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Biologia

Metabolismo da Vida Microscpica

Magnlia Fernandes Florncio de Arajo


Maria Celeste Melo Nunes
Renata de Ftima Panosso

Metabolismo da Vida Microscpica

Magnlia Fernandes Florncio de Arajo


Maria Celeste Melo Nunes
Renata de Ftima Panosso

Biologia

Metabolismo da Vida Microscpica


2 Edio

Natal RN, 2012

Governo Federal
Presidenta da Repblica
Dilma Vana Rousseff
Vice-Presidente da Repblica
Michel Miguel Elias Temer Lulia
Ministro da Educao
Aloizio Mercadante Oliva

Universidade Federal do Rio Grande do Norte UFRN


Reitora
ngela Maria Paiva Cruz
Vice-Reitora
Maria de Ftima Freire Melo Ximenes

Secretaria de Educao a Distncia (SEDIS)


Secretria de Educao a Distncia
Maria Carmem Freire Digenes Rgo

Secretria Adjunta de Educao a Distncia


Eugnia Maria Dantas

FICHA TCNICA
COORDENAO DE PRODUO DE MATERIAIS DIDTICOS
Marcos Aurlio Felipe

GESTO DE PRODUO DE MATERIAIS


Luciana Melo de Lacerda
Rosilene Alves de Paiva

PROJETO GRFICO
Ivana Lima

REVISO DE MATERIAIS
Reviso de Estrutura e Linguagem
Eugenio Tavares Borges
Janio Gustavo Barbosa
Jeremias Alves de Arajo
Jos Correia Torres Neto
Kaline Sampaio de Arajo
Luciane Almeida Mascarenhas de Andrade
Thalyta Mabel Nobre Barbosa
Reviso de Lngua Portuguesa
Camila Maria Gomes
Cristinara Ferreira dos Santos
Emanuelle Pereira de Lima Diniz
Janaina Tomaz Capistrano
Priscila Xavier de Macedo
Rhena Raize Peixoto de Lima

EDITORAO DE MATERIAIS
Criao e edio de imagens
Adauto Harley
Anderson Gomes do Nascimento
Carolina Costa de Oliveira
Dickson de Oliveira Tavares
Heinkel Hugenin
Leonardo dos Santos Feitoza
Roberto Luiz Batista de Lima
Rommel Figueiredo
Diagramao
Ana Paula Resende
Carolina Aires Mayer
Davi Jose di Giacomo Koshiyama
Elizabeth da Silva Ferreira
Ivana Lima
Jos Antonio Bezerra Junior
Rafael Marques Garcia
Mdulo matemtico
Joacy Guilherme de A. F. Filho

IMAGENS UTILIZADAS
Acervo da UFRN
www.depositphotos.com
www.morguele.com
www.sxc.hu
Encyclopdia Britannica, Inc.

Reviso das Normas da ABNT


Vernica Pinheiro da Silva

Catalogao da publicao na fonte. Bibliotecria Vernica Pinheiro da Silva.

Copyright 2005. Todos os direitos reservados a Editora da Universidade Federal do Rio Grande do Norte EDUFRN.
Nenhuma parte deste material pode ser utilizada ou reproduzida sem a autorizao expressa do Ministrio da Educaco MEC

Sumrio
Apresentao Institucional

Aula 1 Comparando clulas procariticas e clulas eucariticas

Aula 2 Trabalhando no laboratrio de Microbiologia

27

Aula 3 Vendo o invisvel

49

Aula 4 Nutrio e crescimento microbiano

73

Aula 5 Obteno de energia para a vida microbiana

91

Aula 6 Controlando os microrganismos

119

Aula 7 A gentica dos microrganismos

141

Aula 8 As bactrias se modicam

159

Aula 9 A diversidade dos microrganismos

181

Aula 10 Os microrganismos auxiliam a (re)circulao da matria no planeta

199

Aula 11 Como os microrganismos se relacionam

229

Aula 12 Os microrganismos podem ser nossos aliados!

253

Apresentao Institucional

Secretaria de Educao a Distncia SEDIS da Universidade Federal do Rio Grande


do Norte UFRN, desde 2005, vem atuando como fomentadora, no mbito local, das
Polticas Nacionais de Educao a Distncia em parceira com a Secretaria de Educao
a Distncia SEED, o Ministrio da Educao MEC e a Universidade Aberta do Brasil
UAB/CAPES. Duas linhas de atuao tm caracterizado o esforo em EaD desta instituio: a
primeira est voltada para a Formao Continuada de Professores do Ensino Bsico, sendo
implementados cursos de licenciatura e ps-graduao lato e stricto sensu; a segunda volta-se
para a Formao de Gestores Pblicos, atravs da oferta de bacharelados e especializaes
em Administrao Pblica e Administrao Pblica Municipal.
Para dar suporte oferta dos cursos de EaD, a Sedis tem disponibilizado um conjunto de
meios didticos e pedaggicos, dentre os quais se destacam os materiais impressos que so
elaborados por disciplinas, utilizando linguagem e projeto grco para atender s necessidades
de um aluno que aprende a distncia. O contedo elaborado por prossionais qualicados e
que tm experincia relevante na rea, com o apoio de uma equipe multidisciplinar. O material
impresso a referncia primria para o aluno, sendo indicadas outras mdias, como videoaulas,
livros, textos, lmes, videoconferncias, materiais digitais e interativos e webconferncias, que
possibilitam ampliar os contedos e a interao entre os sujeitos do processo de aprendizagem.
Assim, a UFRN atravs da SEDIS se integra o grupo de instituies que assumiram
o desao de contribuir com a formao desse capital humano e incorporou a EaD como
modalidade capaz de superar as barreiras espaciais e polticas que tornaram cada vez mais
seleto o acesso graduao e ps-graduao no Brasil. No Rio Grande do Norte, a UFRN
est presente em polos presenciais de apoio localizados nas mais diferentes regies, ofertando
cursos de graduao, aperfeioamento, especializao e mestrado, interiorizando e tornando
o Ensino Superior uma realidade que contribui para diminuir as diferenas regionais e o
conhecimento uma possibilidade concreta para o desenvolvimento local.
Nesse sentido, este material que voc recebe resultado de um investimento intelectual
e econmico assumido por diversas instituies que se comprometeram com a Educao e
com a reverso da seletividade do espao quanto ao acesso e ao consumo do saber E REFLETE
O COMPROMISSO DA SEDIS/UFRN COM A EDUCAO A DISTNCIA como modalidade
estratgica para a melhoria dos indicadores educacionais no RN e no Brasil.
SECRETARIA DE EDUCAO A DISTNCIA
SEDIS/UFRN

Comparando clulas
procariticas e clulas eucariticas

Aula

Apresentao

ma vez que voc j aprendeu sobre a diversidade dos organismos vivos que habitam
a terra na disciplina de Biodiversidade (vegetais, animais, protozorios, algas, fungos
e bactrias), vamos ento aprofundar nosso conhecimento a respeito de um desses
organismos, ou melhor, microrganismos que so as bactrias. O mundo microbiano constitudo
de bactrias, fungos, protozorios e algumas algas, mas as bactrias especicamente possuem
uma relao muito ntima conosco, pois elas esto dentro de ns, sobre ns e em toda parte
ao nosso redor. Voc sabia que nosso corpo possui mais clulas bacterianas que as nossas
prprias clulas?

Objetivos
1

Identificar e comparar as clulas procariticas e


eucariticas.

Reconhecer a estrutura de uma clula procaritica.

Aula 1

Metabolismo da Vida Microscpica

A vida pode ser dividida


em dois grandes grupos

raas ao microscpio eletrnico, foi possvel classicar todas as clulas vivas em


dois grupos: procarioto e eucarioto. Essa ferramenta de estudo permitiu a observao
de diferenas marcantes nas estruturas internas das clulas. O termo procarioto
proveniente das palavras gregas pro (antes) e karyon (ncleo), e o termo eucarioto das palavras
eu (verdadeiro) e karyon (ncleo), ou seja, as clulas eucariticas possuem uma regio interna
chamada de ncleo e as procariticas no possuem esta estrutura. Assim, as bactrias e
as arquibactrias (bactrias primitivas) so seres unicelulares e procariticos, e todos os
outros organismos vivos como vegetais, animais e ainda os protozorios, fungos e algas so
eucariticos revise as Aulas 7 (Protistas I: Microrganismos produtores), 9 (Fungos: seres
especiais), 10 (Biologia das plantas) e 13 (Diversidade animal I) da disciplina Biodiversidade.

O microscpio eletrnico foi desenvolvido em 1932 e permitiu visualizar detalhes


internos das clulas.

10

Aula 1

Metabolismo da Vida Microscpica

Atividade 1
Observe as guras abaixo representativas de duas clulas.

Voc percebe diferena entre as duas? Indique que tipo de diferenas voc pode observar.

Aula 1

Metabolismo da Vida Microscpica

11

Como voc deve ter observado, o interior de uma das clulas diferente da outra. A clula
eucaritica possui muitas estruturas no seu interior, enquanto a outra (procaritica) no. Pois
, as clulas procariticas e eucariticas so similares na sua constituio qumica, pois ambas
so constitudas por carboidratos, lipdios, protenas e cidos nucleicos; porm, so diferentes
em algumas estruturas. Veja um resumo dessas diferenas na tabela abaixo.

Tabela 1 Principais caractersticas que diferenciam as clulas procariticas e eucariticas

Caractersticas

Clulas procariticas

Clulas eucariticas

Membrana plasmtica

Lipdios e protenas sem esteris

Lipdios e protenas com esteris

Material gentico (DNA)

Um nico cromossoma
circular dentro do citoplasma

Vrios cromossomas lineares (o


nmero depende da espcie). Por
exemplo, a espcie humana tem
46 cromossomos.

Ncleo

Ausente

Presente

Organelas (ex.: retculo


endoplasmtico, aparelho de
Golgi, mitocndria etc.)

Ausente

Presente

Ribossomos

Presente (70S)

Presente (80S)

Parede celular

Presente (exceto as bactrias


chamadas Mycoplasmas)

Presente em vegetais e fngicas

Reproduo

Assexuada por diviso binria

Sexuada e assexuada

Esterol
um tipo de lipdio.

S
uma unidade usada
para medir a velocidade
de sedimentao dos
ribossomos durante a
centrifugao (a letra
S em homenagem
ao pesquisador
Theodor Svedberg,
que inventou um
equipamento denominado
ultracentrfuga, utilizada
para estudar os
ribossomos)

A espcie humana possui 46 cromossomos.

12

Aula 1

Metabolismo da Vida Microscpica

Conhecendo uma
bactria por dentro e por fora
Agora que voc consegue distinguir uma clula procaritica de uma eucaritica, vamos
conhecer melhor a estrutura de uma clula procaritica atravs das bactrias, as quais
representam uma clula procaritica tpica. As bactrias so delimitadas pela membrana
celular ou citoplasmtica. Internamente e externamente a essa membrana, existem estruturas
importantes para a sua sobrevivncia, as quais esto detalhadas logo abaixo.

...Por dentro
Membrana Celular: a membrana celular ou membrana plasmtica das bactrias possui a
mesma estrutura geral da membrana das clulas eucariticas. Essa estrutura separa o meio
interno (citoplasma) do meio externo. constituda principalmente por fosfolipdios e protenas
na seguinte proporo: duas camadas de fosfolipdios com as protenas inseridas no centro
(protenas transmembranas ou intrnsecas) ou mais frouxamente colocadas na superfcie
interna e externa (protenas perifricas) da camada de fosfolipdios. Como as protenas esto
inseridas frouxamente e se movem dentro da camada de fosfolipdios, esse arranjo chamado
de mosaico uido. A principal funo da membrana celular selecionar o que entra e sai
da clula. Podemos dizer, ento, que a membrana possui uma permeabilidade seletiva ou
semipermevel. Tambm importante na digesto de nutrientes e na produo de energia
(esse assunto ser discutido na Aula 5).

Aula 1

Metabolismo da Vida Microscpica

13

Atividade 2
1

Observe a gura abaixo.


Glicolipdeo
Glicoprotena

Protena
perifrica

Protena intrnseca

Molcula de fosfolipdeo
Fonte: <www.netxplica.com>. Acesso em: 23 set. 2009.

Descreva a composio qumica da membrana plasmtica.

Entre no endereo eletrnico abaixo:

<http://www.territorioscuola.com/youtube/index.php?key=Plasm%C3%A1tica>.
Clique sobre o vdeo Biologia: Membrana Plasmtica (Prof Toid).
Descreva o que voc assistiu.

14

Aula 1

Metabolismo da Vida Microscpica

Permeabilidade seletiva - indica que certas molculas e ons passam atravs da


membrana, mas outros so impedidos de passar atravs dela.

Internamente membrana celular encontra-se o citoplasma. O citoplasma composto


principalmente de gua e a regio onde se encontram as principais estruturas da bactria,
como o material gentico (DNA), ribossomos e alguns grnulos contendo nutrientes de reserva.
Material gentico bacteriano: como descrito na Tabela 1, o material gentico bacteriano
constitudo de uma nica molcula de DNA (cido desoxirribonucleico) de forma circular,
denominada cromossomo. Nessa molcula esto contidas todas as informaes que vo
determinar como a bactria vai obter nutrientes, produzir energia, multiplicar-se etc. Ao
contrrio das clulas eucariticas, o cromossoma bacteriano no est separado numa regio
chamada ncleo, est disperso dentro do citoplasma juntamente com outros componentes
numa regio denominada nuclolo. Alm do cromossoma, algumas bactrias possuem
uma molcula extra de DNA chamada de plasmdeo, que confere bactria que a possui
caractersticas adicionais s que ela j possua como, por exemplo, a capacidade de sobreviver
a determinados antibiticos.

Antibiticos substncias produzidas por alguns microrganismos com


capacidade de matar outros microrganismos.

Ribossomo bacteriano: so constitudos de cido ribonucleico (RNA) e protena. nessas


estruturas que a bactria sintetiza suas protenas. As clulas eucariticas tambm possuem
ribossomas, porm, so maiores que os das bactrias. Por isso, os ribossomas procariticos
so denominados 70S e os eucariticos 80S.
Grnulos de reserva: so locais onde as bactrias armazenam alguns nutrientes para serem
usados quando estiverem escassos no ambiente. Exemplos de nutrientes armazenados:
glicognio, amido, lipdios, enxofre.

Aula 1

Metabolismo da Vida Microscpica

15

Atividade 3
Agora que voc j reconhece uma clula procaritica e uma eucaritica, observe as
Figuras (a) e (b).
a

b
Citoplasma

Membrana
plasmtica

Complexo
de Golgi

3
2

Mitocndria

Ncleo

Retculo
endoplasmtico
rugoso

Retculo
endoplasmtico
liso

Nuclolo

4
5

Lisossomos

Figura a cula animal

Figura b clula bacteriana

Baseado na leitura acima, indique o tipo de clula nas Figuras (a) e (b) e denomine as
estruturas numeradas na Figura (b).

Figura (a): _______________________________


Figura (b): _______________________________

Estrutura 1 ______________________________
Estrutura 2 ______________________________
Estrutura 3 ______________________________
Estrutura 4 ______________________________
Estrutura 5 ______________________________

16

Aula 1

Metabolismo da Vida Microscpica

... E por fora


Externamente membrana celular, as bactrias possuem um envoltrio chamado de
parede celular. A principal funo da parede prevenir a ruptura das bactrias quando a
presso da gua dentro da clula maior que fora dela. Por isso, essa estrutura uma das
mais importantes para a bactria. Ela tambm serve para manter a forma da bactria.
A parede constituda por um composto qumico chamado de peptidoglicano, tambm
conhecido como murena. O peptidoglicano formado por dois monossacardeos denominados
N-acetilglicosamina e cido N-acetilmurmico, unidos por uma ligao glicosdica de forma
alternada e ligados ao N-acetilmurmico, uma cadeia de quatro aminocidos. So formadas
vrias camadas dessas estruturas em volta da bactria e cada camada est ligada uma outra
atravs dos aminocidos (veja a Figura 1 a seguir).

N-Acetilmurmico

Parede Bacteriana

N-Acetilglicosamina
L-alanina
D-cido glutmico
L-lisina
D-Alanina

Figura 1 Composio do peptidoglicano


Fonte: <www.educa.madrid.org>. Acesso em: 23 set. 2009.

Distinguindo as bactrias pela parede celular


De acordo com a estrutura da parede celular, as bactrias podem ser divididas em dois
grupos: bactrias Gram positivas e bactrias Gram negativas.
Bactrias Gram positivas: nas bactrias chamadas Gram positivas, a parede constituda
por muitas camadas de peptidoglicano, formando uma estrutura espessa e rgida. Dentro
dessa parede encontram-se inseridos dois compostos chamados cido teicoico e lipoteicoico.
Essa estrutura est relacionada com a capacidade que algumas bactrias possuem de causar
doenas (veja na Figura 2 a parede celular de uma bactria Gram positiva).

Aula 1

Metabolismo da Vida Microscpica

17

A parede celular das bactrias Gram positivas pode possuir at 40 camadas de


peptidoglicano.

Figura 2 Parede de uma bactria Gram positiva


Fonte: <www.unb.br/.../morfologia1/morfologia1.html>.
Acesso em: 23 set. 2009.

A palavra Gram uma homenagem ao pesquisador Christian Gram, que


desenvolveu em 1884 uma tcnica de colorao para o estudo de bactrias que
utilizada at hoje.

Bactrias Gram negativas: a parede das bactrias Gram negativas um pouco diferente.
constituda de poucas camadas de peptidoglicano, formando uma estrutura na; externamente
ao peptidoglicano h uma membrana denominada como membrana externa (no confunda
essa estrutura com a membrana celular, vista anteriormente). Na membrana externa
encontram-se inseridos protenas e um composto denominado de lipopolissacardeo (lipdios
e polissacardeos) ou LPS. Essa estrutura, assim como o cido teicoico da parede das Gram
positivas, est relacionada com a capacidade de causar doena em humanos e animais. Entre
a membrana plasmtica e a membrana externa existe um espao denominado de espao
periplasmtico, local onde a bactria armazena vrias protenas utilizadas para vrias funes,
como obteno de energia e transporte de substncia para dentro da clula (veja na Figura 3
a parede celular de uma bactria Gram negativa).

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Aula 1

Metabolismo da Vida Microscpica

LPS
Porina
Lipoprotenas

Membrana externa

Peptidoglicano
Espao periplasmtico
Membrana
citoplasmtica

Figura 3 Parede de uma bactria Gram negativa


Fonte: <www.prof2000.pt/users/biologia/tcolgram.htm>.
Acesso em: 23 set. 2009.

Atividade 4
Observe novamente as diferenas existentes entre a parede celular de uma bactria Gram
positiva e uma Gram negativa nas Figuras 2 e 3. Enumere as diferenas que voc observou
entre as duas paredes.

Aula 1

Metabolismo da Vida Microscpica

19

Externamente parede, algumas bactrias podem apresentar estruturas que auxiliam sua
sobrevivncia, como glicoclix, agelos e fmbrias.
Glicoclix: um polissacardeo que recobre a bactria. Essa estrutura utilizada para a bactria
se xar em uma superfcie. Se o glicoclix estiver rmemente aderido parede, ele chamado
de cpsula, e quando est fracamente aderido chamado de camada limosa.

A bactria Gram positiva Streptococcus mutans fixa-se na superfcie dos


nossos dentes atravs do glicoclix. Essa bactria uma das responsveis pela
criedentria.

Flagelo: um lamento longo, formado de protena, utilizado para o deslocamento da bactria


de um ambiente para outro. As bactrias podem ter um, dois ou mais agelos.
Pili
uma palavra oriunda do
latim que signica pelo.
Pili o plural de pilus.

Fmbrias ou pili: So estruturas mais curtas e mais nas que os agelos, tambm de natureza
proteica, utilizadas para a xao da bactria nas superfcies. Essa estrutura tambm pode ser
utilizada para a bactria fazer um contato fsico com outra bactria, medida que os pili de
uma se ligam superfcie de outra (voc ver mais detalhes sobre esse assunto na Aula 8).

Figura 4 Clula bacteriana


Fonte: <www.terrebonneonline.com/b2eukpro.htm>. Acesso em: 23 set. 2009.

20

Aula 1

Metabolismo da Vida Microscpica

Atividade 5
Observe a Figura 4. Relacione as estruturas externas parede celular.

Aula 1

Metabolismo da Vida Microscpica

21

As bactrias tm uma forma


especca e formam grupos
Geralmente as bactrias possuem algumas formas bsicas: esfricas, em forma de basto
e em espiral. Uma bactria esfrica chamada coco e em basto chamada de bacilo. Existem
as que possuem uma forma intermediria entre coco e bacilo, que so os cocobacilos. As que
tm forma de espiral possuem uma variedade de formas curvas. Por exemplo, a bactria que
tem forma de vrgula chamada de vibrio; em formato ondulado chama-se espirilo e as com
formato de espiral so espiroquetas.
Algumas bactrias no se separam depois que se dividem. As bactrias esfricas (cocos),
depois que se multiplicam, podem formar duplas (diplococos) ou cadeias (estreptococos).
Podem formar ainda ttrades (4 bactrias juntas), sarcinas (8 bactrias juntas) ou apresentamse em cachos, chamados estalococos. Os bacilos tambm podem formar arranjos como
duplas (diplobacilos) ou cadeias (estreptobacilos), ou ainda podem car de forma isolada.

Coco

Cocobacilo

Vibrio

Bacilo

Espirilo

Espiroqueta

Figura 5 As principais formas bacterianas


Fonte: Black (2002).

22

Aula 1

Metabolismo da Vida Microscpica

b
Plano de
diviso

Diplococos
Bacilo nico

Estreptococos

Ttrade

Diplobacilos

Sarcinas

Estreptobacilos
Estalococos

Figura 6 (a) Os principais arranjos dos cocos; (b) os principais arranjos dos bacilos
Fonte: Tortora, Berdell e Funke (2005).

Atividade 6
Observe as principais formas e arranjos das bactrias nas Figuras 5 e 6. Tente desenhar
as principais formas e arranjos dentro dos crculos abaixo.

Aula 1

Metabolismo da Vida Microscpica

23

As bactrias mudam para


sobreviver em ambientes hostis
Quando os nutrientes essenciais se esgotam em um determinando ambiente, algumas
bactrias Gram positivas se transformam em clulas especializadas chamadas endsporos.
uma forma de repouso da clula bacteriana, ou seja, na forma de endsporo ela no
metaboliza nutrientes e nem se multiplica. Estruturalmente, os endsporos so formados
por uma regio central denominada de cerne e camadas mais externas chamadas de crtex e
capa. Essas estruturas so formadas dentro da clula e, quando esta se rompe, o endsporo
liberado no meio ambiente e pode sobreviver nessa forma por milhares de anos. A capacidade
de permanecer vivel por tanto tempo porque os endsporos so resistentes ao calor,
desidratao, acidez, alcalinidade, a certos desinfetantes e at mesmo radiao. Os
endsporos podem germinar, ou seja, voltar a seu estado multiplicativo novamente. Isso
possvel quando ocorre uma leso fsica ou qumica no revestimento do endsporo.

Atividade 7
Faa uma pesquisa na internet sobre a espcie bacteriana produtora de endsporo
chamada Clostridium tetani e responda.

24

Aula 1

a)

Qual a doena que essa bactria causa?

b)

Como se adquire essa bactria?

c)

Qual a funo do endsporo para a bactria?

Metabolismo da Vida Microscpica

Resumo
Nesta aula, voc viu que os seres vivos esto distribudos em dois tipos de
clulas, procariticas e eucariticas, e aprendeu a diferenci-las. Voc viu,
tambm, que a maioria das bactrias se apresenta sob a forma esfrica (cocos),
em basto (bacilo) ou espiralada (vibries, espirilos e espiroquetas) e que as
bactrias so classicadas em Gram positivas e Gram negativas. Entendeu que
elas podem apresentar externamente estruturas como agelos, cpsula e fmbrias,
e, nalmente, compreendeu que algumas espcies de bactrias podem produzir
estruturas denominadas endsporos, que capacitam a bactria a sobreviver em
ambientes desfavorveis.

Autoavaliao
1
2
3

Quais so as principais diferenas entre as clulas procaritica e eucaritica?

Cite as principais diferenas na parede celular das bactrias Gram positivas e Gram
negativas.

Cite as estruturas externas parede celular de uma bactria com sua respectivafuno.

Referncias
BLACK, J. G. Microbiologia fundamentos e perspectivas. 4. ed. Rio de Janeiro: Editora
Guanabara Koogan, 2002.
PELCZAR, M. J. et al. Microbiologia: conceitos e aplicaes. So Paulo: Makon Books, 1996.
TORTORA, G. J.; FUNKE, B. R.; CASE, C. I. Microbiologia. 8. ed. Porto Alegre: Editora
Artmed,2005.

Aula 1

Metabolismo da Vida Microscpica

25

Anotaes

26

Aula 1

Metabolismo da Vida Microscpica

Trabalhando no laboratrio
de Microbiologia

Aula

Apresentao

gora que voc j tem conhecimento sobre a presena dos microrganismos em


praticamente todos os ambientes, vamos, ento, aprender de que forma podemos
manipular e estudar melhor esses seres vivos. Voc sabia que possvel cultivarmos
uma bactria ou um fungo no laboratrio? Sim, possvel. Porm, deve ser feito em um
ambiente adequado, com segurana e com equipamentos e tcnicas especcas. Nesta aula,
voc conhecer o laboratrio de Microbiologia, ou seja, o ambiente onde podemos cultivar
os microrganismos, as condutas de seguranas que devem ser tomadas para se trabalhar
em um laboratrio e os materiais e equipamentos necessrios para a manipulao dos
microrganismos com segurana.

Objetivos
1

Conhecer as normas de biossegurana para o laboratrio


de Microbiologia.

Reconhecer os materiais e equipamentos utilizados no


laboratrio de Microbiologia.

Executar manobras asspticas para a manipulao de


microrganismos no laboratrio.

Aula 2

Metabolismo da Vida Microscpica

29

Trabalhando com segurana no


laboratrio de Microbiologia
Para a manipulao de microrganismos no laboratrio, necessrio seguir algumas regras
bsicas para a segurana pessoal, assim como para o ambiente. Veja abaixo algumas normas que
devem ser seguidas para qualquer atividade executada dentro do laboratrio de Microbiologia.

Os materiais usados para a proteo pessoal so chamados de Equipamentos


de Proteo Individual (EPI).

Normas para a segurana pessoal

30

Aula 2

Usar luvas descartveis. O uso de luvas protege o indivduo de possveis contaminaes,


caso ocorra algum acidente.

Usar jaleco (bata) abotoado de mangas compridas. Protege as roupas do indivduo, assim
como fornece uma proteo adicional ao corpo.

Usar sapato fechado.

Usar culos de proteo. Protege os olhos de vapores e espirros de produtos qumicos


e biolgicos.

Usar protetor facial (mscaras). Protege a face contra o impacto de partculas slidas,
lquidas, vapores etc.

Metabolismo da Vida Microscpica

Gorro
culos
Mscara

Bata

Luvas

Sapato

Figura 1 Equipamentos de Proteo Individual (EPI)

Todos os EPIs devem ser descartveis, exceto o jaleco e os culos de proteo.

Normas gerais de segurana para o laboratrio de Microbiologia




Desinfetar a bancada de trabalho no incio e no trmino da atividade.

No colocar nenhum material sobre a bancada, exceto o de trabalho.

Prender cabelos longos e retirar todos os acessrios pessoais como brincos, anis,
relgios etc.

Alimentos e bebidas no devem ser ingeridos dentro do laboratrio.

Se houver acidentes, como o derramamento de microrganismos, deve ser comunicado


imediatamente ao professor. O material deve ser coberto com desinfetante durante 15
minutos, e deve-se lavar bem as mos com gua e sabo.

Todo material contaminado deve ser colocado em recipientes adequados. Nunca deve
ser deixado sobre a bancada.

Lavar sempre as mos com gua e sabo antes de sair do laboratrio.

Aula 2

Metabolismo da Vida Microscpica

31

Atividade 1
Qual a importncia da utilizao das normas de segurana no laboratrio de
Microbiologia?

32

Aula 2

Metabolismo da Vida Microscpica

Materiais e
equipamentos utilizados no
laboratrio de Microbiologia
Uma vez que voc j aprendeu as principais regras de segurana para se trabalhar em um
laboratrio de Microbiologia, vamos conhecer agora os materiais e equipamentos necessrios
para manipularmos os microrganismos. Como sabemos, os microrganismos esto em toda
parte: no solo, no ar, na gua, nos alimentos, no corpo humano, nas plantas e nos animais. Isso
acontece porque eles encontram nesses diferentes ambientes condies fsicas e nutricionais
para sobreviver e se multiplicar. Dessa forma, para podermos cultivar os microrganismos no
laboratrio, precisamos fornecer a eles essas mesmas condies que so encontradas nos
seus ambientes naturais, ou seja, temperatura adequada, nutrientes, gua etc. Vamos listar a
seguir os principais materiais e equipamentos que so utilizados na rotina de um laboratrio
de Microbiologia.

Para o cultivo dos microrganismos


VIDRARIAS constituem os materiais de vidro que so utilizados no laboratrio de
Microbiologia para os mais diversos ns. Por exemplo: tubos de ensaio, bqueres, placas de
Petri, erlenmeyers, pipetas, provetas, bales etc. Vejas as fotos abaixo.

Figura 2 Becker: recipiente com ou sem graduao,


utilizado para o preparo de solues, aquecimento de
lquidos etc

Figura 3 Balo de fundo chato: frasco destinado a


armazenar lquidos

Aula 2

Metabolismo da Vida Microscpica

33

500ml

Figura 4 Erlenmeyer: frasco utilizado para aquecer


lquidos, para preparar solues etc

Figura 5 Placas de Petri: recipiente redondo com


tampa rasa utilizado para distribuir meios de cultura

Figura 6 Tubos de ensaio: utilizados para distribuir


meios de cultura ou para efetuar reaes qumicas em
pequena escala

Figura 7 Proveta graduada: frasco com graduaes,


destinado a medidas de volumes de lquidos

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7
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9

Figura 8 Pipeta graduada: equipamento calibrado para medida precisa de volume de lquidos
Fonte: <www.casadolaboratorio.com.br/vidrar.html>.
Acesso em: 23 out. 2009.

MEIO DE CULTURA o meio onde esto contidos os nutrientes bsicos para os


microrganismos se multiplicarem. Podemos dizer que o alimento dos microrganismos.
Os meios de cultura podem ser preparados de forma slida, lquida e semisslida, dependendo

34

Aula 2

Metabolismo da Vida Microscpica

da presena ou ausncia de uma substncia que solidica o meio de cultura chamada gar
(uma espcie de gelatina), ou seja, quando o meio de cultura slido, ele contm cerca de
1,5 a 2% de gar; quando semisslido, contm em torno de 0,3 a 0,5% de gar, e quando
lquido, no contm o gar.

gar um polissacardeo obtido de algas marinhas que se liquefaz (se torna


lquido) a uma temperatura acima de 45 C e ca sob a forma de gel abaixo de
45 C . Quando o meio slido, geralmente ele distribudo em placas de Petri
(Figura 9) ou em tubos de ensaio; os semisslidos e lquidos so colocados em
tubos de ensaio (Figura 10). Veja as guras abaixo.

Figura 9 Meio de cultura em placas de Petri

Figura 10 Meio de cultura em tubo de ensaio


Fonte: <www.mbiolog.com.br/produto.php?id=43>.
Acesso em: 27 set. 2009.

s vezes, precisamos usar meios especiais para separar ou reconhecer um microrganismo


especco quando ele se encontra misturado com outros. Para isso, usamos os chamados
meios de cultura seletivos e meios de cultura diferenciais.
Meios de cultura seletivos So meios que possuem determinadas propriedades que
selecionam apenas o microrganismo desejado e impedem o crescimento de outros.
Por exemplo, na nossa pele habitam vrias espcies de microrganismos. Se desejar isolar e
cultivar no laboratrio somente uma espcie, posso passar uma haste exvel (mais conhecida
como cotonete) na pele e seme-lo sobre um meio de cultura seletivo para a espcie que
desejo cultivar. Dessa forma, s vai crescer nesse meio aquela espcie que eu queria isolar.
Meios de cultura diferenciais So meios que possuem propriedades na sua constituio
as quais permitem observarmos caractersticas diferencias de um microrganismo especco
quando esse cresce sobre o meio juntamente com outros. Se pensarmos no exemplo do item

Aula 2

Metabolismo da Vida Microscpica

35

anterior sobre os microrganismos da pele, o meio diferencial no inibe nenhuma espcie,


mas separa o microrganismo desejado por alguma caracterstica diferencial que ele apresente
nesse tipo de meio, como, por exemplo, a cor, a forma etc.

Observao: ser marcado um dia no seu polo para revermos esse assunto,
oportunidade em que voc poder conhecer diferentes tipos de meios de cultura.

Como se preparam os meios de cultura no laboratrio?


Os meios de cultura so encontrados de forma desidratada (em forma de p) em lojas
especcas para materiais de laboratrio. Uma quantidade desejada retirada do frasco
(depende da quantidade de meio que voc deseja preparar), hidrata-se com gua destilada,
esteriliza-se para eliminar qualquer organismo contaminante e depois se distribui em placas
de Petri ou tubos de ensaio. Veja abaixo a sequncia de algumas etapas durante o preparo de
um meio de cultura.

Figura 11 Sequncia de preparo de um meio de cultura


Fonte: <www.e-escola.pt/topico.asp?id=275>. Acesso em: 22 set. 2009.

36

Aula 2

Metabolismo da Vida Microscpica

gua destilada uma gua sem impurezas, ou seja, contm somente molculas
de gua.

Atividade experimental 1
Prepare um meio de cultura
Passo 1 Tente conseguir os seguintes materiais: um tablete de caldo de carne, um pacote de
gelatina incolor, 2 copos de gua, tampas de pote de caf ou margarina, cotonetes.
Passo 2 Forma de preparar o meio de cultura


Dissolva a gelatina incolor na gua conforme as instrues do pacote.

Dissolva o tablete de caldo de carne em um copo de gua morna.

Agora, misture a gelatina dissolvida com o caldo de carne.

Distribua dentro de recipientes rasos como uma tampa de pote de caf ou tampa de
margarina, cobrindo o fundo do recipiente com uma camada rasa do meio.

Cubra as tampas contendo o meio de cultura com um pedao de plstico e deixe descansar
por algumas horas.

Passo 3 Contaminao do meio de cultura




Passe um cotonete no cho e depois esfregue-o levemente sobre a camada de um dos


meios de cultura que voc preparou.

Passe outro cotonete do lado de dentro da sua bochecha e contamine outra tampa
contendo meio de cultura.

Toque os 5 dedos da sua mo sobre o meio de cultura.

Cubra novamente os meios e guarde por 1 ou 2 dias.


Aps esse tempo, abra os meios e descreva o que voc observou.

Aula 2

Metabolismo da Vida Microscpica

37

Observao Voc pode tentar outras formas de contaminar o meio de cultura. Por exemplo:
tente passar um o do seu cabelo sobre o meio, tente passar o cotonete na sua mesa, na
maaneta da porta do seu banheiro ou entre os dedos do seu p. Use a sua imaginao e faa
outras experincias.

Importante: DESCARTE AS PLACAS CONTAMINADAS! Aps voc ter executado


essa atividade importante descartar os meios de cultura contaminados de forma
segura. Ento, proceda da seguinte forma: coloque os recipientes contendo os
meios contaminados dentro de um saco plstico reforado e que no esteja
furado, adicione um pouco de gua sanitria sobre os meios e amarre a boca do
saco bem forte. Leve o saco at uma lixeira onde ele possa ser recolhido pela
companhia de lixo da sua cidade.

ESTUFA um equipamento eltrico que fornece a temperatura ideal para a multiplicao


do microrganismo. semelhante a um forno eltrico; porm, na estufa existe um dispositivo
onde podemos controlar a temperatura desejada. Para cultivarmos um microrganismo
em um meio de cultura, necessrio incub-lo em uma temperatura apropriada ao seu
desenvolvimento. Veja a Figura 12 a seguir.

Figura 12 Estufa bacteriolgica

38

Aula 2

Metabolismo da Vida Microscpica

Voc pode construir uma estufa de incubao!


Voc pode improvisar uma estufa usando uma caixa de papelo e uma lmpada
de 40 ou 60 Watts, como a da gura a seguir.

Figura 13 Caixa de papelo com lmpada


Fonte:<http://revistaescola.abril.com.br/ciencias/pratica-pedagogica/
como-ensinar-microbiologia-426117.shtml>. Acesso em: 28 out. 2009.

Observao caso voc tenha disponibilidade de construir a estufa como a da


Figura 13, voc pode utiliz-la para incubar os meios que voc contaminou na
Atividade Experimental 1, ao invs de incubar temperatura ambiente.

CMARA DE FLUXO LAMINAR Cabine estril para a manipulao de microrganismos sem


contaminar com os microrganismos do ambiente. Esse equipamento possui uma lmpada
ultravioleta que mata os microrganismos contaminantes de dentro da cabine e um ltro
especial que ltra o ar que circula dentro dessa cabine, deixando-a totalmente livre de qualquer
microrganismo. Veja as Figuras 14 e 15.

Figura 14 Cmara de uxo laminar

Figura 15 Tcnico trabalhando na


cmara de uxo laminar
Fonte: <www.lupe.com.br/br/mostra_produtos.php?id=93>.
Acesso em: 27 set. 2009.

Aula 2

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39

CMARA ASSPTICA um pequeno quarto fechado com uma lmpada ultravioleta e uma
bancada onde instalado um bico de Bunsen. A rea em volta da chama do bico de Bunsen
(Figura 16) fornece uma rea chamada de rea de segurana, onde se pode manipular
materiais estreis sem contamin-los com microrganismos do ambiente.

Figura 16 Bico de Bunsen: equipamento ligado a um botijo de gs que gera uma rea de calor em volta da chama,
o que impede a entrada de microrganismos provenientes do ambiente
Fonte: <http://www.vetfacil.com/_/rsrc/1250170894255/Home/microbiologia-1/
Microbiologia-Veterinaria/laboratorio-de-microbiologia/equipamentos/bico-debunsen/Bico%20de%20Bunsen.jpg>. Acesso em: 19 set. 2009.

Voc pode improvisar uma cmara assptica!


Abra uma caixa de papelo e retire a tampa. Coloque a caixa deitada sobre uma
bancada e use uma lamparina ao invs do um bico de Bunsen (Figura 17). Se
voc tiver como improvisar uma cmara assptica como a da Figura 17, voc
pode us-la para distribuir nos recipientes o meio de cultura que voc preparou na
Atividade experimental 1. O uso de um ambiente assptico durante a manipulao
do seu meio de cultura evitar a contaminao com microrganismos do ambiente.

Figura 17 Cmara assptica improvisada


Fonte: Laboratrio de Bacteriologia (UFRN).

40

Aula 2

Metabolismo da Vida Microscpica

Atividade 2
Acesse o endereo eletrnico <www.e-escola.pt/topico.asp?id=312&ordem=2>.
Clique na seta para iniciar a animao e assista.
Cite os materiais utilizados no laboratrio de Microbiologia que voc observou
na animao.

Aula 2

Metabolismo da Vida Microscpica

41

Para a esterilizao de materiais


AUTOCLAVE Equipamento eltrico que fornece calor (na forma de vapor) sob presso e produz
uma temperatura mnima de 121C. A presso interna maior que a presso atmosfrica e
esse aumento da presso faz a gua entrar em ebulio, a uma temperatura acima de 100C.
No interior da autoclave, na parte inferior, coloca-se gua, e logo acima um cesto ou tabuleiro
com o material a esterilizar. O tempo de esterilizao pode variar de 15 a 30 minutos.

Figura 18 Autoclave
Fonte: <www.ciencor.com.br/catalogo/paginas/autoclave.htm>.
Acesso em:7 out. 2009.

ESTUFA DE ESTERILIZAO Diferentemente da autoclave, a estufa de esterilizao utiliza


calor seco. O calor seco possui um poder de penetrao nos materiais menor do que o
calor mido (usado na autoclave) e, dessa forma, necessrio utilizar tempo e temperatura
maiores do que na autoclave. Por exemplo, para esterilizar metais, usa-se a temperatura de
160C por 2 horas.

Figura 19 Estufa de esterilizao


Fonte: <http://br.geocities.com/equipamentosodontolgicos/
estufa.htm>. Acesso em: 16 out. 2009 .

42

Aula 2

Metabolismo da Vida Microscpica

Figura 20 Estufa de esterilizao aberta contendo materiais para esterilizar


Fonte: <www.estg.ipleiria.pt/website/dep.php?id=321378>.
Acesso em: 16 out. 2009.

Para transferncia de microrganismos


A transferncia de um microrganismo para um meio de cultura chamada de repique,
semeadura ou inoculao. Geralmente, usamos para isso ala (Figura 21) ou agulha
(Figura 22) bacteriolgica. So constitudas por um lamento de platina ou de nquel-cromo
inserido em um cabo.

Figura 21 Ala bacteriolgica


Fonte: Laboratrio de Bacteriologia (UFRN).

Figura 22 Agulha bacteriolgica


Fonte: Laboratrio de Bacteriologia (UFRN).

Aula 2

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43

Atividade 3
Acesse o endereo eletrnico <www.e-escola.pt/topico.asp?id=310&ordem=2>
Clique na seta para iniciar a animao e observe a semeadura de um microrganismo
em um meio de cultura.
Cite o instrumental que foi utilizado para a semeadura do microrganismo no
meio de cultura.

Manobras asspticas para a


manipulao de microrganismos
Alm dos vrios materiais e equipamentos que voc conheceu, utilizados para a
manipulao de microrganismos no laboratrio de Microbiologia, necessrio conhecer ainda
a forma adequada de manipul-los para que o material que voc est trabalhando no seja
contaminado com os microrganismos do ambiente ou at com a sua prpria pele. Para isso,
utilizamos alguns cuidados, os quais so chamados de manobras asspticas.
Flambagem
Mtodo usado
para esterilizar alas e
agulhas bacteriolgicas,
deixando-as dentro da
chama do bico de Bunsen
at carem rubras.

44

Aula 2

1)

Trabalhar em reas previamente submetidas limpeza e desinfeco.

2)

Trabalhar dentro da rea de segurana do bico de Bunsen, ou seja, os recipientes estreis


s devem ser manipulados prximo chama do bico.

3)

Esterilizar por ambagem a ala e agulha antes e aps cada inoculao.

Metabolismo da Vida Microscpica

4)

Deixar esfriar ala e agulha antes de obter o inculo, dentro da rea de segurana.

5)

Flamblar rapidamente a boca dos tubos contendo microrganismos ou meio estril,


imediatamente aps abri-los, ou antes de fech-los. A tampa nunca dever ser colocada sobre
a bancada, sendo retirada e mantida segura pelo dedo mnimo da mo durante a inoculao.

Figura 23 Sequncia de manobras asspticas ao manipular microrganismos: a) esterilizao da ala bacteriolgica


por ambagem na chama do bico de Bunsen; b) abertura da tampa do tubo de ensaio; c) ambagem da boca do
tubo de ensaio; d) retirada do microrganismo com a ala bacteriolgica; e) fechamento do tubo de ensaio.

Aula 2

Metabolismo da Vida Microscpica

45

Atividade 4
Acesse o endereo eletrnico <www.e-escola.pt/topico.asp?id=312&ordem=2>.
Clique na seta para ver a animao.
Cite as manobras asspticas que voc observou na animao.

46

Aula 2

Metabolismo da Vida Microscpica

Resumo
Nesta aula, voc cou sabendo que possvel cultivarmos um microrganismo
fora do seu habitat natural, ou seja, no laboratrio. Para isso, basta fornecermos
a esse microrganismo condies semelhantes a que ele tinha no seu ambiente
natural, como nutrientes e temperatura adequados. Voc viu, ainda, que
embora sejam necessrios alguns equipamentos especcos para cultivarmos
os microrganismos, possvel improvisarmos utilizando materiais simples e
um pouco de criatividade. Voc aprendeu, tambm, que para se manipular os
microrganismos com segurana no laboratrio, necessrio seguirmos algumas
normas de biossegurana e algumas manobras asspticas, principalmente para
evitar que a pessoa que est manipulando o microrganismo se contamine ou que
o ambiente venha contaminar o material com o qual se est trabalhando.

Autoavaliao
1

Cite as principais normas de segurana utilizadas no laboratrio de Microbiologia.

Dena meio de cultura.

Dena o termo rea de segurana do bico de Bunsen e diga qual a sua utilizao.

Por que importante a utilizao de manobras asspticas na manipulao de


microrganismos?

Referncias
OKURA, M. H.; RENDE, J. C. Microbiologia roteiros de aulas prticas. Ribero Preto: Editora
Tecmedd, 2008.
SILVA FILHO, G. N.; OLIVEIRA, V. L. Microbiologia manual de aulas prticas. 2. ed.
Florianpolis: Editora da UFSC, 2007.
VERMELHO, A. B. et al. Prticas de microbiologia. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2006.
Aula 2

Metabolismo da Vida Microscpica

47

Anotaes

48

Aula 2

Metabolismo da Vida Microscpica

Vendo o invisvel

Aula

Apresentao

s microrganismos so chamados dessa forma porque so to pequenos que no


podem ser visualizados ao olho humano. Uma bactria, por exemplo, mede entre
0,5 e 2 micrmetros (m
m). Porm, existem vrias estratgias para nos possibilitar
a visualizao dos microrganismos, como por exemplo, o uso de corantes para corar os
microrganismos e a utilizao de lentes de aumento como as dos microscpios. Nesta aula,
voc conhecer vrias dessas estratgias que possibilitam a visualizao dos microrganismos.

1 m
Milionsima
parte do milmetro.

Objetivos
1

Comparar as coloraes simples e diferenciais.

Listar as etapas na preparao da colorao de Gram,


descrevendo o aspecto das clulas Gram-positivas e
Gram-negativas aps cada etapa.

Comparar e contrastar a colorao de Gram e a colorao


de Ziehl-Neelsen.

Aula 3

Metabolismo da Vida Microscpica

51

Preparando os microrganismos
para a visualizao
Embora as lentes dos microscpios possibilitem a visualizao dos microrganismos,
dependendo do que se deseja observar, necessrio criar um contraste entre o microrganismo
que ser observado e o plano de fundo, pois a maioria dos microrganismos quase incolor
quando observados atravs de um microscpio ptico padro. Esse contraste conseguido
atravs de coloraes em que o microrganismo submetido antes de ser observado ao
microscpio. Outro aspecto importante na preparao dos microrganismos para a visualizao
a qualidade do preparo do material a ser visualizado. Por exemplo, necessrio ter um
cuidado especial com a limpeza das lminas de vidro onde ser depositado o microrganismo
para visualizao. Veja a seguir como se prepara as lminas de vidro.
Preparo das lminas de vidro: as lminas devem estar completamente livres de gordura, e para
isso devem ser lavadas com gua e sabo, enxaguadas exaustivamente em gua e deixadas
em um recipiente com etanol a 95%. Antes da utilizao, as lminas devem ser retiradas do
recipiente com uma pina e secas com papel-toalha ou pano bem macio que no solte apos.
De uma forma geral, as clulas microbianas podem ser examinadas a fresco
(microrganismo vivo) ou fixadas sobre uma lmina de vidro (microrganismo morto),
dependendo do que se deseja examinar.

Observando o microrganismo vivo


As tcnicas de observao do microrganismo vivo bastante til para observar a
viabilidade do microrganismo e algumas atividades celulares, como a motilidade e a diviso
celular, uma vez que o microrganismo est vivo. E, ainda, possibilita a observao do tamanho
e da forma natural das clulas microbianas. Veja abaixo como se prepara um exame a fresco,
no qual o microrganismo observado vivo.

Exame a fresco
Cultura microbiana
Crescimento de
um microrganismo em
um meio de cultura.

52

Aula 3

O exame a fresco consiste na deposio de uma gota de cultura microbiana entre uma
lmina e uma lamnula de microscpio. A visualizao microscpica a fresco difcil devido ao
tamanho reduzido dos microrganismos e ao fato de parecerem translcidos, quando suspensos
em um meio aquoso. Porm, bastante til para observar a viabilidade do microrganismo.

Metabolismo da Vida Microscpica

Nas preparaes a fresco, podem-se utilizar corantes para facilitar a visualizao. Veja na Figura 1
o esquema de uma preparao a fresco.

Ala
Bacteriolgica

Lamnula

Lmina
Cultura Microbiana
Cultura Microbiana

Figura 1 Preparo de uma lmina para observao a fresco


Fonte: <www.prof2000.pt/users/biologia/ptemporarias.htm>. Acesso em: 23 nov. 2009.

Atividade 1
Observando microrganismos vivos
Observao Antes de iniciar essa atividade experimental, faa uma reviso a respeito das
normas de segurana e das manobras asspticas na Aula 2, Trabalhando no Laboratrio de
Microbiologia. As Atividades 1, 5 e 6 desta aula so experimentais e devem ser realizadas no
seu polo de ensino.

Objetivo:


Preparar lminas para observao a fresco.

Materiais:
Lminas de microscpio;
Lamnulas;
Cultura da espcie bacteriana Escherichia coli em meio lquido;
Microscpios.
Aula 3

Metabolismo da Vida Microscpica

53

Procedimentos:

1)

Flambe at car vermelha uma ala bacteriolgica na chama de uma lamparina e deixe-a
esfriar prximo chama.

2)

Abra o tubo de ensaio contendo a cultura bacteriana prximo chama, retire uma alada
da cultura, deposite no centro da lmina e ento feche o tubo de ensaio; em seguida, ambe
a ala novamente antes de guard-la.

3)

Cubra a gota da cultura com uma lamnula.

4)

Leve a lmina at o microscpio e observe na objetiva de 40X.

5)

Tente fazer um desenho dentro do crculo do que voc observou na sua lmina.

Colorindo os microrganismos
O uso de corantes para corar os microrganismos uma estratgia bastante til, pois faz
com que eles se destaquem contra seus planos de fundo, otimizando sua observao.

Tipos de corantes
Em Microbiologia, os corantes mais utilizados so os corantes catinicos (positivamente
carregados) ou bsicos e os aninicos (negativamente carregados) ou acdicos. Os corantes
bsicos, tais como o azul de metileno, o cristal violeta, a safranina e o verde de malaquita so
atrados pelos componentes celulares que so negativamente carregados como, por exemplo,
a membrana plasmtica. J os corantes acdicos como a eosina e o cido pcrico so repelidos
pela carga negativa da superfcie dos microrganismos. Nesse caso, o microrganismo no
corado e o corante ca depositado somente na lmina.
54

Aula 3

Metabolismo da Vida Microscpica

Atividade 2
Cite as duas categorias de corantes mais utilizados para corar microrganismos
e diga o que caracteriza cada tipo.

Tipos de colorao
Em Microbiologia, so utilizados 2 tipos principais de colorao: a colorao simples
e a diferencial. Veja abaixo a denio de colorao simples e, mais frente, a denio de
colorao diferenciada.
Colorao simples utiliza apenas um nico corante e revela os formatos bsicos das clulas e
seus arranjos (revise sobre as formas e os arranjos bacterianos citados na Aula 1, comparando
clulas procariticas e clulas eucariticas). Alguns dos corantes mais utilizados nesse tipo
de colorao so azul de metileno, safranina e o cristal violeta. Esse tipo de colorao pode
ser positiva ou negativa.
Colorao simples positiva Usa-se um corante bsico (carregado positivamente), o qual vai
impregnar a superfcie celular da clula (carregada negativamente). til para se constatar a
presena de microrganismos em alguma amostra ou substrato. Acompanhe os passos dessa
tcnica na Figura 2.

Aula 3

Metabolismo da Vida Microscpica

55

Figura 2 Colorao simples positiva. a) Adicionar o corante sobre a lmina contendo uma alada de cultura; b) lavar a
lmina com gua; c) secar a lmina com papel toalha
Fonte: Vermelho et al (2006).

Observe na Figura 3 a visualizao microscpica do parasita Trypanosoma cruzi corado


pelo mtodo da colorao positiva.

Figura 3 Trypanosoma cruzi corado pelo mtodo da colorao positiva


Fonte: Vermelho et al (2006).

Colorao simples negativa usa-se um corante acdico (carregado negativamente), o qual


repelido pelas cargas negativas da superfcie da clula. O fundo da lmina corado e o
microrganismo no, aparecendo mais claro, dando a ideia de um negativo fotogrco. Esse
tipo de colorao muito utilizado para a demonstrao das cpsulas bacterianas (revise sobre
esta estrutura bacteriana citada na Aula 1). Acompanhe os passos dessa tcnica na Figura 4.

56

Aula 3

Metabolismo da Vida Microscpica

Figura 4 Colorao simples negativa. a) Adicionar o corante sobre uma das extremidades da lmina; b) adicionar
uma alada da cultura microbiana sobre o corante; c) colocar uma outra lmina sobre a cultura e o corante e deixar
que o material se espalhe na extremidade da lmina inclinada; d) deslizar a lmina inclinada sobre a outra lmina,
espalhando a cultura e o corante de maneira uniforme
Fonte: Vermelho et al (2006)

Observe na Figura 5 a visualizao microscpica da cpsula bacteriana corada pelo


mtodo da colorao negativa.

Figura 5 Cpsula bacteriana corada atravs da tcnica da colorao negativa


Fonte: <pathmicro.med.sc.edu/Portuguese/chapter_1_bp.htm>. Acesso em: 23 nov. 2009.

Aula 3

Metabolismo da Vida Microscpica

57

Observando o microrganismo xo
em uma lmina (morto)
Para a observao do microrganismo xado em lmina necessrio o preparo do
esfregao, ou seja, xar o microrganismo na lmina de vidro. nesse momento que os
microrganismos so mortos. Veja abaixo como se prepara um esfregao a partir de uma
cultura lquida e de uma slida.
Esfregao a partir de uma cultura em meio lquido com o auxlio de uma ala bacteriolgica,
retira-se uma ou duas aladas da cultura lquida e deposita-se sobre o centro de uma lmina de
vidro. necessrio espalhar a cultura ao longo da extenso da lmina com movimentos circulares.
Esfregao a partir de uma cultura em meio slido Coloca-se previamente 1 a 2 gotas de
soluo siolgica estril sobre a lmina de vidro e, ento, se adiciona uma poro da cultura
retirada do meio slido com o auxlio de uma ala bacteriolgica, espalhando o material ao
longo da extenso da lmina.
Fixao do esfregao pelo calor Deixe que o material depositado na lmina seque ao ar
totalmente antes de proceder com a xao. A xao pelo calor consiste em passar a lmina
contendo o esfregao 3 vezes sobre a chama do bico de Bunsen ou lamparina. A xao do
esfregao vai impedir que os microrganismos depositados sobre a lmina sejam removidos,
quando submetidos ao processo de colorao. Veja na Figura 6 a preparao de um esfregao
a partir de uma cultura lquida e de um meio slido.

58

Aula 3

Metabolismo da Vida Microscpica

Meio Lquido

Meio Slido

f
Fixao

Fixao

Figura 6 Preparo do esfregao para colorao. a e d) Adicionar as clulas bacterianas sobre o centro da lmina
(quando as clulas forem provenientes de meio slido, adicionar antes uma gota de soluo siolgica estril);
b e e) espalhar o material depositado com a ala bacteriolgica; c e f) xao do esfregao atravs da chama do
bico de Bunsen
Fonte: Vermelho et al (2006).

Atividade 3
Qual a diferena na realizao de um esfregao a partir de uma cultura lquida
e de uma cultura slida? Qual a nalidade da xao do esfregao?

Aula 3

Metabolismo da Vida Microscpica

59

Colorao diferencial utiliza dois ou mais corantes e diferencia dois tipos de organismos.
As coloraes diferenciais mais comuns so a colorao de Gram e a de Ziehl-Neelsen.

Atividade 4
Revise a Aula 1 a respeito da estrutura da parede celular das bactrias Gram
positivas e Gram negativas e, aps a reviso, descreva as diferenas existentes
entre a parede celular desses dois tipos de bactrias.

Agora que voc j relembrou a estrutura da parede celular das bactrias, podemos ento
estudar a tcnica de colorao de Gram e a de Ziehl-Neelsen.
Colorao de Gram essa tcnica de colorao recebeu essa denominao em homenagem
ao mdico dinamarqus Hans Christian Gram, que desenvolveu esse mtodo em 1884. Essa
colorao separa as bactrias em 2 grandes grupos: as bactrias Gram positivas e as Gram
negativas. Esse mtodo de colorao o mtodo de escolha para a identicao de bactrias.

Mordente
uma substncia que
forma um complexo
insolvel quando se liga
ao corante

60

Aula 3

A colorao de Gram consiste em submeter um esfregao preparado como descrito no


texto acima e submet-lo a 4 reagentes: um corante bsico, o cristal violeta; uma soluo
de iodo e iodeto de potssio (lugol); lcool a 95%; e um segundo corante que pode ser a
fucsina ou a safranina. O cristal violeta cora as clulas de roxo; o lugol liga-se ao cristal violeta,
formando um complexo insolvel (por isso chamado de mordente); o lcool descora somente
alguns tipos de clula e estas clulas que se descoram so coradas com o segundo corante
usado na tcnica, que pode ser a fucsina ou a safranina. As bactrias Gram positivas se coram
de roxo no m da colorao e as Gram negativas cam rosa.

Metabolismo da Vida Microscpica

Essa diferena em funo das diferenas existentes entre a parede celular das bactrias
Gram positivas e das Gram negativas. As Gram positivas tm a parede celular mais espessa
e, portanto, so mais difceis de serem descoradas pelo o lcool, e as Gram negativas, como
tm uma parede mais delgada, so mais facilmente descoradas quando so lavadas pelo lcool
durante o processo de colorao. Lembre-se que voc aprendeu as diferenas entre esses dois
grupos de bactrias na Aula 1. Observe os reagentes usados nessa colorao na Figura 7 e as
etapas da tcnica na Figura 8.

Figura 7 Reagentes da colorao de Gram


Fonte: Laboratrio de Bacteriologia UFRN

Violeta
de genciana
Iodo
lcool
Safranina

Aplicao de
violeta de genciana
(corante prpura)

Aplicao de iodo
(mordente)

Lavagem com
lcool
(descolorao)

Aplicao de
safranina
(contracorante)

Figura 8 Tcnica da colorao de Gram


Fonte: Tortora et al (2005).

Aula 3

Metabolismo da Vida Microscpica

61

Observe na Figura 9 a visualizao microscpica de uma bactria Gram positiva e na


Figura 10 uma bactria Gram negativa aps serem coradas pela tcnica de colorao de Gram.

Figura 9 Bactria Gram positiva aps tcnica de colorao de Gram


Fonte: <http://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/0/08/
Staphylococcus_aureus_Gram.jpg>. Acesso em: 23 nov. 2009.

Figura 10 Bactria Gram negativa aps tcnica de colorao de Gram


Fonte: <http://images.suite101.com/180490_e.coli.jpg>.
Acesso em: 23 nov. 2009.

Atividade 5
Colorao de Gram
Objetivos:

62

Aula 3

Preparar um esfregao a partir de uma cultura bacteriana lquida.

Corar o esfregao atravs da tcnica de colorao de Gram.

Metabolismo da Vida Microscpica

Materiais:
Tubos de ensaio contendo uma suspenso bacteriana (cultura em meio lquido);
Lminas de vidro;
Reagentes para a colorao de Gram;
Alas bacteriolgicas;
leo de imerso;
Microscpios pticos.
Procedimentos:
Etapa 1 - Preparao do esfregao

1)

Identique o lado da lmina em que voc vai depositar a cultura fazendo uma marca com
lpis grate sobre a extremidade fosca da lmina;

2)

Coloque a lmina no suporte apropriado que est sobre sua bancada;

3)

Colete uma alada ou mais da suspenso bacteriana e espalhe bem sobre a superfcie da
lmina com a prpria ala bacteriolgica;

4)

Deixe o material secar sobre a lmina, deixando-a prximo da chama do bico de Bunsen;

5)

Passe a lmina 2 a 3 vezes atravs da chama do bico de Bunsen para xar o material
sobre a lmina.

Etapa 2- Colorao de Gram

1)

Cubra o esfregao com cristal violeta e deixe agir durante 1 minuto;

2)

Despreze o excesso de corante no depsito apropriado e adicione lugol e deixe agir por
1 minuto;

3)

Lave com gua;

4)

Lave rapidamente com lcool (cerca de 20 segundos);

5)

Lave com gua;

6)

Cubra a lmina com fucsina e deixe agir por 30 segundos;

7)

Lave com gua;

Aula 3

Metabolismo da Vida Microscpica

63

8)

Deixe a lmina secando ao ar ou seque-a com papel toalha;

9)

Pingue uma gota de leo de imerso sobre o esfregao corado e observe ao microscpio
ptico utilizando a objetiva de 100;

10)

Faa um desenho dentro do crculo do que voc observou na sua lmina e depois
responda s perguntas a seguir.

A bactria que voc corou Gram positiva ou Gram negativa? Justique sua resposta.

Qual a forma da bactria que voc observou?

3
64

Aula 3

Acesse o endereo eletrnico <http://vudat.msu.edu/gram_stain>. Clique em Gram


Stain Technique e faa a colorao de Gram de forma virtual.

Metabolismo da Vida Microscpica

Colorao de Ziehl-Neelsen
Esta tcnica utilizada para identicar bactrias do gnero Mycobacterium, como por
exemplo as espcies Mycobacterium tuberculosis, agentes causadores da tuberculose, e
a Mycobacterium leprae, que causa a doena conhecida como lepra ou Hansenase. Esse
gnero bacteriano possui parede celular diferente das bactrias Gram positivas e Gram
negativas; assim, a tcnica de colorao de Gram no adequada para cor-las. A parede das
micobactrias possui uma espessa camada de lipdeos que evita a penetrao de diversos
corantes; porm, uma vez coradas, resistem fortemente descolorao, mesmo com solues
cidas e lcool absoluto. Por essa caracterstica, essas bactrias so chamadas de Bacilos
lcool-cido Resistentes (BAAR).
A colorao de Ziehl-Neelsen consiste na aplicao do corante fucsina fenicada (soluo
de fucsina e fenol) sobre o esfregao e aquec-lo (esse aquecimento do esfregao permite
a entrada da fucsina atravs da parede da clula). Em seguida, o esfregao lavado com
uma soluo de lcool-cido (etanol e cido clordrico a 3%) e ento submetido a outro
corante, normalmente, azul de metileno. Aps a realizao da tcnica, as bactrias que forem
lcool-cido resistentes (AAR) no se descoram com a soluo de lcool-cido e permanecem
coradas de vermelho (cor da fucsina), e as que no forem AAR se descoram e, depois, se coram
de azul (cor do azul de metileno).
Veja na Figura 11 os reagentes usados nessa tcnica de colorao, na Figura 12 os
passos da tcnica e, na Figura 13, a visualizao microscpica de bactrias AAR aps serem
submetidas colorao de Ziehl-Neelsen.

Figura 11 Reagentes utilizados na colorao de Ziehl-Neelsen


Fonte: Laboratrio de Bacteriologia UFRN

Aula 3

Metabolismo da Vida Microscpica

65

Placa aquecedora

Figura 12 Colorao de Ziehl-Neelsen. a) Adio da fucsina sobre o esfregao e aquecimento em uma placa
aquecedora; b) lavagem do esfregao com gua; c) adio da soluo de lcool-cido; d) lavagem com gua;
e) adio do azul de metileno; f) lavagem com gua; g) secar com papel de ltro
Fonte: Adaptado de Vermelho et al (2006).

Figura 13 Mycobacterium tuberculosis coradas pela tcnica de Ziehl-Neelsen


Fonte: <www.craigleithhill.co.uk/craigleith_house.html>. Acesso em:
23 nov. 2009.

66

Aula 3

Metabolismo da Vida Microscpica

Atividade 6
Colorao de Ziehl-Neelsen
Objetivos:


Corar um esfregao atravs da tcnica de colorao de Ziehl-Neelsen;

Entender o mecanismo da tcnica de colorao de Ziehl-Neelsen.

Materiais:
Esfregaos de bactrias lcool-cido resistentes;
Reagentes para a colorao de Ziehl-Neelsen;
Microscpios pticos;
leo de imerso.
Procedimento:

1)

Coloque o esfregao sobre o suporte;

2)

Cubra o esfregao com a soluo de fucsina fenicada;

3)

Com o auxlio da chama do bico de Bunsen ou de uma placa aquecedora, aquea a lmina
pela sua parte inferior at que comece a desprender vapor, no deixando ferver nem secar.
Repetir essa operao at completar trs emisses sucessivas. Porm, esse procedimento
deve demorar em torno de 5 minutos;

4)

Despreze o corante dentro do recipiente apropriado;

5)

Lave a lmina com a soluo de lcool-cido at no sair mais corante;

6)

Lave com gua;

7)

Cubra a lmina com o azul de metileno e deixe agir por 30 segundos;

8)

Despreze o corante;

9)

Lave com gua;

Aula 3

Metabolismo da Vida Microscpica

67

10)

Deixe a lmina secar ao ar;

11)

Pingue uma gota de leo de imerso sobre o esfregao corado e observe ao microscpio
ptico utilizando a objetiva de 100;

12)

Faa um desenho dentro do crculo do que voc observou na sua lmina e responda s
perguntas a seguir.

68

Aula 3

Qual a cor que a bactria adquiriu aps essa tcnica de colorao? Justique
sua resposta.

Qual a forma da bactria que voc observou?

Metabolismo da Vida Microscpica

Resumo
Nesta aula, voc cou sabendo que, embora os microrganismos no sejam
visveis a olho nu, possvel observ-los com o uso de corantes e microscpios
adequados ao que se deseja observar. Voc aprendeu, ainda, que existem
corantes e tcnicas de coloraes especcas para a visualizao de estruturas
microbianas, como por exemplo a cpsula para a deteco de atividades
celulares como a motilidade e, ainda, para se observar a forma e o arranjo das
clulas. Voc viu que a tcnica de colorao de Gram uma das tcnicas mais
utilizadas na Microbiologia e usada para diferenciar as bactrias Gram positivas
das Gram negativas, e que a tcnica de Ziehl-Neelsen usada para identicar
duas espcies de bactrias importantes como a Mycobacterium tuberculosis e
Mycobacterium leprae que causam, respectivamente, as doenas tuberculose
e hansenase no homem.

Autoavaliao
1

Diferencie a colorao simples da colorao diferenciada.

O que caracteriza um corante bsico e um cido?

3
4

Por que as bactrias Gram positivas cam roxas e as Gram negativas cam rosas
aps a colorao de Gram?

Qual a utilizao da colorao de Ziehl-Neelsen?

Aula 3

Metabolismo da Vida Microscpica

69

Referncias
BLACK, Jaquelyn G. Microbiologia fundamentos e perspectivas. Rio de Janeiro: Guanabara
Koogan, 2002.
OKURA, M. H.; RENDE, J. C. Microbiologia roteiros de aulas prticas. Ribero Preto: Editora
Tecmedd, 2008.
SILVA FILHO, G. N.; OLIVEIRA, V. L. Microbiologia manual de aulas prticas. 2. ed. Florianpolis:
Editora da UFSC, 2007.
VERMELHO, A. B. et al. Prticas de microbiologia. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2006.

Anotaes

70

Aula 3

Metabolismo da Vida Microscpica

Anotaes

Aula 3

Metabolismo da Vida Microscpica

71

Anotaes

72

Aula 3

Metabolismo da Vida Microscpica

Nutrio e crescimento microbiano

Aula

Apresentao

a Aula 1 (Comparando clulas procariticas e clulas eucariticas), voc aprendeu a


caracterizar morfologicamente as clulas procariticas. Agora, voc ir aprender como
essas clulas crescem e quais os fatores nutricionais e fsicos que determinam esse
evento. Quando falamos em crescimento microbiano, estamos nos referindo ao nmero e no
ao tamanho das clulas. Portanto, crescimento microbiano signica reproduo, ou seja, os
microrganismos se multiplicam e aumentam o nmero de suas clulas. Voc perceber que,
conhecendo as condies necessrias ao crescimento microbiano, podemos determinar como
controlar os microrganismos que causam doenas ou que degradam os alimentos, assunto
que voc ver com mais detalhes na Aula 6 (Controlando os microrganismos). Podemos
tambm usar essa informao para estimular o crescimento de um microrganismo que estamos
particularmente interessados em cultivar. Voc estudou o cultivo in vitro de microrganismos
na Aula 3 (Vendo o invisvel). Enm, nesta aula voc conhecer os fatores fsicos e qumicos
necessrios para os microrganismos crescerem e se estabelecerem em um dado ambiente.

Objetivos
1

Conhecer as exigncias nutricionais para o crescimento


microbiano.

Explicar, em termos gerais, como os elementos qumicos


so utilizados para o desenvolvimento das clulas
microbianas.

Descrever como os microrganismos procariticos se


reproduzem.

Identicar uma curva tpica de crescimento microbiano.

Reconhecer as condies fsicas necessrias para o


crescimento microbiano.

Aula 4

Metabolismo da Vida Microscpica

75

De que os microrganismos
se nutrem?

e todos os organismos vivos, os microrganismos so os mais versteis e diversicados


em suas exigncias nutricionais, ou seja, podem utilizar desde compostos qumicos
simples, como CO2, at compostos orgnicos mais complexos, como carboidratos
e protenas. Para se multiplicarem em um ambiente, os microrganismos devem encontrar
nesse ambiente todas as substncias requeridas para a gerao de energia e para a sntese
dos seus componentes celulares (Na Aula 5, Obteno de energia para a vida microbiana,
voc aprender como os microrganismos produzem energia). Esses elementos requeridos
so chamados de nutrientes e existem na natureza em uma grande variedade de compostos
inorgnicos e orgnicos.
Basicamente, cada microrganismo utiliza os nutrientes presentes no seu habitat natural.
Porm, quando so removidos do seu meio para serem cultivados em laboratrio, necessrio
que se fornea esses mesmos nutrientes encontrados no ambiente natural. Consegue-se isso
atravs da utilizao dos meios de cultivo (reveja a denio de meio de cultivo na Aula 2,
Trabalhando no Laboratrio de Microbiologia). Veja abaixo os principais elementos qumicos
necessrios para o crescimento microbiano.
Carbono um dos elementos qumicos mais importantes para o crescimento microbiano.
o principal constituinte das trs maiores classes de nutrientes orgnicos: os carboidratos, os
lipdeos e as protenas. Esses compostos so usados como fonte de energia e servem como
unidade bsica dos componentes celulares como parede celular, membrana citoplasmtica
etc. Os microrganismos que utilizam compostos orgnicos e CO2 como sua principal fonte de
carbono so chamados de Heterotrcos e Autotrcos, respectivamente (voc conhecer
mais sobre esses termos na Aula 10, Os microrganismos auxiliam a (re)circulao da matria
no planeta).
Nitrognio esse elemento parte essencial dos aminocidos, os quais formam as protenas.
Ao contrrio das clulas eucariticas, algumas bactrias podem utilizar nitrognio gasoso ou
atmosfrico para a sntese celular por meio de um processo chamado xao de nitrognio
(voc aprender mais sobre esse fenmeno na Aula 10). Outras utilizam compostos
nitrogenados inorgnicos, tais como nitratos, nitritos ou sais de amnia, e ainda podem utilizar
compostos nitrogenados orgnicos, tais como aminocidos ou peptdeos.
Hidrognio, Oxignio, Enxofre e Fsforo o hidrognio e o oxignio fazem parte de
muitos compostos orgnicos como, por exemplo, a glicose. O enxofre necessrio para
a biossntese dos aminocidos, como a cistena, cistina e metionina. Esses aminocidos
formaro as protenas. O fsforo essencial para a sntese de cidos nucleicos (DNA e RNA)
e para a molcula de ATP. Esse ltimo composto muito importante para o armazenamento
e transferncia de energia para a clula (voc ver como os microrganismos sintetizam essa
molcula na Aula 5).
76

Aula 4

Metabolismo da Vida Microscpica

Oligoelementos os chamados oligoelementos ou elementos-trao so aqueles que so


requeridos em pequena quantidade. Podemos citar, por exemplo, o zinco (Zn+2), o cobre
(Cu+2), o mangans (Mn+2), o molibdnio (Mo+6) e o cobalto (Co+2). O principal papel desses
elementos na ativao de enzimas importantes para o metabolismo dos microrganismos. As
vitaminas como o cido flico, a B12 e a vitamina K tambm so importantes na ativao de
enzimas. Alguns microrganismos podem sintetizar algumas vitaminas para seu metabolismo
e essas podem inclusive serem utilizadas pelo homem.

A bactria Escherichia coli, que est presente no intestino humano, benecia


seu hospedeiro produzindo a vitamina K, a qual ajuda na coagulao sangunea.

Atividade 1
Baseado no que voc aprendeu sobre os fatores qumicos necessrio para o
crescimento microbiano, preencha o quadro a seguir.
ELEMENTO QUMICO

FUNO NO CRESCIMENTO MICROBIANO

CARBONO
NITROGNIO
HIDROGNIO
OXIGNIO
FSFORO
OLIGOELEMENTOS

Aula 4

Metabolismo da Vida Microscpica

77

Crescimento microbiano
Como j foi dito a voc, o termo crescimento microbiano diferente do que usamos
na linguagem cotidiana, na qual nos referimos ao aumento de tamanho. As crianas, outros
animais e vegetais crescem, ou seja, aumentam de tamanho, mas os organismos unicelulares
no mximo dobram de tamanho e logo se dividem em duas novas clulas. Dessa forma,
crescimento microbiano sinnimo de multiplicao microbiana, ou seja, aumento do nmero
de clulas, e no de tamanho. Assim como determinados elementos qumicos (nutrientes) so
exigidos ao crescimento microbiano, determinados fatores fsicos tambm so indispensveis.
Antes de falarmos dessas exigncias ambientais, vamos aprender como os microrganismos
procariticos se multiplicam?

Multiplicao das clulas procariticas


A diviso celular nas bactrias, diferentemente daquela nos seres eucariontes, ocorre por
um processo assexuado, ou seja, sem o envolvimento de clulas sexuais (gametas). A maioria
das bactrias de dividem pelo processo de diviso binria ou s vezes por brotamento.
Diviso binria processo em que uma clula parental se divide em duas outras clulas
idnticas. Anteriormente diviso, o contedo celular se duplica, e o cromossoma replicado
(voc ver detalhes da replicao do cromossoma bacteriana na Aula 7, (A gentica dos
microrganismos). Nesse momento a clula parental aumenta, a membrana citoplasmtica
se estende e os cromossomas recm-duplicados se separam. Aps esse evento, ocorre
uma invaginao, formando um septo na membrana e na parede celular, dividindo a clula
parental em duas novas clulas idnticas. Algumas clulas no se separam completamente e
permanecem acopladas, formando arranjos em forma de cadeia, ttrades, duplas etc. (reveja
os diferentes tipos de arranjos que as bactrias podem formar na Aula 1). Veja na Figura 1 as
diferentes etapas da diviso celular.

78

Aula 4

Metabolismo da Vida Microscpica

Parede celular

Membrana plasmtica

Alongamento da clula
e replicao do DNA

DNA

Incio da diviso da
parede celular e da
membrana plasmtica

Formao das paredes


em torno das regies
contendo DNA replicado

Separao
das clulas

Figura 1 Etapas da diviso de uma clula bacteriana


Fonte: Tortora, Funke e Case (2005).

Brotamento processo no qual uma pequena protuberncia cresce em uma extremidade


da clula. Esse brotamento aumenta e se separa da clula parental. As leveduras (fungos
unicelulares) tambm se dividem por brotamento. Veja a Figura 2.

Figura 2 Brotamento em levedura


Fonte: <http://blogosferagg.blogspot.com/2009/06/reino-fungi.html>. Acesso em: 10 dez. 2009.

Aula 4

Metabolismo da Vida Microscpica

79

Cada centmetro da nossa pele hospeda, em mdia, 100.000 organismos. As


bactrias se reproduzem to rpido que sua populao restaurada dentro de
algumas horas aps a lavagem.

Atividade 2
Faa um desenho esquemtico das etapas da diviso binria de uma clula
procaritica e descreva o que acontece em cada etapa.

80

Aula 4

Metabolismo da Vida Microscpica

Os microrganismos tambm
passam por fases de crescimento
Quando um microrganismo cresce em um meio de cultivo rico em nutrientes, ele passa por
quatro principais fases de crescimento: 1) fase lag, 2) fase log ou logartmica, 3) fase estacionria
e 4) fase de declnio ou de morte. Essas fases formam a curva de crescimento bacteriano.
Fase lag Essa fase uma fase de adaptao do microrganismo ao meio. Ele no se
multiplica, porm, est em intensa atividade metablica, ou seja, produzindo energia na forma
de ATP, enzimas e vrias outras molculas. Essa fase tambm denominada de latncia e o
tempo de durao depende das condies do meio e da espcie microbiana.
Fase log nessa fase que ocorre a diviso celular de fato e a populao dobra de tamanho.
Cada espcie leva um tempo geneticamente determinado para se dividir e esse intervalo
denominado de tempo de gerao. Nessa fase, as clulas crescem em velocidade exponencial
ou logartmica (log), ou seja, a populao dobra a cada tempo de gerao. Por exemplo, uma
cultura contendo 1.000 organismos com um tempo de gerao de 20 minutos conteria 2.000
organismos aps 20 minutos, 4.000 aps 40 minutos e 8.000 aps 60 minutos (1 hora).
Fase estacionria Fase em que as novas clulas so produzidas com a mesma velocidade
com que as clulas antigas morrem e assim o nmero de clulas vivas permanece constante.
Fase de declnio (morte) Nessa fase ocorre uma reduo do nmero de clulas vivas,
pois muitas perdem a capacidade de se multiplicar e morrem. Isso ocorre porque o meio de
cultivo vai cando cada vez mais desfavorvel multiplicao, pois os nutrientes se tornam
escassos e tambm h um acmulo de resduos txicos, originados pelo prprio metabolismo
microbiano. Veja na Figura 3 um grco representando uma curva de crescimento tpica.

Log

Estacionria

Declnio

Log - n de clulas

Lag

tempo em horas

Figura 3 Etapas da diviso de uma clula bacteriana


Fonte: <http://vsites.unb.br/ib/cel/microbiologia/crescimento/crescimento.html>. Acesso em: 10 dez. 2009.

Aula 4

Metabolismo da Vida Microscpica

81

Em condies ideais de crescimento, a espcie bacteriana Escherichia coli possui


um tempo de gerao de at 12,5 minutos, e a Mycobacterium tuberculosis,
agente etiolgico da tuberculose, possui um tempo de gerao de 13 a 15 horas,
ou seja, essa ltima espcie levar muito mais tempo para ter sua populao
dobrada de tamanho em um determinado meio.

Atividade 3
Observe o grco abaixo de uma curva de crescimento bacteriano e descreva o
que ocorre em cada fase indicada pelos nmeros 1, 2, 3 e 4.

1 ______________________
3
N de
clulas

2 ______________________
4

3 ______________________

4 ______________________
Tempo

82

Aula 4

Metabolismo da Vida Microscpica

Fatores fsicos que afetam


o crescimento microbiano
Como voc j sabe, os microrganismos esto praticamente em todos os ambientes da
terra, inclusive em ambientes nos quais nenhuma outra forma de vida pode sobreviver. Isso
ocorre por causa do seu pequeno tamanho, de serem facilmente dispersveis, ocuparem pouco
espao e ainda por serem bastante diversicados quanto as suas exigncias nutricionais.
Assim, para praticamente qualquer substncia, h um microrganismo que pode utiliz-la como
nutriente e ainda para praticamente qualquer mudana ambiental, h algum microrganismo
que pode sobreviver.Diferentes espcies de microrganismos podem crescer em ambientes
que podem variar desde extremamente cidos at os alcalinos, no gelo da Antrtida s fontes
termais, em gua pura ou em pntanos e at mesmo em fendas de vapor fervente no fundo
do oceano. Ento, cada espcie possui seu crescimento inuenciado por um conjunto de
caractersticas fsicas do ambiente como, por exemplo, pH, temperatura, concentrao
de oxignio, umidade, presso osmtica etc. Vamos ento entender como esses fatores
inuenciam no crescimento dos microrganismos.
pH Esse termo signica potencial hidrogeninico, ou seja, a quantidade de H+ em uma
soluo e representa a acidez ou a alcalinidade de um meio. Os valores de pH variam de 0 a
14. O valor 7 representa um meio neutro, abaixo desse valor o meio considerado cido e
acima, bsico. De acordo com sua tolerncia acidez ou alcalinidade, os microrganismos
podem ser classicados em: acidlos (organismos que tm tolerncia por meios cidos;
pH de 0,1 a 5,4), neutrlos (organismos que tm tolerncia por meios neutros; pH de 5,4
a 8,5) ou alcallos (organismos que tm tolerncia por meios alcalinos; pH de 7 a 11,5).
As bactrias de um modo geral crescem melhor em pH variando de 4 a 9 e os fungos em pH
mais baixos entre 5 e 6.

Atividade 4
De acordo com o que voc aprendeu, complete o quadro abaixo.
Acidlo
Neutrlo

Organismos que tm tolerncia por meios neutros

Alcallo

Aula 4

Metabolismo da Vida Microscpica

83

Temperatura Os microrganismos podem variar muito quanto a sua tolerncia


temperatura. De acordo com esse fator, os microrganismos podem ser classicados em:
psicrlos (organismos que gostam do frio; crescem melhor entre 15 e 20C), meslos
(crescem melhor entre 25 e 40C) e termlos (organismos que gostam do calor; crescem
melhor entre 50 e 60C). Nenhum psicrlo sobrevive no corpo humano, mas alguns so
conhecidos por causarem deteriorao em alimentos refrigerados. A maioria das bactrias
que causam doena no homem so termlas, pois crescem a uma temperatura prxima
do corpo humano (37C).

Atividade 5
De acordo com o que voc aprendeu, complete o quadro abaixo.
Psicrlos
Meslos

Organismos que crescem melhor entre 25 e 400C

Termlos

Oxignio Estamos acostumados a pensar no oxignio molecular (O2) como um


elemento essencial vida, mas em algumas circunstncias esse elemento pode se tornar um
gs venenoso, como, por exemplo, pode acontecer com alguns microrganismos. Esses, de
acordo com sua tolerncia ao oxignio, podem ser classicados em aerbios obrigatrios
(necessitam de oxignio para crescer), anaerbios facultativos (crescem tanto na presena
como na ausncia de oxignio), anaerbios obrigatrios (no sobrevivem na presena de
oxignio) e microaerlos (crescem na presena de oxignio, porm, em concentraes
inferiores quelas do ar).
Essa tolerncia ao oxignio determinada pela capacidade do microrganismo de produzir
algumas enzimas que degradam os produtos txicos formados no meio composto por oxignio
molecular (O2), como, por exemplo, o radical superxido (O2), o perxido de hidrognio e o
radical hidroxila (OH). Os microrganismos que conseguem sobreviver na presena do oxignio
molecular (O2) porque escapam da toxicidade desses compostos produzindo enzimas que
convertem os compostos txicos em outros no txicos. Essas enzimas so a superxido
dismutase, a catalase e a peroxidase. A superxido dismutase converte o radical superxido
em perxido de hidrognio e oxignio molecular. Veja a equao abaixo.

84

Aula 4

Metabolismo da Vida Microscpica

A catalase e a peroxidase convertem o perxido de hidrognio em oxignio e gua e


somente gua, respectivamente. Veja as equaes abaixo.
O2 + O2 + 2 H+

2H2O2 + O2

superxido dismutase

Radical
superxido

Perxido de Oxignio
hidrognio

2H2O2 Catalase2H2O + O2
Perxido de
hidrognio

Oxignio

gua

H2O2 + 2 H+

Peroxidase

2H2O
gua

Perxido de
hidrognio

Os anaerbios obrigatrios no conseguem crescer na presena do oxignio molecular


(O2) porque no produzem essas enzimas e morrem na presena desses compostos txicos.
Veja na Figura 4 o efeito do oxignio sobre o crescimento dos microrganismos.

a. Aerbicos
obrigatrios

b. Anaerbicos
facultativos

c. Anaerbicos
obrigatrios

d. Microaerfilos

Somente crescimento
aerbico; necessidade de
oxignio.

Crescimento aerbico e
anaerbico; aumento do
crescimento na presena
de oxignio.

Somente crescimento
anaerbico; no h
crescimento na presena
do oxignio.

Somente crescimento
aerbico; necessidade
de oxignio em baixas
concentraes.

Explicao para os padres


de crescimento

Crescimento somente aps


a difuso de altas
concentraes de oxignio
para o meio de cultura.

Melhor crescimento nas


regies de maior
concentrao de oxignio,
mas ocorre em todo o meio.

Crescimento nas regies


onde no h oxignio.

Crescimento ocorre onde


uma baixa concentrao
de oxignio est difusa
no meio.

Explicaes para os efeitos


do oxignio

Presena das enzimas


catalase e superxido
dismutase (SOD) permite a
neutralizao das formas
txicas de oxignio; pode
usar oxignio.

Presena das enzimas


catalase e SOD permite a
neutralizao das formas
txicas de oxignio; pode
usar oxignio.

Ausncia das enzimas que


neutralizam as formas
txicas do oxignio; no
tolera oxignio.

Produo de quantidades
letais das formas txicas
de oxignio quando
expostos atmosfera
normal de oxignio.

Efeito do oxignio sobre


o crescimento

Tubo de ensaio com


crescimento bacteriano
em meio slido

Figura 4 Efeito do oxignio sobre o crescimento de diferentes bactrias


Fonte: Tortora, Funke e Case (2005).

Aula 4

Metabolismo da Vida Microscpica

85

Atividade 6
De acordo com o que voc aprendeu, responda: por que alguns microrganismos
no conseguem sobreviver na presena do oxignio?

Soluo isotnica
quando a concentrao de
solutos igual dentro e
fora da clula.

Soluo hipertnica
quando a concentrao de
solutos do meio maior
do que a do interior
da clula.

Hipotnico
Soluo hipotnico:
quando a concentrao de
solutos do meio menor
do que a do interior
da clula.

86

Aula 4

Presso osmtica Esse termo denido como a presso necessria para impedir o
uxo de gua de um meio de maior concentrao para um de menor concentrao atravs de
uma membrana semipermevel.
Os microrganismos retiram da gua, presente em seu meio ambiente, a maioria dos seus
nutrientes solveis. Portanto, eles necessitam de gua para seu crescimento e seu contedo
celular composto de cerca de 80 a 90% de gua. Dessa forma, quando uma clula microbiana
est num meio aquoso, no devem existir grandes diferenas na concentrao de solutos
dentro e fora, ou as clulas poderiam perder gua ou romper-se.
Quando uma clula est em uma soluo isotnica, o uxo de gua para dentro e para
fora da clula est em equilbrio e a clula cresce normalmente. Porm, a gua presente
dentro da clula pode ser removida por elevaes na presso osmtica. Por exemplo, quando
uma clula microbiana se encontrar em uma soluo hipertnica, ou seja, contendo uma
concentrao de solutos superior quela do interior da clula, ocorrer a passagem de gua
de dentro da clula para o meio atravs da membrana plasmtica e o crescimento microbiano
ser inibido. Esse fenmeno de perda de gua pela clula chamado de plasmlise. Ao
contrrio, quando o meio hipotnico contendo uma concentrao menor de solutos, a gua
ui para dentro da clula rompendo-a. Veja na Figura 5 uma clula em uma soluo isotnica,
hipotnica e hipertnica.

Metabolismo da Vida Microscpica

b
Soluto
Parede
Membrana
Citoplasma
celular
plasmtica

Soluo isotnica (isosmtica) sem movimento total de gua

Soluo hipotnica (hiposmtica) a gua se move para dentro da


clula e pode causar sua ruptura se
a parede estiver fraca ou danificada
(liseosmtica)

Soluo hipertnica
(hiperosmtica) a gua se move para fora da clula,
fazendo sua membrana plasmtica
encolher (plasmlise)

Figura 5 Uma clula em uma soluo a) isotnica, b) hipotnica e c) hipertnica


Fonte: Tortora, Funke e Case (2005).

Atividade 7
Baseado no que aprendeu, responda: por que voc acha que salgando a carne,
ela dura mais tempo, mesmo fora da geladeira?

Entenda que os mesmos fatores que afetam o crescimento microbiano podem ser utilizados
como estratgias para controlar os mesmos, desde que voc altere as condies timas de
cada fator. Por exemplo, quando colocamos um alimento na geladeira estamos impedindo
que os microrganismos meslos cresam nesse alimento, pois esses microrganismos no
crescem na temperatura da geladeira, que em torno de 4C.

Aula 4

Metabolismo da Vida Microscpica

87

Resumo
Nesta aula, voc aprendeu que o crescimento microbiano pode ser denido
como um aumento no nmero de clulas, e no um aumento de tamanho. Voc
aprendeu, tambm, que os microrganismos procariticos se multiplicam por um
mecanismo chamado de diviso binria, no qual uma clula parental se parte em
duas clulas idnticas e que algumas espcies podem se multiplicar por outro
mecanismo chamado de brotamento. E, ainda, que durante seu crescimento,
o microrganismo passa por diferentes fases. Finalmente, voc compreendeu
que cada espcie microbiana possui exigncias prprias com relao a fatores
nutricionais e fsicos para seu crescimento. Por m, voc compreendeu que os
mesmos fatores que afetam o crescimento microbiano podem ser usados para
controlar seu crescimento.

Autoavaliao
1

Explique o que crescimento microbiano.

Qual o signicado do crescimento exponencial de uma cultura microbiana?

Discuta a utilizao nutricional do carbono e do nitrognio pelos microrganismos.

Descreva como os microrganismos aerbios, anaerbios e facultativos crescem em


meio de cultivo com gar de camada alta.

Se uma espcie microbiana produtora da enzima superxido dismutase, o que se


pode dizer sobre sua siologia?

Quais as principais condies fsicas que devem ser consideradas no cultivo


dos microrganismos?

7
88

Aula 4

O que presso osmtica e como ela afeta o crescimento das clulas microbianas?

Metabolismo da Vida Microscpica

Referncias
BLACK, J. G. Microbiologia fundamentos e perspectivas. 4. ed. Rio de Janeiro: Editora
Guanabara Koogan, 2002.
PELCZAR, M. J. et al. Microbiologia: conceitos e aplicaes. So Paulo: Makon Books, 1996.
TORTORA, G. J.; FUNKE, B. R.; CASE, C. I. Microbiologia. 8. ed. Porto Alegre: Editora
Artmed, 2005.

Anotaes

Aula 4

Metabolismo da Vida Microscpica

89

Anotaes

90

Aula 4

Metabolismo da Vida Microscpica

Obteno de energia
para a vida microbiana

Aula

Apresentao

oc estudou na Aula 4, Crescendo na diversidade, que o crescimento dos


microrganismos depende das condies ambientais. Dentre essas condies est
o suprimento de energia que os seres necessitam para seu metabolismo. Agora,
voc vai se surpreender com a variedade de substratos e modos de obteno de energia
utilizados pelos microrganismos.
Nesta aula, vamos identicar alguns desses substratos. Vamos tambm descrever
e distinguir os processos de obteno de energia pelos microrganismos, que incluem a
fermentao, a respirao aerbica e a respirao anaerbica. Outro processo, a fotossntese,
ser estudado posteriormente em outra aula. Ao nal, voc entender que os microrganismos
apresentam uma diversidade metablica muito superior dos organismos macroscpicos,
como plantas e animais. Essa diversidade uma fonte riqussima de produtos a serem utilizados
pelos humanos. Vamos descobrir!

Metabolismo
conjunto de todas as
reaes bioqumicas que
ocorrem em uma clula ou
organismo.

Substrato
substncia ou material que
serve de base ou suporte.
Nesse caso, substrato
a substncia doadora
de eltrons no processo
de oxidao que fornece
energia para a clula.

Objetivos
1

Listar os tipos de substratos que podem ser utilizados por


microrganismos como fonte de energia.

Distinguir os diferentes processos de obteno de energia


pelos microrganismos.

Descrever resumidamente a respirao aerbica, a


respirao anaerbica e a fermentao.

Identicar algumas diferenas da respirao aerbica em


procariotos e eucariotos.

Aula 5

Metabolismo da Vida Microscpica

93

Os seres vivos esto


sempre precisando de energia
Atividade 1
Iniciaremos esta aula reetindo por que os microrganismos precisam de
energia. Baseado no que voc reconhece como funes bsicas de todo ser vivo,
liste quais atividades da clula microbiana requerem energia.

Bioluminescncia
A emisso de luz da
cadeia de transporte
de eltrons de certos
organismos vivos (a
cadeia de transporte de
eltrons ser vista mais
adiante no texto
dessa aula).

94

Aula 5

Sua lista provavelmente contm algumas das seguintes atividades: mobilidade atravs do
movimento de agelos; transporte de substncias do meio para o interior da clula (absoro
de nutrientes) e da clula para o meio (excreo de resduos e secreo de substncias ativas);
reproduo; reparo de danos e manuteno da integridade celular; manuteno da presso
osmtica constante na clula; bioluminescncia. Alm de todas essas atividades, as clulas
precisam de energia para a biossntese de novas macromolculas, que o trabalho de maior
demanda energtica da clula.

Na biossntese, molculas orgnicas complexas so sintetizadas a partir de


molculas mais simples. Exemplos de processos biossintticos so a formao
de protenas a partir de aminocidos, cidos nucleicos a partir de nucleotdeos
e polissacardeos a partir de monossacardeos. A sntese de macromolculas
necessria para a formao de componentes celulares, tais como parede celular,
membrana citoplasmtica, agelos, citoplasma etc.

Metabolismo da Vida Microscpica

De onde a clula retira a energia necessria para todas essas atividades? Voc j deve
ter ouvido falar em um composto chamado adenosina trifosfato ou trifosfato de adenosina, o
ATP. A molcula de ATP (Figura 1) acumula ligaes de alta energia dentro da clula. Quando
a clula precisa realizar a biossntese ou outra atividade celular, a energia necessria cedida
pelas molculas de ATP.
Essas molculas so formadas por adenina (uma base nitrogenada), ribose (um acar
com cinco tomos de carbono) e trs grupos fosfato. O smbolo ~ representa uma ligao
de alta energia, que pode ser prontamente quebrada para liberar energia utilizvel pela clula.
Quando o ATP se degrada em ADP e fosfato inorgnico, grande quantidade de energia qumica
liberada para uso em outras reaes qumicas.

NH2
Adenina
N

HC

P~ O

P~ O

CH

C
N

N
O

CH2 O
H

Ribose
H

HO

OH
AMP

ADP
ATP

Figura 1 Molcula de adenosina trifosfato (ATP)


Fonte: Adaptado de Barbosa e Torres (2005).

Atividade 2
1

A energia qumica das ligaes de alta energia do ATP liberada quando o grupo
fosfato terminal retirado da molcula, resultando na formao de outro composto
com menos energia. Analise a Figura 1 e descubra qual esse composto. Depois,
escreva seu nome completando a reao abaixo.

ATP _______ + fosfato + energia

Agora, descubra qual a reao geral de formao de ATP. Basta escrever a reao
inversa da anterior:
________ + fosfato + __________ ATP

Aula 5

Metabolismo da Vida Microscpica

95

Vamos produo do ATP


Para saber como o ATP produzido na clula a partir do ADP, precisamos descobrir
de onde vem a energia para essa produo. A maioria dos microrganismos retira do ambiente
compostos orgnicos ou inorgnicos que sero as fontes de energia para a produo de ATP.
Outros organismos usam a luz. Os microrganismos extraem a energia de uma (ou mais)
dessas fontes, e transferem essa energia para o ATP. Por exemplo, muitos microrganismos
usam compostos orgnicos, como carboidratos, protenas ou lipdios como fonte de energia.
Primeiro, os microrganismos assimilam esses compostos do ambiente. Em seguida, as clulas
oxidam (veja a Figura 2) esses substratos, extraindo deles a energia para produzir ATP.
Dessa maneira, os microrganismos convertem diferentes fontes de energia em uma moeda
energtica nica, que o ATP.

Em eventos de oxidao-reduo, um eltron transferido da molcula A para


a molcula B. A molcula A, que perde eltrons, oxidada. A molcula B, que
ganha eltrons, reduzida. Muitas vezes, a reao de oxidao-reduo (tambm
chamada reao redox) produz energia, como o caso da oxidao biolgica.

Reduo

A oxidada

B reduzida

Oxidao

Figura 2 Oxidao-reduo
Fonte: Adaptado de Tortora, Funke e Case (2002).

E quais so os processos atravs dos quais as clulas oxidam os substratos, extraindo


deles a energia que transferida para o ATP? Os microrganismos produzem ATP oxidando
diferentes substncias atravs da respirao ou fermentao. Na respirao, que pode ser
aerbica ou anaerbica, substncias orgnicas ou inorgnicas podem ser fonte de energia,
dependendo do microrganismo. Na fermentao, a energia retirada apenas de substncias
orgnicas, ao passo que na fotossntese a fonte de energia a luminosa.

96

Aula 5

Metabolismo da Vida Microscpica

Mas, lembre-se de que esses modos de obteno de energia no acontecem todos em


uma mesma clula. Assim como os animais, muitas bactrias, os fungos e os protozorios
utilizam a respirao ou tambm a fermentao para obter ATP. J as algas e vrias bactrias,
assim como as plantas, utilizam essencialmente a fotossntese. A seguir, descreveremos essas
formas de obteno de energia, exceto a fotossntese, que ser estudada em outra aula. Antes
de prosseguir, resolva a Atividade 3.

Atividade 3
Resuma na tabela a seguir as informaes que voc acabou de estudar.
Processo de
obteno de energia

Microrganismos

Origem da energia

Respirao aerbica
Composto orgnico ou
inorgnico

Respirao anaerbica
Fermentao
Bactrias verdes
Bactrias prpuras
Fotossntese
Cianobactrias
Algas

Respirao aerbica
Veremos agora uma srie de reaes necessrias respirao celular aerbica, ou seja,
que ocorre apenas em ambientes onde o oxignio est presente. A respirao aerbica se d
em trs etapas, de forma semelhante em eucariotos (incluindo animais e plantas superiores)
e procariotos aerbicos. Algumas diferenas existem. Vamos descobrir.

Ns demoramos vrios minutos para


compreender como a respirao celular acontece; mas
dentro clula, tudo isso ocorre em algumas poucas
fraes de segundos!

Aula 5

Metabolismo da Vida Microscpica

97

Microrganismos gostam de glicose


Voc leu h pouco que substncias orgnicas como carboidratos, protenas ou lipdios
podem ser usadas como fonte de ATP pela clula. A maioria dos microrganismos utiliza
carboidratos, sobretudo a glicose como a principal fonte de energia celular. A glicose o
carboidrato mais abundante na natureza. Para compreender a respirao aerbica, vamos
estudar como esse processo ocorre usando a glicose como modelo de substrato. A respirao
aerbica usando a glicose acontece em trs etapas sucessivas: a gliclise, o ciclo de Krebs
e a cadeia respiratria. Veremos essas etapas logo mais.

H
H O

O H H C

H
H
O

O H
H

Hidrognio
Carbono
Oxignio

Figura 3 Molcula de glicose


Fonte: <http://science9.wordpress.com/2007/04/>. Acesso em: 7 out. 2009.

Atividade 4
Analise a Figura 3 e complete a frmula da molcula de glicose, indicando o nmero de
tomos de cada elemento:

C__H__O__

98

Aula 5

Metabolismo da Vida Microscpica

Atividade 5
Ns, humanos, assim como muitas bactrias, fungos e protozorios,
precisamos obter a glicose para a respirao a partir dos alimentos disponveis
no meio. Microrganismos retiram a glicose do solo, da gua, de tecidos animais
e plantas onde se hospedam. Pesquise sobre a glicose em livros ou na internet
e faa uma lista de alimentos que so ricos desse carboidrato.

Quebrando o acar na gliclise


Vimos que a gliclise a primeira etapa da respirao aerbica. Gliclise signica quebra
do acar, e exatamente o que acontece. Nesse processo, a glicose, que um acar
composto por seis tomos de carbono, quebrada em duas molculas de um acar contendo
trs carbonos cada, chamado piruvato ou cido pirvico. Esse processo gera energia, usada
para produzir duas molculas de ATP. Aqui, o ATP formado quando um fosfato de alta
energia diretamente transferido de um composto fosforilado (um substrato, no caso a
glicose) para a molcula de ADP. A formao do ATP por essa via chamada fosforilao
em nvel de substrato, e pode ser representada no seguinte exemplo:
C-C-C~fosfato
Substrato orgnico

ADP C-C-C + ATP

O que mais acontece na gliclise? Lembre-se de que o objetivo da respirao produzir


ATP. Nessa primeira etapa da respirao, cada molcula de glicose oxidada gera um
rendimento de apenas duas molculas de ATP. Isso pouco para a clula. Mas, a funo da
gliclise no para por a: a maior parte da energia da molcula de glicose est contida nos seus
eltrons. Lembre-se de que um composto oxidado quando perde eltrons. Na gliclise, a
molcula de glicose oxidada. Ou seja, os eltrons ricos em energia da glicose so extrados e
transferidos para outra molcula, chamada NAD +. Quando o NAD + recebe esses eltrons
energizados, ele se converte em NADH
NADH.

Aula 5

NAD +
Abreviao do nome da
molcula transportadora
de eltrons chamada
nicotinamida adenina
dinucleotdeo (forma
oxidada).

NADH
Abreviao do
nome da molcula
transportadora de
eltrons chamada
nicotinamida adenina
dinucleotdeo (forma
reduzida).

Metabolismo da Vida Microscpica

99

Veja a Figura 4. Ela representa a oxidao biolgica. Dois eltrons e dois prtons
(juntos equivalem a dois tomos de hidrognio) so transferidos de uma molcula orgnica
para uma coenzima, NAD +. NAD +, na realidade, recebe um tomo de hidrognio e um
eltron, e um prton liberado no meio. NAD+ reduzido a NADH, que uma molcula
mais rica em energia.

Reduo

+
H H
(prton)

e
H+

Molcula orgnica
Coenzima NAD +
que inclui dois tomos (transportador de eltron)
de hidrognio

Molcula orgnica
oxidada

NADH + H + (prton)
(transportador de
eltron reduzido)

Oxidao
Figura 4 Representao da oxidao biolgica
Fonte: Adaptado de Tortora, Funke e Case (2002).

Na gliclise, duas molculas de NADH so formadas para cada molcula de glicose


oxidada. E qual a funo do NADH? a de carreador de eltrons ricos em energia. Voc ver
adiante que a energia desses eltrons transportados pelo NADH usada para a produo de
ATP na ltima etapa da respirao, chamada de cadeia respiratria (ou cadeia de transporte
de eltrons) e quimiosmose.

Atividade 6
Faa aqui uma relao dos produtos resultantes da gliclise, a primeira etapa da
respirao. Considere o nmero de molculas resultantes para cada molcula de
glicose que entra no processo.

Produto formado
1.
2.
3.

100

Aula 5

Metabolismo da Vida Microscpica

Nmero de molculas produzidas

Baseado no que voc estudou at agora, explique com as suas palavras como ocorre
a formao do NADH e qual sua funo na clula.

Continuando a quebra do acar:


a transformao do piruvato e o ciclo de Krebs
GLICLISE
Glicose
2 NADH
+2H

2 ATP
2 cido
pirvico
2 CO2

2 NADH
+2H +
Passo preparatrio

2 Acetil CoA

6 NADH
+6H +

CICLO DE
KREBS

4 CO2

2 FADH2

10 NADH2
2 FADH2
(Total)

6 CO2
(Total)

+10H +

2 ATP
Eltrons

Cadeia de
transporte
de Eltrons e
Quimiosmose

34 ATP
6 O2

+ 12H +
6 H2O

38 ATP
(Total)

Figura 5 Resumo da respirao aerbica em procariotos


Fonte: Adaptado de Tortora, Funke e Case (2002).

Aula 5

Metabolismo da Vida Microscpica

101

A partir de agora, passe a acompanhar o texto com a ajuda da Figura 5. A quebra da


glicose vai continuar at que toda a energia desse composto tenha sido extrada e convertida
em ATP. Voc se lembra de que na gliclise, para cada molcula de glicose (seis tomos de
carbono) que oxidada, so produzidas duas molculas de piruvato (trs tomos de carbono),
duas de ATP e duas de NADH? Agora, uma srie de reaes transforma cada molcula de
piruvato em uma molcula de acetil coenzima-A (ou acetil Co-A), que contm dois tomos
de carbono (veja a Figura 5). Os tomos de carbono que foram extrados das duas molculas
de piruvato so liberados pela clula na forma de gs carbnico. Essa etapa considerada
preparatria ao ciclo de Krebs.
Com a formao da molcula de acetil Co-A, tem incio de fato o ciclo de Krebs.
As prximas etapas envolvem um ciclo de reaes complexas, onde a molcula orgnica (agora
na forma de acetil Co-A) continua sendo degradada. Os dois tomos de carbono que restaram
da molcula de glicose so extrados das molculas de acetil Co-A e liberados da clula na
forma de CO 2 (Figura 5).

Atividade 7
1

Baseado no que voc aprendeu, indique na tabela a seguir os nmeros de tomos


de carbono em cada produto formado nas sucessivas etapas da respirao celular
tendo a glicose como substrato inicial.

Etapas

Composto

Incio da gliclise

Glicose

Final da gliclise

Piruvato

Acetil coA
Etapa preparatria do ciclo de Krebs
CO2

Final do ciclo de Krebs

102

Aula 5

Metabolismo da Vida Microscpica

CO2

Nmero de tomos de carbono em cada molcula

Agora, responda: se a molcula de glicose contm seis tomos de carbono, quantas


molculas de gs carbnico so formadas na clula para cada molcula de glicose
que entra no processo de respirao? Conra sua resposta na Figura 5.

Repare que o substrato (a glicose, no caso) foi continuamente quebrado na


gliclise, etapa preparatria e ciclo de Krebs. Ao nal desse ciclo, a glicose tinha
sido totalmente quebrada. O que mais acontece no ciclo de Krebs e na etapa
preparatria que a antecede?

Durante a transformao do piruvato em acetil Co-A, o piruvato oxidado (perde


eltrons) e o NAD + reduzido (ganha eltrons) a NADH. No total, so produzidas duas
molculas de NADH para cada glicose oxidada (veja a Figura 5). J no ciclo de Krebs, as
reaes que transformam acetil Co -A em CO 2 produzem seis molculas de NADH e duas
molculas de FAD
FADH 2 para cada molcula inicial de glicose. O FADH2 formado quando a
molcula de FAD captura os eltrons extrados durante a oxidao do substrato. O FADH2
possui a mesma funo do NADH, ou seja, a de transporte de eltrons energizados para
serem usados na cadeia respiratria.
Igualmente ao que aconteceu na gliclise, eltrons ricos em energia so retirados do piruvato
e do acetil Co-A, e imediatamente transferidos para as molculas transportadoras, NAD + e
FAD, que so ento convertidas em NADH e FADH 2, respectivamente (veja a Figura 5).
As molculas de NADH e FADH2 produzidas na etapa preparatria e no ciclo de Krebs tero
o mesmo destino daquelas produzidas na gliclise. Ou seja, os eltrons transportados por
essas molculas sero usados para a produo de ATP na ltima etapa da respirao, a cadeia
respiratria, que veremos adiante. As reaes do ciclo de Krebs produzem ainda duas molculas
de ATP para cada molcula de glicose que entra no processo de respirao (veja a Figura 5).

Aula 5

FADH 2
Abreviao do nome da
molcula transportadora
de eltrons chamada
avina adenina
dinucleotdeo (forma
reduzida).

FAD
Abreviao do
nome da molcula
transportadora de
eltrons chamada
avina adenina
dinucleotdeo (forma
oxidada).

Metabolismo da Vida Microscpica

103

Atividade 8
Faa aqui uma relao dos produtos resultantes da etapa de transformao do
piruvato (preparatria para o ciclo de Krebs), do ciclo de Krebs. Considere o nmero
de molculas resultantes para cada molcula de glicose que entra no processo.
Produto formado

Nmero de molculas

1.
2.
3.
4.

A cadeia respiratria e a quimiosmose:


o que acontece com os eltrons
transportados pelo NADH e pelo FADH 2?
Lembre-se de que o objetivo da respirao produzir ATP, que a clula usa em diversas
atividades celulares. Porm, voc notou que a gliclise e o ciclo de Krebs produzem poucas
molculas de ATP (apenas quatro). Por outro lado, foram produzidas dez molculas de NADH
e duas de FADH 2 (veja a Figura 5). Essas molculas carregam eltrons ricos em energia,
que foram extrados da matria orgnica (glicose, no caso). a energia desses eltrons que a
cadeia respiratria vai usar para produzir muitas molculas de ATP.
Todos os NADH e os FADH2 produzidos na gliclise e no ciclo de Krebs so
conduzidos para a cadeia respiratria, tambm chamada de cadeia de transporte de eltrons
(veja a Figura 6). Ela consiste de uma sequncia de molculas transportadoras associadas
membrana citoplasmtica (procariotos) ou mitocondrial (eucariotos). Os NADH liberam na
cadeia seus eltrons ricos em energia. Os eltrons so ento transferidos na sequncia de
molculas transportadoras da cadeia. Na medida em que os eltrons so passados atravs
da cadeia, ocorre uma gradual liberao de energia, em vrias etapas. Essa energia usada
para a sntese de ATP a partir de ADP e fosfato atravs do mecanismo de quimiosmose,
mostrado logo a seguir, na Figura 6.

104

Aula 5

Metabolismo da Vida Microscpica

NADH

Respirao
Gliclise

NAD +

NADH

Cadeia de transporte de eltrons

ATP

NADH

FADH2

FAD

Ciclo de Krebs

F l u xo

FMN
Q

de el

tr on

Cyt b

Fermentao

Cyt c1

ATP

2 H+

Cyt c

ATP

Cadeia de
transporte de
eltrons e quimiosmose

Cyt a3
1
2

Reduo
Energia

Cyt a

Legenda:

O2

H2O

Oxidao

Alta concentrao de H +
H+

H+

Cadeia de
transporte de
eltrons (inclui
bomba de prtons)

Membrana
Citoplasmtica

ATP
sintase

3
Energia de
luz solar
ou NADH

ADP + P
ATP

Baixa concentrao de H +

Figura 6 Cadeia de transporte de eltrons. O diagrama na lateral indica a relao da cadeia de transporte de eltrons com o processo
total da respirao
Fonte: Adaptado de Tortora, Funke e Case (2002).

Aula 5

Metabolismo da Vida Microscpica

105

H quatro classes de molculas transportadoras na cadeia de transporte de eltrons:


desidrogenases, protenas ferro-enxofre, quinonas e citocromos. Com exceo
s quinonas, as demais molculas so protenas. H uma grande variao da
composio exata das molculas transportadoras nos diferentes organismos. Por
exemplo, em eucariotos, a entrada de eltrons na cadeia de transporte de eltrons
mitocondrial feita atravs de apenas duas desidrogenases (NADH desidrogenase
e succinato desidrogenase). J nas bactrias existem outras desidrogenases que
oferecem outras entradas alternativas para os eltrons depositados na cadeia pelos
NADH produzidos na gliclise e ciclo de Krebs. Em bactrias, uma molcula
transportadora particular e a ordem em que ela atua na cadeia pode diferir daquelas
de outras bactrias.

No nal da cadeia de transportes de eltrons est o O 2. A funo do oxignio na cadeia


respiratria a de atrair os eltrons que foram entregues na cadeia pelo NADH. Ao nal dessa
cadeia, os eltrons se unem a prtons (H+) e ao oxignio para formar gua (H 2O). Por isso, o
O 2 chamado aceptor nal de eltrons da respirao aerbica (veja na Figura 6).
O mecanismo de sntese de ATP que utiliza a cadeia de eltrons chamado de
quimiosmose. A maioria do ATP gerado pela respirao aerbica obtida pelo mecanismo
de quimiosmose, durante a fase da cadeia de transporte de eltrons. A sequncia de eventos
na quimiosmose est descrita a seguir (veja tambm a Figura 6).

106

Aula 5

1)

Os eltrons energizados do NADH e do FADH2 so transferidos para as molculas


transportadoras (avina ou coenzima Q, por exemplo) no incio da cadeia. Lembre-se de
que esses transportadores esto localizados na face interna da membrana. Alguns desses
transportadores na cadeia bombeiam prtons (H +) atravs da membrana para sua face
externa. Tais molculas transportadoras so chamadas bombas de prtons.

2)

A membrana normalmente impermevel a esses prtons. Por isso, em um determinado


momento, os prtons se acumulam na face externa da membrana. Isso gera um gradiente
de concentrao de prtons, ou seja, uma maior quantidade de prtons na face externa em
relao interna. O excesso de H+ na face externa torna esse lado positivamente carregado
em relao ao outro lado da membrana. O gradiente eletroqumico resultante gera uma
reserva de energia potencial, chamada de fora prton motiva.

3)

Os prtons acumulados na face externa da membrana podem se difundir atravs da


membrana exclusivamente por meio de canais formados por protenas especiais que
contm uma enzima chamada adenosina trifosfatase (ATP sintase). Quando este uxo
de H + em direo ao interior da clula ocorre, energia liberada e utilizada pela ATP
sintase para fabricar ATP.

Metabolismo da Vida Microscpica

O processo de respirao aerbica basicamente o mesmo em qualquer clula viva, com


algumas poucas variaes. O local onde essas reaes ocorrem, por exemplo, difere entre
procariotos e eucariotos.

Atividade 9
Analise a Figura 7 a seguir e descubra que diferenas so essas. Depois, escreva suas
concluses no espao abaixo.

Procariotos
Eucariotos
Glicose
Glicose
Gliclise
ATP
NADH

Gliclise

Piruvato

ATP
NADH

Piruvato

Mitocndria

Ciclo
de Krebs

Ciclo
de Krebs

CO2
NADH
FADH2
ATP

Cadeia de transporte de eltrons

CO2
NADH
FADH2
ATP

Cadeia de transporte de eltrons

Figura 7 Localizao das etapas da respirao em eucariotos e procariotos


Fonte: Adaptado de Briggs et al. (2009)

Aula 5

Metabolismo da Vida Microscpica

107

Atividade 10
1

Baseado no que voc acabou de aprender, complete a reao geral da respirao


aerbica:

1______+ 6 O 2 + _______ + 38 P _____ +______+_____Glicose

Analisando o metabolismo microbiano, voc capaz de explicar agora, em poucas


palavras, o que acontece quando os alimentos estragam?

Microrganismos tambm extraem a


energia de substncias inorgnicas usando o O2
Acabamos de estudar as etapas da respirao aerbica usando a glicose como exemplo
de substrato. J mencionamos que outras substncias orgnicas, como protenas e lipdios,
tambm podem ser fonte de energia. Repare agora que procariotos podem usar tambm
molculas inorgnicas como fonte de energia para a sntese de ATP. Nesse caso, a energia
derivada da oxidao de compostos inorgnicos como a amnia (NH 3 ), o nitrito (NO2),
o sulfeto de hidrognio (H2S ) e ons ferro (Fe2+) transferida e armazenada na molcula
de ATP. A produo de ATP acontece tambm atravs de uma cadeia de transporte de
eltrons e quimiosmose.

108

Aula 5

Metabolismo da Vida Microscpica

Respirando quando falta o oxignio


Vimos at agora como acontece a respirao quando o aceptor nal de eltrons o
oxignio. Mas, para alguns procariotos, existem outras formas de respirar. Muitas bactrias
usam outras substncias no lugar do O2 ao nal da cadeia respiratria. Isso a respirao
anaerbica. Essas bactrias so capazes de viver em ambientes com pouco ou nenhum
oxignio. Por isso, so chamadas de bactrias anaerbias. Tais bactrias tm sido bastante
estudadas para serem usadas em tratamentos de esgotos, como veremos em outra aula.
bom lembrar que eucariotos no tm capacidade de substituir O2 na cadeia respiratria!
Assim como a respirao aerbica, o processo anaerbico tambm conta com uma
cadeia de transporte de eltrons para gerar ATP. Para as bactrias anaerbias, o aceptor
nal de eltrons geralmente inorgnico, embora compostos orgnicos (por exemplo, uma
substncia orgnica chamada fumarato) tambm podem funcionar como aceptor de eltrons
na cadeia respiratria. Alguns exemplos podem ser vistos a seguir.
Tabela 1 Exemplos de procariotos que usam compostos diferentes do O2 na respirao
Bactria

Aceptor nal de eltrons na respirao anaerbicat

Pseudomonas

NO3

Desulfovibrio

SO42

Methanococcus

CO2

Geobacter metallireducens

Fe3 +

O metabolismo anaerbico induz muitas modicaes no metabolismo dos procariotos.


Por exemplo, vrias enzimas que participam do ciclo de Krebs deixam de ser sintetizadas na
ausncia do O2. Como resultado, algumas bactrias anaerbicas sintetizam enzimas com
funes semelhantes s aerbicas; em outras, o ciclo de Krebs ocorre apenas parcialmente;
outros tipos de bactrias ainda eliminaram o ciclo de Krebs e desenvolveram outras rotas
metablicas para extrair os eltrons do substrato. A cadeia de transporte de eltrons tambm
no completa na respirao anaerbica. Portanto, esse tipo de respirao apresenta um
rendimento energtico menor do que a respirao aerbica. O nmero de molculas de ATP
formado varivel entre os organismos anaerbicos.

Estou comeando a entender por que os


cientistas dizem que os procariotos apresentam
uma grande diversidade metablica!

Aula 5

Metabolismo da Vida Microscpica

109

Atividade 11
Faa uma pesquisa em livros e na internet e descubra em quais ambientes
podemos encontrar bactrias anaerbicas. Registre no espao abaixo os
resultados de sua pesquisa.

Que bom que a


fermentao existe!
Outro modo de obteno de energia por microrganismos a fermentao. Assim como
na respirao anaerbica, a fermentao no requer o oxignio, embora o processo possa
ocorrer na presena de O2. Nesse caso, o aceptor nal de eltrons um composto orgnico
originado da prpria oxidao do substrato! Ou seja, a clula encontra o aceptor nal no seu
citoplasma, e no no ambiente (como o caso do O2 , NO3, do SO42 etc.).

Leveduras
fungos microscpicos,
unicelulares e
no-lamentosos,
com clulas ovais ou
esfricas.

110

Aula 5

A humanidade utiliza a fermentao para fabricar alimentos e bebidas h muitos


sculos. O po, por exemplo. Quem no gosta de um po quentinho com
manteiga? Para fabricar o po, os egpcios j usavam o fermento por volta do
ano 7.000 antes de Cristo! Esse ingrediente formado por leveduras da espcie
Saccharomyces cerevisiae.

Metabolismo da Vida Microscpica

Figura 8 Clulas de Saccharomyces cerevisiae observadas atravs de microscpio


Fonte: <http://users.rcn.com/jkimball.ma.ultranet/BiologyPages/Y/Yeast.html>. Acesso em: 7 out. 2009.

Vamos entender a fermentao usando novamente a glicose como modelo. O processo


de quebra da glicose inicia-se da mesma maneira como foi descrito para a respirao
aerbica. Lembre-se de que a primeira etapa da respirao a gliclise. Nos microrganismos
fermentadores, como leveduras e muitas bactrias, o processo tem incio tambm pela gliclise.

Atividade 12
Voc recorda quais so os produtos formados durante a gliclise? Escreva-os aqui.

Aula 5

Metabolismo da Vida Microscpica

111

Assim como na respirao aerbica, a oxidao do substrato (no caso a glicose) na


fermentao inicia-se pela converso da glicose em cido pirvico. Essa etapa acompanhada
pela produo de ATP e pela transferncia de eltrons do substrato para a coenzima NAD+,
gerando duas molculas NADH (veja a Figura 8). Mas, na fermentao, ao contrrio do que
acontece na respirao, falta um aceptor nal de eltrons exgeno (retirado do meio). A falta
desse aceptor nal de eltrons impede que os eltrons energizados sejam transferidos para uma
cadeia de transporte. Assim, no segundo passo da fermentao esses eltrons so transferidos
das coenzimas reduzidas (NADH) diretamente para o cido pirvico ou a um composto
orgnico derivado deste, originado pela prpria oxidao do substrato (veja a Figura 8).
O composto resultante (produto nal da fermentao) eliminado para o meio externo. As
coenzimas (NAD+) so ento regeneradas para participarem de nova gliclise.

Gliclise
Glicose

Respirao
Gliclise

NADH
2 NAD +

ATP

NADH

2 ADP
2

2 NADH

ATP

Ciclo de Krebs

2 cido pirvico

Fermentao

cido pirvico
(ou derivados)

ATP

2 NADH

ATP

Cadeia de
transporte de
eltrons e quimiosmose

2 NAD +

Formao de
produtos finais
da fermentao

cido pirvico

Organismos

Streptococcus,
Lactobacillus,
Bacillus

cido ltico
Produtos Finais
da Fermentao

Saccharomyces
(levedura)

Etanol
e CO2

Propionibacterium

cido propinico,
cido actico,

CO2 e H2

Clostridium

Escherichia,
Salmonella

Enterobacter

cido butrico,
butanol,
acetona,
lcool isoproplico

Etanol,
cido ltico,
cido succnico,
cido actico,

Etanol, cido ltico,


cido frmico,
butanodiol,
acetona,

e CO2

CO2 e H2

CO2 e H2

Figura 9 Representao do processo de fermentao. O diagrama indica a relao da fermentao e da respirao. a) Viso geral da
fermentao. b) Produtos nais de vrias fermentaes microbianas
Fonte: Adaptado de Tortora, Funke e Case (2002).

112

Aula 5

Metabolismo da Vida Microscpica

Atividade 13
Analise e Figura 8 e compare a respirao com a fermentao. Quais etapas
da respirao faltam na fermentao? O texto que antecede essa gura pode
ajud-lo a responder. Registre suas concluses abaixo.

Sem o ciclo de Krebs, o substrato inicial apenas parcialmente oxidado. Portanto, os


produtos nais da fermentao, excretados no meio, so molculas orgnicas ainda ricas em
energia e podem ser utilizadas por outros organismos como fonte de energia. E como ca
o rendimento energtico para o microrganismo que usa a fermentao para obter energia?
Bem, na fermentao, a produo de ATP restrita apenas primeira fase de oxidao do
substrato. Se o substrato inicial a glicose, apenas duas molculas de ATP so formadas
para cada molcula de glicose que entra no processo de fermentao.

Um exemplo de produto nal da fermentao o lcool que d origem produo


de cerveja, quando o substrato para o processo vem dos cereais. Todo mundo
sabe que cerveja uma bebida com elevadas quantidades de calorias, ou seja,
rica em energia. Voc j sabe por qu?

Aula 5

Metabolismo da Vida Microscpica

113

Atividade 14
O iogurte uma bebida fabricada graas fermentao do leite. Bactrias
do grupo lactobacilos se alimentam do acar do leite e produzem uma
substncia azeda, chamada cido ltico. De acordo com o que voc aprendeu
sobre fermentao, qual , nesse exemplo, o substrato (fonte de energia) para
os lactobacilos? E qual o aceptor nal de eltrons?

Leituras complementares
http://objetoseducacionais2.mec.gov.br/bitstream/handle/mec/2701/cadeia%20
transportadora_ATPsintase.swf?sequence=1
A cadeia transportadora de eltrons e a fosforilao oxidativa: trata-se de uma animao
que est disponvel no Banco Internacional de Objetos Educacionais do MEC. Atravs desse
endereo, voc vai poder entender melhor o mecanismo da cadeia de transporte de eltrons. Caso
o endereo no abra diretamente, v em <http://objetoseducacionais2.mec.gov.br> e digite no
campo de busca Cadeia de transporte de eltrons. Em seguida, clique no link correspondente.

http://cienciahoje.uol.com.br/105458
Os segredos da fermentao: este artigo da revista Cincia Hoje fala sobre a importncia
do estudo da levedura Saccharomyces cerevisiae, envolvida no processo de fermentao da
cachaa de alambique no Brasil. Na parte de baixo da pgina, h um cone que disponibiliza
o artigo completo.

http://cienciahoje.uol.com.br/147455
lcool mais limpo: neste outro artigo da revista Cincia Hoje, voc vai encontrar uma
matria que retrata uma nova tcnica de fermentao do lcool derivado da cana-de-acar,
que garante mais economia para as usinas e reduz o risco de danos ao meio ambiente.

114

Aula 5

Metabolismo da Vida Microscpica

Resumo
Nesta aula, abordamos a diversidade de processos que fornecem energia para
a manuteno e o crescimento (reproduo) da clula microbiana. Voc teve
a oportunidade de compreender a importncia do ATP para o fornecimento
de energia nas clulas vivas, em especial os microrganismos. Apresentamos
as classes de substratos que os microrganismos retiram do ambiente e usam
como fonte de energia em cada um desses processos. Discutimos as principais
diferenas e semelhanas das etapas da respirao aerbica, anaerbica e
fermentao. Foram apontadas algumas diferenas da respirao de procariotos
e eucariotos. Foi discutido, tambm, como microrganismos fermentadores tm
sido usados na fabricao de alimentos e bebidas.

Autoavaliao
Um dos objetivos desta aula foi fazer voc identicar a diversidade de substratos
energticos usados por microrganismos e descrever os respectivos processos de obteno
de energia. Faa os exerccios abaixo para atestar se esses objetivos foram alcanados.

Observe a Figura 5 e descreva com suas palavras o processo de respirao aerbica.

Aula 5

Metabolismo da Vida Microscpica

115

Complete a tabela abaixo sobre os processos de obteno de energia por


microrganismos:

Processo de obteno de energia

Substratos

Aceptor nal de eltrons

Produtos nais

Respirao aerbica

Respirao anaerbica

Fermentao

116

Aula 5

Descreva duas diferenas entre procariotos e eucariotos no processo de respirao.

Leia o texto Os segredos da fermentao, indicado nas Leituras complementares,


e responda as questes propostas.

a)

Quais microrganismos podem ser usados para a fabricao da cachaa?

b)

Qual o substrato da fermentao nesse processo industrial?

Metabolismo da Vida Microscpica

c)

Quais so os produtos nais dessa fermentao?

d)

Qual a importncia desses produtos para o sabor da bebida?

Referncias
BARBOSA, H. R.; TORRES, B. B. Microbiologia bsica. So Paulo: Ed. Atheneu, 2005. 196p.
BRIGGS, B. et al. Teaching cellular respiration & alternate energy sources with a laboratory
exercise developed by a scientist-teacher partnership. The American biology teacher,
Washington, v. 71, n. 3, p. 164-167, 2009.
MADIGAN, M.T.; MARTINKO, J. M.; PARKER, J. Microbiologia de Brock. So Paulo: Prentice
Hall, 2004.
TORTORA, G.J.; FUNKE, B.R.; CASE, C.L. Microbiologia. 6. ed. Porto Alegre: Ed. Artmed,
2000, 827p.

Aula 5

Metabolismo da Vida Microscpica

117

Anotaes

118

Aula 5

Metabolismo da Vida Microscpica

Controlando os microrganismos

Aula

Apresentao

s microrganismos esto relacionados transmisso de doenas, decomposio de


alimentos e contaminao da gua e do ambiente. Portanto, eles esto diretamente
relacionados s atividades humanas. Assim, o bem-estar da humanidade depende em
grande parte do controle que se possa ter sobre a populao dos microrganismos com vistas
preveno desses problemas. Nesta aula, estudaremos como possvel prevenir e evitar a
proliferao exagerada dos microrganismos por meio de mtodos fsicos e qumicos e como,
ainda assim, eles utilizam estratgias para resistir a esses modos de controle.

Objetivos
1

Descrever os principais mtodos fsicos usados para


controlar o crescimento de microrganismos.

Descrever os principais mtodos qumicos usados para


controlar o crescimento de microrganismos.

Compreender os mecanismos de resistncia microbiana


s drogas.

Aula 6

Metabolismo da Vida Microscpica

121

Por que controlar


os microrganismos?

odos ns e, em especial, muitos prossionais da rea da sade, estamos frequentemente


expostos a microrganismos potencialmente causadores de doenas. Como voc j sabe,
de um modo geral, os microrganismos so capazes de sobreviver em ambientes com
diversas condies fsicas. Entretanto, existe uma limitao dessa capacidade de sobrevivncia
de um determinado microrganismo em um meio ambiente com condies desfavorveis.
com base nesse fato que o homem desenvolveu estratgias para o controle de microrganismos.

Atividade 1
Voc conhece alguma forma que utilizamos no dia a dia para matar
microrganismos? Cite-as.

A necessidade de controlar os microrganismos


No sculo XIX j se faziam cirurgias, mas elas eram arriscadas e perigosas, pois os
pacientes submetidos mesmo a operaes mais simples corriam um elevado risco de
infeco. Isso ocorria porque a cirurgia no era realizada sob condies asspticas. A sala de
operaes, as mos do cirurgio e os instrumentos cirrgicos estavam sempre contaminados
com micrbios, o que causava elevados nveis de infeco e mortalidade. Naquela poca, os
cirurgies operavam frequentemente vestindo a mesma roupa com a qual saam nas ruas e sem
lavar as mos. De maneira habitual, eles enavam as agulhas que usavam para dar pontos no

122

Aula 6

Metabolismo da Vida Microscpica

paciente na gola do seu casaco. Os curativos cirrgicos eram muitas vezes feitos com o algodo
que sobrava no cho das fbricas. Foi nesse contexto que o cientista francs Louis Pasteur
demonstrou que havia organismos invisveis, os micrbios, que eram causadores de doenas.
O trabalho de Pasteur inuenciou o cirurgio ingls Joseph Lister, que aplicou a teoria
dos germes de Pasteur nos procedimentos cirrgicos. Fundou, assim, a cirurgia moderna, com
antissepsia. Para desinfetar o ambiente cirrgico, Lister passou a utilizar uma soluo de cido
fnico (fenol), a qual era pulverizada em torno da sala de operao com um pulverizador de mo.

Figura 1 Pasteur (1822-1895) e Lister (1827-1912)


Fonte: <http://www.textbookofbacteriology.net/Pasteur.jpg>; <http://www.
textbookofbacteriology.net/Lister.jpg>. Acesso em: 28 out. 2009.

Figura 2 Cirurgia no sculo XIX utilizando o pulverizador de Lister com cido carblico.
Fonte: <http://www.textbookofbacteriology.net/earlysurgery.jpg>.
Acesso em: 28 out. 2009.

As tcnicas propostas por Lister funcionaram de modo ecaz, aumentando as taxas de


sobrevivncia dos pacientes durante a cirurgia. Mas, isso no foi aceito muito facilmente, uma
vez que os microrganismos no eram vistos a olho nu. Alm disso, os cirurgies tinham que
se submeter a respirar um composto irritante, que o fenol.

Aula 6

Metabolismo da Vida Microscpica

123

Como possvel controlar


o crescimento microbiano?
O controle do crescimento microbiano necessrio em muitas situaes prticas, e
signicativos avanos na agricultura, na Medicina e na produo de alimentos tm sido feitos
atravs do estudo dessa rea da Microbiologia.

Atividade 2
O que voc entende por esterilizao?

O controle do crescimento microbiano pode ser feito por meio de tcnicas que inibem
o crescimento, matando os microrganismos ou removendo-os de um ambiente. Assim, os
agentes antimicrobianos podem ser divididos em agentes que matam os microrganismos,
ou bactericidas, e agentes que inibem o seu crescimento, ou bacteriostticos. Esse controle
geralmente envolve o uso de agentes fsicos ou qumicos. Um bactericida mata bactrias, um
fungicida mata fungos, e assim por diante.
Em Microbiologia, o termo esterilizao refere-se destruio ou eliminao de todos
os organismos viveis dentro ou sobre uma substncia a ser esterilizada. No h graus
intermedirios de esterilizao; assim, um objeto ou substncia ou est estril ou no est.
A esterilizao pode ser realizada por vrios mtodos, como veremos a seguir.

124

Aula 6

Metabolismo da Vida Microscpica

Controle de microrganismos
por meios fsicos
O calor o mtodo de esterilizao mais largamente utilizado. Para uma esterilizao
eciente, deve-se considerar o tipo de calor, e o mais importante, a temperatura utilizada para
assegurar a destruio de todos os microrganismos.


Incinerao
Queima e destruio fsica dos organismos.

Ebulio

Submisso do objeto contaminado a 100 C por 30 minutos. Elimina tudo, exceto alguns
endsporos. Para matar endsporos e, portanto, esterilizar uma soluo, um tempo muito
longo (> 6 horas) de ebulio necessrio.


Autoclavao (vapor sob presso ou panela de presso)

A autoclave o mais utilizado e mais eciente meio de esterilizao. Todas as autoclaves


operam em uma relao de tempo e temperatura. Essas duas variveis so extremamente
importantes. As temperaturas mais elevadas eliminam os microrganismos mais rapidamente.

Figura 3 Autoclave vertical


Fonte: <http://www.autoclaves-india.com/autoclaves_india/images/autoclaves_high_
pressure_4b.gif>. Acesso em: 28 out. 2009.

Aula 6

Metabolismo da Vida Microscpica

125

A temperatura padro usual e a presso empregadas na autoclave de 121 C e 01 atm


de presso durante 15 minutos. s vezes, perodos mais longos so necessrios para cargas
maiores, grandes volumes de lquidos ou materiais mais densos. A autoclave ideal para
esterilizar resduos de risco biolgico, curativos cirrgicos, vidros, diversos tipos de meios de
cultivo microbiolgicos, lquidos e muitas outras coisas. No entanto, certos itens, tais como
plsticos e alguns instrumentos mdicos (como, por exemplo, os endoscpios de bra tica)
podem no resistir autoclavagem e devem ser esterilizados com esterilizantes qumicos
ou de outra natureza. Quando as condies e o tempo adequados so empregados, nenhum
organismo vivo ir sobreviver a uma autoclave.
A autoclave uma panela de presso grande, que opera por meio de vapor sob presso
como agente esterilizante. A maior parte do poder de aquecimento do vapor vem de seu calor
latente de vaporizao. Essa a quantidade de calor necessria para converter o vapor de
gua fervente. O calor mido utilizado para matar os microrganismos porque ele causa a
desnaturao de protenas essenciais na clula microbiana.


Pasteurizao

A pasteurizao um processo que reduz a populao microbiana de um lquido, como o


leite, vinho e sucos de fruta. A denominao do processo uma homenagem a Louis Pasteur,
o primeiro a utilizar a metodologia na produo de vinho.
Durante a pasteurizao do leite, por exemplo, para ter resultados satisfatrios, o lquido
aquecido a 71C durante 15 segundos, e logo depois rapidamente resfriado. A pasteurizao
prolonga a vida til de um produto e reduz o nvel de patgenos nele presente. O processo
chamado de pasteurizao rpida.

Figura 4 Aparelho pasteurizador


Fonte: <http://www.harmomilk.com.br/imagens/pastplacas.jpg>. Acesso em: 28 out. 2009.

126

Aula 6

Metabolismo da Vida Microscpica

Esterilizao por calor seco (estufa ou forno de Pasteur)

realizada em temperaturas de 140 C a 180 C, com tempo de exposio de 60 a 120


minutos. O calor seco ou ar quente em temperatura sucientemente alta levam desnaturao
e oxidao das protenas, resultando na morte dos microrganismos. Este mtodo indicado
para esterilizar vidrarias, instrumentos de corte ou de ponta (os quais podem oxidar na presena
do vapor da autoclave) e materiais impermeveis como ceras, pomadas e leos.


Radiao eletromagntica

uma forma ecaz para esterilizar ou reduzir a carga microbiana de quase qualquer
substncia. O forno de micro-ondas, a radiao ultravioleta (UV), os raios X, os raios gama e
eltrons so utilizados nesse processo, embora cada tipo de radiao tenha um mecanismo
especco de ao. A radiao ultravioleta (UV), que no penetra slidos, til para a
desinfeco de superfcies, do ar e lquidos que no absorvem as ondas UV. Os raios gama e X,
que so mais penetrantes, so mais difceis e caros, mas tm sido utilizados na conservao
de alimentos e outros processos industriais.

Atividade 3
Sabendo que a radiao gama inativa enzimas autocatalticas, que participam do
processo de degradao natural, pesquise e descreva brevemente em que esse
tipo de radiao tem sido muito usado.

Esterilizao por ltrao

Os microrganismos podem ser removidos de meios lquidos por meio da esterilizao


por ltrao. Os ltros de membrana so compostos de acetato de celulose ou de nitrato de
celulose e so feitos de forma a conter um grande nmero de pequenos poros, que retm
os microrganismos, impedindo que eles passem atravs deles. Os tamanhos dos orifcios
podem ser controlados com preciso. A esterilizao por ltrao pode preservar molculas
biologicamente importantes que poderiam ser inativadas pelo calor.

Aula 6

Metabolismo da Vida Microscpica

127

Figura 5 Exemplos de membranas (ltros) com dimetro de 0,22 micras de porosidade para reteno de partculas
microscpicas
Fonte: <http://www.interface.co.pt/images/produtos/mf_gr.jpg>; <http://www.
interface.co.pt/images/produtos/pes_gr.jpg> <http://www.interface.co.pt/images/
produtos/durapore_gr.jpg>. Acesso em: 28 out. 2009.

Figura 6 Sistema de ltrao


Fonte: <http://www.limnotec.com.br/equip/img/novo/06.jpg>.
Acesso em: 28 out. 2009.

Controle de microrganismos
por agentes qumicos
Antimicrobianos so substncias qumicas que matam ou inibem o crescimento de
microrganismos. Agentes antimicrobianos incluem conservantes qumicos e antisspticos,
bem como drogas usadas no tratamento de doenas infecciosas de animais e plantas. Os
agentes antimicrobianos podem ser de origem natural ou sinttica e podem ter um efeito
esttico ou mortal sobre microrganismos.

128

Aula 6

Metabolismo da Vida Microscpica

Tipos de agentes antimicrobianos


Antisspticos: agentes antimicrobianos inofensivos o suciente para serem aplicados
sobre a pele e mucosas, embora no devam ser ingeridos. Por exemplo: alcois, nitrato de
prata, soluo de iodo, detergentes e outros.

Figura 7 Aplicao de lcool em gel nas mos


Fonte: <http://mdemulher.abril.uol.com.br/imagem/saude/internaslideshow/gripe-suina-maos-alcool.jpg>. Acesso em: 28 out. 2009.

Desinfetantes: agentes que matam os microrganismos, mas no necessariamente os seus


esporos, e no so seguros para serem aplicados em tecidos vivos. Servem para esterilizar
objetos como mesas, pisos e outros utenslios. Por exemplo: hipocloritos, compostos de cloro,
soda custica, sulfato, compostos de amnio quaternrio, formaldedo e compostos fenlicos.

Figura 8 Exemplos de desinfetantes


Fonte: <http://www.sanol.com.br/v4/media/imgs/marcas_proprias/familia_
comprebem.jpg>. Acesso em: 28 out. 2009.

Aula 6

Metabolismo da Vida Microscpica

129

Alguns dos principais compostos utilizados


em desinfeco e assepsia
Agente
Alcois
(70-80%)
Cloro

Iodo

Aldedos***
Metais pesados

Espectro de
ao*
Gram-positivas
Gram-negativas
BAAR**
Gram-positivas
Gram-negativas
BAAR
Gram-positivas
Gram-negativas
BAAR
Gram-positivas
Gram-negativas
BAAR
Gram-positivas
Gram-negativas

Uso

Modo de ao

Tempo de exposio

Desvantagens

Antisspticos
Desinfetantes

Desnaturao proteica
Dissoluo de lipdeos

Curto (10 -15 min)

Tratamento
da gua

Inativao enzimtica
do agente oxidante

Efeito imediato

Antisspticos
Desinfetantes

Inativao enzimtica

Efeito imediato

Desinfetantes

Desnaturao proteica
do agente alquilante

Curto (formas vegetativas)


Prolongado (esporos)

Tempo de
exposio longo

Antisspticos

Inativao enzimtica

S agem enquanto esto


em contato

No atuam sobre
BAAR e esporos

Pouco ativo
contra esporos
Odor irritante;
pouco ativo
contra esporos
Odor irritante;
pouco ativo
contra esporos

*Formas vegetativas; **Bacilos lcool-cido resistentes; ***Ativos contra esporos


Fonte: Trabulsi (1991).

Atividade 4
Ateno! Esta atividade deve ser feita em regime presencial. Dirija-se ao seu
polo de ensino para realiz-la.

Atividade prtica: como controlamos os microrganismos?


Voc j sabe que as substncias qumicas podem inuenciar o crescimento bacteriano
de trs formas: como nutrientes, favorecendo o seu crescimento, como bacteriostticos,
impedindo que as bactrias cresam, e como bactericidas, matando-as. impossvel generalizar
a ao de uma substncia qumica sobre o desenvolvimento de todos os microrganismos; at
mesmo quando trabalhamos com um s tipo de microrganismo, um nico agente qumico
pode ter diferentes efeitos, dependendo principalmente de sua concentrao.
A seguir, apresentamos alguns procedimentos prticos com objetivo de que voc verique
como essa ao ocorre. Lembre-se de observar as recomendaes sobre o trabalho em
laboratrio de Microbiologia que voc viu na Aula 2 (Trabalhando no laboratrio de Microbiologia).
130

Aula 6

Metabolismo da Vida Microscpica

Prtica: Por que lavar as mos?


Objetivo: vericar a ao de antisspticos sobre a microbiota das mos.
Procedimentos

1)

Pegue uma placa de Petri contendo gar e divida em 4 partes iguais. Utilize, para isso,
uma caneta de retroprojetor, fazendo a diviso na parte de baixo da placa.

2)

Identique cada quadrante com os termos: Controle (C), Mo Suja (MS), Detergente (Det),
lcool 70% (Al). Prepare a placa seguindo o esquema abaixo.

MS

Det

Al

3)

No quadrante identicado como Mo Suja, voc deve encostar o dedo (sem lavar) por
alguns segundos, fazendo leve presso.

4)

Em seguida, lave as mos com detergente, seque-as ao ar livre e encoste o mesmo dedo
no quadrante do gar identicado como Detergente por alguns segundos.

5)

Agora, lave as mos com lcool, seque-as e encoste o mesmo dedo no quadrante do gar
identicado como lcool por alguns segundos.

6)

Incube a placa em estufa a 35-37C ou deixe-a em temperatura ambiente por 24 horas.

Observao: nada deve encostar no quadrante identicado como Controle.

Aps, no mnimo, 24 horas, faa a leitura dos resultados encontrados na placa, de acordo
com o que se pede a seguir:

Aula 6

Metabolismo da Vida Microscpica

131

Faa uma representao esquemtica dos resultados obtidos na avaliao da


microbiota das mos.

Crescimento Bacteriano

++

+++

++++

Controle
Mo Suja

Placa I

Detergente
lcool 70%

sem crescimento microbiano; + crescimento microbiano. Estabelea um critrio de quantidade de colnias para atribuir a simbologia +, ++, +++ ou ++++
ao crescimento.

Para compreender o que aconteceu, responda ao que se pede.

a)

Qual a diferena entre o controle e os outros campos da placa? Por que isso
ocorre?

b)

Que concluso geral podemos obter desse experimento?

Ateno! Quem trabalha com microrganismos tem que estar sempre atento:
deve-se evitar a contaminao do material com contaminantes, assim como
evitar espalhar microrganismos por todo o laboratrio.

132

Aula 6

Metabolismo da Vida Microscpica

Os antibiticos
O homem sempre procurou descobrir formas de curar leses, febres e as dores. Nessa
perspectiva, os antibiticos vieram revolucionar a capacidade de curar doenas de natureza
microbiana. A partir da descoberta da penicilina a base dos antibiticos pelo bacteriologista
escocs Alexander Fleming, gerou-se uma revoluo na Medicina do sculo XX. Fleming
descobriu que o fungo Penicillium produzia substncias capazes de destruir as bactrias que
cavam sua volta, e deu-lhe o nome de penicilina.
Desse perodo em diante, esses fungos passaram a ser cultivados em laboratrios para
a produo em escala industrial de antibiticos que atacavam microrganismos que o sistema
imunolgico humano no conseguia eliminar sozinho. Graas a esses medicamentos, doenas
infecciosas como a pneumonia, a slis, a gonorreia e a tuberculose puderam ser tratadas,
deixando de ser fatais. Durante a Segunda Guerra Mundial, a penicilina salvou a vida de milhes
de soldados feridos nos campos de batalha, permitindo tambm que a expectativa de vida da
poca aumentasse.

Figura 9 Alexandre Fleming


Fonte: <http://www.cienciapt.net/noticias/imagens/novas/
Fleming.jpg>. Acesso em: 28 out. 2009.

O que um antibitico, anal?


Os antibiticos so substncias desenvolvidas a partir de fungos e bactrias ou produzidas
em laboratrios farmacuticos com a nalidade de combater microrganismos causadores de
infeces no organismo.
Um termo mais adequado antimicrobiano, que abrange tanto os antibiticos
sintetizados naturalmente como tambm as substncias sintetizadas em laboratrios.

Aula 6

Metabolismo da Vida Microscpica

133

Como os antibiticos
agem para matar as bactrias?
O mecanismo de ao dos antibiticos pode se dar de diversas formas:

1)

inibindo a sntese de parede celular;

2)

alterando as funes da membrana celular;

3)

inibindo a sntese proteica;

4)

inibindo a sntese de cidos nucleicos;

5)

alterando o metabolismo bacteriano.

Replicao do DNA

Sntese da parede celular

Sntese de RNA
ADN
ARNm
Ribosomas
50
30

50
30

50
30

Antimetablitos

Sntese de protenas
(ribossomo 50S )
Sntese de protenas
(ribossomo 30S )

Figura 10 Locais de ao dos antimicrobianos


Fonte: adaptado de Murray (2006).

Apesar de sua grande importncia na cura de doenas graves, o uso indiscriminado


de antimicrobianos, principalmente sem orientao e acompanhamento mdico, pode ser
prejudicial sade. Alm disso, favorece o desenvolvimento de microrganismos resistentes
a determinados antibiticos.

134

Aula 6

Metabolismo da Vida Microscpica

Resistncia bacteriana aos antibiticos


Os antibiticos betalactmicos pertencem classe de antimicrobianos que possuem em
comum a presena de um anel betalactmico na sua estrutura qumica (Figura 11).

H
N

R
O

S
N

OH

Figura 11 Anel betalactmico

As bactrias adquirem resistncia aos antibiticos betalactmicos atravs de trs


mecanismos gerais:

1)

evitando a interao entre o antibitico e a molcula de PBP;

2)

modicando a unio do antibitico com a PBP;

3)

PBP
Protena que se liga
penicilina.

hidrolizando o antibitico por meio de betalactamases.

O primeiro mecanismo de resistncia s ocorre em bactrias Gram negativas


(especialmente no gnero Pseudomonas), devido presena da membrana externa que recobre
o peptidoglicano. A entrada dos antibiticos betalactmicos no interior dos bacilos Gram
negativos requer que eles atravessem os poros situados na membrana externa. As modicaes
nas protenas (porinas) que formam a parede dos poros podem modicar o tamanho desses
canais e impedir a entrada do antibitico.

Aula 6

Metabolismo da Vida Microscpica

135

Atividade 5
Pesquise os dois outros tipos de resistncia aos antimicrobianos e descreva-os
brevemente no espao a seguir.

O problema da resistncia bacteriana s drogas


Se um agente patognico capaz de desenvolver ou adquirir resistncia a um determinado
antibitico, essa substncia passa a ser intil no tratamento de doenas infecciosas causadas
por esse patgeno. Nesses casos, preciso encontrar novos e diferentes antibiticos para serem
utilizados no tratamento, em lugar do anterior. Foi assim que as penicilinas naturais tornaramse inteis contra estalococos (causador da furunculose) e tiveram que ser substitudas por
outros antibiticos. A tetraciclina, que j foi considerada uma droga maravilhosa, foi to
mal utilizada durante dcadas que se tornou intil para muitas infeces que ela j combateu.
O problema no consiste apenas em encontrar novos antibiticos para combater doenas
devido ao surgimento de bactrias resistentes. H tambm uma necessidade paralela de
se encontrarem novos antibiticos para combater doenas novas, as chamadas doenas
emergentes. Nas ltimas duas dcadas, muitas novas doenas bacterianas foram descobertas.
Isso aumenta muito a nossa responsabilidade no uso adequado de antimicrobianos.

136

Aula 6

Metabolismo da Vida Microscpica

Resumo
Nesta aula, vimos que o controle do crescimento de microrganismos possvel
pela ao de agentes fsicos e qumicos, que possuem propriedades de matar
a clula microbiana ou de impedir a sua reproduo. Voc aprendeu tambm
que, por outro lado, as bactrias podem ser resistentes a esses agentes ao
desenvolverem diversos mecanismos que impedem a ao de antimicrobianos.

Autoavaliao
1

Qual a diferena entre um antissptico, um desinfetante e um antibitico?

Qual a diferena de um antibitico bacteriosttico e um antibitico bactericida?

Faa uma tabela apresentando os alvos sobre os quais os antimicrobianos agem


nas bactrias.

Descreva os mecanismos bsicos de resistncia bacteriana s drogas.

Referncias
CONTROL of microbial growth. Disponvel em: <http://textbookofbacteriology.net/kt_toc.html>.
Acesso em: 28 out. 2009.
MADIGAN, M. T.; MARTINKO, J.; PARKER, J. Microbiologia de Brock. 10. ed. So Paulo:
Prentice-Hall, 2004.
MURRAY, Patrick R.; PFALLER, Michael A.; ROSENTHAL, Ken S. Microbiologia mdica. 5. ed.
Rio de Janeiro: Ed. Elsevier, 2006.
SERRA, Henrique A. A histria dos antibiticos. Disponvel em: <http://www.medstudents.
com.br/historia/eming/eming.htm>. Acesso em: 28 out. 2009.
TORTORA, G. J.; FUNK, B. R.; CASE, C. L. Microbiologia. 8. ed. Porto Alegre: ArtMed, 2005.

Aula 6

Metabolismo da Vida Microscpica

137

Apndice A
Denies importantes
Esterilizao: destruio ou remoo de todas as formas de vida de um objeto ou
habitat. Processo que visa destruio total de todas as formas de vida (inclusive
esporos), de um material ou ambiente, atravs de mtodos fsicos ou qumicos.
Desinfeco: processo que promove a inibio, morte ou remoo de vrios microrganismos
patognicos e saprtas, sem eliminar todas as formas de vida. Consiste na destruio,
remoo ou reduo dos microrganismos presentes num material inanimado. Visa eliminar a
potencialidade infecciosa do objeto, superfcie ou local.
Sanitizao: processo que leva reduo dos microrganismos, em nveis seguros, de acordo
com os padres de sade pblica (elimina 99,9% das formas vegetativas).
Antissptico: produto que evita a infeco em tecidos, seja inibindo ou matando os
microrganismos. Como so aplicados em tecidos vivos, os antisspticos so, geralmente,
menos txicos que os desinfetantes (agentes aplicadas em materiais inanimados).
Germicida: mata microrganismos, mas no endsporos.
Assepsia: Procedimento que visa evitar o retorno da contaminao a um objeto, superfcie
ou local.
Antissepsia: desinfeco de tecidos vivos, como pele e mucosas.
Bactericida: agente que mata as bactrias. Similarmente, temos fungicida (fungos), viricida
(vrus) e esporocida (esporos).
Bacteriosttico: agente que inibe a multiplicao bacteriana.

138

Aula 6

Metabolismo da Vida Microscpica

Anotaes

Aula 6

Metabolismo da Vida Microscpica

139

Anotaes

140

Aula 6

Metabolismo da Vida Microscpica

A gentica dos microrganismos

Aula

Apresentao
Voc j aprendeu nas aulas anteriores que os microrganismos so muito versteis
metabolicamente. Eles conseguem se adaptar a ambientes diversos devido a sua capacidade
de utilizar compostos muito variados como fonte de energia para o seu desenvolvimento.
Nesta aula, voc ir compreender como a estrutura do cromossomo bacteriano
e quais os mecanismos bsicos que permitem fazer com que as informaes genticas
sejam expressas pelos organismos. Tambm iremos discutir como podem se apresentar
outros modos de informao gentica nos microrganismos, alm daquelas contidas no
prprio cromossomo.

Objetivos
1

Identicar as propriedades genticas de organismos


procariticos.

Reconhecer a estrutura do cromossomo bacteriano.

Compreender as etapas de replicao cromossmica.

Relacionar plasmdeos e transposons s suas funes na


clula bacteriana.

Aula 7

Metabolismo da Vida Microscpica

143

Por que estudar a


gentica dos microrganismos?

m algumas disciplinas j vistas, como Biodiversidade e Histria da Biologia, foram


introduzidos alguns aspectos da gentica, notadamente no que se refere a organismos
eucariticos. Esse tema ser retomado em outros momentos, de forma mais
sistematizada, mas voc deve se lembrar que os genomas desses organismos tm mltiplos
cromossomos e os descendentes formados possuem diferenas uns dos outros.
O que ocorre em procariotos bem diferente disso, como veremos nesta aula. Bactrias
e vrus podem produzir uma gerao de indivduos em questo de minutos, e todos os
organismos de uma mesma gerao so, em princpio, geneticamente idnticos, constituindo
populaes de clones. Isso os torna muito interessantes para os pesquisadores que tentam
compreender processos genticos, pois, por serem mais simples, eles crescem em grande
nmero e de maneira controlada em laboratrio, facilitando o seu uso em estudos que podem
ter vrias aplicaes na compreenso do comportamento gentico de outros organismos mais
difceis de serem estudados, por exemplo.

144

Aula 7

Metabolismo da Vida Microscpica

Onde esto as informaes


genticas nas bactrias e nos vrus?
A organizao de uma clula procaritica tpica revela determinadas caractersticas,
como voc j comparou na Aula 1 (Comparando clulas procariticas e eucariticas).
Observe novamente uma clula eucaritica e outra procaritica e faa a reexo que se
pede em seguida, na Atividade 1.

Figura 1 Clula eucaritica


Fonte: <http://calazans.ccems.pt/cn/images/celulanimal3.jpg>. Acesso em: 6 out. 2009.

Figura 2 Clula procaritica


Fonte: <http://curlygirl.no.sapo.pt/imagens/procarionte.jpg>. Acesso em: 6 out. 2009.

Aula 7

Metabolismo da Vida Microscpica

145

Atividade 1
Estabelea uma comparao entre as duas clulas do ponto de vista da
organizao do material gentico.

Voc deve ter observado que a clula procaritica no dispe de uma membrana tpica,
ao contrrio de clula eucaritica. Nesta, o material nuclear encontra-se envolvido por uma
membrana que se conecta com o citoplasma.
Nos vrus, que no so clulas, mas so considerados entidades biolgicas exatamente
por possurem material gentico, dentre outras caractersticas, o genoma est contido no
interior de uma capa de protenas chamada capsdeo.

146

Aula 7

Metabolismo da Vida Microscpica

Figura 3 HIV: o vrus que causa a AIDS

Figura 4 Bacterifago: um vrus que ataca bactria

As bactrias tambm podem conter material gentico em outras estruturas que no


o cromossomo. Algumas bactrias possuem molculas de DNA de ta dupla menores
que o cromossomo e que podem se replicar independente dele. Essas molculas so
chamadasplasmdeos.

Figura 5 DNA bacteriano (cromossomo e plasmdeo)


Fonte: <http://bio.leo.sites.uol.com.br/bacteriologia.htm>. Acesso em: 24 abr. 2012.

Aula 7

Metabolismo da Vida Microscpica

147

Os plasmdeos so elementos genticos que se replicam independentemente do


cromossomo da clula e podem ser de vrios tipos, de acordo com a funo que possam
desempenhar na bactria. A maioria dos plasmdeos conhecidos corresponde a molculas
de DNA de ta dupla, e em sua maioria so circulares.
Principais plasmdeos:


plasmdeos F (conjugao);

plasmdeos R (resistncia);

plasmdeos de virulncia;

plasmdeos colicinognicos;

plasmdeos integrados epissomo.

Atividade 2
Pesquise na internet ou em livros disponveis nos polos (se for o caso) sobre a funo
dos plasmdeos R e dos plasmdeos de virulncia.
Plasmdeos R
Funo:

148

Aula 7

Metabolismo da Vida Microscpica

Plasmdeos de virulncia
Funo:

Como so os cromossomos
dos microrganismos?
Se voc no percebeu, na Figura 5, a maior parte da informao gentica das bactrias
est contida em um cromossomo nico e circular, o qual consiste de DNA e protenas. Essa
informao duplicada e repassada igualmente entre as duas clulas lhas, quando a clulame se divide. Isso s possvel porque o DNA uma molcula autorreplicvel e pronta para
fazer uma cpia exata de si mesma antes de ocorrer a diviso celular.
Nos vrus, o genoma muito diversicado e pode conter DNA ou RNA, como voc pode
observar nas Figuras 6 e 7 a seguir.

Parvovirus

Hepadnavirus

Papovavirus

Poxvirus
Adenovirus

Herpesvirus
Iridovirus

100 nm

Figura 6 Exemplos de vrus de DNA

Togavirus
Rhabdovirus
Picornavirus
Orthomyxovirus
Bunyavirus
Coronavirus
Reovirus
100 nm
Arenavirus

Retrovirus

Paramyxovirus

Figura 7 Exemplos de vrus de RNA

Aula 7

Metabolismo da Vida Microscpica

149

As etapas do uxo
da informao gentica
Os processos de replicao, transcrio e traduo ocorrem em todos os organismos,
mas existem diferenas entre o que ocorre em procariotos e eucariotos.
O uxo da informao gentica pode ser caracterizado em trs processos moleculares,
descritos a seguir.

a)

Replicao: neste processo, o DNA bacteriano duplicado, originando duas


estruturas de dupla hlice.

b)

Transcrio: refere-se transferncia de informao do DNA para o RNA,


pois o DNA no participa diretamente da sntese proteica.

c)

Traduo: a determinao especca de uma sequncia de aminocidos em


uma determinada protena, a partir de uma sequncia de bases.

Essas trs etapas de transferncia da informao gentica (Figura 8) ocorrem igualmente


em todas as clulas. Em alguns vrus, podem ocorrer diferenas, como a replicao do RNA
(o RNA servindo de molde para ele mesmo) e a transcrio reversa, quando uma sequncia
de RNA serve de molde para o DNA, o inverso do que ocorre nas clulas.

150

Aula 7

Metabolismo da Vida Microscpica

transcrio

(a)

DNA

traduo
RNA mensageiro

Protena

replicao

(b)

fitas novas
DNA de fita dupla

DNA

(c)
mRNA

tRNA

rRNA

(d)
Aminocido (ativado)

Ribossomo

NH2

Figura 8 O uxo da informao gentica


Fonte: <http://openlearn.open.ac.uk/le.php/2645/S377_1_002i.jpg>. Acesso em: 6 out. 2009.

Voc estudar esses processos mais detalhadamente em outras disciplinas, mas


importante que voc relembre qual o objetivo das informaes genticas contidas no DNA: a
produo de protenas especcas ou a produo de uma sequncia de cido nucleico.
Para compreendermos como as bactrias se reproduzem, preciso tambm saber
algumas caractersticas gerais da replicao do DNA. A estrutura do DNA (Figuras 9 e 10) tem
um papel fundamental no processo de replicao. Nesse sentido, alguns importantes aspectos
devem ser lembrados por voc, como:


as duas bandas de DNA so complementares uma outra;

as quatro bases que formam o DNA so adenina, timina, guanina e citosina;

a base adenina combina-se com a base timina e a guanina, com a citosina;

as duas bandas de DNA esto ligadas por pontes de hidrognio;

as duas bandas de DNA so antiparalelas uma outra, ou seja, uma banda corre na
direo 5 - 3 e a outra corre na direo 3- 5;

a sntese de DNA semiconservativa, ou seja, cada nova molcula conserva uma das
cadeias antigas.
Aula 7

Metabolismo da Vida Microscpica

151

Figura 9 Estrutura em dupla hlice do DNA


Fonte: <http://legion.geleia.net/AP/dna.gif>. Acesso em: 6 out. 2009.

Figura 10 Estrutura molecular do DNA (a cadeia dupla enrolada em si mesma formando uma hlice)
Fonte: <http://4.bp.blogspot.com/_R-rTvAicCNQ/SeLIakiR-DI/AAAAAAAABso/3ATUbN92iGs/s400/
como_funciona_o_dna_06.jpg>. Acesso em: 6 out. 2009.

152

Aula 7

Metabolismo da Vida Microscpica

Voc j sabe que a replicao, a transcrio e a traduo ocorrem em todos os organismos


celulares. Mas, h algumas diferenas em como elas ocorrem em procariotos e eucariotos.
Isso se deve, em parte, ao fato de os organismos eucariotos possurem uma membrana nuclear
envolvendo o material gentico, fato que no acontece entre os procariotos, cujo DNA est
disperso no citoplasma. Nos eucariotos, alm de possurem uma membrana envolvendo os
cromossomos, os ribossomos esto localizados no citoplasma, o que provoca uma separao
entre os locais onde ocorrem a transcrio e a traduo.

Atividade 3
Analise a gura a seguir e explique por que as etapas do uxo gentico em uma clula
eucaritica (como no caso da gura) so diferentes em relao a uma clula procaritica, em
termos espaciais.

Figura 11 Etapas da replicao do DNA em uma clula eucaritica

Aula 7

Metabolismo da Vida Microscpica

153

Viso geral da
replicao do DNA bacteriano
Como voc j sabe, a diviso celular nas bactrias consiste em um processo simples
de diviso chamado sso binria, na qual as clulas se dividem em duas, como revela a
guraseguinte.

Figura 12 Fisso binria


Fonte: Raven (2001, p. 208).

A replicao comea no cromossomo bacteriano em uma sequncia especca de


nucleotdeos chamada origem de replicao, onde um grupo de mais de 20 protenas
diferentes d incio ao processo de copiar o DNA. Nesse processo, uma clula divide-se para
gerar duas clulas idnticas. Lembre-se de que o cromossomo bacteriano circular, o que
diferencia o modo como ele se replica, conforme voc pode ver nas Figuras 13 e 14.

Origem da replicao

Figura 13 Replicao do DNA bacteriano


Fonte: Raven (2001, p. 208).

154

Aula 7

Metabolismo da Vida Microscpica

Figura 14 Esquema da replicao do DNA circular bacteriano

DNA que no ca quieto:


os elementos transponveis
Embora possamos considerar que a posio dos genes nos seres vivos relativamente
estvel, o modo como os genes se arranjam em um cromossomo no necessariamente
xo, pois, em certas condies, alguns genes so capazes de se mover. Esse processo de
mobilizao de genes de um local para outro, um evento considerado raro, denominado
transposio. Tambm preciso considerar que nem todo gene capaz de realizar esse
fenmeno.
Podemos considerar dois tipos de elementos transponveis: os transposons e as
sequncias de insero. Ambos possuem a capacidade de sintetizar uma enzima chamada
transponase, a qual permite a ocorrncia da transposio.
As sequncias de insero so os elementos transponveis mais simples e no carregam
uma informao gentica determinada a no ser aquela necessria para sua prpria insero
em um local do genoma.
Os transposons so segmentos de DNA maiores que as sequncias de insero e carreiam
outros genes, alguns dos quais conferem propriedades importantes ao organismo. So capazes
de se mover do DNA cromossomial para o plasmidial etc. Contm genes de resistncia a
antimicrobianos.

Aula 7

Metabolismo da Vida Microscpica

155

Sequncias repetidas

(a)

ACGTACGTACGT

TGCATGCATGCA

TGCATGCATGCA

ACGTACGTACGT

DNA hospedeiro

Stio alvo
CATGC
GTACG

Local de abertura do stio alvo

(b)

CATGC
GTACG

Insero do transposon

(c)
ACGTACGTACGT
GTACG TGCATGCATGCA

TGCATGCATGCA CATGC
ACGTACGTACGT

CATGC ACGTACGTACGT

TGCATGCATGCA CATGC

GTACG TGCATGCATGCA

ACGTACGTACGT GTACG

Figura 15 Modo como se organizam os transposons

Os microrganismos e gentica
O uso cada vez mais intenso de microrganismos na gentica deu um novo impulso
cincia da hereditariedade. Isso foi um marco decisivo para o desenvolvimento dessa rea,
porque os microrganismos possuem excelentes qualidades para os estudos genticos.
Eles apresentam, em geral, um ciclo de desenvolvimento rpido, facilitando assim o estudo
da transmisso de caractersticas hereditrias em um curto perodo de tempo. Como so
microscpicos, podem ser cultivados em grandes densidades em um espao pequeno. Sendo
organismos morfologicamente mais simples, mais fcil, por meio deles, compreender os
mecanismos de herana das caractersticas genticas.
Grande parte dos microrganismos apresenta apenas um cromossomo ou um nmero
reduzido de cromossomos, fato que tambm os torna mais fceis de serem estudados. Por
essas e outras razes, como a utilizao dos microrganismos na indstria de alimentos e de
medicamentos, entre outros usos, a compreenso da gentica de microrganismos torna-se
necessria, como veremos nas aulas seguintes.

156

Aula 7

Metabolismo da Vida Microscpica

Resumo
Nesta aula, voc estudou onde se encontram as informaes genticas dos
microrganismos. Foram revistas as estruturas do DNA bacteriano, que nico
e circular, o que leva a um modo diferenciado de replicao. Voc aprendeu
tambm que pode haver informaes genticas em forma de plasmdeos e que
h sequncias cromossmicas que mudam de lugar, os chamados transposons.

Autoavaliao
1
2
3
4
5

Estabelea as diferenas entre o cromossomo de uma clula eucaritica e procaritica,


descrevendo a organizao do cromossomo bacteriano.

Quais so as etapas do uxo da informao gentica?

Brevemente, descreva a estrutura geral do DNA.

Dena plasmdeo e transposon, de um modo geral, e depois faa a diferena


entreeles.

Explique a importncia dos plasmdeos para os microrganismos.

Referncias
MADIGAN, M. T. Microbiologia de Brock. So Paulo: Pearson Ed. Do Brasil, 2004. 589 p.
PELCZAR, M. J. et al. Microbiologia: conceitos e aplicaes. So Paulo: Makron Books, 1996.
RAVEN, Johnson.Biology. 6th ed. New York: Mc Graw-Hill, 2001.
TORTORA, G. J.; FUNKE, B. R.; CASE, C. I. Microbiologia. 8. ed. Porto Alegre: Editora
Artmed,2005.
TRABULSI, L. R.; ALTERTHUM, F. Microbiologia. 4. ed. So Paulo: Editora Atheneu, 2004.

Aula 7

Metabolismo da Vida Microscpica

157

Anotaes

158

Aula 7

Metabolismo da Vida Microscpica

As bactrias se modicam

Aula

Apresentao

s bactrias se reproduzem o tempo inteiro, o que faz com que variaes genticas se
espalhem rapidamente numa populao. Existem dois processos gerais que originam
variaes nos microrganismos: a mutao e a recombinao gentica. Nesta aula,
voc compreender como ocorrem esses processos e como, a partir deles, as modicaes
acontecem, mais especicamente nas bactrias. Tambm estudaremos como os vrus podem
contribuir para as alteraes genticas nos genomas bacterianos.

Objetivos
1

Conhecer os processos de recombinao gentica que


ocorrem nos microrganismos.

Compreender a funo das mutaes para a variao


gnica nos microrganismos.

Aula 8

Metabolismo da Vida Microscpica

161

Bactrias que se misturam:


sexo bacteriano?

M
Inspito
Que no recebe com
hospitalidade. Diz-se do
lugar onde no se pratica
a hospitalidade. Que no
agasalha, ou no protege;
que no serve para ser
habitado. Fonte: dicionrio
Michaelis.

uitas bactrias trocam material gentico entre si. Essa troca de DNA entre clulas
bacterianas permite o intercmbio de genes e, consequentemente, de certas
caractersticas entre elas, o que leva ao aparecimento de cepas bacterianas antes
no existentes. Essa transferncia de genes pode ser vantajosa para a bactria receptora,
especialmente quando o DNA codica mecanismos de resistncia a antibiticos ou se o
gene novo permitir que a bactria faa uso de um substrato antes no utilizado para sua
sobrevivncia em um ambiente inspito. O material gentico transferido pode se integrar
ao cromossomo da bactria receptora ou manter-se de forma estvel, como na forma de um
elemento extracromossmico, como um plasmdeo, que voc j conheceu na aula anterior.
Pode ainda ser um material gentico advindo de um vrus bacteriano (bacterifago) e ser
transmitido s clulas lhas, como veremos nesta aula.

Atividade 1

Virulncia
Capacidade de um
vrus ou bactria de
se multiplicar dentro
de um organismo,
provocando doena.
Fonte: dicionrio
Houaiss da lngua
portuguesa.

Relembre a Aula 7 (A gentica dos microrganismos) e dena o que um plasmdeo.

Os plasmdeos contm informaes genticas as quais podem proporcionar diversas


vantagens seletivas s bactrias que os carregam. Como um exemplo, podemos citar que os
plasmdeos podem conferir um alto grau de resistncia a antibiticos, codicar a produo de
toxinas que do virulncia s bactrias ou podem garantir a metabolizao de um substrato
que antes no podia ser utilizado pela bactria que o recebe.
Os grandes plasmdeos, com o fator de fertilidade F de Escherichia coli ou o fator de
transferncia de resistncia, podem garantir sua prpria transferncia de uma clula para
outra por meio de um processo chamado conjugao, o qual veremos mais adiante. Esses

162

Aula 8

Metabolismo da Vida Microscpica

plasmdeos conjugativos codicam todos os fatores necessrios para sua prpria transferncia.
Alm disso, outros plasmdeos podem ser transferidos de uma clula bacteriana a outra por
meio de outros mecanismos de transferncia, como veremos.

Atividade 2
1

Relembre a Aula 7, desenhe e descreva a estrutura do DNA.

Explique, do seu modo, o signicado das palavras mutao e conjugao.

Mutao

Conjugao

Voc acha que esses dois processos tm alguma importncia para os seres vivos?
Por qu?

Aula 8

Metabolismo da Vida Microscpica

163

Os microrganismos
sofrem modicaes
J vimos que possvel aos microrganismos, especialmente s bactrias, sofrer
modicaes por meio da transferncia de genes entre elas. O modo como isso pode acontecer
o que estudaremos agora.
As variaes bacterianas podem ser:
Fenotpicas: quando resultam das adaptaes das bactrias ao ambiente. So reversveis, no
se relacionando com alteraes genticas. No so, portanto, transmissveis.
Essas variaes so de carter adaptativo, decorrentes de uma modicao no
meio e podem ser morfolgicas ou siolgicas.
Por exemplo: Serratia marcescens (37 C sem pigmentao 25 C vermelhas)
Genotpicas: alteraes na sequncia de nucleotdeos, levando a uma modicao gentica.
Assim, so transmitidas aos descendentes e irreversveis.
As variaes genotpicas podem ocorrer por recombinao ou por mutao.

Recombinao gentica: os mecanismos de


transferncia de genes entre clulas diferentes
So processos que produzem um novo gentipo por meio de transferncia de material
gentico de um cromossomo para outro, conhecidos como:

164

Aula 8

1)

Transformao

2)

Conjugao

3)

Transduo

Metabolismo da Vida Microscpica

Transformao: genes livres


podem ser aprisionados por bactrias
Processo em que clulas receptoras adquirem genes de molculas de DNA livres no
meio. A partir do descobrimento da transformao que foi demonstrado formalmente que o
DNA era a molcula envolvida na hereditariedade (veja os experimentos de Grifth, 1928, na
disciplina Histria da Biologia).
A transformao se d a partir da incorporao de um fragmento de DNA do meio por uma
clula receptora. A maior parte das espcies bacterianas capaz de realizar recombinaes, mas
apenas poucas espcies conseguem a habilidade necessria de pegar o DNA livre de maneira
eciente. Isso porque o DNA s consegue penetrar algumas das clulas de uma populao em
crescimento, aquelas que estejam em um estado de competncia. Entretanto, muitas espcies
podem se tornar competentes ao serem submetidas a um tratamento qumico apropriado.

Estado de
competncia
Aquele estado em
que a bactria deve
apresentar stios de
superfcie para a ligao
com o DNA da clula
doadora e apresentar
a membrana em uma
condio que permita a
passagem desse DNA.

Molculas de DNA livres


Clula bacteriana

Cromossomo

Figura 1 Transformao bacteriana


Fonte: <http://www.nehmi-ip.com.br/imagens_servicos/bio_6_p.gif>.
Acesso em: 14 out. 2009.

Voc sabia que a competncia bacteriana para a transformao uma


caracterstica inerente a certas linhagens e que pode envolver o mecanismo de
quorum sensing, uma espcie de comunicao entre as bactrias?

Aula 8

Metabolismo da Vida Microscpica

165

Atividade 3
Leia o texto da revista Cincia Hoje sobre quorum sensing <http://www.unb.br/ib/
cel/microbiologia/artigos/qs.pdf> e descreva resumidamente o que voc entendeu
sobre esse processo. O artigo tambm estar disponvel na pgina da disciplina.

A competncia pode ser obtida articialmente, em laboratrio


Voc j sabe que apenas certas linhagens de bactrias possuem competncia para
captar uma molcula de DNA do meio. So exemplos de gneros facilmente transformveis
Acinetobacter, Azotobcter, Bacillus, Streptococcus, Haemophilus, Neisseria e Thermus.
A grande maioria das espcies no possui as caractersticas necessrias para sofrer
transformao, em condies naturais. Por isso, em laboratrio, procurou-se desenvolver
esse estado de competncia nas bactrias. Para a engenharia gentica, foi muito importante
a induo da competncia da espcie Escherichia coli, em laboratrio, pois ela muito
utilizada em experimentos que envolvem transferncias genticas induzidas. A maneira mais
eciente, atualmente, de promover a competncia bacteriana articialmente chamada de
eletroporao (veja a Figura 2).

166

Aula 8

Metabolismo da Vida Microscpica

DNA de
fita dupla
Parede
celular

Membrana
citoplasmtica

DNA integrado

Tratamento com
corrente eltrica

Clula receptora

Fragmentos do DNA
da clula doadora

Clula transformada

Figura 2 Estado de competncia (articial por eletroporao).

Atividade 4
1
2

Pesquise em livros ou em sites conveis (veja indicaes de leitura


ao nal da aula) e explique o processo de eletroporao.

Qual a importncia desse processo para a engenharia gentica?

Aula 8

Metabolismo da Vida Microscpica

167

Conjugao: contato clula a clula para transferir genes


Um outro processo que permite a transferncia de genes de uma bactria para outra a
conjugao. Esse um processo de recombinao gentica atravs do qual o DNA plasmidial
ou cromossmico transferido de uma bactria doadora para uma receptora atravs de contato
fsico direto entre as duas clulas. Esse processo codicado por um plasmdeo, isto , um
plasmdeo conjugativo utiliza esse mecanismo para transferir uma cpia de seu DNA a um novo
hospedeiro. Nesse processo, elementos genticos como pedaos do DNA cromossmico ou
outros plasmdeos podem ser transferidos de uma bactria para outra.

De modo geral, consideramos que a conjugao pode ocorrer em bactrias Gram positivas
e Gram negativas (reveja a Aula 1, Comparando clulas procariticas e clulas eucariticas)
por diferentes mecanismos:

Plasmdeos
Os plasmdeos que
tm a capacidade
de se integrar ao
cromossomo da clula
so chamados de
epissomos.

168

Aula 8

Gram negativas - atravs do pili sexual

Gram positivas - atravs do contato clula a clula

Quando as bactrias fazem conjugao, o DNA transferido de uma clula doadora


para uma clula receptora sob o controle de um conjunto de genes que garantem clula
doadora sua capacidade de transferncia. Esses genes esto frequentemente presentes em
um plasmdeo. A recombinao mediada por plasmdeo que acontece em E. coli, por exemplo,
geralmente resulta da presena de um plasmdeo chamado de fator F, ou fator de fertilidade.
A conjugao comea com o contato fsico entre uma clula doadora e uma clula
receptora. Uma projeo tubular da clula doadora, conhecida por pilus sexual, forma uma
ponte entre a clula doadora e a receptora. Atravs dessa passagem, uma cpia do DNA se
desloca da doadora para a receptora. Na etapa nal da recombinao, se a clula doadora
continha um plasmdeo integrado ao seu DNA, um segmento dele pode acabar sendo
transferido para a clula destinatria. Se o plasmdeo doado era livre, ou seja, no incorporado
ao DNA bacteriano da clula doadora, ento, somente o DNA plasmidial transferido e passa
a compor o arsenal gentico da clula receptora.

Metabolismo da Vida Microscpica

Figura 3 Ligao clula a clula na conjugao bacteriana


Fonte: <http://www.ucm.es/info/genetica/grupod/Recoproc/CONJU1.BMP>.
Acesso em: 14 out. 2009.

O pilus ajuda a conjugao


Durante a conjugao de bactrias, o pilus sexual emerge da bactria doadora e se projeta
em direo da bactria receptora, formando uma ponte de acasalamento, que estabelece um
contato direto entre os citoplasmas das duas bactrias atravs de um poro controlado. Nem
todas as bactrias tm a capacidade de criar o pilus sexual.

Plasmdeo

Pilus sexual

Tubo de conjugao (pilus sexual) se


forma entre a clula doadora e a
receptora. Uma enzima corta o plasmdeo

O DNA plasmidial inicia a replicao.


A fita de DNA livre comea a se deslocar
atravs do tubo

Na clula receptora, a fita de DNA


comea a ser complementada

Ao fim do processo, os plasmdeos esto


completos em cada uma das clulas

Figura 4 Transferncia de plasmdeo por conjugao


Fonte: <http://trc.ucdavis.edu/biosci10v/bis10v/week7/20f/Slide4.gif>. Acesso em: 7 out. 2009.

Aula 8

Metabolismo da Vida Microscpica

169

Apesar do nome, o pilus sexual no utilizado para a reproduo sexual, e no


pode ser equiparado a um pnis, embora tais comparaes sejam frequentemente
usadas para facilitar a compreenso.

Fonte: <http://1.bp.blogspot.com/_iW5f4BaDqvw/SOpbR1v9yKI/AAAAAAAAAC8/iUj6iNPrtHk/s400/
conjuga%C3%A7%C3%A3o+bacteriana+08.jpg>. Acesso em: 14 out. 2009.

Atividade 5
Por que no podemos dizer que a conjugao bacteriana um processo de
reproduo sexuada?

170

Aula 8

Metabolismo da Vida Microscpica

Os vrus se misturam com as bactrias:


o mecanismo da transduo
O terceiro tipo importante de recombinao bacteriana transduo. Nesse processo,
vrus bacterianos (tambm conhecidos como bacterifagos) transferem fragmentos de DNA
de uma bactria (a doadora) para outra bactria (a receptora).
Os ciclos de desenvolvimento de vrus bacterianos podem ser divididos em duas categorias:
o ltico e o lisognico. No ciclo ltico, o cido nucleico do fago entra em uma clula e se replica
repetidamente. A bactria morta, ao nal do processo, e centenas de fagos so liberados.
No ciclo lisognico, entretanto, no h partculas virais formadas. A bactria sobrevive, e
uma molcula de DNA do fago transmitida a cada clula lha bacteriana. Na maioria dos casos,
essa transmisso se d devido integrao do cromossomo do fago ao cromossomo bacteriano.

Figura 5 Injeo do DNA por um bacterifago em uma clula hospedeira


Fonte: <http://biodidac.bio.uottawa.ca/ftp/BIODIDAC/Virus/General/diagbw/Viru006b.gif>. Acesso em: 7 out. 2009.

No ciclo ltico, depois que um bacterifago ou fago entra em uma bactria, ele pode
induzi-la a fazer cpias de si prprio. No m desse processo, a bactria infectada sofre lise
e novos vrus so lanados no ambiente, como voc pode ver na Figura 6 a seguir. Em A, o
vrus infecta uma clula bacteriana, injetando nela seu DNA. Em B, o DNA viral induz a clula
a replicar os genes virais. A etapa C mostra que partes dos vrus so formadas no interior da
clula bacteriana, para dar origem a novas partculas virais completas. Finalmente, em D, a
clula sofre lise e os vrus completos so liberados para o meio extracelular.

Aula 8

Lise
A lise o processo de
ruptura ou dissoluo
da membrana
plasmtica ou da
parede bacteriana, que
leva morte da clula
e liberao de seu
contedo.

Metabolismo da Vida Microscpica

171

Figura 6 Ciclo ltico de um bacterifago


Fonte: <http://wps.prenhall.com/wps/media/objects/488/499792/images/
AABXJOV0a.jpg>. Acesso em: 7 out. 2009.

No ciclo lisognico, o vrus pode se integrar ao cromossomo bacteriano, ligando seu


DNA ao DNA da bactria. Pode permanecer ali por um perodo de tempo antes de se desligar
e continuar seu processo de replicao. Sob essas condies, o vrus no destri a bactria
hospedeira, mas permanece se replicando com ela medida que ela se divide. Nessas condies,
o vrus chamado de fago temperado, tambm conhecido como profago. Em um momento
posterior, o vrus pode se separar do cromossomo bacteriano e retomar um ciclo ltico.
Voc pode acompanhar as etapas do ciclo lisognico de um bacterifago na Figura 7. Em
A, o bacterifago infecta uma clula bacteriana injetando nela seu DNA. Em B, voc v o DNA
viral direita e o bacteriano esquerda. Na etapa C, o DNA viral se integra ao DNA bacteriano.
Por m, em D, a bactria se divide e o genoma viral tambm, uma vez que estava inserido no
cromossomo bacteriano.

Figura 7 Ciclo lisognico de um bacterifago


Fonte: Adaptado de <http://www.dbio.uevora.pt/LBM/Foco/Vectores/Image22.jpg>. Acesso em: 7 out. 2009.

172

Aula 8

Metabolismo da Vida Microscpica

A transduo pode ser de dois tipos, de acordo com os ciclos virais:


Transduo generalizada: durante um ciclo ltico, pode haver a incorporao de DNA bacteriano
ao genoma viral durante a montagem dos vrus, ainda dentro da bactria. Esse DNA poder ser
transferido para outra bactria, quando o vrus for liberado, aps a lise bacteriana. Nesse tipo
de processo, o empacotamento de fragmentos de DNA da clula hospedeira pode ocorrer de
maneira acidental, gerando partculas denominadas partculas transdutoras, que correspondem
ao capsdeo viral contendo em seu interior DNA bacteriano. Embora no correspondam a novos
vrus, essas partculas transdutoras so capazes de se ligar por adsoro superfcie de outras
clulas bacterianas e levar a uma recombinao gentica no DNA da clula hospedeira.
Transduo especializada: ocorre quando se d a transferncia de DNA de uma bactria para
outra de maneira eciente, permitindo que uma pequena regio do cromossomo bacteriano seja
replicado. O processo comea com a lisogenizao do fago em locais especcos do genoma.
Ao de separar da bactria hospedeira, esse processo pode se dar de maneira defeituosa, levando
tambm remoo de genes bacterianos e deixando parte do genoma viral na clula. Assim, ao
infectar novas clulas, pode haver a transferncia de genes da bactria anteriormente infectada.

A - Transduo generalizada

B - Transduo especializada
DNA bacteriano

DNA do fago
A+ B+

Fago infecta clula bacteriana.

B+

Clula bacteriana tem profago


integrado entre os genes A e B.
B+

A+
A+

DNA do profago

A+

B+
A+

DNA do hospedeiro quebrado em pedaos e


DNA e protenas do fago so formados.

B+

Eventualmente, o DNA do profago, ao se deslocar do cromossomo


bacteriano, leva consigo parte do DNA da clula hospedeira.

A+
A+

Eventualmente, parte do DNA bacteriano


empacotado em um capsdeo do fago.

Partculas do fago carreiam DNA bacteriano


(aqui citado como gene A) junto com o DNA do fago.
A+

A+
-

A-

A B

B-

Fagos transduzidos infectam novas clulas hospedeiras, podendo haver recombinao.


Bactria recombinante
A+ B-

A+

B-

Os recombinantes tm DNA diferente de seus doadores ou receptores.

Figura 8 Tipos de transduo: (a) transduo generalizada; (b) transduo especializada.


Fonte: <http://www2.brazcubas.br/professores1/arquivos/35_shyodo/Biologia/Recombinacao_em_bacterias.pdf>. Acesso em: 7 out. 2009.

Aula 8

Metabolismo da Vida Microscpica

173

Atividade 6
Qual a diferena bsica, em termos do ciclo viral, para que ocorra transduo
generalizada ou especializada?

174

Aula 8

Metabolismo da Vida Microscpica

Mutao nos microrganismos


Uma outra maneira dos microrganismos sofrerem modicaes na sua informao
gentica por meio de mutaes.
A mutao uma alterao na sequncia de bases nitrogenadas do DNA. Pode ser
neutra, desvantajosa ou benca. Pode ocorrer por deleo, insero ou substituio de
um ou mais nucleotdeos.
Sem mutao
A

Ponto de mutao
Substituio de base
A

Substituio de
uma base ou de muitas bases

Insero
Adio de uma base
ou de algumas bases
A

Deleo
perda de uma
ou de algumas bases.
A

Figura 9 Tipos de mutao


Fonte: Raven (2001, p. 208).

As mutaes podem ocorrer espontaneamente por causa de erros durante a replicao


ou devido radiao natural, com uma frequncia de cerca de uma em 1.000.000, ou podem
ser induzidas experimentalmente pelo uso de agentes mutagnicos. As mutaes podem ser
tambm quimicamente induzidas por anlogos de base, compostos que so estruturalmente
similares s purinas e pirimidinas, no DNA. A clula incorpora esses anlogos ao DNA, mas
durante as replicaes subsequentes, os anlogos tm uma maior probabilidade de pareamento
incorreto, inserindo uma base inadequada na nova ta de DNA.
Outros mutagnicos qumicos reagem diretamente com o DNA alterando as bases.
A radiao UV absorvida pelas purinas e pirimidinas no DNA, processo que leva a um
impedimento no emparelhamento correto de bases durante a replicao. A radiao ionizante
gera radicais livres nas clulas e esses podem reagir com o DNA, provocando quebras na
cadeia. Os agentes biolgicos, tais como os transposons e os bacterifagos, causam mutaes
atravs da insero de sequncias de DNA nos genes, interrompendo, assim, a informao
inicial de codicao.

Aula 8

Metabolismo da Vida Microscpica

175

Resumo
Nesta aula, voc compreendeu como os microrganismos realizam trocas
de material gentico. Vimos que isso possvel por meio de mecanismos de
transferncia gnica ou de mutaes pontuais no cromossomo. No primeiro
caso, voc aprendeu que as bactrias utilizam trs mecanismos pra transferir
sequncias de DNA plasmidial ou cromossmico: a transformao, a transduo e
a conjugao. Tambm foram discutidos os tipos de mutao que podem ocorrer
espontaneamente ou de forma induzida no cromossomo bacteriano.

Autoavaliao
1

176

Aula 8

Em uma transformao, a clula receptora geralmente est morta. Explique essa


armativa.

Explique as diferenas entre recombinao e mutao gnica.

Metabolismo da Vida Microscpica

No esquema abaixo, observa-se o ciclo ltico de um bacterifago. Descreva os


processos que ocorrem em cada uma das fases, numeradas de 1 a 5.

Fonte: <http://web.educastur.princast.es/proyectos/biogeo_ov/2BCH/B5_MICRO_INM/T51_
MICROBIOLOGIA/ejercicios/Diapositiva5.GIF>. Acesso em: 7 out. 2009.

Aula 8

Metabolismo da Vida Microscpica

177

178

Aula 8

Explique os trs mecanismos bsicos de transferncia de genes entre bactrias.

Diferencie transduo especializada de transduo generalizada.

Metabolismo da Vida Microscpica

Referncias
MADIGAN, Michael T.; MARTINKO, John M.; PARKER, Jack. Microbiologia de Brock. 10. ed.
New Jersey: Prentice Hall, 2004.
PELCZAR JNIOR, Michael. Microbiologia: conceitos e aplicaes. So Paulo: Makron
Books, 1997.
RAVEN, Johnson.Biology. 6th ed. New York: Mc Graw-Hill, 2001.
TORTORA, Gerard J.; FUNKE, Berdell R.; CASE, Christine L. Microbiologia. 8. ed. Porto Alegre:
ArtMed, 2005.
TRABULSI. Microbiologia. 3. ed. So Paulo: Atheneu, 1999.

Anotaes

Aula 8

Metabolismo da Vida Microscpica

179

Anotaes

180

Aula 8

Metabolismo da Vida Microscpica

A diversidade dos microrganismos

Aula

Apresentao

oc j deve ter compreendido que, de uma forma ou de outra, os microrganismos


inuenciam as nossas vidas e, por isso, saber o que eles fazem no ambiente se torna
uma tarefa da maior importncia. No entanto, por serem microscpicos e no poderem
ser visualizados a olho nu, a maioria das pessoas s consegue perceber a existncia dos
microrganismos quando ca doente devido ao de algum deles. Dessa forma, muitas
vezes s conhecemos seu lado negativo. Nesta aula, queremos demonstrar a diversidade
dos microrganismos, reforando o fato de que somos afetados direta e diariamente, tanto de
forma positiva quanto negativa pelas atividades microbianas. Como voc j viu, h milhares
de espcies de microrganismos que reciclam a matria morta, fortalecendo as bases das
cadeias alimentares e contribuindo decisivamente para a composio e manuteno da vida
no planeta. H tambm, uns poucos que causam doenas. Vamos conhecer agora quantos e
quais so os microrganismos.

Objetivos
1

Compreender a classicao dos microrganismos nos


Domnios da vida.

Reconhecer as diferenas entre Archaea e Bacteria.

Identicar aspectos gerais dos grupos de microrganismos.

Aula 9

Metabolismo da Vida Microscpica

183

A vida microbiana
nos primrdios da Terra
Estromatlito
Estrutura fossilizada de
massa microbiana com
idade de cerca de 3,5
bilhes de anos.

Restos fossilizados encontrados em rochas antigas comprovam a existncia da vida


microbiana no incio da formao do nosso planeta. Microfsseis com formas bacterianas de
bacilos, cocos e lamentos se apresentam em estromatlitos com mais de 3 bilhes de anos,
conrmando a existncia de microrganismos pouco tempo depois de a Terra ter sido formada.

Figura 1 Estromatlitos com 3,4 bilhes de anos descobertos por pesquisadores na Austrlia
Foto: Abigail Allwood.

Atividade 1
Reveja as aulas iniciais da disciplina Biodiversidade e descreva como era a
atmosfera da Terra primitiva. Como os primeiros microrganismos obtinham
energia para sobreviver?

184

Aula 9

Metabolismo da Vida Microscpica

Entendendo o planeta
dos microrganismos
Imagine um tempo em que sequer se imaginava que pudessem existir organismos
microscpicos, e que eles eram os causadores de muitas doenas. Esse tempo, voc sabe,
j existiu. Hoje, precisamos ter conscincia de que, mais do que causar doenas, a maioria
dos microrganismos fundamental para a manuteno da nossa vida, e que apenas uma
pequena parcela das espcies existentes nos causam danos. Ao falarmos de microrganismos,
relembre que estamos nos referindo a bactrias, vrus, protozorios e alguns tipos de fungos
microscpicos. Ns dependemos da maioria desses organismos de vrias formas. Eles
produzem oxignio, do qual necessitamos, nos mantm saudveis, so fontes de drogas que
curam doenas, auxiliam nossa digesto, dentre tantas outras atividades bencas. Alguns dos
microrganismos que vivem no nosso corpo competem por espao com espcies patognicas,
numa relao mutualstica em que somos beneciados por sermos protegidos de doenas e
os microrganismos conseguem um espao para viver dentro de ns!

Os microrganismos so como grandes parceiros nossos: desde o momento


em que nascemos, somos invadidos por eles, com quem passamos a conviver
eternamente. Um dado muito impressionante o fato de que a maioria das clulas
que temos no nosso corpo sejam microrganismos e no nossas prprias clulas!

Quo diversos so os microrganismos?


Mais de trs bilhes de anos atrs, os microrganismos deram incio a um processo
que nalmente permitiria a evoluo da vida na Terra. Naquela poca, o nosso planeta era
muito diferente do que hoje e no havia animais ou plantas, mas apenas seres unicelulares
microscpicos vivendo nos oceanos. O dixido de carbono e as concentraes de metano eram
muito elevados, e o oxignio era txico para a maior parte da vida no planeta.
Gradualmente, alguns desses microrganismos comearam a captar a energia do Sol
atravs da fotossntese, e nalmente, a liberao de oxignio como um subproduto da
quebra das molculas de gua nesse processo aconteceu. A Terra comeou a car repleta de
oxignio, e h cerca de 650 milhes de anos, a atmosfera j continha oxignio em quantidade
suciente para sustentar a vida de organismos multicelulares, como conhecemos hoje.

Aula 9

Metabolismo da Vida Microscpica

185

Embora organismos multicelulares sejam visualmente mais interessantes aos olhos, os


microrganismos constituem a forma mais abundante e diversicada que existe, tendo um forte
papel na manuteno das condies atmosfricas e qumicas necessrias para a sobrevivncia
de todas as formas de vida superiores. Na verdade, todas as formas de vida multicelulares
so habitadas por microrganismos.

Figura 2 Diversidade de microrganismos


Fonte: Adaptado de Tortora et al (2005).

Fenotpicas
Que tm o mesmo
conjunto de caracteres
anatmicos, siolgicos
e antignicos.

A construo do conceito de diversidade microbiana surgiu da clssica sistemtica


microbiana, a qual estava baseada nas diferenas fenotpicas e de caractersticas siolgicas.
O conceito de diversidade microbiana tambm se baseou nas inferncias sobre possveis
interaes entre os organismos isolados de ecossistemas semelhantes. Agora, possvel
observar claramente as variaes nas formas e funes microbianas em diversas comunidades
ecolgicas devido s novas tcnicas que so empregadas nessa rea.
Avaliaes comparativas entre grupos, com o uso de tcnicas moleculares, tm revolucionado
os conceitos tradicionais de diversidade microbiana, e essas comparaes permitem compreender
o papel das comunidades microbianas na manuteno da integridade dos ecossistemas.

186

Aula 9

Metabolismo da Vida Microscpica

Atividade 2
Voc j conhece os conceitos de sistemtica e classicao. Relembre e
reescreva esses conceitos.

J percebeu como os
microrganismos so muito diversos em
todos os seus aspectos: aparncia,
metabolismo, siologia e gentica?

Aula 9

Metabolismo da Vida Microscpica

187

Os esquemas de classicao
dos microrganismos
Considera-se que h cinco principais grupos de microorganismos: Archaea, bactrias,
algas, protozorios e fungos. As Archaea e bactrias so formadas por clulas procariticas.
As algas unicelulares e protozorios (em conjunto chamados de Protistas) e os fungos so
formados por clulas eucariticas, semelhantes s de plantas e animais.
Voc j sabe que podemos considerar a organizao dos seres vivos de acordo com o
sistema de classicao dos trs domnios. No Quadro 1 a seguir, esto estabelecidas, para
que voc possa rememorar, as diferenas existentes entre esses trs domnios.
Caracterstica

Bacteria

Archaea

Eukarya

Carioteca

Ausente

Ausente

Parede celular

Presena de
peptidoglicano

Ausncia de
peptidoglicano

Mitocndria

Ausente

Ausente

Presente
De slica (em Diatomceas);
celulose (algas e plantas);
quitina (fungos)
Presente

Cloroplastos

Ausente

Ausente

Presente em plantas e algas

DNA

01 cromossomo

Habitat

Em todos os ambientes

01 cromossomo
Frequentemente em
ambientes extremos

Vrios cromossomos
Em ambientes que no
sejam extremos

Quadro 1 Comparando os domnios Bacteria, Archaea e Eukarya

Figura 3 Diversidade morfolgica e tintorial de colnias


Fonte: <http://static.hsw.com.br/gif/bacteria-2.jpg>. Acesso em: 16 dez. 2009.

Agora, vejamos as caractersticas gerais desses grupos que compem os organismos


que s podemos enxergar atravs do microscpio.

188

Aula 9

Metabolismo da Vida Microscpica

Domnio Bacteria
As bactrias so organismos unicelulares procariontes. Elas possuem um nico tipo de
parede e membrana celulares que as distinguem das Archaea. Vivem em todos os lugares na
Terra onde a vida possvel, exceto nos ambientes mais extremos, inclusive em associaes
com animais e plantas. A maioria benca, mas algumas causam doenas.
Anlises logenticas atuais das bactrias tm demonstrado a existncia de mais de
20 grupos distintos. A maioria dos grupos listados consiste em los distintos, e alguns
so agora subdivididos em mais de um lo. Muitos grupos so compostos por membros
fenotpica e siologicamente independentes. Alm disso, em alguns grupos (por exemplo,
Proteobacteria e Gram-positivos), h uma considervel diversidade logentica, o que no
aparece na grande rvore da vida.

DEFFERIBACTER

DOMINIO BACTERIA

FLAVOBACTERIAS

CYTOPHAGA

ESPIROQUETAS
VERRUCOMICROBIOS
BACTERIAS
VERDES NO
DEL AZUFRE

DEINOCOCCI

BACTERIAS
VERDES
DEL AZUFRE

PLANTOMYCES/PIRELLA
CHLAMYDIA
CYANOBACTERIA

THERMOTOGA
C
hG
Hig GC
Low

THERMODESULFOBACTERIUM

BACTERIAS
GRAM POSITIVAS
NITROSPIRA

AQUIFEX

PROTEOBACTERIAS

Figura 4 Filos do Domnio Bacteria


Fonte: <http://erasmus.ugr.es/lo/imgcomun/dominio-bacteria.gif>. Acesso em: 16 dez. 2009.

Os principais grupos do Domnio Bacteria


a)

Bactrias fotossintetizantes prpuras e verdes: realizam fotossntese anoxignica, ou


seja, sem produo de oxignio, conforme voc j viu anteriormente.

b)

Proteobactrias: constituem o mais diverso grupo de bactrias, incluindo desde bactrias


xadoras de nitrognio em ndulos de leguminosas at bactrias entricas como a
Escherichia coli. Em 2002, as proteobactrias consistiam de mais de 460 gneros e mais de
1600 espcies, espalhadas por 5 grandes linhas logenticas de ascendncia: as classes
Alphaproteobacteria, Betaproteobacteria, Gammaproteobacteria, Proteobactrias
delta e Epsilonproteobacteria. Englobam uma grande parte dos procariotos Gramnegativos, incluindo espcies de interesse na medicina, veterinria, indstria e agricultura.

Aula 9

Metabolismo da Vida Microscpica

189

Atividade 3
As cianobactrias (Figura 5 a seguir) tambm esto organizadas no Domnio Bacteria.
Descreva as caractersticas principais desse grupo, a partir de uma pesquisa que pode ser feita
em sites conveis da internet ou nos livros disponveis no polo. Pea orientao ao seu tutor.

Figura 5 Cianobactrias
Fonte: <http://universe-review.ca/I11-30-cyanobacteria.jpg>. Acesso em: 16 dez. 2009.

190

Aula 9

Metabolismo da Vida Microscpica

Domnio Archaea
As arqueobactrias so um grupo de clulas procariontes, unicelulares, que muitas vezes
vivem em ambientes extremos, como aqueles com altas temperaturas, pH baixo ou altas
concentraes de sal. Elas so especicamente adaptadas a essas condies devido a presena
de tipos especiais de membranas e um metabolismo diferenciado.

EURYARCHAEOTA MARINOS
CRENARCHAEOTA MARINOS
HALOBACTERIUM
HALOCOCCUS

Euryarchaeota
ARCHAEOGLOBUS

NATRONOCOCCUS
METHANOBACTERIUM
METANGENOS
HALFILOS

Crenarchaeota

SULFOLOBUS

METHANOTHERMUS
PYRODICTIUM

METHANOSACINA
METHANOSPIRILLUM
FERROPLASMA
THERMOPLASMA

METHANOCAL
DOCOCCUS

THERMOCOCCUS
PYROCOCCUS

THERMOPROTEUS

METHANOPYRUS

DESULFUROCOCCUS

PICROPHILUS
Korarchaeota

Figura 6 Filos do Domnio Archaea


Fonte: <http://erasmus.ugr.es/lo/imgcomun/dominio-archaea.gif>. Acesso em: 16 dez. 2009.

Com base em sua siologia, as Archaea podem ser organizadas em trs tipos: metanognicas
(produtoras de metano); hallas extremas (que vivem em concentraes muito elevadas de sal)
e hipertermoflicas (que vivem em temperaturas muito elevadas). Alm das caractersticas que
as distinguem das bactrias, como a ausncia de peptidoglicano na parede celular, as Archaea
possuem outros atributos estruturais ou bioqumicos nicos que lhes permitem adaptar-se aos
seus habitats particularmente inspitos.

Metanognicas
So anaerbios obrigatrios, no tolerando a exposio ao oxignio. Ambientes
anaerbicos incluem sedimentos marinhos e de gua doce, pntanos e solos profundos,
o trato intestinal dos animais, e estaes de tratamento de esgoto. So habitantes normais
do rmen de vacas e outros animais ruminantes. O produto nal de seu metabolismo, o gs
metano, acumula-se no seu ambiente, representando um dos gases do chamado efeito estufa.

Sabia que a vaca arrota cerca de 50 litros de gs metano por dia durante o
processo de ruminao?

Aula 9

Metabolismo da Vida Microscpica

191

Atividade 4
Pesquise na internet sobre o efeito do gs metano na atmosfera. Resuma a ideia
principal desse efeito.

Haloflicas
Vivem em ambientes naturais, como o Mar Morto, ou lagoas de evaporao da gua
do mar, onde a concentrao de sal muito elevada. Esses organismos requerem sal para o
crescimento e no conseguem crescer a baixas concentraes de sal. Na verdade, as clulas
lisam a baixas concentraes de NaCl. Suas paredes celulares, ribossomos e enzimas so
estabilizados por Na+. So hetertrofos que respiram aerobicamente.

Hipertermlas
Organismos que requerem uma temperatura muito alta (80 a 105 graus) para seu
crescimento. Suas membranas e enzimas so extraordinariamente estveis em altas
temperaturas. A maioria destas Archaea exige enxofre elementar para o crescimento e algumas
so anaerbias, utilizando o enxofre como um aceptor de eltrons para a respirao no lugar
de oxignio. Hipertermlas so habitantes de ambientes quentes, geralmente associados ao
vulcanismo, como fontes termais, giseres e fumarolas no Parque Nacional de Yellowstone e
outros lugares, fontes hidrotermais e rachaduras no fundo do oceano.

192

Aula 9

Metabolismo da Vida Microscpica

Atividade 5
Pesquise sobre a espcie bacteriana Thermus aquaticus e a sua importncia
para o campo da Biologia de hipertermlos e para a Biologia molecular. Pea
orientao ao seu tutor.

As Archaea so Gram-positivas
ou Gram-negativas?
Embora a reao de Gram dependa tanto do formato estrutural como da composio
qumica da parede celular das bactrias, a maioria das Archaea so Gram-negativas,
independentemente de sua estrutura bsica ou da composio qumica. Uma exceo
interessante Methanobacterium formicicum, que se cora como Gram-positiva, uma vez que
a sua parede celular contm pseudomurena, um tipo diferente de peptidoglicano. Observaes
mostram que, em uma preparao de Gram, com uma populao microbiana mista contendo
arqueobactrias e bactrias, as Archaea se coram como clulas Gram-negativas, e as clulas
Gram-positivas so provavelmente bactrias.

Comparando arqueobactrias e eubactrias


Arqueobactrias e bactrias so semelhantes no sentido de que ambas tm uma clula
procaritica, mas elas variam consideravelmente, em termos bioqumicos e moleculares:


Parede celular: Ambos os tipos de bactrias normalmente tm paredes celulares que


cobrem a membrana plasmtica, reforando a clula. As paredes celulares das eubactrias
so formadas de um complexo estrutural chamado peptidoglicano, uma espcie de
malha que d parede celular das eubactrias grande fora. As paredes das clulas das
arqueobactrias carecem de peptidoglicano.

Membrana plasmtica: Todas as bactrias tm membrana plasmtica formada por


uma bicamada lipdica (reveja a Aula 1 Comparando clulas procariticas e clulas
eucariticas). Os lipdeos que formam as membranas plasmticas de eubactrias
e arqueobactrias, no entanto, so formados de tipos muito diferentes de lipdios.

Processo de traduo gentica: As Eubactrias possuem protenas ribossomais e uma


RNA polimerase que diferem muito das clulas eucariticas. No entanto, as protenas e
o RNA ribossomal de arqueobactrias so muito semelhantes a elas.

Aula 9

Metabolismo da Vida Microscpica

193

Os microrganismos eucariontes
Nem todos os microrganismos so procariontes. Alguns grupos de eucariontes possuem
clulas microscpicas.

Os protozorios
Protozorios so organismos eucariontes semelhantes a animais, no-fotossintetizantes
comuns em ambientes midos, incluindo o trato intestinal dos animais. A maioria dos
protozorios mvel porque, uma vez que so predadores de outros microrganismos,
necessitam buscar e ingerir os alimentos. Alguns deles causam algumas doenas importantes,
como a malria e a doena de Chagas.

Fungos microscpicos
Os fungos so eucariontes no fotossintetizantes, geralmente mveis, que absorvem os
nutrientes diretamente do meio ambiente. O reino compreende tambm os cogumelos, bolores
e leveduras. As leveduras so unicelulares, e os bolores e cogumelos, apesar de terem uma
forma vegetativa multicelular, produzem esporos unicelulares.
Muitos fungos vivem principalmente no solo e so responsveis pela decomposio
(biodegradao) do material orgnico. Eles tambm podem ser uma importante causa de
doenas de plantas e motivo da deteriorao dos alimentos. Alguns causam doenas no homem
e em outros animais.

Figura 7 Aspergillus nidulans, um fungo


Fonte: <http://textbookofbacteriology.net/themicrobialworld/Asp.nidulans.jpg>.
Acesso em: 17 dez. 2009.

194

Aula 9

Metabolismo da Vida Microscpica

Vrus entidades biolgicas acelulares


Os vrus so constitudos por cidos nuclicos (DNA ou RNA) e protenas e, como voc
j sabe, tm algumas das caractersticas que se relacionam ao que vivo. Mas faltam-lhes
ribossomos para a sntese de protenas, membranas e os meios enzimticos para gerar
energia, que so propriedades tpicas das clulas. O estudo dos vrus tornou-se um grande
ramo da Microbiologia, e embora sejam estudados nessa rea, no devem ser considerados
microrganismos, uma vez que no constituem clulas.
Os vrus so considerados parasitas intracelulares obrigatrios, pois eles s podem
se replicar em associao com uma clula hospedeira por eles infectada. Todos os tipos de
clulas plantas, animais e microrganismos so suscetveis a infeces por vrus. Como a
maioria das infeces virais danica as clulas hospedeiras, os vrus so agentes de muitas
doenas. Embora os vrus sejam muito pequenos para serem vistos por microscopia ptica
convencional, eles podem ser visualizados e fotografados por meio de microscopia eletrnica.

Figura 8 Vrus ebola


Fonte: <http://wvlc.uwaterloo.ca/biology475/Emerging_Diseases/
Virus_hemorrhagic/ebola.jpg>. Acesso em: 16 dez. 2009.

Resumo
Nesta aula, pudemos conhecer a grande diversidade de microrganismos existente.
As diferenas entre os grupos procariticos Archaea e Bacteria foram enfatizados.
Vimos que as Archaea compreendem grupos que vivem em ambientes extremos
e que as bactrias compem a maior parte dos organismos, incluindo as
patognicas. As caractersticas gerais dos grupos de protozorios, fungos e vrus
foram apresentadas.

Aula 9

Metabolismo da Vida Microscpica

195

Autoavaliao
1

Estabelea as diferenas entre os Domnios Bacteria e Archaea.

Compare os domnios Bacteria e Archaea com Eukarya.

Explique por que os vrus no so considerados microrganismos, embora sejam


estudados na rea da Microbiologia.

Referncias
CANHOS, V. P.; MANFIO, G. P. Recursos microbiolgicos para biotecnologia. Disponvel em:
<http://www.inpa.gov.br/~cpca/charles/pdf/Canhos-Mano_Rec-biol_2001.pdf>. Acesso em:
16 dez. 2009.
KERSTERS, K. et al. Introduction to the proteobacteria. Prokaryotes, n. 5, p. 3-37, 2006.
MADIGAN, Michael T.; MARTINKO, John M.; PARKER, Jack. Microbiologia de Brock. 10. ed.
New Jersey: Prentice Hall, 2004.
SILVA, Alline Braga. A importncia das bactrias para a vida. 2009. Disponvel em: <http://
portaldoprofessor.mec.gov.br/chaTecnicaAula.html?aula=1523>. Acesso em: 16 dez. 2009.
TORTORA, Gerard J.; FUNKE, Berdell R.; CASE, Christine L. Microbiologia. 8. ed. Porto Alegre:
ArtMed, 2005.

196

Aula 9

Metabolismo da Vida Microscpica

Anotaes

Aula 9

Metabolismo da Vida Microscpica

197

Anotaes

198

Aula 9

Metabolismo da Vida Microscpica

Os microrganismos auxiliam
a (re)circulao da matria no planeta

Aula

10

Apresentao

a Aula 5 (Obteno de energia para a vida microbiana), estudamos alguns processos


atravs dos quais bactrias, arqueobactrias, fungos e protozorios obtm a energia
necessria para suas atividades celulares. Nesses processos, os microrganismos
extraem a energia de substratos orgnicos ou inorgnicos, transferindo-a para o ATP. Agora,
veremos o processo que faltava para completarmos nossa compreenso sobre o metabolismo
microbiano: a fotossntese.
Voc descobrir, nessa aula, as semelhanas e diferenas entre a fotossntese realizada
por procariotos e eucariotos. Concluindo nosso estudo sobre o metabolismo microbiano,
vamos classicar os microrganismos em diferentes tipos metablicos com base em sua forma
de obteno de energia e nutrio. Veremos tambm, nessa aula, que a fotossntese uma
etapa fundamental do ciclo do carbono na natureza. Voc entender como o metabolismo
dos microrganismos est associado sua conhecida funo de decompositores na natureza.
A circulao de matria no planeta depende da respirao, fermentao e fotossntese realizadas
por procariotos e eucariotos microscpicos. Voc vai se convencer que os microrganismos
so os principais atores das transformaes bioqumicas na Terra!

Objetivos
1

Explicar o processo de fotossntese realizado por


microrganismos procariotos, diferenciando-o daquele
que ocorre nas plantas e em algas.

Identicar a classicao os seres vivos quanto aos tipos


nutricionais com base nos processos de obteno de
energia e principal fonte de carbono.

Denir o conceito de mineralizao da matria orgnica.

Descrever as etapas do metabolismo microbiano


responsveis pela circulao do carbono e do nitrognio.

Identificar a influncia do ser humano nos ciclos do


carbono e do nitrognio.

Aula 10

Metabolismo da Vida Microscpica

201

A vida no planeta
depende da fotossntese

oc viu na Aula 6 (A diversidade (quase) invisvel) e 7 (Protistas I microrganismos


produtores) da disciplina Biodiversidade que os organismos autotrcos, como
plantas e microalgas, fabricam uma nova matria orgnica que posteriormente
consumida por seres heterotrcos. Atravs da fotossntese, as algas produzem boa parte
do alimento que fornece suporte para o crescimento dos seres heterotrcos, incluindo animais
como peixes, crustceos, dentre outros. A fotossntese o processo catablico que sustenta
a sntese de grande parte da matria orgnica do planeta e, alm do seu papel de regulador da
concentrao atmosfrica de CO2 , a fonte do O2 que respiramos.
Agora veremos que, alm das algas, alguns procariotos tambm fazem fotossntese,
usando esse processo para obterem energia (ATP), como voc viu na Aula 5 dessa disciplina.

Atividade 1
1

Analise a Figura 1 a seguir e descreva resumidamente o processo de fotossntese


em seres eucariotos.

Oxignio

Oxignio

Glicose
Energia Solar

Gs Carbnico

Esquema da Fotossntese

gua + Sais Minerais

Figura 1 Esquema geral da fotossntese em organismos eucariotos


Fonte: <http://vivendociencias.blogspot.com/2008/11/fotossintese.html>. Acesso em: 2 dez. 2009.

202

Aula 10

Metabolismo da Vida Microscpica

Os eucariotos fotossintetizantes so as algas e as plantas verdes. Verique na


Atividade 3 da Aula 5 quais so os procariotos capazes de fazer fotossntese.
Em seguida, escreva no espao abaixo quais so eles:

Aula 10

Metabolismo da Vida Microscpica

203

Bactrias protagonistas
do processo de fotossntese:
principais caractersticas
As bactrias capazes de usar a luz como fonte de energia compreendem um grupo
numeroso e heterogneo de organismos, tendo como caracterstica comum a presena de
pigmentos fotossintetizantes e a capacidade de gerar ATP atravs da fotofosforilao, processo
que veremos adiante. Dentre esses organismos, dois grandes grupos so reconhecidos:


as bactrias prpuras e verdes

as cianobactrias

Analisando a Figura 1, voc deve ter concludo que a fotossntese consiste na fabricao
de glicose utilizando dixido de carbono (CO2 ), gua (H 2O) e minerais, sendo tambm
produzido oxignio gasoso (O 2). Dizemos, ento, que na fotossntese ocorre a transformao
da energia luminosa em energia qumica, que armazenada na glicose, o composto orgnico
produzido. Essa transformao entre formas de energia caracteriza a fotossntese tanto em
eucariotos quanto em procariotos. Em ambos os grupos o processo fotossinttico dependente
de pigmentos fotossensveis que absorvem a energia luminosa.
A semelhana da fotossntese entre procariotos e eucariotos para por a. Os tipos de
pigmentos presentes e sua disposio na clula so variveis nesses grupos e at mesmo
dentro dos grupos (veja o destaque abaixo). Por exemplo, a clorola, o pigmento verde presente
em plantas e algas (eucariotos) e cianobactrias (procariotos) ausente nas demais bactrias
fotossintetizantes. Bactrias verdes e prpuras, por sua vez, possuem um pigmento relacionado
clorola, chamado bacterioclorola.

Variaes dos tipos de pigmentos


Existem variados tipos de molculas de clorola, que diferem no nmero de tomos
de carbono, hidrognio ou oxignio, e so denominadas clorola-a, clorola-b,
clorola-c e clorola-d. Dentre esses, a clorola-a a nica considerada universal,
ou seja, presente em virtualmente todos os seres fotossintetizantes eucariotos
e cianobactrias, enquanto as demais esto presentes em alguns organismos e
ausentes em outros. Nas bactrias prpuras podem aparecer bacterioclorolas a
ou b. Nas bactrias verdes, alm desses dois tipos, tambm podem estar presentes
bacterioclorolas c e d. As cores que caracterizam os procariotos fototrcos esto

204

Aula 10

Metabolismo da Vida Microscpica

relacionadas no apenas clorola ou bacterioclorola, mas a outros pigmentos


acessrios, que tambm atuam na captao de luz para a fotossntese.
A colorao verde-azulada da maioria das cianobactrias pode ser explicada
pela presena dos pigmentos clorola-a (verde) e cocianina (azul). Porm,
carotenoides (amarelo-laranja) e a coeritrina (vermelho) podem estar presentes,
dependendo da espcie. Algumas espcies podem apresentar mais de um tipo
de pigmento, o que explica a existncia de cianobactrias das mais variadas
cores. Pigmentos carotenoides so responsveis pela cor das bactrias prpuras
(roxa). Mas essas bactrias tambm podem se apresentar cor-de-rosa, marrom
ou marrom-avermelhado, dependendo dos tipos de pigmentos carotenoides
presentes. Alm disso, muitas bactrias verdes so na verdade marrons
por causa desses pigmentos. Ento, a cor no um critrio convel para a
identicao das bactrias fototrcas.

Pigmentos
acessrios
Auxiliam na absoro
de luz e na transferncia
da energia radiante para
os centros de reao.

As estruturas que contm os pigmentos fotossensveis tambm variam. Voc se lembra


qual organela citoplasmtica contm os pigmentos fotossintetizantes em plantas? Trata-se do
cloroplasto, e ele encontrado tambm em algas microscpicas, mas no em cianobactrias e
demais procariotos. Lembre-se que procariotos so desprovidos de organelas citoplasmticas,
e que a membrana celular assume muitas funes do metabolismo procaritico, como ser o
local onde ocorre a cadeia respiratria que estudamos na Aula 5.
A membrana citoplasmtica tambm assume um papel central na fotossntese bacteriana.
Nas bactrias prpuras os pigmentos responsveis pela fotossntese esto localizados em
invaginaes da membrana que contm todo o aparato fotoqumico. Nas bactrias verdes,
formam-se invaginaes que se destacam da membrana e constituem vesculas chamadas
clorossomos (ver Figura 2). Nas cianobactrias, o sistema fotossintetizante mais complexo,
formado por lamelas membranosas dispostas em varias camadas, os tilacoides (Figura 3),
semelhantes aos cloroplastos (exceto pela presena de membrana abrigando as lamelas).

Aula 10

Metabolismo da Vida Microscpica

205

Figura 2 Fotograa feita atravs de microscopia eletrnica. Chlorobium tepidum, uma bactria verde
Fonte: <www.bio.ku.dk/nuf/research/chlorosome.htm>. Acesso em: 2 dez.
2009.

Figura 3 Fotograas feitas atravs de microscopia eletrnica. a) Clula de uma cianobactria evidenciando
tilacoides; b) Detalhe dos tilacoides na clula de cianobactria
Fonte: <www.pnas.org/content/102/3/850/F2.expansion>. Acesso em: 2 dez. 2009.

206

Aula 10

Metabolismo da Vida Microscpica

Atividade 2
Complete a tabela abaixo, considerando o que voc acabou de estudar.
Microrganismo

Pigmentos

Localizao na clula

Algas

Cianobactrias

Bactrias verdes

Bactrias prpuras

Onde podemos ver


bactrias fotossintetizantes?
Cianobactrias so tambm chamadas de algas azuis (ou verde-azuladas) e so
amplamente encontradas na natureza. Esto distribudas na gua de lagos, rios, oceanos.
So tambm encontradas na superfcie do solo e colonizando superfcies de plantas e rochas.
Grandes quantidades de bactrias prpuras e verdes so frequentemente encontradas
nas partes mais profundas e anaerbicas de lagos, desde que haja quantidade suciente de
luz e de H2 S (veremos depois o porqu). Um dos locais onde mais facilmente se encontram
bactrias verdes e prpuras na natureza so as fontes de gua sulfurosa. Em regies costeiras,
grandes quantidades dessas bactrias ocorrem em piscinas de guas salobras e salgadas rasas
e quentes no conectadas com o mar, onde existe H2S em abundncia. Fontes termais so
habitats para uma variedade de bactrias verdes e prpuras. A bactria Chloroexus forma
espessos tapetes (frequentemente em associaes com cianobactrias) em fontes termais
com temperaturas de 40 a 70C. Uma espcie do grupo das bactrias prpuras, a Chromatium
tepidum, cresce em fontes termais sulfurosas a temperaturas de at 60C.

Aula 10

Fonte termal
Emergncia de gua
subterrnea aquecida,
seja pelo calor causado
pelo gradiente geotrmico,
seja por processos
de vulcanismo. As fontes
termais existem em
toda a Terra, incluindo o
fundo dos oceanos.

Metabolismo da Vida Microscpica

207

Atividade 3
Leia o texto anterior e depois relate em quais ambientes podemos encontrar
organismos procariotos fototrcos.

Todos os seres fotossintetizantes


produzem oxignio?

Fotofosforilao
Produo de ATP
pela fotossntese.

Voc j reconheceu exemplos de procariotos fotossintetizantes, e identicou algumas


variaes na composio dos pigmentos e local onde so armazenados nas clulas
eucariotas e procariotas. Agora, vamos estudar as diferenas fundamentais no processo
fotossinttico em si. Para tanto, voc deve acompanhar a Figura 4 ao longo do texto a seguir.
A fotofosforilao cclica Figura 4(a) , que descreveremos adiante, caracteriza a fotossntese
de todos os procariotos com exceo s cianobactrias. A fotofosforilao acclica
Figura 4(b) corresponde ao modelo de fotossntese em eucariotos e cianobactrias.
Em todos os grupos de organismos, o evento primrio da fotossntese a absoro da
energia luminosa pelos pigmentos fotossintetizantes, que leva excitao de alguns eltrons
da clorola ou bacterioclorola. Os eltrons excitados transferem-se da molcula do pigmento
para a primeira de uma srie de molculas transportadoras, uma cadeia de transporte de eltrons
semelhante quela utilizada na respirao (ver Aula 5). Assim como acontece na respirao,

208

Aula 10

Metabolismo da Vida Microscpica

na medida em que os eltrons so passados junto srie de transportadores, prtons so


bombeados atravs da membrana, promovendo a formao de um gradiente de prtons, e ADP
convertido a ATP pela quimiosmose, j descrita na citada Aula 5. At aqui, o processo
basicamente o mesmo em procariotos e eucariotos. A partir de agora, vamos identicar
diferenas. Quais so elas?

a
Fotofosforilao cclica
Cadeia de
transporte
de eltrons

Eltrons
excitados
(2 e)

ATP

Energia para
produo
de ATP

Luz

Transportador de eltrons
Bacterioclorofila

b
Fotofosforilao acclica

Cadeia de
transporte
de eltrons

ATP
Energia para
produo
de ATP

Eltrons
excitados
(2 e)

NADP+
Luz

NADPH
Clorofila
(2 e)
H2O
1

H+ + H+

O2

Figura 4 Fotofosforilao (a) cclica e (b) acclica


Fonte: Tortora, Funke e Case (2002).

Aula 10

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209

Atividade 4
Analise a Figura 4 e descreva as diferenas no processo de fotossntese entre
procariotos Figura 4(a) e eucariotos e cianobactrias Figura 4(b).

210

Aula 10

Metabolismo da Vida Microscpica

Voc deve ter notado que no primeiro esquema Figura 4(a) h um retorno dos
eltrons para a molcula do pigmento aps a produo de ATP. Por isso esse processo
denominado de fotofosforilao cclica. Nesse processo, eltrons liberados do pigmento
pela ao da luz retornam bacterioclorola aps passarem atravs da cadeia de transporte
de eltrons, gerando a produo de ATP.
Diferentemente, na fotofosforilao acclica, eltrons liberados a partir da clorola so
repostos por eltrons provenientes da molcula de gua, a partir da qual se forma o oxignio
veja a Figura 4(b). Os eltrons da clorola so encaminhados atravs da cadeia de transporte
de eltrons para o aceptor de eltrons NADP +, gerando a produo de ATP. O NADP+
combina com os eltrons e com ons hidrognio da gua formando NADPH. Esta coenzima,
assim como o NADH (veja a Aula 5), uma molcula transportadora de alta energia que ser
usada nas reaes escuras, como veremos mais tarde.

NADP +
Nicotinamida
adenina dinucleotdeo
fosfato, uma coenzima
similar ao NAD+.

Atividade 5
Baseado no que voc acabou de aprender, e com auxlio da Figura 4, complete o
quadro abaixo.

Fotossntese

Organismos

Produo de O2 (sim ou no)

Oxignica

Anoxignica

Aula 10

Metabolismo da Vida Microscpica

211

A transformao do CO2
em molculas orgnicas
A fotossntese ocorre em duas etapas. A primeira delas, dependente da luz, denominada
de reaes luminosas, quando ocorre o processo de fotofosforilao que acabamos de estudar.
Voc viu que nas reaes luminosas a energia luminosa usada para converter ADP e fosfato
em ATP. A segunda etapa, chamada de reaes escuras, independente da luz e caracteriza-se
pela converso do CO2 em acar.
A segunda etapa, caracterizada pelas reaes escuras, pode ocorrer na ausncia de luz, e
na maioria dos fototrcos elas so caracterizadas por uma srie de reaes em uma via cclica
complexa chamada de ciclo de Calvin-Benson. Nesse ciclo, dizemos que o CO2 xado. Isso
porque este composto incorporado nas molculas de acares sintetizadas pela clula. Para
tanto, a clula necessita de energia do ATP e da energia redutora proveniente dos eltrons do
NADPH. Onde a clula obtm toda essa energia?
Os organismos oxignicos, que desempenham a fotofosforilao acclica, produzem
durante esse processo o ATP e NADPH necessrios xao do CO2 . J a fotofosforilao
cclica das bactrias anoxignicas no gera coenzimas reduzidas (NADPH). Essas bactrias
utilizam compostos como o gs sulfdrico (H2S ), o tiossulfato (S2O 32), o gs hidrognio
(H2) ou at mesmo o ferro ferroso (Fe2+) como doadores de eltrons para reduzir NADP + a
NADPH e, posteriormente, transformar CO2 em acares.

Podemos representar a fotossntese atravs das equaes abaixo. Lembre-se que


no caso da fotossntese anoxignica (Equao 2), outros produtos nais podem
aparecer no lugar do S 0 dependendo do doador de eltrons.

1)

Fotossntese oxignica:
luz
6CO2 + 12H2O

2)

C6H12O6 + 6H 2O + 6O2

Eq. 1

C6H2O + 6H2O + 12S 0

Eq. 2

Fotossntese anoxignica:
luz
6CO2 + 12H2S

212

Aula 10

Metabolismo da Vida Microscpica

Diversidade metablica
entre os organismos
Os processos de obteno de energia descritos na Aula 5 e at agora nesta aula
demonstram a extraordinria variao metablica encontrada entre os microrganismos. Vamos
agora fazer uma sntese sobre isso.
Todos os organismos, incluindo os seres microscpicos, podem ser classicados quanto ao
seu padro nutricional, isto , quanto a sua fonte de energia e de carbono. Considerando a fonte
de energia, podemos classicar os organismos como fototrcos, que usam a energia luminosa,
ou quimiotrcos, que dependem de reaes de oxidao-reduo de substncias qumicas
orgnicas ou inorgnicas para obterem energia. Qualquer que seja a fonte primria, a energia
ser transferida para formas qumicas prontamente utilizveis pela clula (ATP e NADPH).
Quanto fonte de carbono, organismos que utilizam exclusivamente o CO2 para fabricar
suas molculas orgnicas so chamados autotrcos. Aqueles que requerem um ou mais
compostos orgnicos como fonte de carbono so considerados HETEROTRFICOS. Esses
conceitos foram discutidos tambm na Aula 3 (Pequena histria da diversidade dos seres
vivos) da disciplina Biodiversidade. Se combinarmos as fontes de energia com as fontes de
carbono, surgiro quatro grupos de organismos, descritos a seguir.
Fotoautotrcos: utilizam a luz como fonte de energia e CO2 como nica fonte de carbono;
todos os compostos celulares orgnicos so sintetizados graas xao do CO2. Na ausncia
de luz, esses organismos obtm energia da respirao usando sua prpria matria-prima, ou
seja, acares formados no processo fotossinttico. Esses seres podem ser aerbicos (plantas,
algas, cianobactrias) ou anaerbicos (muitas bactrias verdes e prpuras).
Quimioautotrcos: oxidam compostos inorgnicos reduzidos como a amnia, nitrito, o
sulfeto de hidrognio (H2S ) e ons ferro (Fe2+) para obteno de ATP. Vimos essa modalidade
no item Microrganismos tambm extraem a energia de substncias inorgnicas usando o
O 2, na Aula 5. Esses organismos tambm utilizam o CO2 como fonte de carbono. Bactrias
nitricantes do gnero Nitrosomonas, que estudaremos adiante, so exemplos desse grupo.
Quimioheterotrcos: usam reaes de oxidao-reduo de compostos orgnicos como
fonte de energia e, normalmente, utilizam essas mesmas substncias orgnicas como fonte de
carbono. Tais fontes so muito variveis e incluem a glicose e outros carboidratos, protenas,
lipdios e at compostos orgnicos menos reativos, como hidrocarbonetos. Os processos de
respirao aerbica a partir de substratos orgnicos e a fermentao (estudadas na Aula 5)
so as vias metablicas mais comuns desse grupo de organismos. A maioria dos procariotos
est inserida nessa categoria, incluindo todas as bactrias patognicas. Todos os eucariotos
no fototrcos, incluindo fungos e protozorios, tambm so quimioheterotrcos.

Aula 10

Metabolismo da Vida Microscpica

213

Fotoheterotrcos: utilizam a luz como fonte de energia (ATP), mas no podem converter
CO2 a glicose. Ento, essas bactrias usam compostos orgnicos, como alcois, cidos
graxos e carboidratos como fonte de carbono. So anoxignicos, e incluem algumas bactrias
verdes e prpuras.

Atividade 6
Resuma, no quadro abaixo, as principais caractersticas das categorias metablicas dos
seres vivos, incluindo microrganismos.

FONTE DE
CARBONO

CO2

Compostos
orgnicos

214

Aula 10

FONTE DE ENERGIA
Oxidao-reduo de substncias qumicas

Luz

Grupo:............................................................

Grupo:............................................................

Caractersticas:...............................................

Caractersticas:...............................................

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Grupo:............................................................

Grupo:............................................................

Caractersticas:..............................................

Caractersticas:..............................................

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Metabolismo da Vida Microscpica

O destino da
matria orgnica produzida
Agora, voc j sabe como a matria orgnica produzida na Terra, atravs de seres
fotoautotrcos, dentre os quais plantas, microalgas, cianobactrias, bactrias verdes e
prpuras, e quimioautotrcos, dos quais apenas procariotos fazem parte. Mas para a
continuidade do processo ao longo do tempo, essa matria orgnica precisa ser reciclada. Para
tanto, um conjunto de processos chamado de mineralizao da matria orgnica deve ocorrer.

Atividade 7
O conceito de mineralizao da matria orgnica est implcito no texto da pgina
13 da Aula 6 da disciplina Biodiversidade.

a)

Leia esse texto e deduza o conceito de mineralizao, registrando sua


interpretao no espao abaixo.

b)

Quais so as formas de nitrognio inorgnico mostradas na Figura 6 da Aula


6 da disciplina Biodiversidade?

Aula 10

Metabolismo da Vida Microscpica

215

O ciclo do carbono
Os microrganismos procariotos provocam a mineralizao da matria orgnica na medida
em que obtm energia atravs da respirao e da fermentao. Nutrientes liberados nesses
processos alimentam nova produo de biomassa. Essa sequncia cclica caracteriza o que
chamamos de ciclos biogeoqumicos. Todos os elementos na natureza percorrem um ciclo
particular, do ambiente para os tecidos dos organismos e vice-versa. Veremos agora como
microrganismos participam desses ciclos atravs de dois exemplos: os ciclos do carbono e
do nitrognio.

Ciclo do Carbono

Aerobiose
Respirao aerbica
Fotossntese oxignica

Metanotrofia
(CH2O)n

CH4
Fermentao

CO2
Metanognese

Respirao anaerbica
e fermentao
Fotossntese anoxignica
Anaerobiose

Figura 5 O ciclo biolgico do carbono


Fonte: Modicada de Dodds (2005).

Na Figura 5, voc observa as principais etapas biolgicas do ciclo do carbono. H outros


processos fsicos e fsico-qumicos que controlam as entradas e sadas de carbono nos
ecossistemas, mas esse no ser nosso enfoque aqui. Para conhecer melhor o ciclo global
do carbono, veja o vdeo sobre o ciclo do carbono no site do Instituto Nacional de Pesquisas
Espaciais, atravs do link indicado nas Leituras complementares.
Podemos compreender as etapas biolgicas do ciclo do C comeando pela via
fotossinttica, atravs da qual o CO2 xado em molculas orgnicas tanto aerobiose quanto
em anaerobiose, nos processos de fotossntese oxignica e anoxignica j estudadas nessa aula.
Quando os organismos morrem, a matria orgnica estocada em sua biomassa
mineralizada, e o carbono orgnico novamente transformado em CO2 atravs da respirao
aerbica, respirao anaerbica e fermentao. Algumas poucas bactrias produzem o gs

216

Aula 10

Metabolismo da Vida Microscpica

metano (CH4 ) em anaerobiose atravs da fermentao. Uma produo de metano mais


signicativa ocorre na metanognese realizada por um grupo de Archaea (arqueobactrias),
as metanognicas, que so anaerbios obrigatrios. Na presena de CO2 , e tambm de H2
produzido atravs da fermentao, esses procariotos usam o CO2 como aceptor nal de
eltrons e o H 2 como doador de eltrons na respirao anaerbica. O CO2 ento reduzido a
CH4. A reao geral da metanognese
4H 2 + CO2

CH4 + 2H2O

Atividade 8
O CO 2 tambm usado como fonte de carbono pelas arqueobactrias
metanognicas. Nesse caso, o CO2 no xado pelo ciclo de Calvin-Benson,
mas por outro processo chamado de via acetil-CoA. Em qual categoria nutricional
(denida na Atividade 6) as metanognicas podem ser enquadradas?

Aula 10

Metabolismo da Vida Microscpica

217

O metano uma molcula relativamente estvel, mas algumas bactrias, as metanotrcas,


so capazes de prontamente oxid-lo, utilizando-o como doador de eltrons para a gerao
de energia e como nica fonte de carbono, processo chamado metanotroa. Essas bactrias
so todas aerbias, e amplamente distribudas nos solos e guas naturais. Elas compem
uma grande diversidade de tipos morfolgicos, tendo em comum apenas a habilidade para
oxidar o metano.

Voc sabia?

218

Aula 10

O metano (CH4 ) extensivamente encontrado na natureza. produzido em


ambientes anxicos por bactrias metanognicas, e um dos principais
gases em sedimentos anxicos, pntanos, regies anxicas de lagos, no
rmen e no trato intestinal de mamferos. O metano o principal componente
do gs natural e est tambm presente em muitas formaes de carvo.
Recentemente, tem havido um grande interesse nas bactrias que utilizam o
metano pela possibilidade de utilizao dessa fonte simples e abundante de
energia (metano) para a produo de protena bacteriana para alimentao
ou suplemento alimentar.

O ciclo do C tem recebido grande ateno por parte dos cientistas que
procuram compreender os processos envolvidos no aumento do efeito
estufa, que tem causado o fenmeno de aquecimento global. O aquecimento
global causado, principalmente, pelo gs carbnico (CO 2), responsvel
por 77% do efeito estufa hoje. Embora o metano seja um componente
de menor importncia no ciclo global do carbono, ele importante em
algumas situaes particulares, pois as emisses de metano contribuem
para aumentar o efeito estufa na atmosfera. As emisses de metano so
da ordem de 1% da quantidade de CO2, porm o efeito de aquecimento da
molcula de CH4 25 vezes maior que a de CO2.

Metabolismo da Vida Microscpica

Atividade 9
Acesse o material educativo do site do INPE, Instituto Nacional de Pesquisas
Espaciais <http://videoseducacionais.cptec.inpe.br/>, e assista aos vdeos
Mudanas Ambientais Globais, Efeito Estufa e Ciclo do Carbono. Depois, relate
no espao abaixo o que signica efeito estufa e aquecimento global e qual o
papel do CO2 no aquecimento global.

O ciclo do nitrognio
O nitrognio (N), assim como o carbono, um importante macronutriente para os
seres vivos. O nitrognio est presente nos aminocidos, protenas, DNA, RNA e em outros
componentes celulares. Desvendaremos agora a intensa participao dos microrganismos no
ciclo desse elemento. O ciclo do N tem sido bastante modicado pelas atividades humanas.
Isso ocorre basicamente porque o crescimento das plantas terrestres , em geral, limitado pela
baixa disponibilidade de N nos solos. Por isso, precisamos fertilizar o solo com nitrognio
para aumentar a produtividade agrcola. Se por um lado tal procedimento ajuda a garantir a
produo de alimentos, por outro lado o aumento da concentrao de N no solo pode ter como
consequncia o aumento de sua concentrao em rios, lagos e outros ambientes aquticos,
onde seu excesso provoca poluio.
As principais formas de N assimiladas pelas plantas e microrganismos autotrcos so o
on amnio (NH4+ ) e o nitrato (NO3). Partindo dessas formas mais simples de N inorgnico,
as plantas, microalgas e procariotos fabricam aminocidos e protenas que constituiro as
clulas. Porm, a maior parte do N na natureza no se encontra nessas formas utilizveis pelos
organismos, e sim na forma de N2 (Figura 6).
Aula 10

Metabolismo da Vida Microscpica

219

(N2 )

Gs nitrognio livre
(N2) na atmosfera

Decomposio

Protenas
de clulas
mortas

Azotobacter
Beijerinckla
Cianobactrias
Clostridium
No-simbiticos

Plantas
leguminosas

Fixao
industrial como
fertilizante

Fixao
Organismos em
deteriorao (bactrias
aerbicas e bactrias
anaerbicas e fungos)

(N2O )

Denitrificadoras
(pseudomonas, Bacilus
licheniformis,Paracoccus
denitricans e outras)

Nitritos
(NO2)

Denitrificao

Procariotos
simbiticos

Assimilao
Amonificao
Nitrosomonas
Nitratos
(NO3)

Nitritos
(NO2)

Amnia
(NH3 )

Nitrificao

Nitrificao

Legenda
Amonificao
Fixao
Nitrificao
Denitrificao

Figura 6 O ciclo do nitrognio


Fonte: Tortora, Funke e Case (2002).

Voc sabia?
O maior reservatrio de nitrognio do planeta encontra-se na forma de N2,
constituindo 78% da atmosfera!
O N2 pode ser assimilado apenas por certas bactrias e algumas cianobactrias,
atravs do processo conhecido como fixao biolgica do nitrognio.
Os procariotos xadores de N2 dispem de um sistema enzimtico denominado
nitrogenase, que catalisa a reduo do N2 a amnia (NH 3), com grande gasto
de ATP, segundo a equao abaixo. Uma vez fabricada a amnia, esta ser
incorporada a aminocidos e protenas (veja a Figura 6).
Fixao Biolgica do Nitrognio
N2 + 3H2

NITROGENASE

2NH3

Na Figura 6, vemos uma representao da inuncia humana no ciclo do N com


fabricao de fertilizantes atravs de um processo industrial que xa o nitrognio.
Os cientistas estimam que o ser humano duplicou a produo de nitrognio
assimilvel por plantas e microrganismos, comparado quantidade de N que
naturalmente reciclada no ciclo desse elemento.

220

Aula 10

Metabolismo da Vida Microscpica

Atividade 10
Simbiticos

Observe na Figura 6 que existem duas categorias de procariotos xadores de


nitrognio, os de vida livre (no-simbiticos) e os que vivem associados com
plantas, principalmente leguminosas. Descubra alguns exemplos que esto
faltando na categoria procariotos simbiticos xadores de N. Para tanto, leia o
artigo Estudo mostra que leguminosas arbreas podem ajudar a recuperar reas
alteradas na Amaznia (http://cienciahoje.uol.com.br/4074) e descreva-os. Anote
abaixo esses exemplos. Relate tambm a importncia desses microrganismos
para a recuperao de reas degradadas.

Signica que vivem


juntos, e refere-se
a organismos que
compartilham um
mesmo habitat,
estabelecendo algum
tipo de interao entre si.

Continuando o estudo sobre o ciclo do N, vemos na Figura 6 que compostos orgnicos,


inclusive aqueles ricos em N, como protenas e aminocidos, sero mineralizados aps a
morte do organismo ou aps a excreo de compostos orgnicos no meio. Em se tratando
de protenas, uma primeira etapa na decomposio (protelise; veja a Figura 6) envolve
uma reao catalisada por enzimas das classes das proteases e peptidases, sintetizadas
por microrganismos que usam protenas como fonte de energia e nutrientes. Compostos
resultantes desse processo, os aminocidos, so, por sua vez, tambm hidrolisados por ao
de enzimas microbianas, tais como a alanina desaminase. Essa etapa pode ser chamada de
amonicao microbiana, pois a amnia o principal produto nal (veja a Figura 6).
Na etapa seguinte do ciclo do N, a nitricao, a amnia oxidada a nitrito e este, por
sua vez, oxidado a nitrato (veja a Figura 6). Esses processos correspondem respirao
aerbica tendo a amnia e o nitrito como fonte de energia (ver equao geral abaixo).
As bactrias Nitrosomonas e Nitrobacter, exemplos de microrganismos evolvidos no processo,
so quimioautotrcas e usam a energia obtida na nitricao para xar CO2.

Aula 10

Metabolismo da Vida Microscpica

221

Nitricao
Ex: Nitrosomonas
2NO 2 + 2H2O + 2H + + E

2NH3 + 3O2

Ex: Nitrobacter
2NO 2 + O2

2NO 3 + E

Nossa descrio sobre o ciclo do N se completa agora com a etapa chamada


desnitricao, tambm realizada exclusivamente por seres procariotos.

Atividade 11
Observe a Figura 6 e relate qual a forma nal do N no processo de desnitricao.

A desnitricao ocorre na ausncia de oxignio. Alguns procariotos anaerbios obtm


energia para o crescimento usando o nitrato como aceptor nal de eltrons na respirao
anaerbica. Como fonte de energia (doadores de eltrons), esses organismos usam os variados
compostos, orgnicos e inorgnicos. Veja alguns exemplos abaixo:

222

Aula 10

Metabolismo da Vida Microscpica

Desnitricao

a)

Ex: Pseudomonas

4H+ + 4NO 3 + 5(CH2O)

2N2 + 5CO2 + 7H2O + E

(matria orgnica)

b)

5H2 + 2KNO3

N2 + 2KOH + 4H2O + E

Atividade 12
Observe que o processo que denominamos ciclo do nitrognio constitui para
as bactrias formas de obteno de recursos.

a)

Relate no espao abaixo quais etapas correspondem a processos de obteno


de energia para os microrganismos.

b)

Em uma das etapas do ciclo do N no h produo de energia; pelo contrrio,


os procariotos gastam energia para desempenh-la. Cite qual essa etapa e
explique qual o ganho para o microrganismo.

Aula 10

Metabolismo da Vida Microscpica

223

Leituras complementares
AGNCIA FAPESP. Estrutura da clorola. 5 maio 2009. Disponvel em: <http://www.agencia.
fapesp.br/materia/10442/divulgacao-cientica/estrutura-da-clorola.htm>. Acesso em:
2 dez. 2009.
Nesse artigo so descritos resultados de uma pesquisa sobre a extraordinria ecincia
do processo de fotossntese de um grupo de bactrias verdes que vivem em regies profundas
do Mar Negro.

DBEREINER, Johanna. A pesquisa que revolucionou a agricultura. Scientic American Brasil,


ed. 22, mar. 2004. Disponvel em: <http://www2.uol.com.br/sciam/reportagens/a_pesquisa_
que_revolucionou_a_agricultura.html>. Acesso em: 29 dez. 2009.
O texto, intitulado A pesquisa que revolucionou a agricultura, relata um pouco da trajetria
de Johanna Dbereiner, uma agrnoma que ajudou a desvendar o papel das bactrias no ciclo
do nitrognio. Paralelamente, mostra a importncia dessas pesquisas para a agricultura.

Resumo
Nesta aula, estudamos como ocorre o processo de obteno de energia atravs
da captao da energia luminosa: a fotossntese. Vimos que procariotos, com
exceo das cianobactrias, no produzem oxignio durante a fotossntese.
Outras diferenas, tais como pigmentos, localizao do processo na clula, entre
fotossntese eucaritica e procaritica foram apresentadas. Conclumos o estudo
sobre metabolismo microbiano classicando os seres vivos em diferentes tipos
nutricionais com base nas fontes de energia e carbono utilizadas. Microrganismos,
e especialmente bactrias, esto representadas em todos os tipos nutricionais!
Nesta aula, voc tambm teve a oportunidade de reconhecer a intensa participao
dos microrganismos nos ciclos do carbono e do nitrognio, e exemplos de como
os seres humanos esto interferindo nesses ciclos.

224

Aula 10

Metabolismo da Vida Microscpica

Autoavaliao
1

Estabelea uma comparao entre a fotossntese de eucariotos e procariotos quanto


aos pigmentos utilizados, local onde o processo ocorre na clula e produtos nais.

Sob qual aspecto o aparato fotossinttico de cianobactrias assemelha-se ao dos


eucariotos fototrcos?

Leia o texto guas Potiguares: Osis ameaados (inserido no moodle, na pgina


da disciplina) e responda s questes abaixo, utilizando os conceitos e termos que
voc aprendeu nessa aula.

a)

Explique o que so cianobactrias?

b)

Explique por que a gua do aude (Figura 4 do artigo) verde.

c)

Relate se voc reconhece, em algum corpo dgua da sua regio, a situao


descrita no artigo.

Estabelea uma comparao entre o processo de metanotroa e metanognese


quanto ao ambiente onde ocorrem (aerobiose/anaerobiose), produtos formados e
as funes do CH4 e CO 2.
Pesquise em artigos e notcias do site do Centro de Previso do Tempo e Estudos
Climticos do Instituto Nacional de Pesquisas Espaciais (http://www.cptec.inpe.br/)
quais so as atividades humanas responsveis pela emisso de gases estufa.
Identique na regio onde voc vive quais so as possveis fontes desses gases.

Descreva o ciclo do nitrognio, enfatizando quais so as etapas de ganho e gasto


energtico, e a necessidade do oxignio para que as reaes ocorram.

Leia o artigo A pesquisa que revolucionou a agricultura <http://www2.uol.com.br/


sciam/reportagens/a_pesquisa_que_revolucionou_a_agricultura.html> e descreva
qual a importncia das bactrias xadoras de N para a agricultura.

Aula 10

Metabolismo da Vida Microscpica

225

Referncias
BARBOSA, H. R.; TORRES, B. B. Microbiologia bsica. So Paulo: Ed. Atheneu, 2005. 196p.
ESKINAZI-SANTANNA, Eneida M. et al. guas potiguares: osis ameaados. Cincia Hoje, v.
39, n. 233, p. 68-71, 2006.
FREITAS, S. R. et al. Emisses de queimadas em ecossistemas da Amrica do Sul. Estudos
Avanados, So Paulo: Instituto de Estudos Avanados, v. 19, n. 53, p. 167-185, 2005.
MADIGAN, M. T.; MARTINKO, J. M.; PARKER, J. Microbiologia de Brock. So Paulo: Prentice
Hall, 2004.
TORTORA, G. J.; FUNKE, B. R.; CASE, C. L. Microbiologia. 6. ed. Porto Alegre: Ed. Artmed,
2000. 827p.
WAGENINGEN UNIVERSITY AND RESEARCH CENTRE. Nitrogen Deposition Limits Climate
Change Impacts On Carbon Sequestration. ScienceDaily. Retrieved, n. 3, nov. 2009.
Disponvel em: <http://www.sciencedaily.com/releases/2009/10/091007103059.htm>.
Acesso em: 2 dez. 2009.

Anotaes

226

Aula 10

Metabolismo da Vida Microscpica

Anotaes

Aula 10

Metabolismo da Vida Microscpica

227

Anotaes

228

Aula 10

Metabolismo da Vida Microscpica

Como os microrganismos
se relacionam

Aula

11

Apresentao

a Aula 9 (A diversidade dos microrganismos), estudamos sobre a diversidade microbiana


que existe na natureza. Em condies naturais, um microrganismo raramente existe em
isolamento. Nos ambientes naturais, encontram-se coexistindo numerosas populaes
com caractersticas diversas. As populaes microbianas que vivem juntas em um local
particular, chamado habitat, interagem mutuamente formando uma comunidade microbiana.
Essas comunidades possibilitam a ocorrncia da mineralizao da matria orgnica e os ciclos
dos nutrientes, exemplicados na Aula 10 (Os microrganismos auxiliam a (re)circulao da
matria no planeta). Isso porque cada grupo de organismos especializado numa parte de
cada processo e, juntos, fazem o trabalho que no poderiam fazer separadamente. Nesta aula,
vamos ver alguns exemplos de como a presena de um microrganismo inuencia na vida de
outro ser microscpico. Isso faz parte do estudo da Ecologia Microbiana!

Objetivos
1

Aplicar os conceitos da Ecologia para denir as relaes envolvendo


microrganismos.

Exemplicar algumas relaes que envolvem microrganismos.

Reconhecer quais so as vantagens e desvantagens para os


microrganismos nessas relaes.

Aula 11

Metabolismo da Vida Microscpica

231

Dividindo espaos
muito pequenos
J vimos que microrganismos ocupam os mais diversos habitats, incluindo aqueles onde
nenhum outro organismo pode sobreviver, tais como fontes termais (elevadas temperaturas) e
rochas cidas. Por sua grande diversidade metablica, microrganismos podem viver com ou
sem oxignio, com ou sem luz, e usando os mais diversos tipos de substncias como fonte de
energia e carbono (veja as Aulas 5 e 10). Devido ao reduzido tamanho dos microrganismos,
espaos pequenos como aquele exemplicado na Figura 1 (uma partcula de solo de 12mm
de dimetro) podem abrigar diferentes populaes com capacidades metablicas distintas se
esse habitat for heterogneo.
No exemplo da Figura 1 a concentrao de oxignio pode variar de 21% (normalmente
encontrado no ar que respiramos), na camada supercial da partcula, at 0% no centro
dela. Entre o ambiente oxigenado (na superfcie) e o anaerbico (centro), h um gradiente de
concentraes de oxignio. Essa heterogeneidade espacial, muito comum na natureza, favorece
a existncia do que chamamos de microhabitats. Ocupando esses microhabitats h distintas
populaes microbianas favorecidas por diferentes concentraes de oxignio no meio, desde
a aerobiose at a anaerobiose. Lembre-se de que estamos aqui falando apenas do oxignio,
mas outros fatores ambientais tambm podem variar e assim contribuir para o surgimento de
microhabitats. Microrganismos so encontrados compartilhando os microhabitats e, portanto,
esto em proximidade, favorecendo a inuncia mtua entre as populaes.

21

15
10
5

3
Distncia (mm)

0
Distncia (mm)

Figura 1 Concentraes de oxignio em uma partcula de solo


Fonte: Madigan, Martinko e Parker (2004)

232

Aula 11

Metabolismo da Vida Microscpica

Quais tipos de interaes


existem entre microrganismos?
Os cientistas que estudam Ecologia consideram que as interaes entre os seres vivos
podem ter carter positivo ou negativo.Quando duas populaes diferentes interagem, uma
delas ou ambas pode se beneciar pela interao (interaes positivas), ou ento efeitos
negativos podem ocorrer para uma ou ambas as populaes (interaes negativas). Veja as
denominaes das interaes no Quadro 1.
importante que voc compreenda que interao positiva aquela que favorece a
populao envolvida; essa ter maior crescimento populacional na presena da outra populao
do que na ausncia dela. Por sua vez, uma interao negativa para uma populao signica
que ela ter seu crescimento diminudo quando a outra populao envolvida estiver presente.
As categorias usadas para descrever essas interaes ecolgicas representam um sistema
de classicao conceitual; em muitos casos especcos, no evidente qual o tipo de
interao que ocorre.

Tipo de interao

Espcie A

Espcie B

Natureza da interao

Neutralismo

Sem efeitos

Comensalismo

Comensal/hospedeiro no afetado

Mutualismo

Obrigatria

Protocooperao

No obrigatria

Competio

Inibio mtua

Predao

B ingerido por A

Parasitismo

B explorado por A

Amensalismo

A populao B no afetada

Quadro 1 Principais tipos de interaes entre populaes de seres vivos


Fonte: Pinto-Coelho (2000)

Aula 11

Metabolismo da Vida Microscpica

233

Atividade 1

234

Aula 11

a)

Observe a Tabela 1 e dena com suas palavras cada uma das interaes.

b)

Voc conhece exemplos das interaes mostradas no Quadro 1 envolvendo


plantas e/ou animais? Explique dois desses exemplos no espao abaixo. Caso
no saiba, faa uma pesquisa para responder questo.

Metabolismo da Vida Microscpica

Em comunidades simples, uma ou mais interaes descritas no Quadro 1 podem ser


observadas e estudadas. Em uma comunidade biolgica natural complexa, todas essas
possveis interaes provavelmente ocorrero entre diferentes populaes.

Exemplicando as interaes entre


microrganismos: neutralismo uma interao?
Em Ecologia, o conceito de neutralismo implica na ausncia de interaes entre
duas populaes microbianas. O neutralismo no pode ocorrer entre duas populaes que
apresentam uma sobreposio de seus papis funcionais em uma comunidade, e mais
provvel ocorrer entre populaes microbianas com capacidades metablicas extremamente
diferentes. Pelo fato de ser uma proposio negativa, o neutralismo difcil de ser demonstrado
experimentalmente. Assim, exemplos de neutralismo descrevem casos onde as interaes,
ainda que existentes, no so importantes.
Condies ambientais que no permitem o crescimento microbiano ativo favorecem o
neutralismo. Por exemplo, microrganismos congelados em uma matriz de gelo, tais como
produtos alimentcios congelados, ambientes aquticos (rios, lagos, mares) com a gua
congelada, encontram-se tipicamente sob uma relao de neutralismo. Condies ambientais
que favorecem o crescimento de populaes microbianas decrescem ou impedem a ocorrncia
de neutralismo.
Formas de resistncia de microrganismos tm maior probabilidade de desenvolver
uma relao de neutralismo com outras populaes, do que clulas vegetativas crescendo
ativamente. As baixas taxas de atividade metablica para a manuteno de tais formas de
resistncia no foram o microrganismo para o desenvolvimento de interaes competitivas
envolvendo a busca por recursos. Quando as condies ambientais tornam-se favorveis, os
estgios de resistncia desses microrganismos podem germinar, formando clulas vegetativas
que sero ento engajadas em interaes positivas ou negativas.

Voc notou nesses


exemplos que o tipo de interao
que ocorre entre duas populaes depende
das condies do ambiente? Isso que dizer que
quando o ambiente se altera (e a natureza est
em constante mudana...), as interaes
entre os organismos tambm
se alteram!

Aula 11

Metabolismo da Vida Microscpica

235

Atividade 2
Durante perodos de stress ambiental (temperaturas elevadas ou secas, por
exemplo), populaes microbianas presentes no ambiente em formas de
resistncia podem desenvolver interaes de neutralismo. Que tipos de estruturas
de resistncia bacteriana podem ser encontradas nessas situaes? Voc pode
resolver essa atividade com auxlio da Aula 1 (Comparando clulas procariticas
e clulas eucariticas).

236

Aula 11

Metabolismo da Vida Microscpica

Exemplicando interaes ecolgicas positivas:


comensalismo, protocooperao, mutualismo
O desenvolvimento de interaes positivas permite a utilizao de recursos mais ecientes
pelos microrganismos, alm de possibilitar a ocupao de habitats que de outra forma no
poderiam ser explorados. Interaes positivas entre populaes microbianas so baseadas em
capacidades fsicas e metablicas que aumentam as taxas de crescimento e/ou sobrevivncia.
No comensalismo, uma populao se benecia enquanto a outra no afetada. Embora
relaes comensais sejam comuns entre populaes microbianas, elas em geral no so
obrigatrias. O comensalismo uma relao unidirecional entre duas populaes: a populao
que no afetada, por denio, no se benecia nem sofre prejuzos pelas aes da segunda
populao. A populao afetada (+) necessita dos benefcios fornecidos pela comensal
inalterada (0).
Existem diversas bases qumicas e fsicas para relaes comensais. O comensalismo
frequentemente ocorre quando a populao inalterada (0), no curso normal do seu crescimento
e metabolismo, modica o habitat de tal maneira que uma outra populao (+) se benecia,
porque o habitat modicado torna-se mais favorvel para suprir suas necessidades. Por
exemplo, quando uma populao de anaerbios facultativos utiliza oxignio, reduzindo sua
concentrao no ambiente, ela cria um ambiente favorvel para o crescimento de anaerbios
obrigatrios. Em tais habitats, os organismos anaerbios se beneciam das atividades
metablicas dos organismos facultativos. Por outro lado, os facultativos no so afetados
pela interao enquanto as duas populaes no competem pelos mesmos substratos ou
nutrientes. A ocorrncia de anaerbios obrigatrios em microhabitats inseridos em habitats
predominantemente aerbios depende desse tipo de relao comensal.
Mutualismo, frequentemente chamado de simbiose, uma relao ecolgica obrigatria
entre duas populaes que se beneciam mutuamente. Uma relao mutualstica exige
proximidade fsica, altamente especca, e um membro da associao no pode ser substitudo
por outras espcies relacionadas. As interaes de mutualismo permitem aos organismos
colonizar habitats que no poderiam ser ocupados por nenhuma das populaes isoladamente.
Isso no exclui a possibilidade dessas populaes existirem em outros habitats. As atividades
metablicas e tolerncias siolgicas das populaes envolvidas nas relaes mutualsticas
so normalmente muito diferentes daquelas encontradas nas populaes isoladas.

Os termos mutualismo e simbiose so s vezes usados como sinnimos. Ns


preferimos diferenci-los, considerando a origem grega do termo simbiose, que
signica viver juntos. Assim, consideramos qualquer tipo de interao como
simbiose, pois uma interao qualquer ocorre na medida em que os seres vivos
dividem um mesmo espao. O mutualismo , dessa forma, um dos tipos de
interaes simbiticas.

Aula 11

Metabolismo da Vida Microscpica

237

Atividade 3
Cite e explique dois exemplos que voc conhece de interao mutualstica.

Um exemplo de mutualismo entre microrganismos e vegetais so as associaes entre


bactrias xadoras de nitrognio e plantas leguminosas. Voc estudou na Aula 10 sobre a
importncia do processo de xao biolgica do nitrognio. Na atividade nmero 9 da referida
aula, voc teve a oportunidade de ler sobre esse tipo de interao.

238

Aula 11

Metabolismo da Vida Microscpica

Figura 2 A formao de um ndulo da raiz de uma planta leguminosa


em associao mutualstica com bactrias xadoras do nitrognio
Fonte: Tortora, Funke e Case (2002).

Outra interao ecolgica normalmente exemplicada como mutualismo so os liquens,


que uma associao entre microalgas e/ou cianobactrias e fungos. Os liquens podem
colonizar habitats onde nem os fungos ou as algas poderiam sobreviver isoladamente. Por
isso, liquens so, frequentemente, os primeiros seres a se instalarem em solos ou pedras
recentemente expostos. Para o fungo, o benefcio da interao evidente. Fungos so
seres quimio-heterotrcos (veja a Aula 10) que utilizam como fonte de energia e carbono
a matria orgnica excretada pelo parceiro fotossintetizante (microalga e/ou cianobactria).
Tradicionalmente, considera-se que o benefcio do parceiro fotossintetizante no lquen a
possibilidade de ocupar habitats potencialmente hostis sobrevivncia de algas de vida livre.
O fungo forneceria, nesse caso, um substrato para xao da alga ou cianobactria e proteo
contra a dessecao. Porm, essa interpretao tem sido recentemente questionada.
Alguns pesquisadores da rea de Ecologia tm argumentado que no existem provas
experimentais de que as algas e cianobactrias de fato se beneciam da interao com o
fungo. Algumas pesquisas tm sugerido que a interao no lquen trata-se, na verdade, de
comensalismo ou parasitismo, uma vez que o fungo pode controlar o crescimento da alga.
Isso cou claro quando os pesquisadores descobriram que entre 70 a 90% do produto da
fotossntese liberado para o fungo e que o parceiro fotossintetizante pode formar populaes
maiores na ausncia do fungo. Essas descobertas contradizem a ideia de interao mutualstica,
na qual todos os parceiros devem ter ganhos.
Aula 11

Metabolismo da Vida Microscpica

239

por
isso que se diz que no
existem verdades absolutas na Cincia!
O conhecimento que se tem atualmente pode
ser modicado com as novas descobertas.
E isso torna a Cincia ainda mais
interessante!

Atividade 4
Procure fotos de liquens na internet e analise seu aspecto. Depois, procure
observar a presena de liquens em rvores de jardins ou praas onde voc mora.
Descreva no espao abaixo o que voc encontrou. H liquens de cores e formas
diferentes? Sugerimos os sites abaixo, mas voc pode buscar outros.
<http://www.microbiologia.vet.br/fungoscogumelos.htm>
<http://www.feiradeciencias.com.br/sala26/26_feira_01.asp>

240

Aula 11

Metabolismo da Vida Microscpica

Uma relao de protocooperao entre duas populaes microbianas indica que ambas as
populaes se beneciam com a interao, mas diferentemente do mutualismo, essa associao
no obrigatria. Ambas as populaes so capazes de sobreviver separadamente em seu ambiente
natural, embora o estabelecimento da interao traga vantagens mtuas para as populaes
envolvidas e tenda a maximizar o crescimento de ambas. As relaes de protocooperao so
fracas no sentido de que uma populao pode ser facilmente substituda por outra.
Em alguns casos, difcil determinar se ambas as populaes esto de fato se
beneciando, ou se apenas uma das populaes se benecia enquanto a outra no sofre
nenhum efeito (sendo a interao classicada como comensalismo). Em outros casos,
difcil determinar se a relao obrigatria, devendo, neste caso, ser considerada mutualismo.
Muitos cientistas no fazem distino entre mutualismo e protocooperao por causa dessas
diculdades, considerando tais interaes simplesmente como mutualismo.

Heterocitos
Clula especializada
na xao biolgica
do nitrognio em
algumas cianobactrias
lamentosas, onde a
enzima nitrogenase
armazenada.

Um exemplo de protocooperao pode ser observado entre populaes bacterianas


envolvidas na ciclagem do nitrognio (veja a Aula 10). Especicamente, bactrias heterotrcas
do gnero Pseudomonas so atradas pelos produtos excretados pelos heterocitos de
cianobactrias lamentosas do gnero Anabaena. Pseudomonas formam agregados densos
ao redor dos heterocitos, beneciando-se dos substratos excretados pelas cianobactrias.
Ao oxidar esses excretas orgnicos, as Pseudomonas consomem o oxignio na superfcie do
heterocito. As cianobactrias se beneciam dessa condio, uma vez que a enzima nitrogenase,
responsvel pela xao biolgica do nitrognio, pode ser inativada pelo oxignio.

Exemplicando interaes ecolgicas


negativas: competio, predao e parasitismo
A competio ocorre pela disputa por recursos entre as populaes envolvidas,
especialmente quando tais recursos so escassos no ambiente, ou, como dizemos, so
limitantes (limitam o crescimento das populaes). No caso de microrganismos, esses
recursos so normalmente fontes de energia e nutrientes. Podemos chamar de competio
indireta quando o metabolismo dos microrganismos se modica de modo que as clulas
se tornam mais ecientes na absoro de recursos. Aquelas populaes que capturarem
os recursos mais rapidamente, por exemplo, provavelmente tero mais sucesso (maior
crescimento populacional) do que outros microrganismos menos ecientes.
Um exemplo disso a habilidade de muitos microrganismos, especialmente bactrias,
na produo de enzimas chamadas fosfatases, que atuam na degradao do fosfato orgnico
presente no meio. Com a quebra da molcula orgnica, promovida por essas enzimas, a frao
inorgnica (fosfato) separada da orgnica, tornando-se disponvel para ser assimilada pela
clula. Vale lembrar que o fosfato inorgnico a principal forma de fsforo absorvida pelos
microrganismos e pode ser um nutriente limitante ao crescimento de plantas e microrganismos
em muitos ambientes naturais. Aquelas populaes de microrganismos que produzirem fosfatases

Aula 11

Metabolismo da Vida Microscpica

241

com atividade mais elevada tero mais chance de absorver o fosfato e assim superar (em termos
de crescimento populacional) outras populaes que tm menor atividade da fosfatase.
Outro tipo de interao competitiva, considerada competio direta, tem como base
a produo e secreo por um microrganismo particular de substncias inibidoras do
crescimento de outras populaes potencialmente competidoras. Esse o caso da produo
natural de antibiticos por bactrias e fungos. A observao de um evento de competio
entre microrganismos levou em 1928 o cientista escocs Alexander Fleming descoberta da
penicilina, antibitico que revolucionou a Medicina.
Durante sua rotina de trabalho, cultivando e estudando bactrias, Fleming observou uma
colnia diferente em algumas placas de Petri com cultivo bacteriano. Essa colnia diferente era
formada por um microrganismo contaminante. Ao invs de desprezar os cultivos contaminados,
chamou-lhe a ateno um espao ao redor da colnia contaminante onde as bactrias cultivadas
no cresciam. Esse espao cou conhecido como halo de inibio. Ou seja, a rea no meio
de cultivo que sofre alguma inuncia da colnia a ponto de inibir o crescimento de outros
microrganismos. O fungo contaminante na placa de Fleming foi identicado como do gnero
Penicillium e a substncia inibidora do crescimento de bactrias foi posteriormente isolada e
nomeada penicilina.

Alexander Fleming ganhou em 1945 o prmio Nobel de Fisiologia/Medicina.


Ao receber a condecorao, Fleming disse: No inventei a penicilina. A natureza
que a fez. Eu s a descobri por acaso.

isso mesmo! Microrganismos fabricam e excretam no meio diversos compostos que


matam e inibem o crescimento de outros microrganismos. A sntese de tais substncias tem uma
funo bvia para o microrganismo produtor: a inibio do crescimento de potenciais competidores
que utilizam os mesmos recursos para o metabolismo celular. Com isso, a populao que produz
substncias inibidoras garante para si uma maior disponibilidade de recursos.

242

Aula 11

Metabolismo da Vida Microscpica

Figura 3 Cultura bacteriana contendo uma colnia de fungo contaminante


Fonte: <http://culturesciences.chimie.ens.fr/dossiers-dossierstransversaux-Sante-Penicilline_Decouverte_Antibiotique_Demirdjian.html>. Acesso em: 2 dez. 2009.

Atividade 5
Faa uma pesquisa em livros ou sites da internet sobre outros microrganismos
produtores de antibiticos. Descubra que outros organismos produzem
antibiticos e quais so essas substncias. Registre no espao abaixo o que
voc encontrou.

Aula 11

Metabolismo da Vida Microscpica

243

No mundo microscpico, a distino entre parasitismo e predao nem sempre evidente.


Por exemplo, a interao entre a bactria Bdellovibrio e bactrias Gram-negativas susceptveis
(veja a Figura 4) denida por alguns cientistas como parasitismo e predao por outros.
Em geral, na predao um dos organismos, o predador, alimenta-se e digere o outro, a presa.
No parasitismo, um dos organismos, o parasita, vive sobre ou dentro de outro organismo,
o hospedeiro, extraindo dele nutrientes necessrios ao seu crescimento. Considera-se que
em geral a interao entre parasita e hospedeiro caracterizada por um perodo de tempo
relativamente longo, enquanto a relao predador-presa geralmente, mas no sempre, de
curta durao.
No exemplo da Figura 4, a bactria Bdellovibrio incapaz de se reproduzir isoladamente.
Ela se aloja dentro de outro microrganismo, matando-o e dele extraindo a matria orgnica
e nutrientes para a produo de novos indivduos Bdellovibrio. Outras bactrias, que so
patgenos humanos e de plantas, esto entre as potenciais vtimas do Bdellovibrio. Por isso,
alguns cientistas estudam a possibilidade de usar essa bactria com a nalidade de tratar
doenas. Elas seriam antibiticos vivos, com funo de matar as bactrias patognicas em
um processo de infeco!

Bdellovibrio
Bactria alvo

II. Adeso do Bdellovibrio


em formao

III. Invaso

I. Localizao da
bactria alvo

IV. Estabelecimento

VIII. Lise celular da presa


e liberao de vrios indivduos
de Bdellovibrio

VII. Bdellovibrio em formao

V. Bdellovibrio em formao

VI. Bdellovibrio em formao

Figura 4 Ciclo de vida da bactria parasita (ou predadora?) de outra bactria


Fonte: <http://www.mpg.de/english/illustrationsDocumentation/documentation/pressReleases/2004/pressRelease20040123/index.html>. Acesso em: 2 dez. 2009.

244

Aula 11

Metabolismo da Vida Microscpica

Atividade 6
Considerando os conceitos ecolgicos de predao e parasitismo que voc
aprendeu, relate qual sua opinio a respeito da interao mostrada na Figura 4:
trata-se de um exemplo de parasitismo ou predao? Justique sua resposta.

Aula 11

Metabolismo da Vida Microscpica

245

Um exemplo de parasitismo entre microrganismos a relao estabelecida entre um protista


dinoagelado heterotrco do gnero Amoebophrya e outro dinoagelado Dinophysis norvegica
(fotossintetizante). A Amoebophrya penetra em seu hospedeiro D. norvegica e completa seu ciclo
de vida, gerando vrios outros indivduos que saem de seu hospedeiro para encontrar novos
hospedeiros no ambiente. Essa interao pode ser observada no link <http://www.bom.hik.se/
plankton/>. Nessa pgina da Universidade de Kalmar, Sucia, voc seleciona Movie no tpico
Parasite Research (Pesquisa sobre parasitas). O vdeo mostra imagens feitas sob microscopia,
no momento em que a Amoebophrya, considerado parasita, sai do seu hospedeiro Dinophysis
norvegica (dinoagelado fotossintetizante). Nesse exemplo, um ser eucarioto unicelular completa
seu ciclo de vida parasitando outro ser eucarioto tambm unicelular!
Infeces virais em bactrias conguram uma interao de parasitismo. Atualmente,
sabe-se que vrus esto presentes em ambientes aquticos na ordem de 109 por litro de
gua. Acredita-se que infeces virais controlem o crescimento de populaes bacterianas
e de microalgas em ambientes naturais. Uma aplicao prtica desse conhecimento tem
sido pesquisada para resolver um problema que afeta a Aquicultura em muitas partes do
mundo. Na Europa, na sia e nos Estados Unidos, muitas perdas econmicas no cultivo de
peixes ocorrem devido mortandade de animais marinhos causada pelas oraes de algas e
cianobactrias. Para recordar o que so oraes, recorra ao texto guas potiguares: osis
ameaados, citado na Aula 10. Cientistas investigam a possibilidade de contaminar as
oraes indesejadas com vrus especcos, que afetam apenas a populao alvo, e assim
provocar o decaimento (morte) da orao.
A predao outra interao importante no mundo microbiano. Bactrias no so
predadoras, pois no assimilam partculas, mas apenas substncias dissolvidas no meio.
Outros microrganismos, tais como os ciliados, ingerem seu alimento na forma particulada,
tais como bactrias e algas, conforme mostrado na Figura 5. Aps a ingesto, essas partculas
so envoltas em vacolos e digeridas.

Figura 5 Foto (em microscopia) de um ciliado dentro do qual se pode visualizar uma microalga que foi ingerida
Fonte: <http://www.pmbio.icbm.de/mikrobiologischer-garten/eng/enzoo01b.htm>. Acesso em: 2 dez. 2009.

246

Aula 11

Metabolismo da Vida Microscpica

Atividade 7
Assista ao vdeo Ciliate sweeping up bacteria, disponvel no link <http://www.
youtube.com/watch?v=Fc70Uk1fjTw>, e descreva a interao que voc v.

Aula 11

Metabolismo da Vida Microscpica

247

Leituras complementares
ANTUNES, Luis Caetano Martha. A linguagem das bactrias. Revista Cincia Hoje, v. 33, n.
193, p. 16-20, 2003.
Neste artigo, h a descrio de um mecanismo de comunicao qumica entre bactrias,
chamado quorum sensing. Esse mecanismo corresponde s bases bioqumicas que explicam
como seres microscpicos percebem a presena de outros microrganismos potencialmente
competidores ou mutualistas.

DBEREINER, Johana. A importncia da xao biolgica de nitrognio a agricultura sustentvel.


Disponvel em: <http://www.agencia.cnptia.embrapa.br/Repositorio/revistabiotecnologia1ID0wLrpPCbk3.pdf>. Acesso em: 2 dez. 2009.
Este artigo discute a importncia da associao mutualstica entre bactrias xadoras de
nitrognio e plantas para a reduo no uso de fertilizantes na agricultura, que assim pode se
tornar mais econmica e sustentvel.

Resumo
Nesta aula, vimos que populaes microbianas dividem pequenos espaos
na natureza, e esto sempre interagindo entre si. Estudamos as interaes
ecolgicas chamadas neutralismo, comensalismo, mutualismo, protocooperao,
competio, predao, parasitismo e amensalismo, exemplicando tais interaes
no mundo microbiano. Nesses exemplos, distinguimos como os organismos
envolvidos podem ser afetados positivamente ou negativamente. Compreendemos,
tambm, que o estudo das interaes ecolgicas envolvendo microrganismos
pode trazer benefcios para o ser humano atravs do desenvolvimento de
medicamentos, por exemplo.

248

Aula 11

Metabolismo da Vida Microscpica

Autoavaliao
1

Analise os enunciados abaixo, completando as lacunas existentes.

a)

A produo de fatores de crescimento forma a base para interao do tipo


____________________________________ entre populaes microbianas.
Alguns microrganismos produzem e excretam fatores de crescimento, tais
como vitaminas e aminocidos, que podem ser utilizados por outras populaes
microbianas. Por exemplo, Flavobacterium brevis excreta cistena, que pode ser
utilizada por Legionella pneumophila em ambientes aquticos.

b)

Bactrias epifticas so frequentemente observadas na superfcie de microalgas.


As relaes entre esses microrganismos podem estar baseadas na habilidade
da alga em utilizar a luz, produzindo compostos orgnicos e oxignio para o
metabolismo aerbio heterotrco das aerbias. As bactrias, por sua vez,
mineralizam a matria orgnica excretada, suprindo as algas com dixido de
carbono, e muitas vezes, fatores de crescimento para a assimilao fototrca.
Esse tipo de interao pode ser denominada ___________________________
_______________________________________________________________
______________________________________________________________

c)

O tipo de interao existente entre microrganismos patognicos e seus


hospedeiros __________________________________________________.

Discuta todas as possveis interaes ecolgicas envolvendo microrganismos


presentes no exemplo a seguir.
Animais que possuem um rgo digestivo denominado rmen so conhecidos
como ruminantes. Ruminantes como bovinos e ovinos pastam em plantas ricas
em celulose. As bactrias no rmen fermentam a celulose em compostos que so
absorvidos pelo sangue do animal para serem utilizados como fonte de energia e
carbono. Os fungos do rmen provavelmente hidrolisam outros componentes da
planta, como a madeira. Protozorios do rmen mantm a populao de bactrias
sob controle alimentando-se das mesmas.

Aula 11

Metabolismo da Vida Microscpica

249

As guras abaixo representam resultados de um experimento hipottico para


examinar as possveis interaes existentes entre duas populaes bacterianas
A e B em cultivo, sob condies de laboratrio. Nessas guras so mostradas
curvas de crescimento dos microrganismos (veja a Aula 4, Nutrio e crescimento
microbiano, para recordar o que curva de crescimento). A Figura 1 representa a
curva de crescimento das duas populaes cultivadas separadamente em meio de
cultivo com nutrientes em quantidades adequadas. A Figura 2 indica o crescimento
das populaes conjuntamente, no mesmo meio de cultivo usado para o experimento
da Figura 1. Qual interao pode ser descrita entre a populao A e B demonstrada
na Figura 2? Justique.
Figura 1

Figura 2

Biomassa

Biomassa

A+B
Tempo (h)

250

Aula 11

Metabolismo da Vida Microscpica

Tempo (h)

Referncias
ATLAS, R.; BARTHA, R. Microbial ecology: fundamentals and applications. California: The
Benjamin Kummings Publ. Redwood City, 1993. pp. 37-68.
FUHRAMN, J. A. Marine viruses and their biogeochemical and ecological effects. Nature, n.
399, p. 541-548, 1999.
HYVRINEN, M. Marko; HRDLING, R.; TUOMI, J. Cyanobacterial lichen symbiosis: the fungal
partner as an optimal harvester. OIKOS, n. 98, p. 498504, 2002.
MADIGAN, M. T.; MARTINKO, J. M.; PARKER, J. Microbiologia de Brock. 10. ed. So Paulo:
Prentice Hall, 2004.
MILLIGAN, K. L. D.; COSPER, E. M. Isolation of Virus Capable of Lysing the Brown Tide
Microalga, Aureococcus anophagefferens. Science, v. 266, n. 5186, p. 805-807, 1994.
PINTO-COELHO, R. Fundamentos em ecologia. Porto Alegre: Ed. Artmed, 2000.
TORTORA, G. J.; FUNKE, B. R.; CASE, C. L. Microbiologia. 6. ed. Porto Alegre: Ed. Artmed,
2000. 827p.

Anotaes

Aula 11

Metabolismo da Vida Microscpica

251

Anotaes

252

Aula 11

Metabolismo da Vida Microscpica

Os microrganismos
podem ser nossos aliados!

Aula

12

Apresentao

s microrganismos so vistos pela maioria das pessoas como seres nocivos que
causam doenas em plantas e animais, incluindo humanos. Contrariando esse
conceito, estudamos na Aula 10 (Os microrganismos auxiliam a (re)circulao da
matria no planeta) que microrganismos so fundamentais para o funcionamento da natureza
tal como conhecemos. Alm disso, exemplicamos na Aula 5 (Obteno de energia para a
vida microbiana) alguns casos em que microrganismos so usados pelos seres humanos
para a fabricao de alimentos e bebidas. Agora, reforaremos os aspectos positivos da nossa
convivncia com microrganismos no planeta. Estudaremos alguns exemplos de demonstram
que microrganismos so naturalmente importantes para a sade humana. Veremos tambm
exemplos de produtos microbianos usados para a fabricao de medicamentos, bem como
em processos de biorremediao e outras aplicaes.

Objetivos
1
2
3

Reconhecer situaes em que microrganismos so


utilizados em favor da sade humana.
Identicar como as relaes entre microrganismos e
seres humanos podem ser bencas.
Exemplicar como os microrganismos podem ser utilizados
na despoluio ambiental e na gerao de energia.

Aula 12

Metabolismo da Vida Microscpica

255

Bactrias que
protegem nosso organismo
Voc j deve ter visto propagandas de sabonetes que prometem eliminar as bactrias
nocivas da pele. Mas ser que isso realmente benco?
A pele, assim como vrias partes do nosso organismo, colonizada por microrganismos
que chamamos de ora normal ou microbiota normal. So micrbios que naturalmente
colonizam nosso corpo, mas que no produzem doena em condies normais. A ora normal
muitas vezes benecia o hospedeiro atravs do fenmeno conhecido como antagonismo
microbiano. Nesse fenmeno, microrganismos da ora normal competem com patgenos
que poderiam se instalar no organismo humano. A competio (veja a Aula 11, Como os
microrganismos se relacionam) por nutrientes leva os microrganismos da ora normal a
produzirem substncias nocivas aos micrbios invasores. Como consequncia, nossos bons
micrbios previnem o crescimento excessivo de microrganismos nocivos. No exemplo da
pele, ca bvio que eliminar as bactrias da ora normal no um bom negcio.

256

Aula 12

Metabolismo da Vida Microscpica

Atividade 1
Leia o texto abaixo Sabo com bactericida (Protex) diga no! e descreva outra
desvantagem de se eliminar rotineiramente bactrias da ora normal do corpo humano.

Fonte: A pgina da qumica, Universidade Federal de Santa Catarina. Disponvel em: <http://www.qmc.ufsc.br/qmcweb/exemplar11.html>.
Acesso em: 18 jan. 2010.

Aula 12

Metabolismo da Vida Microscpica

257

Outro exemplo de antagonismo microbiano que favorece os seres humanos visto no


intestino grosso. Nesse rgo, clulas da bactria Escherichia coli produzem bacteriocinas, que
so protenas produzidas por bactrias que inibem o crescimento de outras bactrias. Nesse
caso, bacteriocinas produzidas por E. coli inibem espcies semelhantes, como Salmonella e
Shigella, bactrias patognicas capazes de provocar infeces intestinais acompanhadas de
diarreias, dores abdominais e muitas vezes a desidratao.

Atividade 2
Leia o texto Infeco vaginal pelo fungo Candida albicans inserido no Moodle e descreva
o papel das bactrias da ora normal para a sade da mulher, bem como os possveis efeitos
adversos do uso desnecessrio de antibiticos.

258

Aula 12

Metabolismo da Vida Microscpica

Medicamentos
produzidos por microrganismos
Ao invs de nos causar doenas, algumas bactrias e fungos produzem substncias que
podem ser utilizadas para combater infeces causadas por microrganismos patognicos ou
para combater algum outro problema orgnico ou decincia nutricional. Em algum momento
da nossa vida, utilizamos tais substncias microbianas. Alis, pesquisas para descobertas de
produtos naturais sintetizados por microrganismos aumentam cada vez mais. Vejamos alguns
exemplos a seguir.


Antibiticos

Na Aula 11 (Como os microrganismos se relacionam), vimos como os antibiticos,


mais precisamente a penicilina, foram descobertos. Desde ento, essas substncias tm
sido usadas para controlar as infeces bacterianas e fngicas em humanos. Alm do fungo
Penicillium, outros microrganismos produzem substncias com ao antimicrobiana usadas
como medicamentos. Mais da metade dos antibiticos so produzidos por espcies do gnero
Streptomyces, bactrias lamentosas que comumente habitam o solo. Alguns antibiticos so
produzidos por bactrias do gnero Bacillus, e outros so sintetizados por fungos, a maioria
do gnero Penicillium e Cephalosporium, como nos exemplos listados no Quadro 1 a seguir.

Microrganismo produtor

Antibitico produzido

Bacillus subtilis

Bacitracina

Bacillus polymyxa

Polimixina

Streptomyces venezuelae

Cloranfenicol

Streptomyces erythraeus

Eritromicina

Micromonospora purpurea

Gentamicina

Cephalosporium spp.

Cefalotina

Quadro 1 Microrganismos e respectivas substncias produzidas

Aula 12

Metabolismo da Vida Microscpica

259

Atividade 3
Dirija-se a uma farmcia e pea para ler a bula de um dos antibiticos que
constam no quadro anterior. Anote quais bactrias ou fungos so inibidos (e,
portanto, suas infeces tratadas) pelo antibitico escolhido. No necessrio
abrir a embalagem do medicamento. As farmcias normalmente dispem de
um catlogo de medicamentos que contm as bulas dos remdios. Voc tambm
pode procurar bulas em sites mdicos ou de laboratrios farmacuticos.

Bactrias muitas vezes so mais ecientes


do que os qumicos no trabalho de sntese de
substncias usadas como medicamentos!
Veja o caso da bactria Streptomyces...

Contraceptivo
Refere-se a algum mtodo
para evitar que a mulher
que grvidwa.

Suplementos
alimentares
Substncias ingeridas
para complementar a
quantidade de vitaminas
ou outros componentes

Outros produtos farmacuticos

s vezes, em certas condies fsicas, somos orientados pelo mdico a fazer uso de
medicamentos anti-inamatrios como a cortisona, que faz parte de um grupo de substncias
qumicas denominadas esteroides. Tambm so do grupo dos esteroides os estrgenos e
progesteronas, usados como contraceptivos orais. A extrao de esteroides a partir de
fontes animais ou sua fabricao por mtodos qumicos bastante difcil. Porm, alguns
microrganismos podem sintetizar esteroides a partir de esteris, compostos facilmente
obtidos. Essa transformao feita por bactrias do gnero Streptomyces em uma nica
etapa, enquanto que por mtodos qumicos, em laboratrio, essa mesma transformao requer
cerca de 30 reaes diferentes!

dos alimentos necessrios


ao bom funcionamento
doorganismo.

260

Aula 12

Microrganismos tambm fabricam vitaminas que ns podemos utilizar como suplementos


alimentares, por exemplo. o caso da vitamina B12, que produzida por espcies do
gnero Pseudomonas e Propionibacterium. A riboavina outro exemplo, sintetizada por
vrios fungos, como a espcie Ashbya gossypii. J a vitamina C produzida atravs de uma
modicao da glicose por espcies da bactria Acetobacter. A indstria farmacutica faz uso

Metabolismo da Vida Microscpica

de culturas desses microrganismos para obter as substncias desejadas e depois process-las


e transform-las em medicamentos para serem vendidos.

Atividade 4
Faa uma pesquisa e descreva abaixo quais so as funes da vitamina
B12 no organismo humano. Reconhea, assim, a importncia das bactrias no
processo de produo dessasubstncia.

Puxa, muitas bactrias so mesmo aliadas da nossa sade! Mas sempre bom lembrar:
consuma apenas medicamentos receitados pelo mdico, principalmente aqueles com a
embalagem marcada venda sob prescrio mdica. Somente o mdico tem condies
de avaliar qual o tratamento que precisamos. Consumir medicamentos inapropriados
e na dose errada pode levar a uma piora no estado de sade e ao surgimento de
bactrias super resistentes. E no se esquea, futuro professor: voc tem um papel
muito importante na transmisso desse conceito para seus futuros alunos!

Aula 12

Metabolismo da Vida Microscpica

261

Microrganismos que
comem a poluio
Hoje em dia reconhecido que o aumento da poluio um efeito negativo do crescimento
econmico. O aumento da produo industrial e agrcola gera a produo de resduos muitas
vezes txicos, que so descartados no solo e em ambientes aquticos. Isso sem contar os
acidentes com navios e caminhes que transportam petrleo, combustveis e outros produtos
qumicos.
Para tentar minimizar esses problemas, muitas pesquisas tm sido feitas para o
desenvolvimento de tcnicas de despoluio do solo, de guas subterrneas e superciais,
alm de efluentes e resduos industriais. Aqui entram em cena os microrganismos
usados na biorremediao. Trata-se de um processo biotecnolgico no qual organismos
vivos (microrganismos ou plantas) so utilizados para remover ou reduzir (remediar)
poluentesnoambiente.
Os sistemas metablicos microbianos tm se mostrado aptos para degradar molculas
estveis de poluentes, usando a maquinaria natural de reciclagem das molculas da biosfera. J
vimos que microrganismos so capazes de utilizar diferentes substratos como fonte de energia
e carbono. E exatamente nisso que se baseia a biorremediao usando microrganismos.
Esses, literalmente, comem, ou usam como substratos os compostos poluentes indesejados.
A extraordinria capacidade metablica dos microrganismos se deve combinao do
potencial gentico individual das diferentes espcies microbianas em um sistema natural, com
enzimas e vias metablicas que evoluram ao longo de bilhes de anos, e a capacidade de
metabolismo integrado apresentado pela comunidade microbiana. Assim, produtos resultantes
do metabolismo de um microrganismo podem ser utilizados como substrato (obteno de
energia) por outro microrganismo. Esse intenso sinergismo metablico entre microrganismos
de fundamental importncia para os processos de biorremediao.

262

Aula 12

Metabolismo da Vida Microscpica

Atividade 5
Faa uma pesquisa em revistas ou na Internet sobre exemplos de utilizao
de microrganismos na despoluio de locais contaminados com resduos de
petrleo. Resuma a seguir o que voc encontrou, citando a fonte da informao.

Na lavoura, os micrbios
tambm podem ser nossos aliados
Voc est lembrado que na Aula 10 estudamos a importncia da xao biolgica do
nitrognio para a vida na Terra? O nitrognio um componente essencial das protenas, cidos
nucleicos e outras molculas orgnicas. Embora esse elemento seja abundante na atmosfera
(o nitrognio molecular, N2, perfaz 80% da atmosfera da Terra), ele no pode ser assimilado
por plantas e pela maioria das bactrias quando na forma molecular. As formas preferenciais
de assimilao do nitrognio so os ons amnio (NH 4+) e nitrato (NO3). Esses, por outro
lado, no so to abundantes no solo.
atravs da decomposio da matria orgnica (veja o ciclo do nitrognio na Aula 10) e
principalmente atravs da xao biolgica do nitrognio que esse elemento torna-se disponvel
para a biota. Nesse processo, o N2 transformado em amnia (NH3) por algumas bactrias e
cianobactrias. Tais microrganismos, ento, usam a amnia para a sntese de aminocidos e
protenas em suas clulas. Durante o metabolismo microbiano, e tambm com a morte dessas

Aula 12

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clulas, compostos orgnicos nitrogenados so disponibilizados no meio e decompostos a


nitrato e amnio e, nalmente, absorvidos por outros microrganismos e plantas.
Esse processo muito importante para a produo agrcola, uma vez que o crescimento
das plantas depende da oferta de nitrognio. Nisso, microrganismos tambm podem ser nossos
aliados. Algumas bactrias xadoras de nitrognio tm sido inoculadas em plantas e no solo
para ento enriquec-lo com nitrognio.
Quando isso feito, uma menor quantidade de fertilizantes articiais pode ser utilizada. A
reduo do uso de fertilizantes articiais na agricultura apresenta uma grande vantagem: menos
nitrato carreado para os ecossistemas aquticos, diminuindo o problema da poluio das guas.

Atividade 6
Leia o artigo Sequenciada bactria que produz adubo natural, no link
<http://cienciahoje.uol.com.br/noticias/genetica/sequenciada-bacteria-que-produz-adubonatural/?searchterm=embrapa>, e descreva no espao a seguir qual a bactria de interesse
no caso relatado, onde ela pode ser naturalmente encontrada e como esse microrganismo
pode ser usado na agricultura.

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Microrganismos produzem
fontes alternativas de energia
Voc j deve ter ouvido falar que o petrleo, usado na fabricao de gasolina e o leo
diesel, um combustvel fssil armazenado em reservas que sero esgotadas no futuro. Com a
reduo dessas reservas, os preos esto se tornando mais altos. Assim, fontes alternativas de
energia devem ser desenvolvidas para a manuteno da sociedade humana como conhecemos
hoje. Fontes alternativas de energia mais limpas tambm so desejveis, visto que a extrao
e queima de combustveis fsseis geram uma grande emisso de poluentes, como demonstrado
na Atividade 9 da Aula 10.
O metano, um gs produzido por algumas bactrias (veja o ciclo do carbono tambm na
Aula 10), uma conveniente fonte de energia que pode ser produzida, por exemplo, a partir de
resduos em aterros sanitrios (depsitos controlados de lixo). O metano comea a acumular
alguns meses depois que o aterro est completo e selado. Ele pode permanecer produzindo
metano por 5 a 10 anos, dependendo das dimenses do aterro. O metano pode ser usado para
a gerao de energia eltrica.
Alm de bactrias, hoje em dia tem sido pesquisada a produo de biodiesel por
microalgas isoladas de amostras de lagos, reservatrios e oceanos. Microalgas so uma
potencial fonte de biodiesel em substituio aos combustveis de petrleo. Elas superam
culturas terrestres na produtividade de leo e crescem mais rpido do que as plantas terrestres.
Uma outra vantagem que microalgas dispensam terrenos frteis para seu cultivo. Um exemplo
a alga Botryococcus braunii, cujo contedo de leo pode atingir 75% do peso da clula!
Atualmente j existem empresas que cultivam grandes volumes de microalgas produtoras
de leo, extraindo biodiesel a partir da biomassa produzida. Entretanto, a utilizao de biodiesel
de microalgas em larga escala ainda muito cara, e pesquisas devem ser feitas para aprimorar
o processo. Veja uma foto da alga Botryococcus braunii no seguinte endereo da Internet:
<http://www.algaevs.com/the-wonders-of-algae/what-are-algae>.

Aula 12

Biodiesel
Combustvel biodegradvel
derivado de fontes
renovveis, que pode
ser obtido por diferentes
processos a partir de
gorduras animais ou de
leos vegetais. Existem
dezenas de espcies
vegetais no Brasil que
podem ser utilizadas, tais
como mamona, dend
(palma), girassol, babau,
amendoim, pinho manso
e soja, dentre outras.

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Atividade 7
Leia o artigo Avaliao do leo extrado de diatomceas do RN para produo de
biodiesel, inserido no Moodle. Relate abaixo quais foram os objetivos e as principais concluses
da pesquisa. Que benefcios a produo de biodiesel descrita poderia trazer populao?

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Leituras complementares
UETA, J. et al. Biodegradao de herbicidas e biorremediao. Biotecnologia, Cincia e
desenvolvimento, n. 10, p. 10-13, 1999.
Esse artigo descreve aspectos gerais sobre o emprego do herbicida atrazine na agricultura,
e relata uma experincia de seleo de bactrias degradadoras da atrazina e sua utilizao para
a descontaminao de solos contaminados por esse herbicida.

<http://www.biodiesel.gov.br/>
O Portal do Programa Nacional de Produo e Uso do Biodiesel, do Governo Federal,
divulga as informaes referentes ao Programa. Nesse Portal, voc poder conhecer melhor as
possibilidades oferecidas pelo emprego do biodiesel em substituio aos combustveis fsseis.

<http://www.rudekinc.com/algae.html>
Nesse site, em ingls, voc encontra informaes sobre o cultivo de microalgas para a
produo de biocombustveis. Veja as fotos das culturas da microalga Botryococcus braunii.

Resumo
Nessa aula vimos alguns casos em que as chamadas bactrias da ora normal
trazem benefcios para o organismo humano. Em outros exemplos, observamos
que microrganismos so usados para a produo de medicamentos, como
antibiticos e suplementos alimentares, tambm em prol da sade humana.
Tambm estudamos a aplicao de microrganismos para o controle da poluio
gerada pelas atividades humanas, como as bactrias degradadoras de derivados
de petrleo. Compreendemos tambm que bactrias xadoras de nitrognio
podem ser usadas nas lavouras em substituio aos adubos qumicos. E, por m,
vimos que microrganismos podem produzir substncias usadas para a gerao
de energia. Conclumos, portanto, que microrganismos podem se nossos aliados.

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Autoavaliao
1

Faa uma redao explicando o que so microrganismos e como eles vivem. Explique,
de maneira geral, como constituda uma clula microbiana, diferenciando micrbios
eucariotos e procariotos. Aponte os aspectos principais da diversidade microbiana.
Explique sucintamente como bactrias se reproduzem e como obtm energia. Ressalte
a participao dos microrganismos na mineralizao da matria orgnica.
Leia o texto abaixo e identique qual a relao estabelecida entre seres humanos e
a bactria Escherichia coli no exemplo descrito. Se necessrio, retome os conceitos
estudados na Aula 11.
A bactria E. coli, habitante normal do intestino grosso humano, sintetiza vitamina K
e algumas vitaminas B. Estas vitaminas so absorvidas na corrente sangunea e
distribudas para as clulas do corpo. Em troca, as bactrias encontram no intestino
os nutrientes necessrios para sua multiplicao.

3
4

Qual a funo dos antibiticos para o organismo que o produz? Se necessrio,


retome os conceitos estudados na Aula 11.
Leia o artigo Microrganismos eliminam resduos de agrotxicos no site
<http://cienciahoje.uol.com.br/noticias/agricultura-e-agronomia/microrganismoseliminam-residuos-de-agrotoxico/?searchterm=embrapa>, e descreva com suas
palavras o que relata o artigo.

5
6

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Relate qual a importncia de se desenvolver mtodos de gerao de energia usando


microrganismos.
Apresente uma argumentao contra a ideia de que microrganismos so seres nocivos.

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Referncias
CHISTI, Y. Biodiesel from microalgae. Biotechnology advances, v. 25, p. 294-306, 2007.
GAYLARDE, C. C. et al. Biorremediao: aspectos biolgicos e tcnicos da biorremediao de
xenobiticos. Biotecnologia, Cincia e desenvolvimento, n. 34, p. 36-43, 2005.
TORTORA, G. J.; FUNKE, B. R.; CASE, C. L. Microbiologia. 6. ed. Porto Alegre: Ed. Artmed,
2000. 827p.

Anotaes

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Anotaes

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Esta edio foi produzida em ms de 2012 no Rio Grande do Norte, pela Secretaria de
Educao a Distncia da Universidade Federal do Rio Grande do Norte (SEDIS/UFRN).
Utilizando-se Helvetica Lt Std Condensed para corpo do texto e Helvetica Lt Std Condensed
Black ttulos e subttulos sobre papel offset 90 g/m2.
Impresso na nome da grca
Foram impressos 1.000 exemplares desta edio.
SEDIS Secretaria de Educao a Distncia UFRN | Campus Universitrio
Praa Cvica | Natal/RN | CEP 59.078-970 | sedis@sedis.ufrn.br | www.sedis.ufrn.br

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