REACCIONES COLORIMTRICAS DE

LAS PROTENAS
OBJETIVO:
Reconocer las protenas mediante sus propiedades e identificar el tipo de
aminocidos presentes en una protena.
INTRODUCIN:
Para cada enzima existe un ptimo del pH a que crean las condiciones ms
favorables para el mantenimiento de la conformacin funcionalmente activa de la
molcula. Los grupos amino y carboxilo de los restos de aminocidos ionizados a
una magnitud de pH determinada, participan en el mantenimiento de la
conformacin de la molcula protenica necesaria para la formacin de los centros
catalticos de enzima y favorecen tambin a su ligacin con el sustrato. A una
magnitud de pH distinta se altera la ionizacin de los grupos correspondientes, y
como resultado se rompen los enlaces que aseguran la formacin de los centro
catalticos, y la enzima se inactiva. A los valores de pH muy altos o muy bajos las
enzimas se desnaturalizan.
MATERIAL DE VIDRIO:
o 2 Baln de aforo de 50ml
o 2 Baln de aforo de 25ml
o 2 Pipeta de 5ml
o 3 tubos de ensayos
o Vaso de precipitacin de 250 y 500 ml
EQUIPOS DE LABORATORIO:
o
o
o
o
o
o
o

1 pinza de madera
2 Gradilla
1 Gotero
1 Bao maria
1 Termmetro
1 Pizeta
1 Pera

SUSTANCIAS:
o Muestras: leche, clara de huevo, jugo de espinacas, o vegetales (de
preferencia usar muestras lquidas)
o Hielo

o
o
o
o

HNO3 concentrado
NaOH al 40% y 20 %
Sulfato cprico 1%
Acetato de plomo al 5%

PROCEDIMIENTO:
Esta prctica consta de 3 partes:
a)
Reaccin Xantoproteca (Para identificar aminocidos con que tienen
un ncleo bencnico)
1.
2.
3.
4.
5.
6.

b)

Colocar en un tubo de ensayo 3ml de muestra

Aadir 1ml de HNO3 concentrado
Calentar a bao mara
Enfriar con agua fra
Aadir gota a gota NaOH al 40%
Observar los resultados, un colorar anaranjado oscuro nos indica un
positivo.
Reaccin de Biuret (Para identificar uniones peptdicas)

1.
2.
3.
4.

c)

Colocar en un tubo de ensayo 3ml de muestra

Aadir 2ml de NaOH al 20%
Aadir 4-5 gotas de sulfato cprico 1%
Observar los resultados, un colorar violeta roscea nos indica un
positivo.
Reaccin de aminocidos azufrados

1.
2.
3.
4.
5.

Colocar en un tubo de ensayo 2-3ml de muestra

Aadir 2ml de NaOH al 20%
Aadir 10 gotas de acetato de plomo al 5%
Calentar el tubo hasta ebullicin
Observar los resultados precipitado negro nos indica un positivo

RESULTADOS DE LAS PRUEBAS EFECTUADAS:

Segn estos resultados que muestras tienen un ncleo bencnico presente,
uniones peptdicas y azufre, justifique y discuta.
CUESTIONARIO:
1. Qu son los aminocidos?
2. Dibuje la estructura bsica de un aminocido?

3.
4.
5.
6.

Dibuje el enlace peptdico entre dos aminocidos?

Qu son las proteinas?
Cmo influyen los aminocidos en la dieta?
Ponga el fundamento y un ejemplo de las reacciones de Xantoproteca,
de Biuret y de aminocidos azufrados?
7. Dibuje los aminocidos que tienen anillos aromticos y azufre.
8. Qu tipos de patologas se asocian con una disminucin de
aminocidos y proteinas en la dieta?
BIBLIOGRAFA
BIOQUIMICA.
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HISPANOAMERICANA, S.A. 1993.

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