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Interprtation des
rsultats bactriologiques
sur prlvements
deau froide sanitaire
Dr O. BELLON
Lyon mai 2012
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Quelles Eaux ? Quels usages?
Eau sanitaire
=
eau
chaude
ou froide
destine la
consommation
humaine
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Potabilit
Les eaux sanitaires sont cadres par des exigences en termes de
seuils dits de potabilit : les critres sont d'ordre
microbiologiques,
organoleptiques
physico-chimiques.
Principaux indicateurs de qualit microbiologiques selon
rglementation concernant les eaux chaudes et froides sanitaires
Flore arobie revivifiable ;
E.coli, coliformes ;
Lgionelle ;
Pseudomonas aeruginosa ;
Autres : virus, Cryptosporidium et giardia
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Potabilit
Eau distribue
Sont soumises aux contraintes des eaux destines la consommation
humaine toutes les eaux destines
la boisson,
la cuisson, daliments
la prparation de mets
au nettoyage dobjets entrant en contact avec les denres alimentaires.
ou d'autres usages domestiques
toutes les eaux utilises dans les entreprises alimentaires pour
prparer de substances, destines la consommation humaine
Tous les usages rajouts : eaux pour traitement des endoscopes,
brumisateurs en 2011
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Eau maximum 20C
2011
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Potabilit
Eau distribue
Toutes ces eaux doivent remplir trois conditions :
ne doivent pas contenir un nombre ou une concentration de
micro-organismes, de parasites ou de toutes autres substances
constituant un danger potentiel pour la sant des personnes ;
elles doivent tre conformes aux limites de qualit (valeurs
obligatoires).
elles doivent satisfaire des rfrences de qualit (valeurs
indicatives d'une bonne qualit mais dont le non respect
ponctuel n'engendre pas de risque pour la sant).
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Potabilit
Eau distribue
directive europenne n98/83 remplace la directive du 15 juillet
1980 relative la qualit des eaux destines la consommation
humaine.
Son contenu a t transpos en droit franais par le dcret 2001-
1220 (dcret n 2001-1220 du 20 dcembre 2001 relatif aux eaux
destines la consommation humaine, l'exclusion des eaux
minrales naturelles. ( texte intgr dans le Code de la sant
publique (article L 1321))
Arrt du 11 janvier 2007
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Potabilit
La qualit de l'eau potable est soumise deux types de contrles,
un contrle officiel,
ponctuel,
relve de la comptence des pouvoirs publics (ARS).
Il s'agit l du contrle rglementaire fondamental
une autosurveillance
permanente
par les exploitants
L'arrt d'autorisation dlivr par le prfet dtermine les points
o les prlvements aux fins danalyse doivent tre pratiqus :
au niveau de la ressource
au niveau de la production, c'est--dire aprs traitement et
avant l'envoi de l'eau dans le rseau de distribution
au niveau du rseau de distribution ;
au point de consommation : innovation du dcret 2001-1220
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potabilit
Site : Rsultats-du-contrle-sanitaire-de-
la-qualit-de-l-eau-potable.html sur
sante.gouv.fr
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Le prlvement des chantillons
Choix des points de prlvement sur les rseaux deaux
Modalits pratiques pour effectuer les prlvements deau sur le
terrain en fonction du type deau
Planification (temps, espace)
Prleveur form
Prleveur habilit
Stockages et transport des chantillons
Analyses
mthodes de rfrence pour les principaux indicateurs qualit et
microorganismes pathognes : longues +++
mthode de PCR en temps rel
mthode dATP-mtrie quantitative
Quel labo?
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recommandations
Les analyses et laboratoire :
Pour les analyses microbiologiques de lenvironnement, il nexiste
pas de GBEA ltablissement doit sassurer de la mise en place dune
dmarche qualit par le laboratoire et laborer un cahier des charges
dtaill.
laccrditation par le COFRAC ou un organisme europen quivalent
nest pas obligatoire,
elle est fortement conseille pour la ralisation de contrles
microbiologiques de lenvironnement
Attention rfrentiel 17025 diffrent de celui des analyses de biologie
mdicale
Lagrment du laboratoire dlivr par le ministre charg de la sant
nest obligatoire ce jour que pour lanalyse des eaux destines la
consommation humaine, des eaux de piscine et de baignade
amnage dans le cadre de la rglementation.
O.B. Menuires 03/2003
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Potabilit
rfrences rglementaires :
Le code de la sant publique relatif aux eaux destines la
consommation humaine l'exclusion des eaux minrales
naturelles.
L'arrt du 11 novembre 2005 sur la temprature de l'eau
sanitaire.
Le dcret et l'arrt du 11 janvier 2007 sur les eaux sanitaires
et les eaux embouteilles.
normes et rgles de l'art :
La norme NF EN 1717 Protection contre la pollution de l'eau
potable dans les rseaux intrieurs et exigences gnrales des
dispositifs de protection contre la pollution par retour
Les Guides Techniques du CSTB pour les rseaux sanitaires
l'intrieur des btiments de 2003 et 2005.
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recommandations
Organisation des prlvements et transport des
chantillons
standardisation +++++++
oprateur form et tenue de loprateur adapte au site
identification de lchantillon
informations classiques : site, date, heure, identit
informations susceptible dtre prise en compte dans la
technique danalyse et pour linterprtation des rsultats
le moment de ralisation du prlvement
les caractristiques de linstallation contrle
point deau quip ou non dun filtre terminal,
les problmes ventuels rencontrs lors du prlvement.
O.B. Menuires 03/2003
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recommandations
prlvements et transport des chantillons
mesures complmentaires
mesure de la temprature,
taux de dsinfectant rsiduel (eau),
Le volume en fonction du contrle ralis.
Le dlai et les conditions dacheminement de lchantillon
doivent assurer la survie des micro-organismes collects
sans en favoriser le dveloppement,
ni celui de la flore associe.
Le transport doit tre le plus rapide possible et en
cohrence avec la rglementation.
Certains neutralisants devront tre associs aux prlvements
lorsque cest ncessaire.
O.B. Menuires 03/2003
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Les bases pour interprter
Connaitre
reconnaitre
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Lecture des rsultats
Validit du laboratoire
COFRAC
Cofrac?????
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Lecture des rsultats
Les items recommands
Guide gestion de lenvironnement dans les
centres de sant
COFRAC
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recommandations
Un compte-rendu de rsultats comportant :
lidentification du laboratoire
lidentification du prleveur
la date, la nature et le lieu du prlvement, la technique de
prlvement, lutilisation et la nature dun ventuel neutralisant
ou tout lment susceptible dinterfrer
lindication de lanalyse : dmarche qualit, pidmie.. la
technique utilise
les rsultats
une conclusion comportant un commentaire faisant rfrence
des niveaux seuils quand ils existent
lidentification du responsable du laboratoire.
La participation des essais interlaboratoires (intercalibration)
rgionaux ou nationaux.

O.B. Menuires 03/2003

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Lecture des rsultats
Analyse du rsultat
Correctement fait ?:
bon endroit,
bon horaire,
bien prlev, bien transport,
bien techniqu
bien transcrit..
Si oui : prlvement isol ou non
Si oui : vrification des antrieurs et analyses
similaires.
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Nosobase
Au CH les dialyseurs utilisent maintenant la technique
d'hmodiafiltration.
Nous avons eu un soucis avec deux analyses (soucis qui seraient
peut-tre en rapport avec des travaux l'tage suprieur)
(1 colonie au lieu de zro)
Le PH d'hygine (EOH) fait enqute et tlphone au CCLIN.
Ci joint ses conclusions.
La filtration n'est pas faite sous hotte
Remarques : Frsnius recommande : s'assurer que le
laboratoire ralise les analyses sous un flux laminaire et en
utilisant la connexion bleue (plus proche de la poche)
Dr L Simon, coordonnateur du C CLIN EST et ancien
responsable du laboratoire d'hygine de Nancy crit
Si les chantillons deau ne sont pas filtrs dans un
environnement matris, les rsultats microbiologiques nont
aucune valeur .
17025 : pas de contact entre les analyses denvironnement et les
analyses de biologie mdicale
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Signification des diffrents indicateurs de
contamination microbiologique
Le germe
dorigine fcale
Entrocoque, E.coli
dorigine tellurique
Anarobie sulfitorducteurs
dorigine.hydrique : Croissance dans les biofilms!
Pseudomonas, stenotrophomonas, Serratia marcescens,
Legionella pneumophilia, mycobactries non-tuberculeuses
.
dorigine humaine
S. aureus
La quantit
Taux normal??????
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Les limites de qualit
Un niveau cible :
niveau vers lequel ltablissement doit tendre dans des
conditions normales de fonctionnement.
Un niveau dalerte :
dtecte prcocement une drive potentielle des conditions
de fonctionnement
doit entraner la vrification des rsultats
et la mise en uvre de premires mesures correctives.
Le niveau dalerte peut correspondre une valeur
quantifie ou un ensemble de valeurs comprises entre le
niveau cible et le niveau daction.
Un niveau daction :
doit immdiatement dclencher la mise en uvre de
mesures correctives permettant de revenir rapidement sous
le niveau dalerte et de tendre vers le niveau cible.
Ces diffrents niveaux doivent permettre la fois la protection des
patients les plus fragiles et une gestion raisonne et raisonnable du
risque infectieux li leau dans les tablissements de sant.
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Niveau exig.
Lorsque les critres de qualit des eaux sont fixs
par la rglementation ou des circulaires et que celles-
ci ne contiennent quun seul niveau, les diffrents
niveaux cits prcdemment sont confondus et il
napparat quune seule concentration
(concentration maximale admissible) ou niveau
exig.
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Le niveau dalerte doit entraner
une tude des origines des carts avec les analyses antrieures
prenant en compte la variabilit lie aux prlvements et aux rsultats
analytiques
par la ralisation de nouvelles analyses ;
une information immdiate des personnels en charge de la
gestion de leau et de lquipe oprationnelle dhygine
une valuation de ltendue de la contamination du rseau
une vrification du rseau et de son fonctionnement ;
une mise en oeuvre, si ncessaire des mesures correctives pour
atteindre le niveau cible
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Niveau daction dpass
Raction immdiate :
une information immdiate des utilisateurs, des personnels en
charge de la gestion de leau, du CLIN, de lquipe
oprationnelle dhygine et des personnels des services
concerns
une restriction ou suppression des usages de leau risque ;
une recherche immdiate des causes de la contamination ;
une mise en uvre dactions correctives ;
Vrification et suivi de lefficacit des actions mises en uvre.
Les consignes gnrales dintervention, prconises ci-dessus,
doivent tre enclenches dans les secteurs contamins et ceux
susceptibles de ltre,
Les actions prconises doivent tre maintenues jusqu obtention
de rsultats danalyses conformes au niveau cible
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Eaux froides sans traitement (alimentaire)
Modalits et frquence de prlvement
prlvement obligatoirement sur le 2me jet, mousseur enlev
(qualit de leau circulante )
ajout pour vrifier les conditions relles dutilisation d un
prlvement sur le 1er jet possible.
Aucune frquence fixe par la rglementation,
minimum 1 contrle bactrio par tranche de 100 lits et par an
avec un minimum de 4 contrles par an pour les
tablissements de moins de 400 lits.
1 contrle bactriologique par an sur chaque fontaine.
1 contrle bactriologique par an sur chaque point de
production de glace alimentaire (eau dalimentation et
glaons).
O.B. Menuires 03/2003
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Eaux froides sans traitement (alimentaire)
Analyse
Numration de la flore arobie revivifiable 22C et 37C dans
un chantillon de 1 ml (norme EN ISO 6222)
Recherche de coliformes totaux et dEscherichia coli dans
des chantillons de 100 ml (normes AFNOR NFT 90-414 / ISO
9308-1).
Recherche des entrocoques dans un chantillon de 100 ml
(norme AFNOR NFT 90-416 / ISO 7899-2).
Recherche de bactries sulfito-rductrices y compris les
spores si les eaux subissent un traitement de filtration (norme
AFNOR NF EN 26461).
Cette analyse de type D1 est complte par la recherche de
Pseudomonas aeruginosa.
O.B. Menuires 03/2003
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Pour la numration de la flore arobie
revivifiable, les dispositions du code de la
sant publique relatives aux eaux destines
la consommation humaine lexclusion
des eaux minrales naturelles retiennent
comme tempratures 22C et 37C alors
que la norme NF EN ISO 6222 prconise
les tempratures de 22C pendant 68h+4h et
de 36C pendant 44h+4h.
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Eau Guide 2005
lentre
Points
dusage
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potabilit
Site : Rsultats-du-contrle-sanitaire-de-
la-qualit-de-l-eau-potable.html sur
sante.gouv.fr
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Recherche des causes
Erreur technique
Contrler TOUT.
Eau dentre de mauvaise qualit
Dgradation de leau
Rseau : matriaux, corrosion, biofilm, travaux, retours
inopins ++++, appareils divers
Stagnation : eau qui court nest jamais mauvaise
Temprature suprieure 25Ca-t-elle t
prise.thermomtre vrifi???.....combien de temps aprs
louverture du robinet????
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Interprtation des indicateurs de suivi
Connaissance ncessaire de :
ses indicateurs de structure
plans des rseaux,
matriaux constitutifs des rseaux,
nombre de points deau, nombre de douches.
ses indicateurs de processus
donnes figurant dans le carnet sanitaire, c
consommation deau, de produits filmognes le cas chant, de
filtres
ses indicateurs de rsultats :
rsultats des contrles de leau,
temprature de leau,
nombre de dysfonctionnements ou de non-conformits
Linterprtation des rsultats des indicateurs de suivi se fait en
rfrence
un niveau dexigence
et un seuil dinacceptabilit pralablement dfinis.
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causes
Connaissance du rseau :
tous les points sont connus et rpertoris et leur
raccordement au rseau deau alimentaire rgulirement
vrifi.
Tous les matriels interposs sur le rseau sont rpertoris
et vrifis
y compris les ballons de stockage, fontaines, systmes
de dialyse
Tous les matriels terminaux sont entretenus et vrifis :
mousseurs, pommeaux, robinets (plan de
maintenance)
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Au total
Sur une analyse
Il sagit bien de lanalyse planifie
Quantification du risque ++++++
Estimation de la possibilit de rsultats similaires sur dautres points de la
structure
Correctement prleve et transporte
Discussion avec le prleveur
Correctement analyse
Discussion avec le laboratoire
Isole ou rpte
Temps et ou espace
Planifier et faire un ou des prlvements de contrle
Rechercher les causes possibles et les liminer au fur et a mesure des
investigations
Discussion avec les plombiers, les services techniques, les services des eaux de la ville
Sur un rcapitulatif volutif
Analyse de la courbe
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conclusion
le niveau de matrise atteindre repose sur la mise en uvre de
dmarches d'analyse des risques et sur la dfinition de niveaux de qualit
adapts chaque grand type de situation quil faut connaitre.
Lapplication des mesures dhygine et dune maintenance prventive
rigoureuse par un personnel form et motiv doivent permettre dobtenir
et maintenir ces niveaux de qualit : quil faut vrifier.
La surveillance de cette matrise passe, en priorit, par les contrles des
procds auxquels, sous certaines conditions, on peut associer des
indicateurs de rsultats incluant les prlvements microbiologiques
denvironnement : quil faut interprter rapidement et correctement
O.B. Menuires 03/2003
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Conclusion
Il faut toujours se rappeler que les contrles
d'environnement ne sont pas :
des prvisions du risque infectieux,
des certificats de conformit,
des certificats de bonne ou de mauvaise conduite
des certificats de bonne conscience (surtout sils sont
ngatifs mais faits des moments ou endroits favorables)
O.B. r Menuires 03/2003
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Lgionelles
Recherche sur eaux chaude (hors sujet) et eaux
froidessi trop chaudes.
Un cas de contamination lors de troubles de la dglutition
Il convient donc de veiller ce que la temprature de
leau froide naugmente pas au-dessus de 20C (la
rfrence de qualit rglementaire est de 25C)
Depuis 2002 :
Suivi des paramtres temprature et lgionelles dans les rseaux
d'eau froide
Plusieurs points d'usage reprsentatifs (2 ou 3).
Prlever l'eau aprs coulement de 2 3 minutes.
au niveau d'un robinet simple bec, si possible
Temprature : 1 fois/semaine.
Si la temprature est > 20 C :
il est ncessaire d'en dterminer la cause et d'y remdier
la recherche de lgionelles est prconise.
Si les analyses effectues montrent une prsence de lgionelles, il est
ncessaire de se conformer aux niveaux d'intervention prconiss
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legionelles
Choix des laboratoires. (article 5 de larrt de 2010)
Le responsable des installations fait raliser les prlvements d'eau et
analyses de lgionelles par un laboratoire accrdit pour le paramtre
lgionelles par le Comit franais d'accrditation ou tout autre organisme
d'accrditation quivalent europen signataire de l'accord multilatral pris
dans le cadre de la coordination europenne des organismes
d'accrditation.
Dlais d'application.
Pour les tablissements de sant et les tablissements sociaux et mdico-
sociaux d'hbergement pour personnes ges,
les dispositions du prsent arrt, l'exception de celles mentionnes l'article
5, s'appliquent compter du 1er juillet 2010.
Les dispositions mentionnes l'article 5 s'appliquent compter du 1er janvier
2012.
Pour les htels et rsidences de tourisme, les campings, les autres
tablissements sociaux et mdico-sociaux et les tablissements
pnitentiaires, les dispositions du prsent arrt s'appliquent compter du
1er janvier 2011.
Pour les autres tablissements recevant du public, les dispositions du
prsent arrt s'appliquent compter du 1er janvier 2012.
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Piscine afsset 2010