Informe de Laboratorio

Extraccin del ADN

Curso: Biologa
Alumno: Joaqun Gago-Dorca
Profesora: Miss. Anita Gabilondo
Institucin: Casuarinas
International

Introduccin

La extraccin de ADN requiere hacer varias

series de etapas bsicas. En primer lugar
tienen que romperse la pared celular y la
membrana plasmtica para poder acceder al
ncleo de la clula. Despus debe romperse
igual la membrana nuclear para dejar libre el
ADN. Por ltimo hay que proteger el ADN de
enzimas que puedan disminuirlo y para
aislarlo hay que hacer que se precipite en
alcohol. El ADN es soluble en agua, pero
cuando se encuentra en alcohol se desenrolla
y precipita en la interface entre el alcohol y el
agua. Adems de permitirnos ver el ADN, el
alcohol separa el ADN de otros componentes
celulares, los cuales son dejados en la solucin
acuosa. La sal evita la unin de las protenas
al ADN.

Objetivo
En esta practica realizaremos la extraccin del
ADN de clulas animales poniendo de
manifiesto su estructura fibrilar y el
extraordinario grado de arrollamiento, que
permite el empaquetamiento en el ncleo
celular de largusimas cadenas de esta
molcula.

Hiptesis

Pienso que lo que va a pasar es que no vamos

a poder hacerlo sin hacer espuma por lo que
el alcohol no esta tan frio como dice que hay
que hacerlo.

Material necesario

Tejido animal (Hgado de pollo)

Trozo de tela para filtrar
Pipeta
Alcohol 96 grados
Mortero o batidora
Arena
Varilla de vidrio
Solucin de NaCl 2M
Embudo
Probeta
Vaso de precipitados
Detergente tipo lavavajillas

Procedimiento
1.Triturar en frio la muestra de hgado en el
mortero junto con la arena o mediante la
batidora para homogenizar el tejido.
2.Aadir unos 50 ml de agua destilada o, en

su defecto, agua mineral y remover

suavemente pero mezclando a fondo.
3.Filtrar varias veces el resultado a travs de
un pedazo de tela.
4.Aadir al filtrado resultante un volumen
igual de solucin de NaCl 2M.
5.Aadir 1 ml de detergente y remover
suavemente sin hacer espuma.
6.Con
los
pasos
anteriores
hemos
conseguido tener el ADN libre en la
disolucin acuosa.
7.Ahora se aaden unos 50 ml de alcohol
muy frio.
8.El ADN ira apareciendo poco a poco en la
interface agua-alcohol en forma de
grumos blancos.
9.Se puede ahora tomar una muestra de
ADN recogido.

Resultados

El producto filamentoso obtenido de la

extraccin no es ADN puro ya que,
entremezclado con l, hay fragmentos de
ARN. Una extraccin "profesional" se realiza
aadiendo enzimas que fragmentan las
molculas de ARN e impiden que se unan al
ADN.
Para realizar una extraccin pura ocurrir que
el detergente contiene lauril sulfato de sodio,
el cual limpia los trastes removiendo grasas y
protenas. ste acta de la misma manera en
el protocolo de extraccin de ADN, separando
las grasas (lpidos) y las protenas que
constituyen las membranas que rodean la
clula y el ncleo. Una vez que estas
membranas se han roto, el ADN es liberado de
la clula.

Conclusin

 Al
realizar
el
procedimiento
adecuadamente, resulta que las fibrillas
de ADN comenzaron a salir, de un color
blanco precipitado por sobre el alcohol.
Con un alambre doblas y obtenemos y
sacamos del tubo de ensayo el ADN. Si
quieres conservar el ADN puede dejarse
secar sobre un papel de filtro.
En caso de que el ADN de la Muestra
Vegetal no se pueda apreciar muy
claramente. Tenemos que agitar el tubo un
poco para poderlo apreciarlo mejor.