FACULTAD DE INGENIERIA

AGROINDUSTRIAL

DOCENTE
ASIGNATURA

: Ing. Nelson Garca Garay

:

Microbiologa
Agroindustrial

TEMA

: Prctica N2

ESTUDIANTE

: Bocanegra Garca Eylen Roco

TARAPOTO SAN MARTN

- 2014-

PRCTICA N 02:
OBSEVACIN MACROSCPICA Y MICROSCPICA DE BACTERIAS,
MOHOS Y LEVADURAS

I.

INTRODUCCIN
Existen varios tipos de microorganismos que crecen y se reproducen
en todo tipo de alimentos, causando serios problemas de dao y
prdida.
El deterioro de los alimentos es causado por tres tipos de
microorganismos: mohos, bacterias y levaduras. Cada uno con
requisitos especficos de oxigenacin, nutrientes, humedad y
temperatura. De esta forma las condiciones ambientales determinan
el tipo de microorganismos que va a prevalecer en el producto
causando la mayora del dao.
La sociedad humana se beneficia de los microorganismos de muchas
formas. Son necesarios para la elaboracin de pan, queso, cerveza,
antibiticos, vacunas, vitaminas, enzimas y otros productos
importantes.
Hay tres grupos de microorganismos que tienen inters
biotecnolgico o industrial: bacterias, levaduras (hongos unicelulares
del grupo ascomicetos) y mohos (hongos que no forman estructuras
claramente microscpicas).
Los mohos, junto a las levaduras, producen fermentaciones que
proporcionan bebidas, productos alimenticios (quesos), cidos
orgnicos (ctrico, lctico), antibiticos (penicilina) o enzimas
(amilasas, pectinasas, proteasas).
Bacterias, levaduras y mohos son utilizados en las conversiones
biolgicas, de las cuales las ms importantes son las fermentaciones.

II.

OBJETIVOS
Adquirir entrenamiento en la realizacin de cultivo de
microorganismos.

 Observar la morfologa macroscpica microbiana y aprender a

diferenciar los distintos tipos.
Observar la morfologa microscpica microbiana y aprender
los distintos tipos a partir de las coloraciones de las muestras.
III.

REVISIN DE LITERATURA
Medio de Cultivo: Es un sustrato o solucin utilizada para el
desarrollo de microorganismos el cual constituye el aporte de
nutrientes indispensables para el crecimiento de los mismos. Los
medios de cultivo deben contener los nutrientes y factores de
crecimiento necesarios y deben estar exentos de cualquier
microorganismo contaminante.
El aire que respiramos no es solo una simple mezcla de nitrgeno,
oxgeno y CO2, el aire contiene en suspensin diferentes tipos de
microorganismos, especialmente bacterias y hongos. La presencia
de uno u otro tipo depende del origen, de la direccin e intensidad de
las corrientes de aire y de la supervivencia del microorganismo. Los
microorganismos presentes en el aire son un riesgo potencial de
contaminacin de materias primas, productos semi terminados, de
procesos, de pacientes, y personal que trabaja en reas que
requieran calidad de aire controlado.
La produccin de alimentos por tcnicas microbiolgicas
es una actividad de larga historia: los microorganismos alteran los
constituyentes de los alimentos de forma que los estabilizan
permitiendo su mayor duracin y, adems, proporcionan compue
stos que confieren sabores caractersticos a los alimentos por ellos
producidos. Esta faceta se complementa
con la accin
de microorganismos alterantes de los alimentos y responsables
de su deterioro de forma que se hagan inaceptables por los
consumidores.
El yogur es un producto lcteo producido por la fermentacin natural
de la leche. A escala industrial se realiza la fermentacin aadiendo
a la leche dosis del 3-4% de una asociacin de dos cepas
bacterianas: el Streptococcus termophilus, poco productor de cido,
pero muy aromtico, y el Lactobacillus bulgaricus, muy acidificante.
Por lo tanto, contiene dos morfologas bacterianas distintas (cocos y
bacilos).
La fermentacin espontnea es el resultado de incalculables
transformaciones bioqumicas realizadas por un conjunto microbiano
muy diverso a partir de una materia prima de por s muy compleja. La
levadura de vinificacin Saccharomyces ellipsoideus transforma la

glucosa en etanol, pero tambin en glicerol y numerosos otros

productos secundarios. Esta misma levadura emplea al mismo
tiempo otros azcares, varios cidos orgnicos y aminocidos. As
pues, una sola levadura en el zumo de uva es responsable de una
multitud de reacciones.
Los mohos crecen sobre los vegetales produciendo el deterioro de
los mismos. Forman metabolitos secundarios que actan como
antibiticos favoreciendo la prevalencia del moho frente a otros
microorganismos, muchos de los cuales son txicos para plantas.
(Swanson 1987).
La enfermedad Cladosporiosis del tomate, se caracteriza por la
aparicin de moho gris causada por el hongo Cladosporium fulvum.
Es un tipo de hongo que al igual que la mayora de los hongos se
desarrolla en cultivos con una temperatura y humedad alta.
IV.

MATERIALES Y MTODOS
4.1.

Materiales

Placas Petri, lminas portaobjetos y cubreobjetos

Mechero de alcohol, asa de kolle, fsforo
Equipo: Microscopio
Material Biolgico: Yogurt, Vinagre, Mosto de vino, Pan,
Zanahoria, Tomate
Medios de Cultivo: Agar Nutritivo, Oxitetraciclina
Glucosa Agar y Agar Rojo Violeta
4.2.

Mtodos
La
observacin
macroscpica
y
microscpica
microorganismos se realiz de la siguiente manera:

de

Microorganismos del Ambiente de Trabajo: Se coloc en

las prcticas los 3 tipos de medios de cultivos ya mencionados
en las placas petri, luego se las abri y se recorri el
laboratorio exponindoles al aire, se cerr las placas Petri y se
las incub en la estufa. Se observ el crecimiento
microbiolgico por 3 das consecutivos.
Microorganismos de los Alimentos: Se coloc el pan,
tomate y zanahoria sobre papel filtro, se les puso en bolsas
plsticas y se les dej a temperatura ambiente. Se observ el
crecimiento microbiano por 3 das consecutivos.

Bacterias del yogur: Colocamos una mnima cantidad de

yogur en la lmina portaobjetos y adems una gota de agua y
lo cubrimos con el cubreobjetos. Y observamos a travs del
microscopio.
Levaduras del Vino: Disolvemos una pequea cantidad de
muestra de vino con una gota de agua sobre una lmina
portaobjetos y lo cubrimos con el cubreobjetos. Observamos a
travs del microscopio.
V.

RESULTADOS
Microorganismos del Ambiente de trabajo: En los medios de
cultivo de Agar Nutritivo se observ el crecimiento de mohos, en el
segundo y tercer da.
Microorganismos de los Alimentos: De las 3 muestras: pan,
tomate y zanahoria, se observ que en el tomate al tercer da haba
un leve crecimiento de mohos.
Bacterias del yogur: Al realizar la observacin en el microscopio se
observ bacterias de los 2 tipos de bacterias: cocos y bacilos
(Streptococcus termophilus y Lactobacillus bulgarius).
Levaduras del Vino: Al realizar la observacin en el microscopio se
observ en la muestra levaduras de forma ovoide.

VI.

DISCUSIONES
El medio ambiente tanto como los alimentos tiene una interaccin
con los microorganismos siendo sta benfica o perjudicial.
Considerando la revisin bibliogrfica en el ambiente se deben
encontrar microorganismos como hongos y bacterias, mientras que
en los resultados obtenidos tenemos la existencia de levaduras, esto
es debido a que el aire es un medio de proliferacin y transporte de
microorganismos y en el ambiente del laboratorio continuamente se
realiza procesos de fermentacin.
El estudio de forma sensorial para el caso del tomate no fue tal vez el
ms adecuado ya que aparentemente no se pudo encontrar una
cantidad considerable de microorganismos siendo ste el un vegetal
muy dbil frente a los mismos.
Las levaduras son los microorganismos encargados de las
fermentaciones como es el caso del vino que sin duda alguna la
levadura Saccharomyces ellipsoideus es la encargada de la
fermentacin vnica.

VII.

CONCLUSIONES

1. Es posible en el ambiente encontrar levaduras debido a que en el

laboratorio de Microbiologa y Fermentacin se realiza
constantemente procesos fermentativos.
2. Mediante un estudio sensorial no sabremos con certeza si existen
ms microorganismos en el alimento.
3. Las levaduras encontradas en el vino son de forma ovoide
(Saccharomyces ellipsoideus)
VIII.

CUESTIONARIO
1. Por qu es importante estudiar a los microorganismos?
Es importante estudiar los microorganismos para comprender
cules son sus actividades beneficiosas y perjudiciales y
mediante esta comprensin, aprenderemos a disear la manera
de aumentar los beneficios y disminuir los daos.
2. Por qu es necesario con algunas muestras, fijar y teir,
para observar al microscopio?
La fijacin de las muestras es importante para:
Evitar que se produzcan cambios en el aspecto o volumen
de la muestra durante los procesos subsecuentes.
Permitir la claridad de las estructuras de los
microorganismos para poder diferenciarlos.
El teido es importante ya que existen muestras o
microorganismos incoloros lo cual dificulta su observacin en el
microscopio.
3. Explicar los mtodos de tincin que se utilizan en la
microbiologa.
Existen tres tipos de tcnicas de tincin: simples, diferenciales y
especficas:
Tinciones simples: Se usa un nico colorante, que siempre es
de tipo bsico. Se utilizan solamente para incrementar el
contraste; todas las clulas absorbern el colorante y quedarn
teidas del mismo color. Por tanto, la tincin simple mejora la
observacin de la clula completa. Se fija el espcimen, se aade
el colorante y se deja el tiempo adecuado para que se absorba,
se retira el exceso de colorante y la preparacin ya est lista para
ser observada. Si se utiliza un mordiente, hay que aadirlo justo
antes del colorante.

Tinciones diferenciales: Se utilizan para distinguir entre tipos de

microorganismos. La tcnica de tincin diferencial consta de dos
etapas: una tincin primaria (siguiendo el mismo mtodo que en
una tincin simple) seguida de una tincin de contraste. En la
tincin de contraste se utiliza otro colorante que tie (y por tanto,
revela) las clulas no teidas por el primer colorante. Estas
tinciones son muy utilizadas en microbiologa. Por ejemplo, la
tincin de Gram y la tincin de cido-alcohol resistencia, ambas
aplicadas a bacterias.
Tinciones especficas: Mientras las tinciones diferenciales
permiten distinguir entre distintos tipos de microorganismos, las
tinciones especficas incrementan el contraste en las clulas
microbianas y revelan estructuras particulares, entre las que se
incluyen en las dos poras, los flagelos y las cpsulas.
4. Qu medios especficos se utilizan para el cultivo de
bacterias y hongos?
Para Hongos:
Agar Sabouraud
Agar Neopeptone-glucose-rose Bengal-aureomycin
Agar Czapek (para Aspergillus, penicillium y hongos
relacionados
Agar Yeast extract-malt extract-glucose
5. Por qu es necesario ajustar el pH de los medios de cultivo,
cul es el valor adecuado para bacterias y para hongos?
Es necesario ajustar el pH para la supervivencia del
microorganismo que se desee cultivar, teniendo en cuenta cules
son sus niveles de pH ptimos.
Para las bacterias el pH adecuado es casi neutro (6-8).
En el caso de los hongos el pH es muy variado (4.8-7.8)
6. Qu muestras recomendara usar Ud. Para sta prctica,
que determinara?
Recomendara muestras como el pan (en estado de deterioro)
para determinar las levaduras existentes.
Repollo, lechuga, coliflor ya que hay muchos organismos que
atacan a las hojas y es probable que estas muestras se
determinen de manera ms fcil los tipos y morfologas de
microorganismos existentes en las mismas.

IX.

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
1. Swanson BG. 1987. Mycotoxins on fruits and vegetables. Acta
Horticulturae 207: 49-61.

LINKS
1. file:///C:/Users/b/Downloads/Microorganismos%20%20su%20importancia%20y%20control.pdf
2. http://inter-micro-uvm.over-blog.es/article-33657810.html
3. http://www.slideshare.net/vegabner/preparacion-de-mediosde-cultivos-jhons-27609464
4. http://www.porquebiotecnologia.com.ar/adc/uploads/pdf/22Micr
oorganismos_microscopio.pdf
5. http://urbinavinos.blogspot.com/2013/01/microorganismos-delvino.html
6. http://www.unsa.edu.ar/matbib/hongos/01htextomohos.pdf