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Bioqumica y
Biologa Molecular
Primer ao
2009-2010
Departamento de Bioqumica
Facultad de Medicina
Universidad Nacional Autnoma de Mxico
Cd. Universitaria, D.F. Agosto de 2009.
FACULTAD DE MEDICINA
MANUALES DEPARTAMENTALES
2004
Nueva edicin revisada y estructurada.
2005 primera reimpresin.
2006 primera reimpresin.
FACULTAD DE MEDICINA
Director
Secretario General
Secretario de Planeacin
DEPARTAMENTO DE BIOQUMICA
Dr. Edgar Zenteno Galindo
Coordinador de Investigacin
Coordinadora del Laboratorio de Prcticas
Colaboradores
OBJETIVOS DEL CURSO
lpidos).
Hayde
Torres
Guerrero
(modificaciones
postraduccionales).
Ada Uribe Medina (caractersticas de la materia viva).
Alejandro
Zentella
Dehesa
(virus,
oncogenes
transformacin).
SYLLABUS
Guillermo lvarez Llera (agua, ciclo de Krebs, oxidacin de
los
aminocidos,
qumica
metabolismo
de
Cea
Bonilla
protenas,
(fundamentos
enzimas
del
coenzimas,
metabolismo,
estructura
de
carbohidratos,
metabolismo
de
carbohidratos,
regulacin de la glucemia, regulacin del metabolismo
de lpidos, sntesis y degradacin de fosfolpidos,
regulacin
e
integracin
metablica,
biologa
molecular).
Leonor Fernndez Rivera Ro (nucletidos).
scar Flores Herrera (figuras: ciclo energtico, vas que
siguen los protones en las levaduras, ciclo de Krebs y
esquema de un potencimetro).
Alberto
Hamabata
Nishimuta
(aspectos
bsicos
de
Flores
Robles.
CONTENIDO
PROGRAMA ACADMICO
I.
II.
Introduccin
III.
IV.
Objetivos de aprendizaje
12
V.
Metodologa educativa
12
VI.
13
VII.
Lineamientos de evaluacin
19
VIII.
IX.
10
alumnos
25
Bibliografa
25
27
29
29
29
y
29
46
48
B.1. Estructura
48
B.2. Digestin y absorcin
48
C. Metabolismo energtico
50
C.1. Gluclisis
50
C.2. Papel de la mitocondria en las funciones
oxidativas
51
C.3. Descarboxilacin del piruvato
52
C.4. Ciclo de los cidos tricarboxlicos (ciclo
de Krebs)
52
C.5. Cadena de transporte de electrones
(cadena respiratoria)
54
C.6. Fosforilacin oxidativa
54
C.7. Radicales libres
56
D. Otras vas metablicas de los carbohidratos.58
D.1. Gluconeognesis
58
D.2. Glucogenlisis y glucognesis
59
D.3. Va del fosfogluconato (ciclo de las
pentosas)
59
D.4. Regulacin de la glucemia
60
E. Lpidos
62
E.1. Estructura
62
E.2. Digestin, absorcin y transporte
62
F. Metabolismo de lpidos
64
F.1. Oxidacin de los cidos grasos (oxidacin)
64
F.2. Sntesis y utilizacin de los cuerpos
cetnicos
65
F.3. Sntesis de cidos grasos
65
F.4. Sntesis y degradacin de triacilgliceroles
66
F.5. Sntesis y degradacin de fosfolpidos 67
F.6. Metabolismo del colesterol
67
F.7. Estructura y metabolismo de las
lipoprotenas
68
F.8. Regulacin y alteraciones del
metabolismo de lpidos
69
G. Metabolismo de los compuestos
nitrogenados.
72
G.1. Aminocidos y protenas
72
G.2. Nucletidos
74
H. Regulacin e integracin metablica
76
80
83
83
83
85
86
VI
89
90
93
95
de la reaccin enzimtica
140
Prctica 4. Efecto de la insulina sobre la Glucemia
de la rata.
145
Prctica 5. Estudio del bombeo de protones
por levaduras; efecto de los inhibidores
de la cadena de transporte de electrones
y de los desacoplantes
146
Prctica 6. El efecto del etanol sobre la lipoperoxidacin
149
Prctica 7. Estudio general del metabolismo
de carbohidratos
150
Prctica 8. El efecto del tetracloruro de carbono
sobre las transaminasas
1155
Prctica 9.Determinain de glucosa en sangre
total.
156
Prctica 10. Integracin metablica
Prctica 11. Huella gnica
160
168
VII
PROGRAMA ACADMICO
Calidad
acadmica.
Que
significa
favorecer la formacin ms all de la
simple informacin en sus estudiantes,
fortaleciendo su preparacin en las
ciencias bsicas de la medicina que les
permita seguir el ritmo de los avances en
el conocimiento y sus aplicaciones en la
clnica.
Vitalidad. Para poder enfrentar el futuro
en el contexto del cambio cientfico y
tecnolgico y de las modificaciones que
experimenten
las
condiciones
socioeconmicas de nuestra poblacin.
Para ello, ser necesario rescatar la
enseanza tutorial orientada a la solucin
de problemas de manera original e
innovadora y capaz de inducir en el
estudiante una conciencia clara de sus
necesidades de actualizacin permanente
y educacin continua.
Investigacin original. Por cuanto que es
un elemento indispensable para alcanzar
un sistema de salud de alta calidad y
eficiencia, y porque es la nica va para
atender
cabalmente
los
complejos
fenmenos que inciden en el proceso de la
salud y la enfermedad en medicina,
educacin
e
investigacin
son
inseparables.
Humanismo. Porque el fin ltimo del
mdico es el hombre mismo. Para ello
habr de desarrollar una sensibilidad
singular ante el dolor y la angustia de los
enfermos, ante su ignorancia y sus
problemas, para que pueda ayudar a
superarlos. Para poder servir a la sociedad
y los individuos con plena conciencia de
sus valores y potencialidades habr que
inducir en nuestros estudiantes una actitud
humanitaria.
aspectos
afectivos,
emocionales
y
conductuales de los pacientes bajo su
cuidado.
Conoce con detalle los problemas de
salud de mayor importancia en nuestro
pas y es capaz de ofrecer tratamiento
adecuado a los pacientes que los
presentan.
Promueve el trabajo en equipo con otros
mdicos y profesionales de la salud y
asume la responsabilidad y el liderazgo
que le corresponden, segn su nivel de
competencia y papel profesional.
Dispone de conocimientos slidos acerca
de las ciencias de la salud, lo que le
permite utilizar el mtodo cientfico como
herramienta de su prctica clnica habitual
y lo capacita para optar por estudios de
posgrado, tanto en investigacin como en
alguna especialidad mdica.
Tiene una actitud permanente de
bsqueda de nuevos conocimientos, por lo
que cultiva el aprendizaje independiente y
autodirigido, lo que le permite actualizarse
en los avances de la medicina y mejorar la
calidad de la atencin que otorga.
Se mantiene actualizado en relacin a los
avances cientficos y tecnolgicos ms
recientes; utiliza la informacin y la
tecnologa
computacional
para
la
adquisicin de nuevos conocimientos y
como una herramienta de trabajo dentro
de su prctica profesional.
II. INTRODUCCIN:
1. Mapa curricular:
ANATOMA
PRIMER AO
SEGUNDO AO
FARMACOLOGA
FISIOLOGA
INMUNOLOGA
MICROBIOLOGA Y PARASITOLOGA
SALUD PBLICA II
ASIGNATURAS DE LIBRE
ELECCIN***
TERCER AO
PROPEDUTICA Y
FISIOPATOLOGA*
PATOLOGA
MEDICINA GENERAL I*
PSICOLOGA MDICA II**
SALUD PBLICA III***
GENTICA CLNICA*
CUART
O AO
SEMINARIO CLNICO*
ASIGNATURAS DE LIBRE
ELECCIN***
HISTORIA Y FILOSOFA DE LA
MEDICINA
10
ASIGNATURAS DE LIBRE
ELECCIN***
SEXTO AO
S E R V I C I O
URGENCIAS
COMUNIDAD
GINECOLOGA Y
OBSTETRICIA
CIRUGA
MEDICINA
INTERNA
PEDIATRA
QUINTO AO
INTERNADO MDICO*
S O C I A L
* Estas asignaturas son la base del entrenamiento en el rea clnica, en llas el alumno
adquirir los conocimientos acerca de la patologa de los diversos aparatos y sistemas,
as como las habilidades y destrezas necesarias para el manejo de los problemas de
salud ms frecuentes.
** Estas asignaturas corresponden al rea sociomdica.
*** Su propsito es permitir que el alumno profundice o complemente de acuerdo a sus
preferencias algunos contenidos del plan de estudios; tenga la posibilidad de capacitarse
en ciertas reas no consideradas en dicho plan, as como tambin dar flexibilidad al
currculo.
reas de rotacin bimestral.
11
Departamento
de
Terica y prctica
Primer ao
Anual
Teora: 160 h
Prctica: 120 h
6. N de crditos
22
7. Clave
1115
8. Requisitos acadmicos
Cubrir
los
requisitos de ingreso a la licenciatura
IV OBJETIVOS DE APRENDIZAJE
1. Que el estudiante entienda los fenmenos
biolgicos desde el punto de vista molecular y
que sea capaz de integrar este conocimiento
en la estructura fisiolgica de la clula, del
tejido y del organismo.
2. Que el estudiante conozca los mecanismos
moleculares del funcionamiento del organismo
humano de una manera dinmica e integral y,
al mismo tiempo, comprenda cmo esos
mecanismos se encuentran alterados en la
enfermedad.
3. Que el estudiante demuestre, mediante
actividades ex profeso, que ha podido integrar
el conocimiento a nivel molecular como una
herramienta fundamental para la comprensin
de los procesos fisiolgicos y de la
fisiopatologa y con ello entienda los principios
en los que se apoya la tecnologa empleada
en el diagnstico de enfermedades.
4. Que el estudiante aplique el mtodo cientfico
como una herramienta en la identificacin, el
anlisis y la solucin de problemas mdicos.
V. METODOLOGA EDUCATIVA
Con base en lo descrito en el Plan nico de
Estudios respecto a este tema en los puntos A. 1,
12
2, 4, 6, 7, 8 y 9 y B. 1 y 2, el profesor utilizar, en
la medida de lo posible, algunos procedimientos y
tcnicas que impliquen una metodologa centrada
en la solucin de problemas, la vinculacin tericoprctica de los conocimientos (el desarrollo y
discusin de prcticas de laboratorio de inters
mdico), la aplicacin de tcnicas de enseanza
que favorezcan la participacin activa de los
estudiantes (como seminarios, discusin de casos,
las semanas de integracin bsica-clnica), as
como la bsqueda y anlisis crtico de la
informacin, sea de libros como de fuentes
automatizadas, para lograr los objetivos de
aprendizaje.
II. Aspectos
fisicoqumicos
del
funcionamiento celular
A. Aspectos bsicos de fisicoqumica aplicados
a la bioqumica
B. Agua
C. Equilibrio hidroelectroltico y cido-base
D. Aminocidos y protenas
D.1. Aminocidos
D.2. Protenas
E. Enzimas y coenzimas
E.1. Caractersticas
de
un
sistema
enzimtico
E.2. Cintica enzimtica
E.3. Aspectos mdicos de la enzimologa
13
G. Metabolismo
de
los
compuestos
nitrogenados
G.1. Aminocidos y protenas
G.2. Nucletidos
H. Regulacin e integracin metablica
UNIDAD
Molecular
TEMTICA
III:
Biologa
IV Biologa Molecular
A. Organizacin del genoma
14
3. CALENDARIO DE ACTIVIDADES:
CALENDARIO SUGERIDO PARA CUBRIR LAS ACTIVIDADES DE LA PRIMERA UNIDAD TEMTICA
(BLOQUE 1)
Semana
Fecha
10 al 15 de agosto
17 al 22 de agosto
B. Agua
Prctica: Soluciones
24 al 29 de agosto
B. Agua
Amortiguadores
C. Equilibrio hidroelectroltico y cido-base
Prctica: Soluciones
Revisin del caso clnico: CLERA
31 de agosto al 5 de
septiembre
7 al 12 de septiembre
D. Aminocidos y Protenas
Prctica: Equilibrio cido-base
14 al 19 de septiembre**
D. Aminocidos y Protenas
Prctica: Equilibrio cido-base
21 al 26 de septiembre
E. Enzimas y coenzimas
Prctica: Cintica Enzimtica
28 de septiembre al 3 de
octubre
E. Enzimas y coenzimas
Prctica: Cintica enzimtica
5 al 10 de octubre
Tema
Lgica molecular de la vida: Caractersticas de la materia viva y
jerarqua de la organizacin celular.
A. Aspectos bsicos de Fisicoqumica aplicados a la
Bioqumica.
2 . Unidad
A. Fundamentos del metabolismo
B. Estructura y Digestin de carbohidratos
10
12 al 17 de octubre
16 DE OCTUBRE
* Da de asueto
/ Exmenes departamentales
15
Fecha
Tema
19 al 24 de octubre/
26 al 31 de octubre///
C. Gluclisis
Descarboxilacin del piruvato
C. Ciclo de los cidos tricarboxilicos
Prctica: Efecto de la insulina sobre la Glucemia
de la rata
3 al 7 de noviembre/
9 al 14 de noviembre
16 al 21 de noviembre*
23 al 28 de noviembre
30 de noviembre al
5 de diciembre
7 al 11 de diciembre//
D. Regulacin de la glucemia
12 de diciembre 09
al 2 de enero 10
4 al 9 de enero 2010
Vacaciones de Navidad
10
7 de enero 2010
C. Radicales libres
D. Gluconeognesis
Prctica: El efecto del etanol sobre la Lipoperoxidacin
1. Semana de Integracin Bsica-Clnica
MIELOMENINGOCELE E INSUFICIENCIA RENAL
D. Va del fosfogluconato
D.Glucognesis y glucogenlisis
Discusin Semana de Integracin
D.
Regulacin de la glucemia
Revisin del caso clnico: HIPOGLUCEMIA E
INTOXICACIN ALCOHLICA
Prctica: El efecto del etanol sobre la Lipoperoxidacin
* Da de asueto
/ Exmenes departamentales
16
Fecha
7 al 9 de enero 2010
Tema
11 al 16 de enero
18 al 23 de enero
25 al 30 de enero
1
2
3
4
1 al 6 de febrero/
5
6
8 al 13 de febrero
15 al 20 de febrero
22 al 27 de febrero
8
1 al 6 de marzo
10
8 al 13 de marzo//
11
17 de marzo
Da de asueto
/ Exmenes departamentales
17
Fecha
Tema
18 al 20 de marzo
22 al 27 de marzo
2
3
29 de marzo al 3 abril
5 al 10 de abril
12 al 17 de abril
5
19 al 24 de abril
26 al 30 de abril
3 al 7 de mayo//*
7 de mayo
* Da de asueto
/ Exmenes departamentales
Los contenidos especficos correspondientes a este programa, tanto tericos, como las prcticas de
laboratorio y los casos clnicos a que hace referencia esta calendarizacin de actividades se encuentran en el
manual de objetivos y prcticas de laboratorio de la Asignatura de Bioqumica y Biologa Molecular.
18
19
20
21
22
23
24
IX BIBLIOGRAFA
Profesores
BSICAS
COMPLEMENTARIAS
1. Alberts B, Bray D, Lewis J. Biologa molecular
de la clula. 3a. ed. Barcelona: Ediciones
Omega; 1992.
2. Bloomfield MM.Qumica de los organismos
vivos. Mxico: Editorial Limusa; 1997.
3. Holum JR. Fundamentos de qumica general,
orgnica y bioqumica para ciencias de la
salud. Mxico: Editorial Limusa Wiley; 2001.
25
CONTENIDO TEMTICO
26
I
LGICA MOLECULAR DE LA VIDA
Al finalizar esta unidad, el alumno conocer la naturaleza qumica de los seres vivos y
su organizacin. La unidad se divide en:
A. Caractersticas generales de la materia viva.
B. Niveles de la organizacin celular.
A. Caractersticas generales de la
materia viva
Al finalizar esta subunidad, el alumno conocer las
caractersticas de la materia viva.
A.1
A.2
27
H
Li
Be
a Mg
K Ca
Sc Ti
Rb Sr
Cs Ba
B C O F
Ne
Al Si P S Cl
Ar
V Cr Mn Fe Co Ni Cu Zn Ga
Zr Nb
Mo Tc
Hf
Ta
Ru Rh Pd Ag Cd
Re Os
Ir
Pt
In
Au Hg Tl
Ge
As Se Br
Kr
Sn
Sb Te
Xe
Pb Bi
Po At Rn
Fr Ra
28
B.1.3
B.2
Conocer
los
aminocidos,
nucletidos, monosacridos y cidos
grasos
como
precursores
de
protenas,
cidos
nucleicos,
polisacridos y lpidos, as como las
diversas funciones que llevan a cabo
en el organismo.
29
Tabla I.1
Tipo de enlace
INICO
COVALENTE
Simple
Coordinado
Polar
Mltiple
Enlaces
intermoleculares
PUENTE DE
HIDRGENO
FUERZAS DE
VAN DER WAALS
INTERACCIONES
HIDROFBICAS
INTERACCIN
IN DIPOLO
Descripcin general
Es la fuerza de atraccin entre iones con signos
contrarios que se forman por la transferencia completa
de electrones desde el tomo con mayor tendencia a
perderlos, al que tiene mayor afinidad por ellos.
Resulta de compartir electrones entre dos o ms
tomos que tienen una afinidad electrnica semejante
Se forma mediante la donacin de un electrn por parte
de cada tomo que participa en el enlace.
Ambos elctrones los da uno solo de los tomos que
participan en la formacin del enlace.
Se establece cuando los electrones del enlace
covalente se encuentran ms cerca del elemento de
mayor electronegatividad. En el enlace se forma un
polo relativamente positivo y otro relativamente
negativo.
En algunos compuestos de los tomos comparten ms
de un par electrnico (enlaces dobles o triples).
Fuerzas de atraccin dbiles entre diferentes
molculas y iones
Interaccin dipolo-dipolo. Se establece cuando un
tomo de hidrgeno sirve como puente entre dos
tomos electronegativos, unido a uno con un enlace
covalente, y al otro, con fuerzas de naturaleza
electrosttica.
Son fuerzas electrostticas transitorias. La atraccin se
establece entre los extremos de dipolos momentneos
con cargas opuestas.
Enlaces polares. Las molculas se reunen
conjuntamente asocindose entre s en el seno del
agua debido a que las interacciones agua-agua son
muy fuertes y rodean a las molculas apolares
Es la atraccin de un in positivo por el extremo
negativo de las molculas de un disolvente polar
(solvatacin). Cuando el disolvente es el agua, se dice
que las partculas de soluto se hidratan.
Energa de enlace
10-20 kcal/mol
42-84kJ/mol
Para la unin:
CC
83 kcal/mol
348 kJ/mol
___
OH
111kcal/mol
464kJ/mol
CC
146kcal
611kJ/mol
___
2.5kcal/mol
8-21kJ/mol
1kcal/mol
4kJ/mol
1-2kcal/mol
4-8kJ/mol
0.01 kcal/mol
0.04kJ/mol
30
II
ASPECTOS FISICOQUMICOS
DEL FUNCIONAMIENTO CELULAR
Al finalizar esta unidad, el alumno deber conocer y aplicar los conceptos
fundamentales de fisicoqumica a la comprensin de la estructura y comportamiento de
las molculas biolgicas en la clula y en su interaccin con el ambiente; adems,
conocer algunos aspectos mdicos de ellos. La unidad se divide en:
A.
A.
B.
Agua.
C.
D.
Aminocidos y protenas.
E.
Enzimas y coenzimas.
A.4
A.5
A.6
A.1
A.2
A.3
31
(3)
32
B.3
Ecuacin:
(kcal/mol)
Glucosa + Pi = Glucosa 6 fosfato + H2O
+3.3
7.3
B.
Agua
Conocer
las
siguientes
propiedades
fisicoqumicas del agua: su composicin, sus
enlaces qumicos, densidad electrnica,
caractersticas de dipolo, puentes de
hidrgeno, estructura en sus estados fsicos,
calor latente de vaporizacin, calor
especfico, tensin superficial, conductividad
trmica, constante dielctrica y su papel
como solvente.
B.2
Soluciones acuosas.
B.2.1 Definir qu es una solucin y los
diferentes tipos de soluciones que
existen.
B.2.2 Explicar los clculos y los
procedimientos
para
preparar
soluciones porcentuales molares,
osmolares y normales, as como las
diferentes diluciones de estas.
Conocer la composicin de las
siguientes soluciones utilizadas en
medicina: solucin istonica, de
Ringer, de Darrow, de Hartman.
B.2.3 Revisar las propiedades coligativas
de las soluciones y su importancia en la
medicina.
B.2.4 Definir
los
conceptos
de
osmolaridad,
osmolalidad,
hiper
e
hipoosmolaridad, as como el de isotonicidad.
Realizacin de la prctica 1 "Soluciones" (ver pg.
133)
33
H 2O
H + OH
A las sustancias que tienen esta capacidad
se las llama anfteras o anfolitos.
La velocidad de las reacciones qumicas
depende de la concentracin de las molculas
implicadas en ellas, as como de una constante de
34
Equilibrio hidroelectroltico
y cido-base
C.2
C.3
Analizar
el
concepto
de
sistema
amortiguador.
C.3.1 Definir
el
concepto
de
amortiguador, de pK y explicar la
importancia
de
los
sistemas
biolgicos de amortiguacin.
C.3.2 Aplicar la ecuacin de HendersonHasselbalch al clculo del pH y de la
concentracin de sal o de cido de
diferentes soluciones.
C.3.3 Identificar
los
sistemas
amortiguadores ms importantes en
los medios intra y extracelular.
Explicar cmo se regula el pH de los
lquidos orgnicos y la participacin de los
sistemas amortiguadores, el intercambio
inico,
as
como
los
mecanismos
respiratorios y renales.
C.4.1 Revisar las principales alteraciones
del equilibrio cido-base en el
organismo y los mecanismos para su
control.
C.4
35
2+
2+
electrlitos como Na , K , Cl , HCO3 , Mg y Ca ,
fosfatos y proteinatos. Las concentraciones de estos
electrlitos se mantienen dentro de ciertos lmites
que al alterarse, producen desequilibrios que pueden
llegar hasta la muerte.
En la prctica mdica est indicada la
cuantificacin de electrlitos en cualquier paciente
con sntomas neuromusculares. El tratamiento de las
alteraciones hidroelectrolticas se basa en la
evaluacin del agua corporal total y su distribucin,
as como en las concentraciones de electrlitos y en
la osmolaridad del suero.
Agua corporal
El agua en el cuerpo humano ocupa cerca de 70%
del peso corporal dependiendo de la edad, el sexo y
la grasa corporal. La cantidad de agua puede variar
desde alrededor de un 40% en personas mayores a
ms de un 75% en nios recin nacidos. Su
porcentaje tambin es mayor en personas delgadas
que en obesas, as como un hombre tendr mayor
cantidad de agua que una mujer. La cantidad de
agua presente en los diferentes tejidos vara de
acuerdo con las funciones y caractersticas de cada
uno,
siendo
ms
abundante
en
clulas
metablicamente muy activas (~ 90%) y de menos
del 10% en el tejido adiposo o an menor, en
estructuras relativamente inactivas como el
esqueleto.
El agua se encuentra distribuida en el lquido
intracelular (30-40% del peso corporal total) y el
lquido extracelular que, a su vez, est conformado
por el lquido intersticial y la linfa (15%), el plasma
(4.5%) y los fluidos transcelulares que incluyen los
36
Osmolaridad
Las diferentes molculas disueltas en el agua
corporal contribuyen a la presin osmtica, la cual es
proporcional a la concentracin molar de la solucin.
Un cambio en la concentracin inica en cualquiera
de los compartimentos celulares crea un gradiente de
presin y como consecuencia, existe un cambio en la
cantidad de agua que fluye del compartimiento que
presenta una menor osmolaridad hacia el de mayor.
Para determinar la concentracin osmolar de
una solucin que contiene una mezcla de electrlitos
y no electrlitos hay que tener en cuenta las
concentraciones
individuales
de
todos
sus
componentes. Una frmula sencilla para cuantificar la
osmolaridad del suero y que ofrece una utilidad
clnica es:
+
Osmolaridad =2(Na mmol/l) + glucosa mmol/l + BUN
mmol/l
= 280 a 320 mOsm
Osmolaridad = 2(Na+ meq/l) + glucosa mg/dl + BUN mg/dl
---18
-----
2.8
Protenas.
D.2.1 Identificar
los
productos
de
hidrlisis de las protenas.
D.2.2 Clasificar a las protenas con base
en su composicin, funcin y
localizacin.
D.2.3 Conocer las caractersticas ms
importantes de la unin peptdica.
Describir qu es un pptido y
mencionar
algunos
de
los
polipptidos
importantes
en
medicina.
D.2.4 Describir el estado nativo de las
protenas y sus diferentes niveles de
organizacin: estructuras primaria,
secundaria, terciaria y cuaternaria y
mencionar las fuerzas que las
Aminocidos y protenas
37
D.2.5
D.2.6
D.2.7
38
O
N
C
H
N+
H
Desnaturalizacin
Se dice que una protena se desnaturaliza cuando
pierde sus diversos niveles de organizacin
estructural. Algunos agentes que desnaturalizan las
protenas son: el calor, los pH extremos, los rayos X,
la luz UV, o la agitacin vigorosa. La
desnaturalizacin es causada por un colapso de la
estructura original con la ruptura de los enlaces de
hidrgeno, de los enlaces inicos y de las
interacciones hidrofbicas, sin cambios en la
estructura primaria. La desnaturalizacin va
acompaada de la disminucin de la solubilidad,
cambios en la rotacin ptica, prdida de la funcin
biolgica y una mayor susceptibilidad al ataque de
las enzimas digestivas. En algunos casos, al eliminar
los agentes que causan la desnaturalizacin, la
protena recupera su conformacin original; a este
fenmeno se le conoce como renaturalizacin.
Una mezcla de protenas puede separarse a
partir de las diferentes movilidades en un campo
elctrico (electroforesis), por cromatografa de
distintos tipos o por su diferente solubilidad.
39
E.
Enzimas y coenzimas
40
E.2.5
Al finalizar esta subunidad, el alumno conocer qu
es una enzima y cmo acta; podr calcular sus
principales parmetros cinticos y el efecto de
algunas molculas que modifican su accin y
describir ciertas aplicaciones mdicas de las
enzimas.
E.1
Caractersticas de un sistema enzimtico.
E.1.1 Conocer qu son las enzimas y su
clasificacin de acuerdo con su
funcin.
E.1.2 Identificar los componentes de un
sistema enzimtico y mencionar las
coenzimas
y
cofactores
que
participan.
E.1.3 Analizar el papel de vitaminas
hidrosolubles como precursores de
las coenzimas e identificar al
magnesio, al manganeso y al fierro
como
ejemplos
de
cofactores
metlicos.
E.1.4 Definir los conceptos de zimgeno
e isoenzima.
E.1.5 Conocer el modo de accin de las
enzimas y en qu consiste su
especificidad.
E.2
Cintica enzimtica.
E.2.1 Analizar una reaccin enzimtica
para identificar al sustrato, al
complejo enzima-sustrato y al
producto.
E.2.2 Definir lo que es la velocidad de
una reaccin enzimtica y conocer
cmo se calcula su constante de
equilibrio; mencionar el significado
de dicha constante.
E.2.3 Analizar
las
ecuaciones
de
Michaelis Menten y de LineweaverBurk; describir sus usos e
identificar el significado de los
valores de Vmx y de Km.
E.2.4 Conocer las estrategias de control
de la actividad de las enzimas: disponibilidad
de
sustrato,
modificacin
covalente,
alosterismo,
retroalimentacin
y
concentracin de la enzima.
E.2.6
E.3
Describir
la
accin
de
los
inhibidores
competitivos
y
no
competitivos y de los moduladores
alostricos sobre la actividad de las
enzimas.
Conocer el efecto del pH y de la
temperatura sobre la actividad
enzimtica.
41
42
c)
43
Transfieren
electrones
hidrgenos.
TRANSFERASAS. Transfieren
entre dos molculas.
grupos
funcionales
Realizan
interconversiones
de
ismeros.
LIGASAS. Realizan reacciones de formacin de
enlaces con gasto de ATP.
44
CONTENIDO TEMTICO
45
III
METABOLISMO Y BIOENERGTICA
Al finalizar esta unidad, el alumno conocer en forma integral las rutas metablicas de las diversas
molculas biolgicas en las clulas y las alteraciones que aparecen asociadas a su disfuncin en algunas
enfermedades. La unidad se compone de:
A.
B.
C.
D.
E.
F.
G.
H.
A.
A.1
Conocer las
metabolismo.
funciones
generales
del
A.2
A.3
A.4
A.5
A.6
46
se
divide
en
catabolismo
Catabolismo
Anabolismo
Biodegradativa.
Biosinttica.
Oxidativa.
Reductora.
Generador de energa.
Consumidor de energa.
Variedad de materiales
iniciales, pero productos
finales bien definidos
(convergente)
47
4.
las
glicoprotenas
y
de
los
glicolpidos y conocer su funcin
como receptores y molculas de
reconocimiento.
En
las
clulas
eucariticas,
la
compartimentalizacin permite la localizacin
especfica de las vas metablicas y su control.
B. Carbohidratos
Al finalizar esta subunidad, el alumno explicar la
estructura qumica de los carbohidratos, sus fuentes,
su digestin, su absorcin y la funcin que
desempean en la clula.
B.1
Estructura.
B.1.1 Definir qu son los carbohidratos y
cul es su importancia biolgica.
B.1.2 Conocer la clasificacin de los
carbohidratos con base en el nmero
de unidades sacridas que los
componen (mono, di, tri, oligo y
polisacridos) y con base en su
composicin
(homo
y
heteropolisacridos).
B.1.3 Conocer la estructura qumica de
los monosacridos con base en su
grupo carbonilo, en su estructura
lineal o cclica y en el nmero de
tomos de carbono. Sealar las
siguientes
caractersticas
fisicoqumicas:
solubilidad
y
propiedades pticas. Definir el
concepto de carbono asimtrico y los
diferentes tipos de ismeros pticos:
epmero, enantimero y anmero.
B.1.4 Describir la estructura de los
carbohidratos
de
importancia
fisiolgica: ribosa, glucosa, fructosa,
manosa,
galactosa,
sacarosa,
lactosa, maltosa, almidn, glucgeno
y celulosa.
B.1.5 Describir
la
estructura
y
caractersticas de los principales
heteropolisacridos
(quitina,
heparina, sulfato de dermatan,
condroitin
sulfato,
glicosaminoglucanos,
peptidoglicanos). Reconocer los
carbohidratos como componentes de
B.2
Digestin y absorcin.
B.2.1 Sealar las fuentes dietticas de los
carbohidratos y el papel de la celulosa
en la dieta de los mamferos.
B.2.2 Conocer el proceso de la digestin y
la absorcin de los carbohidratos de la
dieta.
B.2.3 Conocer
los
cinco
principales
transportadores de glucosa (GLUT 1 a
GLUT 5) y su distribucin en los
diferentes tejidos.
Lecturas recomendadas
1.
Daz HD, Burgos HLC. Cmo se transporta
la glucosa a travs de la membrana celular?
IATREA. 2002; 15 (3): 179-189.
2.
Maeder T. Sweet Medicine. Scientific
American. 2002; 287(1): 24-31.
Los carbohidratos, o sacridos, son las biomolculas
ms abundantes en la naturaleza y son
indispensables en los organismos vivos. Se les llama
carbohidratos debido a que su estructura qumica
semeja formas hidratadas del carbono y se
representan con la frmula (CH2O)n; qumicamente
se definen como derivados aldehdicos y cetnicos
de alcoholes polivalentes y no puede haber menos
de 3C para constituir un carbohidrato.
48
Transportador
GLUT 1
Distribuidor
Propiedades
Eritrocitos,
Ingreso
barrera
de glucosa.
basal
hematoencefli
Km 1.6 mM.
ca,
placenta,
retina,
rin y cerebro.
GLUT 2
Hgado,
Transportador
pncreas
de
galactosa
intestino
delgado
glucosa,
y
fructosa.
Sensor
de
glucosa
en
pncreas.
Km de 15 mM o
ms.
GLUT 3
Cerebro,
placenta,
hgado, rin
y corazn.
Ingreso basal
de glucosa.
KM 2 mM.
Transportador
de glucosa y
galactosa.
GLUT 5
Tejido
adiposo,
corazn
y
msculo
esqueltico.
Yeyuno,
espermatozoi
des,
rin,
cerebro.
Dependiente
de insulina.
Km de 5 mM.
Transportador
de
fructosa.
Glucsidos
Son los compuestos resultantes de la unin
covalente de azcares con varias molculas. Se
clasifican en homoglucsidos, si se unen
exclusivamente carbohidratos (osas) mediante
49
C. Metabolismo energtico
Al finalizar esta subunidad, el alumno conocer las
vas involucradas directamente en la generacin de
la energa de la clula.
C.1
Gluclisis.
C.1.1 Describir las reacciones de la va
glucoltica, indicando las reacciones
irreversibles y aquellas que generan
NADH o ATP por fosforilacin a nivel
de sustrato.
C.1.2 Sealar los productos de la va y su
destino en presencia y en ausencia
de oxgeno; discutir la importancia
fisiolgica de la formacin de lactato.
C.1.3 Conocer el balance energtico y la
regulacin de la va glucoltica; har
nfasis en el papel de las siguientes
molculas: ATP, ADP, AMP, fructosa
2,6-bisfosfato, alanina y citrato.
C.1.4 Sealar la importancia de la
gluclisis en los eritrocitos, en las
clulas musculares, en las clulas
nerviosas y en los hepatocitos.
50
C.2
C.2.1
C.2.2
C.2.3
Conocer la biognesis de la
mitocondria.
Sealar la estructura de la
mitocondria
y
describir
las
caractersticas
de
su
matriz,
membrana
externa,
membrana
interna y espacio intermembranal;
har nfasis en su papel en la
transduccin de energa.
Reconocer que en la mitocondria se
realizan, entre otras, las siguientes
vas: sntesis de algunas protenas,
descarboxilacin del piruvato, oxidacin, ciclo de Krebs, cadena de
transporte
de
electrones
y
fosforilacin oxidativa.
51
C.3
C.4
Ciclo de los cidos tricarboxlicos (ciclo de
Krebs).
C.4.1 Definir
el
concepto
de
xidorreduccin,
par
redox
y
potencial de xidorreduccin.
C.4.2 Sealar la localizacin subcelular
de la va en funcin de sus
alimentadores y precisar el papel
del ciclo en la generacin de la
energa celular.
C.4.3 Describir
las
reacciones
enzimticas involucradas en el ciclo,
sus sustratos y productos, as como
las sustancias que intervienen en la
regulacin de la va.
C.4.4 Conocer el papel anfiblico de la
va y los diferentes destinos de sus
intermediarios: citrato, isocitrato, cetoglutarato, succinil CoA, malato y
oxaloacetato.
C.4.5 Definir el concepto de reaccin
anaplertica y conocer las enzimas
involucradas en estas reacciones
para el ciclo de Krebs.
C.4.6 Conocer el balance energtico de la
va y har nfasis en el nmero y tipo
de coenzimas reducidas producidas
52
2CO2 + 4(2H )
b)
c)
d)
e)
f)
53
C.5.2
C.5.3
C.5.4
C.5.5
Lecturas recomendadas
1.
2.
3.
4.
de
la
cadena
respiratoria
S20.
5.
enfermedades
mitocondriales
durante
la
C.6
Fosforilacin oxidativa.
C.6.1 Describir brevemente la hiptesis
quimiosmtica
propuesta
para
explicar la sntesis de ATP y los
datos que existen en favor de ella.
Definir
los
conceptos
de
vectorialidad,
impermea-bilidad,
fuerza protonmotriz e ionforo,
empleados en esta hiptesis.
C.6.2 Con base en el clculo de energa
libre de Gibbs, sealar el nmero
54
C.6.3
Lectura recomendada
1. Hinkle PC. Cmo fabrican ATP las clulas?
Investigacin y Ciencia 1978; 20: 58-75.
Mientras que el CO2 se forma por la oxidacin del
sustrato durante el ciclo del cido ctrico en la matriz
mitocondrial, la secuencia de las reacciones que
participan en la transferencia de hidrgenos y
electrones (la cadena respiratoria) se localiza en la
membrana interna de la mitocondria. La cadena se
puede dividir en cuatro complejos: el complejo I o
NADH deshidrogenasa (que cede sus electrones a la
coenzima Q); el complejo II o las deshidrogenasas
que ceden sus electrones al FADH2 (como la
succinato deshidrogenasa) y a travs de l a la
misma coenzima Q; el complejo III o citocromo c
reductasa, y el complejo IV o citocromo c oxidasa,
que transfiere los electrones al oxgeno, que es el
aceptor final.
Los componentes de la cadena respiratoria
estn arreglados de acuerdo con potenciales de
oxidorreduccin crecientes (de valores negativos a
55
C.7
Radicales libres.
C.7.1 Definir el concepto de radicales
libres y cules son derivados del
oxgeno.
C.7.2 Describir cmo y dnde se generan
los radicales superxido, hidroxilo y
otras molculas reactivas: perxido
de hidrgeno y singulete de oxgeno.
C.7.3 Describir el efecto de estos
radicales y molculas reactivas sobre
otras
molculas,
clulas
y
organismos y su contribucin en las
siguientes condiciones: fagocitosis,
inflamacin,
lipoperoxidacin
y
perfusin postisquemia.
C.7.4 Describir las condiciones en las que
se genera el radical NO y su relevancia
fisiolgica.
C.7.5 Describir los mecanismos protectores
del organismo contra las especies
reactivas de O2: superxido dismutasa,
catalasa,
glutatin
peroxidasa,
vitaminas E y C y -carotenos.
Lecturas recomendadas
1.
Pia GE, Huberman A, Chvez R, Lascurain
R, Zenteno E, Frenk S. Los radicales libres.
Beneficios y problemas. Gac Md Mx 1996;
132 (2): 183-203.
2.
Fernndez AA, Abudara V, Morales FR. El
xido ntrico como neurotransmisor y
3.
56
superxido: O2 .
Probablemente la fuente ms importante de
produccin de radicales superxido sea el estallido
respiratorio (aumento sbito del consumo de
oxgeno) de los macrfagos y de los leucocitos
polimorfonucleares en respuesta a una seal
inmunitaria provocada por alguna infeccin.
Perxido de hidrgeno. El anin superxido
sufre espontneamente, o bajo la accin de la
enzima superxido dismutasa (SOD), una reaccin
de dismutacin: dos radicales libres reaccionan entre
s, uno de ellos perdiendo electrones y el otro
ganndolos. Esta dismutacin produce agua
oxigenada, que no es realmente un radical libre, pero
este compuesto por captacin de un electrn y de un
protn, puede dar lugar a la formacin de especies
oxigenadas muy activas, especialmente al radical
hidroxilo.
Radical hidroxilo. El OH es un oxidante
extremadamente reactivo que interacta con casi
todas las molculas a velocidades slo limitadas por
su difusin. El radical hidroxilo es formado por la
ruptura de una molcula de agua bajo el efecto de
una radiacin gamma o en el ciclo de Haber-Weiss:
1. 2 O2 + 2 H
O 2 + H 2O 2
2+
3+
2. H2O2 + Fe
Fe + OH + OH
3+
2+
3. Fe + O2
Fe + O2
el ciclo global se expresa:
2+
Antioxidantes
Para controlar los efectos devastadores de los
radicales libres existen mecanismos protectores.
Estos sistemas tienen la funcin de neutralizar el
efecto de los radicales libres o evitar su aparicin. El
nivel primario de defensa lo constituyen tres enzimas
especializadas.
1. Superxido dismutasa. Existe en las mitocondrias
2+
2+
(SOD de Mn ) y en el citosol (SOD de Cu y de
2+
Zn ). Cataliza la dismutacin del radical anin
superxido para dar oxgeno molecular y perxido
de hidrgeno:
2 O2 + 2 H
O 2 + H 2O 2
GSSG + 2H2O
2H2O + O2
3+
Fe /Fe
O2 + H2O2
O2 + OH + OH
57
D.
Otras
vas
metablicas
carbohidratos
de
los
D.1
Gluconeognesis.
D.1.1 Sealar en qu consiste la
gluconeognesis,
los
sustratos
gluconeognicos,
los
compartimentos celulares de la va y
los tejidos con mayor actividad
gluconeognica.
D.1.2 Comparar
y
analizar
las
reacciones de esta va con las de la
gluclisis desde el punto de vista
energtico
y
describir
los
mecanismos empleados para evitar
las barreras energticas.
D.1.3
D.1.4
D.1.5
58
D.2
Glucogenlisis y glucognesis.
D.2.1
D.2.2
D.2.3
D.2.4
D.2.5
D.3
Va
pentosas).
del
fosfogluconato
(ciclo
de
las
59
D.3.1
D.3.2
D.3.3
D.3.4
D.3.5
D.4
Regulacin de la glucemia.
D.4.1 Explicar el significado de los trminos:
glucemia, hipo e hiperglucemia.
D.4.2 Discutir la importancia biolgica de
mantener una glucemia normal.
D.4.3 Discutir el papel de las siguientes
hormonas:
epinefrina,
glucagon,
cortisol e insulina en la regulacin de la
glucemia normal indicando las vas
metablicas, los tejidos involucrados y
las fuentes endgenas y exgenas de
los carbohidratos.
D.4.4 Reconocer
la
glucosilacin
no
enzimtica
de
las
protenas
(hemoglobina
glucosilada
y
fructosaminas) como consecuencia de
una hiperglucemia prolongada.
Lecturas recomendadas
1.
Beisswenger PJ, Szwergold BS, Yeo KT.
Glycated proteins in diabetes. Clin Lab Med.
2001; 21 (1): 53-78.
2.
Cohen MP. Intervention strategies to prevent
pathogenetic effects of glycated albumin.
Arch Biochem Biophys. 2003; 419 (1): 25-30.
3.
Desmond A. Glicosilacin no enzimtica de
protenas: su rol en las complicaciones
crnicas de la diabetes y el envejecimiento.
Acta Bioqum Cln Latinoamer. 1995; 29 (2):
173-190.
La concentracin sangunea de la glucosa o glucemia
debe mantenerse dentro de lmites muy estrechos
debido a que algunas clulas como las nerviosas y
los eritrocitos utilizan a la glucosa como nica fuente
de energa, lo que las hace especialmente sensibles
60
61
E. Lpidos
Al finalizar esta subunidad, el alumno explicar las
caractersticas principales de los lpidos, sus
estructuras, el papel que desempean en los seres
vivos, as como su digestin y absorcin.
E.1
E.2
Estructura.
E.1.1 Definir qu son los lpidos, cul es
su importancia biolgica.
E.1.2 Conocer
las
propiedades
fisicoqumicas
de
los
lpidos:
solubilidad,
naturaleza
qumica,
apolaridad.
E.1.2 Reconocer las frmulas de los
lpidos que emplea la clula: cidos
grasos,
triacigliceroles,
fosfoglicridos
y
glicolpidos,
terpenos y esteroides.
E.1.3 Clasificar a los lpidos con base en
su composicin, en su grado de
complejidad y en su grado de
polaridad.
E.1.4 Identificar a los lpidos como los
componentes principales de las
membranas celulares y relacionar el
contenido y las caractersticas
qumicas de los lpidos con la
impermeabilidad y fluidez de la
membrana.
E.1.5
Mencionar las diferencias en cuanto
a la asimetra y la composicin de las
membranas celulares (citoplasmtica
y mitocondrial).
Digestin, absorcin y transporte.
E.2.1
E.2.2
E.2.3
62
63
F.
F.1
64
F.2
Sntesis
cetnicos.
F.2.1
F.2.2
F.2.3
F.2.4
utilizacin
de
los
cuerpos
F.3
65
F.4
F.4.1
F.4.2
F.4.3
F.4.4
F.4.5
66
F.5
Degradacin de fosfoglicridos.
Los fosfoglicridos son hidrolizados por diversos
tipos de fosfolipasas que se clasifican segn su sitio
de accin: la fosfolipasa A1 libera los cidos grasos
de la posicin de 1; la fosfolipasa A2 los libera de la
posicin 2. La fosfolipasa C libera la cabeza polar
fosforilada que se encuentra en la posicin 3 del
glicerol, mientras que, la fosfolipasa D libera la
cabeza polar.
Sntesis de esfingolpidos
Los esfingolpidos contienen una molcula de
esfingosina en lugar del glicerol. Sus precursores son
serina y palmitoil CoA. Los cidos grasos activados
(acil CoA) reaccionan con el grupo amino de la
esfingosina para formar las ceramidas, quienes son
las precursoras de esfingomielinas, cerebrsidos y
ganglisidos.
Las esfingomielinas se obtienen de la reaccin de la
ceramida con CDP-colina.
Los cerebrsidos se obtienen por la unin
directa de galactosa o glucosa a la ceramida. El
donador del azcar es UDP-galactosa o UDPglucosa.
Los ganglisidos se forman por la adicin
secuencial y ordenada de residuos de azcar a la
ceramida. Los donadores de estos azcares son
UDP-azcares o el CMP-NeuAc (cido Nacetilneuramnico o cido silico).
Los esfingolpidos son degradados por
enzimas
lisosomales
(hexosaminidasas,
galactosidasa, la sialidasa o la esfingomielinasa)
hasta
dar
ceramidas
y
los
azcares
correspondientes. Existen una serie de defectos
genticos en los que faltan estas enzimas lo que
conduce a una acumulacin de ganglisidos que
causan graves consecuencias a la salud.
F.6
67
F.6.1
F.6.2
F.6.3
F.6.4
F.7
Estructura
y
metabolismo
de
las
lipoprotenas.
F.7.1 Describir los mecanismos de
transporte de los cidos grasos
provenientes de la liplisis y el de los
otros lpidos (TAG, steres de
colesterol y fosfolpidos) en el
organismo.
F.7.2 Conocer la composicin y la funcin
de las lipoprotenas (quilomicrones,
LDL, VLDL, HDL y Lp[a]).
F.7.3 Describir el metabolismo de las
diferentes lipoprotenas.
68
F.8
Lecturas recomendadas
1.
Libby P. Atherosclerosis the new view.
Scientific American. 2002; 286( 5): 28-37.
2.
NIH (National Institutes of Health) consensus
conference. Triglyceride, HDL, and coronary
heart disease. JAMA. 1993; 269 (4): 505-510.
69
3.
4.
5.
6.
70
consecuencia
de
aterosclerosis
o
sus
complicaciones. El control riguroso de la glucemia en
estos enfermos disminuye las complicaciones
microvasculares de la diabetes, por lo que se
recomienda prestar atencin al control de la
glucemia.
La leptina es una hormona de naturaleza
proteica constituida por 167 aminocidos que circula
en el plasma sanguneo y regula el peso corporal y
los depsitos de grasa, a travs de sus efectos en el
metabolismo y el apetito. En general, induce una
disminucin en el apetito y un incremento en el gasto
energtico.
La leptina es producida y liberada por el
tejido adiposo blanco fundamentalmente como una
seal de saciedad, aunque se ha visto tambin que
se produce en tejido adiposo marrn, en la placenta y
en algunos tejidos fetales, como el corazn, hueso y
cartlago.
La sntesis y la secrecin de leptina estn
directamente relacionadas con la cantidad de grasa
corporal y el tamao del adipocito. Aunque factores
como la edad, el sexo, el ndice de masa corporal, la
actividad fsica, el fumar, la hipertensin, el colesterol
en HDL, la concentracin plasmtica en ayuno de
triacilgliceroles, de glucosa y de insulina tambin
afectan la secrecin de leptina. As por ejemplo, la
concentracin de la hormona es hasta cuatro veces
mayor en mujeres que en hombres. El fumar puede
traer cambios en el peso corporal, al modificar la
sensibilidad de los receptores del hipotlamo a la
leptina y en consecuencia modular la sntesis de
hormona, reduciendo el peso corporal.
El hipotlamo es el sitio de mayor accin de
leptina. La accin ms importante de la leptina en
este rgano es la disminucin en la produccin del
neuropptido Y (NPY). Las implicaciones de estos
cambios son las siguientes:
Incremento en el NPY
Incremento en la leptina
(disminucin de leptina)
(diminucin en el NPY)
Se presenta hiperfagia.
Hipofagia.
Aumento en la secrecin de
Incremento
energtico.
en
el
gasto
Aumento de peso.
Prdida de peso.
71
proceso;
sealar
sus
consecuencias fisiolgicas.
G.1.7 Identificar a los aminocidos
precursores
de
-cetoglutarato,
piruvato, acetoacetato, fumarato y
oxaloacetato.
G.1.8 Identificar a los aminocidos
precursores
de
las
siguientes
aminas: acetilcolina, catecolaminas,
serotonina, carnitina, poliaminas y
creatinina.
G.1.9 Conocer las bases metablicas de las
siguientes alteraciones congnitas
del
metabolismo:
acidemia
propinica, acidemia metilmalnica,
hipervalinemia,
fenilcetonuria
y
alcaptonuria.
G. Metabolismo
nitrogenados
de
los
compuestos
G.1
Aminocidos y protenas.
G.1.1 Conocer de manera general cmo
se realiza en el organismo la
digestin de las protenas y la
absorcin de los aminocidos.
G.1.2 Identificar las fuentes nutricionales
de los aminocidos.
G.1.3 Describir
las
reacciones
de
transaminacin y desaminacin e
identificar la localizacin subcelular,
sustratos, enzimas y productos de la
actividad de estas enzimas.
G.1.4 Identificar el papel de la glutamina y
del
cido
glutmico
en
el
metabolismo de los compuestos
nitrogenados. Describir el papel de
la glutamino sintetasa, de la
glutamato deshidrogenasa, de las
transaminasas y de la glutaminasa
en
el
metabolismo
de
los
compuestos nitrogenados.
G.1.5 Sealar las causas de la toxicidad
del in amonio y los mecanismos del
organismo para combatirla.
G.1.6 Describir el proceso de sntesis de
la urea e indicar la localizacin
subcelular, sustratos, enzimas y
productos de la va. Describir la
regulacin de la sntesis de urea, as
como los defectos en el metabolismo
que producen alteraciones en este
Realizacin de la prctica 8
"El efecto del
tetracloruro de carbono sobre las transaminasas (ver
pg. 155).
Los aminocidos son el sustrato ms importante del
metabolismo nitrogenado en los organismos
superiores pues de ellos derivan protenas, purinas,
pirimidinas, porfirinas, pptidos y hormonas, entre
otros compuestos y, adems, sus esqueletos
carbonados se oxidan para liberar energa.
Todos los aminocidos de los sistemas vivos
se encuentran como parte de un pool o poza
(reserva) metablica cuya magnitud se mantiene
constante mediante un equilibrio entre la entrada y la
salida de aminocidos. Desde la poza, los
aminocidos son llamados hacia sus diferentes
destinos metablicos:
1. Participar en el proceso de la nutricin por medio
de la sntesis de nuevas protenas.
2. La sntesis de compuestos nitrogenados no
proteicos.
3. Su entrada a la gluconeognesis para sintetizar
glucosa.
4. Su degradacin oxidativa para la produccin de
energa.
1.
72
73
El ciclo de la urea
El mecanismo de la transdesaminacin permite el
acopio de los grupos amino de los diferentes
aminocidos en la molcula del glutamato, la cual, al
ser
desaminada
oxidativamente
por
la
deshidrogenasa del glutamato, libera el ion amonio.
Dado que este compuesto es muy txico para el
sistema nervioso central, se elimina mediante la
sntesis de urea. Esta sntesis se lleva a cabo en el
hgado mediante un proceso metablico denominado
el ciclo de la urea, la primera parte del cual se realiza
en la mitocondria y el resto en el citoplasma de la
clula heptica.
El ciclo de la urea (fig. III.2) que permite
mantener una muy baja concentracin de amonio
libre, se inicia con la sntesis del carbamil fosfato a
partir del amonio y el CO2 con un gasto de 2 enlaces
de alta energa. El carbamil fosfato entrega el grupo
carbamino a la molcula de ornitina, la cual acta
como portadora de grupos en las cuatro reacciones
del ciclo:
1. Transferencia del carbamino a la ornitina para
formar citrulina: ornitina transcarbamilasa.
2. Condensacin de la citrulina con el aspartato. Se
forma el arginino-succinato con gasto de 2ATP:
arginino-succinato sintetasa.
3. Ruptura del arginino-succinato. Se desprende
fumarato y se produce arginina: arginino-succinato
liasa.
4. Hidrlisis de la arginina para regenerar a la ornitina
y liberar urea: arginasa.
G.2
Nucletidos.
G.2.1
Conocer
las
caractersticas
generales de las bases nitrogenadas,
los nuclesidos y nucletidos:
estructura qumica y funciones.
181).
Los nucletidos estn formados por ribosa o
desoxirribosa, una base nitrogenada que puede ser
una purina o una pirimidina, y una, dos o tres
molculas de cido fosfrico. Dependiendo del
74
los
75
H.
H.1
H.2
H.3
Realizacin de la prctica
Metablica (ver pg. 168).
10
"Integracin
Lecturas recomendadas
1.
Scott JD, Pawson T. Cell communication the
inside story. Scientific American. 2000; 282
(6): 54-61.
2.
Kholodenko BN, Westerhoff HU. The
macroworld
versus
microworld
of
biochemical regulation and control. TIBS.
1995; 20: 52-54.
Las clulas y los organismos son sistemas
relativamente aislados en un estado casi
estacionario. Las funciones de los organismos vivos
76
77
78
CONTENIDO TEMTICO
79
IV
Biologa molecular
Al finalizar esta unidad, el alumno ser capaz de identificar las diferentes molculas
informacionales de la clula y su organizacin; los mecanismos por los que fluye la
informacin gentica; los mecanismos por los que se regula la expresin gentica en los
diferentes estadios del ciclo celular, y el empleo de algunas tcnicas de manipulacin del
DNA tiles en medicina. La unidad se divide en:
A.1.3 Describir
las
estructuras
primaria, secundaria y terciaria
de los cidos nucleicos y har
nfasis en lo dinmico de estas
molculas.
La informacin gentica es el conjunto de
datos que determinan la estructura y
propiedades funcionales en las clulas. La
informacin gentica es almacenada en el
ncleo de los eucariotos en estructuras
llamadas cromosomas. En el caso de los
procariotos, el cromosoma se encuentra
disperso en el citosol. El ncleo es un
orgnulo separado del citoplasma por la
membrana nuclear, que de hecho, es una
doble membrana que presenta poros con un
dimetro de 30 a 100 nm, a travs de los
cuales
las
macromolculas
pueden
intercambiarse entre el citoplasma y el
ncleo. La membrana nuclear, adems,
participa directamente en la duplicacin del
80
A.2
81
organizacin
del
DNA;
reconocer al nucleosoma, la
fibra de 30 nm (solenoide), el superenrollamiento
de
300
nm
del
del
DNA.
dominios
proteicos:
hlice-vuelta-hlice, cremalleras
de leucina, dedos de cinc, en su
interaccin con el DNA y entre
protenas que interactan con el
DNA.
A.2.3 Relacionar los cambios en el
empaquetamiento
del
siguientes
conceptos:
A.3
genes
contenidos
en
el
genoma humano.
A.3.2 Sealar las caractersticas ms
importantes de los genes nicos
82
y redundantes, de mantenimiento
y tejido especficos, estructurales
y
reguladores,
recesivos
dominantes,
ligados
al
sexo
las
regiones
mito-condrial
la
informacin contenida en l.
informacin
gentica
(dogma
los
sucesos
ms
1.
2-
Lecturas recomendadas
Hbscher U. Eukaryotic DNA
polymerases a growing family.
TIBS. 2000; 25 (3): 143-147.
Collins
FS,
Jegalian
KG.
Deciphering the code of the life.
Scientific American. 1999; 281
(6): 86-91.
83
84
B.3
Transcripcin.
B.3.1 Identificar en qu consiste, en
qu compartimiento subcelular y
en qu fase del ciclo celular se
lleva a cabo la transcripcin.
B.3.2 Identificar
las
enzimas,
sustratos y los sucesos ms
importantes del proceso de
transcripcin.
B.3.3 Describir en qu consisten los
procesos
de
modificacin
postranscripcional que sufren el
RNAm, el RNAt y el RNAr y har
nfasis en el papel de las
ribozimas.
B.3.4 Revisar el efecto de la
rifamicina, de la actinomicina D y
de la -amanitina sobre la
transcripcin.
Lectura recomendada
1Proudfoot
N.
Connecting
transcription to messenger RNA
processing. TIBS 2000; 25 (6):
290-293.
Todas las molculas del RNA son
sintetizadas
en
el
ncleo
mediante
transcripcin de la informacin gentica
codificada en la secuencia de las bases del
DNA mediante la accin de una RNA
polimerasa dependiente de DNA.
La RNA polimerasa dependiente del
DNA es una enzima que est compuesta de
6 subunidades: 2, , , y una protena
acdica designada como que se requiere
85
uno
contribuye,
de
B.4 Traduccin.
B.4.1 Proceso de la traduccin.
B.4.1.1 Describir en qu consiste
y en qu compartimiento
subcelular se realiza la
traduccin,
tanto
de
protenas
intracelulares,
como
protenas
de
de
secrecin.
B.4.1.2 Conocer el alfabeto del
cdigo
gentico
concepto
de
codn
el
y
anticodn.
B.4.1.3 Identificar las molculas
que
intervienen
en
el
proceso de traduccin.
B.4.1.4 Conocer las fases del
proceso y la funcin que
desempea el ribosoma
en el mismo.
B.4.1.5 Conocer el efecto de los
siguientes
sobre
la
protenas:
inhibidores
sntesis
de
tetraciclinas,
estreptomicina,
cloranfenicol, eritromicina,
puromicina,
dehidroemetina,
cicloheximida y la toxina
diftrica.
La sntesis de protenas es un proceso
complejo en el que intervienen de manera
coordinada ms de cien macromolculas
para unir los residuos de los 20 aminocidos
en una secuencia codificada en el RNA
mensajero.
cada
Asimismo,
la
sntesis
de
protena funcional.
El lenguaje codificado en nucletidos
en los cidos nucleicos es traducido a un
lenguaje de aminocidos mediante una serie
de RNAs de transferencia (RNAt) cargados
cada uno con un aminocido determinado, el
que es especificado por el asa del anticodn,
segn un cdigo de lectura: el cdigo
gentico. Este cdigo presenta cuatro
caractersticas:
1. Est basado en tripletas, es decir, una
secuencia de 3 nucletidos determina un
aminocido.
2. El cdigo no se sobrepone y no tiene
espacios, es decir, que la informacin se
almacena en tripletas de bases seguidas.
3. El cdigo es universal. Es el mismo para
todos los organismos.
4. El cdigo es degenerado. Esto significa
que ms de una tripleta puede codificar
para un aminocido. Sin embargo, los
primeros dos nucletidos de una tripleta
son generalmente los mismos para un
aminocido determinado.
El proceso de la sntesis de
protenas puede dividirse en diferentes
etapas:
a) La activacin de los aminocidos, es
decir, la formacin de los aminoacil RNAt
por sintetasas especficas.
b) La iniciacin es la primera fase del
proceso; en ella se requiere la presencia
de tres protenas conocidas como
factores de iniciacin necesarios para
disociar
los
ribosomas
en
sus
subunidades y para acarrear el aminoacil
RNAt inicial (generalmente metionil RNAt
o su anlogo formilado). Adems, se
necesita la asociacin del RNA
mensajero con la seal de inicio de la
traduccin (generalmente la tripleta
AUG) a la subunidad pequea del
86
corresponde
protenas
que
membrana
plasmtica,
del
retculo
se
forman
en
ribosomas
de
azcares.
Ms
tarde
estas
B.4.2 Modificacin
postraduccional
degradacin de protenas.
B.4.2.1 Mencionar
en
qu
consisten
las
modificaciones
postraduccionales:
plegamiento,
modificaciones
lentes
covareversibles
(fosforilacin, acetilacin y
ADP
ribosilacin)
irreversibles
(glucosilacin,
hidroxilacin,
protelisis
se
mediante
los
degradan
las
protenas.
87
Lectura recomendada
1.
Goldberg AL. The cellular
chamber of pomm. Scientific
American. 2001; 284 (1): 56-61.
que
tienen
como
respuesta
puede
metilarse,
otros
como
la
especfica
puentes
disulfuro.
88
Identificar
los
mecanismos
que
Durante
la
duplicacin
puede
ocurrir
que
cambian
una
base
por
otra
DNA.
C.1
Al
finalizar
esta
subunidad
el
En
Conocer
los
diferentes
tipos
de
UV,
acridina,
naranja
de
genes
reguladores,
un
mayor
informacin
mutaciones
agentes
radiaciones,
C.2
las
una
luz
la
caso de
base,
el
nmero
de
gentica
bases,
es
ocurren
89
secuencias
especiales,
vida
media del RNAm.
D.3.5 Regulacin del proceso de
sntesis proteica.
sentido
la
actividad
exonucleasa
desempean
un
D.4
D.5
papel
importante.
D. Niveles de regulacin de la
expresin gentica
Al
finalizar
esta
subunidad
el
alumno
D.1
Lecturas recomendadas
1.
(transcripcionales,
traduccionales,
postranscripcionales
postraduccionales).
D.2
2.
modificaciones
3.
4.
5.
90
91
92
E. Virus, oncogenes y
transformacin
Al finalizar esta subunidad el alumno
conocer la estructura general de los virus,
su clasificacin y su posible implicacin en la
transformacin celular. Conocer la relacin
entre la funcin de los productos de los
oncogenes y la transformacin celular.
E.1
E.2
E.3
E.4
E.5
93
94
F.1
Sealar la importancia de la
tecnologa del DNA recombinante en el
campo de la medicina.
F.2
F.3
F.4
Conocer
en
qu
consiste
el
procedimiento
bsico
de
la
metodologa de clonacin y cul es su
utilidad, al tomar en cuenta:
F.4.1 Cmo se fragmenta el DNA.
F.4.2 Cmo se unen los fragmentos de
DNA a los vectores.
F.4.3 Cmo se introduce el DNA
recombinante en las clulas
hospederas (transfeccin).
F.4.4 Cmo se seleccionan las clulas
que
contienen
DNA
recombinante.
F.4.5 Cul es la utilidad del DNA
recombinante.
F.5
Conocer
los
mecanismos
de
recombinacin in vitro (ingeniera
gentica).
F.6
95
96
97
I
CONCEPTOS TERICOS INICIALES
98
EL MTODO CIENTFICO
La cultura no puede comprenderse sin hacer
sistemticamente,
naturaleza.
constituyen
la
ms
moderna.
La ciencia est basada en el mtodo
Observacin
El
mtodo
cientfico
se
directa o indirectamente
inicia
con
la
por medio de
instrumentos o de modificaciones de la
ciencia.
forma
independiente
por
observadores
espiritual de la humanidad.
Problema
El objetivo de la ciencia es hacer
teoras. Las teoras cientficas explican los
hechos
probabilidad
la
ocurrencia
de
hechos
similares.
99
del
hombre
comn;
hacen
Plantear
un
ambos
problema
es
hacer
La experimentacin es la parte ms
ardua
cientfico
los
significativos
problemas
y
deben
tener
ser
respuestas
qu?
se
resuelven
mtodo
conocimiento
anterior
cientfico.
y
la
Cada
experiencia
del
mejor,
separa
investigacin.
al
genio
del
aficionado
la
forma adecuada.
Teora
Hiptesis
cientfico
procede
al
tercer
tiempo
del
convincentes,
condiciones similares.
cientfico.
obtenidas
por
muchos
Experimentacin
El
objetivo
de
es
probabilidad de ocurrir.
comprobacin.
la
puede
experimentalmente.
La
El
experimentacin
procedimiento
situacin
experimentacin
consiste
ideal
en
la
en
reducir
el
100
Un sistema de medidas
preciso
en esta observacin.
Las
leyes
naturales
orientan
los
cientfico de ellas.
idiomas).
partir
del
creciente
por
experimentos,
teoras
se
se
acumula
formulan
el
nuevas
conocimiento
El
SI
comprende
tres
tipos
de
utilizadas.
10
20
sobre su ambiente.
Unidades de base
(SI)
Unidades SI derivadas
101
prefijos
SI
se
anteponen
signo
de
puntuacin
alguno
(ejemplo:
nanmetro y no nano-metro).
Magnitud
Longitud
Masa
Tiempo
Cantidad de
sustancia
Temperatura
termodinmica
Intensidad luminosa
Nombre
metro
kilogramo
segundo
mol
Smbolo
m
kg
s
mol
kelvin
candela
cd
Intensidad de
corriente elctrica
ampere
moles).
nombres especiales
Magnitud
Nombre
Smbolo
Definicin
2
Fuerza
Newton
Nm.
kgm/s
Presin
Pascal
Pa
N/m2
Trabajo;
Joule
Nm
Coulomb
Watt
J/s
Volt
W/A
energa;
Magnitud
Superficie
Volumen
Concentracin
de sustancia
Velocidad
Nombre
metro
cuadrado
metro
cbico
mol/metro
cbico
metro
por
segundo
Smbolo
2
m
m
calor
Carga
mol/m
cantidad de
A.s
elctrica;
3
cantidad de
electricidad
m/s
Potencia;
flujo
energtico
Tensin
elctrica;
ciencia
contribuciones
potencial
elctrico
Temperatura
Grado
Celsius
Celsius
que
han
hecho
K273,16
Prefijos SI
Cuando las unidades SI derivadas resultan
demasiado grandes o demasiado pequeas
para
determinados
fines
(sera
102
10
10
10
10
exa
Peta
12
10
10
Smbolo
15
10
10
Prefijo
18
10
9
6
3
12
15
Tera
Giga
Mega
Kilo
Mili
Micro
Nano
Pico
Femo
ato
3
6
18
forma correcta:
1 000 000
0,003 278
0.003 278
forma incorrecta: 1,000,000
Unidades no pertenecientes al SI
0.003,278
Algunas
de
estas
unidades,
en
1/s = s
tiene
muchas
mol/m o mol.m
El
SI
ventajas
I.5.
Algunas
unidades
no
pertenecientes al SI.
Magnitud
Unidad
Smbolo
Valor en
SI
minuto
min
60 s
hora
3 600 s
Da
86 400 s
Volumen
Litro
loL
10 m
-3
Energa
calora
cal
4.185J
Tiempo
103
el SI en bioqumica
H ),
en
submltiplos
como el
milimol
el
esta
actividad
puede
determinarse
pH-metro.
corresponde
mmol/l.
Glucosa en el suero o plasma: 3.6 a 6.1
mmol/l.
la
catlisis.
proporcional
concentracin
de
denominada
sustancia
en
forma
de
no
debe
ser
concentracin
molar
la
La
a
cantidad
velocidad
la
cantidad
de
sustrato
medida
de
es
enzima
presente.
La actividad tambin puede ser
expresada en trminos de unidades (smbolo:
U). Por definicin, una unidad es igual a la
concentracin de enzima necesaria para la
formacin de un micromol de producto por
minuto (mol/min). La actividad especfica de
una enzima se define como la concentracin
de producto que se forma por 1 miligramo de
enzima por minuto.
104
ya que 6 x 3 = 18 y 10
6
6+3
= 10
6 x 10 entre 3 x 10 = 2 x 10
6 x 10 por 3 x 10 = 18 x 10 = 1.8 x 10
ya que 6/3 = 2 y 10
63
= 10
10
205 = 2.05 x 10
5
205 000 = 2.05 x 10
1
0.205 = 2.05 x 10
10 ) = 3.91 x 10
Clculos.
negativo:
El
procedimiento
que
se
utilizar
para
Esta
tcnica
se
basa
en
las
5).
del 2 a la coma decimal son 4 lugares; por lo
4
tanto, es 2.05 x 10 .
reduce
el
manejo
tres
cifras
entre
el
ndice
de
la
raz.
1 minuto
1 minuto
1=
60 segundos
1 minuto
60 segundos
1 minuto
1=
1 minuto
60 segundos
105
coeficientes de conversin.
El
recproco
de
cualquier
factor
decir:
n
si a = N entonces n = loga de N
base
misma cantidad.
el
nmero
10
los
logaritmos
una
fraccin
(llamada
factor
de
punto
decimal;
caracterstica
la
corresponde
izquierda,
al
orden
la
de
unidades
si fueran nmeros.
En
esta
multiplicacin,
las
10 L)?
representa:
-6
1) 1 l = 10 L 1 L = 10 l
2)
10 l
0.001 = 10
-3
caracterstica 3
1 000 = 10
-3
caracterstica 3
1L
A la derecha, la mantisa es la
3) 5 x 10
-5
L x= 5 x 10
[-5+ 6]
= 5 x 10 l =
fraccin
decimal
de
exponente
que
50l.
se
0.3010
=2
Logaritmos
106
+ 0.0001
+0.3010
-2.6990 cologaritmo
El
antilogaritmo
es
el
nmero
que
nmero.
logaritmos
corresponde a 4 729.
donde
se
hallara
que
comunes.
logaritmos:
se
El logaritmo de la potencia n de un
nmero es igual a "n" veces el logaritmo del
nmero:
la
misma
(9
079),
pero
difiere
la
caracterstica. As:
log a = 3 x log a
Grficas
parte
partes
y debe agregarse a la
de
la
proporcionales
tabla
que
dice
107
relacin
que
guardan
las
magnitudes
comparadas.
Entre
variabilidad
las
diferentes
clases
de
muy
amplio,
lo
cual
hace
en
continuo
de
Grfica
por
poligonal.
medio
de
Consiste
puntos
de las ordenadas.
Barras
horizontales.
Las
barras
de las abscisas.
habitualmente
slo
el
primer
Los
sectores
proporcionales
las
circulares
son
magnitudes
que
consideran:
como
uno
de
los
ejes
sean
100%
la
suma
total
de
las
en
cada
diente;
caso
el
una
vez
porcentaje
obtenido
108
f = 0.01096 x n mr = 717 g
980
o sea, interpretando la frmula, la fuerza de
contencin para sostener la unidad masa (el
BIOQUMICA
Centrifugacin
en
un
lquido
es
la
afuera
un
determinado
peso
en
centrifugacin
Las
ultracentrfugas
operan
en
frmula:
es la dina, la de m es el gramo y la de r es el
109
70 000 rpm.
La
sedimentacin
ultracentrfuga
se
expresa
en
en
la
unidades
las
velocidades
fuerzas
comparacin
tamaos
tambin
de
prctica
su
forma.
de
Es
importante
la velocidad requerida.
3. Nunca se frene una centrfuga; djese
parar por su propia inercia; el no hacer
esto conduce a que se agite el contenido
2 S = 10 kdal
4 S = 50 kdal
8 S = 160 kdal
16 S = 400 kdal
13
al profesor.
Potenciometra
electrones.
La
reacciones
agente oxidante.
electroqumica
qumicas
en
estudia
las
que
las
hay
siguientes puntos:
oxidorreduccin.
110
respecto
La determinacin cuantitativa de la
un
electrodo
de
referencia
temperatura.
electrodos
asignado.
mide
hidrgeno
se
con
mide
con
referencia
al
que
al
se
le
referencia
electrodo
ha
al
de
asignado
incluyen
menudo
al
ion
111
selectivos
para
prcticas
de
iones,
especiales
ms
importantes
de
la
hidrogeniones se conoce.
El
esquema
del
circuito
de
un
temperatura
circuito
travs
de
la
cual
difunden
los
que
(botn
permite
de
que
control
la
de
lectura
iones
potencimetro corresponda a un pH de 7. El
amortiguadora,
diferencia
de
potencial
aparece
entre
los
una
dos
en un
potencimetro
112
depende
inversamente
la solucin problema.
directamente
de
su
de
su
tamao
carga
y
de
e
la
frontal y la zonal.
Electroforesis
se
depende
fundamentalmente de la carga y no de la
tcnica
llama
se
electroforesis
la
pptidos,
entre
importante
pH y fuerza inica.
Electroforesis zonal. Uno de los
separacin
otros
ha
de
empleado
protenas,
compuestos.
Es
en
113
aparatos
se
tapan
para
evitar
la
El
agar
polisacridos que
es
una
mezcla
de
se obtiene de ciertas
tiempo, etctera.
favorece
la
migracin
regular
de
las
ha
similares,
probar
que
una
protena
es
usado
en
combinacin
con
la
de protenas y en la cuantificacin de
protenas inmunoprecipitables.
La electroforesis en agarosa ha
114
afectados.
Tambin
agentes
reductores
pueden
emplearse
como
el
la
de protenas.
superenrollado.
Electroforesis
en
geles
de
electroforesis
isoelctrico,
discontinua
donde
son
permanecer
la
sin
como
grado
su
anlisis de protenas.
*Nota:
amortiguador
movimiento
de
entrecruzamiento.
en
los
Dada
tanques
de
los
electroenfoque.
Cuando
se
Para
aplica
electrofortico,
formar
un
un
potencial
alterando
la
amortiguador
adecuado)
el
gel
flujo
puede
incorporar
sustancias
disociantes
del
lquido
dentro
del
canal
115
causar
problemas
en
las
separaciones
electroforticas.
la concentracin (la
SOLUCIONES
Soluciones porcentuales
encuentra
Las
en
mayor
proporcin.
La solubilidad de un soluto en un
Ejemplos:
solvente.
una
proporcin
relativamente
%p/p = g de soluto
x 100
100 g de solucin
posibles
de
soluto.
Slo
son
muy soluble.
existencia
las
de
un
equilibrio
entre
las
soluciones
porcentuales
deben
cuidadosamente
para
evitar
la
%p/p = g de soluto
x 100
100 ml de solucin
116
x 100
importante
insistir
los
es
decir,
podemos
variar
los
Soluciones molares
Una solucin molar se define como el
nmero de moles de soluto en un litro de
solucin:
M= No. de moles
planteamiento:
litro de solucin
X = 20 x 50 x 10
100
de
23
Avogadro
(6.023x10 )
de
X= 20 x 100 = ml de solucin
96
Resultado: necesitamos 20.83 ml de
solucin de alcohol a 96% y completar un
volumen de 100 ml.
Si tan slo queremos 50 ml de esta
nueva solucin, entonces:
100 ml de sol. de alcohol a 20% tienen
100
X= 50 x 20.83 = 10.41ml
los
29.25
de
NaCl
los
100
117
el siguiente planteamiento:
1000
disolverlo
hasta
completar
un
multiplicado
la
molaridad
del
valencia
frmula:
V x PM x M = gramos de la sustancia
1000
total
de
los
cationes
(cargas
En donde:
V=
PM =
M=
Soluciones normales
Son las que contienen el peso equivalente de
una sustancia en gramos por litro de
solucin:
molcula.
Recordemos la frmula utilizada para
calcular la cantidad de sustancia necesaria
para preparar cualquier cantidad de una
N = peso equivalente
litro de solucin
solucin determinada:
Para calcular la cantidad de una sustancia
que se necesita pesar para preparar un
1000
n
n = nmero de hidrgenos sustituibles.
118
V =
300 ml
N =
Eq =
0.1
peso molecular del CaCl2
111/2 = 55.5
Sustituyendo=300 ml x 55.5 g x 0.01 N= 1.67
1000
el
efecto
osmtico
de
una
0.1 N.
Soluciones osmolares
molecular.
acuosa
se
disocia
casi
gramo
aplicarse
sobre
la
solucin
de
mayor
(peso
molecular
expresado
en
es
decir,
que
son
del
solvente
pequeas
Las
mediciones
Soluciones isotnicas
se
habla
de
soluciones
isotnicas
en
119
el
sanguneo,
ximadamente
de
que
0.3
es
osmolar
apro(300
de
300
mosm/l
se
denominan
hipertnicas.
Una solucin es isotnica con
respecto a una clula viva cuando no ocurre
de
una
solucin
se
llaman
diluciones
aadirle
etiquetarlo
0.5
como
ml
tubo
del
1
diluyente
(dilucin
1:2,
volumen 1 ml).
Paso 2: transferir a otro tubo 0.5 ml
de la dilucin anterior y agregarle 0.5 ml de
diluyente (dilucin 1:2). La dilucin final
120
Tubo
Dilucin
1. 0.5 ml(1)
1 ml (3)
= 0.5 ml (1) = 1:4 (4)
1 ml (3)
es decir:
1/2 x 1/2
= 1:4
3.
1/4 x 1/2
= 1:8
4.
1/8 x 1/2
= 1:16
5.
1/16 x 1/2
= 1:32
Animales
El animal utilizado ms comnmente en el
laboratorio de bioqumica es la rata. Para su
correcto manejo es importante la forma cmo
se sujeta, lo cual se har con firmeza, pero a
la vez, en forma suave para no lesionarla; no
121
alguna
otra
enfermedad
sobre la mesa.
estasis
de
la
sangre
sistema Vacutainer).
Alerta clnica
Si es difcil detener el sangrado de la
puncin, elevar la zona y aplicar una cubierta
que presione. Los hematomas se pueden
evitar:
Usando una buena tcnica.
Aflojando el torniquete antes de retirar la
aguja.
Aplicando la presin suficiente sobre el
sitio de puncin despus de completar el
procedimiento.
La sangre obtenida puede tratarse de
diferentes maneras segn el empleo que se
le vaya a dar.
Para obtener suero. La sangre se
recibe en un tubo de ensayo o de centrfuga
seco y se deja coagular a temperatura
ambiente o en una estufa o bao de agua a
37 C. Si se va a trabajar inmediatamente
con el suero, separar con un aplicador de
madera el cogulo y centrifugar el resto del
tubo. Si se desea la separacin espontnea
del suero, se deja a temperatura ambiente
122
medidas
coagulacin
por
medio
de
un
para minimizar
duracin
la difusin de
accidentales
sustancias
qumicas peligrosas.
1. Manejar
cualquier
sangre,
plasma,
lquido
suero,
corporal,
orina,
tejido,
considerarse
potencialmente
como
infectante,
material
atendiendo
las
de
coordinacin
de emergencia.
laboratorio
lo
cuidado,
que
del
por
mximo
para
su
desinfeccin y desecho.
el
la
localizacin
de
MEDIDAS DE SEGURIDAD
Durante
conocer
desarrollo
del
curso
de
se permanezca en el laboratorio.
que,
riesgos
contaminadas.
en
ocasiones
Aunque
representan
los
laboratorios
se
Despus
del
uso
de
lavado
debemos
seguimos
las
normas
de
seguridad
sustancias,
lo
cual
nos
permite
de
manos
lavarnos
con
los
guantes
nuevamente
las
manos.
5. Todos los materiales desechables y no
desechables se deben descontaminar en
una solucin 1:10 de hipoclorito de sodio
de 4 a 7 % de concentracin, durante ms
Manejo
de
materiales
peligrosos
y/o
biolgico infecciosos
123
6. Los
elementos
punzocortantes
desecharse en recipientes
deben
especiales
las
8. Todas
Nunca
realizar
actividades
adecuadamente
los
residuos
sustancias
qumicas
son
identifique
su
nivel
de
riesgo
el
lo que se deber:
las
sustancias.
Para
generales
para
explosiones
solventes
al
evitar
utilizar
inflama-
se
utilizan
en
todos
los
124
encontrar
pictogramas
(smbolos
RIESGO BIOLGICO
un
extinguidor
de
bixido
de
la institucin.
accidentes
ms
frecuentes
que
aplicar un desinfectante.
personal.
E = EXPLOSIVO
precauciones
de
seguridad
se
de
sustancias
que
pueden
exponerse
al
calor
cuando
estn
Pictogramas de seguridad
de
prevencin:
uso
la
fuego.
en
el
laboratorio
adems
de
125
F+ = EXTREMADAMENTE INFLAMABLE
Sustancias cuyo punto de ignicin es menor
O = OXIDANTE
cuando
capaces
de
reaccionan
aportar
con
otra
35C.
F = INFLAMABLE
avivan
dietlico.
la
reaccin
pudiendo
desarrollar
eventuales
chispas,
de
materiales
combustibles y oxidantes.
Xn = NOCIVO
Sustancias de menor toxicidad pero
Aquellas
sustancias
preparados
que
diferido,
pero
que
se
encuentra
una
baja
peligro
alguna
Xi = IRRITANTE
que
en
concentracin en la mezcla.
Sustancias
poniendo
pueden
causar
tambin
provocar
inflamacin.
126
Protection Association)
cantidades.
Ejemplo:
azida
de
sodio,
directo.
proteccin
Utilizar
personal.
elementos
Emplear
de
qumico,
en
tres
categoras
"salud",
"inflamabilidad"
principales:
"reactividad"
estrictas
del laboratorio.
C = CORROSIVO
caso
bien
atacar
ciertos
metales
de
derrames
informacin
se
presenta
por
superior
indica
el
riesgo
por
Identificacin
sobre
los
riesgos
esa
el
riesgo
por
reactividad
emergencias,
La
ms
de
salpicaduras.
sustancia
C
o
n
su
almacenamiento
manipulacin
en
forma
segura.
y
En
cido clorhdrico
127
Hojas de seguridad
Residuos
especiales
CRETI:
son
para
se utilice en el laboratorio.
agresivas
Las
hojas
de
seguridad
proveen
la
salud
por
tales
Reactividad,
sus
caractersticas
Corrosividad,
como:
Explosividad,
Toxicidad
reactividad,
las
principales
medidas
las
precautorias
advertencias
ms
importantes.
CRETI.
La informacin toxicolgica.
Las
recomendaciones
para
su
almacenamiento.
Las condiciones para la disposicin de los
residuos.
instituciones
de
enseanza
Residuos
peligrosos
biolgico
contacto
con
pacientes
entrado
desecho.
caractersticas
son similares
a los
contenedores
para
fracturas
prdida
del
contenido al caerse.
Destruibles por mtodos fisicoqumicos.
Esterilizables y con tapa, la que puede tener
o no separador de agujas.
Precauciones: depositar los RPBI, de
acuerdo a su clasificacin, inmediatamente
despus de su generacin.
No compactar los residuos durante el
envasado y no mezclar residuos de diferente
clasificacin.
Una vez identificados, separados y
envasados
peligrosos,
correctamente
el
personal
los
residuos
responsable
del
128
Frases R
Frases S
Combinacin de frases
R7
S3
R 23
S 20
No comer ni beber
durante la manipulacin
R 39/25
R 36
S 29
S 3/7
R 45
S 37
Llevar guantes de
proteccin adecuados
S 36/37/39
129
cido clorhdrico
Identificacin
Frmula qumica: HCl
Apariencia y olor: solucin de color ligeramente
amarillo o incolora
con olor caracterstico muy penetrante.
Marcaje liqudo corrosivo
Sinnimos: cido muritico, cloruro de hidrgeno.
Generalidades
Est presente en el sistema digestivo de muchos
mamiferos y una deficiencia de ste provoca
problemas en la digestin; un exceso provoca
lceras gastricas. La disolucin acuosa grado
reactivo contiene aproximadamente 38% de HCl.
Propiedades fsica y qumicas
PM: 36.46
Solubilidad: soluble en agua
pH de disoluciones acuosas: 0.1 (1.0N), 4.0(0.001N).
Reacciona con la mayora de los metales
desprendiendo hidrgeno.
Con agentes oxidantes como perxido de hidrogeno
genera cloro, el cual es muy peligroso.
Niveles de toxicidad.
DL50 (oral en conejos): 900 mg/Kg, inhalacin en
ratas): 3124 ppm/1 h.
CLMo
(concentracin
(inhalacin
en
letal
humanos)
minima
1300
publicada):
ppm/30
min;
3000ppm/5 min.
Riesgos
Produce gas inflamable cuando se encuentra en
contacto con metales. Se generan v apores txicos e
irritantes de cloruro de hidrgeno cuando se calienta.
Inhalacin: elgas causa dificultad para respirar, tos,
inflamacin y ulceracin de nariz, trquea y laringe.
Exposiciones severas causan espasmo de la laringe
y edema en los pulmones.
Contaco con los ojos y piel: es un irritante severo de
ojos y piel, puede causar quemaduras serias,
dermatitis, reducir la visin o, incluso, la prdida total
de sta.
Ingestin: produce corrosin de las membranas
Primeros auxilios
Ojos: lavar inmediatamente con agua corriente
durante 15 mi nutos.
Piel: quitar ropa y zapatos contaminados, lavar
inmediatamente la zona daada con abundante
agua.
Inhalacin: mover a la persona al aire fresco; si se
dificulta la respiracin proporcionar oxigeno y
mantenerlo caliente y en reposo, no dar a ingerir
nada.
Ingestin: no provocar vmito y dar a beber agua
continuamente, por ejemplo, una cucharada cada 10
minutos o dar a beber leche de magnesia.
En todos los casos de exposicin, el afectado debe
ser transportado al hospital tan pronto como sea
posible.
Manejo y almacenamiento
Peligro: corrosivo y venenoMantngase en envase
de vidrio, en lugares secos, bien ventilados, alejados
de materiales oxidantes y fuentes de ignicin o calor.
Tratamiento en caso de accidente
Control de fuego: en caso de accidente utilizar CO2,
polvo qumico seco o arena seca. Los extinguidotes
de fuego se eligen dependiendo de los alrededores,
ya que el HCl no arde.
Fugas y derrames: ventilar el rea y protegerse con
el equipo de seguridad necesario. Cubrir el derrame
con bicarbonato de sodio o una mezcla de 50:50 de
hidroxido de calcio y cal
sodada, mezclar
cuidadosamente. Mantener el materil lejos de fuentes
de agua y drenajes hasta no ser neutralizado como
se indic anteriormente.
Desechos
Neutralizar las soluciones concentradas de cido
clorhdrico con carbonato de calcio o cal y diluir con
agua cuidadosamente. La disolucin resultante
puede verterse al drenaje, con abundante agua. En
caso de soluciones diluidas,
130
TIPO DE RESIDUO
ESTADO FSICO
ENVASADO
COLOR
Sangre
Slido
Lquido
Bolsa de plstico
Recipiente hermtico
Rojo
Cultivos y cepas de
agentes infecciosos
Slidos
Lquidos
Bolsa de plstico
Recipiente hermtico
Rojo
Residuos
anatmicos
Slidos
Lquidos
Bolsa de plstico
Recipiente hermtico
Rojo
Slidos
Lquidos
Bolsa de plstico
Recipiente hermtico
Amarillo
Slidos
Recipientes rgidos
Rojo
Patolgicos
Objetos
punzocortantes
usados y sin usar
no
131
II
EXPERIMENTOS
132
Prctica 1
Soluciones
Tiempo de la prctica 3 horas
Objetivos
Que el alumno:
1. Identifique la existencia de soluciones en los sistemas biolgicos.
2. Explique los clculos y procedimientos para preparar soluciones porcentuales, molares
y normales, as como las diferentes diluciones de stas.
3. Presente ejemplos de soluciones utilizadas en medicina (solucin isotnica, Ringer,
Darrow y Hartman).
Responda a las siguientes preguntas:
1.Qu es una solucin?
2.Cuntas clases de soluciones existen?
3.Qu significan los siguientes trminos: mol, solucin molar y solucin normal?
4.Qu significan: v/v, p/v, p/p y ppm?
5.Cul es la composicin de las siguientes soluciones: solucin isotnica de cloruro de
sodio, suero glucosado al 5%, Ringer-lactato?
6.Cules son los tipos de soluciones que existen in vivo? Mencionar ejemplos.
7.Qu es una solucin isotnica?
8.Qu es una solucin osmolar?
9.Cmo se calcula la osmolaridad de una solucin?
10.Qu les pasa a los eritrocitos cuando se ponen en contacto con soluciones salinas de
diferente osmolaridad?
11.Qu se entiende por dilucin y dilucin seriada de las soluciones?
Material
Por equipo:
3 vasos de precipitado de 10 ml
3 pipetas de 1.0 ml
3 pipetas de 5.0 ml
3 pipetas de 10.0 ml
Gradilla con 6 tubos de ensayo
Eritrocitos humanos lavados en solucin
Salina isotnica
Solucin de azul de metileno al 1.0%
Cloruro de sodio en cristales (NaCl)
Balanza granataria
Por grupo:
1 Microscopio marca Leica.
Procedimiento
1. Hacer los clculos correspondientes para comprobar que la solucin a 0.9% de NaCl es
isotnica con respecto al plasma (ver pag. 121). Considerar que:
133
a) El cloruro de sodio se disocia en solucin acuosa en los iones sodio y cloruro, por lo
que la concentracin inica se duplica (1 mmol/l = 2 mosm/l).
b) La presin osmtica normal del plasma es de 290-310 mosm/l.
2. Preparar 20 ml de una solucin de NaCl a 4.5% (etiquetar como solucin 1).
3. A partir de la solucin anterior, preparar 25 ml a 0.9% (solucin 2) y 50 ml a 0.045%
(solucin 3).
4. Colocar en tres tubos de ensayo las diferentes soluciones de cloruro de sodio
preparadas en los puntos 1 y 2. Con la ayuda de un gotero (dejando caer lentamente por
las paredes del tubo) 2 gotas de eritrocitos lavados. Mezclar con cuidado y dejar reposar a
temperatura ambiente unos minutos. Valorar el grado de hemlisis que sufren los
eritrocitos cuando se ponen en contacto con las diferentes soluciones.
5. De las 3 soluciones prepradas tomar una gota de cada una y por separado colocarlas
en un porta-objetos, colocar un cubre-objetos y observarlas al microscopio, para valorar el
efecto de los eritrocitos.
Ver las intrucciones para el uso del microscopio
6. Hacer la dilucin y redilucin (dilucin seriada) de la solucin de azul de metileno como
se muestra en el siguiente cuadro:
DILUCIN SERIADA DE AZUL DE METILENO
de
Tubo H2O (ml) Sol
azul
de
metileno
1
2
0.5 ml*
2
2
3
2
4
2
5
2
6
2
-
Volumen de
transferenci
a
0.5 ml
0.5 ml
0.5 ml
0.5 ml
0.5 ml
*Nota: para mezclar al hacer las diluciones se debe succionar y soplar con cuidado la
pipeta en cada tubo varias veces antes de transferir la dilucin al siguiente tubo.
Resultados
1. Expresar en forma ordenada los clculos efectuados para cada uno de los ejercicios.
2. Deducir el movimiento o no del solvente cuando se ponen en contacto eritrocitos con
soluciones hipo, hiper e isoosmticas.
3.
Calcular la dilucin y la concentracin de azul de metileno en cada uno de los seis
tubos de la dilucin seriada (ver pg. 93). Asegrese que la coloracin obtenida disminuya
gradualmente conforme avanza la dilucin.
Problemas
1. Hacer los clculos para preparar una solucin de KCl al 3%.
2. Hacer los clculos para prepara una solucin de CaCl2 0.25 M se requieren 15 ml.
134
135
utilizando el
micromtrico.
mando
de
enfoque
6
9
3
4
136
Prctica 2
137
aumentandola
o
disminuyndole
-con
la
siguiente
modificacin del del nivel de CO2]
Material
Diez probetas o vasos de precipitado.
Orina.
Solucin de bicarbonato de sodio a 3%.
Potencimetro.
Mtodo
Un alumno por equipo desayunar o
comer normalmente (evitar ingestin de
jugos cidos); despus har lo que se
indica a continuacin.
1. Tomar 250 ml de agua una hora antes
de la clase prctica. Vaciar la vejiga y
descartar esa orina.
138
2.
Tomar
250
ml
de
inmediatamente antes de la
prctica.
agua
clase
Orina
Solucin de bicarbonato de sodi al 3%
Potencimetro
Mtodo
1. Tomar 250 ml de agua una hora antes
de la clase prctica. Vaciar la vejiga y
descartar esa orina.
2.
Tomar
250
ml
de
inmediatamente antes de la
prctica.
agua
clase
Hiptesis
Elabore la hiptesis apropiada.
Material
139
Prctica 3
Cintica enzimtica.
Efecto de la concentracin del sustrato
sobre la velocidad de reaccin enzimtica
Tiempo de prctica: 2 horas
Objetivo
El alumno:
1. Explicar el efecto de la concentracin
de sustrato sobre la velocidad de una
reaccin enzimtica.
2. Calcular por mtodos grficos la
velocidad mxima y la constante de
Michaelis de una reaccin enzimtica.
3. Conocer los diferentes tipos de
inhibidores que existen y estudiar su efecto
sobre la Km y V mx.
4. Conocer
aspectos
bsicos
de
fotocolorimetra (ver pg, 115).
Para lograr los objetivos de esta prctica
contestar las siguientes preguntas:
1. Qu es la velocidad de una reaccin
enzimtica?
2. Cmo se define la constante de
Michaelis (Km) de una reaccin enzimtica?
3. Cmo se define la velocidad mxima (V
mx) de una reaccin?
4. Para qu le sirve a un mdico la
determinacin de la actividad de algunas
enzimas?
5. Cules son las
enzimas cuya
determinacin tiene valor diagnstico?
Hiptesis
Si la velocidad de una reaccin enzimtica
es proporcional a la concentracin del
sustrato; cuando la concentracin del
140
141
Glucosa + O2
Acido glucnico +
H2O2
La peroxidasa cataliza la transferencia de
oxgeno del perxido a un aceptor que es
cromgeno como la ortotoluidina, la
ortodianisidina,
la
2,2-azino-bis
(3etilbencentiazolin-6-sulfnico) o la 4-aminoantipirina (y fenol) que se colorean al
oxidarse. La reaccin se expresa:
E+S
ES
E+P
Material y reactivos
2 Gradillas con 8 tubos de ensaye cada
una.
1 Pipeta de 5 ml.
2 Pipetas de 5 ml.
1 Matraz Erlemeyer de 100 ml.
Fotocolormetro con filtro azul.
Solucin estndar de glucosa 40 mmol/l y
una dilucin 1:10 de sta para los tubos 2, 3
y 4.
2 frascos con solucin de enzimas: 41.6
Uml1 de glucosa oxidasa, 4.6 Uml1 de
peroxidasa, ortodianisidina 0.21 mmol/l.
Solucin de azida de sodio 400 mmol/l
como inhibidor.
Gotero con HCl.
Mtodo I (con azida de sodio)
1. En un matraz Erlenmeyer de 100 ml
preincubar 20 minutos la solucin de
enzimas con 0.3 ml del inhibidor.
2. Preparar la siguiente serie de tubos (tabla
1).
3.- Considerar un intervalo de 30 segundos
para cada tubo al agregar la enzima.
4.- Agitar cada tubo e incubar 5 minutos
temperatura ambiente y de inmediato
detener la reaccin agregando 3 gotas de
HCl concentrado. Considerar un intervalo de
Tubo Solucin
No.
glucosa (ml)
1
2
3
4
5
6
7
8
dil 1:10
dil 1:10
dil 1:10
de H2O
(ml)
0.0
0.1
0.25
0.5
0.1
0.25
05.
1.0
1.0
0.9
0.75
0.5
0.9
0.75
0.5
0.0
Soucin
de
enzimas
(ml)
3
3
3
3
3
3
3
3
Referencias
1. Devlin TM. Bioqumica. Libro de texto con
aplicaciones clnicas. 4a. ed. Barcelona:
Editorial Revert; 2004.
2. Lehninger AL, Nelson, DL. Principios de
bioqumica. 4a. ed. Barcelona: Ediciones
Omega; 2005.
3. Mathews CK, van Holde KE. Bioqumica.
3a.
ed.
Espaa:
McGraw-Hill
Interamericana; 2003.
4. Voet D, Voet JG, Pratt C. Fundamentals
of biochemistry. USA: John Wiley and
Sons; 1999.
143
Tubo
No.
Concentracin de
sustrato molas
de glucosa inicial
ml-1
ABCISAS (X)
Velocidad de la
reaccin unidades
Klett 5 min-1 1/V
ORDENADAS (Y)
1
2
3
4
5
6
7
8
Velocidad de la
reaccin con
INHIBIDOR 1/V
Unidades Klett
5 min1 (Y)
Tubo
No.
Concentracin de
sustrato molas
de glucosa inicial
ml-1
ABCISAS (1/X)
Velocidad de la
reaccin unidades
Klett 5 min-1
ORDENADAS (1/Y)
Velocidad de la
reaccin con
INHIBIDOR
Unidades Klett
5 min -1
1
2
3
4
5
6
7
8
144
Prctica 4
Mtodo
1. Encender la computadora y localizar el
icono del programa. El efecto de la insulina
sobre la glucemia de la rata. Hacer doble
clic sobre este icono.
2. Hacer clic sobre los botones que indican
cada de las partes de la prctica; empezar
por leer las
145
Prctica 5
146
EXPERIMENTO 2 (DINITROFENOL)
1. Diluir 5 ml de la levadura con 40 ml de
agua destilada.
2. Aadir por decantacin (no pipetear) 0.2
ml de la solucin de dinitrofenol 40 mmol/l,
concentracin final de 200 mol/l.
3. Determinar el pH de la solucin y repetir
la medicin dos veces ms con intervalos
de 3 minutos para obtener la lnea basal.
4. Esperar 5 minutos.
5. Repetir los pasos 3 y 4 del experimento
control.
Material
Tres vasos de precipitado de 100 ml.
Pipetas de 5 y 10 ml.
Potencimetro.
Piceta para enjuagar el electrodo del
potencimetro.
Levadura (Saccharomyces cerevisiae)
200 mg/ml.
Solucin de glucosa (10%) para una
concentracin final de 1%.
Solucin de dinitrofenol 40 mmol/l en
etanol.
Solucin de azida de sodio 400 mmol/l.
Agua destilada.
Mtodo
Experimento 1 (control)
EXPERIMENTO 3 (AZIDA)
1. Diluir 5 ml de la levadura con 40 ml de
agua destilada.
2. Aadir por decantacin (no pipetear) 0.5
ml de la solucin de azida de sodio 400
mmol/l, concentracin final de 5 mmol/l.
Agitar con cuidado.
3. Determinar el pH de la solucin y repetir
la medicin dos veces ms con intervalos
de 3 minutos para obtener la lnea basal.
4. Esperar 5 minutos.
5. Repetir los pasos 3 y 4 del experimento
control.
6. Registrar sus datos en la siguiente
tabla.
147
Tiempo
(min)
pH
Glucosa
Azida de
Dinitrofe
sodio
nol
0
5
10
15
20
30
40
Anlisis de resultados
mamferos
(ver
7.1).
Referencias
1. Pea A. Studies on the mechanism of
K+ transport in yeast. Arch Biochem
Biophys. 1975; 167:397-409.
+
2. Pardo JP. La ATPasa de H de la
membrana plasmtica de los hongos.
Mensaje Bioqumico. 1990; 13: 119-172.
Glucosa
fig.
ADP + Pi
Glucosa
H
ATP
ADP
ATP
Etanol
+
H H
ADP
ADP
148
Prctica 6
149
Prctica 7
Cuerpos
cetnicos
en
sangre
(cetonemia) y en orina (cetonuria).
150
Determinacin
de
hormonas
relacionadas con el metabolismo de
carbohidratos (insulina, pptido "C" y
glucagn).
Determinaciones de enzimas y sustratos
hidrocarbonados en clulas y tejidos.
Otras
determinaciones
(microalbuminuria,
determinaciones
inmunolgicas
y
determinacin
de
receptores).
Para llevar a cabo la determinacin de
glucosa plasmtica en ayunas (basal)
utilizaremos un mtodo enzimtico
colorimtrico y para la determinacin de
glucosa y cuerpos cetnicos en orina
utilizaremos tiras reactivas.
Material
Gradilla con 3 tubos de ensayo.
Pipetas de 0.1 y 1 ml.
Solucin reactiva para glucosa: TRIS 92
mmol/l, pH 7.4; fenol 0.3 mmol/l, glucosa
oxidasa 15 000 U/l, peroxidasa 1000 U/l y
4-aminofenazona 2.6 mmol/l.
Solucin reactiva para determinacin de
fructosaminas 1: proteinasa K 786 U/ml,
peroxidasa 60 U/ml, amortiguador de pH y
diversos estabilizadores.
Solucin reactiva para determinacin de
fructosaminas 2: cetoamina oxidasa 9
U/ml, 4-aminoantipirina 10.5 mmol/l, EDTA
50 mmol/l, amortiguador de pH y
estabilizadores.
Solucin estndar de glucosa 100 mg/dl.
Solucin estndar de fructosamina 150
mol/l.
Curva patrn de fructosaminas (DA
contra concentracin) 50, 100, 200, 400
mol/l. Grfica proporcionada por la
coordinacin.
Suero o plasma problema (estable 3 das
a 2-8C).
Espectrofotmetro a 505 y 620 nm.
Mtodo
DETERMINACIN DE LA GLUCEMIA BASAL
POR GOD-POD/TRINDER
El mtodo ms utilizado en el laboratorio
clnico es el de la glucosa oxidasa (GOD).
Esta enzima cataliza la reaccin de la
glucosa presente en la muestra.
GOD
Glucosa + O2 + H2O
H2O2 +
Gluconato
La cuantificacin de los resultados puede
llevarse a cabo de la siguiente manera:
Mediante polarografa, determinacin del
consumo de oxgeno con la ayuda de un
electrodo de oxgeno. La cantidad de
glucosa en la muestra es directamente
proporcional a la cantidad de oxgeno
consumido. Mtodo muy utilizado en
sistemas automatizados de anlisis
clnico.
Enzimtico
colorimtrico,
por
determinacin de la quinona producida por
la accin de la peroxidasa (POD), en
donde un cromgeno pasa de su forma
reducida (incolora) a su forma oxidada
(coloreada). El mtodo utilizado para esta
determinacin es el de Trinder. En l la
intensidad del color es directamente
proporcional a la cantidad de glucosa
presente en la muestra.
POD
1. Blanco
2. Estndar
3. Suero
Estndar
10 l
Suero
10 l
1 ml
1 ml
1 ml
problema
-
problema
Solucin
reactiva para
glucosa
Mezclar e incubar
temperatura ambiente.
15
minutos
151
ASuero
X[Estndar.g / dl] = [Glucosa.g / dl]
AEstndar
El resultado se obtiene en mg/dl (x 0.0555
= mmol/l).
El mtodo es lineal hasta valores de 500
mg/dl.
Diluir el suero 1:2, si la concentracin de
glucosa es mayor a 500 mg/dl con
solucin salina.
La hemlisis hasta 0.3 g/dl de
hemoglobina no interfiere.
Los anticoagulantes como el EDTA,
oxalato, heparina o fluoruro no afectan a
los resultados.
La glucosa en suero o plasma es estable
tres das a 2-8C. A temperatura
ambiente, la glucosa presente en una
muestra de sangre entera puede
desaparecer por completo al cabo de 6
horas debido a la gluclisis en los
eritrocitos. Adems, la contaminacin
bacteriana y la presencia de cantidades
elevadas de leucocitos, pueden tambin
aumentar
dicho
proceso,
por
consiguiente:
Siempre que la muestra sea sangre total,
la determinacin de la glucosa debe
realizarse durante la media hora siguiente
a su recoleccin.
De lo contrario, aadir un conservador que
inhiba la gluclisis (fluoruro sdico).
152
a
n
e
t
o
r
P
a
n
e
t
o
r
P
a
n
e
t
o
r
P
a
n
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t
o
r
P
H
H C
N H
N
O
O
C
H
H
O
C C
N H H
HO
C
H H
H
C
O
H
H
C
O
H
H
O
C
H
H
O
C
H
H
O
C
H
H
C
O
H
H
O
C
H
H
O
C
H
H
O
C
H
i
c
a
c
i
l
g
e
d
s
o
t
c
u
d
o
r
P
i
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o
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a
m
A
e
d
o
t
c
u
d
o
r
P
Productos de la glicacin
E
G
A
a
d
a
z
n
a
v
a
a
n
i
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a
o
t
e
C
f
f
i
h
c
S
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d
e
s
a
B
H
Oa
s
2o
Hu
c
Cl
a
n
e
t
o
r
P
H
O
2
H
C
H
O
2
H
C
H
O
C
H
Fig. 10.1.
avanzada
Proteinasa K
Protena glicada
Fragmentos de protena
glicada
153
Cetoamina oxidasa
Fragmentos de protena
Aminocidos + H2O2
Peroxidasa
H2O2 + Cromgeno
Cromgeno
oxidado + H2O
Procedimiento para la determinacin de
fructosaminas:
1. Vaciar en un tubo de ensayo 0.5 ml (500 l)
de reactivo 1 para fructosaminas.
2. Agregar 0.02 ml (20 l) de suero o plasma
problema.
3. Incubar
ambiente.
10
minutos
temperatura
Prctica 8
155
Prctica 9
concentraciones de glucosa en la
sangre total esto es debido a que la
gluclisis contina en los eritrocitos.
El uso del glucmetro es de mucha
utilidad en el autocontrol de pacientes
diabticos, lo que ayuda a medir una
glucosa en sangre casual.
El valor calrico total diario de los
alimentos deber ser entre 25 y 30
Kcal/Kg/da,
para
las
personas
sedentarias y de 30 a 40 Kcal/Kg/da
para una persona fsicamente activa o
que realiza ejercicio de manera
regular4,5.
Referencias
1.-Koolman J, Roehm KH (2004).
Bioqumica Texto y Atlas: 3 Edicin,
Ed. Mdica Panamericana, pp.: 158,
308-310
2.-Smith, C; Marks, A. D. & Lieberman, M.
(2005). Marks Basic Madical
Biochemestry. 2a Edicin. Ed. Lippincott
Williams & Wilkins. Pag. 24-26
3.-Kaplan LA, Pesce AJ. (2002). Qumica
Clnica. Teora, anlisis y correlacin. 3
Edicin. Ed. Pesce Kaplan Publicaciones,
Captulo: 32.
4.- NORMA OFICIAL MEXICANA, NOM015-SSA2-1994, Para la prevencin,
tratamiento y control de la diabetes
mellitus en la atencin primaria. Listado
de Normas Oficiales Mexicanas de la
Secretara de Salud.
5.-MODIFICACIN a la Norma Oficial
Mexicana NOM-015-SSA2-1994, Para la
prevencin, tratamiento y control de la
diabetes. Listado de Normas Oficiales
Mexicanas de la Secretara de Salud.
6.- Manual para el manejo de las insulinas
2001. 2 Edicin. Subsecretara de
Prevencin y Proteccin de la Salud.
Centro
Nacional
de
Vigilancia
Epidemiolgica. SSA. Mexico.
Material
Dietas:
a).-Rica en carbohidratos (X gr. spaghetti).
b).- Dieta rica en lpidos (hamburguesa).
Mtodo
1.- Dos sujetos sedentarios, uno de los cuales
consumir una dieta rica en carbohidratos y el
otro una dieta rica en protenas.
2.- Dos sujetos con actividad fsica constante,
uno de los cuales consumir una dieta rica en
carbohidratos y el otro una dieta rica en lpidos.
3.- A cada uno de los sujetos en cualquiera de
las condiciones y consumo de dietas se les
determinar la concentracin de glucosa en
sangre total por medio de un glucmetro en los
siguientes tiempos:
0 minutos (antes de ingerir los alimentos).
30 minutos, 60 minutos y 120 minutos, despus
de ingerir los alimentos
Para realizar la determinacin de glucosa en
sangre total seguir los siguientes pasos:
4.-Para Insertar la lanceta
a) Gire la tapa One Touch
UltraSoft hacia la izquierda
para quitarla
b) Inserte una lanceta en el
portalancetas
y
empjela
firmemente hasta que quede
bien asentada
avance ms.
13.-Lectura. El resultado de la
prueba de glucosa de su
sangre aparecer despus de
que el medidor cuente en
forma regresiva de 5 a 1.
Anotar el resultado en la tabla
correspondiente Tabla 14.1.
14.-Es
importante
desechar
con
mucho
cuidado la lanceta usada
luego de cada uso, con el
fin de evitar que se
produzcan
lesiones
accidentales con las
puntas de la lancetas. Para el desecho de las
lancetas siga los siguientes pasos:
15.- Gire la tapa One Touch Ultra Soft en
direccin contraria a las manecillas del reloj.
16.Apunte
el
dispositivo
de
puncin hacia a hacia
usted. Presione el
botn de liberacin
para asegurarse que
el
dispositivo
de
puncin no est en posicin de cargado.
Deslice el botn cargador hacia delante y
deposite la lanceta en un recipiente para
material punzo cortante
a)
Muestra
adecuada
b) Muestra
insuficiente
a
158
Tipo de dieta
Tiempo
(min.)
[Glucosa mg/dl]
0
30
60
120
159
Prctica 10
Integracin Metablica
Objetivos
1.-Que el alumno pueda integrar las vas
metablicas de los carbohidratos, de los
lpidos y protenas en (condiciones
normales) en un paciente sano.
2.-Que el alumno reconozca los sitios
denominados encrucijadas metablicas y
las enzimas de las vas reguladoras.
3.-Que el alumno pueda correlacionar el
papel que tienen las hormonas en la
regulacin de las vas.
4.-Que el alumno sea capaz de analizar
los datos de las pruebas clnicas en un
sujeto normal.
5.-Que el alumno relacione que vas se
encuentran alteradas en un paciente
diabtico.
Los alimentos que ingerimos deben estar
constituidos por los 6 componentes
bsicos que son protenas, carbohidratos,
lpidos, vitaminas, minerales y agua, la
cantidad que se requiere ingerir de cada
uno de los componentes vara de acuerdo
a la constitucin y la actividad fsica que se
realiza, tanto la falta como en el exceso de
consumo de alguno de los componentes
bsicos conlleva a diversos trastornos
metablicos.
Aproximadamente del 40 al 45% de
nuestra ingesta calrica proviene del
consumo
diario
de
carbohidratos
complejos los cuales al ser digeridos dan
lugar a los diferentes monosacridos entre
los que se encuentra la glucosa, la cul se
distribuye por la sangre a las clulas para
poder captar la glucosa, siendo la principal
fuente de energa. Algunos tipos celulares
son dependientes de la liberacin de
insulina por el pncreas como es el caso
de las clulas musculares. Si la insulina no
160
161
Material.
Dietas:
Dos sujetos sanos sedentarios y dos horas
mnimas de ayuno.
Dos sujetos con actividad fsica constante
y dos horas mnimas de ayuno.
a).-Dieta rica en carbohidratos (g
spaghetti).
b).-Dieta rica en protenas.
Determinacin de glucosa
Glucmetros One Touch Ultra.
Tiras reactivas One Touch Ultra [Glucosa
oxidasa (Aspergillus nger)].
Dispositivo de puncin.
Lancetas estriles con discos protectores
One Touch UltraSoft.
Recipiente para material punzo cortante.
Recipiente
para
material
biolgicoinfeccioso.
Jabn para manos.
Torundas de algodn con alcohol.
Glucmetros.
Determinacin
de
colesterol
y
triacilgliceroles
Accutrend Roche para determinacin de
colesterol y triacilgliceroles.
Tiras reactivas para determinacin de
colesterol.
Tiras reactivas para determinacin de
triacilgliceroles.
Lancetas estriles.
Determinacin
de
hemoglobina
glicosilada.
Micromat
HbA1c
BIO-RAD
para
determinacin de hemoglobina glicosilada
en sangre total.
Lancetas estriles.
Las determinaciones de urea, creatinina y
cido rico, se realizaran en orina.
La muestra de orina deber ser del alumno
a quien se le haya determinado glucosa,
colesterol y triacilgliceroles para poder
discutir todos los valores en conjunto y
162
163
Anotar el resultado
correspondiente
Tabla 15.1
en
la
tabla
[Glucosa mg/dl]
Determinacin
de
colesterol
y
triacilgliceroles
AccutrendGCT.
1.-Lavarse las manos cuidadosamente
esto es con la finalidad de retirar residuos
de crema o grasa en las manos para
evitar
determinaciones
errneas
principalmente cuando se realiza la
determinacin de triacilgliceroles.
2.- Con la ayuda de unas pinzas extraer
una tira reactiva del envase y taparlo
inmediatamente para evitar que las tiras
se sequen.
3.-Con la tapa cerrada D inserte en la
ranura F, en la direccin indicada por la
164
1 ml
1 ml
Urea + oftaldehdo
Isoindolina
La urea es estable 5 das a 2-8 C.
1.-Diluir la muestra 1:50 con agua
destilada mezclar y multiplicar el resultado
por el factor de dilucin (50).
2.-Para realizar la dilucin 1:50 recupere la
orina con la pipeta
Pasteur de plstico hasta la marca (lo que
corresponde a 0.5 ml) y colquelo en un
tubo Falcn que ya contiene 24.5 ml de
agua, con ello se tendr una dilucin 1:50,
de ah tomar la muestra como se
esquematiza en el cuadro.
La determinacin se realiza directamente
en las celdas con la finalidad de tomar la
lectura de las absorbancias exactamente
al minuto (A1) y a los dos minutos (A2).
Mezclar y poner en marcha el cronmetro,
anotar las absorbancias a los 60 (A1) y 120
(A2) segundos.
165
Secretara de Salud.
5.-MODIFICACIN a la Norma Oficial
Mexicana NOM-015-SSA2-1994, Para la
prevencin, tratamiento y control de la
diabetes. Listado de Normas Oficiales
Mexicanas de la Secretara de Salud.
167
Prctica 11
Huella gnica
Objetivos
1. Que el estudiante conozca la aplicacin de
las tcnicas de DNA recombinante.
2. Que el estudiante sea capaz de analizar e
interpretar los datos generados a partir de una
prueba de huella gnica.
3. El alumno adquirir la capacidad de
manejar muestras para anlisis de cidos
nucleicos.
4. El alumno desarrollar destreza en la
interpretacin de resultados de metodologas
bsicas de anlisis molecular.
FUNDAMENTO
El DNA es un polmero lineal formado
por desoxirribonucletidos que contienen a las
bases
nitrogenadas
adenina,
guanina,
citosina, timidina. La interaccin de las bases
nitrogenadas por puentes de hidrgeno
permite la formacin de la doble cadena de
DNA. Cada grupo fosfato est unido al
carbono 5 de una subunidad de azcar y al
carbono 3 de la subunidad de azcar del
nucletido contiguo.
Las cadenas se mantienen unidas por
puentes de hidrgeno entre las bases. Las
cuales son completamente lineales.
En la molcula de DNA que reside la
informacin gentica de un organismo,
especficamente en la secuencia de los
nucletidos, de tal manera que cada tres
bases forman un codn que corresponde a su
vez a uno de los 20 aminocidos, teniendo un
total de 64 codones posibles, los cuales
conforman el cdigo gentico. En el DNA se
encuentran dos tipos de secuencia, la que es
capaz de ser leda para dar origen a una
protena lo que permite que una clula u
organismo crezca desarrolle tambin la no
codificante una que codifica para las
funciones celulares y otra no codificante, que
participa en la regulacin de su expresin.
Algunas de las secuencias de nucletidos no
codificantes se caracterizan por ser cortas,
estn alineadas en tndem y se repiten miles
de veces de manera constante a lo largo del
168
Referencias
169
170
Muestra de
la escena
Sospechoso
1 azul
Sospechoso
2 naranja
Sospechoso
3 violeta
Sospechoso
4 rojo
Sospechoso
5 amarillo
Muestras
de DNA
Enzimas de
restriccin
EcoRI y
PstI
Volumen total
de la
reaccin
10 l
10 l
20 l
10 l
10 l
20 l
10 l
10 l
20 l
10 l
10 l
20 l
10 l
10 l
20 l
10 l
10 l
20 l
PROCEDIMIENTO
1.-Marcar los microtubos de la siguiente
forma:
a) Tubo verde (muestra de la escena)
b) Tubo azul (sospechoso 1)
c) Tubo naranja (sospechoso 2)
d) Tubo violeta (sospechoso 3)
e) Tubo rojo (sospechoso 4)
f) Tubo amarillo (sospechoso 5)
171
Referencias
Cortar en pequeas
piezas con enzimas
de restriccin
DNA total
de
una
persona
-ve
Ms
grandes
Fragmentos
de DNA en el
gel
+ve
Fragmentos separados y
transferidos a membrana
de nylon
Ms
pequeas
172
III
Casos de correlacin bioqumica
y prctica mdica
173
Caso 1
Clera
Preguntas de bioqumica
1. Qu procesos de la membrana
resultan afectados por Vibrio cholerae
en un caso de clera?
2. Qu valores de laboratorio clnico
podran estar alterados en este
paciente?
3. Cules seran los datos de laboratorio
que permitiran precisar el tratamiento
hidroelectroltico?
4. Por qu en este caso hay que aadir
glucosa al tratamiento hidroelectroltico
por va oral?
5. Cules
son
los
signos
de
deshidratacin?
6. Cul fue la situacin cido-base del
paciente al momento de su ingreso al
hospital?
174
Caso 2
Oclusin intestinal. Acidosis metablica.
Deshidratacin grave.
Cl = 100 mEq/l
Gasometra arterial:
t
CO2 = 12
pH = 7.29
pCO2 = 24 mmHg
pO2 = 95 mmHg
HCO - = 11.2 mmol/l
3
EB (exceso de base) = 20
Qumica sangunea:
Glucosa = 5.2 mmol/l (95 mg/dl)
BUN = 15 mmol/l
Preguntas de bioqumica
1. Evaluar el estado cido-base del
paciente; tomar en cuenta los valores
de pH y presin parcial de bixido de
carbono (pCO2), el valor de bicarbonato
175
REFERENCIAS
1. Harrison. Principios de medicina interna.
15a.
ed.
Madrid:
McGraw-Hill
Interamericana
Editores; 2001; cap:
Lquidos y electrlitos y Obstruccin
intestinal aguda. p. 184.
2. Devlin TM. Bioqumica. Libro de texto
con aplicaciones clnicas. 4a. ed.
Barcelona: Editorial Revert; 2004.
3. Montgomery R. Bioqumica: Casos y
texto. 6a. ed. Barcelona: Editorial
Harcourt-Brace, 1998; cap. 4.
4. Laguna J, Pia E. Bioqumica de
Laguna. 5a.ed. Mxico: Editorial El
Manual Moderno; 2002: 41-76.
5. Villazn SA, Crdenas CO,Villazn DO,
Sierra UA. Fluidos y electrlitos. Mxico:
JGH Editores; 2000.
176
Caso 3
Hipoglucemia secundaria
a intoxicacin alcohlica
Se trata de un paciente de 58 aos,
alcohlico crnico, cuyos familiares relatan
que ha ingerido una gran cantidad de
alcohol en los dos ltimos das con un
consumo muy escaso de alimentos. Inici
su padecimiento con nusea, vmito,
mareo, sudacin, cefalea, visin borrosa y
confusin; present, en una sola ocasin,
una convulsin, por lo que es llevado al
servicio de urgencias. A la exploracin se
encuentra semiconsciente con aliento
alcohlico e hipotermia.
Se procede a un lavado gstrico para
remover el alcohol an no absorbido; se
mantienen
permeables
las
vas
respiratorias; se instala oxgenoterapia y se
le administra solucin glucosada por va
endovenosa.
Los resultados de laboratorio muestran:
Alcohol
300 mg/dl
Glucosa
2.0 mmol/l
Lactato
9.0 mmol/l
pH
7.2
Preguntas de bioqumica
1. Cules son los sntomas de la
hipoglucemia?
2. De qu forma el etanol produce acidosis
lctica e hipoglucemia? Cmo se
encuentra la relacin intracelular de
+
NADH/NAD ? Qu procesos metablicos
se favorecen con los niveles altos de
NADH?
177
Caso 4
Cetosis por inanicin.
Obesidad
Una mujer de 27 aos llega al servicio de
urgencias mdicas despus de haber sufrido
un desmayo. Al interrogarla, relata que lleva
15 das a dieta de agua, t y verduras
cocidas para bajar de peso, sin ningn
control mdico. Se detect aliento con olor a
manzana, cetonuria, cetonemia, cidos
grasos libres elevados, triacilgliceroles
elevados, hipoglucemia y presin arterial
baja; su peso al iniciar la dieta era de 78 kg y
su estatura de 1.59 m. Se diagnostica
cetoacidosis por inanicin y obesidad
exgena.
El estudio de su dieta mostr que gran
parte de su ingesta calrica era en forma de
carbohidratos (galletas, chocolates, pasteles,
refrescos, dulces, etctera).
El tratamiento consisti en administrar
parenteralmente solucin glucosada y
continuar con una dieta normocalrica.
Preguntas de bioqumica
1. En esta mujer de 27 aos: corresponde
el peso a su talla? Determinar su ndice
de masa corporal, grado de obesidad y el
porcentaje de sobrepeso.
2. Cmo es posible que se formen grandes
almacenes de energa en forma de
grasas,
si
la
dieta
contiene
predominantemente carbohidratos?
3. Cules
son
las
interrelaciones
metablicas de los principales tejidos
(hgado, tejido adiposo,
cerebro, msculo, etctera) en la
obesidad?
4. Cules
son
las
interrelaciones
metablicas de los principales tejidos en
178
Caso 5
Hipercolesterolemia y aterosclerosis
Un hombre de 56 aos acudi al mdico
por presentar dolor precordial en reposo que
se incrementaba con el esfuerzo. Se le
detect hipercolesterolemia que, al anlisis
de los lpidos plasmticos, mostr que la
mayora del colesterol plasmtico elevado se
encontraba en la fraccin de lipoprotena de
baja densidad (LDL). Se le realiz una
arteriografa coronaria la cual mostr un
estrechamiento de las arterias. La evaluacin
de la dieta indic que consuma gran
cantidad de alimentos ricos en colesterol,
aunque en los ltimos meses haba seguido
una dieta baja en grasas.
Fue diagnosticado de aterosclerosis en las
arterias coronarias.
El tratamiento consisti en una dieta sin
colesterol y en administrar preparados de
lovastatina, un inhibidor de la HMGCoA
reductasa.
Fue tratado tambin con colestiramina,
una resina que capta las sales biliares. La
resina no se absorbe y permanece en la luz
intestinal donde se une a las sales y aumenta
la cantidad de las mismas que se excreta con
las heces.
Preguntas de bioqumica
1. Cules son algunos alimentos ricos en
colesterol?
2. Cul es el destino del colesterol de la dieta?
3. Cul es la funcin de la bilis en la digestin?
4. Qu conexin metablica existe entre el
colesterol y las sales biliares?
5. Cmo disminuye la resina de colestiramina
la concentracin plasmtica de colesterol?
6. Por qu se le ha llamado al colesterol-LDL:
colesterol malo y al colesterol-HDL:
colesterol bueno?
179
otras
formas
de
arteriosclerosis
e
hiperlipoproteinemias y otros trastornos del
metabolismo lipdico.
4. Pennachio D. Lineamientos para la deteccin
de hipercolesterolemia. Atencin Mdica
1997;10/2:30-43.
5. Vogel RA. Coronary risk factors, endothelial
function, and atherosclerosis. Clin Cardiol
1997; 20:426-432.
6. Goodman & Gilmans. The pharmacological
basis of therapeutics. 10th ed. McGraw-Hill
Interamericana Editores; 2002.
7.
Mecanismo
de
accin
de
los
hipercolesterolemiantes.
Rev
Mdico
General. 1997; 2(7): 71-74.
180
Caso 6
GOTA
Preguntas de bioqumica
1. Qu alteraciones metablicas pueden traer
como consecuencia un aumento en los
niveles sricos de cido rico?
2. Son necesarias las purinas y las pirimidinas
en la dieta?
3. Qu alimentos son ricos en purinas y
pirimidinas?
4. Qu valores de laboratorio podran estar
alterados en este paciente?
5. Son importantes los antecedentes familiares
de este paciente?
6. Cul es la base bioqumica para sospechar
que una dieta rica en protenas puede
provocar ataques de gota en pacientes
susceptibles?
7. Cmo se relaciona la ingestin de etanol
con el incremento de la concentracin
plasmtica de cido rico?
181