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EXTRACCIN DE ADN

VEGETAL

Objetivos
-Realizar la extraccin de ADN de tejidos animales y vegetales y reflexionar
sobre la simpleza de su composicin con sencillas tcnicas.
- Observar la estructura fibrilar del ADN.
- Establecer la relacin entre el proceso de extraccin y propiedades qu?
mico-f?sicas del ADN

Fundamento
Al extraer ADN de bananas licuadas con agua, Una parte de esta mezcla de
banana, es tratada con shampoo y sal, mezclada durante 5-10 minutos, y
luego escurrida a travs de un filtro de caf. A lo filtrado se le agrega
alcohol fro y es ste el momento cuando el ADN de la solucin de banana
se precipita y se hace visible.
El detergente disuelve los lpidos (molculas grasas) y las protenas de la
membrana celular, rompiendo las uniones que mantienen la integridad de la
misma. De esta forma se libera el contenido celular. Luego, el detergente
forma complejos con los lpidos y las protenas, permitiendo que los mismos
sean separados del ADN por filtracin. As se libera el ADN. La sal permite
que el ADN precipite en una solucin fra de alcohol y que las cadenas de
ADN no se corten.

Materiales:
8 tazas o vasos de plstico
Licuadora
Una cuchara plstica para medir y mezclar
2 filtros de papel de caf N 2 (conos)
20 ml de agua destilada
Shampoo de color claro
3 bananas
Sal de mesa, con o sin Iodo
1 pipeta de transferencia plstica o un gotero mdico
1 tubo de ensayo sellado que contenga 95% de etanol o 91% de alcohol
isoproplico
1 conservadora con hielo para enfriar los tubos con alcohol
1 varilla de vidrio o 1 pipeta Pasteur
Procedimiento para la extraccin del ADN
Preparar una solucin de banana procesada con sal, agua destilada y
shampoo (detergente) mediante los siguientes pasos:
1

En una licuadora, mezclar una banana por taza de agua destilada


(250ml).
2 Licuar por 15-20 segundos, hasta que la solucin se mezcle.
3 En una taza, preparar una solucin consistente en una cucharadita de t
de shampoo y dos pizcas de sal.
4 Agregar 20 ml (4 cucharaditas) de agua destilada o hasta que la taza
est llena en un tercio.
5 Disolver la sal y el shampoo revolviendo lentamente con la cuchara de
plstico evitando formar espuma.
6 A la solucin preparada en el paso 2, agregar tres cucharaditas de t de
la mezcla de banana del paso 1.
7 Mezclar la solucin con la cuchara por 5-10 minutos.
8 Mientras uno de los miembros del grupo mezcla la solucin de banana,
otro miembro pondr el filtro N 2 de caf dentro de otra taza de
plstico. Doblar el borde del filtro alrededor de la taza para que el filtro
no toque el fondo de la taza.
9 Filtrar la mezcla vertindola dentro del filtro y dejar que la solucin drene por
algunos minutos hasta que sean 5 ml aproximadamente de filtrado para testear.
10 Tomar un tubo de ensayo con alcohol fro. Para mejores resultados el
alcohol debe estar tan fro como sea posible.
11 Llenar la pipeta plstica con la solucin de banana y agregarla al alcohol.
El ADN no es soluble en alcohol. Cuando el alcohol se agrega a la
mezcla, los componentes, excepto el ADN, permanecen en la solucin
mientras el ADN precipita en la capa de alcohol.

Conclusin
Al realizar el procedimiento adecuadamente, resulta que las fibrillas de ADN
comenzaron a salir, de un color blanco precipitado por sobre el alcohol
(mezcla Heterognea). Con un alambre doblas y obtenemos y sacamos del
tubo de ensayo el ADN. Si quieres conservar el ADN puede dejarse secar
sobre un papel de filtro.
En caso de que el ADN de la Muestra Vegetal no se pueda apreciar muy
claramente. Tenemos que agitar el tubo un poco para poderlo apreciarlo
mejor.
Si se tiene problemas con el filtro, que no est bien hecho y que no filtra
bien, por lo tanto hay que hacer otro. Tambin puede haber complicaciones
con la forma de poner el alcohol de manera que cayera por las paredes del
tubo de ensayo.
Con esto podemos saber cmo es el procedimiento del extracto del ADN, as
como si estructura de una forma fcil y sencilla.

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