Separacin de protenas por dilisis

La dilisis suele utilizarse como tcnica para separar las protenas de las molculas de
bajo peso molecular que proceden de un extracto de un tejido o de un extracto celular.
Procedimiento

Una vez obtenido un homogeneizado de clulas o tejidos, este se retiene en un saco

construido con un material cuyos poros son ultramicroscpicos, como, por ejemplo, el
celofn. Posteriormente, el saco se suspende en agua destilada, las molculas pequeas
que hay en el extracto, tales como las sales minerales, atravesarn los poros, pero las
protenas quedarn retenidas.
Saco de
dilisis

Molculas
pequeas

El agua se
sustituye varias
veces

Protenas
Solucin
concentrada
Agua
destilada

Las molculas pequeas

se difundirn fuera del
saco ya que tienden a
desplazarse hacia las zonas
de menor concentracin.
Las protenas tienen
impedido el paso por el
tamao del poro.

El agua se sustituye
varias veces para que los
solutos pequeos puedan
seguir difundindose fuera
del saco.

La concentracin
de molculas de soluto
pequeas en el interior
del saco llega a ser
despreciable.

Tras la separacin de las molculas pequeas, en el interior del saco queda una mezcla
de protenas que pueden separarse segn su tamao. Para ello, se utilizan dos tcnicas:
la cromatografa y la electroforesis.
De esta forma, se dispone de la suficiente cantidad de protena pura de la que se puede
determinar su composicin aminocida y su secuencia.

Tcnicas

La dilisis

La dilisis es un fenmeno que permite que las molculas grandes (como las protenas o
el almidn) y las molculas pequeas (como los aminocidos, la glucosa o las sales minerales) de una disolucin puedan separarse por difusin selectiva a travs de una membrana semipermeable. Esta membrana, llamada dializadora, presenta un tamao de poro
que permite el paso de las sustancias pequeas, pero no el de las molculas grandes.

Molculas grandes que

no pueden atravesar la
membrana

Molculas pequeas
que pueden atravesar
la membrana

Membrana semipermeable que

permite el paso de molculas pequeas,
pero no de solutos grandes como
las protenas

Tcnicas