Universidad Autnoma de Ciudad Jurez

Ingeniera Biomdica

Laboratorio de Bioqumica

Prctica #3: Uso, calibracin y

manejo del potencimetro
Prctica #4: Titulacin Acido-Base

Profesor: lvaro Torres

Alumna: Jennifer Alejandra Muoz Valdez
131449

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Prctica #3-4: Uso, calibracin y manejo del potencimetro

Titulacin Acido-Base
Prerrequisitos:
Definiciones
Disolucin:
Una disolucin es
una mezcla homognea a
nivel molecular o inico de dos o ms sustancias, que no reaccionan entre s,
cuyos componentes se encuentran en proporcin que vara entre ciertos lmites.
Tambin se puede definir como una mezcla homognea formada por
un disolvente y por uno o varios solutos.
Mezcla: Una mezcla es un sistema material formado por dos o ms componentes
unidos, pero no combinados qumicamente. En una mezcla no ocurre una reaccin
qumica y cada uno de sus componentes mantiene su identidad y propiedades
qumicas. No obstante, algunas mezclas pueden ser reactivas, es decir, que sus
componentes pueden reaccionar entre s en determinadas condiciones
ambientales
cido: Un cido es considerado tradicionalmente como cualquier compuesto
qumico que, cuando se disuelve en agua, produce una solucin con
una actividad de catin hidronio mayor que el agua pura, esto es, un pH menor
que 7.
Base: Una base es cualquier sustancia que presente propiedades alcalinas. En
primera
aproximacin
es
cualquier sustancia que

en disolucin acuosa aporta iones OH al medio.

Amortiguador:
Un tampn, buffer, solucin
amortiguadora o solucin
reguladora es la mezcla en concentraciones relativamente elevadas de un cido
dbil y su base conjugada, es decir, sales hidroltica mente activas. Tienen la
propiedad de mantener estable el pH de una disolucin frente a la adicin de
cantidades relativamente pequeas de cidos o bases fuertes.
Objetivo:

Que el alumno conozca el instrumento de medicin, principios y

fundamento para aplicarlo en las caractersticas cido base de las
soluciones.
Observar una reaccin acido-base fuerte utilizando un indicador de pH y
comprobar el pH de la solucin mediante el uso del potencimetro.

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Introduccin:
El pH nos ayuda a determinar de qu tipo es una sustancia, acido o base.
La escala de pH es de 0 a 14, donde de 0 a 6.9 se considera cido y de 7 a 14 se
considera base.
Para determinar el pH de una forma ms exacta se utiliza un potencimetro, en
este caso un pH-metro que consiste en dos electrodos, uno de calomel (mercurio,
cloruro de mercurio) y otro de vidrio comn no conductor.
Como los electrodos de vidrio de pH cuantifican la concentracin de H+ relativa a
sus referencias, deben ser calibrados peridicamente para asegurar la precisin,
es por eso que se utilizan soluciones especficas llamadas buffers de calibracin
Estas soluciones son: solucin buffer (fosfato) de pH 7 color amarillo claro,
solucin buffer (biftalato) de pH 4 color rojo-rosado, solucin buffer (borato) de pH
10 color azul claro.

La titulacin cido-base es una tcnica utilizada para conocer la concentracin de

soluto que puede actuar como cido o base. Es un tipo de valoracin basada en
una reaccin cido-base o reaccin de neutralizacin entre el la sustancia cuya
concentracin se quiere conocer y la sustancia valorante.
Un indicador de pH es una sustancia que permite medir el pH de una sustancia.
Generalmente, se utilizan como indicadores sustancias qumicas que cambian su
color al cambiar el pH de la disolucin. El cambio de color se debe a un cambio
estructural impulsado por la protonacin o desprotonacin de la sustancia. Los
indicadores cido-base tienen un intervalo de cambio de unas dos unidades de
pH, en la que cambian la disolucin en la que se encuentran de un color a otro, o
de una disolucin incolora, a una coloreada.
Los ms conocidos son el naranja de metilo, que vira en el intervalo de pH 3,1 4,4, de color rojo a naranja, y la fenolftalena, que vira desde un pH 8 hasta un pH

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10, transformando disoluciones incoloras en disoluciones con colores rosados /

violetas.
Los indicadores de pH tienen una constante de protonacin, K, que informa sobre
el desplazamiento de la reaccin de protonacin de la forma bsica del indicador.
Se dice que el cambio de color de un indicador es apreciable cuando la
concentracin de la forma cida o de la forma bsica es superior o igual a 10
veces la concentracin de la forma bsica o la forma cida respectivamente.

Metodologa:
Experimento 1.

Para su calibracin a un punto:

1. Conecte el electrodo al instrumento y encienda la tecla ON.

2. Introduzca el electrodo en la solucin patrn de pH 7 y permita la lectura que la
lectura
se
estabilice
(aproximadamente
30
seg).
3. Ajuste la perilla de compensacin de temperatura temp. C a la temperatura de
la
solucin
patrn
(buffer).
4. Ajuste la perilla de calibracin calbrate, hasta que el medidor indique el valor
pH
7.0
de
la
solucin
patrn
(buffer).
5. Retire el electrodo de la solucin patrn (buffer) y enjuguelo muy bien con
agua
destilada
(pizeta),
pero
no
seque
el
electrodo.
6. Ajuste la perilla de compensacin de temperatura temp. C a la temperatura de
la
solucin
a
medir.
7. Introduzca el electrodo en la solucin a medir y lea el valor pH del medidor. Si el
valor de la solucin no est entre 3 unidades de pH de la solucin patrn (7.0
pH), se necesita hacer una calibracin a dos puntos (con dos buffers de diferente
pH, 7 y 4, o 7 y 10 dependiendo de las soluciones que vaya a manejar).
8. Despus de cada medicin, retire el electrodo y enjuguelo muy bien con agua
destilada (pizeta)

Calibracin a dos puntos:

1. Siga los pasos de calibracin a un punto hasta el paso 5

2. Sumerja el electrodo en la segunda solucin patrn de pH 4.00 o pH 10.00. La
temperatura de esta solucin patrn debe ser idntica a la de la primera
3. Ajuste el control de pendiente slope, hasta que el medidor indique el valor del
pH
de
la
segunda
solucin
patrn.
4. Retire el electrodo, enjuguelo con agua destilada y proceda a efectuar las

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mediciones. No olvide enjuagar el electrodo muy bien con agua destilada (pizeta)
despus de cada medicin.
Experimento 2.Materiales:

2 buretas 50 ml
2 Matraz Erlenmeyer
150 ml HCl 0.1N
NaOH 0.1N
Fenolftalena

Metodologa:
1.
Verter
NaOH
y
HCl
en
buretas
graduadas.
2. Tomar 20 ml de HCl y colocarlo en un matraz Erlenmeyer.
3.
Medir
el
pH
de
la
solucin
un
potencimetro
4.
Agregar
4
gotas
de
fenolftalena
y
mezclar
5. Agregar gota por gota NaOH a los 20 ml de HCl siempre mezclando
6. Observar cambios de coloracin. 7. Una vez obtenido el cambio de coloracin
del indicador de pH medir una vez ms el pH de la solucin ahora titulada.
Resultados1
Muestra

pH

Buffer

Caf negro
Caf con azcar
Caf con crema
Soda
Leche
Salsa Valentina
Jugo de limn
Agua embotellada
T

5.90
4.51
6.41
3.84
6.75
3
2.20
7.59
4

7
7
7
4
7
4
4
7
4

Resultados2
Volumen de NaOH utilizado durante la titulacin de HCl: 37 ml
Concentracin de NaOH y de HCl en la solucin final: .01 M
Establecer la relacin entre el indicador de pH y el pH obtenido con el
potencimetro: 1.21-4.00

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Discusiones:
Amortiguadores Fisiolgicos: Los tampones fisiolgicos son la primera lnea de
defensa frente a los cambios de pH de los lquidos corporales, entre los que
destacan: el tampn fosfato, el tampn bicarbonato y el tampn hemoglobina.
Fenolftalena: La fenolftalena de frmula (C20H14O4) es un indicador de pH que
en disoluciones cidas permanece incoloro, pero en presencia de bases toma un
color rosado con un punto de viraje entre pH=8,0 (incoloro) a pH=9,8 (magenta o
rosado). Es un compuesto qumico orgnico que se obtiene por reaccin
del fenol (C6H5OH) y el anhdrido ftlico (C8H4O3) en presencia de cido sulfrico.
Otros indicadores de pH:

-Naftolftalena

Prpura de cresol

Amarillo de alizarina

Repollo morado

amarillo de metilo

Rojo clorofenol

Azul de bromofenol

Rojo Congo

Azul de bromotimol

Rojo de bromocresol

Azul de metileno

Rojo de cresol

Azul de timol

Rojo de fenol

Betabel

Rojo de metilo

Cebolla morada

Rojo neutro

Col morada

Timolftalena

Eritrosina disdica

Tornasol

Fenolftalena

Tropeolina

Indigotina

Verde brillante

Naranja de metilo

Verde de bromocresol

Naranja de etilo

Verde de cresol

Naranja de xinelol

Verde de metilo

Nitramina

Verde congo

Nitrato de plata

Verde Janus

p-Nitrofenol

Violeta de genciana

Prpura de bromocresol

Violeta de metilo

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Fundamento de titulacin: El fundamento de la titulacin cido-base es la

reaccin de neutralizacin entre cidos y base. Como solucin volumtrica se
selecciona un cido o base como complemento a la solucin de prueba. Mediante
la titulacin se consigue una neutralizacin entre iones H3O+- y OH-. Si se
alcanza el valor pH 7 la solucin es neutra; aadiendo ms solucin volumtrica la
solucin de prueba se volver ms cido o bsico. Si se registra en una curva el
desarrollo del valor pH a travs de todo el desarrollo de la reaccin, es posible
determinar la cantidad a raz del punto de equivalencia (valor pH 7).
Problemas:
Preparar 2 litros de una solucin 1M de glucosa
PM glucosa = 180 g
n = M.V
V=2L
n=(1)(2000)=2000
M=1
g=n/PM=2000/180g
M= n/V
g=11.11g
Preparar .5L de una solucin de NaCl 10M
PMNaCl=58.44
M=10
V=.5L
n = M.V
g=n/PM=5000/58.44g
n=(10)(500)=5000
g=85.55g

Preparar una solucin de glucosa 10% (500ml)

PM glucosa = 180 g
n = M.V
V = .5 L
n=(.1)(500)=50
M = .1
g=n/PM=50/180g
M= n/V
g=0,27g
Preparar una solucin de H2SO4 (100ml) .1 Normal
PM H2SO4 = 82 g
n = M.V
V = .1 L
n=(.1)(50)=5
M = .1
g=n/PM=5/82g
M= n/V
g=0,06 g

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Conclusiones:
El trmino pH se define como el logaritrno negativo de la concentracin de iones
hidrogeno:
pH = - log [H']
Esta definicin, aunque no es rigurosa*, es adecuada para la mayor parte de los
estudios bioqumicos. Para calcular el pH de una solucin se debe:
1) Calcular la concentracin del ion hidrgeno, [H+].
2) Calcular el logaritmo de base 10 de [H+].
3) El pH es el negativo del valor encontrado en el paso 2. Por ejemplo, para agua
pura a 25 C:
pH = -log [H] = - log = - (-7) = 7.0
Los valores de pH bajos corresponden a concentraciones elevadas de H- y los
valores de pH altos a concentraciones bajas de H'.
Los cidos son donadores de protones y las bases son aceptores de protones. Sin
embargo, se hace una distincin entre cidos fuertes (por ejemplo, HCI, H2SO4),
que se disocian completamente aun en soluciones muy cidas (pH bajo) y los
cidos dbiles, que se disocian solo de manera parcial en soluciones acidas. Una
distincin semejante se hace entre bases fuertes (por ejemplo, KOH, NaOH) y
bases dbiles (por ejemplo, Ca(OH)2). Solo las bases fuertes se disocian a pH
alto. Muchas sustancias bioqumicas son cidos dbiles.
Debido a que todas las reacciones qumicas en gran medida del pH, es importante
poder medir el pH con gran exactitud. Esta medicin se realiza con pH-metro
comercial. Sin embargo, es importante saber cmo efecta el instrumento la
medicin del pH, debido a que existen diversos factores que pueden hacer variar
los valores que se observan respecto al pH real.
Un pH-metro mide la diferencia de voltaje de una disolucin. La clave del sistema
es un electrodo cuyo potencial es dependiente del pH. El que se usa con mayor
frecuencia es el electrodo de vidrio. El funcionamiento de este electrodo se basa
en el hecho de que ciertos tipos de vidrio de boro silicato son permeables a los
iones H+. Debido a que el paso de un ion H+ a travs del vidrio aade un ion
positivo a la disolucin con una baja concentracin de iones H+, y deja en la
disolucin inicial un ion negativo, se desarrolla un potencial elctrico a travs del
vidrio.
Debido a que los electrodos de vidrio de pH cuantifican la concentracin de H+
aproximada a sus referencias, deben ser calibrados para asegurar la precisin, es
por eso que se utilizan soluciones especficas llamadas buffers de calibracin
(disoluciones reguladoras de pH conocido). Estas soluciones son: solucin buffer
(fosfato) de pH 7 color amarillo, solucin buffer (biftalato) de pH 4 color rojo,
solucin buffer (borato) de pH 10 color azul.

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Bibliografa:
Freifelder D. Tcnicas de Bioqumica y Biologa Molecular, Editorial
Reverte, Espaa; Barcelona, 2003, 635 pp.

Murray R. K., Mayes P. A., Granner D. K., Rodwell V. W. Bioqumica de

Harper, 14va Edicin. Editorial McGraw Hill, Mxico D.F. 2000, 911 pp.

Murray R.K. et al. Harper Bioqumica Ilustrada, 28va Edicin. Editorial

McGraw Hill, Mxico D.F. 2006, 687 pp.

Nelson D.L., Cox M.M. Lehninger Principios de Bioqumica, 4ta Edicin,

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Gmez G. Indicadores de pH [Online]. Mxico: UNAM, 2010, disponible en:

http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/12.IndicadoresdepH_9152.pdf

Bertomeu J.R. PH-METROS Y OTROS INSTRUMENTOS DE MEDIDA

ELECTROQUMICA
[Online]
Espaa:
Valencia,
disponible
en:
http://www.uv.es/~bertomeu/material/museo/instru/pdf/10.pdf