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UNIVERSIDAD TCNICA DE MANAB

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


ESCUELA DE MEDICINA

Proyecto de Histologa II

Tema:

Gua Prctica Histolgica de Sistema Digestivo I

Autores:

Cevallos Macas Evelyn

Mariano Lpez Mara Beln.

Molineros Santos Julio

Veliz Pin Michael Jonathan.

Vergara Ibarra Irene Monserrate.

Zamora Cevallos Shirley Magdalena.

Docente:
Dra. Silvia Alarcn

Semestre/Paralelo
Segundo Semestre B
Oct/2014 Feb/2015
Portoviejo Manab Ecuador

NDICE GENERAL

1. INTRODUCCIN

II

CAPTULO I

1.1 JUSTIFICACIN
1.2 OBJETIVOS
1.2.1 OBJETIVO GENERAL
1.2.2 OBJETIVOS ESPECFICOS

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CAPITULO II

2. MARCO TERICO
2.1 PROTOCOLO
2.2. TCNICAS HISTOLGICAS PARA EL ESTUDIO DE CLULAS Y TEJIDOS
2.2.1. Biomicroscopa: In Vivo
2.2.1.1 Mtodos no invasivos
2.2.1.2 Mtodos invasivos
2.2.1.3 Animales pequeos transparentes
2.2.2 Estudios Inmediatos de Clulas Vivas fuera del organismo:
2.2.2.1 Clulas descamadas
2.2.2.2 Clulas libres de animales superiores
2.2.2.3 Cortes frescos de rganos y tejidos
2.2.3. In Vitro
2.3. PROCEDIMIENTOS PARA LA PREPARACIN DE LA MUESTRA.
2.3.1. Toma de la muestra.
2.3.2. Fijacin.
2.3.2.1 Agentes fsicos.
2.3.2.2 Agentes qumicos
2.3.3. Deshidratacin
2.3.4. Inclusin.
2.3.5. Corte
2.3.6. Tincin
2.3.6.1 Colorantes cidos.
2.3.6.2 Colorantes bsicos

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3. BIBLIOGRAFA

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3.1 LIBROS
3.2 FUENTES ELECTRNICAS

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NDICE DE PRCTICAS

1. LAMINA DE UN CORPSCULO GUSTATIVO

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2. LAMINA DEL CORTE SAGITAL DE UN DIENTE INCISIVO SITUADO EN EL HUESO MANDIBULAR.

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3. LAMINA DE LABIO (HUMANO), CORTE SAGITAL

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4. LAMINA DE LAS PAPILAS FUNGIFORMES

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5. LAMINA DE PAPILAS FOLIADAS

14

6. LAMINA DE LAS PAPILAS FILIFORMES

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7. LAMINA DE LAS PAPILAS CALICIFORMES

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8. LAMINA DE LENGUA

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9. LAMINA DE GLNDULA SUBMANDIBULAR HUMANA

16

10. LAMINA DE GLNDULA PARTIDA

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11. LAMINA DE GLNDULA SUBLINGUAL (HUMANA)

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12. LAMINA DE PORCIN SUPERIOR DEL ESFAGO (HUMANO), CORTE TRANSVERSAL ENTERO

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13. LAMINA DE UNIN ESFAGO GSTRICA

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14. LAMINA DEL ESTMAGO.

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15. LAMINA DE LA GLNDULA CARDIACA

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16. LAMINA DELA MUCOSA GSTRICA DEL FUNDUS

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17. LAMINA DE LA PORCIN BASAL DE LA GLNDULA GSTRICA EN LA REGIN DEL FUNDUS.

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18. LAMINA DE UN CORTE DE LA REGIN PILRICA DEL ESTMAGO.

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ii

1. Introduccin

El reconocimiento de un tejido no es tarea fcil, pero para facilitar el


reconocimiento del tejido, se deben tomar en cuenta varios aspectos: (1) existencia
de los tejidos bsicos, sus caractersticas fundamentales y los criterios de
clasificacin de cada uno de ellos; (2) celularidad, si existe un solo tipo o varios
tipos celulares; la forma de las clulas y su tamao; las caractersticas nucleares,
nmero y posicin en el citoplasma, la afinidad del citoplasma por los colorantes,
las diferenciaciones celulares de superficie y su relacin con las clulas vecinas; (3)
existencia de matriz intercelular o su falta; la naturaleza y cuanta en relacin con
la celularidad; las particularidades y modificaciones en cuanto a su grado de
hidratacin, la disposicin espacial de sus componentes, o la existencia de
mineralizacin, (4) en cualquier caso no olvidar que se trata de cortes histolgicos
y hay que pensar en la estructura tridimensional y como esta puede mostrar distintos
aspectos segn la seccin, as como la indeseable presencia de artefactos de la
tcnica histolgica.

El propsito de la investigacin es proporcionar imgenes seleccionadas, con


observaciones de tipo general y a pequeos aumentos que permitan un primer
reconocimiento de los tejidos que constituyen el rgano, de esta manera en cada
prctica se adquirirn conocimientos bsicos de cada tema, como: reconocer,
localizar y describir los tipos celulares y los tejidos bsicos.

Finalmente es importante poner atencin a la tcnica de tincin utilizada ya que las


afinidades tintoriales y en el caso de tcnicas especficas en mayor medida,
marcaran, junto con la forma, los parmetros tiles para el reconocimiento.

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CAPTULO I

1.1 Justificacin

En los pensums de estudios mdicos, generalmente la Histologa se encuentra en


los primeros niveles, debido a que aporta los conocimientos bsicos de la estructura
interna y las interrelaciones complejas que existen entre la morfologa y la funcin
de las clulas y los tejidos. De esta manera se persigue que el estudiante al iniciar
sus estudios clnicos pueda entender, con mayor claridad, la importancia que tiene
el conocimiento detallado de los tejidos del organismo humano. En este sentido, la
Histologa constituye el estudio que introduce al futuro mdico, en las distintas
asignaturas que se refieren a los aspectos estructurales, funcionales y patolgicos.

En dcadas anteriores, la Histologa se ocupaba de describir los detalles de la


estructura; en nuestros das, gracias a los grandes avances fundamentalmente con
el invento del microscopio electrnico y la inmunohistoqumica, el problema est
en dilucidar la forma en que los componentes celulares y tisulares cumplen
funciones especficas, la forma que las clulas se comunican e interactan y cmo
el organismo coordina y regula sus innumerables actividades a nivel celular.

La amplitud del conocimiento mdico ha trado como consecuencia que los lmites
de las disciplinas cientficas estn, cada vez menos delimitados, lo cual ha
contribuido a que se promueva y se planifique la integracin del proceso enseanza
aprendizaje en las Ciencias Mdicas. Es as como en la actualidad integracin es
la palabra clave en los intentos de reforma de los programas de las Ciencias
Morfolgicas: Anatoma, Embriologa e Histologa, para lograr la coordinacin de
los programas de estas tres asignaturas en el rgimen de anualidades.

1.2 Objetivos

1.2.1 Objetivo general

Integrar los diversos aspectos de la Histologa con los conocimientos adquiridos en


Anatoma y Embriologa para establecer las bases morfolgicas del cuerpo humano.

1.2.2 Objetivos especficos

Identificar las caractersticas estructurales, ultra estructurales e histolgicas


generales de las clulas y tejidos normales que conforman los diversos
rganos del sistema digestivo.

Diferenciar los diferentes tejidos que forman el sistema digestivo,


relacionndolas con la funcin especfica.

CAPITULO II

2. Marco terico

2.1 Protocolo

A continuacin se enlistan los 10 pasos necesarios a seguir para la realizacin


de las prcticas en el aula- laboratorio en la asignatura de Histologa II:

Paso 1. Preparar el espacio fsico para el uso del microscopio.


Paso 2. Preparar el material de trabajo para la realizacin de la prctica.
Paso 3. Revisar que el microscopio est en condiciones aptas para el trabajo*
Paso 4. Solicitar la preparacin histolgica al responsable de seccin.
Paso 5. En caso de tener que preparar la muestra seguir los pasos correspondientes*
Paso 6. Realizar la prctica indicada.
Paso 7. Observar con atencin cada una de las placas, y realizar el detalle en la gua
prctica
Paso 8. Regresar la preparacin histolgica al responsable de seccin**
Paso 9. En caso de ser el encargado de desechar la prctica, llevar a cabo todas las
normas de bioseguridad posibles

Paso 10. Revisar que el microscopio se deje en condiciones aptas para que pueda
ser utilizado por otros compaeros***
Paso 11. Limpiar el rea donde se realiz la prctica.
Paso 12. Solicitar la revisin de la realizacin de la prctica.
Paso 13. Guardar la prctica en el portafolio de trabajo.

Si el microscopio no est en condiciones aptas para su uso (limpieza y


funcionalidad) se deber reportar inmediatamente a los docentes
responsables de la prctica en el aula o laboratorio.

Los pasos 4, 5, 6, 7, 8, y 9 se realizarn el nmero de veces que sea necesario


hasta cumplir los objetivos de la prctica y con la observacin del total de
preparaciones histolgicas asignadas en cada una de ellas.

Si el microscopio no se deja en condiciones aptas para su uso posterior, se


deber reportar inmediatamente a los profesores responsables de la prctica
en el aula o laboratorio.

2.2. Tcnicas histolgicas para el estudio de clulas y tejidos

Para que las muestras de los diferentes tejidos puedan ser observadas al
microscopio, son necesarios una serie de pasos que se inicia con la toma de la
muestra, que consiste en la extraccin de un fragmento de tejido u rgano desde
un ser humano o un animal, el cual puede estar vivo (biopsia) o muerto
(necropsia).

Para que el tejido se conserve lo ms parecido posible al que tiene en su estado


original, se lo coloca, en forma inmediata, en un lquido denominado fijador, cuya
finalidad principal es la de preservar el tejido evitando que se inicie su
autodestruccin o autolisis.

Posteriormente las muestras son deshidratadas en alcohol e incluidas en parafina


derretida, que al enfriarse forma un bloque slido, lo cual permite cortar el
material en fetas muy delgadas con un instrumento denominado micrtomo. Una
vez cortadas, se elimina la parafina de las muestras disolvindola con alcohol, de
esa manera queda lista para su coloracin. Las muestras son introducidas en un
recipiente con el colorante adecuado y despus de uno minutos se retira el exceso
de colorante y se las cubre con un vidrio delgado o cubreobjetos para que puedan
observarse al microscopio.

Entre las tecnologas aplicadas para el estudio biolgico, tenemos las siguientes:

2.2.1. Biomicroscopa: In Vivo

Estudios Inmediatos en Organismos Vivos completos:

2.2.1.1 Mtodos no invasivos

Imagenologa:

tomografa

computarizada,

resonancia

magntica,

RX,

transiluminacin con luz incidente, transvein. Con o sin medio de contraste.

2.2.1.2 Mtodos invasivos

Endoscopia con luz incidente con o sin colorantes inocuos (gastroscopia,


colonoscopia)
Membranas y cmaras transparentes (mesenterio de rana, oreja de roedores).

Con o sin colorantes intravitales

2.2.1.3 Animales pequeos transparentes

Protozoos, rotferos, crustceos, larvas

2.2.2 Estudios Inmediatos de Clulas Vivas fuera del organismo:

2.2.2.1 Clulas descamadas

Epitelios de revestimiento (boca, urinario, genital)


Muestra por aposicin, hisopados, raspados. Con o sin coloracin supravital

2.2.2.2 Clulas libres de animales superiores

vulos, espermatozoides, clulas sanguneas


Muestra por puncin, aspiracin, recoleccin. Con o sin coloracin supravital

2.2.2.3 Cortes frescos de rganos y tejidos

Hgado, cartlago, mesenterio de batracios


Diseccin, escisin. Con o sin coloracin supravital

2.2.3. In Vitro

Cultivo de clulas (lneas celulares), tejidos, fertilizacin.

Coloracin vital: Intravital y Supravital. Definicin y ejemplos de colorantes


vitales bsicos: rojo neutro, verde Jano, azul de metileno, azul de Nilo, azul
Tripan.

2.3. Procedimientos para la preparacin de la muestra.

La muestra biolgica no puede ser procesada directamente tal y como se obtiene del
espcimen para ser observada al microscopio ptico. La muestra debe ser procesada
de forma tal que mantenga condiciones lo ms cercanas posible a las naturales y
luego coloreadas para facilitar su observacin.

2.3.1. Toma de la muestra.

Una condicin bsica en el estudio de muestras biolgicas es la preservacin de sta


durante todo el proceso. Es por ello que la obtencin de la muestra debe ser lo ms

rpida posible a fin de evitar los inevitables procesos de degradacin subsiguientes


a la muerte del animal.

Una vez que el espcimen ha muerto, en el caso de un animal, o ha sido extrada


solo una porcin de tejido u rgano, en el caso de una biopsia, comienzan a
producirse procesos de autolisis y putrefaccin que conducen a la destruccin de
estructuras tisulares que impediran o complicaran en demasa el estudio de la
muestra. La autolisis sobreviene por la liberacin de las enzimas lisosomales y su
accin sobre los componentes celulares, dicha autolisis comienza prcticamente en
el momento de la muerte del animal. La putrefaccin es un proceso ms tardo y se
produce por la accin de bacterias que van a utilizar los tejidos muertos como
alimento. Para evitar estos dos procesos, la recoleccin de la muestra y la fijacin
deben producirse lo antes posible.

2.3.2. Fijacin.

La fijacin consiste en el tratamiento de la muestra con agentes que retardan


o evitan la aparicin de alteraciones en sta tras la muerte del organismo. Este
procedimiento trata, por tanto, de evitar los procesos de autolisis y de
putrefaccin.

Los agentes fijadores pueden ser tanto fsicos como qumicos. La congelacin y
el calor son mtodos fsicos. Mientras que entre los qumicos encontramos una
gran variedad de productos que actan desnaturalizando o precipitando las

protenas del tejido con lo que se evita la autolisis y en algunos casos la


putrefaccin por su efecto antibacteriano. No obstante, no existe un mtodo
universal de fijacin y no todos los fijadores conservan el tejido indefinidamente.

2.3.2.1 Agentes fsicos.

La congelacin es la base de la fijacin mediante agentes fsicos. Es ideal


para aquellos procedimientos que necesiten de la conservacin intacta de
la estructura antignica y del contenido enzimtico (histoqumica e
inmunohistoqumica).

2.3.2.2 Agentes qumicos

Existen numerosos agentes qumicos (formol, acetona, entro otros).


El fijador qumico ms utilizado es el formol al 10 % para las muestras que van
ser observadas con el microscopio ptico, y el glutaraldehido para las muestras
que van a ser observadas con el microscopio electrnico

En general cada uno tiene ventajas y desventajas, por ello para potenciar las
ventajas de cada uno se prefiere utilizar mezclas de fijadores que generalmente
tienen nombre propio (ej. Fijador de Bouin, que mezcla acido pcrico, acido
actico y formol)

2.3.3. Deshidratacin

Despus de varias horas de fijacin, las muestras de tejidos son sumergidas en


alcohol para eliminar el agua de los tejidos y facilitar la penetracin del medio
de inclusin.

2.3.4. Inclusin.

Las muestras deben ser procesadas hasta obtener lminas delgadas de unas pocas
micras de espesor. Estas lminas no pueden ser cortadas sin un endurecimiento
previo de la muestra para que adquiera la consistencia adecuada.

Una vez deshidratado se introduce el tejido en parafina derretida que luego


se deja enfriar para que forme un bloque slido, el cual puede ser cortado
en finas rodajas.

2.3.5. Corte

Una vez obtenido el bloque se procede al corte de la muestra


Los cortes para el MO se realizan en el micrtomo. El micrtomo es unbaparato
que permite la obtencin de secciones tisulares de un espesor micromtrico por lo
que son lo suficientemente delgadas para su posterior observacin.. La
microscopa ptica utiliza espesores de entre 5 y 10 micras.

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2.3.6. Tincin

Ahora tenemos las secciones finas de 5 a 10 micras, pero antes de colorearlas


se les retira la parafina sumergindolas nuevamente en alcohol (que disuelve la
parafina) y se rehidrata sumergiendo las muestras en agua. Para colorear el tejido
se suelen utilizar uno, dos o ms colorantes. Para un estudio general de los
tejidos es esencial diferenciar entre colorantes bsicos, cidos.

2.3.6.1 Colorantes cidos.

Son sustancias cidas como la eosina que tie estructuras bsicas contenidas
generalmente en el citoplasma de la clula. Los componentes de la clula que se
tien con los colorantes cidos se denominan acidfilos. Son ejemplos de
componentes acidfilos, las estructuras membranosas del citoplasma como el REL
o las mitocondrias.

2.3.6.2 Colorantes bsicos

Son bases como la hematoxilina que es un colorante que tie

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FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
GUA PRCTICA DE HISTOLOGA II

SISTEMA DIGESTIVO I
OBJETIVOS:

Identificar los diferentes tipos de papilas.


Conocer las caractersticas morfolgicas de las glndulas salivales.
Diferenciar los diferentes tipos de epitelio que se encuentran en la
cavidad oral.

1. Lamina de un corpsculo gustativo


Se muestran las clulas gustativas y el poro gustativo. El esquema tambin ilustra diversos
tipos de clulas (clulas basales, gustativas y de sostn) y fibras nerviosas aferentes que,
despus del estmulo, transmitirn la informacin sensorial a las neuronas centrales
asociadas con el sentido del gusto

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Elementos:

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GUA PRCTICA DE HISTOLOGA II

2. Lamina del corte sagital de un diente incisivo situado en el hueso


mandibular.

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Elementos:

3. Lamina de labio (humano), corte sagital


Entre las caractersticas del labio figura el cambio de su epitelio de revestimiento. El
epitelio cutneo tpico (epidermis) con estructuras anexas como los pelos, las glndulas
sudorparas y las glndulas sebceas cambia en la regin del borde libre (borde bermelln)
y se convierte con un epitelio estratificado plano no queratinizado sin glndulas. Hacia la
cavidad bucal se contina con un epitelio estratificado plano no queratinizado debajo del
cual hay aglomeraciones glandulares (glndulas labiales). La mayor parte del soporte
hstico central del labio est formada por las fibras musculares esquelticas del msculo
orbicular de la boca.

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Elementos:

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4. Lamina de las papilas fungiformes


Lgrese distinguir las papilas fungiformes y su ubicacin.

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Elementos:

5. Lamina de papilas foliadas


Lgrese distinguir las papilas foliadas y su ubicacin.

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6. Lamina de las papilas filiformes


Lgrese distinguir las papilas foliadas y su ubicacin.

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Elementos:

7. Lamina de las papilas caliciformes


Llgrese distinguir las papilas caliciformes y su ubicacin.

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Elementos:

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8. Lamina de lengua
Lgrese ver en la lengua un epitelio escamoso estratificado junto a su musculo geniogloso,
glndulas salivales menores y su mucosa escamosa.

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Elementos:

9. Lamina de glndula submandibular humana


Obsrvense sus cino mixto y las diferencias entre los grnulos de secrecin de las clulas
serosas (parte inferior) y de las clulas mucosas (parte superior)

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Elementos:

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10. Lamina de glndula partida


Su porcin secretora consta de clulas serosas productoras de amilasa que almacenan esta
enzima, entre otras protenas, en los grnulos de secrecin. Tambin estn presentes
conductos intralobulares.

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Elementos:

11. Lamina de glndula sublingual (humana)


Los adenmeros tubulares mucosos plidos predominan mucho sobre los cinos serosos y
las semilunas serosas. Asimismo, los conductos estriados son relativamente infrecuentes.

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Elementos:

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12. Lamina de porcin superior del esfago (humano), corte transversal


entero
La tpica organizacin en capas de la pared en principio aparece en la misma forma en
todos los segmentos del tubo digestivo: mucosa (con epitelio, lmina propia y muscular de
la mucosa), submucosa y muscular externa (con una capa circular interna y otra
longitudinal externa). Justo por fuera de la muscular externa del esfago se encuentra una
adventicia de tejido conjuntivo que une el rgano con su entorno en el mediastino. Las
glndulas esofgicas son relativamente infrecuentes y no aparecen en todos los cortes

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Elementos:

13. Lamina de unin esfago gstrica


Obsrvese las diferencias que existe entre el esfago y el estomago

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Elementos:

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14. Lamina del estmago.


Logre distinguir sus diferentes tnicas

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Elementos:

15. Lamina de la glndula cardiaca


Logre distinguir la glndula cardiaca

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Elementos:

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16. Lamina dela mucosa gstrica del fundus


Se puede observar en la mucosa gstrica del fundus las criptas gstricas acotadas, junto a
sus glndulas fndicas, clulas parietales, clulas principales y las clulas mucosas cubicas.

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Elementos:

17. Lamina de la porcin basal de la glndula gstrica en la regin del


fundus.

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Elementos:

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18. Lamina de un corte de la regin pilrica del estmago.


Obsrvense las fositas gstricas profundas con glndulas pilricas cortas.

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Elementos:

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3. Bibliografa

3.1 Libros

Ross, M., Paulina W. Histologa. Texto y Atlas Color con Biologa Celular
y Molecular. 7 ed. Buenos Aires: Editorial Mdica Panamericana.

Histologa Sobotta, Welsch, Editorial Panamericana, 2 edicin, 2009

Histologa Bsica, Junqueira, Carneiro. Editorial Masson, 6 edicin, ao


2006.

Texto Atlas de Histologa. Gartner y Hiatt,Ed. Mc Graw Hill, 2a edicin,


2002.

3.2 Fuentes electrnicas

Centro de Histologa, Universidad de los Andes-Venezuela, recuperado de:


http://www.medic.ula.ve/histologia/docencia/programateorico2.htm#bibli

Universidad

del

Cuyo,

Argentina.

Recuperado

de

http://www.fodonto.uncu.edu.ar/upload/guiaTP2009.pdf

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