasa, del grado de ramificacin y de la
distribucin del peso molecular.
Varios estudios se han enfocado en la utilizacin del almidn no modificado, por
ser un producto biodegradable, con caractersticas no toxicas, de naturaleza
abundante y de bajo costo. El almidn nativo es usado actualmente en la industria
como recubrimiento, textiles, alfombras, aglutinantes, absorbentes, entre otros.
En general la esterificacin de los polisacridos con cidos orgnicos y derivados
del cido es una de las transformaciones ms verstiles de estos biopolmeros.
El mtodo seleccionado por shogren (2003) fue el calentamiento de mezclas del
almidn con cido actico glacial y anhidro actico a bajos volmenes de reaccin
de 50 microlitros. Para el caso del acetato de almidn con grados de sustitucin
entre 160C a 180C desde 2 a 10 minutos de reaccin. En el proceso de
esterificacin con cidos carboxlicos anhidros podran presentarse degradaciones
del producto, una alternativa para disminuir la degradacin en el producto es la
utilizacin de catalizadores bsicos.
En la modificacin qumica del almidn con cidos orgnicos se obtienen
productos con diferentes grados de sustitucin, y dependiendo de este grado las
aplicaciones del almidn modificado pueden variar.
Cuando se tienen bajos grados de sustitucin los almidones modificados se
utilizan como espesantes para mejorar la estabilidad y claridad de las pastas a
bajas temperaturas para proteger las fibras con respecto a la abrasin y el
desgaste del hilado y as mejorar la impresin, porosidad y resistencia a la




abrasin y el desgaste del hilado y as mejorar la impresin, porosidad y
resistencia a la abrasin en la industria del papel, mientras que en altos grados de
sustitucin los almidones modificados se pueden emplear en recubrimientos,
produccin de pelculas y adhesivos.
En cuanto a la reaccin con clases de cidos orgnicos, se ha mostrado que la
incorporacin de cadenas de cidos grasos en el almidn mejoran las
caractersticas termoplsticas y la estabilidad trmica de los esteres de almidn.
EQUIPOS:
Se utilizaron los siguientes equipos titulacin potenciometricas, anlisis por
infrarrojo, resonancia magntica, anlisis trmicos, espectroscopia infrarroja, la
resonancia magntica nuclear (RMN), microrreactores.
OBJETIVO:
El presente documento se centr en la revisin de las investigaciones sobre la
modificacin qumica del almidn con cidos orgnicos con el objetivo de
identificar el empleo de algunos catalizadores, las tcnicas de la modificacin y las
aplicaciones de los almidones modificados.
ESTRATEGIAS:
La obtencin de un material biodegradable a partir de la reaccin del almidn con
cidos orgnicos tiene gran inters debido a que conllevara a la generacin de
nuevos materiales con propiedades fsicas y qumicas que podrn utilizarse
ampliamente en las industrias de la qumica fina, cosmtica y alimentos. As
mismo, el almidn modificado, al poseer carcter biodegradable, ayudara a la
disminucin de contaminantes de residuos slidos.







CONCLUSION:
Se han desarrollado procedimientos que se estn aplicando en la modificacin
qumica del almidn que van desde el uso de microrreactores hasta extrusoras de
doble husillo.
Estos estudios de modificacin qumica del almidn se han ido incrementando y
dirigido a la bsqueda de nuevos productos aplicables en cada uno de los
sectores de la industria qumica, debido a su propiedad biodegradable as como a
la diversidad de propiedades que se pueden presentar segn su modificacin.



















ESTRATEGIAS DE OBTENCION DE PROTEINAS RECOMBINANTES EN
ESCHERICHIA COLI.
ENSAYO:
En las ltimas dcadas se han desarrollado cepas de E.coli modificadas
genticamente para solucionar algunas de sus desventajas.
En otras cepas desarrolladas pueden obtenerse protenas complejas, con
modificaciones postraduccionales propias de clulas eucariotas, como es el caso
de las que aportan el gen de la tirosina kinasa para producir protenas fosforiladas
por la tirosina, para aprovechar las ventajas que ofrece el periplasma, en
comparacin con el citosol, para la expresin de protenas recombinantes se han
desarrollado vectores plasmidicos en los cuales es posible clonar los genes
recombinantes.
Entre los parmetros ms importantes en la produccin exitosa de protenas
recombinantes en E.coli se encuentran: la eficiencia transcripcional y traduccional,
la estabilidad del vector de expresin y de los cidos ribonucleicos (ARN)
transcriptos, la estabilidad de las molculas ante el ambiente proteoltico del
hospedero y la localizacin y plegamiento de la protena. Tambin es necesario
hacer estudio con diferentes cepas del organismo hospedero, con vistas a
seleccionar la ms adecuada para la expresin de la protena recombinante
deseada, ya que estudios muestran que esta puede variar al usar una cepa
determinada u otra.
El banco de clulas primarias es una suspensin homognea de clulas iniciales
ya transformadas por el vector de expresin, almacenadas en envases
individuales y en condiciones que garanticen su estabilidad gentica.




Con el objetivo de mejorar la productividad de la protena de inters, obtenida al
usar una cepa E.coli, se puede correlacionar la velocidad de produccin del
producto de inters.
En este sistema de fermentacin presupone resolver algunos inconvenientes,
como son: la inhibicin del crecimiento por acumulacin de sustrato; la capacidad
limitada de transferencia de oxgeno y la formacin de subproductos inhibitorios
para el crecimiento como el cido actico.
La estandarizacin permiti un enfoque ms sistemtico al desarrollo de estos
procesos y fue el basamento para la introduccin del paradigma captura-
purificacin-pulido, ahora extendido en todos los diseos de los esquemas de
purificacin de protenas.
EQUIPOS:
Los equipos utilizados en la recuperacin de los metabolitos antes mencionados
fueron un fermentador o un biorreactor, cromatografa de lecho o cama expandida,
ultrasonido.
OBJETIVO:
El objetivo fue alcanzar altos niveles de expresin de la protena de inters es
necesario estudiar la influencia de diferentes factores en el proceso de produccin,
los cuales pueden agruparse en genticos y fisiolgicos.
ESTRTEGIAS:
La expresin de protenas recombinantes se ha favorecido con el uso de
Escherichia coli debido a su relativo bajo costo, alta densidad de cultivo, su fcil
manipulacin gentica y las diversas herramientas biotecnolgicas disponibles que
son compatibles. En este artculo se presentan algunas estrategias para la
expresin de Escherichia coli; se destacan factores genticos y fisiolgicos que
influyen: nmero de copias del vector de expresin, caractersticas del gen,
estabilidad del cido ribonucleicos mensajero, promotor empleado, cepa utilizada,




composicin del medio de cultivo, parmetros de operacin en el fermentador y
tambin se abordan la conservacin de cepas y la estrategia de cultivo y
purificacin.
CONCLUSION:
Por ltimo, uno de los objetivos de los investigadores fue alcanzar altos
rendimientos en la produccin de productos biotecnolgicos expresados en E. coli,
con vistas a hacer estos procesos ms factibles econmicamente y cumplir con las
regulaciones vigentes en esta rama de la industria.
Las estrategias han estado encaminadas desde el mejoramiento gentico de la
cepa y los vectores de expresin hasta los mtodos de cultivo y purificacin de
estas protenas. No obstante, existen retos que deben abordarse en un futuro,
entre los que se encuentran: superar los niveles de expresin de protenas
alcanzadas; realizar un adecuado estudio del espacio de diseo durante la etapa
de desarrollo de los procesos de fermentacin y recobrado, para establecer los
parmetros que influyen significativamente en su eficiencia; realizar una adecuada
seleccin del medio de cultivo que facilite tanto la expresin como el crecimiento
celular.













COMPARACION DE LA EFICIENCIA DE EXTRACCION DE ACIDOS
NUCLEICOS UTILIZANDO DISTINTOS KITS COMERCIALES Y EMPLEANDO LA
QPCR. EFECTO DE LAS SUSTANCIAS INHIBIDORAS.
ENSAYO:
La deteccin de secuencias especficas de cidos nucleicos (AN) empleando la
reaccin en cadena de la polimerasa (PCR) revoluciono diversos campos de las
ciencias biolgicas y mdicas.
El ciclo de amplificacin en el que la cantidad de fluorescencia acumulada supera
el umbral establecido se conoce como ciclo umbral. Los errores en el diseo de la
reaccin (insuficiencia de reactivos, temperaturas de hibridacin o amplificacin no
optimas), una actividad reducida de la polimerasa o la presencia de inhibidores
purificados conjuntamente con los AN pueden alterar la eficiencia.
En el caso de muestras ambientales o de aguas de consumo, la cantidad de
algunos microorganismos (virus y parsitos) es generalmente pequea y se
necesita una etapa de concentracin para lograr un lmite de deteccin aceptable
en un ensayo diagnstico, lo que tambin incrementa la concentracin para lograr
un lmite de deteccin aceptable en un ensayo diagnstico, lo que tambin
incrementa la concentracin de inhibidores.
Como consecuencia de los problemas originados por los inhibidores, la extraccin
de AN es importante en la qPCR por que debe garantizar una alta eficiencia de
recuperacin y adems reducir la concentracin de inhibidores remanentes.
En cambio, los puntos no alineados son aquellos cuya amplificacin sufri
inhibicin. Para la curvas estndares con puntos no alineados se determin el
factor de dilucin (FD) correspondiente a la dilucin necesaria para superar la
inhibicin.




As se recupera la seal y se puede realizar la deteccin en una regin libre de
inhibiciones, lo que permite la cuantificacin correcta.
OBJETIVO:
El objetivo del presente trabajo fue comparar la eficiencia de extraccin de AN de
diferentes kits comerciales empleando qPCR. Se evalu la cantidad de AN
recuperados y la eficiencia de amplificacin en presencia de inhibidores en
muestras de agua y de sangre entera, empleando kits de extraccin de las firmas
comerciales de Qiagen (Q), invitrogen (I) y Macherey-Nagel (MN).
ESTRATEGIAS:
La deteccin de secuencias especficas de cidos nucleicos (AN) empleando PCR
revoluciono las ciencias biolgicas y mdicas. La PCR en tiempo real (qPCR)
incorporo la posibilidad de obtener resultados cuantitativos.