Tcnicas de FIXAO E conservao de cadver

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Publicado porRaphaela Travassos
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A utilizao de cadveres um mtodo de ensino amplamente realizado.
Em

decorrncia desse fato existe a necessidade de preservao de corpos para estudos anatm
icos e histolgicos o que se torna maior a cada dia, pois cada vez mais difcil pree
ncher a demanda de cadveres nas faculdades de medicina, veterinria, odontologia, e
nfermagem e demais reas da sade. Portanto, a utilizao destes corpos deve ser otimiza
da, para que um maior nmero de alunos e pesquisadores possa usufruir das vantagen
s do estudo em um corpo natural. Os tecidos provenientes de cadveres so objetos de
estudo nas mais diversas reas da cincia, mas, para possibilitar seu estudo por te
mpo superior ao tempo de autlise e sem a ao de microrganismos, necessrio o uso de mto
dos de fixao e preservao, que consiste em mergulh-los em solues qumicas denominadas f
dores. A fixao extremamente importante, pois mantm os tecidos firmes, insolveis e pr
otegidos. Assim, a boa conservao das peas, alm de no permitir a deteriorao do material
tambm evita a proliferao de patgenos que podero causar doenas nas pessoas que frequen
tam o laboratrio. Por exemplo, a contaminao por fungos nas peas anatmicas pode desenc
adear em alunos e profissionais, quadros de alergia em decorrncia da grande expos
io de esporos fngicos suspensos no ar. Os principais grupos de fixadores so os fenis,
aldedos, cidos, compostos halogenados, agentes oxidantes, metais pesados e seus s
ais corantes, enxofre e tiossulfatos. Os cidos mais usados so o pcrico, actico, brico
, saliclico e arsnico. Entre os sais esto o cloreto de sdio, os hipocloretos de sdio,
o potssio ou clcio, o sulfato de potssio, o nitrato de potssio, o acetato sdico, o s
ulfato ferroso e outros. Os mais comuns so o formaldedo, a glicerina, o lcool etlico
e o fenol. O formaldedo o fixador e conservante mais utilizado, comumente em sol
uo aquosa a 10%. Por ser barato e penetrar rapidamente nos tecidos (seis milmetros
em doze horas) amplamente utilizado nos laboratrios de anatomia, porm, muitas outr
as substncias, quando em contato com os tecidos, impedem a proliferao de microrgani
smos.

dado o baixo custo e a rpida penetrao tecidual. representando um grande avano na pre
parao de peas anatmicas. em 1779. O lcool etlico ainda continua a ser utilizado. e por
Petrus Florestius. ora inadequados. que fez uma descrio detalhada dos mtodos utili
zados para embalsamamento de pontfices de Roma. que a formolizao uma tcnica que dema
nda espao. Guilhermo Hunter. Segundo KLEISS & SIMONSBERGER (1964). Pierrento Dion
es empregou a pulverizao de cido tnico a fim de se evitar o crescimento de fungos. r
ealizam uma verdadeira fixao nos tecidos mediante a coagulao rpida das protenas No fin
al do sculo XVII. mas traz como principal desvantagem o odor forte e irritante de
mucosas. e assim surge a necessidade de conservao deste material para fins didtico
s. e alguns encontram-se ainda em uso. As tcnicas de conservao do corpo humano tem
inicio com os Egpcios. hoje utilizado principalmente na preparao de peles de animai
s. Diversos reagentes qumicos foram utilizados. sendo a fixao qumica um processo com
plexo e pouco compreendido (JUNQUEIRA & CARNEIRO. ficando consagrado como o Pai
da moderna anatomia. em 1868. porm esta tcnica teve alguns entraves. utilizou o lco
ol etlico associado pimenta negra. posteriormente. 2008). No entanto. Essa tcnica
a mais empregada atualmente. como a ingesto do lquido de conservao de peas anatmicas q
ue estavam sendo transportadas entre pases. sendo mais empregado como conservante
. gerando episdios distintos. J no sculo XVI o belga Andreas Vesalius realizou as p
rimeiras dissecaes em cadver humano e props a sua configurao anatmica em seu famoso De
Humani Corporis Fabrica. H uma srie de outras tcnicas de conservao de cadveres na form
a de peas anatmicas. ocorre a descoberta mais importante. o formol (formaldedo ou a
ldedo frmico). o qumico alemo Tauflieb descobriu a ao fixadora do cloreto de zinco. do
que cientfico. Outro aspecto a ser considerado. Mais tarde. o lcool etlico fui usa
do sem boa aceitao. Na mesma poca. para conservar peas anatmicas injetadas com sebo o
u cera. porm mais com fins religiosos. atravs do processo de mumificao (natural) e o
embalsamamento (qumico). O cadver ou pea deve permanecer por longo perodo submerso

no lquido antes de ser dissecado e ainda permanecer submerso para armazenamento.

Karl Schelle. sem nenhuma descrio e comprovao de resultados. com resultados controve
rsos.Breve histrico da conservao de cadveres A fixao pode ser feita por mtodos qumico
u fsicos (congelamento). Em 1853. as tcnicas de fixao e preservao melhoram com a intro
duo de certas substncias. como a glicerinao. porm no o fixador mais adequado. porm.
835 foram empregadas solues aquosas de arsnico associadas ao lcool e. Froncois Chaus
sier empregou o bicloreto de mercrio para evitar a putrefao e favorecer a mumificao.
passando este a ser empregado nas tcnicas anatmicas e microscpicas. em torno do scul
o XVIII. por August Von Hoffman. que injetadas intravascularmente. o almen tambm f
oi utilizado para injeo intravascular em cadveres. ora bons. que . atualmente em us
o. j que o produto voltil. Posteriormente. as primeiras descries destas tcnicas de co
nservao de cadveres foram feitas por Ambroise Par no seu Tratado de Cirurgia (1544).
sendo aplicada pela primeira vez no sculo XVIII pelo anatomista Carlo Giacomini.
descobre a glicerina.

j que esto.conserva a pea em glicerina. permitindo assim o estudo da clula ou do tec

ido como se estivesse. Outros como o formaldedo ou aldedo frmico. insolubilizar as
protenas dos tecidos por meio de ligaes cruzadas entre os aminocidos. O fixador deve
ser escolhido levando-se em conta as caractersticas do tecido. evitar a prolifer
ao bacteriana e fngica. Fixadores BEHMER et al. mantendo apenas o tecido sseo. poden
do ficar em ambiente seco. 1987). sem ocasionar alteraes da estrutura celular. poi
s estas ltimas so as responsveis pela degradao espontnea que os tecidos sofrem aps a m
rte. ALVES (2002). podem ser utilizados para fragmentos maiores. RODRIGUES. por
exemplo. vivos. a grosso modo. ALVES (2002) e RODRIGUES (2010) acrescentaram que
no h fixadores perfeitos. que no existe um mtodo padro. isto . naquele momento. O tem
po de fixao depende do tipo de fixador e da temperatura em que este se encontra: q
uando. aumentando a penetrao do fixador atravs do tecido (BEHMER et al. 1976. A pla
stinao uma tcnica inovadora que impe a substituio das molculas de gua do corpo por
lmero. temperatura ambiente. porm pode-se empregar misturas para minimizar as limi
taes de cada um. que consiste no preenchimento das estruturas tubulares com resina
seguida por corroso cida dos tecidos no preenchidos. Concluram. o lcool e o ter. como
o aldedo glutrico. (1976). e deve ser realizada o mais breve possvel aps a remoo de u
ma . que gera peas translcidas. como em um museu (VON HAGENS et al. aps a anlise das
respostas. JUNQUEIRA & CARNEIRO (2008) e RODRIGUES (2010) ressaltaram que os fi
xadores so substncias qumicas que mantm a integridade dos tecidos aps a morte. No fin
al do sculo XX surge uma nova tcnica. a macerao. a autlise. deseja-se uma fixao rpida
equer pelo menos 12h para exercer sua atividade completamente. Alguns tipos de f
ixadores s podem ser usados para pequenos fragmentos de tecidos. pois apresentam
maior poder de penetrao. um questionrio sobre o embalsamamento e armazenamento de c
adveres humanos. podendo ficar expostas. os exames pretendidos e as coloraes a sere
m aplicadas. facilitando o manuseio. aquecida a 50oC durante 1h. A temperatura a
umenta a velocidade de fixao.. ressaltando que. 2010). emprega-se o formol (denomi
nao dada a qualquer diluio a partir do formaldedo comercialmente puro 40%). colocando
a anatomia de novo no centro da ateno popular e da polmica cientfica. EERDEN & NIE
(1981) realizaram um levantamento sobre as principais tcnicas e solues conservadora
s de tecidos. mantendo a estrutura e as caractersticas originais da pea de forma i
nodora e resistente. enviando para o Departamento de Anatomia das Faculdades de
Medicina. e que so utilizadas diferentes tcnicas. e a corroso. pois so essas protenas
as responsveis pela manuteno estrutural das clulas e tecidos e inativar enzimas pro
teolticas o mais rapidamente possvel. plastificadas. bem como diferentes solues conser
vadoras para tal fim. Suas finalidades bsicas so as de evitar ao mximo as alteraes na
constituio qumica celular. o que de fundamental importncia na fixao.. Este mesmo fix
dor. uma boa fixao dos tecidos fundamental para a observao em microscopia ptica. a di
afanizao. E por fim. gerando peas de fcil conservao. A fixao pode ser efetuada por im
ou por perfuso. que retira todas as partes moles da estrutura.
ou seja. o fixador empregado em trabalhos de rotina o formaldedo a 4% em soluo tamp
onada. O fenol lquido ou em forma de cristais no endurece muito os tecidos e torna
o meio estril. (2010) observaram uma expressiva melhora tanto qualitativa como q
uantitativa no material fixado em lcool a 70% em comparao ao tradicional formol na

evidenciao imuno-histoqumica dos miofibroblastos marcados com o anticorpo anti-acti

na. sem impurezas (RODRIGUES. na agricultura como conservante de gros e sementes
e na produo de fertilizantes. Apresenta incompatibilidade com oxidantes fortes. Se
gundo RODRIGUES (2010). fenis e uria e apresenta como sinnimos: formol. Assim.000 m
L. Na Medicina. como na produo de papel. 2001. Tcnicas usuais de fixao de peas anatmic
s Formolizao: O formaldedo ou aldedo frmico um dos mais comuns produtos qumicos de us
atual. a glicerina e o fenol. Deve ser usado com cuidado. o lcool endurece muito
os tecidos. O formol ou formalina uma soluo aquosa saturada de aldedo frmico a cerc
a de 37% a 40%.pea cirrgica ou da morte do indivduo.. ou ainda o pro-analysis. rgos ou
cadveres. VINCENT & JANDEL. GOMEZ et al. O formol pode ser comprado em vasilhames
de plstico e tambores com 5 e 20 L. de cheiro muito forte e irritante. madeira c
ompensada. Acima nesta concentrao. pois precipita-se em concentraes superiores. e o
etanol. 2009). e o fixador deve ter contato com todas as superfcies da pea na prop
oro mnima entre 1:10 e 1:20. HERAUSGEGEBEN et al. o lcool metanol ao perder um tomo d
e hidrognio d origem ao aldedo frmico. de frmula molecular H2CO e nome oficial pela I
UPAC (Unio Internacional de Qumica Pura e Aplicada). formalina. usado tambm em outr
as reas de atividade. pois txico e provoca queimaduras na pele. cidos. O fenol no se
mistura bem gua. mas solvel em lcool. j que qualquer atraso leva desidratao dos
os e acelerao da autlise. xido de metileno. 2010). lcalis. componente de exausto de d
esel e produto da pirlise (queima) de revestimento . os fixadores mais utilizados
no Brasil so o formol. que equivale soluo aquosa de formol a 10% (JUNQUEIRA & CARN
EIRO. 2006. o lcool etlico. resinas e cosmticos. protegendo o material da ao de fungo
s. acondicionado em vidro com capacidade de 1. na preservao da madeira e na produo d
e filmes fotogrficos (INWALD. e pelos anatomistas e patologistas para preservarem
tecidos. anti-sptico. usado como desinfetante. sendo indicado quando no possvel a
utilizao de fixador via injeo vascular. no mnimo. o aldedo mais simples. na concentra
e 70%. um volume 10 a 20 vezes maior que o volume da pea. ao aldedo actico (CARVALH
O. Pode ser empregado isoladamente para a fixao ou preservao de peas pequenas ou anim
ais de pequeno porte. o volume do lquido fixador deve ter. voltil e txico. 2006). O
s aldedos so compostos qumicos resultantes da oxidao parcial dos lcoois. 2008) O lcool
etlico a 96 GL um bom fixador e de fcil aquisio. Na temperatura ambiente. metanal. Em
microscopia ptica. o aldedo frmico um gs incolor. na indstria da borracha. Tem excel
ente capacidade de penetrao nos tecidos.

no preserva gorduras livres. que contm grupamentos amnicos na sua cadeia lateral (CH (NH2). Considera-se que 40% a 60% desses grupamentos estejam livres para a re
ao com os aldedos. por imerso (RODRIGUES. Dependendo das circunstncias. 10 e 20%. KAR
LSEN et al. a Agncia Internacional de Pesquisa em Cncer (IARC) o classificou como
cancergeno e teratognico (INCA. (1994). sendo que tal cido frequentemente interage
com a hemoglobina. Essa reao ocorre principalmente com o aminocido bsico lisina. o m
ecanismo de ao ocorre atravs da reao do formol com os grupamentos amnicos das protenas
relacionado com cnceres de vias areas superiores e de pulmo. lesar mucosas e pele.
JACKSON et al. 2010).. BALLENGUER (1984). (1993). OLSEN et al. alm dessa reao. 199
8. podendo provocar irritao dos olhos e vias respiratrias. MIES (1994). enquanto a
20% so empregadas na impregnao de encfalos isolados. 2008). dentre as quais destacam
-se o carbonato de clcio (MICHALANY. (1976). As concentraes mais baixas. SESSO (199
8). 2010). HAMAZAKI et al. Entretanto. o fosfato de sdio bibsico anidro (RODRIGUES
. impedindo assim o aparecimento do pigmento de formol. devendo ser tratado como
potente cancergeno ocupacional. o que torna providencial para a colorao dos tecido
s com os corantes cidos nas tcnicas histolgicas (JUNQUEIRA & CARNEIRO. J. porm fixa l
ipdeos complexos. uma vez que somente essa reao no explica totalmente o seu efeito f
ixador. fcil penetrao nas peas e ao rpida como fixador. Para o preparo da soluo de f
a 10% para a fixao de peas. 2010) e o fosfato de sdio mono-hidratado. Em 1995. 5. f
ormando ligaes cruzadas. produzindo um pigmento acastanhado chamado de "pigmento d
e formol" ou hematina. so usadas em animais de pequeno porte ou fetos ou quando a
ssociado a outro fixador. devido ao seu baixo custo. Essa reao reversvel em gua. Est
e mtodo faz com que os cadveres fiquem bem fixados. ALVES (2002) e RODRIGUES (2010
) descreveram que o formol em soluo aquosa a 10% (formaldedo a 4%) o mais utilizado
na fixao e conservao de tecidos. simplicidade de uso. leucemia e cncer no encfalo. BE
HMER et al. mas tambm para pesquisa (IKEDA et al. o formol tem outros efeitos pou

co conhecidos. e consiste na injeo do fixador pelas artrias. RODRIGUES. o formol us

ado nas concentraes de 3.COOH). Sendo esta soluo ligeiramente cida. A via arterial um
a das tcnicas de fixao mais utilizadas. EGLINTON & LOGAN (1991). juntam-se 100 mL d
e formol a 40% (formol puro) a 900 mL de gua corrente ou destilada. que constitui o
composto mais utilizado (SESSO. a eliminao da acidez obtida .de eletrodos de sold
a (TOKUDA et al. O tamponamento pode ser realizado com diversas substncias.. 1990
). Bioquimicamente. provoca leve precipitao de outros constituintes celulares e no
o fixador de eleio para carboidratos. 1990). de forma que possam ser usados no s par
a dissecao anatmica. embora seja extremamente voltil e tenha cheiro irritante. 1993)
. (1984). O uso de soluo tampo evita a acidificao do fixador. 4. Tal fixador no provoc
a precipitao de protenas. GUSMMAN (2007) descreveu que o aldedo frmico atua como fixa
dor interagindo com os aminocidos lisina e arginina. resultando em um composto qu
e em parte desnatura estas substncias. (1991) descreveram que o cido frmico um dos
produtos de degradao do formol. 2010).

nas mitoses os cromossomos so mal fixados. (2006). essas ligaes ocorrem somente na pe
riferia da pea. CHEOKER (2002) e GINO et al. SOLOMON (1975) reportou que o Asperg
illus um fungo predominante em ambientes fechados e que permanece em nuvens de e
sporos no ar.. permite a recuperao antignica na tcnica de imuno-histoqumica. as mitocn
drias nem sempre so preservadas. Por outro lado. (1995) e KIKUGAWA & TAKASHI (200
4) relataram alteraes nas propriedades mecnicas e resistncia fratura de ossos fixado
s em soluo de formol. a fixao prolongada por formaldedo pode dificultar a tcnica de re
cuperao antignica. decomposio dessas protenas estruturais. Para o efeito da fixao. se
o Aspergillus niger mais resistente que Candida albicans. CURREY et al. sem a r
ealizao de um estudo propositivo de campo ou experimental. Klebsiella sp. ou seja.
TOMASI et al. isto . tornando-o mais quebradio. 2010).5 g de fosfato de sdio dibsic
o anidro.. por provocar artefatos que influenciam na morfologia do rgo. o tempo de
fixao varivel segundo o tamanho da pea. Segundo WERNER et al. o formol no indicado
omo fixador para estudos histomorfomtricos de testculo de felinos. deste modo. por
tanto. 2000). recomendando para espcimes pequenas. no seu todo ou parcialmente. n
a dependncia da concentrao e do tempo de exposio (fixao) a que um determinado tecido
bmetido. a fixao em formaldedo por menos de 24 horas e. SESSO (1998) ressaltou que
as principais alteraes celulares consequentes fixao pelo formol incluem a tendncia a
separao celular. CARVALHO (2009) concluiu que os cadveres fixados com formol na con
centrao de 5% apresentaram mnima degradao do DNA. Os fungos mostraram-se mais resiste
ntes que as bactrias. no caso do processo imuno-histoqumico (WERNER et al. tecidos
mineralizados submetidos conservao em formol podero sofrer perda de substncia miner
al. ficando o interior no fixado onde ocorre o fenmeno de autlise. e Salmonella sp.
SPICHER & PETERS (1976) verificaram a resistncia de diferentes microorganismos a
o formaldedo e seu efeito antimicrobiano em diversas concentraes e concluram que Pse
udomonas sp. De acordo com SOARES et al. Concluram ainda que a formalina aumenta
a fragilidade do osso em um perodo relativamente curto. podendo penetrar no inter
ior de estruturas e . 24 horas para que as ligaes cruzadas entre as protenas causad
as pela fixao possam ser completadas. as clulas tornam-se mais isoladas. o citoplas
ma contrai-se em relao ao ncleo e. Observaram que a concentrao dos elementos inorgnico
s diludos no formol conservante aumentou proporcionalmente ao perodo de preservao. (
2004) observaram que o formol tem a propriedade de degradar o DNA. porm na concen
trao de 10% e 20% apresentaram a degradao do DNA em 100%. Seus estudos baseiam-se em
reaes bioqumicas. mostraram-se mais susceptveis ao formaldedo que Staphylococcus sp.
no mnimo. Mas em peas maiores. (2005) e FONSECA (2007) concluram que ocorre desmin
eralizao ssea em peas fixadas com formol. uma vez que o processo de desmineralizao in
uzido por meio cido.pela adio de 4 g de fosfato de sdio monobsico e 6. no recomendado
exceder 48 horas de fixao. Do contrrio. a fixao deve ser de. (2000). com cerca de 3mm
de espessura. a soluo de formol a 10% injetada na proporo de 10% do peso do espcime
(RODRIGUES.

O termo glicerina refere-se ao produto na forma comercial do glicerol com pureza

acima de 95%. PIGOSSI. 1964. o que mantm a integridade celular e .2. objetiva in
ativar a ao das enzimas autolticas. Glicerinao: A glicerina um lquido viscoso tempe
ura ambiente (25C). 1992). DALECK et al.. que so responsveis por sua solubilidade e

m gua. com exceo para as formas esporuladas (PIGOSSI. tcnicos e pesquisadores. por o
utro lado.contaminar o ambiente interno. incolor. devemos evitar o uso do formal
dedo como lquido conservador de peas anatmicas.3-triol. A glicerina mais utilizada n
a concentrao de 98%. Pelo contrrio. atuando contra fungos e bactrias gram-negativas
e gram-positivas. Cabe ressaltar que a desidratao obtida com a glicerina no altera
a concentrao inica das clulas. 1967). higroscpico (absorve gua do ar) e com sabor adoc
icado. ALVARENGA. mas seu nome oficial pela IUPAC propano-1. Apresenta trs grupos
hidroxlicos (OH-) hidroflicos. um composto orgnico pertencente funo lcool. posteri
ente fixao. Uma das principais caractersticas da glicerina a capacidade de desidrat
ao celular (PIGOSSI. importante salientar que o processo de fixao dos cadveres visa m
anter as estruturas dos tecidos com o aspecto apresentado in vivo e. Este fator
determina a sua ao antissptica. docentes. inodoro. uma vez que esse fixador apresen
ta propriedades txicas e outros efeitos desagradveis. visa impedir a proliferao de b
actrias e fungos e a macerao dos tecidos. no havendo razo para acreditar que as mesma
s substncias qumicas sejam ideais para ambos os processos. J a conservao. 1967. 1988.
alm do potencial de risco para a sade de alunos.

posteriormente. A glicerinao ou tcnica de Giacomini permite uma melhor preservao. ini

cia-se o mtodo de glicerinao composto por trs etapas: desidratao. por meio de injeo d
olues em seu interior. microfilme. para a fixao por aproximadamente sete dias.mantm o
s tecidos mais moles e flexveis (PIGOSSI. CALOMENO et al.). ltex natural. faz-se u
ma pr-fixao do material de estudo em soluo de formol a 10% durante 24 horas. Posterio
rmente. em temperatura ambiente. baixo custo e facilidade no manuseio das peas. c
lareamento e impregnao da glicerina e escoamento. linfticos. as peas so imersas em gl
icerina a 98%. Os produtos mais utilizados conforme o grau de penetrao nos capilar
es (da maior a menor penetrao). com as vantagens de se obter peas anatmicas mais lev
es. 2010). 1964). ao meio ambiente (diminuio e eliminao de vapores prejudiciais natu
reza) e aos manipuladores. por sete dias. O processo de desidratao tem incio com a
imerso das peas em soluo de lcool etlico a 70%. as peas j fixadas. Repleo e corros
a de repleo consiste no preenchimento de conductos (vasos sanguneos. segue o clarea
mento com a imerso das peas em soluo de gua oxigenada a 3%. Ao trmino do processo de p
refixao. borracha siliconada e resina polister (RODRIGUES. resina epxi. durante apro
ximadamente sete dias. Aps este perodo. etc. Para a realizao do mtodo. so retiradas e
mantidas a seco em caixas. peas anatmicas esteticamente melhores (Figura 2). utili
zao de produtos menos agressivos s peas. De acordo com esse estudo. (1987) realizara
m estudo comparativo com ltex de neoprene e acetato de vinil. o ltex de neoprene m
ais efetivo para a visibilizao de estruturas de calibres maiores. concluindo que o
s dois mtodos tm vantagens e desvantagens. enquanto a resina de vinil mostrou melh
ores resultados quando se pretende estudar detalhes delicados da . em caixas plst
icas. incluem a tinta da china. brnquios. vias biliares ou urinrias. conservao mdia d
as peas semelhantes da formalizao.
primeiramente se faz a repleo e. O protocolo da repleo e corroso indicado por RODRIGU
ES (2010) inclui as seguintes etapas: 1) Lavagem das peas com gua corrente. sulfric
o (5 a 10%) e o hidrxido de potssio (KOH).anatomia vascular e de acordo com YAMAMO
TO et al. (2007) descreverafm que essa tcnica excelente para trabalhar na docncia
e na pesquisa. 3) Canulao dos stios dos vasos a serem injetados. para visibilizar o
s conductos repletos ou as cavidades previamente injetadas. 5) Injeo de acetato de
vinil colorido diludo em acetona a 100%. em banho-maria. que fez uso do acrlico p
ara estudar a microscopia microvascular dos ramos arteriais do fgado de ratos. .
posteriormente. 2) Aquecimento das peas 37C. 4) Injeo de gua destilada para lavagem d
os leitos vasculares. O procedimento de corroso consiste na eliminao do tecido orgni
co da amostra. se utiliza um produto qumico para executar a corroso do tecido orgni
co. (1984) e BUSTAMANTE et al. 9) Lavagem das peas com jato fino de gua para limpe
za. de 15 a 20% (RODRIGUES. Para o processo de corroso. Coronria em corao humano. (1
985). 6) Retirada da agulha e ocluso do stio com fio de nilon monofilamentar agulha
do. MATAMALA et al. relataram ser esta substncia apropriada para estudos tanto de
estruturas microscpicas quanto de calibres maiores. Os produtos mais utilizados
incluem os cidos clordrico. 8) Incio do processo de semicorroso e/ou corroso da pea co
m cido clordrico (HCl). devido ser uma tcnica de baixo custo e oferecer excelentes

resultados na visibilizao macroscpica da trama vascular de peas anatmicas. 7) Conduo d

pea imersa em gua destilada ao congelador (freezer) para solidificao do acetato de
vinil colorido. 10) Concluso do processo corrosivo e colocao das peas para secagem.
2010).

com temperatura mdia em torno de -5C . d-se incio tcnica. As peas so inicialmente fi
as em soluo aquosa de formol a 10%.Criodesidratao: A tcnica de criodesidratao consiste
na desidratao dos tecidos do animal para a preservao da pea a seco. em que as peas so
ongeladas em freezer. Aps a fixao.

Baseia-se na afinidade que os sais de clcio tem pela alizarina. para se manter em
consultrios. a pea se mantm fora de uma soluo fixadora. ou mesmo para fins didticos.
Co Fila Brasileiro dissecado. RODRIGUES. que consiste em descongelar a pea em temp
eratura ambiente por 12 horas e retorn-la ao freezer. 2) Lavagem: para eliminar q
ualquer excesso de formol.. at a obteno da desidratao da pea. reduo do peso da pea e
no de 70%. 1996). segue um processo de descongelamento seriado. a amostra . Post
eriormente. substncia corante sinttica (CORTSDELGADOet al. A pea desidratada apresen
ta cor mais clara (esbranquiada) que o normal e apresenta como vantagens a manute
no da forma dos msculos e as relaes entre si... sendo empregada para estudar o estado
da cartilagem e ossos ou pontos de ossificao em diferentes fases do desenvolvimen
to e tambm observar anormalidades. 2010). 2009. Diafanizao: A diafanizao utilizada de
sde os anos 70. at o completo congelamento. Consiste basicamente na digesto do tec
ido muscular por meio de uma enzima (tripsina) e a colorao da cartilagem e esquele
to usando azul alcian e alizarina em espcimes previamente fixados em formalina (F
igura 4). TEIXEIRA FILHO et al. Outra vantagem a possibilidade de manter a confo
rmao de rgos cavitrios. uma tcnica ideal para a produo de peas para compor coleo
biolgicos. o material deve ser armazenado em etanol 70% ou formol a 10%. Se o mat
erial foi armazenado em etanol. De acordo com CORTS-DELGADO et al. criodesidratad
o e pintado para fins didticos. (2009).por um perodo em torno de 72 horas (varivel
em funo do tamanho da pea). pela mesma quantidade de tempo por sucessivos dias. alm
de ser uma tcnica de baixo custo. afim de ilustrar explanaes de condutas ao proprie
trio. Concluda a desidratao. dispensa cubas de formol para conservao e utilizao por l
o perodo. 1990. inflados com gs durante o processamento (TEIXEIRA et al. a tcnica d
e diafanizao segue algumas etapas a seguir: 1) Preservao e fixao: no momento da coleta
. deve posteriormente ser fixado com formol a 10% atravs de injees nas vsceras e dei
x-lo submerso por dois a trs dias. Este processo prolongado e varia de acordo com
o tamanho e espessura da pea.
. 1:1 e 1:3). A soluo de colorao pode ser reutilizada vrias vezes em outros estudos.
70 mL de gua destilada. Durante este processo. Repita por 2h em um novo banho. qu
ando se tornar turva. 8) Branqueamento e desidratao: colocar a amostra em banhos s
ucessivos: solues de glicerina 0. . Armazenar a amostra em gua destilada por cerca
de 8h. e 0. Deixar o modelo durante vrios dias em cada etapa. se necessrio.5g de e
nzima tripsina (tripsina de pncreas suna). A tripsina funciona melhor em temperatu
ras ligeiramente elevadas (KISHIMURA et al. 2005). sendo assim colocar o recipie
nte com a amostra em um forno a temperatura mxima de 25C.5%. esta etapa tambm ajuda
a reforar a fixao do alcian blue na cartilagem. Deixar a amostra nesta soluo por 24h
. 40% e 15% (2h por banho). Aquecer a amostra at que o msculo fique macio e gelati
noso ou a cartilagem e os ossos serem visualizados. Adicionar vermelho de alizar
ina S em forma de p at a soluo adquirir a cor roxa. 5) Reidratao: colocar a amostra nu
m banho de lcool etlico a 95% por 2h. 4) Colorao da cartilagem: deixar o material to
talmente imerso na mistura feita com 10 mg de alcian blue 8GN. adicionando algum
as gotas de perxido de hidrognio para ajudar a aumentar a transparncia. Coloque o e
spcime em banhos sucessivos.(Srie sequencial: 3:1. e 20 mL de cido actico glacial po
r 2 dias. dependendo do tamanho do espcime. diminuindo as concentraes de lcool etlico
em 75%. 3) Relavagem: deixar a amostra em gua destilada por um dia. 80 mL de lcoo
l etlico 95%. KOH. aumentar a concentrao de tripsina para melhorar o processo de di
gesto. necessrio verificar o material todos os dias. at o completo branqueamento da
musculatura e remoo dos excedentes da alizarina vermelho e 9) Armazenamento: colo
que a amostra em soluo de glicerina pura. uma vez que a exposio prolongada tripsina

pode dissolver o esqueleto.5%. Para as massas relativamente grandes. Troque a so

luo.imersa e lavada em gua destilada por dois a trs dias. 6) Digesto muscular: imergi
r o material em soluo de 30 mL de borato de sdio. 7) Colorao do osso: transferir a am
ostra para uma soluo aquosa de KOH a 0. eviscerar o espcime. De acordo com HANKEN &
WASSERSUG (1981). Este resultado pode demorar vrias semanas.

2007). Plastinao Plastinao um processo desenvolvido por von Hagens em 1977. calor ou
certos gases. modelos em madeira e bexigas de ltex. KCN et al. DHINGRA et al...
As tcnicas atuais de conservao baseadas em formaldedo utilizadas na rea de anatomia e
m muitas universidades no so as mais adequadas. 1984). raiz. 2007). 1997. 2008).As
pecto da macroconfigurao da cavidade pulpar. esmalte. WEIGLEIN. Em tempos de expos
io prolongada h tambm irritao cutnea (BALLENGUER. canal radicular e pice). peas ou p
delas e desde a sua introduo foi uma verdadeira revoluo na educao.. como ressonncia m
gntica. 1987). Este mtodo apresenta um custo muito alto. so implementados mtodos alt
ernativos como: utilizao de cadveres formolizados ou preservados com soluo de Larssen
. suturas em panos. . com o desenvolvimento de mtodos de ensino e contribui para
o pensamento tico.. A inalao causa irritao na mucosa nasal e do trato respiratrio supe
rior e pode at afetar os pulmes. dentina. melhorando a qualidade da prtica docente
e na investigao da anatomia macro e mesoscpica. tomografia. aps as consideraes bsicas
a anatomia interna (coroa. 1995. cmara pulpar. Em contrapartida. 2006. 1987.. end
oscopia. como a rigidez e a perda da cor natural dos tecidos. so secas e muito re
sistentes (REYES-AGUILAR. Os cadveres podem ser obtidos atravs de convnios com clnic
as veterinrias mediante doao dos proprietrios (VON HAGENS et al. e depois passam por
um processo de endurecimento pela luz. 2006. 1984. modelos sintticos (espumas. Tc
nicas alternativas de conservao de peas anatmicas: A elaborao de mtodos alternativos p
ra a realizao de aulas prticas visa manter a educao atualizada e sincronizada com o p
rocesso tecnolgico. irritando a mucosa ocular. 2007.. que proporcionar a rigidez e
conservao dos espcimes (VON HAGENS et al. vsceras e msculos de animais abatidos. as
peas plastinadas esto livres de odor. cemento. que afetam as pessoas que a manipul
am. epxi. as propriedades fsico-qumicas da soluo levam formao de gases. e est sendo
amente utilizado na Europa e nos EUA e j est sendo empregada em algumas universida
des brasileiras (SILVA et al. O'SULLIVAN & MITCHELL. com preservao de estruturas a
natmicas detalhadas. A tcnica possibilita a utilizao de um nico cadver indefinidas vez
es. tm alta durabilidade.. substituindo todos os fluidos teciduais e solveis em go
rdura (gua e lipdeos) por polmeros (silicone. preparao de peas anatmicas. Estas tm in
venientes. BRAVO. entre outros. alm da obteno de peas anatmicas reais. ou copolmero de
polister). simulaes em vsceras do uso de eletrobisturi e criocirurgia. entre outras
(VON HAGENS et al. REYES-AGUILAR. que se baseia em impedir a decomposio e preserv
ar espcimes anatmicos para a educao mdica e cientfica. revelado pela tcnica da diafani
ao onde se pode ver o verdadeiro labirinto da anatomia interna dental ou o sistema
de canais radiculares. vdeos ilustrativos. Para isso. Alm disso. como base para a
interpretao das modernas tcnicas de diagnstico. 1987). A tcnica de plastinao permite
obteno de corpos inteiros. OLSEN et al.
como grau de decomposio. 2007... 900 g de bicarbonato de sdio. a pea ou cadveres so fi
xados em uma soluo de formol a 10% por um perodo de uma semana. O autor relatou que
o lquido de Larssen conservou a cor. secando a pea em cerca de 48h. (3) impregnao f
orada. a . 2003). Soluo de Larssen modificada Trata-se de uma tcnica de tratamento q
umico para a preservao de cadveres que sero utilizados em aulas de tcnica cirrgica. a
a dos tecidos lentamente substituda pela acetona. A secagem completa leva vrios me
ses (VON HAGENS et al. SAMPAIO (1989). para preservar fetos humanos. um grande nm
ero de fatores deve ser considerado. Ento. 2009). Os espcimes biolgicos tm um alto t
eor de gua que deve ser removida. utilizou o lquido de Larssen conforme a frmula ut
ilizada pelo Servio de Anatomia Patolgica do Hpital Cochin. da Universidade Ren Desc
artes Paris V. 1000 g de hidrato de cloral.. o solvente aqui substitudo por um po
lmero em uma cmara de vcuo em baixas temperaturas e endurecimento. 1100 g de sulfat
o de sdio. 500mL de soluo de formol a 10% e 1000 mL de gua destilada. como a acetona
a -25C. Segundo KCN (2007). 1987. durante um perodo de quatro a cinco semanas. co
mposta por 500 g de cloreto de sdio. KCN et al. Este gs endurece o polmero.Corpo co
nservado pela tcnica plastinao A tcnica desenvolvida por Gunther Von Hagens em Heide

lberg. (2) desidratao. Isto conseguido por meio de um processo conhecido como subs
tituio em congelamento. onde entra em contacto com um gs de cura. na Alemanha. em u
m estudo sobre o crescimento do rim humano no perodo fetal. a distribuo do tecido ad
iposo e quantidade de sangue nas veias quando da escolha do polmero a ser utiliza
do. onde as amostras so colocadas em solvente orgnico. calor ou luz ultravioleta.
Frana. como mtodo alternativo ao uso de animais vivos (SILVA. RIVERA et al. onde a
amostra preenchida de polmero colocada em uma cmara fechada. consiste basicamente
em quatro etapas: (1) fixao: aps a disseco.
200 g de hidrato de cloral. (2003). bem como ausncia de liberao de odores desagradve
is oriundos do processo de decomposio. e durante o treinamento apresentavam textur
a. evidenciando boa condio. e apresentou caractersticas teciduais semelhantes s de u
m animal vivo. A soluo de Larssen modificada pelos autores compreende a mistura de
100 mL de formalina a 10%. colocando os rins o mais prximo do natural. os animai
s so acondicionados em sacos plsticos e criopreservados em cmera frigorfica com temp
eratura entre -20C e -16C. 180 g de cloreto de sdio e 2000 mL de gua destilada. . A
soluo foi utilizada na diluio de uma parte do concentrado para trs partes de gua desti
lada. (2004) utilizaram esta tcnica na preservao de cadveres que foram utilizados no
ensino da cirurgia. tendo ainda como finalidade dissolver cogulos e restaurar a
volemia fetal. tanto da cavidade abdominal como da regio cervical.consistncia e as
caractersticas das peas anatmicas. pelo fato dos tecidos musculares e cutneos apres
entarem reduo significativa de elasticidade. acrescentando glicerina. a fim de tor
nar as peas mais maleveis. Os docentes da disciplina de tcnicas cirrgicas do Departa
mento de Cirurgia da FMVZ/USP. 400 mL de glicerol. em seu trabalho utilizando do
modelo experimental de ces conservados com soluo de Larssen modificada para treina
mento em videocirurgia. A presso de CO2 necessria a execuo do procedimento parece se
r maior do que a rotineira em animal vivo. SCHERER (2009). relatou que foi vivel
e efetivo para treinamento de tireoidectomia videoendoscpica e nefrectomia total
laparoscpica. A quantidade a ser utilizada para fixao de 10% do peso do animal a se
r injetado via artria cartida comum. modificaram a tcnica da soluo de Larssen. princi
palmente no que se refere a tecidos corpreos extra-abdominais. colorao e consistncia
dos tecidos semelhantes ao encontrado em animais vivos. Os cadveres preservados
foram utilizados no mnimo 4 vezes. SILVA (2003) e SILVA et al. como msculos e pele
. 200 g de sulfato de sdio. Entretanto evidenciou rgos intra-abdominais com textura
mais frivel. como a flexibilidade das articulaes. 200 g de bicarbonato de sdio. con
forme protocolo preconizado por SILVA et al. e ps fixao.

Influncia do formol utilizado para conservao de cadveres na obteno de DNA nuclear em t

ecido muscular. 2009 66f.REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS: CARDOZO. Rio de Janeiro: Guanab
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