ORGANISMOS CELULARES

EUCARITICOS

PROCARITICOS
Monera ou bacterias
UNICELULAR
Protista ou protozoa
e algas unicelulares

MULTICELULAR

FOTOSSINTTICOS
Plantae ou plantas

ABSORTIVOS
Fungi ou fungos

INGESTIVOS
Animalia ou animais

CLASSIFICAO DOS ORGANISMOS CELULARES

FOTOSSINTTICOS
captam a luz para converter CO2 e H20 em O2 e acares

6H2O + 6CO2 6O2 +C6H12O6

ABSORTIVOS
ABSORTIVOS: captam nutrientes qumicos dissolvidos em soluo aquosa
(fungos e leveduras)

INGESTIVOS
INGESTIVOS: captam partculas no dissolvidas (animais)

ESQUEMA GERAL DE UM PROCESSO

FERMENTATIVO
microrganismo

Matrias-primas

Meio de cultura
Esterilizao

Inculo Laboratrio

Clulas
Separao
das clulas

Biorreator
Inculo Industrial

Industrial

Caldo fermentado

Ar
Compressor

Recuperao Produto
Esterilizao
do Ar

Produto

Tratamento efluentes

Crescimento Microbiano

Aumento em tamanho da populao

Aumento no nmero de clulas
Aumento da massa celular
Duplicao
Fisso binria
Tempo de gerao
Curva do crescimento microbiano

Crescimento Microbiano

Fonte de carbono
Energia
Aceptor de eltrons
Doador de eltrons
H2O

Crescimento Microbiano

Nutrientes orgnicos: aminocidos, vitaminas, purinas e

pirimidinas
Nutrientes inorgnicos: macro e micro
Condies ambientais: pH, temperatura, potencial hdrico,
condutividade, presso, potencial redox, superfcie para
crescimento

Grupos nutricionais

Fotoautotrficos: luz energia para sintetizar ATP, e CO 2 fonte de

C para sintetizar compostos orgnicos (bactrias fotossintticas,
cianobactrias, algas, etc.)
Fotoheterotrficos: luz energia para sintetizar ATP, mas o C
obtido em formas orgnicas mais complexas

Grupos nutricionais

Quimioautotrficos: energia obtida pela oxidao de compostos

inorgnicos como H2S, NH3, e Fe2+, e CO2 como fonte de C (bactrias
que oxidam S, bactrias nitrificadoras, bactrias que oxidam H 2,
bactrias que oxidam Fe)
Quimioheterotrficos: energia e C obtidos de molculas orgnicas
complexas

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Fatores que afetam o crescimento

Fatores qumicos:
pH:
neutrfilos pH 7.0
acidfilos pH < 7.0
alcalfilos pH > 7.0

Importncia:

Atividade enzimtica
Conformao protica
Disponibilidade de metais e elementos orgnicos

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Fatores que afetam o crescimento

Fatores qumicos:
O2:

Aerbicos obrigatrios
Anaerbicos obrigatrios
Anaerbicos facultativos
Microaerfilos
Aerotolerantes

Importncia:

Respirao
Reaes de xido-reduo
Atividade enzimtica

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aerbios
obrigatrios

anaerbios
obrigatrios

anaerbios
facultativos

microaerfilos

anaerbios
aerotolerantes
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Fatores que afetam o crescimento

Fatores qumicos:
Capacidade de troca de ons:
Importncia:

Disponibilidade de nutrientes
Ligaes substrato-microrganismo
Defesa
Atrao de ons

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Fatores que afetam o crescimento

Fatores fsicos:
Temperatura:

Psicrfilos: - 5 C a 20 C
Mesfilos: 20 C a 50 C
Termfilos: 50 C a 80 C
Termfilos extremos: acima de 80 C

Importncia:

Respostas enzimticas
Respostas a choques trmicos
Razo de crescimento

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16

Fontes de Microrganismos
Os microrganismos de Interesse Industrial
pode ser obtidos:
Isolamento de recursos naturais: (solo, gua,
plantas, etc);
Compra em colees de cultura: (Agricultural
Research Service Culture Collection (EUA),
Coleo de Cultura Tropical (Campinas);
Obteno de mutantes naturais;
Obteno de mutantes induzidas por mtodos
convencionais;
Obteno de microrganismos recombinantes.

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Caractersticas Desejveis do
Microganismo
Os microrganismos de Interesse Industrial devem:
Apresentar elevada eficincia na converso do substrato em
produto;
Permitir o acmulo do produto no meio, de forma a ser elevada
concentrao do produto no caldo fermentado;
No produzir substncias imcompatveis com o produto;
Apresentar constncia quanto ao comportamento fisiolgico;
No ser patognico;
No exigir condies de processo muito complexas;
No exigir meios de cultura dispendiosos;
Permitir rpida liberao do produto para o meio.
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Caractersticas Desejveis do
Microganismo
Exemplo da Fermentao Alcolica:

C6H12O6

2C2H5OH + 2CO2

Fator estequiomtrico terico=0,511

Cada grama de glicose convertida em 0,511g de etanol
Saccharomyces cerevisiae, alcana 90% deste rendimento,
enquanto outros microrganimos produzem etanol, mas
com rendimentos muito inferiores;

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Caractersticas Desejveis do
Microganismo
Exemplo da Fermentao Alcolica:

C6H12O6

2C2H5OH + 2CO2

Por outro lado, sabe-se que quando se atinge 8 10% em

volume de lcool no meio, ocorre inibio da levedura e
diminui a velocidade de converso de acar em lcool.
Portanto no caso de obteno de lcool combustvel, deve-se
trabalhar com valores que no ultrapassem esta concentrao
alcolica.
Neste caso, a matria prima incide em 60% do valor do custo
do etanol.
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Caractersticas Desejveis do
Microganismo
Exemplo da produo de enzimas ou antibiticos:

Acar + O2

Clulas + CO2 + Produtos + Intermedirios

Oxignio, faz com que aumente consideravelmente a produo

de clulas, enquanto pequena quantidade do produto obtida.
A matria-prima barata, mas a recuperao do produto
onerosa, chegando a 70% do valor do custo, porm o produto
tem maior valor agregado.
Portanto, buscar microrganismo, que cresam menos, ou que
acumulem menos intermedirios, podem diminuir o custo do
processo.
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Caractersticas Desejveis do
Microganismo
Exemplo da produo de glicoamilase por Aspergillus:
Glicoamilase, enzima que hidrolisa amidos em glicose;
Transglicosidase, enzima que polimeriza a glicose formando amido;
Um microrganismo ideal, seria aquele que produz o mnimo de
substncias competitivas, ao mesmo tempo sintetize muito bem o
produto pretendido.

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Caractersticas Desejveis do
Meio de Cultivo
Ser o mais barato possvel;
Atender as necessidades nutricionais do microrganismo;
Auxiliar no controle do processo, como o caso de ser
ligeiramente tamponado, o que evita variaes drsticas de
pH, ou evitar excessiva formao de espuma;
No provocar problemas na recuperao do produto;
Os componentes devem permitir algum tempo de
armazenamento, a fim de estarem disponveis para o uso a
qualquer tempo;
Ter composio razoavelmente fixa;
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Meio de Cultivo
Os microrganismos utilizam:
Fonte de carbono e energia, diversos acares, como glicose,
sacarose, frutose, polissacarideos como amido e celulose;
Fonte de nitrognio: sais como (NH4+)2SO4, (NH4)2HPO4,
aminocidos e uria;
Fonte de fsforo: Monoamnio fosfato ou Diamnio fosfato;
Outros elementos: Na, K, Ca, Fe, Cu, Mg, Mn, Co, etc. em
concentraes bem reduzidas, porm necessrias.
Meios constitudos apenas por estas substncias so
denominados de meios sintticos.
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SUBSTRATOS

Monossacardeos (glicose, frutose, galactose, manose, ribose, xilose,

arabinose)
Dissacardeos:
Sacarose (glicose + frutose)
Lactose (galactose + glicose)
Maltose (glicose + glicose)
Trissacardeos:
Rafinose (glicose + frutose + galactose)
Maltotriose (glicose + glicose + glicose)
Polmeros de alto peso molecular:
Amido (amilose + amilopectina)
Amilose: cadeia linear de glicose ligaes alfa 1-4
Amilopectina: cadeia ramificada com ligaes alfa 1-4 e alfa 1-6
Celulose: polmero de glicose em ligaes beta 1-4
Glicognio: polmero de glicose com ligaes alfa 1-4 e alfa 1-6
Pectina: polmero de cidos galacturnico, raminose, arabinose e

Perfil de Utilizao de
Fontes de Carbono

Meio de Cultivo

Meios de cultivo preparados com fatores de crescimento:

aminocidos;
Vitaminas (biotina, tiamina, riboflavina, etc.);
Extratos de leveduras, extratos de malte, extratos de carne,
peptona, hidrolisados de protenas;

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Meio de Cultivo
Meios mais complexos e menos onerosos, por esta razo
empregados na maioria dos processos fermentativos em
grande escala:
Caldo de cana-de-acar;
Melao,
Cereais (trigo, milho, cevada, soja);
Frutas (uvas, jaboticabas, laranjas, bananas)
Estas matrias-primas so de composio qumica
desconhecidas, mas os teores de acares, nitrognio e
fosforo, devem ser determinados para avaliar sua
complementao ou no.

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Consideraes Finais

A definio adequada do microrganismo a ser

empregado, assim como do meio de cultura para este
microganismo, etapa fundamental para o sucesso de
um processo fermentativo;
No entanto, sempre importante lembrar que a
definio de um processo fermentativo mais
adequado, assim como as preocupaes com a
recuperao do produto, so etapas da mais alta
importncia;
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Consideraes Finais
Em alguns casos o emprego de microrganismos
disponveis em colees de cultura pode levar ao
desenvolvimento de processos produtivos que sejam
atraentes;
necessrio lembrar, no entanto, que presentemente
se dispem de muitos recursos para o aprimoramento
de linhagens produtivas, o que torna os processos
fermentativos cada vez mais promissores;

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Consideraes Finais

Essas consideraes trazem tambm um importante

alerta sobre a constante necessidade de
desenvolvimento do processo produtivo j instalado,
justamente por essa grande variedade de
desenvolvimentos possveis;
Presentemente e bastante dificial imaginar que uma
dada empresa disponha do microrganimso timo ou
do meio de cultura otimizado;
da mais alta importncia que essa empresa continue
a busca por melhores condies, em termos de
microrganismos e de meio, caso contrrio, poder ser
ultrapassada pela concorrente.
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ESTERILIZAO DE MEIOS
ESTERILIZAO DE MEIOS DE FERMENTAO POR
AQUECIMENTO A VAPOR
MUITOS PROCESSOS FERMENTATIVOS EXISTEM A
PRESENA DE MICORRGANISMOS ESTRANHOS
CONTAMINANTES;
EXEMPLO:
1. PINICILINA OS CONTAMINANTES PODEM PRODUZIR
PENICILINASE;
2. FERMENTAO ACETONA-BUTANLICA, A BACTRIA
PODE SER DESTRUDA POR VIRUS BACTERIFAGOS;
OS CONTAMINANTES CONSOMEM ACARES E
NUTRIENTES, COMPETINDO COM OS MICRORGANISMOS DE
INTERESSE.
O GRAU DE ELIMINTAO DOS CONTAMINANTES DEPENDE
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DE CADA CASO.

ESTERILIZAO DE MEIOS

PROCESSOS DE ESTERILIZAO POR AQUECIMENTO

PROCESSOS DESCONTNUO:
O MEIO COLOCADO NO FERMENTADOR E ENTO TODO O
SISTEMA AQUECIDO COM VAPOR. ESTERILIZA-SE O MEIO
E O FEMENTADOR AO MESMO TEMPO, PODENDO SER POR
VAPOR DIRETO OU INDIRETO;
O AQUECIMENTO COM VAPOR DIRETO, PROVOCA DILUIO
DO MEIO ENTRE 10 E 15%;
A ESTERILIZAO DESCONTNUCA TEM AS SEGUINTES
FASES:
1. AQUECIMENTO: elevao da temperatura prximo de 120 oc;
2. ESTERILIZAO: temperatura mantida constante durante o tempo
de esterilizao;
3. RESFRIAMENTO: refrigera-se o sistema por serpentina ou pela
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camisa do fermentador.

ESTERILIZAO DE MEIOS

PROCESSOS DE ESTERILIZAO POR AQUECIMENTO

A DESTRUIO TRMICA DOS MICRORGANISMOS
OCORREM QUANDO A TEMPERATURA EST ACIMA DA
TEMPERATURA MNIMA LETAL (80 A 100 oC).

DESVANTAGENS DA ESTERILIZAO
DESCONTNUA:
a) Manuteno do meio em teperaturas relativamente
altas por perodos longos, favorecendo o
desenvolvimento de reaes qumicas e
decomposio de nutrientes;
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ESTERILIZAO DE MEIOS
DESVANTAGENS DA ESTERILIZAO
DESCONTNUA:
a) Elevados

consumos de vapores no aquecimento e de

gua no resfriamento;
c) Problemas de corroso nos equipamentos;
d) Tempo no produtivo relativamente elevados,

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ESTERILIZAO DE MEIOS

ESTERILIZAO CONTNUA:
Pode ser por vapor direto ou indireto tambm.
O meio preparado bombeado para um trocador de
calor de placas ou tubos,
A temperatura sobe instantneamente e mantida por um
determinado tempo de residncia;
O meio enviado para outro trocador de calor para o
resfriamento;
O meio enviado para um fermentador, j esterilizado;
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ESTERILIZAO DE MEIOS
ESTERILIZAO CONTNUA:
ALGUNS VALORES NUMRICOS DE
ESTERILIZAO CONTNUA
a) vapor de aquecimento: vapor saturado (6,8 a
8,5 atm
b) bombas de recalque do mosto no esterilizado
podem ser bombas centrfugas, rotativas ou de
pisto;
c) tempo de enchimento do fermentador: no
superior a 8 hs;
d) temperatura de esterilizao: 130 A 165 oC;
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ESTERILIZAO DE MEIOS

VANTAGENS DA ESTERILIZAO
CONTNUA:
Temperaturas mais altas, porm tempos de
permanncia entre 5 e 10 minutos, o que diminui a
destruio dos nutrientes melhorando a
fermentao;
Meios com densidade ou viscosidade altas, como
mostos de cereais, o processo contnuo dispensa
motores de potencia elevada, o que seria
necessrio no caso do processo descontnuo;
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ESTERILIZAO DE MEIOS
VANTAGENS DA ESTERILIZAO
CONTNUA:
Economia de vapor, de gua de
resfriamento;
Os esterilizadores podem ser utilizados nos
processos de cozimentos e de sacarificao;

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ESTERILIZAO DE MEIOS
CINTICA DA DESTRUIO TRMICA DOS
MICRORGANISMOS:
A VELOCIDADE DE DESTRUIO DEPENDE:
a) dos microrganismos
b) do meio
c) da temperatura
Do ponto vista cintico a destruio dada pela
equao de primeira ordem:

onde: N= nmero de mo vivos

dN

dt

= K *N

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