DETERMINACIN DE LA DEMANDA BIOQUMICA DE OXGENO

OBJETIVO
Determinacin de la demanda bioqumica de oxgeno a los 5 das en una
muestra de aguas residuales domsticas.
DISCUSIN GENERAL DE LA PRUEBA
En la prueba de la demanda bioqumica de oxgeno (DBO 5), las aguas
residuales abastecen de alimento a los microorganismos encargados de la
descomposicin, y el agua de dilucin abastece de oxgeno disuelto. La
diferencia entre el oxgeno disuelto determinado inmediatamente despus
de que se hace la dilucin y el oxgeno disuelto determinado a los 5 das de
incubacin constituye el oxgeno consumido o Demanda Bioqumica de
Oxgeno a los 5 das (DBO5) de la porcin de muestra utilizada.
La reaccin biolgica aerobia que tiene lugar es la siguiente:
microorganismos
Materia Orgnica + O2 --------------- CO2 + H2O + nuevas clulas + MO Refractaria + calor

Esta ecuacin es una gran simplificacin de reacciones bioqumicas muy

complejas que se llevan a cabo.
INTERFERENCIAS
Las sustancias txicas causan interferencias porque matan los organismos
presentes en el agua (cloro residual, pH extremos, etc.).
MUESTREO
Una vez que se ha tomado la muestra, la determinacin debe hacerse lo
antes posible. Mientras se realiza, la muestra debe ser almacenada a una
temperatura de 4oC o menos y hacerse antes de las 6 horas de recolectada
la muestra.
EQUIPO REQUERIDO
Botellas para DBO (de Whinkler), Pipetas graduadas de 10 ml, Matraces
Erlenmeyer, Bureta de 50 ml, Vasos de precipitado, Incubadora para 20 o C.

Medidor de oxgeno disuelto para utilizar en el campo

SOLUCIONES REQUERIDAS
Sulfato de Magnesio, Cloruro de Calcio, Cloruro de Hierro y Solucin
amortiguadora de Fosfatos.
PROCEDIMIENTO
1. PREPARACIN DEL AGUA DE DILUCIN

Sature de O2 el agua que usar para la dilucin, agitndola en un

frasco parcialmente lleno.
Ponga el volumen deseado de agua destilada en un frasco apropiado y
aada un ml/litro de cada una de las soluciones siguientes: Sulfato de
Magnesio, Cloruro de Calcio, Cloruro de Hierro y solucin
amortiguadora de fosfatos. Se aade la solucin amortiguadora de
fosfatos justamente antes de usar el agua de dilucin.

1. SEMBRADO

El propsito de sembrar es introducir a la muestra una poblacin

bioqumica capaz de oxidar el material orgnico. Donde tales
microorganismos se encuentran presentes como en el caso de las
aguas negras domsticas o afluentes de las Plantas de tratamiento que
no tienen cloracin y en las aguas superficiales el sembrado se hace
innecesario y no debe ser usado.
Cuando la muestra contiene muy pocos microorganismos como
resultado de la cloracin, altas temperaturas o pH extremos, siembre
con el sedimento de aguas domsticas que ha sido almacenada a 20 o
C por 24 a 36 horas.

1. PRETRATAMIENTO

Muestras que contienen alcalinidad acidez custica, neutralcelas a un

pH cerca de 7 con cido sulfrico o hidrxido de sodio 1N.
Muestras que contienen compuestos de cloro residual, si permanecen
1 o 2 horas en reposo, el cloro residual a menudo ser disipado. En
este caso, prepare las diluciones de DBO con agua propiamente
sembrada. Destruya altos contenidos de cloro en muestras
neutralizadas aadiendo Na2SO3 en cantidades apropiadas.
Muestras supersaturadas de oxgeno disuelto que contienen ms de 9
mg/1 a 20o C pueden ser encontradas en los meses de invierno o en
localidades donde crecen algas abundantemente. Para prever la
prdida de oxgeno durante la incubacin reduzca el oxgeno disuelto a
saturacin trayendo la temperatura de 20 oC en un frasco parcialmente
lleno y agitando.

1. DILUCIN
Haga varias diluciones de la muestra para obtener las disminuciones
de oxgeno disuelto requerido. Estime la dilucin necesaria para
producir un consumo de oxgeno de 2 6 mg/l despus de 5 das.

TIPO DE DESECHO

DBO5 en mg/1

% de DILUCIN

Industrial concentrado

500-5000

0.1 1

Aguas residuales domsticas

100-500

1.5 5

Efluentes tratados

30-100

5 25

Aguas superficiales contaminadas

5-30

25 100

2. Sifonee cuidadosamente el agua de dilucin a un vaso de precipitado

de 1000 ml. Llnese hasta la mitad procurando no hacer burbujas para
evitar la entrada de aire.
Agregar cuidadosamente la cantidad de muestra para la dilucin
deseada y dilyase al nivel apropiado con el agua de dilucin.
Mezcle bien un agitador de tipo de mbolo, evitando la entrada de
aire. Sifonee la solucin deseada por lo menos en 2 frascos de DBO
procurando que el lquido se derrame; tape hermticamente evitando
la formacin de burbujas de aire. Incube por lo menos un frasco y en el
otro determine el oxgeno disuelto inicial.
Prepare diluciones sucesivas de concentracin ms baja de la misma
manera.

3. INCUBACIN
Incbese el testigo del agua de dilucin si es sembrada y las muestras
diluidas a 5 das a 20oC. Selle hidrulicamente los frascos de DBO en la
parte superior del cuello del frasco.
4. CLCULOS

SIN DILUCIN:
Donde:

DBO5 en mg/ 1 = (DIOD mg/1 OD mg/1)

DIOD = Demanda inmediata de oxgeno disuelto
OD = oxgeno disuelto despus de 5 das

CON DILUCIN:

DBO5 en mg/1 = DIOD mg/1 OD mg/1 al 5o da

% de dilucin expresado en decimales

CORRECCIN POR INOCULO: Correccin = (B1 B2) f

Donde:
B1 = OD del agua de dilucin inoculada antes de la incubacin.
B2 = OD del agua de dilucin inoculada despus de la incubacin.
F= % de inculo en la muestra diluida
% de inculo en la dilucin del inculo en control

Contaminacin por materia orgnica y

microorganismos
La mayora de la materia orgnica que contamina el agua procede de desechos
de alimentos, de aguas residuales domsticas y de fbricas y es descompuesta por
bacterias, protozoarios y diversos organismos mayores. Ese proceso de
descomposicin ocurre tanto en el agua como en la tierra y se lleva a cabo mediante
reacciones qumicas que requieren oxgeno para transformar sustancias ricas en
energa en sustancias pobres en energa. El oxgeno disuelto en el agua puede ser
consumido por la fauna acutica a una velocidad mayor a la que es reemplazado
desde la atmsfera, lo que ocasiona que los organismos acuticos compitan por el
oxgeno y en consecuencia se vea afectada la distribucin de la vida acutica.
Una medida cuantitativa de la contaminacin del agua por materia orgnica
(sirve como nutriente y requiere oxgeno para su descomposicin) es la
determinacin de la rapidez con que la materia orgnica nutritiva consume oxgeno
por la descomposicin bacteriana y se le denomina Demanda Bioqumica de Oxgeno
(DBO). La DBO es afectada por la temperatura del medio, por las clases de
microorganismos presentes, por la cantidad y tipo de elementos nutritivos
presentes. Si estos factores son constantes, la velocidad de oxidacin de la materia
orgnica se puede expresar en trminos del tiempo de vida media (tiempo en que
descompone la mitad de la cantidad inicial de materia orgnica) del elemento
nutritivo.
La DBO de una muestra de agua expresa la cantidad de miligramos de oxgeno
disuelto por cada litro de agua, que se utiliza conforme se consumen los desechos
orgnicos por la accin de las bacterias en el agua. La demanda bioqumica de
oxgeno se expresa en partes por milln (ppm) de oxgeno o miligramos por litro
(mg/L) y se determina midiendo el proceso de reduccin del oxgeno disuelto en la
muestra de agua manteniendo la temperatura a 20 C en un periodo de 5 das. Una
DBO grande indica que se requiere una gran cantidad de oxgeno para descomponer
la materia orgnica contenida en el agua.
El agua potable tiene una DBO5 de 0.75 a 1.5 ppm de oxgeno y se considera
que el agua est contaminada si la DBO es mayor de 5 ppm. Las aguas residuales
municipales contienen entre 100 y 400 ppm pero los desechos industriales y los
agrcolas contienen niveles de DBO5 del orden de miles de ppm.
La reduccin de los niveles de DBO 5 se hace mediante la depuracin de las
aguas residuales.

Valores tpicos de Demanda Bioqumica de Oxgeno para aguas de diferente calidad.

Tipo de agua

DBO5 mg/L

Agua potable

0.75 a 1.5

Agua poco contaminada

5 a 50

Agua residual municipal

100 a 400

Residuos industriales

500 a 10 000

Lixiviados

5000 a 35000

A la descomposicin de la materia orgnica en presencia de oxgeno se le llama

aerobiosis y es el proceso ms eficiente para liberar la energa de la materia
orgnica. Por ejemplo, la aerobiosis de la glucosa (C 6H12O6) se puede representar
mediante la ecuacin qumica:
C6H12O6 + 6 O2 -----> 6 CO2 + 6 H2O
H = - 3600 cal/g

La descomposicin aerbica de las protenas que contienen nitrgeno y azufre

(representadas por la frmula general (C xHyOzN2S) se puede representar mediante
la ecuacin qumica no balanceada:
CxHyOzN2S + O2 --------> CO2+ H2O + NH4+ + SO42Protena + oxgeno -----> Dixido de carbono + agua + ion amonio + ion sulfato
H = - 5090 cal/g

Cuando la materia orgnica que contamina al agua se ha agotado, la accin

bacteriana de la desoxigenacin de las aguas contaminadas oxida al ion amonio,
proceso denominado nitrificacin, se puede representar mediante la ecuacin
qumica inica:
NH4+ + 2 O2 -------------> 2 H+ + H2O + NO3ion amonio + oxgeno

ion hidrgeno + agua + ion nitrato

H = - 4350 cal/g

A los procesos de descomposicin bacteriana anaerbica (en ausencia de oxgeno)

de la materia orgnica se le llama anaerobiosis. A la descomposicin anaerbica
(por enzimas producidas por levaduras) de los carbohidratos o azcares se le llama
fermentacin y a la descomposicin bacteriana anaerbica de las protenas se le
llama putrefaccin.

La fermentacin de un azcar por enzimas de levaduras, por ejemplo de la

glucosa, se puede representar en trminos generales, mediante la ecuacin qumica:
C6H12O6 + enzimas de levadura ----> 2 CO2 + 2 CH3-CH2-OH
Glucosa

Alcohol etlico o etanol

La putrefaccin de las protenas puede representarse mediante la ecuacin

qumica no balanceada:
CxHyOzN2S + H2O ---bacterias----> CO2 +CH4 + H2S + NH4+

Protena + agua -----> bixido de carbono + metano + sulfuro de hidrgeno + ion amonio
H = - 368 cal/g

Se puede observar que se libera mayor cantidad de energa en la aerobiosis que

en la putrefaccin. En el proceso de putrefaccin, como el metano es insoluble en
agua se libera en forma de gas. El sulfuro de hidrgeno es un gas incoloro, de mal
olor (a huevo podrido) y txico (en concentraciones de 5 % es nocivo para la vida),
por lo que la putrefaccin desprende olor ftido y los peces y otros animales que
requieren del oxgeno no pueden vivir en aguas contaminadas donde ocurra la
putrefaccin (se le considera la peor forma de contaminacin bacteriana).
Contaminacin del agua por microorganismos patgenos
Por regla general, se considera que el agua es aceptable para beber si: a)
contiene menos de 10 bacterias intestinales en cada litro de agua; b) si no presenta
mal sabor, olor, color o turbiedad; c) si no contiene impurezas qumicas en
concentraciones que puedan ser peligrosas para la salud del consumidor; d) si no son
corrosivas con respecto al sistema de conduccin del agua, y e) si no provienen de
sistemas acuferos sujetos a contaminacin por aguas negras u otros contaminantes.
El hombre vive en relacin ntima con los microorganismos sobre su piel y en su
sistema digestivo. En estado de salud, los humanos y los microbios viven juntos para
beneficio mutuo. Sin embargo, algunas personas sanas viven en armona con
organismos que pueden resultar patgenos para otros. Por ejemplo, algunas
personas estn adaptadas a las aguas con bacilos que provocan disentera en otras
personas. Por otra parte, resulta muy fcil contaminar el agua con microorganismos
como las bacterias intestinales por lo que es muy difcil mantener el agua potable
libre de bacterias intestinales y adems eliminarlas no es posible, ni benfico y
resulta muy costoso.

Las bacterias coliformes son microorganismos inofensivos para el hombre y

residen en su intestino grueso y abundan en la materia fecal. Forman parte de los
desechos de las aguas negras y no se desarrollan en el agua, de manera que un
recuento de las bacterias coliformes constituye un indicio del grado de
contaminacin de esas aguas.

Se considera que el nmero de microorganismos portadores de enfermedad

en el agua es proporcional al nmero total de microorganismos y que una cantidad
total baja representa un menor riesgo de contraer una enfermedad.
Sin embargo, se han dado casos en que enfermedades virales han sido
trasmitidas por aguas que cumplen estrictamente con las normas de control de
bacterias. Por consiguiente, la presencia de que cualquier impureza tpica de las
aguas negras, inclusive si no son perjudiciales en s mismas, implica que el agua en
que se encuentran no deja de ser fuente peligrosa de enfermedad.
El agua contaminada puede estar sucia, mal oliente, ser corrosiva, de mal sabor
o poco apta para lavar la ropa con ella. Sin embargo, para el hombre el efecto ms
perjudicial del agua contaminada ha sido la transmisin de enfermedades por
microorganismos que pueden habitar en ella. Por ejemplo, la fiebre tifoidea causada
por la bacteria salmonella typhi, el clera causada por la bacteria Vibrio cholerae
(1), la disentera provocada por parsitos como las amibas Entamoeba histoltica (2)
y la bacteria Shigella, la gastroenteritis causada por virus, bacterias y
protozoarios, la hepatitis infecciosa causada por el virus de la hepatitis y la
poliomielitis causada por el virus de la poliomielitis.

CONTAMINACION Y DEPURACION DEL AGUS RESIDUAL URBANA

GENERACION

ANALISIS

RESULTADOS

DEPURACION