UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA DE LA SELVA

FACULTAD DE RECURSOS NATURALES RENOVABLES

DEPARTAMENTO ACADEMICO DE CIENCIAS DE CIENCIAS EN LA

CONSERVACION DE SUELOS Y AGUA

ESTIMACION DE LA POBLACION ACTINOMYCETA EN EL SUELO EN EL

FUNDO DE LA FACULTAD DE AGRONOMIA

ALUMNO

CRUZ TORRES, Gian Marlon

PONCE VALENTIN, Yusy
SOTO GARCIA, Clovis
VILLAVICENCIO RAMOS, Cesar

PROFESOR

ING. GUERE SALAZAR, Fiorela

CURSO

MICROBIOLOGIA DE SUELOS

TINGO MARA- PER

2014-II

I.

INTRODUCCION

Los atinomicetos representan un grupo de microorganismos

ampliamente distribuido en ecosistemas naturales y tienen gran importancia en
la participacin de la degradacin de materia orgnica, adems de ciertas
propiedades fisiolgicas que los hacen particulares.
Son importantes en la mineralizacin de materia orgnica que
hongos y bacterias, ya que se regulan la composicin de la comunidad en el
ecosistema del suelo, los atinomycetos y microorganismos relacionados
probablemente representan el grupo ms grande y diverso. Ya que su
reproduccin es rpida es por ello que el siguiente proyecto, que se realizara
en el fundo de agronoma, estar basadas en el comportamiento que tienen los
atinomycetos en el suelo, tambin su incremento de poblacin de atinomyceto
en el suelo.
La importancia que tiene este grupo microbiano en la fertilidad del
suelo y en la produccin agrcola. Solo conocida por su capacidad de producir
antibiticos para su potencial en agricultura y mayor en la industria.
1.1.

1.2.

objetivos:
Determinacin de la poblacin actinomiceto en el suelo.
objetivos especficos:

Determinar la presencia de organismos en el suelo

Determinacin como influye la poblacin actinomyceta en el suelo.

II.

REVISION DE LITERATURA

2.1 Distribucin y densidad en el suelo.

Los Actinomicetos son abundantes y cosmopolitas en el ambiente:

lagos, ros, suelo y estircol de animales y aves; son aerobios en el suelo se
ubican en la superficie, aunque tambin viven en los horizontes inferiores, al
igual que gneros comunes de bacterias verdaderas Bacillus, Pseudomonas,
Agrobacterium en especial en suelo alcalino, la mayora de los Ac son
saprobios, mineralizan materia orgnica vegetal, animal, existen ciertos
gneros fitopatgenos: Streptomyces scabies al igual aquellos que causan
enfermedades en humanos: Nocardia, y animales como Actynomyces.

Los Actinomicetos en el suelo se estudian por mtodos

microscpicos, por cuenta viable en placa (CVP) en medios de cultivo para
bacterias heterotrficas como el agar nutritivo, es preferible en selectivos que
contienen quitina como nica fuente de carbono y antibiticos que inhiben
hongos, ya que tienen tiempo de generacin mayor al de bacterias nativas del
suelo

la

rizosfera

de

plantas

como:

Achromobacter,

Rhizobium,

Burkholderia,etc, es recomendable usar medios de cultivos especficos para su

aislamiento

En la naturaleza los Ac como el suelo se observan en hifas y

conidias, al inicio de la esporulacin generan poblaciones abundantes, donde el
tamao de la comunidad depende de la clase del suelo, de sus propiedades
fisicoqumicas como el contenido en materia orgnica, del pH en consecuencia
la estimacin por CVP seala valores que varan desde 1000 a 10,000,000/g
de suelo seco de una zona templada, en la mayora de los suelos el porcentaje
de Actinomicetos de la microbiota total se reduce con la profundidad, lo que
asociado con la concentracin diferencial de oxgeno y dixido de carbono

entre bacterias y Actinomicetos, en el horizonte C la densidad vara de 1000 a

1,000,000 UFC/g de suelo seco, sin embargo esto son valores relativos pues
no es posible diferenciar si esas colonias provenan de una conidia o una hifa

La abundancia de las conidias de los Actinomicetos, es un

respuesta a cualquier condicin ambiental adversa del suelo, as que algunos
generan esporas resistentes a la desecacin, las conidias son viables en suelo
seco por aos cuando el ambiente es desfavorable para la vida vegetativa, las
conidias tienen mayor tolerancia el calor que las hifas, resisten temperaturas
que inhiben la reproduccin del micelio, la conidia es menos tolerante al calor
que la espora bacteriana, normalmente la hifa muere pocos grados arriba de
la temperatura de crecimiento o causa la inactivacin de las conidias
2.2 Influencias ambientales sobre los actinomicetos

En

trminos

cualitativos

cuantitativos

la

poblacin

de

Actinomicetos al igual que su actividad mineralizante, dependen de la

concentracin de la materia orgnica, del pH, de la humedad, de la temperatura
y el cultivo vegetal sembrada en un suelo especfico.

La mineralizacin de los Ac en el suelo, est relacionada con la

concentracin de carbono disponible en especial con los que contienen altos
niveles de materia orgnica como el humus, lo anterior es posible medirlo
directamente por CVP o indirectamente con parmetros del metabolismo como:
la produccin de dixido de carbono, u amonio derivado de compuestos
proteicos, cidos nucleicos en el estircol animal, o en los restos de cultivos
agrcolas, todo lo anterior aumenta la densidad de Ac hasta 10,000,000 de UFC
de Ac/g del suelo seco.

El agregar restos de plantas en el suelo eleva la temperatura, tanto

la biota fngica como la bacteriana inicialmente proliferan, mientras que los Ac
no se estimulan hasta el final de la mineralizacin de la materia orgnica, lo
que indica que este proceso depende de la accin conjunta de bacterias y

hongos, mientras que los Ac aparecen cuando los compuestos fciles de

degradar desaparecieron y ya no existe competencia

Los Ac no toleran el pH cido, su densidad es inversa a la

concentracin del in hidrgeno; especies del gnero Streptomyces no
proliferan a pH menor 5.9, en suelo cido la proporcin de Ac es menor al 1%
del total de la poblacin microbiana, existen gneros resistentes a la acidez,
crecen mejor en microambientes donde el valor flucta entre 7 y 8 derivados de
los productos orgnicos alcalinos excretados por la actividad de la microbiota
hetertrofa acompaante, el pH lmite de crecimiento de los Ac es de 5.0 ello
tiene aplicacin prctica en el control de ciertas enfermedades vegetales
causadas por ste grupo, el uso intensivo del fertilizante nitrogenado con base
en el amonio que se oxida biolgicamente a cido ntrico, mientras el
encalamiento tiene un efecto benfico sobre los Ac, una condicin neutra o
alcalina estimula su crecimiento, mientras que el contenido de humedad de 85100% o inundacin los inhibe porque son aerbicos, no son afectados por la
condicin de semisequedad como las bacterias verdaderas, en contraste una
baja humedad induce la formacin de conidias, la densidad de Ac permanece
alta cuando el suelo se seca, pero el nmero de bacterias comunes disminuye
porque carecen de tolerancia a un ambiente rido. En una sequa severa en
Kenya, Africa; los Ac inicialmente representaban menos del 30% de colonias,
pero con el tiempo alcanzaron ms del 90% del total viable, en general en
suelo del desierto dominan la vida microscpica, la humedad est asociado con
la formacin y persistencia de sus conidias, las hifas requieren un por ciento de
humedad superior al 60% para mantenerse viables, este hecho demuestra que
las esporas o estructuras relacionadas de los Ac son ms resistentes a la
desecacin y persisten por periodos mayores de tiempo que otros grupos
microbianos del suelo.

El anlisis de la densidad de las hifas de Ac en portaobjetos de

vidrio enterrado en el suelo indica que un alto porcentaje son mesfilicos,
crecen poco a 5C y nada a 39C, al aumentar la temperatura de 5 a 27C se
favorece su crecimiento, el intervalo adecuado para su multiplicacin esta entre
28 a 37C. En sntesis la humedad, la temperatura y la cantidad de materia

orgnica derivada de las races, los restos vegetales, la estacin del ao

influyen en la diversidad y densidad de Ac mayor en primavera y otoo.

2.3 Clasificacin de actinomicetos

Actualmente en el suelo existe una alta densidad de Actinomicetos

mayor de los que se conocan antes, los que se dividen en las siguientes
familias de acuerdo con el Manual de Bergey 2000:

a. Streptomycetes tiene hifas no fragmentadas, un micelio areo extenso,

esporas en cadenas con 5 a 50 o conidias en cadena, los gneros
representativos son: Streptomyces, Microeliobosporia, Sporichthya.
b. Actinomycetes del tipo Nocardia, poseen hifas fragmentadas con
pequeas estructuras redondeadas o alongadas; el subgrupo uno que
contiene cido mcolico; el subgrupo dos est representado por el
gnero Pseudonocardia; el subgrupo tres por los gneros: Nocardioides
y Terrabacter; el subgrupo cuatro por: Promicronospora.
c. Actinoplanetes, tiene esporas en esporangios, el dimetro de las hifas
es de 0.2 a 2.0; los gneros tpicos son: Streptosporagium,
Actinoplanes,

Planobispora,

Dactylosporangium

forman

hifas

no

fragmentadas; con conidias aisladas, o de cadena corta los gneros

como:

Micromonospora,

Microbispora,

Micropolyspora,

Thermomonospora, Thjemoactnomices, Actinobifida

d. Gneros con esporangios diversos, los fragmentos de hifas se dividen
para dar estructuras redondas, mviles, el tpico es Geodermatophilus.
Mientras Frankia es un simbiote que fija nitrgeno molecular en rboles
no leguminosas del gnero Alnus cuando forma ndulos en sus races
por ello se fabrican inoculantes con base en ese gnero que se cultiva
en el laboratorio.
e. Madurromycetes tienen filamentos estables con una espora o de
cadena corta, los gneros representativos son: Microtetraspora,
Actinomadura, otros producen esporas mviles como: Planobispora,
Planomonospora, Spirillospora o bien aquel que tiene esporas inmviles
Streptosporangium.

f. Thermomonospora, tienen filamentos estables producen esporas

sencillas como el gnero Thermomonospora, en cadena como:
Actinosynnema, Nocardipsis, o aquel con una estructura parecida a un
esporangio representado por el gnero Streptoalloteichus.
g. Thermoactinomycetes, forman filamentos estables con una espora,
todas las especies son termfilas como: Thermoactinomyces.

En el suelo crece un amplio nmero de gneros y especies que

dominan en medio de cultivo selectivo inoculad, como: Streptomyces que
equivale al 70 a 90% del total, rara vez es baja, pero ciertas especies de este
gnero son el 5% del total de los Ac en algunos suelos, por ejemplo: Nocardia
es el segundo ms abundante entre 10 al 30% de las colonias en medio
selectivo, En general existen los Ac mesoflicos que producen conidas en el
extremo de la hifa que pertenece a Micromonospora, su hifa mide 0.3 a 0.8 de
dimetro liberan esporas redondas u ovaladas de 1.0 a 1.2 por 1.2 a 1.5 en el
extremo de los conidiforos como: Thermoactinomyces un termfilico
dominante en el abono en mineralizacin, cuando la temperatura se eleva
producto de proceso, las especies Micromonospora son el tercer grupo en
frecuencia con menos del 15% del total de los Ac que crecen en agar
especifico, los anteriores son miembros morfolgicamente distintivos de este
grupo bacteriano, en contraste las especies de Actinomyces poco comunes y
otras patgenas humanas

2.4 Papel delos actinomicetos en la agricultura

Los Actinomicetos se crecen lentamente en comparacin con las
bacterias verdaderas, por ello no son competidoras, su nmero disminuye al
elevar la concentracin de nutrientes orgnicos, por la presin de competencia
biolgica con otros grupos y cuando los nutrientes estn en baja concentracin
al inici de la mineralizacin de restos vegetales, dominan al limitarse la fuente
de carbono y nitrgeno la competencia disminuye, pues los Ac son
hetertrofos, dependen de la disponibilidad de compuestos orgnicos, de
carbono sencillo y luego del restante complejo; ejemplo los cidos orgnico,
azcares simples y ciertos polisacridos como: el almidn, la inulina, la quitina,
los lpidos, las protenas e hidrocarburos alifticos de cadena larga y los

aromticos; los Ac en cultivo puro mineralizan celulosa una lenta velocidad de

la descomposicin, tambin degradan protenas.

Las especies de Streptomyces hidrolizan la quitina, su adicin al

suelo estimula su proliferacin, las de Micromonospora tambin y otras la
celulosa y las hemicelulosas, las especies de Nocardia oxidan hidrocarburos
del tipo de las parafinas, fenoles, esteroides y pirimidinas como fuente de
carbono y energa, lo que se relaciona con la posibilidad de emplearlos en
biorremediacin ambientes contaminados con estos compuesto, adems
existen Ac oligoscarboflicos que crecen en ambientes o medio de cultivos
pobres en carbono orgnico.

El orden Actinomycetales se reconoce en la industria farmacutica

porque sintetizan metabolitos txicos, tres cuartas partes de gneros y
especies que viven en el suelo, los liberan al medio de cultivo inhiben el
crecimiento de bacterias, levaduras y hongos, el porcentaje de Ac que
producen antibiticos depende del tipo de suelo y de la estacin del ao,
existen una amplio nmero que inhibe microorganismos blanco sensibles a
esos antibiticos (patgenas humanas, animales o vegetales), mientras que las
especies de Streptomyces liberan enzimas extracelulares que atacan bacterias
verdaderas,

tales

enzimas son

consideradas claves

en

el

equilibrio

microbiolgico del suelo.

Los Ac en su mayora son mesfolitos crecen a temperatura de

entre 25-30C, un tercio son termofilicos y/o l termfilos facultativos que se
reproducen en el intervalo 55-65C. Los termofilicos son comunes en el suelo,
en el estircol, en la paja, algunos tambin usan la quitina como nica fuente
de carbono, combinado con peptona, sales minerales a pH de 7.5 si se
mantienen a elevada temperatura, como en el abono caliente, la poblacin de
Ac termofilicos es numerosa entre 50-65C se reportan de 1000-100,000/g de
suelo seco, los ms comunes en procesos as son: Thermoactinomyces y
Streptomyces.

El anlisis microscpico y microbiolgico del suelo y abono indica

que los Ac son de menor impacto que bacterias y hongos pero participan en:

a) Mineralizan algunos poliscaridos resistentes del tejido vegetal y animal,

aunque no responden inmediatamente al enriquecimiento carbono
orgnico, no compiten con las bacterias verdaderas ni con los hongos por
carbohidratos simples- pero si por los compuestos resistentes a la
mineralizacin.
b) Participan en la formacin de humus mediante la oxidacin de restos
vegetales y hojas de la porcin orgnica del suelo, algunos gneros de Ac
al crecer en medio de cultivo sintetizan molculas complejas que son
bsicas en la fraccin de humus en suelo.
c) Realizan la mineralizacin de abono verde, de paja y estircol a elevada
temperatura donde dominan los gneros como: Thermoactinomyces,
Streptomyces, la superficie de estos materiales puede ser blanca o gris
tpica por la actividad de ese grupo.
d) Patogenos vegetales: Streptomyces scabies y S. ipomoeae son
fitopatgenos, causan la roa de la papa, y la viruela del camote
e) Nocardia asteroides y N. otitidis-caviarum causan infecciones en humanos
y animales.
f) Existen los que en asocian con rboles fijan N2 en races vegetales como
Frankia para solucionar problemas de reforestacin y degradacin de
suelos, con acciones del tipo de las bacterias promotoras del crecimiento
vegetal y con el uso potencial como inoculantes biolgicos

III.

MATERIALES Y METODOS

3.1 Ubicacin
El siguiente estudio se realizara en el fundo Agronoma, ingresando por la
puerta principal de la facultad de Agronoma llegamos as al rea de
estudio que es aproximadamente 1 Ha.

3.2 Materiales
Machete
Palana
Libreta de notas
GPS
Muestra de suelo
Cajas de Petri estriles
Pipetas estriles o micropipetas
Tubos con solucin salina 9 mL
Agitador
Bacterias Gram
Incubadora
Microscopio

3.3 Metodologa
Secado al aire
1. Dejar secar al aire la muestra suelo por 48 horas
2. Realizar disoluciones 1 gramo hasta 10-5
3. Sembrar en superficie alcuota de 2.1 mL de 10-3 y 10-5
4. Incubar a temperatura por 7 12 das
Calentamiento de la suspensin-dilucin de suelo
1. Preparar una dilucin de 10-2 (1 gramo en 99 mL de agua destilada)

2. Preparar la disolucin siguiente 10-3 (1 mL de 10-2 en 9 mL de agua

destilada)
3. Calentar la suspensin 10-3 a 45 C por 16 horas
4. Sembrar 0.1 mL de la ltima disolucin en agar caseinato de sodio
5. Incubar 7 12 das a temperatura ambiente
3.4 Procedimientos:

Se realiz la recoleccin de muestras en fundo de agronoma de la

Universidad Nacional Agraria de la Selva.

Las muestras se tomaron de una capa que no exceda los 30 cm de

profundidad

Se realiz el secado de la muestra a temperatura ambiente durante 48

horas

Luego de haber secado la muestra, se separ 10 gramos de suelo para

realizar las disoluciones y sembrar en el agar, se pas a realizar la
incubacin durante 10 das

PLAN DE EJECUCION

Tiempo
Actividad
Solicitud de permisos
Reconocimiento del
lugar
Recoleccin de
muestras
Anlisis de la muestra
Interpretacin de la
muestra
Evaluacin de datos
Tabulacin de datos
Redaccin
Presentacin de

meses 2014
septiembre octubre noviembre diciembre
1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4
x
x
x
x
x
x
x
x x x
x x

proyecto
Sustentacin de
proyecto

x x

PRESUPUESTO

RUBRO
I. COSTO DIRECTO
1. Mano de obra
Deshierbo y limpieza
Recoleccin de muestras
3. Herramientas
GPS
Bolsas
Machete
Wincha
Pala recta
4. Equipo
USB
5. Materiales
Plumn indeleble
Lapicero
Libreta de campo
6. Transporte
Movilidad
7. Otros
Impresin
Servicio de anlisis de suelo

Unidad

Cantidad

Costo unid. S/

Jornal
Jornal

1
1

25
0

Unidad
Unidad
Unidad
Unidad
Unidad

1
5
2
1
2

15
0.5
9
25
20

Unidad

20

Unidad
Unidad
Unidad

1
2
1

5
0.5
5

Pasaje

Global

Global

Unidad
Unidad

2
1

10
30

Total S/.
25
25
0
100.5
15
2.5
18
25
40
20
20
11
5
1
5
5
5
40
10
30

II. COSTO SUBTOTAL

201.5

III. COSTO INDIRECTO

Imprevistos (15%)

30.2

IV. COSTO TOTAL

231.7

BIBLIOGRAFIA

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