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THERMOSULFIDOXIDANS
Cristian Guisande Donado
CINDEFI - CONICET
INTRODUCCIN
Este seminario es una breve recopilacin de informacin acerca del
Sulfobacillus Thermosulfidooxidans.
Esta bacteria fue encontrada en un cultivo de ka muestra Bao 9
(Copahue) en medio MAC 1.8 + Fe(II) (5.58 g/L)
Fue sembr en placas de Petri doble capa agarosa con Fe(II)+S4O6-2
Posteriormente se cultivo por separado en medios MAC 1.8 + Fe(II)
(5.58 g/L) y MAC 3.0 + S4O6-2(3 g/L)
Fue identificada tras la secuenciacin del DNA codificante para el
RNA-16S y la posterior comparacin con la base de datos BLASTN
con un 99% de identidad .
CLASIFICACIN
Dominio
Bacteria
Filo
Firmicutes
Clase
Clostridia
Orden
Clostridiales
Familia
Gnero
Sulfobacillus
Especie
Sulfobacillus thermosulfidooxidans
CARACTERISTICAS
Caracterstica
Type Strain
Descripcin
AT-1, DSM 9293, VKM B-1269
Gram
Positivo
Forma
Bastn
Largo
1-6 m
Dimetro
Colonias en agar +Fe(II)
Existencia
Endosporas
0.6-0.8 m
Redondas, brillantes, inicialmente amarillas luego marrn
rojizo.
En pares o cadenas cortas
Endosporas esfricas o ligeramente ovalada se encuentran
subterminalmente, terminal, o paracentralmente.
CARACTERISTICAS
Caracterstica
pH de crecimiento
Rango
1.5 -5.5
Temperatura de crecimiento
20-60 C
Crecimiento
Descripcin
Optima
1.9-2.4
50-55C
Aerbico Estricto.
Anaerobiosis no ocurre con NO3 Mixotrofico y organogrfico facultativo
Oxida Fe+2, S0, S2O32-, S4O6 2 y sulfuros minerales en
presencia de sustrato orgnico
Crece poco organotroficamente en: EL, CASEINA,
CLUCOSA, SCUROSA, FRUTOSA TREALOSA, MANOSA,
RAFINOSA, GLUTAMATO y GLUTATIONATO REDUCIDO
El crecimiento autotrfico es muy pobre.
MEDIO DE CULTIVO
DSM665. SULFOBACILLUS MEDIUM
Solucin B:
Solucin A:
(NH4)2SO4
3.00 g
FeSO4 7 H2O
44.20 g
KCl
0.10 g
Agua destilada
300.00 ml
K2HPO4
0.50 g
H2SO4, 10 N
1.00 ml
MgSO47 H2O
0.50 g
Ca(NO3)2
0.01 g
Agua destilada
700.00 ml
Solucin C:
Extracto de levadura (1% p/v en agua)
20.00 ml
LOCALIZACIN NATURAL
Menas mierales
Habitat
Sitios Acidos Sulfurosos
fumarolas, lugares volcanicos
pasivos mineros, drenajes accidos,
Pirita
Arsenopirita
Sulfuros de Cobre
Sulfuro de Zinc
Distribucin Geogrfica
Inglaterra Europa Escandinavia Islandia
Norte America
Sudamerica
Russia Eastern Europe (DSM 9293,Kazakhstan)
India Pakistan
Asia Pacifico
MORFOLOGIAS
Bulaev, A. G. et al. Polymorphism of Sulfobacillus thermosulfidooxidans strains dominating in processes of high-temperature oxidation of gold-arsenic
concentrate. Microbiology 80, 326334 (2011).
MORFOLOGIA
Bulaev, A. G. et al. Polymorphism of Sulfobacillus thermosulfidooxidans strains dominating in processes of high-temperature oxidation of gold-arsenic
concentrate. Microbiology 80, 326334 (2011).
ENSAYOS REALIZADOS Y
APLICACIONES BIOTECNOLOGICAS
[Fe(II)]initial (g L1 )
2
5
10
15
20
Bio-oxidation rate
(g L1 h1 )
0.292 0.034
0.480 0.056
0.697 0.140
0.643 0.058
0.654 0.067
Yield (
E9 cells g1 )
4.177 0.960
7.616 1.197
4.206 0.522
3.197 0.993
3.909 0.534
RESISTENCIA A METALES
Concentraciones de metales en solucin ms altas en las que se observo
crecimiento bacetriano crecimiento bacteriano en test de toleracian a metales.
Tolerancia metal (g/L)
Aislado
Fe
Cu
Zn
Ni
Co
N1-45-01
2.5a
15
35
4.4
19
13
1.5
N19-45-01
4.4
50
50
<5
N45-45-02
2.5a
35
10
10
N1-45-02
3.2a
35
13
N45-45-01
2.8a
20
10
N19-50-01
2.5a
50
35
10
<5
N22-45-01
4.4
50
50
<5
<5
Watkin, E. L. J. et al. Metals tolerance in moderately thermophilic isolates from a spent copper sulfide heap, closely related to Acidithiobacillus caldus,
Acidimicrobium ferrooxidans and Sulfobacillus thermosulfidooxidans. J. Ind. Microbiol. Biotechnol. 36, 461465 (2009).
RESISTENCIA A METALES
Elemento (g/L)
Cu
Ni
Co
Zn
As(V)
S. acidophilus
b 0.3
0.6 (1.5)
2.9 (5.9)
1.6 (3.3)
1.9 (3.7)
S. thermosuldooxidans
19 (22)
8.8 (11)
1.5 (2.9)
13 (16)
3.7 (7.5)
S. thermotolerans
1.6 (3.2)
0.6 (1.5)
b 0.3
1.6 (3.2)
3.7 (7.5)
S. sibiricus
19 (22)
0.6 (1.5)
0.3 (0.6)
3.3 (6.5)
7.5 (11)
BIOLIXIVIACIN DE CALCOPIRITA
Lixiviacin de Calcopirita a 50C
Medio de Cultivo: DSM 150
Potencial redox
pH
Fe(II),
Cu , and Fe(TOT)(filtrado)
Stott, M. & Sutton, D. Comparative leaching of chalcopyrite by selected acidophilic bacteria and archaea. Geomicrobiol. 3741 (2003).
doi:10.1080/01490450390206692
BIOLIXIVIACIN DE PIROTITA
Efectos del ajuste de pH (H2SO4 4M): Extraccin Total 65.28% contra 23.8%
Medio 9K: 3.0 g/L (NH4)2SO4, 0.1 g/L, KCl, 0.5 g/L K2HPO4, 0.5 g/L MgSO47H2O, 0.01 g/L Ca(NO3)2.
S(10g/K) + EL (0.02%; pH=1.6 Condiciones: 52C, 160rad/minc
Ni, Z., Gu, G., Yang, H. & Qiu, G. Bioleaching of pyrrhotite by Sulfobacillus thermosulfidooxidans. J. Cent. South Univ. 21, 26382644 (2014).
BIOLIXIVIACIN DE PIROTITA
Efectos de la concentracin de pulpa: altas concentraciones inhiben el proceso
Medio 9K: 3.0 g/L (NH4)2SO4, 0.1 g/L, KCl, 0.5 g/L K2HPO4, 0.5 g/L MgSO47H2O, 0.01 g/L Ca(NO3)2.
S(10g/K) + EL (0.02%; pH=1.6 Condiciones: 52C, 160rad/minc
Ni, Z., Gu, G., Yang, H. & Qiu, G. Bioleaching of pyrrhotite by Sulfobacillus thermosulfidooxidans. J. Cent. South Univ. 21, 26382644 (2014).
BIBLIOGRAFIA/REFERENCIAS
Milton S da Costa, Fred A Rainey, Luciana Albuquerque. "Chapter: Genus Sulfobacillus". IN: Paul De Vos, George M Garrity, Doroty
Jones, Noel R Krieg, Wolfgang Ludwig, Fred A Rainey, Karl-Heinz Schleifer, William B Whitman. Bergeys Manual of Systematic
Bacteriology Vol. 3, 2nd ed, New York, Springer, 2009: pages Vol. 3, 1181-1184;
Donati , Sand. Microbial Procesing of Metal sulfides - New York, Springer,
Catalog of MicrLeibniz-Institut DSMZ - Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH
Bulaev, A. G. et al. Polymorphism of Sulfobacillus thermosulfidooxidans strains dominating in processes of high-temperature
oxidation of gold-arsenic concentrate. Microbiology 80, 326334 (2011).
Ni, Z., Gu, G., Yang, H. & Qiu, G. Bioleaching of pyrrhotite by Sulfobacillus thermosulfidooxidans. J. Cent. South Univ. 21, 26382644
(2014).
Stott, M. & Sutton, D. Comparative leaching of chalcopyrite by selected acidophilic bacteria and archaea. Geomicrobiol. 3741
(2003). doi:10.1080/01490450390206692
Pina, P. S., Oliveira, V. a., Cruz, F. L. S. & Leo, V. a. Kinetics of ferrous iron oxidation by Sulfobacillus thermosulfidooxidans. Biochem.
Eng. J. 51, 194197 (2010).
van der Merwe, J. a., Deane, S. M. & Rawlings, D. E. The chromosomal arsenic resistance genes of Sulfobacillus thermosulfidooxidans.
Hydrometallurgy 104, 477482 (2010).
Watkin, E. L. J. et al. Metals tolerance in moderately thermophilic isolates from a spent copper sulfide heap, closely related to
Acidithiobacillus caldus, Acidimicrobium ferrooxidans and Sulfobacillus thermosulfidooxidans. J. Ind. Microbiol. Biotechnol. 36, 461
465 (2009).
Watling, H. R., Perrot, F. a. & Shiers, D. W. Comparison of selected characteristics of Sulfobacillus species and review of their
occurrence in acidic and bioleaching environments. Hydrometallurgy 93, 5765 (2008).
MUCHAS GRACIAS!