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Alfredo Gallego
Ctedra de Higiene y Sanidad
Facultad de Farmacia y Bioqumica
Universidad de Buenos Aires
Suelos
Residencial
Industrial
Aire
Aire ambiental
Emisiones gaseosas
Agua
Irrigacin
Bebida para ganado
Pesca industrial
Recreacin
COMPUESTOS
CONTROLADOS
CONTAMINANTES
EMERGENTES
Clorofenoles
Medicamentos
Nitrofenoles
Herbicidas
Insecticidas
Solventes halogenados
Metales pesados
PRODUCCIN
PRODUCTOS
RESIDUOS
CONSUMIDOR
TRATAMIENTO DE
RESIDUOS
MUNICIPALES
TRATAMIENTO DE
RESIDUOS
INDUSTRIALES
CONTAMINANTE
REMEDIACIN
Tratamiento para reducir la contaminacin
La remocin o no de la
matriz contaminada
Ex situ
In situ
Procesos Fsico-qumicos
La naturaleza del proceso
empleado
Procesos Biolgicos
PROCESOS BIOLGICOS
VENTAJAS
Bajo costo
Degradacin completa a CO2 y H2O (Mineralizacin)
No afecta la flora y fauna del lugar
BIORREMEDIACIN
ES EL USO INTENCIONAL DE LOS PROCESOS DE
BIODEGRADACIN PARA ELIMINAR CONTAMINANTES
AMBIENTALES DE LOS SITIOS DONDE ELLOS SON O HAN
SIDO LIBERADOS INTENCIONAL O INADVERTIDAMENTE
BIORREMEDIACIN
Aplicacin de organismos vivos para:
Degradar (Biodegradacin)
Transformar (Biotransformacin)
Separar (Bioadsorcin)
BIORREMEDIACIN
INOCULACIN
MICROORGANISMOS
ESPECFICOS
BIOESTIMULACIN
NUTRIENTES
AIREACIN
SUSTRATO
COMPUESTOS
BIOGNICOS
ESTRUCTURA
SEMEJANTE A LOS
COMPUESTOS
SINTETIZADOS POR
LOS SERES VIVOS
XENOBITICOS
ESTRUCTURAS O
SUSTITUYENTES
DISTINTOS A LOS
ENCONTRADOS EN LA
NATURALEZA
NMERO DE SUSTITUYENTES
POSICIN DE LOS SUSTITUYENTES
NMERO DE ANILLOS AROMTICOS
RAMIFICACIN DE CADENAS
ASPECTOS FISICOQUMICOS
COEFICIENTE DE PARTICIN OCTANOL / AGUA
PUNTO DE FUSIN / EBULLICIN
RADIO DE VAN DER WAALS
s HAMMET
COMPUESTO
BIODEGRADABLE
COMPUESTO
BIODEGRADADO
BIODEGRADACIN
Microorganismos
autctonos
Naturalmente presentes en
ambientes contaminados
Microorganismos
genticamente modificados
Mayor impacto
ambiental
OBJETIVO GENERAL
Aislamiento
Identificacin
Aislamiento
Ensayos de
Biodegradacin
Reactor batch
Influencia de
distintos factores
Concentracin
Ensayos de
Biodegradacin
Reactor batch
Influencia de
distintos factores
pH
Ensayos de
Biodegradacin
Reactor batch
Influencia de
distintos factores
Ensayos de
Biodegradacin
Reactor batch
Influencia de
distintos factores
Presencia de otros
compuestos
Ensayos de
Biodegradacin
Reactor batch
Influencia de
distintos factores
Adaptacin
Ensayos de
Biodegradacin
Reactor batch
Reactor continuo
Ensayos de
Biodegradacin
Ensayos de
Biodegradacin
Evaluacin de la
Biodegradacin
Evaluacin de la
Biodegradacin
Evaluacin del
crecimiento
bacteriano
Evaluacin de la
degradacin del
compuesto
Evaluacin de la
toxicidad
Espectrofotometra UV
Bioensayos
estandarizados
DQO
Vibrio fischeri
Pseudokirchneriella
subcapitata
Recuento en placa
Microscopa electrnica
de barrido
Cromatografa
gaseosa
Electroforesis
capilar
Daphnia magna
Lactuca sativa
p-cloroanilina
2,4-diclorofenol
2,4-D
2,4,6-triclorofenol
MCPA
m-nitrofenol
Ibuprofeno
o-, m- y p-cresol
Cloruro de
benzalconio
cido 3-clorobenzoico
Seleccin de microorganismos
Muestras de aguas superficiales
Determinacin de la viabilidad
Subcultivos
sucesivos
Aislamiento
de cepas
degradadoras
Nuevo
subcultivo
Descartar
Ensayos de biodegradacin
Reactor batch
ADAPTACIN
Frasco Erlenmeyer + 100 mL medio mnimo
Incubacin a 28 C en
bao termostatizado
con agitacin planorotatoria
Evaluacin de la
biodegradacin
Ensayos de biodegradacin
Reactores continuos
Aireacin
Relleno
Carbn activado
granular
Entrada
Recirculacin
BIOENSAYOS DE TOXICIDAD
Vibrio fisheri
Pseudokirchneriella subcapitata
Daphnia magna
Lactuca sativa
RESULTADOS
100
75
8
50
7
25
% 2-Clorofenol remanente
Reactor batch
10
20
30
40
Tiempo (h)
300
200
100
0
30
60
90
120
Das de operacin
5 mm
2720 x
10 mm
2080 x
Evaluacin de la toxicidad
Reactor continuo
Achromobacter sp.
2-clorofenol 200 mg/L
CE 50 (%v/v)
INICIAL
FINAL
>90
75
50
25
5,5
0
Daphnia magna
50
7
10
20
30
40
Tiempo (h)
Eficiencia de remocin de compuesto/DQO: 98,0 / 89,1
0
50
% BKC remanente
Crecimiento bacteriano
(Log UFC/mL)
Concentracin (mg/L)
120
100
80
60
40
20
0
0
Entrada
Salida
10
20
Das de
30
40
50
operacin
60
70
500mm
1 mm
5mm
Evaluacin de la toxicidad
Reactor continuo
INICIAL
75
CE50 (%v/v)
FINAL
50
50
25
CE (%v/v)
0,2
0
1,0
0,1
Vibrio fischeri
Pseudokirchneriella subcapitata
Lactuca sativa
Pseudomonas sp.
Achromobacter sp.
Sphingopyxis sp.
Biodegradacin
Concentracin (mM)
0.30
Influente
Nitrificacin
Efluente
0.26
0.26
0.20
Efluente
0.26
0.18
Denitrificacin
Efluente
0.26
0.18
0.10
0.00
PCA
Cloruro
Amonio
Nitrato
Evaluacin de la toxicidad
INICIAL
75
CE50 (%v/v)
FINAL
50
50
22,0
25
16,0
14,4
CE (%v/v)
0
Vibrio fischeri
Pseudokirchneriella subcapitata
Daphnia magna
Ensayo respiromtrico
Agua superficial + Ibuprofeno 20 mg/L
Ibuprofeno
Control
Cultivo en medio
Mnimo con el compuesto
como nica
fuente de carbono
28C - Agitacin
CONCLUSIONES
El empleo de bacterias y comunidades bacterianas
autctonas es una alternativa eficiente y econmica
para el tratamiento de efluentes y la biorremediacin de
aguas contaminadas con compuestos persistentes
MUCHAS GRACIAS
agallego@ffyb.uba.ar