UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA

LA MOLINA

FACULTAD DE CIENCIAS

PROYECTO DE TESIS:
CONSTRUCCIN Y EVALUACIN DE UN PURIFICADOR DE AGUA
PARA E. COLI POR FOTOCATLISIS PARA LA LOCALIDAD DE
TANCARPATA, CUSCO
EJECUTOR:
Janzen Fausto Trujillo Valverde

ASESORA:
Rosemary Vela Cardich

La Molina, 2013
1

INDICE
I.

INTRODUCCIN ................................................................................................................. 3

II.

PROBLEMA DE LA INVESTIGACIN ................................................................................ 4

III.

OBJETIVOS DE LA INVESTIGACIN............................................................................. 5

IV.

JUSTIFICACIN DE LA INVESTIGACIN ..................................................................... 6

V. MARCO TERICO............................................................................................................... 8
5.1.

Procesos avanzados de oxidacin..................................................................................... 8

5.2.

Fotocatlisis heterognea: tio2 ......................................................................................... 9

5.3.

Aplicaciones de la fotocatlisis heterognea tio2 ............................................................. 12

5.4.

Inmovilizacin con tio2 ................................................................................................. 14

5.5.

Escherichia coli ............................................................................................................ 14

5.6.

Metodologas clsicas de desinfeccin de agua ............................................................... 16

5.7.

Mecanismo de desinfeccin por uv ................................................................................ 17

5.8.

Reactores fotocatalticos para tratamiento de agua .......................................................... 18

5.9.

Diseo de reactores para fotocatlisis ............................................................................. 19

METODOLOGA ............................................................................................................ 23

VI.
6.1.

Tipo de Investigacin.................................................................................................... 23

6.2.

Formulacin de la Hiptesis .......................................................................................... 23

6.3.

Identificacin de variables............................................................................................. 23

6.4.

Definiciones operacionales ............................................................................................ 27

6.5.

Diseo de la investigacin ............................................................................................. 29

6.6.

Instrumentos de colecta de datos.................................................................................... 32

6.7.

Procedimientos de anlisis de datos ............................................................................... 33

VII.

CRONOGRAMA............................................................................................................. 34

VIII. PRESUPUESTO .............................................................................................................. 37

IX.
X.
XI.

COLABORADORES ....................................................................................................... 38
REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS ................................................................................... 39
ANEXOS ........................................................................................................................ 42

I.

INTRODUCCIN

En Amrica Latina, cerca de la mitad de la poblacin que vive en reas rurales, no tiene
acceso a servicios de saneamiento mejorado y aproximadamente un 20% an no cuenta con
agua potable (Pearce, 2011). Del mismo modo, el 8% del total de las muertes de nios de
cinco aos o menos es causado por diarrea crnica (Craun, 1996 de Rincn, 2005) Las
enfermedades infecciosas, en su mayora intestinales, van desde una leve gastroenteritis hasta
diarreas severas (a veces fatales), hepatitis y fiebre tifoidea. El mayor riesgo de enfermedades
transmitidas por el agua se observa en nios, ancianos, personas dbiles o que viven en
condiciones insalubres. En la Regin Cusco, el dficit de cobertura de abastecimiento de agua
y saneamiento bsico es mucho ms crtico en las zonas rurales que en las zonas urbanas. El
INEI estim para el Cusco, en el ao 2002, una cobertura de agua de 60.21% y 39.67% de
saneamiento (COSUDE, 2007).

En este contexto, se hace necesaria la implementacin de sistemas de potabilizacin de agua

en estas localidades que puedan funcionar de manera sencilla y econmica. Los procesos
avanzados de oxidacin

son una alternativa viable para llevar a estas comunidades rurales

agua con la calidad necesaria para consumo humano, brindndoles una mejor calidad de vida.
Uno los procesos avanzados de oxidacin ms utilizado es el de fotocatlisis heterognea; el
efecto antibacterial de la fotocatlisis con TiO 2 ha sido demostrado con Escherichia coli y
Lactobacillus (Escudero, 2010).

En el presente estudio se pretende disear, construir y evaluar un purificador de agua para E.

coli (utilizado como indicador de materia fecal y contaminacin microbiolgica) por efecto
fotocatlisis para su uso en la localidad de Tankarpata, distrito de San Sebastin, en la
provincia de Cusco, Cusco. Dicha localidad sufre por la falta de agua potable, siendo los ms
perjudicados los nios con enfermedades estomacales (ONG Cooperar Per, 2013)..

II.

PROBLEMA DE LA INVESTIGACIN

En la Regin Cusco, el dficit de cobertura de abastecimiento de agua y saneamiento bsico

es mucho ms crtico en las zonas rurales que en las zonas urbanas. El INEI estim para el
Cusco, en el ao 2002, una cobertura de agua de 60.21% y 39.67% de saneamiento
(COSUDE, 2007). El presente proyecto de tesis tiene como propsito la construccin de un
purificador de agua para consumo humano por efecto de fotocatlisis para la eliminacin o
inactivacin de bacterias E. coli. El purificador tendr como principio desinfectante la
radiacin de un fluorescente que emite ondas de longitudes de 254 nm con el uso de dixido
de titanio (TiO 2 ) fijado en vidrio esmerilado como fotocatalizador. Este dispositivo ser
utilizado en la localidad de Tancarpata, debido a que sus habitantes consumen el agua de las
quebradas cercanas a dicha localidad sin ningn tratamiento previo de potabilizacin. Al
mejorar la calidad del agua que consumen, los habitantes de Tancarpata tendrn una mejor
calidad de vida y se podr disminuir las enfermedades ligadas al E. coli, sobretodo en la
poblacin infantil.

Investigaciones anteriores muestran una eficiente disminucin de coliformes y contaminantes

(hasta cinco unidades logartmicas) en agua con un tiempo de exposicin de hasta cinco horas
(Delgado et al. 2007). El resultado que se espera obtener es la disminucin de coliformes (en
especial las de E. coli) de las muestras de agua de la comunidad hasta obtener resultados
prximos a 0 UFC/mL.

En primera lugar se realizar la construccin del purificador consistente en un paraleleppedo

de vidrio fijado con dixido de titanio (TiO2 ) en la cara interior con un tubo fluorescente en el
medio del sistema y un pequeo motor para la recirculacin del sistema en el Laboratorio de
Ingeniera Ambiental de la Universidad Nacional Agraria La Molina. Luego se realizarn
pruebas continuas para evaluar el tiempo de retencin necesaria para la eliminacin eficaz de
coliformes y por ltimo se realizar el trabajo de campo en el centro poblado de Tancarpata,
con el apoyo de la ONG Cooperar Per que realiza trabajos de educacin y salud en los nios
del mencionado centro poblado. El trabajo de gabinete, el estudio preliminar en el laboratorio
y el trabajo en campo tendr una duracin de 9 meses.
4

III.

OBJETIVOS DE LA INVESTIGACIN

1. OBJETIVO PRINCIPAL:

Disear, construir y evaluar un purificador de agua para E. coli por efecto

fotocatlisis para su uso en la localidad de Tancarpata, regin Cusco.

2. OBJETIVOS ESPECFICOS:

Ensamblar el prototipo de purificador fijando TiO 2 (dixido de titanio) en vidrio

esmerilado en las caras interiores del purificador, acoplando todas las partes y
sellando el sistema purificador.

Realizar ensayos con el purificador con una solucin de bacterias E. coli en

laboratorio y evaluar la eficiencia de remocin de E. coli.

Caracterizar la calidad de agua superficial utilizada para consumo humano en la

localidad de Tancarpata, en la Regin Cusco y evaluar sus niveles de
contaminacin microbiolgica.

Realizar ensayos y evaluar la eficiencia de remocin de E. coli en las muestras de

agua en la localidad de Tancarpata con el purificador diseado.

IV.

JUSTIFICACIN DE LA INVESTIGACIN

En Amrica Latina, cerca de la mitad de la poblacin que vive en reas rurales, no tiene
acceso a servicios de saneamiento mejorado y aproximadamente un 20% an no cuenta con
agua potable (Pearce, 2011). Las enfermedades transmitidas por el agua pueden tener
diferentes vectores; en trminos generales, el principal riesgo de enfermedad est asociado
con la ingestin de aguas superficiales o

subterrneas contaminadas con bacterias

provenientes de materia fecal humana o animal. En Amrica Latina, 8% del total de las
muertes de nios de cinco aos o menos es causado por diarrea crnica (Craun, 1996 de
Rincn, 2005) Las enfermedades infecciosas, en su mayora intestinales, van desde una leve
gastroenteritis hasta diarreas severas (a veces fatales), hepatitis y fiebre tifoidea. El mayor
riesgo de enfermedades transmitidas por el agua se observa en nios, ancianos, personas
dbiles o que viven en condiciones insalubres.

Pizarro et al. (2005) indican que los desinfectantes ms frecuentemente usados, como O 3 , Cl2 ,
ClO2 y cloraminas pueden conducir a la formacin de compuestos residuales nocivos, no
tienen efecto residual, etc. Particularmente, en comunidades pequeas y reas rurales, la
desinfeccin con cloro es a menudo el nico tratamiento disponible para el agua de consumo
humano, sin embargo, este tipo de desinfeccin no ha sido siempre implementado de la mejor
manera en zonas rurales debido a problemas financieros que resultaron en sistemas
intermitentes, malas dosificaciones o pobres operaciones y mantenimiento. Un reciente
estudio realizado en el Valle del Cauca, descubri que la desinfeccin con cloro fue aplicado
solo en el 23% de todo el suministro de agua en zonas rurales. El 77% de los sistemas
utilizados con cloro fueron potencialmente inseguros (Rincn, 2005). Mientras que la mayora
de los agentes desinfectantes normalmente utilizados en aguas inactiva los microorganismos
por una interaccin (reaccin) qumica, la inactivacin de los microorganismos por
irradiacin se debe a la absorcin de radiacin ultravioleta (UV) de alta energa, que causa
reacciones fotoqumicas de los componentes fundamentales de las clulas, perjudicando as su
funcionamiento normal. Por ejemplo, se interrumpe el mecanismo de duplicacin, o se
provoca la muerte de la clula (Guimaraes, 2001).

La fotocatlisis heterognea muestra una serie de ventajas, ya que evita la formacin de

compuestos halogenados, que pueden ser peligrosos (carcinognicos o mutagnicos) o
malolientes; por otra parte, no es una tcnica cara, parece actuar sobre todos los tipos de
bacterias, incluyendo Gram (+) y (-) y otros microorganismos. Debido a esto, se puede que es
particularmente conveniente para poblaciones rurales y remotas (campamentos, instalaciones
militares), y para la desinfeccin de aguas municipales ya que no requiere suministro de alto
voltaje como el ozono y puede ser usado inclusive con luz solar (Guimaraes, 2001). La
construccin de un purificador de agua para la eliminacin de contaminantes microbiolgicos
solucionar en gran parte la necesidad de agua potable en las comunidades rurales, con
potencial de contaminacin del agua por sus actividades ganaderas y agrcolas debido a su
facilidad de uso, bajsimo costo energtico, facilidad de recambio y la larga duracin de sus
componentes.

V.

MARCO TERICO

5.1.
PROCESOS AVANZADOS DE OXIDACIN
Los procesos avanzados de oxidacin (PAO) son procesos fisicoqumicos que involucran la
generacin y uso de especies transitorias altamente reactivas principalmente del radical libre
hidroxilo (HO*) que posee alta efectividad para la oxidacin de materia orgnica. Este radical
puede ser generado por medio fotoqumicos (incluida luz solar) o por otras de energa,
suministrando una mayor factibilidad termodinmica y un incremento en la velocidad de
reaccin en el tratamiento de agua contaminada. El OH* reacciona de 10 6 a 1012 veces ms
rpido que oxidantes alternativos como el O 3 . Adems, esta especie es el segundo mejor
oxidante conocido despus del flor, con un potencial de oxidacin de 2,80 V (Escudero
.2010).

Las ventajas que tienen los PAO sobre los mtodos de tratamiento convencionales, segn
Bernabeu (2012), son muchas:

En algunos tratamientos, se consigue a un tratamiento biolgico, ya que permitira

reducir los costes de operacin degradando hasta la formacin de CO 2 ;

Es posible realizar acoplamiento a un tratamiento biolgico, ya que permitira reducir

los

costes

de

operacin

degradando

los

contaminantes

hasta

alcanzar

la

biodegradabilidad deseada;

Las condiciones de operacin no son complejas, ya que se trabaja en condiciones

atmosfricas, y adems, se realiza el aprovechamiento de energa renovables como es
el caso de la radiacin solar para la activacin del fotocatalizador;

En el caso de la fotocatlisis heterognea con TiO 2 , este es estable en un rango de pH

muy amplio, por lo que junto a su bajo coste parece ser idneo para su aplicabilidad en
estos tratamientos;

Aplicacin de bajas concentraciones de reactivos, por lo que se ecita la generacin de

grandes cantidades de residuos;

Elevada eficiencia en la degradacin de compuestos halogenados, los cuales presentan

altas toxicidades en fangos activados;

Las especies oxidantes generadas durante el tratamiento (radicales hidroxilo), no presentan

una elevada selectividad en cuanto al compuesto a degradar, por lo que son capaces de
oxidar una gran variedad de compuestos orgnicos

Cuadro 1. Relacin de procesos fotoqumicos y no fotoqumicos.

PROCESOS NO FOTOQUMICOS

PROCESOS FOTOQUMICOS

Ozonizacin en medio alcalino

(O3/OH-)

UV/peryodato

Ozonizacin con perxido de

hidrgeno (O3/H2O2)

Ferrioxalato y otros complejos de

Fe (III)

Procesos Fenton (Fe2+/ H2O2) y

relacionados

Fotlisis del agua en el ultravioleta

al vaco (UVV)

Oxidacin electroqumica

UV/perxido de hidrgeno

Radilisis y tratamiento con haces

de electrones

UV/O3

Plasma no trmico

Foto-Fenton y relacionadas

Descarga electrohidralicaUltrasonido

Fotocatlisis heterognea
FUENTE: Escudero, 2010

5.2.
FOTOCATLISIS HETEROGNEA: TiO2
En este tipo de tratamientos, el contaminante y el fotocatalizador se encuentran en fases
distintas, normalmente el fotocatalizador (semiconductor) se encuentra en estado slido
formando una suspensin (ej: TiO 2 , ZnO), y el contaminante est disuelto en la fase acuosa.
9

La formacin de especies oxidantes se realiza a partir de la generacin inicial de pares

electrn/hueco. La radiacin solar recibida por el fotocatalizador, con energa superior al
ancho de banda del fotocatalizador (E>EG=3.2 eV), produce la promocin de electrones a la
banda de conduccin, y por lo tanto, genera huecos en la banda de valencia. A su vez, se
forman especies reactivas asociadas a la banda de conduccin. Por otra parte, los huecos
generados pueden reaccionar en disolucin acuosa promoviendo la formacin de otro tipo de
oxidantes, con potenciales de oxidacin inferiores al radical hidroxilo. Posteriormente, se
produce la reaccin con el contaminante presente en el agua residual (Hoffmann M. R. y col.
1995, Banerjee S. y col. 2006, Ahmed S. y col. 2011 de Bernabeu, 2012).

A manera de plasmar la serie de reacciones individuales que describen el proceso

fotocataltico, consideremos una partcula de TiO 2 (semiconductor), las principales subetapas
de la reaccin intrnseca son (Escudero, 2010):

Generacin de pares e-/h+ cuando el TiO 2 absorbe radiacin con energa igual o
superior a la energa del ancho de banda:

Transferencia de un electrn del sustrato adsorbido (RXad), agua adsorbida (H2 O ad) o
del in OH adsorbido (OHad), al hueco formado:

Transferencia del electrn de la partcula a un aceptor de electrones como el O 2 *:

Las especies generadas, como el radical anin superxido pueden a su vez participar
en las siguientes reacciones:

10

Asimismo, en presencia de fotones de energa adecuada, el perxido de hidrgeno

puede participar en la generacin de radicales libres OH*:

Finalmente, los radicales OH* oxidan contaminantes orgnicos adsorbidos (RXad) sore
la superficie de las partculas de dixido de titanio:

Figura 1: Superficie del semiconductor TiO2 con absorcin directa de fotones con
energa igual o superior a la banda ancha de energa prohibida

FUENTE: Candal et al, 2001; Grupo Tar, 2011 de Villanueva 2011

11

5.3.
APLICACIONES DE LA FOTOCATLISIS HETEROGNEA TiO2
Entre los contaminantes en agua que se han tratado con fotocatlisis-TiO2 se encuentran los
fenoles, compuestos muy txicos incluso a muy bajas concentraciones (1-20 mg/L); los
compuestos orgnicos clorados, compuestos peligrosos y difciles de tratar con mtodos
convencionales; algunos productos farmacuticos, biocidas que no pueden ser tratados
mediante sistemas biolgicos; residuos de la limpieza de tanques portuarios, tales como
metilditiocarbamato sdico, percloroetileno, tricloroetileno, cloruro de metileno, etc. El efecto
antibacterial de la fotocatlisis-TiO 2 ha sido demostrado con Escherichia coli y Lactobacillus,
adems se ha informado la desinfeccin de los virus Phage MS2 y poliovirus; los plaguicidas,
generalmente se deben tratar como disoluciones o suspensiones multicomponentes muy
diluidas (concentraciones <1000 mg/L), en pequeos volmenes que pueden recircularse
(Escudero, 2010).

12

Cuadro 2: Campo de aplicacin del TiO2

CAMPO

APLICACIN

FUNCIONES REQUERIDAS

Sistemas de distribucin de

Eliminacin de material

agua potable

txico/olores
Herbicidas en

Presas/lagos

Agua

agua/desinfeccin/adsorcin

Agua almacenada en tanques

Desinfeccin

Baos/piscinas

Desinfeccin

Tanques de alimentacin de

Herbicidas en

peces

agua/limpieza/desinfeccin

Bahas/puertos

Aire

crudo

Drenaje de fbricas de

Limpieza de agua derrames de

semiconductores

cloroetileno

Drenaje de campos de golf

Limpieza de agua con pesticidas

Disposicin de NOx

Oxidacin

Interiores de casas-habitacin

Eliminacin de olores

Hospitales

Desinfeccin

Bloqueos de arena de parques

infantiles
Suelo

Limpieza de derrames de petrleo

Desinfeccin

reas de ganado

Eliminacin de olores

Campos de golf

Limpieza de zonas con herbicidas

FUENTE: Escudero, 2010

El mecanismo de accin de los sistemas de desinfeccin de aguas se basa en la promocin de

la oxidacin de los fosfolpidos poli-insaturados componentes de la membrana, produciendo
un desorden celular en la clula por fallas en su membrana (Maness et al. 1999, de De la Hoz
2007). A nivel de laboratorio, la Eschirichia coli se ha utilizado como microorganismo
modelo en la mayora de los estudios de desinfeccin del agua con luz UV (200 < < 400
nm) o con lmparas que simulan la luz solar; algunos estudios se realizaron con luz solar real.
13

Se usaron diferentes tipos y tamaos de reactores, con TiO 2 en suspensin, se han utilizado
con este mismo propsito: fotorreactores batchcon volmenes entre 10 y 50 mL, reactores con
lmpara inmersa, reactores coaxiales. En otros casos, se fij el TiO 2 sobre placas de vidrio,
sobre tubos de slica y sobre superficies plsticas (Rincn, 2005).

5.4.
INMOVILIZACIN CON TiO2
En las aplicaciones fotocatalticas, el TiO 2 puede ser dispuesto en suspensiones o soportado
sobre diferentes sustratos como vidrio, cuarzo y metales, dependiendo de la fase en que se
realice el proceso y de la configuracin del foto -reactor. Problemas tcnicos en el manejo de
suspensiones, como aglomeracin, segregacin y la posterior separacin del medio de
reaccin para la limpieza y reus del catalizador, han promovido el desarrollado de estudios
relacionados con la inmovilizacin del foto catalizador TiO 2 sobre diferentes sustratos, en los
cuales generalmente se obtienen materiales con menor rea superficial activa, pero con
condiciones mecnicas y operacionales apropiadas para ser usados en procesos fotocatalticos
aplicados a situaciones prcticas. Dado tambin, que el uso de TiO 2 en polvo implica la
necesidad de incorporar una etapa de separacin y recuperacin del catalizador, es
conveniente su inmovilizacin sobre distintos sustratos. Algunas de las vas conocidas para la
fijacin de TiO 2 son el mtodo sol-gel, solgel combinado y el proceso por inmersin
(Grieken et al., 2009; Vera, 2008; Duffy et al., 2004 de Acevedo, 2012).

5.5.
ESCHERICHIA COLI
E. coli es una bacteria Gram negativa, mvil, facultativa, taxonmicamente es una
Enterobacteria y hace parte del grupo de coliformes totales, sub-grupo coliformes fecales; se
encuentra en el intestino de animales de sangre caliente, haciendo parte de la carga intestinal
normal de este. Esta y otras bacterias como Clostridium perfringens o Enterococcus faecalis,
se caracterizan por ser indicadores de contaminacin fecal de agua, ya que su presencia
informa una contaminacin fecal resiente, antigua o contaminacin por heces de animales
homotermos, respectivamente.

Las principales fuentes de contaminacin son la escorrenta agrcola, las descargas de aguas
residuales e infiltracin de materia fecal de animales domsticos o salvajes. Normalmente se
14

encuentran en el tracto intestinal de animales de sangre caliente sin causar algn tipo de. Sin
embargo, algunos serotipos s son patgenos conformando el grupo de E. coli verotoxignicos
(ECVT), haciendo parte de este grupo el serotipo altamente virulento O157:H7 (EHEC),
cepas enterotoxignica (ETEC), cepas eneteropatgena (EPEC) y cepas enetroinvasivas
(EIEC) (Madigan

et al., 2003 de Villanueva, 2011); estos patgenos son considerados

emergentes y causan graves patologas en el ser humano, siendo los rumiantes son el principal
reservorio. El agua constituye un vehculo importante de transmisin, se ha documentado la
presencia del serotipo E. coli O157:H7 en este tipo de recurso, siendo introducido por el riego
en cultivos con agua contaminada con heces del ganado o que estuvo en contacto previo con
superficie contaminadas (Ethan et al., 2002 de Villanueva, 2011).

Aproximadamente el 95% del grupo de los coliformes presentes en heces fecales estn
formados por E. coli. Ya que los coliformes fecales se encuentran casi exclusivamente en las
heces de animales de sangre caliente, se considera que reflejan mejor la presencia de
contaminacin fecal. Los coliformes fecales se denominan termotolerantes por su capacidad
de soportar temperaturas ms elevadas. Esta denominacin est ganando ms adeptos
actualmente, pues sera una forma ms apropiada de definir este subgrupo que se diferencia de
los coliformes totales por la caracterstica de crecer a una temperatura superior. La capacidad
de reproduccin de los coliformes fecales fuera del intestino de los animales homeotrmicos
es favorecida por la existencia de condiciones adecuadas de materia orgnica, pH, humedad,
etc (Campos, 2001).

Campos (2001) indica que el grupo de microorganismos coliformes es adecuado como

indicador de contaminacin bacteriana por las siguientes razones:

Son contaminantes comunes del tracto gastrointestinal tanto del hombre como de los
animales de sangre caliente.

Estn presentes en el tracto gastrointestinal en grandes cantidades.

Permanecen por ms tiempo en el agua que las bacterias patgenas.

Se comportan de igual manera que los patgenos en los sistemas de desinfeccin.

15

El E. coli es una bacteria usada como indicador biolgico o de eficiencia de desinfeccin en

tratamientos de agua (Rincn, 2005).

5.6.
METODOLOGAS CLSICAS DE DESINFECCIN DE AGUA
Entre los agentes qumicos de desinfeccin ms utilizados, se destacan el cloro elemental
gaseoso (Cl2 ), el hipoclorito (ClO -), la mezcla de cloro con amonaco (Cl2 /NH3 ) que forman
cloramina, el dixido de cloro (ClO 2 ), el ozono (O 3 ) y el permanganato de potasio (KMnO 4 ).
Entre los agentes fsicos se utiliza extensamente la luz ultravioleta. Se han desarrollado
mtodos modernos que se basan en la generacin de oxgeno libre por absorcin de radiacin
por un colorante, la irradiacin con rayos y la fotocatlisis heterognea UV/TiO 2
(Guimaraes, 2001). En el siguiente cuadro se muestran los efectos bactericidas y remanentes
de algunos de los tratamientos de aguas y aire:

Cuadro 3. Efecto bactericida y remanente de algunos de los tratamientos comunes de

aguas y aire.

TIPO

EFECTO BACTERICIDA

EFECTO REMANENTE

O3

+++

Cl2

++

Cloraminas

++

UV

++

Colorantes/luz visible

En estudio

ClO2

++

Irradiacin

+++

+++

UV/TiO 2

Esterilizacin

En estudio
FUENTE: Guimaraes, 2001

Leyenda:
+++

M uy efectivo

++

Efectiva

Poco efectiva

Nada efectiva

16

5.7.
MECANISMO DE DESINFECCIN POR UV
El mecanismo de desinfeccin por UV depende de la absorcin de la radiacin por las
protenas, y por los cidos nucleicos (RNA y DNA) de un microorganismo dado. La
absorcin de dosis altas de UV por las protenas presentes en las membranas celulares lleva a
la ruptura de esas membranas y, consecuentemente, a la muerte de la clula. Del mismo
modo, la absorcin de dosis ms bajas de UV por el DNA puede interrumpir la capacidad del
microorganismo de reproducirse, impidindole infectar el medio. El DNA es un cido
nucleico que contiene una secuencia de cuatro bases nitrogenadas (adenina, citosina, guanina
y timina), secuencia que constituye el cdigo gentico. Las dos hlices que constituyen el
DNA permanecen unidas por los enlaces de hidrgeno que se establecen entre bases
apareadas de ambas hlices (por ejemplo, adenina con timina y citosina con guanina).
Algunas molculas presentes en el DNA, como las purinas y pirimidinas, absorben
fuertemente la radiacin ultravioleta (con un mximo en 254 nm) y sufren cambios qumicos,
como formacin de dmeros e hidratos. La dimerizacin de la timina ha sido considerada
como la causa principal del efecto mutagnico de la radiacin UV. Si una de dos timinas
adyacentes absorbe un fotn UV, se forma el dmero y se romper la estructura del DNA; se
bloquea as la elongacin de las cintas hijas durante la replicacin del DNA y se inhibe la
capacidad de reproduccin del microorganismo. ste es el mecanismo fundamental de la
desinfeccin UV (Bolton, 1999 de Guimaraes, 2001).

FIGURA 2. Dimerizacin fotoqumica de dos bases de timina

FUENTE: Guimaraes, 2001

17

En el proceso de desinfeccin con radiacin ultravioleta pueden ocurrir dos fenmenos. Bajo
algunas condiciones, ciertos microorganismos poseen la capacidad de reparar el dao causado
al DNA durante la exposicin y retornar al estado original, inclusive volvindose a reproducir.
Con algunas clulas daadas puede ocurrir el proceso de fotorreactivacin: si la dimerizacin
no es muy irreversible, radiacin entre 330-500 nm, puede catalizar la ruptura de los dmeros
y producir reversin (Guimaraes, 2001).

5.8.
REACTORES FOTOCATALTICOS PARA TRATAMIENTO DE AGUA
Un reactor fotocataltico es un equipo en cuyo interior tiene lugar una reaccin qumica
iniciada por la incidencia de fotones en el reactante, estando ste diseado para maximizar la
conversin y selectividad de la misma con el menor coste posible. Existen varios aspectos en
el diseo, optimizacin y operacin de reactores fotocatalticos que deben ser considerados en
el diseo. Segn Escudero (2010), algunos de estos aspectos son los siguientes:

La seleccin de la fuente de irradiacin incluyendo el poder lumnico, la eficiencia de

la fuente, la distribucin espectral, la forma, las dimensiones, los requerimientos de
mantenimiento y operacin (periodo de calentamiento y enfriamiento).

Diseo de la geometra del reactor con respecto a la fuente de irradiacin.

El diseo del dispositivo de irradiacin del reactor, incluyendo espejos, reflectores y

ventanas, los materiales de construccin, forma, dimensiones y procedimientos de
limpieza.

Segn Escudero (2010), los reactores fotocatalticos para el tratamiento de agua se pueden
clasificar de acuerdo a sus caractersticas de diseo:

Estado del fotocatalizador: Este puede estar suspendido o adherido a un soporte:

o

Reactores fotocatalticos agitados (catalizador en suspensin)

Reactores fotocatalticos con el catalizador inmovilizado (fijado a un soporte)

Tipo de iluminacin: El tipo de irradiacin es un asunto mayor en el diseo de

foto reactores. Los reactores pueden ser irradiados usando:
o

Lmparas de UV policromticas
18

Luz solar

Los reactores iluminados por luz solar se subdividen en dos categoras: reactores
solares no concentrados y los concentrados. Los primeros emplean intensidades
iguales o menores a la irradiacin solar natural, mientras que los reactores solares
concentrados utilizan intensidades de irradiacin que superan la equivalente a la
del Sol.

Posicin de la fuente de irradiacin: La posicin de la lmpara o fuente de

irradiacin es una caracterstica distinguible de un reactor fotocataltico. La
posicin de la lmpara determina diferentes configuraciones:
o Reactores con una fuente de luz inmersa
o Reactores con una fuente de luz extensa
o Reactores con fuentes de luz distribuidas

En los reactores con fuente inmersa, la lmpara se ubica dentro de la unidad. En

los de fuente externa, las lmparas se colocan fuera del reactor. En los reactores
con fuentes distribuidas, la irradiacin es transportada de la fuente al reactor por
medios pticos, tales como reflectores o guas de luz.

5.9.
DISEO DE REACTORES PARA FOTOCATLISIS
Existen varios factores importantes a la hora de disear un reactor fotocataltico dado que la
necesidad de utilizar un catalizador slido complica el proceso al aadir otra fase al sistema.
En este tipo de reactores es evidente que, adems de tener que conseguir un buen contacto
entre los reactivos y el catalizador (elevada rea superficial de catalizador por unidad de
volumen del reactor), es igualmente necesario lograr una exposicin eficiente del catalizador a
la luz til para el proceso (distribucin ptima de luz dentro del reactor). Adems hay que
considerar los parmetros convencionales tales como distribucin de flujo, mezclado e
interaccin entre reactivos y catalizador, transferencia de masa, etc, que juegan un papel muy
relevante (Blanco et al, 2001).

19

Entre los parmetros limitantes de diseo se encuentra la disposicin del catalizador,

concentracin e iluminacin del catalizador, dimetro del reactor y tiempo de residencia:

5.9.1. Disposicin del catalizador

La disposicin del catalizador dentro del reactor, as como el tipo de soporte inerte a utilizar,
si no se quiere trabajar con suspensiones, es un aspecto todava a desarrollar ya que existen
mltiples propuestas y no hay una decisin sobre cul sera ms idnea. Se ha usado para ello
tanto vidrio (en forma de bolas o depositando el catalizador directamente sobre la superficie
del tubo por donde circula el agua), como diferentes materiales cermicos, polmeros e
incluso algunos metales. Estos soportes pueden ser en forma de malla, reticulares, etc. Las
ventajas de trabajar con el catalizador inmovilizado en vez de en suspensin son claras: se
evita la separacin posterior al tratamiento, su recuperacin en unas condiciones ptimas que
permitan su reutilizacin y la re suspensin del slido como paso previo del proceso. Las
desventajas de la utilizacin de soportes dentro del reactor seran:

La disminucin de superficie de TiO 2 activada, en un determinado volumen de reactor, en

comparacin con el mismo volumen con catalizador en suspensin.

Limitaciones en la transferencia de materia a bajos caudales. Este efecto es ms intenso

cuando se aumenta la potencia de iluminacin, no aprovechndose una buena parte de
ella. Cuando esto ocurre, la velocidad de reaccin no aumenta al hacerlo el flujo de
fotones.

Dificultades para conseguir una correcta iluminacin, cuando la fuente de fotones no se

sita en el interior del reactor. Esto es particularmente problemtico cuando se pretende
trabajar con radiacin solar.

Aumento de la prdida de carga del reactor. La consecuencia es un incremento de los

costes energticos, y del capital, ya que se deben instalar sistemas de bombeo de mayor
potencia (Blanco et al, 2001).

5.9.2. Concentracin e iluminacin del catalizador/dimetro del reactor

Existen varias consideraciones respecto a la concentracin del catalizador (si no est fijado),
la forma en que la radiacin incide sobre el reactor y la longitud del camino ptimo de esta en
20

su interior. Estos ltimos dos factores son fundamentales para determinar la concentracin
ptima del catalizador. Blanco et al (2001) indica lo siguiente:

Si la lmpara est en el interior de reactor y coaxial con ste, la concentracin de TiO 2 es

muy alto (del orden de varios gramos por litro) si el camino ptico es corto (varios mm);
en cambio, la concentracin TiO 2 es bajo (cientos de mg por litro) si alcanza varios
centmetros.

Si la lmpara est en el exterior, pero el camino ptico es corto (1-2 cm), la eficiencia
mxima se consigue con 1-2 gr/L de TiO 2 .

Si la lmpara est en el exterior (similar a lo que se produce en un reactor iluminado por

radiacin solar), pero el camino ptico alcanza varios centmetros, la concentracin
adecuada de catalizador es de unos cientos de miligramos por litro.

En

todos

los

casos

anteriormente

expuestos,

se produce tambin un efecto

de

"apantallamiento", cuando la concentracin de TiO 2 es muy alta. La velocidad de reaccin

disminuye debido a la excesiva opacidad de la disolucin, que impide que el catalizador de la
parte ms interna del reactor se ilumine.

FIGURA 3. Efecto de apantallamiento en funcin de la posicin de la fuente de

alimentacin

FUENTE: Blanco et al; 2001

21

5.9.3. Tiempo de residencia

Otro parmetro altamente relevante, tanto en procesos fotocatalticos en fase acuosa como
gaseosa, es el Tiempo de Residencia o tiempo que cada unidad de fluido va estar expuesto a la
radiacin en su pase por el reactor. Este parmetro puede no ser relevante en el caso de
procesos en recirculacin, pero si resulta evidente que se trata de un parmetro fundamental
cuando se pretende completar el proceso fotocataltico con un nico paso por el reactor
(procesos en lnea), ya que en este ltimo caso hay que conseguir que el tiempo de residencia
en el reactor sea, cuando menos, igual al tiempo requerido por el proceso fotocataltico.
Un parmetro que nos permite modificar el tiempo de residencia es, obviamente, el caudal
msico que se tenga en el proceso. Sin embargo este no siempre es posible modificarlo
libremente por cuestiones del propio proceso que genera dicho caudal o bien por posibles
restricciones del propio proceso fotocataltico (sedimentacin de catalizador en fase acuosa,
suministro de oxgeno al proceso, consumo energtico inadecuado, etc.).

22

VI.

METODOLOGA

6.1. Tipo de Investigacin

El tipo de investigacin planteada en el presente proyecto de tesis es del tipo explicativo

experimental debido a que se realizarn diferentes ensayos con la manipulacin de las
variables en estudio, tales como la concentracin de E. coli, el tiempo de retencin de la
muestra y el tipo de longitud de onda (o la ausencia) con el cual se irradiar las muestras de
agua, para analizar la eficiencia del purificador de agua.

6.2. Formulacin de la Hiptesis

El diseo y el funcionamiento adecuado de un purificador de agua por fotocatlisis
heterognea lograrn una disminucin de la concentracin de la bacteria Eschirichia Coli en
el agua a tratar hasta niveles aceptables para el consumo humano en la localidad de
Tancarpata, en la regin Cusco.

6.3. Identificacin de variables

6.3.1. pH del agua: Dependiendo del pH del medio de reaccin, el catalizador presentar
diferentes estados superficiales que afectan a su comportamiento como adsorbente y,
por tanto, a la eficiencia de contacto con las especies participantes en las reacciones.
En el caso del TiO 2 , su punto isoelctrico est directamente relacionado con la
tendencia a la floculacin, con lo que una modificacin del pH del medio condicionar
el estado de agregacin de sus partculas. Asimismo, los compuestos a degradar
pueden presentarse en distintas formas qumicas, de mayor o menor accesibilidad para
el catalizador (Pizarro, 2005). Esta es una variable independiente.

6.3.2. Temperatura del agua. Dado que la activacin del fotocatalizador tiene lugar por
absorcin de energa radiante, la temperatura del medio de reaccin no desempea un
papel relevante en este sentido. No obstante, a partir de ciertas temperaturas puede
23

producirse la excitacin trmica generando niveles energticos. Otros parmetros

como la solubilidad y volatilidad de los contaminantes y dems especies partcipes
(O2 , aditivos, Fotocatlisis heterognea, etc.), o la cintica de adsorcin-desorcin de
las molculas sobre el catalizador, deben tenerse en consideracin a la hora de
seleccionar la temperatura de trabajo (Pizarro, 2005). Es una variable independiente.
6.3.3. Oxgeno disuelto. El comportamiento del oxgeno como aceptor de electrones permite
el desarrollo

de

las

reacciones

fotocatalticas minimizando

los procesos de

recombinacin de los pares e -h+, a la vez que no compite con el contaminante por los
sitios de adsorcin. Diversos estudios han confirmado que la ausencia de O 2 en el
medio

de

reaccin

conduce

la

inactividad

del catalizador.

En

cambio,

investigaciones empleando otras sustancias con afinidad electrnica han obtenido

actividad concluyendo que el O 2 no es imprescindible para esas condiciones. En
cualquier caso, si se suministra O 2 debe asegurarse una presin parcial del mismo
constante en todo el proceso, con el fin de no convertir esta variable en la etapa
limitante sobre la velocidad global de reaccin (Villanueva, 2011). Es una variable
dependiente.
6.3.4. Longitud de onda: La foto actividad de los semiconductores slo se manifiesta cuando
sobre ellos incide radiacin cuya energa asociada sea igual o superior a la separacin
energtica entre las bandas de valencia y de conduccin. Por ejemplo, en el caso del
TiO 2 en su forma cristalina anatasa con un valor de EG de 3,2 eV, la longitud de onda
umbral (EG) es de 390 nm. A partir de este punto, si se utilizan longitudes de onda
inferiores, la velocidad de reaccin es independiente y constante, si bien pueden
aparecer efectos de ruptura fotoltica de molculas cuando se emplean radiaciones
demasiado energticas, falseando los resultados obtenidos. Por otro lado, debe tenerse
en cuenta que los propios reaccionantes podran absorber parte de la radiacin til, lo
que supondra una disminucin del rendimiento fotnico.
La intensidad de la radiacin utilizada ha de ser suficiente para alcanzar todas las
partculas del catalizador y provocar la generacin de los pares de carga. Se ha
encontrado que la velocidad de reaccin es directamente proporcional a la cantidad de
24

fotones absorbidos, con un comportamiento de orden 1, hasta un determinado valor de

intensidad. A partir de este valor el orden parcial pasa de 1 a 0,5 debido a que el
aprovechamiento de los fotones empieza a estar limitado por el fenmeno de
recombinacin de los electrones y huecos. A mayores intensidades de radiacin se
produce un nuevo cambio a orden cero que indica que el catalizador no puede generar
ms pares aun cuando aumente el flujo radiante (Blanco et al, 2001). Es una variable
dependiente
6.3.5. Concentracin de E. coli en el agua. El grado de concentracin y la velocidad de las
reacciones fotocatalticas estn vinculados a la naturaleza del contaminante a degradar,
ya que esta determinar tanto su estabilidad qumica como la complejidad del
mecanismo de reaccin.. De manera general, las reacciones fotocatalticas presentan
una cintica de acuerdo con las ecuaciones de tipo Langmuir-Hinshelwood (Pizarro,
2005). Es una variable dependiente
6.3.6. Aditivos. Es habitual la incorporacin al medio de reaccin de compuestos con
capacidad aceptora de electrones que reducen la recombinacin de los pares e-h+,
donde el ms efectivo resulta ser el O 2 , seguido de otros como el H2 O 2 , S2 O8 2 , O 3 , etc.
En cambio, la presencia de otros aditivos o impurezas pueden ejercer un efecto
negativo sobre la eficacia del proceso al competir con el sustrato por los sitios de
adsorcin del catalizador. Es el caso de aniones como los SO 4 2 , PO 4 3 y Cl o de
cationes como Ca2+, Mn2+y Ni2+ (Pizarro, 2005). Esta variable ser analizada si se
observase la necesidad de utilizar los aditivos debido a la posible poca efectividad del
reactor fotocataltico.

6.3.7. Concentracin y situacin del TiO 2 . El primer aspecto a considerar es la cantidad de

catalizador utilizado, puesto que constituye la fuente de generacin de los pares de
carga reactivos. Es evidente que la velocidad de una reaccin fotocataltica guardar
una proporcionalidad directa con la concentracin de catalizador, si bien a partir de un
valor lmite esta dependencia es cada vez menos acusada debido a que los fenmenos
de dispersin y apantallamiento de la radiacin comienzan a hacerse significativos
impidiendo la completa iluminacin del slido. Es una variable independiente.
25

Asimismo,

las caractersticas intrnsecas del catalizador desempean un papel

importante sobre la eficacia del proceso fotocataltico:

6.3.7.1.Propiedades cristalinas. Influyen principalmente sobre la produccin de los
pares e-h+ y su disponibilidad para las reacciones redox superficiales.
Destacan el grado de cristalinidad del material, las fases cristalinas presentes
y proporcin de cada una de ellas, as como el tamao de los cristales. Por
ejemplo, de las dos fases cristalinas del TiO 2 ms frecuentes, anatasa y rutilo,
la primera ofrece los mejores resultados de transformacin de contaminantes.
Debe entenderse, tambin, que la presencia de defectos en la estructura del
cristal pueden favorecer los procesos de recombinacin.

6.3.7.2.Propiedades texturales. Afectan especialmente a la eficiencia del contacto

entre el catalizador y las especies reaccionantes. Por regla general, interesan
fotocatalizadores con un rea superficial alta y distribucin de tamao de
partcula uniforme y forma esfrica (Pizarro, 2005).
6.3.8. Diseo del reactor fotocataltico. El diseo de los fotorreactores est supeditado a dos
dificultades inherentes a la fotocatlisis heterognea: debe asegurar el perfecto
contacto entre dos fases diferentes (slido-fluido) y permitir la iluminacin uniforme
de todas las partculas del catalizador. Las configuraciones desarrolladas son diversas,
basndose en aspectos como localizacin de la fuente de radiacin (externa o interna),
intervalo de longitudes de onda requeridos, operacin en continuo o por cargas, en
fase lquida o gas, etc. En la actualidad, la mayor parte de las instalaciones
fotocatalticas han sido diseadas con fines de investigacin, para obtener datos
cinticos que puedan ser extrapolados al desarrollo de aplicaciones reales futuras. Esta
situacin supone que las configuraciones disponibles suelen estar bastante alejadas de
la viabilidad tcnica y econmica. Por ejemplo, el empleo de lmparas de UV
inhabilita el tratamiento fotocataltico dado el encarecimiento del proceso, siendo
deseable el aprovechamiento de la luz solar como fuente de radiacin. Asimismo, los

26

caudales y composicin de las corrientes reales a tratar exigen un cambio de escala

que afecta al diseo del reactor (Pizarro, 2005). Es una variable independiente.

6.3.9. DQO y DBO 5 . La DQO y DBO 5 son medidas de la cantidad de oxgeno utilizado en la
oxidacin qumica y biolgica de la materia orgnica e inorgnica presente en el agua
y son unos parmetro secundarios utilizados para evaluar la efectividad de la
biorremediacin como tratamiento de aguas residuales y de consumo humano
(Acevedo, 2012). Son variables independientes

6.3.10. Turbidez. Debe tenerse en cuenta que una alta turbidez en el agua a tratar no permitir
aplicar la dosis adecuada de radiacin para la desinfeccin total del agua. Sin
embargo, la eficiencia de la desinfeccin continuar aumentando incluso despus de
alguna cada en la radiacin (Acevedo, 2012) Es una variable independiente.

6.4. Definiciones operacionales

VARIABLE
EN ESTUDIO

METODOLOGA DE MEDICIN

REFERENCIA

MTODO POTENCIOMTRICO
- Realizar la calibracin del pH-metro con la
solucin calibradora.
pH

-Colectar en un vaso de precipitados de 50 mL una

muestra del agua a evaluar.

Bernabeu, 2012
Villanueva, 2011

-Medir el pH de la muestra cuando se encuentre el

equilibrio de las lecturas.
-Anotar los valores registrados.
TERMOMETRA
Temperatura del -Colectar en un vaso de precipitados una muestra
agua

del agua a evaluar.

-Realizar la medicin con un termmetro de

27

---

mercurio o alcohol.
PLAQUEO MICROBIANO
-Se cultivar cepas E. coli entregadas por el
Laboratorio de Microbiologa de la UNALM en
medios de cultivo estndar.
Concentracin
de E coli

-Los cultivos frescos se inocularn en caldos de

cultivo y se mantendrn durante una noche en

Izurrieta, 2001

agitacin a 37 C.
-Se determinar su concentracin a travs del
conteo de Unidades Formadoras de Colonias
(UFC/mL).
Se utilizar un multiparmetro con un sensor
especfico para oxgeno disuelto.
-Calibrar el sensor de oxgeno disuelto.
Oxgeno
disuelto

-Colocar en un vaso de precipitados de 50 mL la

muestra a evaluar.

Visitacin, 2011

-Colocar el sensor de oxgeno disuelto dentro de la

muestra.
-Esperar la estabilizacin de la lectura.
-Anotar los datos recolectados.
-Preparar el agua de dilucin con 1mL de buffer
fosfato con un litro de agua desmineralizada.
-Realizar mediciones de pH de las muestras, debe
encontrarse entre 6.5 y 7.5 y la temperatura en 20
C.

DBO5

-Realizar varias diluciones a la muestra.

-Medir el OD con el multiparmetro.
-Incubar a 20 C las botellas de DBO con las
diluciones.
-Despus de 5 das de incubacin determinar el OD
en las muestras diluidas.
28

Visitacin, 2011

MTODO DE REFLUJO CERRADO

-Precalentar el digestor de DQO a 150 C. Destapar
el vial que contiene los reactivos de digestin.
-Pipetear cuidadosamente 2.0 mL de la muestra
dentro del vial.
Preparar los testigos con agua desionizada.
DQO

-Colocar el vial en el reactor precalentado e iniciar

el conteo de dos horas.
-Trasvasar el contenido del vial a un vaso de

Medicin colorimtrica
5220D Stndar
Methods, 2005.
Acevedo, 2012

precipitados de 50 ml y agregar indicador ferron.

-Titular con solucin de sulfato ferroso amoniacal
hasta el cambio de color azul a naranja pardo.
-Realizar los clculos estequiomtricos.
-Calibrar el Turbidmetro
-Agitar la muestra y esperar que las burbujas de aire
desaparezcan.
-Enjuagar la celda limpia tres veces con un
Turbidez

volumen pequeo de muestra. Limpiar con papel

CEPIS, 2004

toalla el agua y huellas digitales de la celda.

-Colocar la celda en el compartimiento del equipo y
cerrar la cubierta
-Leer directamente el valor en el turbidmetro.

6.5.Diseo de la investigacin
6.5.1. Diseo del purificador: Siguiendo los conceptos de Cassano et al (2001) que
explica sobre el balance de masa, velocidad de reaccin y volumen de agua a
utilizar; de Gimnez y Curc (2001) sobre los modelos de emisin de radiacin y
las comparaciones de las distintas opciones de diseo de reactores y materiales
realizado por Blanco et al (2001) se disear el purificador dando prioridad a la
facilidad de su construccin, puesta en marcha y costo de construccin. Se realizar

29

el diseo con un caudal de diseo de aproximadamente 5 L. Este diseo ser

plasmado en dibujos realizados por el software AutoCAD 2013.
6.5.2. Construccin del purificador
6.5.2.1.Fijacin del TiO 2 a las paredes del purificador: Se fijar el dixido de titanio
sobre las caras interiores del purificador, siendo este de vidrio esmerilado tal
como lo desarroll Clark et al (2004). Se agitarn 2 gr. de TiO 2 en 1 L de agua
destilada y la suspensin se volcar en un bao chato conteniendo ocho placas
de vidrio esmerilado (dos de ellas con orificios para la entrada y salida del
agua) con el lado esmerilado hacia arriba. Despus de 12 horas de
sedimentacin del TiO 2 sobre el lado esmerilado, las placas de vidrio se
extraern de la suspensin y se las dejar secar al aire por 12 horas en un
soporte vertical. Cada placa ser recubierta dos veces de esta forma. No se
observ depsito sobre el lado no esmerilado del vidrio. El vidrio ser
calentado en un horno a 300 C durante 1 hora con el lado recubierto hacia
arriba. Se pesarn las placas de vidrio antes y despus del tratamiento para
conocer cuanto TiO 2 fue fijado.
6.5.2.2.Instalacin del recipiente del purificador con el motor de recirculacin: Se
unirn las placas de vidrios fijados con dixido de titanio (TiO2 ) con silicona,
realizando un purificador con una geometra de paraleleppedo y con un
interior de forma hexagonal. Posteriormente se ensamblar el fluorescente UV
por dentro y en el centro del purificador para lograr una mxima radiacin en el
sistema. Luego se sellarn las mangueras en los orificios de las placas de vidrio
y por ltimo se cerrar el sistema con la unin de las mangueras con un motor
de pecera que recircular el agua a tratar de nuevo al purificador.
6.5.3. Desarrollo de soluciones de bacterias Eschirichia coli: El caldo de cultivo utilizado
en todos los ensayos en laboratorio ser suministrado por el Laboratorio de
Microbiologa de la Facultad de Ciencias de la Universidad Nacional Agraria La
Molina. El caldo de bacterias con una concentracin conocida (deseablemente de
10^5 UFC/100mL) ser diluido en agua destilada para alcanzar concentraciones
30

que van de los 1.000 a 3.000 UFC/ 100mL. La solucin final obtenida de la
dilucin, ser vertida en el purificador para la experimentacin.

6.5.4. Pruebas y comparacin del funcionamiento del purificador en laboratorio:

6.5.4.1.Ensayos sin radiacin UV: Se desarrollarn ensayos con el purificador
construido y con la solucin de E. coli. En primer lugar se realizar una prueba
con el purificador con el motor de pecera encendido pero no el fluorescente por
un rango de tiempo de 2 horas, donde cada 20 minutos se realizarn muestreos
para evaluar la eficiencia de inactivacin o desinfeccin de E. coli en el agua
(Rincn,

2003).

Estas muestras sern evaluadas en el laboratorio de

Microbiologa de la UNALM para su anlisis de recuento de bacterias, adems

servir como blanco para los siguientes ensayos.

6.5.4.2.Ensayo con radiacin UV: Se realizar la misma prueba con todos los
elementos del purificador encendidos. Una vez recolectado los datos de
remocin de E. coli, se compararn las eficiencias a travs de grficas Tiempo
(minutos) versus concentracin de E. coli. Estas muestras sern evaluadas en el
laboratorio de Microbiologa de la UNALM para su anlisis de recuento de
bacterias.
6.5.5. Caracterizacin del agua de consumo humano en Tancarpata: Se realizarn
muestreos de agua superficial en las quebradas utilizadas por los pobladores de la
comunidad de Tancarpata como fuente de agua para consumo humano. En este
proceso se realizarn mediciones in situ (pH, temperatura OD y turbidez) y se
preservarn muestras para analizarlas en laboratorio (DBO, DQO y conteo de E.
coli) tal como lo indica el Protocolo Nacional de Monitoreo de la Calidad en
Cuerpos Naturales de Agua Superficial (2011). Estas muestras preservadas sern
enviadas a un laboratorio acreditado por el INDECOPI para el anlisis de
concentracin de E. coli (UFC/ 1mL) presente en el agua; por otro lado, se
realizarn los anlisis de DBO y DQO en el Laboratorio de Ingeniera Ambiental de
la Universidad Nacional Agraria La Molina.
31

6.5.6. Pruebas del purificador en Tancarpata: Se realizarn ensayos con el purificador y el

agua para consumo humano en la localidad de Tancarpata. Se realizar una prueba
por un intervalo de 2 horas donde cada 20 minutos (Rincn, 2003) de recolectarn
muestras de agua para evaluar la remocin o desinfeccin de la bacteria en estudio
a travs del tiempo, temperatura y otros factores ambientales caractersticos de la
localidad. Estos ensayos se realizarn tres das consecutivos para garantizar una
mayor cantidad y calidad de los resultados.
6.5.7. Determinacin del tiempo de retencin: Al recopilarse la informacin, se proceder
a encontrar el tiempo de retencin adecuado para la localidad de Tancarpata, siendo
este el tiempo que demor el purificador en eliminar o inactivar la totalidad de
bacterias E. coli en el agua en tratamientos en los ensayos realizados.
6.5.8. Anlisis de resultados: Se realizar un anlisis estadstico de los resultados
obtenidos por pruebas de anlisis de varianza, al 95% de probabilidad (Prueba F)
entre el resultado de la prueba en blanco y la prueba con el purificador.

6.6.Instrumentos de colecta de datos

DATO A COLECTAR

INSTRUMENTO

MARCA

Ph

Ph-metro

WTW 330-I

Temperatura

Termmetro de alcohol

---

Oxgeno disuelto

oxmetro

WTW 340-I

Turbidez

Turbidmetro

HACH

DQO

Digestor

HACH

DBO

Sensor de oxgeno disuelto

en multiparmetro

Concentracin de E. coli en

Microscpio

la muestra

Placa Naubahuer

32

WTW 340-I

3M

6.7.Procedimientos de anlisis de datos

Debido a que este proyecto de tesis no compara la desinfeccin del agua para consumo
humano por TiO 2 con otras diferentes tcnicas de desinfeccin, no se realizar diseos
factoriales estadsticos. Despus de obtenerse los resultados de recuento de bacterias se
realizar un anlisis de los resultados a travs de grficas de relacin Tiempo versus
Concentracin de E. coli (UFC/mL) tal como lo realizado por Rincn (2005). Este tipo de
grficas permite visualizar la evolucin de la inactividad de E. coli y la desinfeccin del agua
a travs del transcurso del tiempo. Este tipo de grficas se efectuarn con el software Excel
2010. Las grficas tambin sealarn el tiempo necesario para que el purificador desinfecte el
agua con E. coli cuando la lnea de concentracin cruce la recta de las ordenadas. Adems, se
realizarn pruebas de varianza (al 95% de probabilidad) para validar los resultados
estadsticamente con una Prueba F.

33

VII. CRONOGRAMA
Las actividades ha realizarse estn programadas de las siguiente manera
ENERO 2013
ACTIVIDADES

Bsqueda de informacin
bibliogrfica
Presentacin del Proyecto de tesis
Aprobacin del Proyecto de tesis
Redaccin de Tesis
Etapa de diseo
Clculos de diseo
Ensamblado del purificador
Pruebas en laboratorio
Recopilacin de datos
Anlisis de resultados
Pruebas en campo
Periodo de espera de resultados
Anlisis de resultados
Revisin final de documento de Tesis
Presentacin del documento de Tesis
Sustentacin

04-10

11-17

18-24

FEBRERO 2013

25-31

01-07

34

08-14

15-21

MARZO 2013

22-28

01-07

08-14

15-21

22-28

27-31

MAYO 2013
ACTIVIDADES

01-07

08-14

15-21

Bsqueda de informacin bibliogrfica

Presentacin del Proyecto de tesis
Aprobacin del Proyecto de tesis
Redaccin de Tesis
Etapa de diseo
Clculos de diseo
Ensamblado del purificador
Pruebas en laboratorio
Recopilacin de datos
Anlisis de resultados
Pruebas en campo
Periodo de espera de resultados
Anlisis de resultados
Revisin final de documento de Tesis
Presentacin del documento de Tesis
Sustentacin

35

JUNIO 2013

22-28

29-31

01-07

08-14

15-21

22-28

29-30

JULIO 2013
ACTIVIDADES

01-07

08-14

15-21

Bsqueda de informacin bibliogrfica

Presentacin del Proyecto de tesis
Aprobacin del Proyecto de tesis
Redaccin de Tesis
Etapa de diseo
Clculos de diseo
Ensamblado del purificador
Pruebas en laboratorio
Recopilacin de datos
Anlisis de resultados
Pruebas en campo
Periodo de espera de resultados
Anlisis de resultados
Revisin final de documento de Tesis
Presentacin del documento de Tesis
Sustentacin

36

AGOSTO 2013

22-28

29-31

01-07

08-14

15-21

22-28

29-31

VIII. PRESUPUESTO
COSTOS
COSTOS
UNITARIOS TOTALES
COSTOS POR TRABAJO DE CAMPO
Pasajes Lima-Cusco (ida y vuelta)
unidad
1
302.4
302.4
Comida
das
4
20
80
Alojamiento
das
4
25
100
Transporte a la localidad
unidad
8
3
24
SUBTOTAL
506.4
MATERIALES DE CONSTRUCCIN DEL PRIFICADOR DE AGUA
Vidrio esmerilado
m2
2
30
60
Dixido de titanio (TiO2)
Kg
3
4.01
12
Tuberas de coneccin de PVC
ml
2
10
20
Sellados (silicona slida)
unidad
3
1.5
4.5
Motor de acuario
unidad
1
65
65
Recipiente de vidrio de 5 litros
unidad
1
25
25
Fluorescente UV de 253 nm
unidad
1
126
126
SUBTOTAL
312.5
ANLISIS DE LABORATORIO
CONCEPTO

Anlisis de E. coli*

UNIDADES

UFC/ml o
NMP/100
ml

CANTIDAD

36

115

4140

SUBTOTAL

4140

COSTOS ADICIONALES
Impresin de Proyecto de Tesis
unidad
2
0.15/pagina
Impresin de Volmenes de Tesis
unidad
8
30
Costos adicionales
SUBTOTAL
TOTAL

13.5
240
700
953.5
5923.108

* Cons iderando el anlisis en un l aboratorio privado a l no poder ejecutarse

en el La bora tori o de Mi crobi ol oga de l a UNALM

37

FORMA DE PAGO

Subvencionado por
la ONG Cooperar
Per

Pago por el ejecutor

y subvenciones

Pago subvencionado
por CONCYTEC y
Concursos de
financiamiento en la
UNALM

Pago por el ejecutor

y subvenciones

IX.

COLABORADORES

Dra. Rosemary Vela Cardich, profesora principal del Departamento de Ingeniera ambiental,
fsica y meteorologa, apoyo como asesora de tesis.

Laboratorio de Ingeniera Ambiental de la Universidad Nacional Agraria la Molina, apoyo en la

realizacin del anlisis de variables de calidad de agua y ejecucin de los experimentos de la
presente investigacin.

Laboratorio de Microbiologa de la Universidad Nacional Agraria La Molina, apoyo en la

realizacin del anlisis de conteo de e-coli

ONG CooperarPer, apoyo con el contacto a la poblacin de Tancarpata, alimentacin y

alojamiento durante la temporada de trabajo en campo.

38

X.

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS

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Universidad Nacional Agraria La Molina, Lima.

41

XI.

ANEXOS

42

ANEXO A

Proformas y precios de materiales

ANEXO B

Hojas de informacin de los materiales

principales para la investigacin

ANEXO C

Carta de confirmacin de apoyo por parte de la ONG

Cooperar Per para la realizacin de la investigacin