UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR

FACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA

FUNCIN ENDCRINA DE LOS TESTCULOS DEL CONEJO

INTEGRANTES:

SARA BENAVIDES
XAVIER BONIFAZ
JESSICA BRIONES
XINEMA CONDO
GABRIELA CEVALLOS
JAVIER CORAL
MAURICIO CHICAIZA
JESSICA CHILLIG

Quito, 17 de Febrero de 2014

INDICE

INTRODUCCIN....................................................................................................... 4
CAPTULO I.............................................................................................................. 5
OBJETIVOS............................................................................................................... 5
GENERAL:............................................................................................................. 5
ESPECFICOS:....................................................................................................... 5
PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA........................................................................6
JUSTIFICACIN..................................................................................................... 6
CAPTULO II............................................................................................................. 7
2. MARCO TERICO.............................................................................................. 7
................................................................................................................................ 9
CAPTULO III.......................................................................................................... 10
DISEO DE LA INVESTIGACIN..........................................................................10
CAPTULO IV.......................................................................................................... 11
PROCEDIMIENTO................................................................................................ 11
CAPTULO V........................................................................................................... 13
RESULTADOS...................................................................................................... 13
DISCUSIN......................................................................................................... 13
CAPTULO VI.......................................................................................................... 14
CONCLUSIONES.................................................................................................. 14
RECOMENDACIONES.......................................................................................... 14
BIBLIOGRAFA........................................................................................................ 15
ANEXOS................................................................................................................. 16

INTRODUCCIN

Los andrgenos son hormonas esteroides que se sintetizan a partir del colesterol. El
principal andrgeno producido es la testosterona aunque tambin se producen
androsterona y epiandrosterona. Estos tienen mayor influencia en el macho que en la
hembra. (1 pg. 89)
En los machos se sintetizan en las clulas de Leydig del tejido intersticial testicular, por
influencia de la LH, y adems en la corteza suprarrenal. (1 pg. 89)
Es tambin conocido que la testosterona no acta de igual modo en funcin de la edad y
de un rea corporal precisa y puede hacerlo directamente, tras su conversin en DHT
(dihidrotestosterona) por la accin de la 5 reductasa o por aromatizacin estrognica.
(2)
La testosterona mantiene la espermatognesis en la mayor parte de los vertebrados,
promueve el funcionamiento de las glndulas reproductoras masculinas (las vesculas
seminales, la prstata, las glndulas bulbouretrales, en los mamferos), tambin estimula
el desarrollo de los caracteres sexuales secundarios y de muchas estructuras accesorias
en el macho. (3 pg. 270)
De esta forma, el presente trabajo tiene como objetivo la investigacin de la funcin
endcrina testicular, mediante la prctica de una castracin a un conejo, con el fin de
poder medir sus niveles de testosterona una vez extirpado las gnadas y compararlo a
otros dos que debern ser entero y castrado (con la suplementacin de la hormona al
segundo). Para tal fin se buscar extirpar los testculos a conejos en la edad de seis meses
(antes de su madurez sexual) por el procedimiento de escisin simple.
Es necesario que durante la intervencin quirrgica no se ejerza traccin sobre el cordn
testicular, esto debido a que en los conejos, el anillo inguinal, es normalmente muy
dilatado, dando fcil paso al intestino y de su salida, resultan gravsimos accidentes. (4
pg. 204)

CAPTULO I

OBJETIVOS

GENERAL:
Verificar el funcionamiento endocrino que cumplen los rganos sexuales, tomando
como animal experimental a 3 conejos mayores de 6 meses, sometindolos a
procesos diferentes y comprobar el descenso de hormonas sexuales y su efecto en
el comportamiento.
ESPECFICOS:
Observar los cambios fisiolgicos y etolgicos que ocurren en el animal despus de
la castracin.
Comparar los cambios producidos por la ausencia de hormona testosterona del
animal experimental, con los de un animal testigo y otro castrado con suplementos
de hormona exgena (enantato de testosterona 25%).

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Los cambios hormonales conllevan a una involucin de los conductos genitales y
glndulas accesorias genitales dando como resultado la ausencia de la espermatognesis.
Se bloquea la finalidad reproductiva a travs de la castracin del conejo.
JUSTIFICACIN
Se considera cuatro acciones fisiolgicas

de los andrgenos sobre los rganos

reproductores: los esteroides sexuales masculinos tienen actividad andrognica, es decir,

estimulan el crecimiento y funcin de los rganos genitales accesorios, incluyendo el
pene, el escroto, la prstata y las glndulas vesicales, son responsables de caracteres
sexuales secundarios, de importancia en la atraccin sexual, facilita el libido y aumentan
la potencia sexual en el macho, para la normal funcin espermatogenica es necesaria la
intervencin de la LH/FSH y sobre todo de la testosterona.
La finalidad es comprobar los cambios fisiolgicos en la ausencia de hormonas masculinas
como la testosterona, vemos la importancia de las hormonas gonadotroficas que influyen
sobre las clulas de los tbulos seminferos y sobre otras hormonas. As, la LH induce a las
clulas de Leydig a producir testosterona. Esta LH solo tiene afinidad por estas clulas. La
FSH se fija solamente a las clulas de Sertoli y las induce a producir ABP que se une a la
testosterona y la introduce dentro de los tbulos seminferos. La hormona prolactina acta
de modo sinrgico con la LH para estimular la secrecin de testosterona

por los

testculos. El comportamiento sexual debe presentar una disminucin paulatina a partir

del momento de la castracin, haciendo la comparacin con un conejo entero.

CAPTULO II
2. MARCO TERICO
Los testculos son dos glndulas de forma ovoide, situadas en la regin inguinal y
encerradas en una estructura denominada escroto (5 pg. 561). Constan de dos unidades
funcionales. La primera es una red de tbulos seminferos formados por clulas
germinales

primitivas

denominadas

de

Sertoli,

lugar

donde

se

produce

la

espermatognesis; y la segunda la conforman clulas intersticiales o tambin llamadas de

Leydig cuya funcin principal es la biosntesis de andrgenos (6 pg. 341) aunque no es el
nico lugar de produccin de los mismos ya que tambin son sintetizados en menor
cantidad, en la corteza suprarrenal, la placenta y los ovarios (7 pg. 400).
Los gametos producidos en los testculos y especficamente en los tbulos seminferos
pasan por diferentes conductos como los tbulos rectos, red testicular y conductos
eferentes antes de llegar al epiddimo y madurar (8 pg. 481). Los espermatozoides son
almacenados en la cola del epiddimo para luego ser expulsados a travs de los conductos
deferentes hacia la uretra pelviana (9 pg. 511) y mezclados con las secreciones de las
glndulas accesorias para formar el semen, el cual es expulsado en forma abrupta
durante el proceso de eyaculacin (8 pg. 481).
El tamao de los testculos depende en gran parte de la especie, la edad y la raza,
adems son de gran importancia econmica en las especies domsticas debido a que su
tamao est directamente relacionado con la cantidad de espermatozoides y la fertilidad
(8 pg. 482).
Los andrgenos son hormonas esteroideas que sirven para la diferenciacin y desarrollo
de los rganos reproductores del macho (6 pg. 343), actan tambin sobre el desarrollo
de los caracteres sexuales primarios y secundarios en la etapa adulta (10 pg. 981). Por
ejemplo en la mayora de los embriones de mamferos, el desarrollo y diferenciacin
gonadal se define de acuerdo a los cromosomas XX o XY (9 pg. 515). Si el resultado de la
combinacin cromosomal es XY, se tiene como resultado el desarrollo de un macho, y ms
especficamente si en el cromosoma Y existe un gen denominado SRY (regin
determinante del sexo) (9 pg. 515). El SRY codifica la protena factor determinante
testicular e interacta con el DNA de las clulas gonadales para el desarrollo de las
clulas de Leydig y Sertoli, estas ltimas degeneran los conductos de Muller a travs del
factor inhibidor Mulleriano y las clulas de Leydig secretan testosterona para la formacin
del epiddimo, los conductos deferentes y las vesculas seminales (9 pg. 515). En
humanos la produccin de testosterona fetal es estimulada por la gonadotropina corinica
hasta el momento del nacimiento, durante la niez (10 a 13 aos de edad) la produccin
de testosterona es casi nula. En la pubertad y la mayor parte del resto de la vida la

secrecin de testosterona aumenta con rapidez bajo el estmulo de la gonadotropina

hipofisiaria, sin embargo, en hombres ms halla de los 50 aos de edad esta produccin
desciende hasta llegar a un 20% del valor mximo a los 80 aos (10 pg. 980).
Los principales andrgenos testiculares son la testosterona y la dihidrotestosterona que es
el mediador de la accin de la testosterona a nivel de los tejidos efectores (6 pg. 347),
las dos se sintetizan en las clulas de Leydig (6 pg. 343). Los andrgenos tienen cuatro
funciones principales en el macho siendo as: a) estimulan el crecimiento y funcin de los
rganos genitales externos y accesorios, b) son responsables de los caracteres sexuales
secundarios, de importancia en la atraccin sexual, c) facilitan el libido y aumentan la
potencia sexual y d) requieren de ayuda de otras hormonas para su normal desarrollo,
estas son la LH y FSH (11 pg. 838) reguladas por la inhibina (secretada por las clulas de
Sertoly) que es liberada por los mecanismos responsables de la secrecin de testosterona
en los testculos (11 pg. 352).
En la red testicular, la LH se une a la membrana receptora de las clulas de Leydig y las
estimula para convertir colesterol en testosterona (9 pg. 513) (12 pg. 456). Los
andrgenos sintetizados se difunden en la sangre y en la linfa provocando un efecto de
retroalimentacin negativa sobre la hipfisis anterior y el hipotlamo (9 pg. 513). Las
ABP o protenas de unin a andrgenos producidas por las clulas de Sertoli facilitan la
acumulacin de altas concentraciones de testosterona e dihidrotestosterona en los
tbulos seminferos y en el intersticio de los testculos de manera que permite que ocurra
la espermatognesis (12 pg. 456). Las ABP facilitan tambin el transporte de andrgenos
desde los testculos al epiddimo de manera que ayudan a la posterior maduracin de
espermatozoides.
Por otro lado la FSH y la testosterona actan sobre las clulas de Sertoli para inducir la
secrecin de sustancias parcrinas que promueven la liberacin de espermatogonios y la
diferenciacin en espermatozoides. Las clulas de Sertoly secretan tambin nutrientes
para los espermatozoides en crecimiento e inhibina que suprime la secrecin de FSH (9
pg. 513).
La biosntesis de la testosterona ocurre en la mitocondria de las clulas intersticiales y es
derivada del colesterol libre en el citoplasma (6 pg. 343). La testosterona se produce a
partir del colesterol en las clulas de Leydig, bajo la influencia de la LH. Las enzimas
mitocondriales escinden la cadena lateral del colesterol en dichas clulas para formar
pregnenolona. Otras enzimas contribuyen al desarrollo de una serie de pasos biocinticas
para

transformar

la

pregnenolona

en

la

definitiva

testosterona:

pregnenolona,

progesterona, dihidroepiandrostediona, androstediol y, finalmente, testosterona (13).

La pregnenolona una vez fuera de las mitocondrias puede tomar dos caminos en los
ribosomas del RE: a) pasa de 17--hidroxipregnenolona que es un precursor de la

dihidroepiandrosterona, y b) la pregnenolona
con

intervencin

progesterona

enzimtica
este

pasa

pasa

17--

hidroxipregnenolona, ambos caminos dan un

andrgeno menos potente que la testosterona
que se sintetiza en la pubertad (11 pg. 837).
Pero una vez que se segrega la testosterona en
un animal adulto, debe metabolizarse a otros
esteroides

para

ser

excretado

por

medio

heptico, heces y orina.

El

testculo

del

aproximadamente,
testosterona

al

hombre
de
da.

5
La

adulto
a

produce,
mg

de

secrecin

de

testosterona se ajusta a un ritmo circadiano,

con mnimos a ltimas horas de la tarde y
mximos al final de la noche y primeras horas
de la maana (14). La vida media de la
testosterona en humanos es de 10-100 minutos (15 pg. 681).
Figura 2. Biosntesis de la Testosterona
(13)

Finalmente la cantidad de luz diurna tambin

tiene un fuerte efecto en el funcionamiento testicular y en la temporada reproductiva

debidos a los efectos sobre la hipfisis, de esto los animales domsticos se han dividido
en tres grupos: a) aquellos en los que la glndula hipfisis es activada por perodos cortos
de luz diurna (ovejas y cabras), b) aquellos en los que la hipfisis es activada por periodos
largos o cada vez ms largos de luz (equinos), y c) aquellos para los cuales es difcil
establecer un modelo de sensibilidad a los fotoperiodos (bovinos y cerdos) (7 pg. 403.).

CAPTULO III
DISEO DE LA INVESTIGACIN
Metodologa
Para este estudio se utilizaron 3 conejos que provinieron del mercado San Roque de la
ciudad de Quito, los tres de aproximadamente 6 meses de edad y de un peso cercano a
las 6 libras cada uno. Se los someti a un perodo de adaptacin de una semana tiempo
en el cual se los desparasit tanto de endo como ectoparsitos, se los alimento con
balanceado y agua a voluntad, provocando el menor estrs posible.
Administracin y dosificacin de testosterona exgena
Una vez pas el tiempo de adaptacin, se procedi a la prctica de castracin de dos de
los tres conejos objetos de este estudio. Una semana despus se administr enantato de
testosterona al 25% a uno de ellos a razn de 0,11ml cada tres das por dos semanas
10mg/kg (15 pg. 682) va I.M.
La administracin del frmaco se realiz una semana despus de la castracin debido a
que se esper que las heridas producidas por la operacin sanen y los niveles de
testosterona se reduzcan. Adems se deba esperar a que los animales se adapten a su
nuevo entorno para evitar estrs.
La razn para que se administrara testosterona cada tres das se debe a que la vida
media de la hormona es muy corta.
Muestras
Se tomaron en total tres muestras de sangre en tubo de tapa roja para extraer el suero
sanguneo, para esto se us una centrifugadora que se oper a 3000 revoluciones por
minuto durante 10 minutos y luego el suero fue enviado a laboratorio para la
determinacin de los niveles de testosterona. La sangre obtenida fue de yugular y de
corazn.

CAPTULO IV
PROCEDIMIENTO
Tabla1. Materiales y equipos
Materiales
Conejo macho #2
Cofias
Mascarillas
Guantes quirrgicos
Jeringas hipodrmicas de 5ml #5
Ketamina 5%
Xilacina 2%
Gasas hipodrmicas
Tintura de yodo al 2%

Equipos
Equipo de diseccin
Bistur y hoja de bistur
Pinzas hemostticas # 2
Pinzas anatmicas # 2
Tijera recta
Tijera en punta roma
Mesa de ciruga

Descripcin: Materiales y equipos usados para la prctica

Fuente: El Autor

Procedimiento
1. Procedimiento pre-operatorio:
Antes de realizar cualquier procedimiento es necesario realizar exmenes sobre las
constantes fisiolgicas del animal tales como valoracin de la temperatura corporal,
frecuencia cardiaca y frecuencia respiratoria; para evitar riesgos al administrar los
anestsicos.
2. Consideraciones previas al procedimiento
2.1 Aclimatacin:
Asegurarse de que el animal ha realizado correctamente su aclimatacin (mnimo
una semana). Si el animal va a permanecer aislado tras la ciruga, se recomienda
alojarlo individualmente 5-7 das antes de la ciruga para evitar estrs (16)
2.2 Planificacin de la ciruga (16):
Comprobar que se cumplen las siguientes condiciones:
a. Tener el animal para el experimento en ayuno.
b. Tener un quirfano reservado.
c. Poder administrar el protocolo analgsico completo.
d. Disponer de todo el material necesario como los anestsicos, agujas, gasas,
guantes, el equipo de diseccin, etc.
e. Esterilizar todo el material necesario para realizar una ciruga (material
quirrgico, paos, gasas, etc).
3. Sujecin

 Sujetarlo de forma tal que las patas traseras estn lejos del cuerpo del operario, de
esta forma agarrar al animal por la piel sobre los hombros con la cabeza en
direccin al operario ya que es el mejor mtodo de sujecin para un conejo (17).
Colocarlo en una superficie plana.
4. Administracin de anestsico:
4.1 Para procedimientos cortos (30 - 45minutos):
Xilacina 2%: 3mg/kg una vez va SC o IM (15 pg. 439)
Ketamina 5%: 10mg/kg IV, en combinacin con xilacina 3mg/kg (15 pg.
439)
5. Procedimiento quirrgico mediante la tcnica abierta clsica o de escisin
simple (18):
Procedimiento preoperatorio: antes de realizar cualquier procedimiento es
necesario realizar exmenes sobre las constantes fisiolgicas del animal en este
caso del conejo como: valoracin de la temperatura corporal, frecuencia cardiaca y
frecuencia respiratoria; para evitar riesgos al administrar los anestsicos.
Una vez constatado que todo est en orden, se prepara el rea en donde se va a
realizar la operacin se procede con el rasurado del rea, el lavado de la misma y
la desinfeccin del rea.
Realizar una incisin en la lnea media sobre la piel escrotal mientras se empuja
suavemente el testculo hacia el exterior
Incidir el tejido subcutneo y fascia espermtica para exponer la tnica vaginal

parietal.
Exteriorizar el

ligamento escrotal.
Exteriorizar el cordn espermtico.
Ligar el cordn espermtico con el vicryl para ocasionar hemostasis.
Seccionar el cordn espermtico distalmente a la ligadura.
Realizar una sutura en el rea de incisin con el vicryl.

testculo y con unas tijeras incidir la fascia espermtica y el

6. Cuidados postoperatorios (16):

Administrar al animal analgsicos y antibiticos
Prevenir la hipotermia.
Observar al animal en la misma sala de ciruga hasta que recupere la
consciencia. Si es necesario trasladarlo antes de que se haya recuperado,
cumplir con los siguientes requisitos:
Alojar al animal individualmente.
Monitorear al animal frecuentemente hasta que recupere la consciencia.

En general, y aunque el animal ya se haya recuperado totalmente, el hecho de

estar alojado con otros individuos puede suponer un riesgo para la cicatrizacin de
la herida quirrgica, por ello, alojar al animal individualmente.
Durante el periodo post-anestsico inmediato, se debe retirar la comida y la bebida
de la jaula. Reponer estos componentes cuando el animal est completamente
despierto y ande por la jaula.
7. Extraccin de sangre mediante puncin venosa

Anestesiar al animal
Rasurar el rea yugular y proceder a realizar asepsia del lugar.
Localizar la yugular para realizar una puncin.
Extraer la sangre suavemente para evitar hemlisis.
Colocar la sangre en un tubo de ensayo de tapa roja
Etiquetar y enviar a laboratorio.

CAPTULO V
RESULTADOS
Tabla1. Niveles sricos de testosterona en conejo machos.
Conejo

Niveles sricos

Niveles sricos

obtenidos (ng/ml)
normales (ng/ml)
Testigo (sin castrar) A
1.72
1.84 (19)
Castrado bilateral B
0.15
1.84 (19)
Castrado bilateral con testosterona T
1.8
1.84 (19)
Descripcin: Niveles sricos de testosterona tras la dosificacin de enantato de
testosterona en una animal castrado.
DISCUSIN
Tras la castracin se estudi el comportamiento de los tres conejos, la primera semana no
se observ cambios significativos en el comportamiento de los individuos (salvo los
malestares tpicos postoperatorios), sin embargo a inicios de la segunda semana del
experimento se not que los conejos mostraron comportamientos distintos as: El testigo
mantuvo su dinamia de inspeccionar sus alrededores, mientras que los conejos B y T se
mostraban tranquilos y desinteresados de merodear su alrededor (no me movan
mayormente).
Sin embargo al trmino de la segunda semana, el ejemplar T ya con dos dosis de
enantato de testosterona, se mostraba ms inquieto y su comportamiento era semejante
al del conejo A.
Desde este punto hasta el trmino de la tercera semana tanto el conejo A como T no
variaron en su comportamiento ya que se mostraban curiosos a entornos nuevos, se
observ tambin un comportamiento de marcaje de territorio constante en estos
animales, el conejo B por otro lado se mantena quieto y al parecer intranquilo ante
escenarios nuevos. Estos comportamientos se valida con los obtenidos por Justael,
Bentosela y Ruetti (2010) que indican que los animales gonadoctemiados muestran miedo
y ansiedad a condiciones nuevas, mostrndose renuentes a investigar su alrededor (20).
A ms de la prueba de comportamiento se decidi realizar un estudio srico de los niveles
de testosterona tras dos semanas despus de la castracin, obteniendo que tanto el
animal A y T se encuentran con niveles altos en comparacin con el animal B, sin
embargo se encuentran por debajo del rango normal, esto se debe a que las muestras de
sangre se tomaron pasado el medioda donde los niveles de testosterona cae.

CAPTULO VI
CONCLUSIONES
Se comprob que la testosterona es una prohormona, en realidad la forma activa
es la 5-alfa- dihidrotestosterona. Este andrgeno producido en los testculos posee
una notable actividad dentro del metabolismo de un individuo.
Al alterar la condicin natural de un individuo por mtodos quirrgicos como la
castracin se generan grandes cambios que posteriormente se traducen en una
serie de trastornos fisiolgicos. Transcurrido el lapso de dos semanas continuas de
observacin, los animales experimentaron cambios en su comportamiento.
El animal B present cambios significativos en el funcionamiento general del
organismo tanto metablicos como emocionales, entre otras cosas redujo el
marcaje del territorio y la orina en aspersin, comportamiento natural cuando los
niveles de hormonas T son altos.
El

conejo

muestra

un

comportamiento

menos

agresivo,

disminuy

el

comportamiento de monta desapareci el comportamiento nervioso y agresivo

provocado por las hormonas.
RECOMENDACIONES
Se recomienda que para tener una mayor efectividad en esta prctica se utilicen
conejos que tengan una edad de 6 meses de edad, porque en esta etapa es donde
la actividad sexual del macho empieza y tiene su pico mximo y por lo tanto es
donde la testosterona juega su papel fundamental.
En los procesos quirrgicos es recomendable utilizar la tcnica ms sencilla y
menos traumantes para el animal ya que todos estos procesos causan estrs y por
lo tanto hay variaciones en peso y en sus niveles hormonales.
Es muy importante tener precaucin en los procesos anestsicos y administracin
de medicamentos y hormonas ya que un mal uso puede provocar hasta la muerte
del animal.

BIBLIOGRAFA
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ANEXOS

Calculo de dosis de anestsicos

Conejo experimental B
KERATINA 5%

XILACINA 2%

Dosis: 2mg/kg

Dosis: 0.1mg/kg

Peso conejo B: 6 lb= 2,72kg

Peso conejo B: 6 lb= 2,72kg

1kg-----------2mg/kg

1kg-----------0.1mg/kg

2,72kg-----------X= 5,44mg

2,72kg----------- X= 0,272mg

1ml-----------5mg/kg
1,088ml=X---------5,44mg

1ml-----------2mg/kg
0,54 ml=X---------0,272mg

Dosis total
Dosis total
Calculo de dosis de la hormona testosterona
Conejo experimental T
Hormona Testosterona 25%
Dosis: 10mg/kg
Peso conejo B: 6 lb= 2,72kg
1kg-----------10mg/kg
2,72kg-----------X= 27,27mg

1ml-----------25mg/kg
1.09ml=X---------27,27mg
Dosis a administrar de hormona
testosterona