REACTIFS BIOLABO

ww w. b i o l a b o . f r
FABRICANT :
BIOLABO SA,
02160, Maizy, France
RPR-CHARBON
TEST de dpi st age de l a SYPHI LI S
Test de floculation lipidique non-trponmique sur lame pour la dtermination
qualitative et semi-quantitative des anticorps (ragines) dans le srum ou le plasma humain.
REF 3800100
REF 3800150
100 tests : R1 2,0 mL R2 0,5 mL R3 0,5 mL
150 tests : R1 3,0 mL R2 0,5 mL R3 0,5 mL

SUPPORT TECHNIQUE ET COMMANDES
Tel : (33) 03 23 25 15 50
Fax : (33) 03 23 256 256
|
IVD USAGE IN VITRO
INTERET CLINIQUE (1) (2)
La Syphilis est une maladie vnrienne cause par un micro-organisme
spirochaete T. pallidum. Ce micro-organisme ne pouvant tre cultiv sur
milieu artificiel, le diagnostic de la syphilis est bas sur la corrlation des
donnes cliniques et la dtection danticorps spcifiques par des tests
srologiques.
Des ractions positives au Test RPR peuvent tre dues chez certains
patients une infection autre que la syphilis.
Le diagnostic clinique ne doit donc pas tre tabli sur la base des
rsultats dun seul test, il doit tre tay par des signes cliniques et des
rsultats danalyses biologiques complmentaires
(voir INTERFERENCE).
PRINCIPE (3) (5) (6)
Le RPR-CHARBON est un test de floculation non trponmique utilis
pour la dtection de la Syphilis dans le plasma ou le srum chauff ou
non chauff.
La formation de liaisons entre le cholestrol, la cardiolipine, la lcithine
du ractif et les anticorps (ragines) du spcimen conduit la formation
dagglutinats.
Le test antignique est une forme modifie de lantigne VDRL (Veneral
Disease Research Laboratory) dont les particules de charbon
sadsorbent sur les agglutinats forms et amliorent leur visualisation
(amas gris).
Labsence de floculation visible indique un rsultat ngatif.
Le test RPR-CHARBON peut tre utilis en technique manuelle sur
carte test ou sur autoanalyseur mono ou multi-canal qui sont utiliss
dans les tablissements de transfusion sanguine pour un dpistage en
routine de la Syphilis dans les dons de sang.
Ce test est raccord sur un srum de rfrence du WHO pour le
srodiagnostic des infections trponmiques.- Ref 3-1980.
Les rsultats du test sont obtenus en 8 minutes.
REACTIFS
-- 10 Cartes Test (usage unique, liminer aprs utilisation)
-- 100 Pipettes usage unique.
-- 1 Flacon dispenseur et aiguille (16 >L/goutte)
Flacon R1

RPR CHARBON

Suspension contenant environ :
Charbon 0,2 g/L
Cardiolipine 0,003 %
Lcithine 0,02 %
Cholestrol 0,09 %

Flacon R2

Contrle Positif
Srum humain contenant des anticorps anti-Treponema Pallidum.

Flacon R3

Contrle Ngatif
Srum humain exempt danticorps anti-Treponema Pallidum.

Version : FT 3800100 RPR 20 12 2007
PREPARATION DES REACTIFS
Les ractifs sont prts lemploi.
Flacon R1 : dboucher le flacon dispenseur en plastique et insrer la
base de laiguille dans le col du flacon. Presser le flacon et insrer la
pointe de laiguille dans la suspension dantigne pralablement
homognise. Relacher ensuite doucement la pression sur le flacon
plastique afin de transfrer la suspension dantigne. Le stockage de
lantigne dans le flacon plastique rduit sa dure de vie. Il est conseill
de reverser lantigne restant dans le flacon dorigine la fin de la srie
de tests.
Le flacon plastique dispenseur et laiguille doivent tre rincs
immdiatement leau dminralise et schs lair.
REACTIFS ET MATERIEL COMPLEMENTAIRES
1. Test semi-quantitatif: micropipettes et tubes essais.
2. Chlorure de Sodium (9 g/L)
,STABILITE ET CONSERVATION
Stocker 2-8C et labri de la lumire
NE PAS CONGELER.
En labsence de contamination, stocks dans le flacon dorigine et
utiliss comme indiqu dans la notice, les ractifs sont stables jusqu
la date de prremption indique sur ltiquette du coffret.
Rejeter tout ractif contamin ou qui ne donne pas des rsultats
corrects avec les srums de contrle.
Ne pas utiliser les ractifs aprs la date de premption.
Ne pas stocker les cartes test au rfrigrateur, les ranger
temprature ambiante.
Ne pas toucher la surface des cercles test de la carte avec les doigts
car des dpts gras pourraient fausser les rsultats.
PRECAUTIONS
Les ractifs BIOLABO sont destins du personnel qualifi, pour un
usage in vitro.
Utiliser des quipements de protection (blouse, gants, lunettes).
Ne pas pipetter avec la bouche.
Ne pas utiliser de ractifs endommags ou contamins.
En cas de contact avec la peau ou les yeux, rincer abondamment
leau et consulter un mdecin.
Les ractifs contiennent de lazide de sodium (concentration < 0,1%)
qui peut ragir avec les mtaux tel que le cuivre ou le plomb des
canalisations . Rincer abondamment.
Les contrles sont raliss base de srums humains. Chaque srum
humain utilis dans la fabrication des contrles a t analys et a
donn des rsulats ngatifs pour lantigne de surface de lhpatite B
(HBsAg), les anticorps de lhpatite C (anti-HCV) et du VIH 1 et VIH 2.
Cependant comme aucun test ne peut garantir de faon absolue
labsence de tout agent infectieux, traiter ce produit comme
potentiellement infectieux.
Pour plus dinformations, la fiche de donnes de scurit peut tre
obtenue sur simple demande.
Elimination des dchets : respecter la lgislation en vigueur.
Par mesure de scurit, traiter tout spcimen comme potentiellement
infectieux, dans le respect des bonnes pratiques de laboratoire.
Respecter la lgislation en vigueur.
PRELEVEMENT ET PREPARATION DU SPECIMEN
Srum : Prlever un chantillon de sang de patient et laisser coaguler.
Centrifuger le sang coagul et sparer le srum clair. Travailler
imprativement sur srum frachement prlev.
Plasma : Prlever un chantillon de sang de patient dans un flacon de
collecte de plasma. Centrifuger le spcimen et sparer le plasma clair.
Travailler imprativement sur plasma frachement prlev.
Ne pas utiliser de srum ou plasma hmolys, contamin ou lipmique
qui sont susceptibles dinterfrer avec le test.
Le srum peut tre conserv 2-8C pendant au moins 48 heures.
Pour une dure prolonge, stocker -20C pendant un maximum de
6 semaines.
Homogniser les chantillons congels avant utilisation.
Les spcimens dcongels ne doivent pas tre recongels ce qui
fausserait les rsultats.
NE PAS DILUER LES SPECIMENS AVANT DE REALISER LE TEST
QUALITATIF.
INTERFERENCES
Lutilisation de spcimens autres que srum ou plasma na pas t
valide pour ce test.
Il nexiste pas de protocole de rutilisation de ce produit.
Des rsultats faiblement positifs ou suspects doivent tre retests. Si le
rsultat dun test RPR est positif, il doit tre confirm par un test
trponmique spcifique. BIOLABO fabrique et commercialise un test
TPHA (Treponema Pallidum Haemagglutination Assay) REF 4500100 pour
la dtection spcifique des anticorps anti-trponmiques.
CONTRLE DE QUALITE
Contrles RPR positif et ngatif inclus dans le coffret.
Programme externe de contrle de la qualit.
Il est recommand de contrler dans les cas suivants :
Au moins un contrle par srie.
Au moins un contrle par 24 heures.
Changement de flacon de ractif.
Lorsque les rsultats du contrle sont incorrects, appliquer les actions
suivantes:
1. Rpter le test en utilisant le mme contrle.
2. Si les rsultats sont encore incorrects, utiliser un autre flacon de
contrle et rpter le test.
3. Si les rsultats sont encore incorrects, utiliser un autre flacon de
ractif et rpter le test
4. Si les rsultats sont encore incorrects, contacter le service technique
BIOLABO ou le revendeur local.
PERFORMANCES
Des titres jusqu 1/132 peuvent tre dtects avec le test RPR
CHARBON sans effet de Prozone.
En 1995, le centre de rfrence de la Syphilis du laboratoire de la Sant
Publique de Bristol en Grande Bretagne a valu les performances du
test RPR CHARBON.

RPR-CHARBON
+ -
Spcimens ngatifs 0 645
Spcimens positifs 30 0

Tous les spcimens tests avec RPR-CHARBON ont donn des
rsultats corrects.
REFERENCES
(1) McGrew, B.E. et al., Amer. J. Med Tech. , 34, 634 (1968a)
(2) McGrew, B.E. et al., Amer. J. Clin. Path., 50, 52 (1968b)
(3) Norins, L.C. Automation in Clinical Chemistry, 1, 157New York Mediad (1968)
(4) Portnoy, J. et al., U.S. Publ. Health Report, 75, 985-988 (1960)
(5) Portnoy, J. et al., U.S. Publ. Health Report, 77, 645 (1962)
(6) Manual Test for Syphilis PHS Publications No 411, (1969

Version : FT 3800100 RPR 20 12 2007
MODE OPERATOIRE (TECHNIQUE MANUELLE)
METHODE QUALITATIVE
Changer de pipette usage unique chaque spcimen pour viter les
contaminations croises.
Ne pas toucher la surface des cercles test de la carte avec les doigts car
des dpts gras pourraient fausser les rsultats.
1. Ramener chacun des composants temprature ambiante.
2. Dposer une goutte de contrle ngatif sur un cercle de la carte-test.
Rpartir sur la totalit de la surface du cercle.
3. Dposer une goutte de contrle positif sur un cercle adjacent de la
carte-test. Rpartir sur la totalit de la surface du cercle.
4. A laide dune pipette usage unique fournie, dposer une goutte de
spcimen (50 >L) sur un autre cercle de la lame de test. Rpartir sur la
totalit de la surface du cercle laide du ct aplati de la pipette.
5. Remettre en suspension par retournements le Ractif
RPR CHARBON (flacon R1).
6. Remplir le flacon dispenseur comme indiqu au PREPARATION DES
REACTIFS
7. Ajouter une goutte de Ractif RPR CHARBON (16>L) sur chacune
des gouttes de contrles et spcimen(s) de la carte-test. Ne pas
mlanger.
8. Balancer doucement la lame manuellement ou laide dun balancier
automatique (100 tpm) pendant 8 minutes et observer lagglutination
dans les cercles de test. Ne pas prolonger lincubation au del de
8 minutes pour viter les phnomnes dvaporation pouvant conduire
une erreur dinterprtation (faux positifs).
9. A la fin du test, liminer les cartes-test usages.
METHODE SEMI-QUANTITATIVE
Le test semi-quantitatif est effectu selon le mme mode opratoire que
le test qualitatif en ralisant des dilutions du spcimen dans NaCl 9 g/L
comme suit :
Prparer les dilutions dans des tubes essais:
Dilutions 1/2 1/4 1/8 1/16 1/32 1/64 1/n
NaCl 9 g/L
100 >L 100 >L 100 >L 100 >L 100 >L 100 >L 100 >L
Spcimen
100 >L - - - - - -
100 >L
100 >L

100 >L

100 >L

100 >L

100 >L

Transfrer dans un cercle de la carte test: :

Spcimen dilu 50 >L 50 >L 50 >L 50 >L 50 >L 50 >L 50 >L
Ractif (R1)
1 goutte = 16 @L
1
goutte
1
goutte
1
goutte
1
goutte
1
goutte
1
goutte
1
goutte
Le titre correspond la dernire dilution conduisant un rsultat positif
(ex : ci-dessous le titre est de 1/32).
Rsultats : +++ ++ ++ + + - - -
Titre : 1/32
INTERPRETATIONS DES RESULTATS
METHODE QUALITATIVE

Raction Positive (+++) Raction lgrement Positive (+-)
Prsence de gros aggrgats gris Prsence de petits aggrgats gris
Raction Positive (++) Raction ngative (-)
Prsence daggrgats moyens Absence daggrgats
METHODE SEMI-QUANTITATIVE

Le titre est exprim comme tant la plus haute dilution conduisant une
floculation macroscopique.
Fabricant Date de premption IVD Usage in vitro Temprature de conservation REF Rfrence du produit Consulter la notice LOT Numro de lot